常用实验动物 实验动物学讲义

合集下载

第三章 遗传学控制 实验动物学讲义

第三章 遗传学控制  实验动物学讲义
习惯上把近交系动物称为品系,封闭 群动物称为品种。
动物分类学中,种(species)是分类的 基本单位。而实验动物学中把同一种动物 中具有不同遗传特性的动物分成不同的品 种(stock)、品系(strain)。
品种、品系的概念超出了一般动物学分 类的概念,它们才是实验动物分类的基本 单位。
三、作为品种、品系的条件 1.相似的外貌特征
殖隔离的动物则是异种动物 。
2、品种(stock): 是种以下的进一步的分类。品种一
般系指具有一些容易识别和人们所需要的 性状,而且可以基本稳定遗传的动物群体。 如青紫蓝兔、Wistar大鼠、KM小鼠等。
3、品系(strain): 在实验动物学中把基因高度纯合的动
物称作品系动物。如,C57BL/6是近交系动 物中的一个品系,属低癌、高补体活性的 动物。
实验动物质量控制 v遗传质量控制 v微生物质量控制 v营养质量控制 v环境质量控制
实验动物的遗传背景与反应特性是影响 实验结果的重要因素,不同遗传背景与反应 性的实验动物,对同一刺激有时可引出不同 质和量的反应。
从遗传学角度讲,实验动物应是具有 明确遗传背景并受严格遗传控制的,属于遗 传限定性动物。
一、实验动物按遗传学控制分类 v近交系动物(Inbred strains)相同基因型 v杂交F1代动物(F1--Hybrid) 相同基因型 v封闭群动物(Closed--colony) 不同基因型
一切动物的分类都离不开传统的生 物学分类法则。每一种实验动物都可以 在传统分类法中找到自己的位置。以大 家鼠为例,它属于:
2.重组近交系
recombinant inbreed strain,RI
由两个无血缘关系的近交系杂交后,得 到F2代,分组分别经续20代以上的兄妹交 配而育成的近交系列组动物。为重组近交 系提供亲代的两个近交系称为祖系。该品 系动物既具有其双亲品系的特性,又具有 重组后一组内和每个重组近交系的特征

常用实验动物1

常用实验动物1

1. 裸小鼠:第11对染色 体突变,无毛。 2. SCID小鼠: 严重联合免疫缺陷小鼠。 第16号染色体上的scid隐性基因 突变所致,出现T、 B淋巴细胞免疫功 能缺陷。 3. 快速老化模型小鼠(SAM小鼠): 4-6个月后迅速出现老化诸特征。
2月龄(左)与14月龄老化小鼠(右)
二、小鼠在生物医学研究中的应用 (一)药物研究: 1、药物安全性评价试验 2、生物制品的检定 3、药物筛选 4、药效学评价试验 (二)肿瘤学研究: 1、自发性肿瘤 2、诱发性肿瘤 3、人癌细胞移植 4、肿瘤遗传学研究
动情前期可见大量有核上皮细胞
动情期可见大量角化上皮细胞
交配后的大鼠阴道分泌物,可见精子
3.无呕吐反射 食管与胃小弯之间有 界限嵴,该嵴的皱褶是阻止大鼠呕吐的 原因,因此不适宜作呕吐实验。 4. 血压 对药物反应敏感。 5. 感觉器官 大鼠视觉灵敏,对光照 较敏感,嗅觉灵敏, 对噪音较敏感。适 宜做条件反射实验。 6.应激反应 大鼠垂体--肾上腺系统 功能发达,应激反应灵敏。
8、淋巴系统:发达,但腭和咽无扁桃体。 外界刺激可使淋巴系统增生,因此易患 淋巴系统疾病。 9、骨髓:无黄骨髓。 10、皮肤:无汗腺,尾部有四条明显的血 管,背腹部各有一条静脉,两侧各有一条 动脉,尾有散热,平衡,自卫等功能。 11、小鼠有褐色脂肪组织,参与代谢和增 加热能。
(三)生理学特点: 1、生长快: 各品系小鼠达到18-22克体重所需时间:
(1)昆明种小鼠4周, (2) NIH小鼠4-4.5周, (3) 615小鼠4-5周, (4) C57BL/6小鼠5-6周, (5) C3H小鼠6-7周, (6) BALB/c小鼠7-8周。
2、生殖生理:
(1)性成熟期:1.5-2个月。 (2)体成熟期:2.5-3个月。 (3)性活动维持时间:1年。 (4)性周期:4-5天 动情前期、动情期、 动情后期、动情间期(表3-2)。

常见的实验动物ppt课件

常见的实验动物ppt课件
放射性同位素照射剂量与生物效应等试验。
12
小鼠
(二)肿瘤学研究(自发肿瘤、诱发性肿瘤、人癌细胞移植)
1、自发肿瘤: 许多小鼠品系自发产生肿瘤。近交系小鼠中大约有
244个品系或亚系都有其特定的自发性肿瘤。 从肿瘤发生学上来看,这些自发性肿瘤与人体肿瘤
相近,所以常选用小鼠自发的各种肿瘤模型,进行肿瘤 病因、发病机理、防治及抗癌药物筛选的研究。
① 8月龄后,开始出现衰老现象,表现为肥胖、增重, 被毛蓬松、脱落。
②自发肿瘤发生率:低白血病;低乳腺癌、高肺腺癌。 ③对津638白血病病毒敏感。 (4)主要用途:用作白血病、老年病的研究。
27
小鼠
7.FVB小鼠 起源
源自远交系Swiss鼠。1935年,在NIH 饲养,1966 年 起开始选育,在接种白日咳疫苗后,其中一系HSFS/N对 组胺(Histamine)敏感。70 年代初,在HSFS/N 系第八代 发现部份小鼠携带Fv1 b 基因对B strain Friend 白血 病毒敏感,称FVB。NIH 、Jackson等保存。 毛色:白化 应用:
实验小鼠来自 野生小鼠,经长期选 择培育而成
3
小鼠
一、生物学特性
(一)习性和行为
1、胆小怕惊
2、昼伏夜动
3、喜群居
4、适应性差:小鼠体小娇嫩,不耐饥饿和缺水;
对环境适应性差,不耐热;过冷、过热均会造 成死亡;不耐强光的噪声;
对疾病抵抗力差。
5、喜欢啃咬:因为小鼠门齿生长较快,所以特别喜欢 啃咬坚硬物品。非同窝的雄性好斗,但不主动咬人。
1985年从美国NIH引进到 中国医学科学院实验动物研 究所,为BALB/c第180代。
(2)毛色:白化
BALB/c

实验动物学:第一章 绪论

实验动物学:第一章 绪论

3.实验动物科学的研究范围
实验动物学 实验动物医学 比较医学 动物实验技术
第二节 实验动物在生物医学发展中的意义
1. 实验动物的使用价值
医学生物学研究领域里,进行实验研究四个基本要 素:
动物 (Animal) 设备 (Equipment) 信息 (Information) 试剂 (Reagent)
包括野生动物 、经济动物(家畜)、社会
动物(宠物)、实验动物。
实验动物化:
把广义上用于科学实验的实验用动物经过人 工驯养,按科研目的给予科学饲养、繁殖、微 生物控制和定向培育,最后变成狭义的实验动 物。
小鼠
BALB/c小鼠 C3H小鼠
C57BL/6小鼠 ICR小鼠
裸小鼠
SD大鼠
大鼠
Long-Evans大鼠
第二十条 供应用的实验动物应当具备下列完 整的资料: (一)品种、品系及亚系的确切名称; (二)遗传背景或其来源; (三)微生物检测状况; (四)合格证书; (五)饲育单位负责人签名。 无上述资料的实验动物不得应用。
1997年12月国家科委(现科技部)和国家技术监督 局(现国家质量监督检验检疫总局)颁布了《实验 动物质量管理办法》,共五章26条
第三章 实验动物生用,实行许可证制度。 实验动物生产和使用单位,必须取得许可证。
实验动物生产许可证,适用于从事实验动物繁育 和商业性经营的单位。 实验动物使用许可证,适用于从事动物实验和利 用实验动物生产药品、生物制品的单位。
第十条 从事实验动物繁育和商业性经营的单位,取 得生产许可证,必须具备下列基本条件:
1.实验动物种子来源于国家实验动物保种中心,遗传背景 清楚,质量符合国家标准;
2.生产的实验动物质量符合国家标准; 3.具有保证实验动物质量的饲育、繁育环境设施及检测手

讲义4 实验动物解剖

讲义4 实验动物解剖

第四章实验动物解剖选用环节动物(蚯蚓)、节肢动物(鳌虾)、鱼类(鲫鱼)、两栖类(蛙类或者蟾蜍)、哺乳类(大白鼠、小白鼠或者家兔)等作为代表性动物,进行系统操作实验,既学习了动物解剖知识,也在具体操作中熟悉和巩固前章所学习的动物抓取、麻醉。

安死术等技术。

通过解剖与观察,使学生建立动物躯体结构和主要功能的认识,以便为各种实验所需的组织取材准确定位。

哺乳动物是医学、药理学及生理学等学科的基本实验材料;环节动物、鱼类及两栖类则是环境生物学及水生生物学的常用实验动物,故在大学一年级的基础生物技术实验课中开设该项基本操作训练是很有必要的。

教师也依据专业方向,为学生选择针对性的实验动物作为教学材料。

第一节环毛蚓(Pheretima sp.)解剖及横切面观察一、目的意义蚯蚓及沙蚕等都是环节动物门动物,尤以蚯蚓最为常见,也最为重要。

蚯蚓不仅能改良土壤、净化修复污染上壤,还是很重要的畜禽饵料及人类的医药原料。

本实验以环毛为代表动物,研究它的外形和内部构造,籍以了解环节动物的有机结构和特化程度。

二、获得与处理在野外阴暗潮湿而多腐殖质的土壤中挖取成熟的环毛蚓,用5%福尔马林溶液浸泡后备用。

部分活的蚯蚓用琼脂培养几天后,通过普通石蜡切片法,制成横切面玻片标本。

三、操作及观察(一)外形观察置环毛蚓于蜡盘中,观察其外部形态。

1.外形长筒形,由很多环节组成,环节之间有节间沟,每节中央环上有一圈刚毛,身体可分为背、腹面及前、后端。

2.前端在第ⅩⅣ~ⅩⅪ节有棕红色隆起的环带,可据此判断身体的前端,前端的第一节叫围口节,中间是口,口的背侧有肉质的口前叶。

3.后端相反的一端为后端,末端的开口为肛门。

4.背面颜色深暗的一面。

在背中线处每条节间沟内有1个背孔(前端几节缺)。

背孔的起始位置则因种类不同而异。

5.腹面颜色浅淡的一面。

通常在6/7~8/9节间沟的腹面两侧有受精囊孔3对,孔的数量(1对~4对)因种而异;在第ⅩⅣ节腹中线上有1个雌性生殖孔;在第ⅩⅧ节腹侧有1对雄性生殖孔。

实验动物学知识大全

实验动物学知识大全

第二章实验动物与动物实验的环境 设施控制 第一节 实验动物的环境及环境控制 的意义 一、实验动物环境 某种品系的实验动物,如免疫缺 陷动物对病原微生物抵抗能力很低, 在自然环境几乎不可能生存,而只能 在严格控制的人工环境中生存。这种 人工控制的,供实验动物繁殖、生长 的特定场所及有关条件,即围绕实验 动物的所有事物的总和,称实验动物 环境。而界定实验动物的生存空间、
件发展“九五”计划和2010年远 景目标纲要》,
提出了“实验动物、仪器、试剂、
文献信息”(AEIR)四大科研条 件的发展规划。1998年,国家科技 部组建成立国家实验动物种子中心 和国家实验动物质量检测机构。 A animal E equipment I information R reagent


(3)合乎标准的环境,可为实验动物及
动物实验工作才提供适宜的条件,并保 障人们身体健康,不受危害因素的伤害。 三、实验动物环境监控与动物实验结果 的关系 实际上是控制实验动物的演出型, 并对演出型动物作严格的管理;只有演 出型隐定,实验结果才有良好的可重复 性和高度的可信性。实际上,除了动物 外,监控环境因子是保证演出型稳定的 关键之一。
(二)实验动物与疾病动物模型的发 展 1. 1951年雷尼尔(Reynier)等 人成功 研制出金属隔离 器; 2. 1957年特雷勒(Treyler)又研制出塑料 隔离器; (三)实验动物培育的上述工作成果, 大大推动了生命科学研究的发展 1. 1966年,弗連纳根(Flanagan)培育 出了突变系裸小鼠,以后又有人培育出 裸大鼠。
(五)我国实验动物工作的管理机构
及法规 1.人员培训 1992年中国和日本政府签署协议, 成立了中国实验动物 人才培训中心 开设了项22期课程培训班,招收学员 520多人;另派往日本学习15人。 2.实验动物科研 “七五”期间(1986年~1990年) 科研课题中的1218项与实验动物有关, 投入经费共计484万元。“九五”

实验动物学汇总-发讲义

实验动物学汇总-发讲义

动物福利的概念动物福利,就是让动物在康乐的状态下生存,其标准包括动物无任何疾病、无行为异常、无心理紧张压抑和痛苦等。

基本原则包括:让动物享有不受饥渴的自由、生活舒适的自由、不受痛苦伤害的自由、生活无恐惧感和悲伤感的自由以及表达天性的自由。

我国学者这一定义基本等同于国际公认的动物五大福利:不受饥渴之苦、不受困顿不适之苦、不受伤痛疾病之苦、不受恐惧和精神之苦和表达天性的自由。

总之,动物福利包括物质和精神两个方面的内容。

动物多样性为医学提供广泛的研究资源实验动物选择的原则和方法总的原则应当包括以下5个方面:1、遵循国际通用的“3R”要求。

3R是指Reduction(减少)、Replacement(替代)和Refinement(优化)。

“减少”是指在满足实验的前提下,减少实验用的动物和实验的次数;“替代”是指尽可能采用可以替代实验动物的替代物,如用细胞组织培养方法,或用物理、化学方法代替实验动物的使用。

“优化”是指对待实验动物和动物实验工作应做到尽善尽美。

2、依微生物和寄生虫学标准选择实验动物。

通常要求选用清洁级或SPF的实验动物,原因是这种实验动物排除了人兽共患疾病,排除了实验动物本身的重要传染病,也排除了明显影响实验研究的相应微生物和寄生虫,使实验研究处于没有或很少有生物干扰的情况下进行。

排除这些干扰有利于实验的顺利进行和获得可靠的数据,同时,尽最大可能保证了实验人员的健康。

3、依遗传学特性选择实验动物。

实验动物要求遗传背景清楚,基因型决定表现型,了解实验动物遗传特性,如选择近交系、突变系、封闭群、杂交系及转基因动物去进行研究实验,它们的遗传组成、生理变化、寿命、疾病、解剖、药物反应、免疫、对病原体的感受性和生殖等方面表现出不同特性。

如近交系BALB/c和其他品系在存活期、自发肿瘤、对药物反应和生殖上都有明显的差异。

实际上,从遗传观点来选择动物就是从分子生物学角度来选择实验动物。

4、依生物学特性选择实验动物。

常用动物和细胞实验讲义

常用动物和细胞实验讲义

绪言一、实验课目的本学科是一门实验性很强的学科,其实验课教学是整个教学的重要组成部分。

目的有如下几方面:(一)验证理论。

通过对理论课所学理论的验证,进一步加深对教学内容的理解、巩固和提高。

(二)通过基本技能的训练以及对实验结果的观察分析,使学生了解并掌握细胞生物学有关的实验技术方法,进而培养学生动手实践、观察分析和解决问题的能力。

(三)培养学生实事求是的科学态度和科学的思维方法,为其后续课的实验及今后的医学研究打下基础。

二、实验课要求(一)学生在实验前应认真预习实验指导及教材中与实验有关的章节,对实验课的原理、内容及方法有初步的了解。

(二)在实验中要认真操作、仔细观察、分析并及时做好记录。

(三)要注重动手能力的培养。

(四)在实验中要注重基本技能的训练及实验仪器、器械的使用方法。

对基本的实验技能要反复训练直至基本掌握。

(五)实验结束后,要根据实验过程中的记录和实验指导的要求,实事求是、认真的写好实验报告,不得抄书或借阅他人的报告参考。

三、实验室规则(一)遵守实验纪律,不迟到、不早退或无故缺席。

(二)进入实验室要穿好白大衣。

(三)进实验室后要按学号对号入座,不能随意更换座位。

要保持肃静。

(四)要严肃认真地进行实验。

实验期间不得进行任何与实验无关的活动。

(五)实验中各种用品使用后应放回原处。

示教标本应按顺序观察,不能任意移动标本,以免妨碍他人观察。

(六)要爱护仪器、标本和器械,如有损坏,应及时报告老师,以便修理或更换。

损坏仪器、器械和标本者应按规定进行赔偿。

(七)要注意节约实验材料、药品和水、电等资源。

(八)保持实验室内清洁整齐。

实验废物及纸屑应放到指定地点,不得随意乱丢。

实验结束后要认真清理各自的实验台面,将器械清洗后点清数目并摆放整齐。

值日生负责清扫实验室,清扫结束后要关好水、电、门窗等,经教师允许方可离开实验室。

附:实验课绘图要求学生每人准备一支HB铅笔、直尺和橡皮。

四、实验教学的内容实验顺序实验内容实验一普通光学显微镜的结构和使用实验二动物细胞的基本形态观察和显微测量实验三细胞组分的化学反应实验四线粒体的活体染色实验五液泡系的活体染色实验六细胞膜通透性的观察实验七细胞计数实验八细胞超微结构电镜照片的识别实验九细胞分裂实验十细胞的原代和传代培养实验十一细胞融合第一次实验:普通光学显微镜的结构和使用动物细胞的基本形态观察和显微测量第二次实验:细胞组分的化学反应线粒体的活体染色液泡系的活体染色第三次实验:细胞膜通透性的观察细胞计数第四次实验:细胞超微结构电镜照片的识别细胞分裂细胞的原代和传代培养录像常用实验动物的了解和解剖器械的使用一、常用实验动物常用的实验动物有蟾蜍、小白鼠、大白鼠、豚鼠、猫、兔和狗等。

常用实验动物

常用实验动物
1、体积小、繁殖快、饲养容易 2、遗传学研究最详细
3、与人的发育模式相似
4、有众多遗传背景清楚的近交系和人类疾
病的动物模型
第一节 生物学特性和解剖生理学特点
一、生物学特性 二、生理学特点 三、解剖学特点
一、生物学特性
1、生活习性:
1)小鼠胆小怕惊,性情温顺,一般不会主动
攻击人,但仍保持一些野生习性。
101 86
134 166 209 214 232 246
150 206 262 130 172 210 318 240 365 399 258 272
2、繁殖力强。 性成熟:♂2月龄 ;♀2.5月龄 性周期:4~5天
妊娠期:19~21天
3、体 温:39℃左右
4、血总量:6.4ml/100g
常用大鼠品系
(2)诱发性肿瘤 小鼠对致癌物敏感,可诱发各种肿瘤模型,如用 甲基胆蒽诱发小鼠胃癌和宫颈癌,用二乙基亚 硝胺诱发小鼠肺癌等,用于肿瘤防治的实验研 究。 (3)人癌细胞移植 胸腺严重缺陷的裸小鼠可接受人类各种肿瘤细 胞的植入,成为活的癌细胞“试管”。是研究 人类肿瘤生长发育、转移和治疗的最佳实验动 物。
小鼠的繁殖能力很强,妊娠期很短,仅21 天,生长速度很快,因此很适合避孕药和 营养学实验研究。如常选用小鼠作抗生育 、抗着床、抗早孕、中孕和抗排卵实验。
9.镇咳药研究
小鼠在氢氧化铵雾剂刺激下有咳嗽反应, 可利用这个特性来研究镇咳药物。因此, 小鼠是研究镇咳药物所必需的动物
10. 免疫学研究
如可利用各种免疫缺陷小鼠来研究免疫机 理等。
第二节 小鼠在生物医学研究 中的应用
1.各种药物的数致死量的测定等常常选用小鼠。
2.生物制品的检定
小鼠广泛地应用于血清、疫苗等生物制品 的检定,各种药物的效价测定,以及放射性 同位素照射剂量与生物效应等试验。

实验动物学课6

实验动物学课6

8.成年鼠性别很易区分,雄鼠的阴囊明显; 雌鼠可见阴道开口和五对乳头。
幼鼠或仔鼠则主 要从外生殖器与肛 门的距离判定,近 者为雌,远者为雄。 另外,雌鼠肛门和 生殖器之间有一无 毛小沟,而雄鼠则 在肛门和生殖器之 间长毛。雌鼠比雄 鼠有明显多的乳头。
(三)生理学特点
1.小鼠体型小 2.体温与能量代谢 对小鼠需要供给充足的饮水。小鼠饮水量为4~7ml/d。 3.泌尿 小鼠尿量较小,一次排尿仅1~2滴。与其他哺乳动 物不同的是,小鼠尿液中含有蛋白质和肌酸酐。 4.生殖 生长期短、成熟早、繁殖力强。
5 . 正 常 小 鼠 生 理 值
二、小鼠在生物医学中的应用
(一)药物研究
1.药物安全性评价和毒性试验 2.药物筛选性试验 一般筛选药物首先使用杂种 鼠观察一个药物的综合效果,再用纯系小鼠或 大动物作进一步的肯定。 3.生物药品和制剂的效价测定
(二)肿瘤学研究 (三)病毒、细菌和寄生虫学研究 (四)遗传学研究 (五)遗传工程研究 (六)老年病学的研究 (七)计划生育研究 (八)免疫学研究
1897年 -- 重组表型 生物学家William Haacke 发现白鼠和杂色鼠杂交 会产生重组表型。他注意到在出生的第一代老鼠全部 是杂色的,但到了第二代却有了重组表型——既有白 色鼠又有杂色鼠。William Haacke观察到的现象实际 上已经触及了孟德尔遗传学,但可惜他没能提供任何 重要数据,他的报告也受到了一些争议,这项重要的 工作最终被忽视了。
4.CBA系 毛色为野生色。易诱发免疫耐受性,血压较高, 对维生素K不足高度敏感。雌鼠乳腺癌60~65%, 雄鼠肝癌发生率约为65%。
5.C3H/He系 与CBA同一起源。毛色为野生色,较易诱发免疫 耐受性。红细胞及白细胞数较少。繁殖用雌鼠 从较早期(约5月龄)便有乳腺癌发生

动物实验技术常用实验动物大小鼠豚鼠2讲课文档可编辑全文

动物实验技术常用实验动物大小鼠豚鼠2讲课文档可编辑全文
第八页
4、性情温顺,胆小怕惊,反应敏感。 对多种病原体、毒素及致癌物都很敏感, 外界环境光照、噪音、营养、温度、空气 质量等多种因素均可对小鼠造成影响。
第九页
5、群居,昼伏夜动,喜啃咬。 因门齿生长较快,需经常啃咬坚硬物品。 喜光线较暗的安静环境,进食、分娩都常 发生在夜间,傍晚和黎明前是小鼠活动的 两个高峰。
第四十六页
2、NIH 白色,由美国国立卫生研究院(NIH)培育。主要特 性:繁殖力强,产仔成活率高,雄性好斗,易打伤 致残。
免疫反应敏感性比昆明鼠强,是国际广泛通用的实验动 物。
主要用于药物毒理研究和生物制品检定。
第四十七页
3、ICR
又称Swiss Hanschka,CD-1,Ha/ICR。为美国培育的Swiss
第四十五页
封闭群
1、昆明小鼠(KM):白色,1926年美国从瑞士引入白化小
鼠先培育成瑞士小鼠,1946年我国从印度将瑞士小鼠引入
昆明,1952年从昆明引入北京生物制品研究所,1954年推 广到全国。 是我国特有的封闭群小鼠。
主要特性:繁殖率和成活率高,抗病力和适应性很强,雌
鼠乳瘤发生率为25%。 广泛用于药理、毒理、病毒和细菌学的研究,以及生物 制品和药品的检定。
第二十四页
(二)、肿瘤学研究
1、肿瘤实验研究: 自发性肿瘤:
诱发性肿瘤:
人癌细胞移植 肿瘤遗传学研究
第二十五页
(三)、遗传学研究 1、遗传学分析: 如:毛色基因是遗传标记
和品系鉴定的依据之一。
2、基因研究: 重组近交系;
同源近交系;
转基因小鼠
第二十六页
3、遗传性疾病模型动物: 具有遗传性疾病的突变系为研究人类遗传 性疾病的病因、发病机理和治疗提供了自然 的动物模型。 如家族性肥胖、遗传性贫血、全身性红斑狼疮 、侏儒症、尿崩症等都有相应的突变系小鼠可 供研究用。

实验动物与动物实验方法教案 - 实验讲义及附表

实验动物与动物实验方法教案 - 实验讲义及附表

第四篇 实验讲义实验一 大鼠、小鼠的实验基本操作练习1、练习动物的编号、雌雄的鉴别和处死方法。

2、灌胃给予大、小鼠、豚鼠10%碳末混悬液,并熟练掌握之。

3、静脉给予大、小鼠1%伊文氏蓝生理盐水溶液。

实验二 家兔血清转氨酶的测定【实验目的】学习和掌握家兔的取血方法、血清的制备方法,熟悉转氨酶的测定方法。

【实验材料】722分光光度计、试管、吸量管、恒温水浴锅、家兔、注射器、1.0mol/L 磷酸盐缓冲液(pH7.4)底物液、丙酮酸标准液、2,4-二硝基苯肼、0.4mol/L NaOH 等。

【原理】]血清谷丙转氨酶作用于丙氨酸及α-酮戊二酸,结果生成谷氨酸与丙酮液。

丙酮酸与2,4-二硝基苯肼作用,生成二硝基苯腙,此物在碱性溶液中显红棕色,与经同样处理的标准丙酮酸比色,求得丙酮酸的生成量以表示酶的活性。

【实验步骤】 取家兔一只,耳缘静脉或心脏取血2~5ml ,沿试管壁缓慢加入试管中,静止30分钟,3000转离心5分钟。

用吸管吸取上层液血清,加入试管中,另取3支试管连同这支试管共4支试管,编号,按下表加试剂(ml )。

标准管 标准空白管 测定管 测定空白管丙酮酸标准液 0.1 — — —新鲜血清 — — 0.1 0.1底物液(已在37℃保温过) 0.5 0.5 0.5 —1.0mol/L 磷酸盐缓冲液 — 0.1 — —混匀各管,置于37℃保温30分钟,再按下表加入试剂:2,4-二硝基苯肼 0.5 0.5 0.5 0.5底物液 — — — 0.5充分混匀,继续在原水浴中保温20分钟,取出,每管加入0.4mol/L NaOH 5ml ,混匀,静置10分钟后,用721型分光光度计比色,波长520nm ,以蒸馏水校正零点,测定各管光密度。

本法所规定的谷丙转氨酶活性单位的定义是:1ml 血清于37℃与底物作用30分钟,产生2.5ml 丙酮酸为1个谷丙转氨酶单位。

先计算出0.1ml 血清所产生的丙酮酸的μg 数:g/0.1ml 10=μ白管吸光度标准管吸光度-标准空白管吸光度测定管吸光度-测定空⨯ 再根据单位定义,换算为每ml 血清内谷丙转氨酶活力单位。

  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
3、不同遗传特点的动物群(如:近交系与封闭群)繁殖方法不同。 4、种鼠可使用1年半。雌鼠生育6-8胎即可淘汰。要经常检查种鼠的生
殖能力,及时淘汰受孕率低的种鼠并增补新种。
5、离乳后的雌鼠和雄鼠分开饲养,发现异常动物及时淘汰处理。
• 大鼠属于脊椎动物门、哺乳纲、啮齿目、 鼠科、大鼠属动物 。野生褐家鼠的变种
DBA:分为DBA/1和DBA/2两个品系,1977年由美 国实验动物中心引进,毛色均为浅灰色。
• KM种小鼠:我国生产量、使用量最大的远交种小鼠,白 色。抗病力和适应力强,繁殖力和成活率高。
• ICR:1973年由日本国立肿瘤研究所引入我国,白色,其 显著特点是繁殖力强。
• CFW :1973年由日本国日本国立肿瘤研究所引入我国, 白色,起源于Webster小鼠,经20代近亲交配后,采用随 机交配而成。
• 中国培育的近交系小鼠有:TA1(津白一号) 、 TA2 (津白二号) 、 615系
• 引进的近交系小鼠有20多种,常用的有4种。
C3H小鼠:1975年从美国引进,毛色为野生色
C57BL/6小鼠:1975年从日本引进,毛色为黑色
BALB/c:Bagg1913年获得小鼠白化株,经近亲繁 殖20代以上育成,毛色为白色
试验。测定药物(或化学制)的LD50或药物致癌 性试验等常选用小鼠;
• 3、生物制品、药品安全性、有效性评价:药物 的效价比较实验 如广泛用于血清、疫苗等生物 制品的鉴定,照射剂量与生物效应实验,各种药 物效价测定等实验。
• 4、药品研究方面
小鼠广泛应用于癌、肉瘤白血病以及其他恶性肿瘤 的研究。为研究各种类型肿瘤的发生和生物学特 性及其防治,提供了很好的动物模型。
• 小鼠的毛色变化多样,常作为小鼠遗传学分析中 遗传标记和品系鉴定的依据之一。
• 重组近交系小鼠将双亲品系的基因自由组合和重 组产生一系列的子系,是遗传分析的重要依据, 主要用作基因定位及其连锁关系的研究。
• 同源近交系小鼠常用来研究多态性基因位点的多 效性,基因的效应和功能。
• 具有遗传性疾病的突变系小鼠为研究人类遗传性 疾病的病因、发病机制和治疗措施,提供了自然 的动物模型。如家族性的肥胖、遗传性的贫血、 全身性红斑狼疮、侏儒症、尿崩症等都有相应的 突变系小鼠供使用。
自发性肿瘤:AKR小鼠白血病发生率可达90%, C3H小鼠自发乳腺癌发病率高达90%。
诱发性肿瘤:对各种致癌物敏感可诱发各种供研究 用的肿瘤模型。如用二乙基亚硝胺诱发小鼠肺癌, 甲基胆蒽诱发小鼠胃癌和宫颈癌等。
移植性肿瘤:裸小鼠、SCID小鼠可接受人类各种肿 瘤细胞的移植,成为活的癌细胞“试管”。
小鼠对多种病原体具有易感性,适合于研 究吸血虫感染、流行性感冒、脑炎、狂犬 病等。
• 现在全世界已培育出100多个近交品生系, 常用的大鼠近交品系 有:
• ACI系 :1926年由哥仑比亚大学肿瘤研究 所培育 ,黑色,但腹部和脚白色 ,易发生 先天性畸形。该品系大鼠低血压。
• F344/N大鼠: 1926年由哥仑比亚大学肿瘤 研究所培育 ,白色 ,我国从NIH研究所引 进。用于毒理、肿瘤、生理学研究。
尾巴较长,约等于体长,尾具有平衡、散热 和自卫等功能。尾部有四条明显的血管, 其背腹面各有一条静脉血管,两侧各有一 条动脉血管。
• 正常体温37-39℃ ,成年小鼠呼吸频率140210次/分,心跳平均163次/分。
• 染色体20对。
1、近交系小鼠
据不完全统计,近交系小鼠品系、亚系及其衍
生物总共加起来有1000多个,但在国际上广泛应 用的品系数目还是有限的.据Festing对已发表的 1600篇研究论文进行统计,C57BL/6是最为广泛 应用的小鼠品系,其次是C3H品系,1600篇论文 涉及到40多个常用品系,但最为常用的6-8个品系 使用率达到70%。对于绝大多数使用者只需要了 解常用近交系小鼠品系的生物学特性。
• 癫痫大鼠 • 白内障大鼠 • 尿崩症大鼠
大鼠给药容易,采样量合适方便,行为多样 化,常用于药物毒理、药效评价、新药筛 选等研究
1、药物毒性试验 2、致畸胎研究 3、药物的筛选 4、药物效价评定、安全评定
可复制成各种肿瘤模型,是肿瘤实验研究最 常用的实验动物 。
自发性肿瘤模型:有肾上腺髓质肿瘤、乳腺 癌和粒细胞型白血病等。
• LACA :1973年由英国实验动物中心引入我国,白色。其 实是小鼠改名而成。
• NIH :由美国国立卫生研究院培育而成,白色。繁殖力强, 幼仔成活率高,雄性好斗。
目前突变系小鼠有143种,常用的突变系小鼠有: 侏儒症:比正常小鼠体型小,缺少生长素和促甲 状腺素,用于内分泌研究。
无毛症: 裸鼠:第11对染色体上的裸基因(nu)导致无毛、
• 侏儒症小鼠垂体功能低下,生长激素缺乏, 其寿命只有4-5个月,且表现为灰发,皮肤 萎缩,双眼白内障,常用于研究生长激素
与老化的关系。
小鼠内分泌结构的缺陷常引起的库欣综合症; 甲状旁腺激素失活引起的钙磷代谢紊乱和 次生骨吸收障碍等。
• 是研究支气管肺炎、副伤寒的重要实验动 物。选用幼年大鼠进行流感病毒传代,进 行厌氧菌细菌学实验,还可进行假结核、 麻疯、霉形体病、巴氏杆菌病、念珠状链 杆菌病、黄曲病、烟曲菌等真菌病等研究。
• 也可作为旋毛虫、吸血虫、钩虫、锥虫等 寄生虫疾病的研究。
• 大鼠的内分泌腺容易手术摘除,常用于研 究各种腺体对全身生理生化功能的调节; 激素腺体和靶器官的相互作用;激素对生 殖生理功能的影响,如发情、排卵 、胚胎 着床等的调控作用。
诱发肿瘤模型:如用二乙基亚硝胺、二甲基 偶氮苯复制大鼠肝癌动物模型;用甲基苄 基亚硝胺诱发复制大鼠食管癌,3-甲基 胆蒽诱发的肺鳞状上皮癌及间皮瘤等。
大鼠的毛色变型很多,具有很多的毛色基因
类,例如野生色(A)突变种[野生色等位基 因(a)和白化等位基因(C)、淡黄色 (d)、粉红眼(p)、红眼(r)、银色(S)、 沙色(sd)、黄色(e)、白灰色(wb)等,在遗传 学研究中常可运用。
(2)小鼠属于杂食性动物,胃容量小,有随时采食的习性,夜间更为活跃。 采取“少量勤添”的原则,保证随时有料。每周喂料3-4次,以上次 的料刚刚吃完为好。小鼠的饲料消耗量,随着生长发育和生产繁殖的 阶段不同而有所不同,所以必须注意不同阶段添加的饲料量。对于种 鼠、妊娠鼠、哺乳鼠应该使用繁殖用高营养饲料,并适当添加葵花籽、 麦芽、鸡蛋等。成年小鼠采食量:5-6g/d。怀孕后期:8-10g/d;哺乳 第一阶段(1-12d)约13g/d;哺乳第二阶段(13-21d)约19g/d。仔鼠在 21d离乳前约4g/d;22-23d为5.6-6g/d。饲料存放在凉爽、干燥的地 方,1周内用完,饲料贮存期不超过90d。
免疫缺陷小鼠 BALB/c-nu SCID小鼠
小鼠繁殖能力强、妊娠期短、生长速度快, 适合作避孕药研究。如选用小鼠作抗生育、 抗着床、抗早孕和抗排卵实验。
• 小鼠寿命短,个体差异小和花费低廉,常 用于老年学研究。用于老年病研究1.5年以 上,大鼠1.7年以上。
• 胶原蛋白老化常作为老化的指标,是研究 胶原老化的动物模型。
• 行为表现多样,情绪反应敏感,易接受通过正负 强化进行的多种感觉指令的训练。
大鼠发育快,成熟早,繁殖力强。雄性2
月龄、雌性2.5月龄达到性成熟,性周期45d,妊娠期19-23d(平均21d),哺乳期2528d,年产5-8胎,每胎产仔6-12只,生育 期1.5年。全年多发情动物,具有产后发情、 产后妊娠的特点。寿命2.5-3年。
• 小鼠(mouse)哺乳纲、啮齿目、鼠科、 鼠属、小家属种 。
• 体型小,性情温顺,易于饲养管理。
• 小鼠是哺乳动物中体型较小的动物,出生时体重 1.5g,体长20mm左右。成年体重30-40g,体长 110mm。
• 喜黑暗,昼伏夜动。
• 喜欢群居,雄性好斗。
• 胆小怕惊,对环境反应敏感,适应性差,汗腺不 发达,怕热,高温容易中暑。
• Wistar大鼠:由美国wistar研究所培育而成。使 用数量最多,遍及全世界。我国从日本引进,白
色。该品系产仔数多,性周期稳定,早熟,繁殖
力强,性格温顺。抗病例力强。自发性肿瘤发病
率低。雄鼠耳朵比其他品系稍长,尾长短于身长。
• .SD:1975年由美国Spraque和Dawley农场育 成。又叫SD大鼠,多用于营养实验,对性刺激感 受性高,自发性肿瘤发病率低。比wistar大鼠生长 发育快,产仔也较高。尾长几乎等于身长。
• 肥胖症大鼠(Obese Rat ):血浆中胆固醇、磷脂含量较 高,3周龄就表现出肥胖,5周龄肥胖明显。食量大,体 重比正常大鼠大一倍。雌性不育。可作为研究人肥胖症模 型。
• SHR/OLa大鼠:自发性高血压大鼠,白色。严重的自发 性高血压(200mmHg),心血管疾病发生率高,而且无 明显原发性肾脏和肾上腺损伤。对抗高血压药物有反应, 是筛选抗高血压药物的良好模型。
• 群居,喜啃咬,喜黑暗,昼伏夜动,嗅觉灵敏
• 杂食性动物,特别喜欢吃熟肉。对蛋白质、维生 素、氨基酸等营养缺乏敏感 ,VA缺乏时常咬人。
• 性情较凶猛、抗病力强 ,对新环境的适应力强, 但对环境刺激、炎症反应敏感。强烈噪音可引起 食仔或抽搐;湿度低于40%易发生环尾巴症。
• 汗腺不发达,仅抓垫上有汗腺,靠尾和唾液散热, 体温调节不稳定。
• 2、给水:饮用水应保证连续不断,每周换水2-3 次(最好是每天更换新鲜水),并特别注意饮水 瓶嘴是否有气泡、不出水或漏水的现象。每次换 水要连同水瓶和瓶嘴一起换下;并认真清洗水瓶 和瓶嘴,然后消毒,严禁未经消毒的水瓶和瓶嘴 继续使用
• 3 、垫料和笼具:每周更换垫料和清洗鼠笼1-2 次.保持室内卫生,定期彻底清洗。室内一般不 用水冲,而用消毒液抹,常用消毒液有0.1%新洁 尔灭、3 %来苏儿等
• 无扁桃体.胸腺位于气管的前部。 • 肝的再生能力很强。如切除60-70%还能再
相关文档
最新文档