果蝇的遗传分析(双因子杂交实验)

果蝇的遗传分析（双因子杂交试验）
一、实验目的：
通过两对性状个体杂交，观察F2的分离现象及其比例，了解两对非等位基因间的自由组合。

同时掌握果蝇的杂交技术，并学会记录交配结果和掌握统计处理方法。

二、实验材料：
灰体残翅EEvgvg 黑檀体长翅eeVgVg
三、实验原理：
果蝇的灰体基因（E）与黑檀体基因（e）为一对相对性状，位于川R70.7位置，而长翅（Vg）与残翅（vg）为另一对相对性状，位于U R67.0位置。

这两对基因是没有连锁关系的，位于不同染色体上的非等位基因。

根据非等位基因分离的自由组合定律，在F1代产生配子时，非等位基因的
分离是独立的，它们彼此自由组合，产生四种基因型的配子（EVg Evg, eVg, evg），且它们的比例相同。

这四种配子自由结合，因此在F2代会出现9种基因型的后代，若显性完全，就出现4种表型，比例为9 : 3: 3: 1。

正交：灰体残翅EEvgvg （早）x黑檀体长翅（$）eeVgVg P
灰体长翅EeVgvg F1
J 自交
四、实验内容：
1、选处女蝇：每组做正交1瓶，正交选灰体残翅为母本，黑檀体长翅为父本，将母本旧瓶中的果蝇全部麻醉处死，在8-12h内收集处女蝇5只，将处女蝇和5 只黑檀体雄蝇转移到新的杂交瓶中，贴好标签，于25C培养；
2、7d后，释放杂交亲本；
3、再过4-5天，F1成蝇出现，在处死亲本7天后，集中观察记录F1表型；
4、选取5对F1代果蝇，转入一新培养瓶，于25C培养，其余F1代果蝇处死；
5、7d后，处死F1亲本；
6 再过5d，F2成蝇出现，开始观察记录，连续统计7d;
五、备注：
1、保证杂交所用的亲本雌果蝇一定是处女蝇；
2、杂交后倒掉亲本时，一定要倒干净，以免造成回交产生实验误差。

同样在F1 自交后，倒掉F1时一定要倒干净，以免造成F1和F2的混杂产生实验误差。

六、实验结果
F1:
对F2代的统计结果做X测验:
自由度=n— 1 = 3
X2=E (O-E)2/E = 0.767
七、分析讨论
1.果蝇的杂交实验中，为什么要收集处女蝇？简单描述如何收集处女蝇？
因为雌性果蝇生殖器官有受精囊，可保存交配所用的大量的精子，能使大量的卵细胞受精。

因此，在做果蝇杂交实验的时候，雌果蝇必须是处女蝇，保证实验结果的可靠性。

雌蝇羽化出来10h 内一般不会交配，
选择在这个时间段内收集雌蝇，均属处女蝇。

2.对杂交实验数据进行统计分析，并说明其遗传学意义；或计算遗传图距及基因顺序。

由df （自由度）=4-1=3，当p=0.05时，查x2表得X2=7.82.实验所求得的x2值与查表所得
X2相比较时，0.767<7.82，统计学上认为在5%显著水准上差异不显著，观察频数与理论频数间的差异属于随机误差。

遗传学上则可认为该次果蝇杂交实验结果符合孟德尔第二定律：两对基因之间的遗传是自由组合的。