叶绿素A测定复习试题

叶绿素a测定复习试题

一、填空题

1.叶绿素a的测定方法有和，环境监测(生物)技术规范中规定用。

答：分光光度法；荧光光度法；分光光度法；

2.地表水环境质量标准(GHZB1-1999)中，对控制湖泊水库富营养化的特定项目之一叶绿素a作了明确规定：Ⅰ类水质的标准值为，Ⅱ类水质的标准值为，Ⅲ类水质的标准值为，Ⅳ类水质的标准值为，Ⅴ类水质的标准值为。

答：≤0.001mg/L；≤0.004mg/L；≤0.01mg/L；≤0.03mg/L；≤0.065mg/L。

3.进行生物样品污染物测定的样品处理可概括为二个过程：第一步是将样品

、、；第二步是将前一步处理过的样品

以消除干扰，提高被测组分的浓度。

答：分离；纯化；浓缩；分解消化或提取。

4.经丙酮浸取含有叶绿素a的溶液，以溶液为参比，在波长、

、、下测定吸光度。在波长测定丙酮溶液的空白值。丙酮溶液空白值应不大于。

答：丙酮；663nm；645nm；630nm；750nm；0.05。

5.经离心后的样品上清液，在750nm处测定吸光度，用以校正提取液的，当测定用1cm比色皿，吸光度超过时，提取液应。

答：浊度；0.005；重新离心。

二、问答题

1. 控制叶绿素a指标值的意义是什么？

答：叶绿素a是反映水体富营养化的一个重要指标。控制叶绿素a就在于控制富营养化和藻类生物量，从而揭示湖库富营养化发生的内在实质。

2. 叶绿素a的涵义是什么？

答：指水中藻类具有光合色素的叶绿素。

3.什么叫富营养化？

答：营养物质特别是含氮和磷的化合物，在淡水或盐水中的富集。富营养化加速了藻类和较高等植物的生长。

4.评定水质富营养化的几种类型标准是什么？

答：参照国际经济合作与发展组织(OECD)规定和关于评定湖泊富营养化状态的叶绿素a划分标准：以≥78μg/L为重富营养型；11—78μg/L为富营养型；3.0—11μg/L为中营养型；＜3.0μg/L为贫营养型。

5.用于叶绿素a测定的水样应如何保存？

答：每升水样加1%碳酸镁悬浊液1ml，以防止酸化引起色素溶解。如不能立即测定，则应在低温(0—4℃)避光保存。

6.叶绿素a测定方法的原理是什么？

答：原理是：以丙酮溶液提取浮游植物色素，浸取液经过滤离心后，依次在663、645、630nm波长下测定吸光度，按Jettrey—Humphrey方程式计算，可得出叶绿素a的含量。

7.一般用于测定叶绿素a的样品采集多少量较合适？

答：通常采样体积可根据水中叶绿素a含量的高低来确定，一般可采取1.5—2升。按浮游植物采样方法，湖泊、水库采样500毫升，池塘300毫升，按海洋监测方法规定，海水采取2—5升。

8.什么叫中营养水？

答：天然发生的，或由于营养累积形成的中等营养状态的水，及介于贫营养和富营养之间的水。

9.什么叫贫营养水？

答：贫营养物且含高浓度腐殖质的水。

10.简述叶绿素a测定操作步骤？

答：⑴.样品制备：在每升水样中加入1mL1%碳酸镁悬浮液，混匀，用滤膜过滤。过滤负压不得超过50 kPa。

⑵.样品提取：用10mL90%丙酮溶液浸泡滤膜，置于冰箱冷藏12—24h，提取叶绿素a。

⑶.样品离心：以3000—4000转/分，离心十分钟。

⑷.样品测定：用分光光度计，以90%丙酮溶液为参比，分别在750nm、663nm、645nm、630nm波长下测定吸光度。

11.如果样品过滤后不能马上测定，应该怎么做？

答：若滤得样品不能及时提取，应该将滤膜抽干，对折后再套上一张滤纸，置于含硅胶的干燥器内，贮存在低于1℃的冰箱中。

12.试写出测定叶绿素a的计算公式，并指出各符号的意义？

答：叶绿素a(μg/L)＝［11.64(663－E750)－2.16(E645－E750)＋0.10(E645－E750)］×ν/V.δE——吸光度值

v——样品提取液体积ml

V——样品体积L

δ——比色皿厚度cm

三、计算题

1.采集某一水库的样品500毫升，进行叶绿素a的检测，测得的结果是：750nm 处吸光度值0.002；663nm处吸光度值0.849；645nm处吸光度值0.486；630nm 处吸光度值0.209；请计算该样品叶绿素a的含量。用地表水质量标准评价该水质为几类标准？

答：叶绿素a(mg/L)＝(11.64×0.847－2.16×0.484＋0.10×0.207)×10/500 ＝0.177

根据与地表水质量标准比较，此水质为超Ⅴ类标准。