微生物期末复习

第一章绪论

微生物的特点：

个体小、结构简、胃口大、食谱广、繁殖快、易培养、数量大、分布广、种类多、级界宽、变异易、抗性强、休眠长、起源早、发现晚

五大共性：体积小、面积大；吸收多，转化快；生长旺，繁殖快；适应强，易变异；

分布广，种类多。

1、个体小：a.杆菌的平均长度：2 微米；

b.面积/体积比：人 = 1，大肠杆菌 = 30万.

优点：这样大的比表面积特别有利于它们和周围环境进行物质、能量、信息的交换。微生物的其它很多属性都和这一特点密切相关

2、食谱广：微生物获取营养的方式多种多样，其食谱之广是动植物完全无法相比的。如：纤维素、木质素、几丁质、角蛋白、石油、甲醇、甲烷、天然气、塑料、酚类、氰化物、各种有机物均可被微生物作为粮食。

3、繁殖快：大肠杆菌一个细胞重约10 –12克，平均20分钟繁殖一代

4、易培养：很多细菌都可以非常方便地进行人工培养

5、数量大：在自然界中（土壤、水体、空气，动植物体内和体表）都生存有大量的微生物

6、易变异：个体小、结构简、且多与外界环境直接接触繁殖快、数量多，突变率达10-5– 10-10，短时间内产生大量的变异后代。

7、抗（逆）性强：

（1）抗热：有的细菌能在265个大气压，250 ℃的条件下生长；自然界中细菌生长的最

高温度可以达到113 ℃，有些细菌的芽孢，需加热煮沸8小时才被杀死；

（2）抗寒：有些微生物可以在―12℃~ ―30℃的低温生长；

（3）抗酸碱：细菌能耐受并生长的pH范围：pH 0.5 ~ 13；

（4）耐渗透压：蜜饯、腌制品，饱和盐水（NaCl, 32%)中都有微生物生长；

（5）抗压力：有些细菌可在1400个大气压下生长

8、起源早：38亿年前，生命在海洋中出现，而26亿年前，陆地上可能就存在微生物了

9、发现晚：300多年前人们才真正发现微生物的存在

第二章纯培养和显微技术

一、微生物的基本特点：小

在绝大多数情况下都是利用微生物的群体来研究其属性，微生物的物种（菌株）一般

也是以群体的形式进行繁衍、保存，所以培养技术在微生物学中具有重要意义。微生物个

体微小的特点也决定了显微技术是进行微生物研究的另一项重要技术，因为绝大多数微生

物的个体形态及其内部结构只能通过显微镜才能进行观察和研究。

1、显微镜：观察个体或细胞结构。

2、培养：形成菌落，研究群体形态，遗传特性及生理生化等。

二、培养物

在一定的条件下培养、繁殖得到的微生物群体。

1、混合培养物：含有多种微生物的培养物。

2、纯培养物：只有一种微生物的培养物。

通常情况下只有纯培养物才能提供可以重复的结果，纯培养技术是进行微生物学研究

的基础。

第一节微生物的分离和纯培养

从混杂的群体中分离特定的某一种微生物，是研究和利用微生物的第一步。

一、无菌技术（aseptic technique)

1、定义：在分离、转接及培养纯培养物时要防止被其它微生物污染，其自身也不污染操作环境的技术。在转接、培养微生物时防止其它微生物的污染，即无菌操作。

灭菌：用于分离、培养微生物的器具事先不含任何微生物, 即灭菌。

2、微生物培养的常用器具及其灭菌

常用器具：试管、瓶子、培养皿等。

常用的灭菌方法：a、高压蒸汽灭菌；b高温干热灭菌 ;c

二、用固体培养基分离纯培养

1、培养基分类：a液体培养基

b固体培养基(含琼脂1.5-2.5%）

c半固体培养基(含琼脂0.2-0.7%）

2、菌落：单个（或聚集在一起的一团）微生物在适宜的固体培养基表面或内部生长、繁殖到一定程度可以形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞生长群体。众多菌落连成一片，形成菌苔。

不同微生物在特定培养基上生长形成的菌落或菌苔一般都具有稳定的特征（形状、颜色等），可以成为对该微生物进行分类、鉴定的重要依据。

3、倒平板：

（1）稀释倒平板法：操作较麻烦，对好氧菌、热敏感菌效果不好

（2）涂布平板法：使用较多的常规方法，但有时涂布不均匀！

（3）平板划线法

4、厌氧微生物的分离

厌氧罐、厌氧手套箱、稀释摇管法

三、用液体培养基分离纯培养

稀释法进行液体分离必须在同一个稀释度的许多平行试管中，大多数（一般应超过95%）表现为不生长。在有细菌生长的试管中得到纯培养的几率为97.5%

四、单细胞（孢子）分离

（1）一般采用显微操作仪，在显微镜下进行

（2）操作难度与细胞或个体的大小成反比

五、选择培养分离

微生物群落中数量占少数的微生物的分离纯化

（1）抑制大多数其它微生物的生长

（2）使待分离的微生物生长更快

（3）使待分离的微生物生长“突出”

没有一种培养基或一种培养条件能够满足自然界中一切生物生长的要求，在一定程度上所有的培养基都是选择性的。

使待分离的微生物在群落中的数量上升，方便用稀释法对其进行纯化。直接挑取待分离的微生物的菌落获得纯培养

1、利用选择平板进行直接分离

（1）高温下培养：分离嗜热细菌

（2）培养基中不含N：分离固氮菌

（3）培养基加抗生素：分离抗性菌

待分离的微生物生长，其它微生物的生长被抑制，待分离的微生物的生长特征明显不同于其它微生物。

2、富集培养:

在特定的环境条件下,仅适应于该条件的微生物旺盛生长，待分离微生物在群落中的数量大大增加，从自然界中分离到所需的特定微生物。

富集培养是微生物学家最强有力的技术手段之一。营养和生理条件的几乎无穷尽的组合形式可应用于从自然界选择出特定微生物的需要。

根据微生物的特殊要求，从自然界分离出特定已知微生物种类。分离培养在特定环境中能生长的微生物

六、二元培养物

培养物中只含有二种微生物，而且是有意识的保持二者之间的特定关系的培养物称为二元培养物。

第二节显微镜和显微技术

一、1、放大：被观察物越小，放大倍数应越大，否则难以看清

2、分辨率：能辨别两点之间最小距离的能力

3、反差：被观察物区别于背景的程度

与显微镜的自身特点有关，但也取决于进行显微观察时对显微镜的正确使用及良好的标本制作和观察技术，这就是显微技术。

二、显微镜的种类及原理

1、普通光学显微镜：又称明视野显微镜其照明光线直接进入视野，属透射照明

2、暗视野显微镜

3. 相差显微镜：形成亮背景暗物象的结果

4. 荧光显微镜

5. 透射电子显微镜