小鼠缺氧实验实验报告
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\篇二:缺氧
缺氧动物模型复制及中枢神经系统功能抑制和低温对缺氧的影响
【摘要】目的:本实验学习复制乏氧性缺氧和血液性缺氧的动物模型方法,观察缺氧过程中呼吸的反应及血液色泽和全身一般情况的变化,并了解温度和中枢神经系统机能状态对缺氧耐受的影响以及对照实验和控制实验条件重要性。方法:通过复制缺氧动物模型,观察不同类型缺氧过程中呼吸、黏膜和血液色泽的变化。通过测定耗氧量和小鼠的存活时间来观察中枢神经系统机能抑制和低温对缺氧的影响。结果:中枢神经系统功能抑制和低温对动物耐受缺氧的影响与对照组相比,存活时间和总耗氧率有显著性差异;复制不同原因造成的不同缺氧类型小鼠都表现出了不同的呼吸频率和存活时间的变化。结论:给小鼠注射氯丙嗪、冰浴降温可显著降低总耗氧率,延长其存活时间(p<0.01)。co中毒、亚硝酸盐可显著缩短小鼠存活时间,降低呼吸频率。美兰可以缓解亚硝酸盐对小鼠的作用,已定程度延长小鼠存活时间,延缓呼吸频率的下降。
【关键词】缺氧氯丙嗪总耗氧率 co 亚硝酸盐美兰存活时间
当供应组织的氧不足,或组织利用氧障碍时,机体的机能和代谢可发生异常变化,这种病理过程称为缺氧。根据缺氧的原因不同可将缺氧分为低张性缺氧、血液性缺氧、循环性缺氧和组织中毒性缺氧四种类型,不同类型的缺氧,机体的代偿适应性反应和症状表现有所不同。
1.材料和方法
1.1实验动物:小白鼠(雌性)。
1.2 药品:氯丙嗪(chlorpromazine) 、钠石灰(soda lime),亚硝酸钠( sodium nitrite ) 、亚甲基蓝(美蓝)(methylene blue,mb)、 0.9%nacl (physiological saline solution) 、co(carbon monoxide)。
1.3 器材:100、500ml广口瓶和测耗氧装置。 1.4 方法
1.4.1 中枢神经系统功能抑制和低温对缺氧的影响
取2只性别相同体重相近的小鼠,准确称取体重,并随机分为生理盐水组和氯丙嗪组。氯丙嗪组按0.1ml/10g体重腹腔注射0.25%氯丙嗪,随即安放在冰浴的纱布上
10~15min,使呼吸频率降至70~80次/min;生理盐水组按0.1ml/10g体重腹腔注射生理盐水,室温放置10-15min,作为对照。之后将2只小鼠分别放入100ml的广口瓶内,连接好测耗氧装置。如右图。
1.4.2 不同原因造成的缺氧
取2只性别相同体重相近的小鼠随机分为乏氧性缺氧组和一氧化碳中毒组。乏氧性缺氧组小鼠放入含有5g钠石灰的100ml密闭瓶中;一氧化碳中毒组小鼠放入500ml密闭瓶,注入10ml co气体。
另取2只性别相同体重相近的小鼠随机分为亚硝酸纳组和亚硝酸纳治疗组。亚硝酸纳组小鼠腹腔注射50g/l亚硝酸纳0.2ml,并随即腹腔注射生理盐水0.2ml;亚硝酸纳治疗组小鼠腹腔注射50g/l亚硝酸纳0.2ml后即刻腹腔注射10g/l亚甲基蓝0.2ml 。
2.观察项目
2.1 中枢神经系统功能抑制和低温对缺氧的影响
记录下小鼠的体重w(g)。从密闭测耗氧装置开始记时到小鼠死亡,分别观察氯丙嗪组和生理盐水组小鼠的存活时间t(min)、总耗氧量a(ml)。按以下公式计算出总耗氧率r[ml/(g·min)]:
r[ml/(g·min)]= a(ml)÷w(g)÷t(min)
2.2 不同原因造成的缺氧
乏氧性缺氧组和一氧化碳中毒组:处理前分别测出两鼠的正常呼吸频率(次/min)。待塞
紧瓶塞开始记时后,每隔5min测一次呼吸频率(次/min),并观察两鼠的行为以及耳、尾、
口唇等的颜色变化,直至小鼠死亡。记录死亡时间。
亚硝酸纳组和亚硝酸纳治疗组:处理前分别测出两鼠的正常呼吸频率(次/min)。待注射
药品后,每隔5min测一次呼吸频率(次/min),并观察两鼠的行为以及耳、尾、口唇等的颜
色变化,直至小鼠死亡。记录死亡时间。
将4只鼠分别解剖取出小块肝脏组织置于滤纸上观察颜色的不同。
3.实验结果
3.1中枢神经系统功能抑制和低温对缺氧的影响氯丙嗪组小鼠体重与生理盐水组小
鼠体重无显著性差异(p>0.05);氯丙嗪组小鼠的耗氧量为12.7±5.02 ml,生理盐水组
小鼠的耗氧量为16.0±3.01 ml,两者无明显差异(p>0.05);氯丙嗪组小鼠耐缺氧存活
时间为44.7±17.21 min,生理盐水组小鼠耐缺氧时间为21.0±3.61,两者相比有高度显著
性差异
(p<0.01);氯丙嗪组小鼠的耗氧率为0.013±0.005 (ml/g/min),生理盐水组小鼠
的耗氧率0.03±0.002 (ml/g/min),两者相比有高度显著性差异(p<0.01)。见表1。
表1. 氯丙嗪、冰浴对小鼠缺氧耐受性的影响实验结果统计表
小鼠体重(g)
样本 1 2 3 4 5 6 7 8 9
对照 23 19
实验 22 25 22 25 24 22 23 22 22 23.0±1.32&
总耗氧量(ml)对照 19.5 14.0 16.0 14.0 17.4 17.0 11.5 21.0 13.5 16.0± 3.01
实验
存活时间(min)总耗氧率((ml/g/min) 对照
实验 47
52 35 23 24 59 31 60 71 44.7±17.21*
对照 0.034 0.035
0.033 0.035 0.033 0.034 0.031 0.037 0.029 0.03± 0.002
实验 0.01 0.011 0.013 0.014 0.016 0.015 0.024 0.005 0.012 0.013±0.005# 10.5 25 14.3 21 10.0 8.0 9.5 19.9 17.0 6.0 19.0 12.7±5.02$ 22 16 21 22 15 26 21 21.0± 3.61 22 25 25 23 25 22 22 22.9±
x?s
1.96
注:*p<0.01 vs对照组;p<0.01 vs对照组;&p>0.05 vs对照
组,$p>0.05 vs 对照组 3.2不同原因造成的缺氧由表2可知,亚硝酸钠中毒小鼠的存
活时间最短,其次为co中毒组。存活时间最长的是亚硝酸钠+美兰组,可见美兰具有抗亚硝
酸钠中毒的作用。
表2. 乏氧、co中毒、亚硝酸钠中毒小鼠的呼吸频率(次/10秒)
缺氧类型乏氧 co中毒亚硝酸钠亚硝酸钠+
美兰
0min 29.7±4.90 29.7±5.90 29.7±3.54 29.7± 5.68 5min 31.2±6.96 24.7±8.72 26.1±7.13 25.9± 4.99 10min 30.4±7.52 26.8±9.31 28.7± 8.38 15min 25.0±8.97