叶绿素测定办法 - 360文档中心

叶绿素含量的测定分光光度法

叶绿素含量的测定分光光度法叶绿素是植物和一些原生生物中重要的光合色素之一，它在光合作用中起到接收和转换光能的关键作用。

测定叶绿素含量可以帮助我们了解植物的光合效率和健康状况，以及研究光合作用的机制和调控。

分光光度法是一种常用的测定叶绿素含量的方法，本文将介绍该方法的原理、实验步骤和数据分析。

一、原理分光光度法测定叶绿素含量的原理是基于叶绿素对光的吸收特性。

叶绿素分子可以吸收特定波长的光，特别是蓝光和红光，而对绿光的吸收较弱。

利用分光光度计测量叶绿素溶液在不同波长的光下的吸光度，可以通过比较吸光度与叶绿素浓度的标准曲线，计算出待测样品中叶绿素的含量。

二、实验步骤1. 制备叶绿素提取液：将适量的鲜叶片（去除茎和大的叶脉）放入离心管中，加入少量酒精，并用研钵捣碎，使叶绿素释放到酒精中。

然后用酒精将研钵中的残渣洗入离心管中，最后用酒精将叶绿素完全溶解。

注意，酒精的使用要避免火源。

2. 离心沉淀：将叶绿素提取液离心10分钟，以沉淀残渣和悬浮物。

3. 分光光度计测量：取离心后的叶绿素提取液，用分光光度计在特定波长下（如645 nm和663 nm）测量其吸光度。

记录吸光度值。

4. 制备标准曲线：取不同浓度的叶绿素标准溶液，用同样的方法测量其吸光度，记录吸光度值。

5. 计算叶绿素含量：根据标准曲线，将待测样品的吸光度值代入，通过计算叶绿素浓度的公式，得出叶绿素的含量。

三、数据分析1. 标准曲线的绘制：将各个标准溶液的叶绿素浓度作为横坐标，吸光度作为纵坐标，绘制曲线。

利用标准曲线可以通过待测样品的吸光度值，反推出其叶绿素的浓度。

2. 计算待测样品中叶绿素的含量：根据标准曲线，将待测样品的吸光度值代入，通过计算叶绿素浓度的公式，得出叶绿素的含量。

四、注意事项1. 实验中应尽量避免阳光直射，以免光线对实验结果的干扰。

2. 操作时应注意安全，避免酒精接触到火源。

3. 叶绿素提取液的制备应充分溶解，避免残渣和悬浮物的影响。

叶绿素的测量方法

叶绿素的测量方法叶绿素是植物和浮游生物体内的一种绿色色素，具有光合作用和光合细菌中也存在这种色素。

叶绿素对于生物体内的光合作用非常重要，因此对于叶绿素的测量方法，一直是科学研究和工程应用中的重要问题。

本文将介绍叶绿素的几种常用测量方法，旨在通过详细的介绍和分析，使读者对叶绿素的测量方法有更为全面深入的了解。

一、光学吸收法1.常用紫外-可见分光光度计法(UV-Vis)光学吸收法是一种广泛使用的叶绿素测量方法之一。

通过利用叶绿素对特定波长光的吸收特性，可以测量叶绿素的浓度。

常用的是紫外-可见分光光度计法(UV-Vis)。

通过用叶绿素标准溶液构建标准曲线来测定待测叶绿素溶液的浓度，精确、快速、准确。

2.高效液相色谱法(HPLC)高效液相色谱法(HPLC)是一种专业的叶绿素测量方法，对于复杂样品的分离和测量更加准确。

利用HPLC技术，可以进一步分析不同种类的叶绿素和其同系物的含量。

二、荧光法1.光诱导荧光法(PAM)光诱导荧光法(PAM)是一种基于叶绿素光合效率的测量方法。

通过测量叶绿素在光合作用过程中释放的荧光信号，可以快速、准确地评估叶绿素的光合活性和健康状态。

2.激光诱导荧光法(LIF)激光诱导荧光法(LIF)是利用激光激发样品后产生的荧光信号来测量叶绿素含量和活性的一种方法，具有高灵敏度和高空间分辨率。

三、生物化学法1.粉末化学法粉末化学法是通过将叶绿素样品制成粉末，再用特定的溶剂提取叶绿素进行测定的方法。

这种方法操作简单，适用于对叶绿素的快速测量。

2.超声波破碎法超声波破碎法利用超声波的作用，能够快速破碎植物细胞壁，并释放出细胞内的叶绿素。

该方法操作简单、高效。

以上所述的叶绿素测量方法只是其中的几种常用方法，随着科技的不断发展，还有许多新的测量方法不断涌现。

在实际的应用中，根据需求和样品的特性选择合适的测量方法至关重要。

希望本文所介绍的叶绿素测量方法能够为相关研究和实际应用提供参考。

实验10叶绿素含量的测定

叶绿素不溶于水，溶于有机溶剂，可用多种有机溶剂，如丙酮、乙醇或二甲基亚砜等研磨提取或浸泡提取。叶绿色素在特定提取溶液中对特定波长旳光有最大吸收，用分光光度计测定在该波长下叶绿素溶液旳吸光度(也称为光密度)，再根据叶绿素在该波长下旳吸收系数即可计算叶绿素含量。利用分光光计测定叶绿素含量旳根据是Lambert-Beer 定律，即当一束单色光经过溶液时，溶液旳吸光度与溶液旳浓度和液层厚度旳乘积成正比。其数学体现式为： A=Kbc 式中： A为吸光度；K为吸光系数；b为溶液旳厚度；c为溶液浓度。
叶绿素a、b旳丙酮溶液在可见光范围内旳最大吸收峰分别位于663、645nm处。叶绿素a和b在663nm处旳吸光系数（当溶液厚度为1cm，叶绿素浓度为g·L-1时旳吸光度）分别为82.04和9.27；在645nm处旳吸光系数分别为16.75和45.60。根据Lambert-Beer定律,叶绿素溶液在663nm和645nm处旳吸光度（A663和A645）与溶液中叶绿素a、b和总浓度（a+b）（Ca、Cb 、Ca十 b，单位为g·L-1），旳关系可分别用下列方程式表达：
叶绿素含量旳测定
一.试验原理
根据叶绿体色素提取液对可见光谱旳吸收，利用分光光度计在某一特定波长测定其吸光度，即可用公式计算出提取液中各色素旳含量。
根据朗伯—比尔定律，某有色溶液旳吸光度A与其中溶质浓度C和液层厚度L成正比，即 A＝αCL.式中：α百分比常数。当溶液浓度以百分浓度为单位，液层厚度为1cm时，α为该物质旳吸光系数。多种有色物质溶液在不同波长下旳吸光系数可经过测定已知浓度旳纯物质在不同波长下旳吸光度而求得。
漏斗、大试管
三. 试验环节
叶片洗净、吸干、去大叶脉 ↓
称0.5g叶用丙酮研磨 ↓

叶绿素含量的测定方法

叶绿素含量的测定方法
以下是 8 条关于叶绿素含量测定方法：
1. 嘿，你知道吗，分光光度法就可以测定叶绿素含量哦！就像用魔法镜一样，能把叶绿素的秘密都照出来。

比如说，在实验室里，小明拿着样本放在分光光度计前，专注地操作着，那认真的样子，简直酷毙啦！
2. 还有一种方法叫荧光分析法呢！哇哦，这就像是给叶绿素装上了信号灯，一测就知道它的情况啦！想象一下，小红在那里调试着仪器，期待着结果，那心情肯定很激动呀！
3. 说起来，高效液相色谱法也是很厉害的哟！这不就是给叶绿素来个精准的“体检”嘛！记得有一次，小王看着色谱图出来，脸上露出了惊喜的表情，嘿，肯定是发现了什么有趣的结果！
4. 重量法也能行呀！这就像称一称叶绿素有多重一样。

就像那次和小李一起做实验，看着天平上的数字，我们都在猜叶绿素到底有多少呢！
5. 浸提法也不错呢！感觉就像是给叶绿素泡个舒服的“澡”，然后就能知道它在里面的情况。

那次和朋友们一起用这个方法，大家边做边讨论，可有意思了！
6. 哇塞，难道你不知道还有纸层析法呀！这简直就是给叶绿素来一次奇妙的“旅行”嘛！上次看到老师熟练地操作着，那技术，真牛！
7. 原子吸收光谱法也能测定哦！这是不是跟找宝藏一样神奇呀！就像我们有一次好奇地看着仪器，在想它怎么就能找到叶绿素的秘密呢。

8. 近红外光谱法也很管用呢！想想看，就像是给叶绿素照了个特别的“照片”。

我记得有一次和同学一起用这个方法，大家都觉得好新奇呀！
总之呀，这些方法都各有各的奇妙之处，都能帮助我们了解叶绿素含量呢！。

叶绿素测定实验方法

叶绿素测定实验方法引言：叶绿素是一种存在于植物和藻类细胞中的绿色色素，它在光合作用中起着至关重要的作用。

因此，测定叶绿素含量对于研究光合作用的过程和效率具有重要意义。

本文将介绍一种常用的叶绿素测定实验方法，通过该方法可以准确快速地测定叶绿素的含量。

实验材料：1. 叶绿素提取液：含有乙醇和醋酸的混合液；2. 磷酸盐缓冲液：用于稀释样品和调整pH值；3. 丙酮：用于去除样品中的类胡萝卜素；4. 乙醇：用于去除样品中的脂类物质；5. 乙酸镁溶液：用于稀释样品和调整pH值；6. 纯水：用于稀释样品和制备试剂。

实验步骤：1. 取一片新鲜的叶片，用研钵将其研磨成细碎的叶浆。

添加适量的磷酸盐缓冲液，使叶浆与缓冲液的体积比为1:10，并搅拌均匀。

2. 将混合物过滤，收集滤液，滤液即为叶绿素提取液。

3. 将叶绿素提取液分装到两个试管中，分别标记为A和B。

4. 在试管A中加入适量的丙酮，用于去除样品中的类胡萝卜素。

搅拌均匀后，使其静置5分钟。

5. 在试管B中加入适量的乙醇，用于去除样品中的脂类物质。

搅拌均匀后，使其静置5分钟。

6. 分别离心试管A和B，将上清液转移到两个新的试管中。

7. 在试管A中加入适量的乙酸镁溶液，用于稀释样品和调整pH值。

搅拌均匀后，使其静置5分钟。

8. 在试管B中加入适量的纯水，用于稀释样品和制备试剂。

搅拌均匀后，使其静置5分钟。

9. 分别使用分光光度计测量试管A和B中溶液的吸光度。

选择适当的波长（通常为665nm和649nm），分别记录吸光度值为A665和A649。

10. 根据公式A = (A665 - A649) × V / M，计算叶绿素的含量。

其中，V为取样体积，M为叶绿素的摩尔吸光系数。

结果分析：通过测量试管A和B中溶液的吸光度，可以计算出叶绿素的含量。

试管A中的溶液经过丙酮处理，去除了类胡萝卜素的干扰；试管B 中的溶液经过乙醇处理，去除了脂类物质的干扰。

因此，通过计算两个试管中溶液的吸光度差，可以准确测定叶绿素的含量。

叶绿素含量测定方法

叶绿素含量测定方法一、引言叶绿素是植物体内的一种重要的生物色素，对于植物的光合作用和生长发育有着至关重要的作用。

因此，测定叶绿素含量对于研究植物生理生态学、环境保护等领域具有重要意义。

本文将介绍几种常用的叶绿素含量测定方法。

二、材料与仪器1. 乙醇：纯度为95%。

2. 醋酸：纯度为99%。

3. 氯仿：纯度为99%。

4. 石油醚：纯度为95%。

5. 甲醛：纯度为37%。

6. 碳酸钠：分析纯。

7. NaOH溶液：浓度为0.1mol/L。

8. 蒸馏水：去离子水或超纯水均可。

9. 离心管、比色皿、移液管等实验器具。

三、方法1. 乙醇法步骤：（1）取适量新鲜叶片，洗净后切成小段；（2）加入95%乙醇中，放置在室温下静置20-24小时；（3）将样品离心，取上清液；（4）将上清液转移到比色皿中，加入等体积的95%乙醇；（5）用分光光度计在663nm和645nm处测定吸光度，计算叶绿素含量。

2. 醋酸法步骤：（1）取适量新鲜叶片，洗净后切成小段；（2）加入80%醋酸中，放置在室温下静置24小时；（3）将样品离心，取上清液；（4）将上清液转移到比色皿中，加入等体积的80%醋酸；（5）用分光光度计在652nm和665nm处测定吸光度，计算叶绿素含量。

3. 氯仿-甲醛法步骤：（1）取适量新鲜叶片，洗净后切成小段；（2）加入95%甲醛中，在水浴中加热至90℃保持10分钟；（3）将样品离心，取上清液；（4）将上清液转移到比色皿中，加入等体积的氯仿，并振荡混合均匀后静置10分钟；（5）用分光光度计在649nm和665nm处测定吸光度，计算叶绿素含量。

4. 石油醚-乙醇法步骤：（1）取适量新鲜叶片，洗净后切成小段；（2）加入石油醚中，放置在室温下静置2-3小时；（3）将样品离心，取上清液；（4）将上清液转移到比色皿中，加入等体积的95%乙醇；（5）用分光光度计在663nm和645nm处测定吸光度，计算叶绿素含量。

5. NaHCO3-NaOH法步骤：（1）取适量新鲜叶片，洗净后切成小段；（2）加入NaHCO3-NaOH缓冲液中，在冰箱中保持暗处理2小时；（3）将样品离心，取上清液；（4）将上清液转移到比色皿中，并用蒸馏水稀释至一定浓度；（5）用分光光度计在665nm处测定吸光度，计算叶绿素含量。

叶绿素含量的测定

浓度和总浓度代入公式（7）中求出所测材料单位重量或单位面积的叶绿素a、b含量和总含量。
叶片洗净、吸干、去大叶脉 ↓ 称0.5g叶用乙醇或丙酮研磨 ↓ 匀浆过滤（用乙醇或丙酮洗研钵及残渣，合并滤液） ↓ 滤液用乙醇或丙酮定容至25mL ↓ 置分光光度计测定 (注意:不同提取溶剂波长不同)
四. 结果计算
注意分光光度计的规范使用

六. 思考题

为什么植物在不同生长环境下其 Chl含量有差异？ Chla /Chlb有何适应意义？
实验二. 叶绿素含量的测定
高等植物光合作用过程中利用的光能是通过叶绿体色素(光合色素)吸收的。叶绿体色素由叶绿素a、叶绿素b、胡萝卜素和叶黄素组成。在植物光合生理、发育生理和抗性生理研究中经常需要测定叶绿素含量。叶绿素含量也是指导作物栽培生产和选育作物品种的重要指标。

一.实验原理
组织变白，在暗处静止3-5min后，用滤纸过滤
到25ml容量瓶中。
注意：用滴管吸取96%乙醇或80%丙酮将研钵洗净，
清洗液也要过滤到容量瓶中，并用96%乙醇或 80%丙酮沿滤纸的周围洗脱色素，待滤纸和残渣全部变白后，用96%乙醇或80%丙酮定容至刻度。
3．读取吸光度：取厚度为lcm的洁净比色皿，注意不要用手接触比色皿的光面，先用少量色素提取液清洗2~3次，注意清洗时要使清洗液接触比色皿内壁的所有部分，然后将色素提取液倒
4.1 结果计算
C(mg/L)×提取液总量（L）×稀释倍数
Chl = (mg/g叶)
材料鲜重（g）
4.2 比较分析不同植物的叶绿素含量差异及同种植物在不同生长环境下Chla/Chlb差异。
五. 注意事项

注意叶绿素一定要提干净，避免造成测定误差

叶绿素含量的测定方法

叶绿素含量的测定方法1、实验原理：根据叶绿体色素提取液对可见光谱的吸收，利用分光光度计在某一特定波长下测定其吸光度，即可用公式计算出提取液中各色素的含量。

根据朗伯-比尔定律，某有色溶液的吸光度A与其中溶液的质量浓度C和液层厚度L成正比，即 A=αCL式中，α为比例常数。

当溶液浓度以质量浓度为单位，液层厚度为1cm时，α为该物质的吸光值。

各种有色物质溶液在不同波长下的吸光值可通过测定已知质量浓度的纯物质在不同波长下的吸光度而求得。

如果溶液中有数种吸光物质，则此混合物在某一波长下的总吸光度等于各组分在相应波长下吸光度的总和，这就是吸光度的加和性。

要测定叶绿体色素混合提取液中叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜素的含量，只需测定该提取液在3个特定波长下的吸光度A，并根据叶绿素a、叶绿素b及类胡萝卜素在该波长下的吸光系数即可求出其浓度。

在测定叶绿素a、叶绿素b时，为了排除类胡萝卜素的干扰，所用单色光的波长选择叶绿素在红光区的最大吸收峰。

由于叶绿体色素在不同溶液中的吸收光谱有差异，因此，在使用其他溶剂提取色素时，计算公式也有所不同。

叶绿素a、叶绿素b在体积分数为95%的乙醇中最大吸收峰的波长为665nm和649nm，类胡萝卜素为470nm，据此列出关系式为C a=13.95A665-6.88A649C b=24.96A649-7.32A665C c=(1000A470-2.05C a-114.8C b)/245C a为叶绿素a的质量浓度，C b为叶绿素b的质量浓度，C c为类胡萝卜素的质量浓度，单位都是mg/L2、器材准备：分光光度计，百分之一天平，研钵，棕色容量瓶（25mL），小漏斗，滤纸，吸水纸，擦镜纸，滴管。

3、溶剂的制备：1）95%乙醇 2）石英砂 3）碳酸钙粉4、实验步骤：（1）取新鲜植物叶片，擦干净表面，剪去叶中脉，只取叶片（2）取新鲜植物叶片样品2g，放入研钵中，加少量石英砂及2-3mL95%乙醇，研成匀浆，再加10mL95%乙醇，研磨至组织变白。

叶绿素含量的测定分光光度法

叶绿素含量的测定分光光度法叶绿素是一种广泛存在于植物和一些浮游生物中的绿色色素，它在光合作用过程中起着至关重要的作用。

测定叶绿素含量是研究植物光合作用和生长发育的重要手段之一。

其中，分光光度法是一种常用的测定叶绿素含量的方法。

分光光度法是通过测量溶液对特定波长光的吸收程度来确定其中物质浓度的一种方法。

在测定叶绿素含量时，我们会选择特定波长的光，并测量通过溶液后的光线强度。

根据光线的吸收程度，可以计算出样品中叶绿素的浓度。

在进行叶绿素含量的分光光度法测定时，我们首先需要提取叶绿素。

通常采用乙醇、丙酮等溶剂来破坏叶绿素在叶片中的结构，并将其溶解出来。

然后，将提取液置于离心管中进行离心，以去除悬浮的杂质。

离心后，我们可以得到含有叶绿素的溶液。

接下来，我们需要使用分光光度计来测量叶绿素溶液的吸光度。

分光光度计通过选择特定波长的光源，将光线通过样品后，再通过光电二极管接收光信号，最后转化为电信号。

根据吸光度的定义，可以通过测量进射光和透射光的光强来计算吸光度，并由此得到叶绿素的浓度。

为了准确测定叶绿素含量，我们需要在测量前进行一些预处理。

首先，需要校准分光光度计，以确保测量的准确性。

其次，应该选择适当的波长进行测量。

常用的波长为663纳米和645纳米，这两个波长对叶绿素的吸光度较高。

最后，要注意样品的稀释，以确保其吸光度在仪器检测范围内。

在实际测定中，我们可以根据测量结果计算出叶绿素的浓度，并进行统计分析。

通过比较不同处理组的叶绿素含量，可以了解不同因素对植物生长和光合作用的影响。

此外，还可以将分光光度法与其他方法相结合，来对叶绿素含量进行验证和比对，以提高测定结果的可靠性。

分光光度法是一种常用的测定叶绿素含量的方法。

通过测量溶液对特定波长光的吸收程度，可以计算出叶绿素的浓度。

在实际应用中，我们需要注意校准仪器、选择适当的波长、稀释样品等步骤，以确保测定结果的准确性。

分光光度法的应用为我们研究植物生长和光合作用提供了重要的手段。

叶绿素的测定

叶绿素的测定（分光光度计法）
1.样品的选取
在测定叶片光和作用的枝条上，随机选取3~5片叶子，用水洗净并用滤纸吸干，取其中脉两侧的叶肉组织，取其鲜重0.1g，剪碎放于试管中。

2.叶绿素的提取
在试管中加入10毫升二甲基甲酰氨，加塞，放于阴暗处提取，待样品为白色透明时即表明叶绿素提取完毕。

3.测定
把提取的上清液注入比色杯中，以二甲基甲酰氨为对照，用72G型分光光度计测定在645nm和663nm时的光密度。

4.计算
（1）叶绿素浓度的计算：以Amon公式计算
参考文献：丁圣彦编著的《常绿阔叶林演替系列比较生态学》河南大学出版社.1999年
熊庆娥编著的《植物生理学实验教程》四川科学技术出版社2003年
呼吸速率的测定
卞勇主编的《植物与植物生理》中国农业大学出版社2007。

光谱法叶绿素测定

光谱法叶绿素测定
光谱法叶绿素测定是一种常用的绿色植物叶片中叶绿素含量的测定方法。

该方法基于叶绿素对不同波长的光的吸收特性进行测量。

具体步骤如下：
1. 准备样品：取待测叶片，将其切碎并加入适量的乙醇溶液中，使样品完全浸泡在溶液中。

2. 溶液搅拌：使用搅拌器将样品溶液搅拌均匀，使叶绿素充分溶解。

3. 光谱扫描：使用光谱仪或紫外-可见吸收光谱仪对样品中叶绿素的吸收进行测量。

从紫外到可见光区域（通常是200-800nm范围内）进行光谱扫描，并记录各个波长下的吸光度值。

4. 数据处理：根据得到的吸光度数据，绘制吸光度-波长的光谱曲线。

通过该曲线，可以确定叶绿素在不同波长下的吸收峰，并计算出各个吸收峰的峰值。

5. 叶绿素浓度计算：根据已有的吸收特性和校正因子，可以利用峰值计算样品中叶绿素的浓度。

需要注意的是，为了保证测量结果的准确性，可以进行以下控制措施：
- 使用空白溶液进行零点校准，以减少系统误差。

- 采取恰当的光路设置，确保光线通过样品时均匀而稳定。

- 避免样品中悬浮物的干扰，可以在测量前对样品进行过滤。

- 进行多次测量，并计算平均值，以提高测量结果的准确性。

总之，光谱法叶绿素测定是一种简单、快速、准确的方法，可以在科研实验和农业生产等领域中广泛应用。

叶绿素含量的测定

叶绿素含量的测定：
1实验仪器：高级型分光光度计，离心机，电子天平，剪刀，研钵，漏斗，移液管。

2实验试剂：丙酮，石英砂。

3实验材料：植物叶片。

4实验步骤：
（1）色素的提取：取新鲜叶片，剪去粗大的叶脉并剪成碎块，秤取0.5g放入研钵中加纯丙酮5ml ，少许石英砂，研磨成匀浆，，再加入80%丙酮5ml ，将匀浆转入离心管，并用适量80%丙酮洗涤研钵，一并转入离心管，离心后弃沉淀，上清液用80%丙酮定容至20ml。

（2）测定OD值：取上述色素提取液1ml，加80%丙酮4ml稀释后转入比色杯中，以80%丙酮为对照，分别测定663nm、645nm的OD值。

（3）计算：按照公式计算叶绿素a、叶绿素b、叶绿素a+b的浓度，再根据稀释倍数分别计算每克鲜重叶片中色素的含量。

（4）公式：ρa=12.7A663—2.69A645；
ρb=22.9A645—4.68A663；
ρ（a+b）=ρa+ρb =8.02A663 +20.21A645
注意：ρ代表叶绿素浓度，单位：mg/L 。

1.由于植物叶子中含有水分，故先用丙酮进行提取，以使色素提取液中丙酮的最终
浓度近似80% 。

2.由于叶绿素a、b的吸收峰很陡，仪器波长稍有变差，就会是结果产生很大的误
差，因此最好能用波长较正确的高级型分光光度剂。

测定植物叶绿素含量的方法

测定植物叶绿素含量的方法
植物叶绿素是一种广泛存在于植物、藻类和一些细菌中的绿色色素，能够在吸收光子的过程中将光能转化为化学能。

因此，测定植物叶绿素含量是衡量植物光合作用效率的重要指标之一。

1. 乙醇提取法
将待测叶片粉碎后加入适量的95%乙醇中，放置于暗处浸泡数小时或过夜，然后离心收集上清液。

测定上清液吸光度，通过比较不同波长下的吸光度值，可计算出叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜素的含量。

将待测叶片粉碎后加入1.5mL 80%乙醇和0.5mL 1mol/L HCl的混合液中，振荡10分钟后加入玻璃珠摇匀，含有叶绿素的乙醇溶液将变为红褐色。

用0.22µm微孔滤纸过滤，取上清液，用分光光度计测定吸光度值后计算叶绿素含量。

3. 醋酸铜法
将待测叶片加入0.05%醋酸铜溶液中，用滚轴摇匀10分钟后过滤，取上清液后测定吸光度并计算叶绿素含量。

4. 液相色谱法
将待测叶片加入甲醇或乙腈中，使用高效液相色谱仪分析样品中的叶绿素和类胡萝卜素含量。

这种方法需要更为精确的仪器和技术，但可以同时测定多种色素。

无论使用哪种方法测定植物叶绿素含量，都需要注意以下几点：
1. 样品采集应在相同的时间、地点和光照条件下进行，以保证结果可比性。

2. 需要控制乙醇、醋酸铜等试剂用量、摇匀时间和过滤条件等因素，以获得准确的结果。

3. 对于不同种类和部位的植物，可能需要针对性地选择不同的测定方法，并对结果进行修正和比较。

叶绿素等的测定方法

叶绿素等的测定方法叶绿素是存在于植物和藻类细胞中的一种绿色色素，它在光合作用中起着关键作用。

因此，测定叶绿素及其相关的测定方法对于研究植物生理学、光合作用机理以及环境生态学等方面具有重要意义。

下面将介绍几种常用的叶绿素测定方法。

1.全光谱扫描法全光谱扫描法可以用于测定叶绿素a、叶绿素b以及类胡萝卜素的含量。

该方法基于不同波长下叶绿素和类胡萝卜素的吸光度差异，通过测量样品在300-800nm范围内的吸光度来确定其含量。

全光谱扫描法准确度较高，但需要较贵的设备。

2.分光光度法分光光度法是一种常用的测定叶绿素含量的方法。

该方法基于叶绿素和类胡萝卜素在不同波长下的吸光度差异，通过选择波长进行测定。

常用的波长包括470nm、645nm和663nm等。

该方法简单、快速，并且可以用于高通量样品测定。

3.乙醇提取法乙醇提取法是一种常用的叶绿素提取和测定方法。

该方法将叶样品放入乙醇等有机溶剂中，通过溶剂提取叶绿素并使其溶于溶剂中，然后使用分光光度法或高效液相色谱法等测定溶液中叶绿素的含量。

乙醇提取法可以快速提取样品中的叶绿素，适用于大量样品的测定。

4.高效液相色谱法高效液相色谱法是一种高精度的叶绿素测定方法。

该方法基于叶绿素在特定条件下在高效液相色谱柱中的分离和检测，通过测定样品中叶绿素的峰面积或峰高来确定其含量。

高效液相色谱法准确度高，但需要较为复杂的仪器和操作技术。

除了以上介绍的常用方法外，还有一些新兴的测定方法不断涌现，例如荧光光谱法、激光诱导荧光法、红外反射法等。

这些新方法在提高测定精度、扩展测定范围和降低测定成本方面具有优势，正在逐渐得到广泛应用。

综上所述，叶绿素测定方法多种多样，每一种方法都有其特点和适用范围。

在选择合适的测定方法时，需要考虑实验目的、样品种类、所需精度、设备条件和实验操作难易程度等因素，以确定最适合的测定方法。

叶绿素测定方法

叶绿素测定方法一、实验原理叶绿素广泛存在于果蔬等绿色植物组织中，并在植物细胞中与蛋白质结合成叶绿体。

当植物细胞死亡后，叶绿素即游离出来，游离叶绿素很不稳定，对光、热较敏感；在酸性条件下叶绿素生成绿褐色的脱镁叶绿素，在稀碱液中可水解成鲜绿色的叶绿酸盐以及叶绿醇和甲醇。

高等植物中叶绿素有两种：叶绿素 a 和 b，两者均易溶于乙醇、乙醚、丙酮和氯仿。

叶绿素 a 和叶绿素 b 在 645nm 和 663nm 处有最大吸收，且两吸收曲线相交于652nm 处。

因此测定提取液在 645nm、 663nm、652nm 波长下的吸光值，并根据经验公式可分别计算出叶绿素 a、叶绿素 b 和总叶绿素的含量。

二、仪器、和试剂仪器：分光光度计、电子天平(0 ． 01g) 、研钵、棕色容量瓶（容量瓶包锡纸代替）、小漏斗、定量滤纸、吸水纸、擦境纸、滴管。

试剂：丙酮；石英砂；碳酸钙粉三、操作步骤取新鲜蔬菜1g，洗净吸干水分，放入研钵中，加少量石英砂和碳酸钙粉及3mL80％丙酮，研成均浆，再加丙酮10mL，继续研磨至组织变白。

暗处静置3～ 5min。

取滤纸 1 张置于漏斗中，用丙酮湿润，沿玻棒把提取液倒入漏斗，滤液流至50mL容量瓶中（外包锡纸）；冲洗研钵、研棒及残渣数次，最后连同残渣一起倒入漏斗中。

用滴管吸取丙酮，将滤纸上的叶绿体色素全部洗入容量瓶中。

直至滤纸和残渣中无绿色为止。

最后用丙酮定容至100mL，摇匀。

取叶绿体色素提取液在波长665nm、 645nm下测定吸光度，以丙酮为空白对照。

四、计算按照实验原理中提供的经验公式，分别计算植物材料中叶绿素a、 b 和总叶绿素的含量。

ρa =12.72A663-2.59A 645ρb =22.88A663-4.67A 645ρ=ρa +ρb =20.29A645+8.05A663叶绿素含量 =ρ*V /（m*1000）(mg/g)ρ：叶绿素质量浓度，mg/lV：提取液体积，mlm：样品质量，gPS:若处理干燥样品，则用80%丙酮（体积分数）。

叶绿素含量测定

叶绿素含量测定1. 引言叶绿素是植物和一些浮游植物中广泛存在的一种绿色素，它在光合作用中起着关键的作用。

叶绿素的含量不仅与植物的生长发育和光合效率密切相关，还可以作为评估环境污染和植物健康状况的重要指标。

因此，准确测定叶绿素含量对于植物研究和环境监测具有重要意义。

本文将介绍一种常用的叶绿素含量测定方法——乙醇提取法。

这种方法简单易操作，且可靠性较高，适用于不同类型的植物材料。

2. 实验材料和仪器•植物叶片样品•乙醇•磨杯和磨杵•离心机•显微镜•吸光度计3. 实验步骤1.取适量鲜叶片样品，洗净表面的杂质和灰尘，并用纸巾吸干水分。

2.将叶片样品剪碎或撕碎，然后将其放入磨杯中。

3.加入适量的乙醇，使得乙醇完全覆盖叶片样品。

4.使用磨杵将叶片样品彻底磨碎，直至完全均匀混合。

5.将磨碎好的样品倒入离心管中，并离心10分钟，以分离悬浮液和植物残渣。

6.用移液器将上清液转移到透明的试管中。

7.使用显微镜观察上清液，如果有大量的悬浮物，则需再次离心并取上清液。

8.使用吸光度计测定上清液的吸光度，在叶绿素吸收峰波长处（通常为663nm和645nm）测定吸光度值，记录下来。

9.根据吸光度值，根据已知标准曲线或计算公式计算叶绿素含量。

4. 结果和讨论根据吸光度测定的结果，可以计算出样品中叶绿素的含量。

这种方法在测定叶绿素含量时具有较好的准确性和重复性。

然而，需要注意的是，乙醇提取法只能测定总叶绿素含量，并不能区分不同种类的叶绿素。

如果需要分析特定种类的叶绿素，需要使用其他方法。

此外，叶绿素含量的测定结果还会受到许多因素的影响，如植物的生长环境、光照条件和采样时间等。

因此，在进行叶绿素含量测定时，应保持样品处理的一致性，并尽量在相同条件下进行测定，以获得可靠的结果。

5. 总结叶绿素含量测定是植物研究和环境监测中重要的实验内容。

本文介绍了一种常用的叶绿素含量测定方法——乙醇提取法，该方法简单易操作，适用于不同类型的植物材料。

叶绿素测定原理

叶绿素测定原理
叶绿素测定是一种常用的生物化学分析方法，用于确定植物组织中叶绿素的含量。

其原理基于叶绿素的吸收光谱特性以及叶绿素与吸光度之间的线性关系。

下面是叶绿素测定的原理步骤：
1. 植物组织样品制备：将需要测定叶绿素含量的植物组织（如叶片）切碎并加入适量的提取液，通常使用乙醇、醋酸乙酯等有机溶剂来提取叶绿素。

2. 提取叶绿素：样品与提取液混合后，将其搅拌或超声处理，使叶绿素充分释放到溶液中。

3. 测定吸光度：取适量的提取液转移至光密度管或比色皿中，使用紫外可见分光光度计选择适当的波长进行测定。

叶绿素的吸收峰位于波长范围为400-700纳米之间，其中最常用的是波
长为660和640纳米。

4. 计算叶绿素含量：通过构建标准曲线，根据吸光度测定值计算出样品中叶绿素的浓度。

标准曲线是通过不同浓度的已知叶绿素标准溶液测定吸光度而得到的。

以标准曲线上对应样品吸光度的浓度值来表示样品中的叶绿素含量。

叶绿素测定的原理基于叶绿素的特性和吸光光谱，通过测定吸光度来间接测量叶绿素的含量。

这种方法广泛应用于农业、生态学等领域中，帮助人们了解植物生长状况和生态系统的健康程度。

叶绿素含量

叶绿素含量引言叶绿素是植物和一些原生生物中最丰富的色素之一。

它们在光合作用中起着至关重要的作用，能够捕获和转化太阳光能量，并将其转化为化学能。

叶绿素含量是一个衡量植物光合能力的重要指标，也可以用于评估植物的健康状况和生长速度。

本文将重点介绍叶绿素的含量的测量方法以及与植物生长和环境因素的关系。

叶绿素的测量方法萃取法萃取法是测量叶绿素含量最常用的方法之一。

该方法基于将叶片或细胞中的叶绿素从其它组分中提取出来，并用适当的溶剂溶解后测量其吸光度。

常用的溶剂包括乙酸乙酯、甲醇和二氯甲烷等。

一般情况下，通过反复萃取和过滤的步骤，可以将样品中的叶绿素完全提取出来。

然后，使用紫外-可见光分光光度计测量提取液的吸光度，通过与标准曲线进行比较，即可计算出叶绿素的含量。

色谱法色谱法是一种高效的叶绿素分析技术，具有准确性和灵敏度高的优点。

该方法使用高效液相色谱（HPLC）或气相色谱（GC）等设备，将样品中的叶绿素分离出来，并通过其在色谱柱中的保留时间和峰面积来定量分析叶绿素的含量。

色谱法可以同时测量多种叶绿素和其它色素，对于复杂样品的分析具有重要的应用价值。

光度法光度法是一种简单快速的叶绿素测量方法。

该方法利用叶绿素吸收光线的特性，通过将样品溶液置于特定波长（通常为640nm和660nm）的光源下测量其透光率或吸光度。

根据不同波长下的吸光度比值，可以计算出叶绿素的浓度。

叶绿素含量与植物生长的关系叶绿素含量与植物生长密切相关。

通常情况下，叶绿素含量越高，说明植物光合作用能力越强，能够更有效地吸收阳光中的能量，并将其转化为化学能供给植物的生长和发育。

因此，叶绿素含量可以作为评估植物健康和生长速度的重要指标。

同时，叶绿素含量还受到一系列环境因素的影响，如光照、温度和水分等。

在光照充足的情况下，植物的光合作用能力增强，叶绿素含量也会相应增加。

然而，当光照过强时，叶绿素含量可能会下降，这是由于较高的光强导致叶绿素光抑制效应的发生，从而抑制了光合作用的进行。