最新工业微生物学实验考卷A0708答案

工业微生物学实验考卷A0708答案

一、填空题（共30分，其中8和11小题每空1分，其余每空0.5

分）

1. 显微镜物镜的放大倍数可由外形来辨别，镜头长度越短，口径越大，放大倍数越低。物镜的放大倍数都标在镜头上，常用的低倍镜为_ 10 ×、20×；高倍镜为 40 ×、45×；油镜为90×、 100 ×。若20×的目镜与45×的物镜配合使用，显微镜的总放大倍数为900倍，一般用 45×20 表示。

2. 新玻璃器皿含有游离碱，一般先将其浸于 2%盐酸溶液中浸泡数小时，然后用自来水清洗干净；用过的培养皿或试管若含有废弃

培养基或菌体，需先经高压蒸气灭菌或沸水煮沸后，倒掉污

物，方可清洗。

3. 微生物培养基的分类方法和种类很多，如按培养基中凝固剂含量的多少可分为固体、半固体和液体培养基；按照

培养基的原料来源可分为合成、半合成和天然

培养基，如PDA培养基根据其原料来源属于其中的半合成培养基。

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4. 固体培养基的配制过程可简单描述为：配料（称量）→溶解→校正pH→加凝固剂→融化→分装→加棉塞、包扎→灭菌→无菌检查，其中最后一步非常关键，可检测培养基的是否可用。

5．培养基的灭菌一般多采用高压蒸气灭菌，灭菌压力为0.1Mpa，即 121 ℃，时间20 min，若培养基中含糖成分的含量较高，一般多采用过滤除菌或减压灭菌，减压灭菌时温度为 115 ℃。

6．对不同的微生物进行斜面接种时，常根据需要采用不同的接种方法，如细菌和放线菌多采用密波状蜿蜒划线，酵母菌多采用中央划线法，用来观察菌种的形态和培养特征；霉菌多用点接法。

7．利用显微镜观察不同的微生物常采用不同的制片方法，如细菌需经过固定和染色后利用油镜（物镜）观察；酵母菌需制备水浸片，不需要染色，高倍镜下观察；霉菌制片时需要乳酸苯酚油作为一种介质，防止菌丝成团影响观察；另外，在观察假丝酵母和青霉菌时，需对菌体作小室培养以便观察到完整的菌体形态。

8．微生物学中可根据细菌的生理生化实验结果对未知菌进行鉴定，如利用MR实验和V-P实验可检测微生物利用葡萄糖产酸能力；明胶液化实验可检测细菌是否产蛋白酶；硝酸盐还原实验可检测细菌

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是否具有硝酸盐还原酶，可将硝酸盐还原为亚硝酸盐，有些细菌还可继续还原，最后生成氨和氮。

9. 三糖铁高层琼脂斜面中含有的糖主要有葡萄糖、乳糖和蔗糖三种，培养基中加入了指示剂酚红, 它在pH小于6.8时为黄色, 大于8.4时为红色。伤寒沙门氏菌在该培养基里生长时，只能利用葡萄糖产酸，产酸量也小。处于高层琼脂斜面表面的有机酸有的挥发，有的被氧化，很快消失。因此，表面黄色在短时间内也消失了。又因伤寒沙门氏菌分解氨基酸等产生碱性物质，所以高层琼脂斜面表面又转成红色。而底层在比较短的培养时间为黄色。大肠杆菌在该培养基中生长时，能利用其中所有的糖，培养基上下全为黄色。

10．根据下表实验结果计算菌落总平均数。

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11．实验过程中我们通常采用一些特殊的方法或添加一些特殊的物质来达到预期的目的，如移液管包扎时在粗头塞上一小段棉花的主要目的是防止杂菌进入（防止染菌）；接种时采用穿刺法是主要是便于观察细菌的运动和对氧的需求情况；糖发酵实验中加杜氏管的目的是便于观察微生物发酵糖产气现象；乳糖胆盐发酵培养基（大肠菌群测定）中加入胆盐的目的是抑制革兰氏阳性菌的生长；将无菌的液体石蜡灌入斜面培养基进行菌种保藏时，液体石蜡的作用为隔绝空气。

二、判断题（共10分，每小题1分）

1．显微镜的油镜使用完毕后，直接用擦镜纸揩去香柏油就可以了。（×）

2．利用手提式灭菌锅进行高压蒸汽灭菌时，首先应开启放汽阀，待锅内水沸腾后，使锅内的冷空气从放汽阀排净，此段时间大概为

3~5min。（√）

3．最常用的划线接种法为三区划线，实际操作如图所示。利用该

方法在第三区可获得单菌落。（×）

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4．大肠杆菌和八叠球菌为革兰氏阴性菌，革兰氏染色后菌体呈红色；枯草芽孢杆菌为革兰氏阳性菌，革兰氏染色后菌体呈紫色。（×）

5．在酵母细胞大小测定的实验中使用了目镜测微尺和镜台测微尺。目镜测微尺需进行标定，即测定目镜测微尺每格代表的实际长度，当使用不同放大倍数的物镜时该标定结果是相同的，不需要重新标定。（×）

6．曲霉和青霉在个体形态上具有比较明显的差别，其中之一为曲霉具有足细胞，而青霉没有。（√）7．利用细菌总数测定方法所测得的是一群在营养琼脂生长的需氧或兼性厌氧的杂菌总数。（×）

8．酵母死亡率测定实验中使用的无毒的染料为溴甲酚紫。

（×）

9．简单染色或革兰氏染色中在载玻片上所涂的菌量越多越便于观察。（×）

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10．培养基的pH 值在加热灭菌后会下降0.3~0.4，因此配制时的pH 值要比要求的略高一些。 （√）

三、名词解释（共12 分，每小题3分）

1．大肠菌群

大肠菌群系指一群在37℃、24h 能发酵乳糖，产酸、产气，需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。

2

．显微镜分辨力

是指显微镜分辨被检物体细微结构的能力，也就是判别两个物体点之间最短距离的本领，分辨力用R 表示。

3．无菌操作

培养基经灭菌后，用经过灭菌的接种工具在无菌条件下接种含菌材料于培养基上，这一操作称为无菌操作。

4．假菌丝

酵母生长旺盛时，出芽形成的芽细胞尚未脱离母细胞又长出了新芽，容易形成成串的细胞。如果各细胞之间连接处面积小于细胞直径，形成的这种藕节状的细胞串称为假菌丝。 四、简答题（共30分）

1．革兰氏染色的原理？（5分）