实验1紫外-可见吸收光谱实验报告

实验一：紫外-可见吸收光谱

实验目的

1. 熟悉和掌握紫外-可见吸收光谱的使用方法

2. 用紫外-可见吸收光谱测定某一位置样品浓度

3. 定性判断和分析溶液中所含物质种类实验原理

紫外吸收光谱的波长范围在200~400,可见光吸收光谱的波长在

400~800,两者都属于电子能谱，两者都可以用朗伯比尔(Lamber-Beer'Law) 定律来描述

A=£ bc

其中A为吸光度；£为光被吸收的比例系数；c为吸光物质的浓度，单位mol/L;

b为吸收层厚度，单位cm 有机化合物的紫外-可见吸收光谱，是其分子中外层价电子跃迁的结果，其中包括有形成单键的

c电子、有形成双键的n电子、有

未成键的孤对n电子。外层电子吸

收紫外或者可见辐射后，就从基态

向激发态 (反键轨道)跃迁。主要有

四种跃迁，所需能量圧大小顺序

为nf >n^n*

吸收带特征典型基团

cfc *主要发生在远紫外区C-C、C-H (在紫外光区观测不到)

n fc *跃迁一般发生在150~250nm，因此在紫

外区不易观察到

-OH、-NH 2、-X、-S

nfn *跃迁吸收带波长较长，孤立跃迁一般发

生在200nm左右

芳香环

n fn *跃迁一般发生在近紫外区(200~400nm ) C=O、C=s、一N=O、一N=N ―、C=N ;

三、实验步骤

1、开机

打开紫外-可见分光光度计开关f开电脑f软件f联接f M (光谱方法)进行调节实验需要的参数：波长范围700-365nm

扫描速度高速；采样间隔：0.5 nm

2、甲基紫的测定

(1)校准基线

将空白样品（水）放到比色槽中，点击“基线”键，进行基线校准

（2）标准曲线的测定

分别将5ug/ml、10ug/ml、15ug/ml、20ug/ml甲基紫溶液移入比色皿（大

约23处），放到比色槽中，点击“开始”键，进行扫描，保存

（3）测定试样

将试样甲基紫溶液移入比色皿（大约23处），放到比色槽中，点击“开始” 键，进行扫描，保存

3、甲基红的测定

（1）校准基线

将空白样品（乙醇）放到比色槽中，点击“基线”键，进行基线校准

（2）测定试样

将试样甲基紫溶液移入比色皿（大约23处），放到比色槽中，点击“开始” 键，进行扫描，保存

四、实验结果

1•未知浓度的测定

分别测定了5卩g/ml，10卩g/ml，15卩g/ml，20卩g/ml和未知浓度的甲基紫溶液的紫外吸收光谱，紫外吸收谱图如下：

甲基紫在580nm是达到最大吸收见下表:

20 2.659

未知0.732

由计算机计算的拟合直线的关系为A = 0.135c - 0.027

故带入未知浓度的甲基紫溶液的吸光度0.732得浓度为5.622卩g/ml-1 2.化合物的定性分析

已知甲基橙和甲基紫的结构式如下图所示:

数据做成散点，结果显示，能很好的拟合直线如下图:

N

甲基红

从图中可知，甲基紫约在580nm左右达到吸光度的最大值，而甲基橙溶液在410 那么时达到吸光度最大值，这是由于甲基紫和甲基橙的结构不同造成的，由于甲基紫结构高度共轭，形成大n键，故最强吸收峰要的波长要比甲基橙的大（红移），同时由于高度共轭，吸光强度也有所增强。【下载本文档，可以自由复

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