土壤微生物综合实验报告
案例分析实验报告
实验名称：土壤微生物群落结构分析实验日期：2023年3月15日实验地点：XX大学环境科学与工程学院实验室一、实验目的1. 了解土壤微生物群落结构的基本概念和分类方法。
2. 掌握土壤微生物群落结构分析的基本原理和实验操作。
3. 分析不同土壤类型中微生物群落结构的差异。
二、实验原理土壤微生物是土壤生态系统中的重要组成部分，其群落结构对土壤肥力、植物生长和环境质量具有重要影响。
本实验通过PCR-DGGE技术对土壤微生物群落结构进行分析，通过比较不同土壤类型中微生物群落结构差异，揭示土壤微生物群落结构的特征。
三、实验材料1. 样品：取自我国不同地区的土壤样品，包括农田土壤、林地土壤和草地土壤。
2. 主要试剂：PCR试剂盒、DNA提取试剂盒、琼脂糖、TAE缓冲液等。
3. 仪器：PCR仪、电泳仪、凝胶成像系统、紫外分光光度计等。
四、实验方法1. 土壤样品的采集：在采样点随机采集土壤样品，每个样品重复3次。
2. 土壤样品的处理：将土壤样品风干、研磨、过筛，以去除大颗粒物质。
3. DNA提取：采用DNA提取试剂盒提取土壤样品中的微生物DNA。
4. PCR扩增：根据土壤微生物16S rDNA基因保守区域设计引物，进行PCR扩增。
5. DGGE分析：将PCR扩增产物进行变性梯度凝胶电泳（DGGE）分析，根据DNA条带差异分析微生物群落结构。
五、实验结果与分析1. 不同土壤类型微生物群落结构差异分析通过对不同土壤类型进行DGGE分析，发现农田土壤、林地土壤和草地土壤的微生物群落结构存在显著差异。
农田土壤中，细菌类群相对丰富，尤其是与植物根系共生菌相关的细菌；林地土壤中，真菌类群相对丰富，与土壤腐殖质分解相关的真菌较多；草地土壤中，放线菌类群相对丰富，与土壤肥力相关的放线菌较多。
2. 不同土壤类型微生物群落结构相关性分析通过对不同土壤类型微生物群落结构进行相关性分析，发现土壤类型与微生物群落结构存在显著相关性。
农田土壤、林地土壤和草地土壤的微生物群落结构差异与土壤类型、土壤理化性质和植物种类等因素密切相关。
土壤微生物综合实验报告
广州大学综合设计性实验报告课程：微生物实验实验课题：土壤中产淀粉酶芽孢杆菌的筛选及淀粉酶活力的测定学院：生命科学学院姓名：徐嘉宽学号：1414300030班级：生技142小组成员：一实验摘要本次实验通过采用5点采样方法在校园中采取2处土壤样品，运用梯度稀释的方法分离培养出不同生长形态的细菌，镜检后挑选几个菌落进行纯培养，用淀粉培养基鉴定其是否产淀粉酶，通过单染色、芽孢染色、革兰氏染色确定菌株的形态及革兰氏阴阳性，再通过各株菌株其中一株为蜡状芽孢杆菌。
2种生化试验鉴定菌株的特性，确定了我们所分离的．二实验目的1.掌握从土壤等复杂的微生物环境中分离纯化技术2.掌握培养基的配置方法及常用的微生物培养方法3.掌握常用的微生物形态学鉴定方法、生理生化鉴定方法4.了解微生物的16SrRNA序列鉴定方法、免疫学鉴定方法5.掌握淀粉酶活力测定的原理及方法6.掌握菌种保藏技术7.培养数据统计、分析能力8.培养团队协作精神，增强沟通合作能力9.与其他小组交流合作、数据共享，进行更深入的探讨10.学会查找、收集、整理资料三实验原理芽孢杆菌(BaciUus)是一类好氧或兼性厌氧、产生抗逆性内生孢子的杆状细菌。
这类细菌多数为腐生菌,主要分布于土壤、植物体表面及水体中,由于它们能够产生对热、紫外线、电磁辖射和某些化学药品有很强抗性的芽孢,因此能忍受多种不良环境。
土壤中蕴含着丰富的微生物资源,芽孢杆菌是其中具有重要应用价值的微生物类群。
有些菌种可以分泌多种酶,可应用于工业生产;有些菌种能产生对昆虫毒性较强的蛋白,可生产微生物农药;有些菌种可作为多种分泌蛋白基因表达受体,在基因工程领域中有较高的应用价值。
土壤具有微生物进行生长繁殖和生命活动中所需的各种条件，是微生物生活最适宜的环境。
其中的微生物的数量因土壤类型、季节、土层深度与层次等不同而异。
一般地说，在土壤表面，由于日光照射及干燥等因素的影响，微生物不易生存，离地表10cm～30cm的土层中菌数最多，随土层加深，菌的数量减少。
出去实践的实验报告
实验名称：土壤微生物多样性调查一、实验目的1. 了解土壤微生物的基本概念和分类；2. 掌握土壤微生物多样性调查的方法；3. 分析土壤微生物多样性对土壤生态系统的影响；4. 培养实践操作能力和数据分析能力。
二、实验时间2023年3月15日三、实验地点某市郊农业实验基地四、实验材料1. 土壤样品采集工具：采样铲、采样袋、无菌手套、无菌瓶；2. 实验室仪器：显微镜、离心机、恒温培养箱、PCR仪等；3. 实验试剂：DNA提取试剂盒、PCR试剂盒、DNA序列分析软件等。
五、实验方法1. 土壤样品采集：在实验地点选取3个不同土壤类型（沙土、壤土、黏土）的地点，使用采样铲采集0-20cm深度的土壤样品，每个地点采集3个重复。
2. 土壤样品处理：将采集到的土壤样品放入无菌瓶中，加入适量的无菌生理盐水，充分振荡，使土壤样品均匀分散。
3. DNA提取：采用DNA提取试剂盒提取土壤样品中的微生物DNA。
4. PCR扩增：以提取的DNA为模板，进行PCR扩增，扩增目的基因片段。
5. DNA测序：将PCR扩增产物进行测序，获得微生物的基因序列。
6. 数据分析：将测序结果进行比对分析，统计不同土壤类型中微生物的多样性。
六、实验结果1. 土壤样品的微生物多样性分析：- 沙土：共检测到5个属，包括细菌属A、B、C、D、E；- 壤土：共检测到8个属，包括细菌属A、B、C、D、E、F、G、H；- 黏土：共检测到10个属，包括细菌属A、B、C、D、E、F、G、H、I、J。
2. 不同土壤类型微生物多样性比较：- 沙土与壤土：沙土中的微生物多样性低于壤土；- 壤土与黏土：壤土中的微生物多样性低于黏土。
3. 土壤微生物多样性对土壤生态系统的影响：- 微生物多样性高的土壤，其养分循环、植物生长等生态过程更为活跃；- 土壤微生物多样性高的土壤，其抗逆性更强，对环境变化的适应性更高。
七、实验讨论1. 本实验通过土壤微生物多样性调查，揭示了不同土壤类型中微生物的多样性差异，为土壤生态系统的保护与利用提供了科学依据。
土壤中微生物培养实验报告
微生物培养实验报告
微生物培养实验是利用微生物及其细胞生长、繁殖和生活规律的实验
方法，用于研究微生物的形态、结构和特性，以及评价微生物对环境
因子的适应性和变革性。
本实验通过对土壤中的微生物进行培养，目的是研究微生物在不同物
质及条件的作用，以及测定其细胞增殖率和形态特征。
本次实验的培
养基为细菌培养液，用于土壤中微生物的培养，细菌培养液添加一定
的氮、磷和其它元素，以及含有大量碳、水分的糖为源，微生物可以
从中摄取所需的营养物质，使微生物培养成功。
实验中，我们首先采集土壤样本，并用70%乙醇完成灭菌，把样品装
入细菌培养液中，将培养瓶置于培养箱中，进行恒温振荡摇床控温培养；每天对培养液中的细菌表型进行观察，以观察细胞形态、形状及
计算增殖率。
进行实验足够的时间之后，我们用光学显微镜对培养液
中的细菌表型进行观察，直观观察细菌的形态和结构变化。
经过本实验后，我们发现土壤中微生物的形态特征与正常的细菌株相似，且增殖率也在一定的区间内，通过本次实验我们对土壤中的微生
物种类有了更深入的了解。
总之，通过本次微生物培养实验，受到很大帮助，我们深刻地感觉到，研究微生物种类及其变化规律是非常重要和有益的，有助于我们理解
生态系统中各组分的作用以及变化。
土壤中微生物实验报告
一、实验目的1. 了解土壤中微生物的种类和数量；2. 掌握土壤微生物的分离和纯化方法；3. 熟悉微生物的形态和生理生化特性；4. 培养无菌操作和实验记录能力。
二、实验原理土壤是微生物生活的良好环境，其中含有大量微生物，包括细菌、放线菌、真菌、藻类、原生动物、噬菌体、病毒和线虫等。
微生物在土壤中发挥着重要作用，如土壤肥力的维持、植物生长的促进、有机物的分解等。
本实验通过分离和纯化土壤微生物，观察其形态和生理生化特性，进一步了解土壤微生物的种类和功能。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：土壤样品、牛肉膏蛋白胨培养基、葡萄糖、酵母提取物、琼脂、无菌水、无菌平板、无菌移液器、显微镜、培养箱等。
2. 实验仪器：天平、酒精灯、高压蒸汽灭菌器、恒温培养箱、无菌操作台等。
四、实验方法1. 土壤样品的采集：选取有代表性的土壤样品，注意样品的均匀性和代表性。
2. 土壤微生物的分离和纯化：a. 制备牛肉膏蛋白胨培养基，高压蒸汽灭菌后备用；b. 将土壤样品与无菌水按1:10的比例混合，充分搅拌；c. 将混合液进行系列稀释，取适量稀释液涂布于牛肉膏蛋白胨平板上；d. 将平板倒置放入恒温培养箱中培养，观察菌落生长情况；e. 挑取单个菌落进行纯化，重复以上步骤，直至获得纯菌株。
3. 微生物的形态观察：a. 将纯菌株接种于牛肉膏蛋白胨培养基，培养后进行显微镜观察；b. 观察菌体的形态、大小、排列方式等特征。
4. 微生物的生理生化特性测定：a. 对纯菌株进行革兰氏染色，观察菌体的染色特性；b. 进行糖发酵试验，观察菌株对葡萄糖、乳糖、麦芽糖等糖类的分解能力；c. 进行氧化酶试验，观察菌株的氧化酶活性。
五、实验结果与分析1. 土壤样品的微生物数量：通过平板计数法，估算土壤样品中的微生物数量。
2. 微生物的分离和纯化：成功分离和纯化出多种微生物，如细菌、放线菌、真菌等。
3. 微生物的形态观察：观察到的菌体形态、大小、排列方式等特征与文献报道相符。
土壤微生物生理实验报告
一、实验目的1. 了解土壤微生物生理特性的基本知识。
2. 掌握土壤微生物生理实验的基本操作技能。
3. 通过实验，观察土壤微生物在不同环境条件下的生理反应，分析土壤微生物生理特性与土壤环境的关系。
二、实验原理土壤微生物是土壤生态系统中的重要组成部分，其生理特性直接影响土壤肥力、土壤结构及土壤环境质量。
本实验旨在通过观察土壤微生物在不同环境条件下的生理反应，了解土壤微生物生理特性与土壤环境的关系。
三、实验材料与方法1. 实验材料：（1）土壤样品：采集不同类型的土壤样品，如农田土壤、林地土壤、草地土壤等。
（2）培养基：牛肉膏蛋白胨培养基、磷酸盐缓冲液、葡萄糖、硫酸铜、氯化钠等。
（3）实验仪器：恒温培养箱、显微镜、比色计、天平等。
2. 实验方法：（1）土壤微生物数量测定① 土壤样品的处理：将土壤样品过筛，去除植物残体等杂质。
② 微生物数量的测定：采用稀释平板法，分别测定土壤样品中的细菌、放线菌、真菌数量。
（2）土壤微生物生理特性观察① 耐盐性实验：将不同浓度的氯化钠溶液加入土壤样品，观察微生物生长情况。
② 耐酸碱实验：将不同pH值的磷酸盐缓冲液加入土壤样品，观察微生物生长情况。
③ 耐温实验：将土壤样品分别置于不同温度条件下培养，观察微生物生长情况。
④ 耐氧性实验：将土壤样品分别置于有氧和无氧条件下培养，观察微生物生长情况。
⑤ 营养特性实验：分别添加不同碳源、氮源、能源等，观察微生物生长情况。
四、实验结果与分析1. 土壤微生物数量测定实验结果显示，不同类型的土壤样品中，细菌数量最多，放线菌次之，真菌最少。
这可能与不同土壤类型中微生物的种类和数量有关。
2. 土壤微生物生理特性观察（1）耐盐性实验：随着氯化钠浓度的增加，土壤微生物生长受到抑制，说明土壤微生物具有一定的耐盐性。
（2）耐酸碱实验：在pH值适宜的条件下，土壤微生物生长较好；pH值过高或过低时，微生物生长受到抑制。
（3）耐温实验：土壤微生物在不同温度下生长情况不同，说明土壤微生物具有一定的耐温性。
土壤培养实验报告
一、实验目的1. 掌握土壤培养的基本原理和方法；2. 了解土壤微生物的种类、数量和分布情况；3. 探讨土壤微生物对土壤肥力的影响；4. 评估土壤改良剂对土壤微生物群落的影响。
二、实验材料与仪器1. 实验材料：土壤样品、植物种子、土壤改良剂、水、培养皿、无菌移液器、无菌手套、显微镜等；2. 实验仪器：恒温培养箱、电子天平、pH计、电导率仪、土壤养分分析仪等。
三、实验方法1. 土壤样品采集与处理：采集不同类型的土壤样品，如耕层土壤、底层土壤等，并按照无菌操作规程进行处理，防止土壤污染。
2. 土壤微生物分离与纯化：采用平板划线法或稀释涂布平板法，对土壤样品进行微生物分离与纯化，得到不同类型的微生物纯菌株。
3. 土壤培养实验：将分离得到的微生物纯菌株接种到含有土壤样品的培养皿中，分别添加不同浓度的土壤改良剂，设置对照组。
在恒温培养箱中培养一段时间，观察微生物的生长情况。
4. 土壤微生物数量测定：采用显微镜计数法，统计土壤培养皿中微生物的数量。
5. 土壤养分分析：使用土壤养分分析仪，测定土壤样品中的有机质、全氮、速效磷、速效钾等养分含量。
6. 数据处理与分析：对实验数据进行统计分析，探讨土壤微生物与土壤肥力之间的关系，以及土壤改良剂对土壤微生物群落的影响。
四、实验结果与分析1. 土壤微生物数量测定结果：不同土壤样品中微生物数量存在差异，耕层土壤中微生物数量普遍高于底层土壤。
在添加土壤改良剂后，土壤微生物数量有所增加，表明土壤改良剂对土壤微生物的生长具有促进作用。
2. 土壤养分分析结果：土壤样品中的有机质、全氮、速效磷、速效钾等养分含量在不同土壤类型之间存在差异。
添加土壤改良剂后，土壤养分含量普遍提高，说明土壤改良剂有助于提高土壤肥力。
3. 土壤微生物与土壤肥力关系：土壤微生物在土壤肥力形成和维持过程中发挥着重要作用。
实验结果表明，土壤微生物数量与土壤养分含量呈正相关，说明土壤微生物对土壤肥力具有显著影响。
土壤微生物检测实验报告
土壤微生物检测实验报告实验目的：1.了解土壤微生物检测的原理和方法。
2.掌握土壤微生物检测的实验操作步骤。
3.探究不同土壤样品中微生物数量的差异。
实验原理：土壤微生物检测主要是通过分离、培养和计数来估计土壤微生物的数量。
主要方法包括稀释平板法、滴定法、过滤膜法等。
其中，稀释平板法是应用最广泛的方法之一，它是将土壤样品稀释后，在琼脂胶平板上培养并计数微生物菌落形成的数量来得到微生物数量。
实验材料和仪器：1.土壤样品；2.琼脂胶平板；3.微量移液器；4.灭菌的乙醇；5.灭菌的酒精灯；6.培养箱；7.可移动反应仪；8.移液管；实验步骤：1.准备土壤样品，从不同的地点取样，混合均匀后，取一定量的土壤样品（如10g）。
2.加入一定量的蒸馏水（如90ml），混合均匀。
3.取1ml土壤液体，加入到10ml的蒸馏水中稀释，得到1:10的稀释液。
4.取1ml稀释液，加入到9ml的蒸馏水中稀释，得到1:100的稀释液。
5.重复第4步，得到1:1000的稀释液。
6.从1:10、1:100和1:1000的稀释液中，每个稀释液中各取1ml，分别塗于琼脂胶平板上。
7.将琼脂胶平板在培养箱内培养24-48小时。
8.取出琼脂胶平板，观察并计数每个平板上的微生物菌落。
由于每个样品含有不同数量的微生物，可能需要在某些平板上进行稀释，以避免过于密集菌落的计数误差。
9.计算样品中的微生物数量。
实验结果：通过实验，我们发现来自不同土壤样品的微生物数量是有明显差异的。
同一种土壤类型，在不同的采样地点也会有不同的微生物数量。
例如，采自沿海地区和山区的土壤样品，发现前者的微生物数量要高于后者。
这可能与气候、植被和土壤性质等因素有关。
实验结论：通过本次实验，我们进一步了解了土壤微生物检测的原理和方法，掌握了土壤微生物检测的实验操作步骤，并且发现了不同土壤样品中微生物数量的差异。
本实验提醒我们要在保护环境的前提下，科学利用土地资源，研究土壤微生物的分布、多样性和生态功能，推动生态环境的改善和可持续土地利用。
从土壤中分离纯化微生物实验报告
从土壤中分离纯化微生物实验报告
实验名称：从土壤中分离纯化微生物
实验目的：从土壤中分离纯化微生物，了解微生物的生长与繁殖规律，提高分离技术的实践能力。
实验步骤：
1. 采集土壤样品，从不同深度、不同地点取样，放入消毒过的容器中，避免污染。
2. 准备好细菌培养基，如Luria-Bertani（LB）培养基、营养琼脂培养基等。
3. 取少量土样，加入LB培养基中，振荡混合，放入42℃的恒温培养箱中培养。
4. 24小时后，观察培养基上是否有生长菌落，若有，则取一部分菌落接种到新的LB培养基上再次培养。
5. 重复以上步骤，直至获得单个菌种菌落。
用无菌线圈挑取单一菌落，接种到新的培养基上，进行进一步鉴定。
实验结果：从土壤样品中获得多种不同形态和颜色的微生物。
通过分离和纯化，最终得到单一微生物菌落。
实验结论：从土壤样品中分离纯化微生物能够获得纯净的菌落，为进一步鉴定和研究微生物提供了基础。
同时，这也证明了分离技术在微生物研究中的重要性和必要性。
土壤中微生物的分离
微生物学实验报告土壤微生物的分离、培养及鉴定学生学号：学生姓名：专业班级：指导教师：土壤微生物的分离、培养及鉴定摘要：本实验是微生物学综合性实验项目包含了微生物学实验使用的微生物分离和纯化、微生物的选择培养基、培养基的制备、高压蒸汽灭菌、微生物类群的主要培养特征和形态特征、制片染色技术等。
[1]土壤是微生物的良好生境，土壤中有多种类群的微生物，它们对自然界物质的转化和循环起着极为重要的作用，对农业生产和环境保护有着不可忽视的影响。
根际微生物与植物的关系特别密切，不同的土壤和植物对根际微生物产生显著影响，而不同的根际微生物由于其生理活性和代谢产物的不同，也将对土壤肥力和植物营养产生积极或消极的作用。
土壤微生物不仅对土壤的肥力和土壤营养元素的转化起着重要作用，而且对于进入土壤中的农药及其他有机污染物的自净、有毒金属及其化合物在土壤环境中的迁移转化等都起着极为重要的作用。
关键词：土壤微生物，分离鉴定，生理生化，1前言土壤中微生物的数量因土壤类型、季节、土层深度与层次等不同而异。
一般地说，在土壤表面，由于日光照射及干燥等因素的影响，微生物不易生存，离地表10 cm～30 cm 的土层中菌数最多，随土层加深，菌数减少。
土壤是微生物生活的大本营，是寻找和发现有重要应用潜力的微生物的主要菌源。
不同土样中各类微生物数量不同，一般土壤中细菌数量最多，其次为放线菌和霉菌。
一般在较干燥、偏碱性、有机质丰富的土壤中放线菌数量较多。
本实验从土壤中分离细菌、放线菌和霉菌。
为了分离和确保获得某种微生物的单菌落，首先要考虑制备不同稀释度的菌悬液。
各类菌的稀释度因菌源、采集样品的季节、气温条件而异。
其次，应考虑各类微生物的不同特性，避免样品种各类微生物相互干扰。
细菌或放线菌在中性或微碱性环境较多，但细菌比放线菌生长快，分离放线菌时，一般在制备土壤稀释液时添加10％酚或在分离培养基中加相应的抗生素以抑制细菌和霉菌。
培养基是指利用人工方法将适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的各种营养物质混合配制而成的营养基质，主要用于微生物的分离、培养、鉴定、菌种保藏等方面。
微生物实验报告(土壤)
吉林化工学院环境与生物工程学院微生物学实验报告土壤微生物的分离、培养及鉴定学生学号：10350106学生姓名：王慧专业班级：生技1001指导教师：谢莹吉林化工学院Jilin Institute of Chemical Technology土壤微生物的分离、培养及鉴定王慧、王宇、邓赛、丛学琦（环境与生物工程学院，生物技术1001）摘要：利用分离纯化微生物的基本操作技术对土壤中的微生物进行分离与纯化，根据菌落形态观察及一系列生理生化试验的结果，对照种属特征初步鉴定分离纯化的微生物所属类群。
关键词：细菌、放线菌、霉菌、培养基的配制、高压灭菌。
1前言培养基是指利用人工方法将适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的各种营养物质混合配制而成的营养基质，主要用于微生物的分离、培养、鉴定、菌种保藏等方面。
自然界中微生物种类繁多，营养类型多样，加之实验和研究的目的不同，所以培养基种类很多。
不同培养基一般都应含有微生物生长繁殖所需的碳源、氮源、能源、无机盐、生长因子和水等营养成分。
此外，为了满足微生物生长繁殖的要求，还必须控制培养基的pH值。
牛肉膏蛋白胨培养基是一种用于培养细菌的培养基，属于半合成培养基。
高氏一号培养基是一种用于培养放线菌的合成培养基。
马丁氏培养基用于霉菌的分离培养。
2材料与药品2.1材料土壤（选定采土地点后，铲去表涂层2～3cm，取3～10cm深层土壤10g。
）、天平、高压蒸汽灭菌锅、移液管、试管、烧杯、量筒、锥形瓶、培养皿、pH试纸、棉花、纱布、牛皮纸、线绳、报纸、无菌培养皿、无菌移液管、玻璃涂棒等。
2.2药品牛肉膏、蛋白胨、葡萄糖、可溶性淀粉、琼脂、黄豆芽、NaCl、KNO3、K2HPO4、MgSO4、FeSO4、KH2PO4、MgSO4•7H2O、NaOH溶液（1mol/L）、无菌水、1％重铬酸钾。
3 实验方法3.1 培养基的配制3.1.1肉膏蛋白胨培养基的配制1．培养基成分牛肉膏0. 3g蛋白胨1gNaCl 0.5g琼脂 1.5g水100mLpH 7.2~7.42．配制方法（1）称量及溶化：分别称取蛋白胨和NaCl的所需量，置于烧杯中，加入所需水量的2／3左右的蒸馏水；用玻璃棒挑取牛肉膏置于另一小烧杯中，进行称量。
土壤细菌实验报告
一、实验目的1. 了解土壤细菌的种类和分布；2. 掌握土壤细菌分离和纯化的方法；3. 学习细菌的形态和培养特征观察；4. 探讨土壤细菌在生态系统中的作用。
二、实验原理土壤是微生物的天然栖息地，其中含有丰富的细菌资源。
细菌在土壤生态系统中扮演着重要的角色，如参与土壤肥力循环、生物降解、病原菌抑制等。
本实验通过分离和纯化土壤中的细菌，观察其形态和培养特征，了解其在生态系统中的作用。
三、实验材料与仪器1. 材料：新鲜土壤、牛肉膏蛋白胨培养基、生理盐水、无菌水、酒精、火焰等；2. 仪器：显微镜、恒温培养箱、无菌操作台、接种环、培养皿、吸管等。
四、实验步骤1. 土壤样品采集：取适量新鲜土壤，用无菌操作台上的无菌容器盛装，并迅速密封，防止样品污染；2. 土壤样品处理：将土壤样品与生理盐水按1:10的比例混合，充分振荡后，用无菌吸管吸取上清液；3. 稀释涂布：将上清液依次稀释10倍、100倍、1000倍，取适量稀释液涂布于牛肉膏蛋白胨培养基上；4. 培养与观察：将涂布好的培养基放入恒温培养箱中，培养24-48小时，观察菌落生长情况；5. 分离纯化：挑选单菌落，用接种环挑取菌落，接种于新的牛肉膏蛋白胨培养基上，重复培养和观察，直至获得纯培养；6. 形态观察：将纯培养的细菌制片，用显微镜观察其形态；7. 培养特征观察：将纯培养的细菌接种于不同类型的培养基上，观察其在液体、半固体、固体培养基上的生长情况。
五、实验结果与分析1. 土壤样品中分离出的细菌种类丰富，包括杆菌、球菌、螺旋菌等；2. 分离纯化得到的细菌在牛肉膏蛋白胨培养基上生长良好，形成典型的菌落；3. 通过显微镜观察，细菌的形态各异，如杆状、球状、螺旋状等；4. 细菌在不同类型的培养基上表现出不同的生长特征，如液体培养基中呈均匀浑浊，固体培养基上形成菌落。
六、结论1. 土壤是微生物的天然栖息地，其中含有丰富的细菌资源；2. 通过分离和纯化土壤中的细菌，可以了解其种类和分布；3. 细菌在土壤生态系统中扮演着重要的角色，如参与土壤肥力循环、生物降解、病原菌抑制等；4. 本实验通过观察细菌的形态和培养特征，为进一步研究细菌在生态系统中的作用奠定了基础。
土壤中微生物的分离与鉴定实验报告
Sdu微生物大实验土壤微生物的分离纯化与鉴定【实验目的】1、从各地区土壤中筛选含几丁质酶的真菌及含果胶酶的菌株；2、通过从土壤中分离纯化菌株，掌握培养基的制备与灭菌技术、微生物的筛选、分离纯化方法和无菌操作技术。
3、复习以前学过的各种染色方法，掌握生理生化试验的原理与方法。
4、掌握微生物的鉴定技术、菌种保藏技术。
【实验原理】1、微生物的分离与纯化：从混杂的微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物的分离与纯化。
此次实验采取平板分离法，该方法操作简便，普遍用于微生物的分离与纯化，其基本原理主要包括两个方面：a.选择适合于待分离微生物的生长条件或加入某种抑制剂造成只利于待分离微生物生长，而抑制其它微生物生长的环境，从而淘汰大部分不需要的微生物。
b.微生物在固体培养基上生长形成的单个菌落可以是由一个细胞繁殖而成的集合体，因此可通过挑取单菌落而获得一种纯培养。
获得单菌落的方法可通过稀释涂布平板法或平板划线法等技术来完成。
微生物的观察可以用显微镜观察其细胞形态，也可以用肉眼观察其菌落形态。
前者是微生物的显微镜观察技术，后者是微生物的肉眼观察技术。
2、霉菌：霉菌可产生复什分枝的菌丝体，分基内菌丝和气生菌丝，气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。
霉菌菌丝体（尤其是繁殖菌丝）及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。
霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗得多（约 3-10μm ），常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍，因此，用低倍显微镜即可观察。
观察霉菌的形态有多种方法，常用的有直接制片观察法、载玻片培养观察法和玻璃培养观察法三种方法，本实验采用载玻片培养观察法。
3、果胶酶筛选培养基：配制以果胶为唯一碳源的筛选培养基，在该培养基上，只有能分解利用果胶的菌株才能够生长，依此来从土壤中筛选出能够产果胶酶的菌株。
刚果红（Congo Red,简称CR）是一种染料，它可与果胶形成红色复合物，但并不和果胶水解后的产物发生这种显色反应，在含有果胶的培养基中加入刚果红时，刚果红能与培养基中的果胶形成红色复合物。
土壤微生物实验报告
土壤微生物实验报告尊敬的实验室主任：根据您的要求，我为您撰写了一份《土壤微生物实验报告》。
请您查阅。
实验目的：本实验旨在探究土壤微生物对植物生长和土壤质量的影响。
通过分析土壤微生物群落的特点和数量，进一步了解其与植物健康生长之间的关系。
实验方法：1. 选取不同类型的土壤样品，包括肥沃土壤、沙质土壤和酸性土壤。
2. 采用平板计数法，将土壤样品分别以不同稀释倍数接种在琼脂平板上。
3. 分别培养在适宜温度下，待菌落生长后，使用显微镜观察和计数。
4. 利用分子生物学技术，提取土壤DNA样品，采用PCR扩增16S rDNA基因，并通过测序得到土壤微生物群落的DNA序列。
实验结果：通过实验，我们获得了以下结果：1. 不同类型土壤的微生物数量差异明显。
肥沃土壤中微生物数量最多，其次是沙质土壤，酸性土壤中微生物数量最少。
2. 肥沃土壤中的微生物多样性较高，具有丰富的菌群组成，包括厌氧菌、好氧菌等。
而酸性土壤中微生物种类单一，以酸耐受菌为主。
3. 对于植物生长的促进作用，肥沃土壤中的微生物扮演着重要角色。
肥沃土壤中丰富的微生物群落可分解有机物质，释放养分供植物吸收。
4. 酸性土壤中的微生物对植物生长产生了限制作用。
酸性土壤中的微生物代谢产生的酸性物质，抑制了植物的生长和养分吸收。
实验结论：通过本实验的研究，可以得出以下结论：1. 土壤微生物群落在土壤肥力和植物生长中起着重要作用。
2. 肥沃土壤中的微生物种类多样性和数量多于酸性土壤，对植物生长更为有利。
3. 土壤酸碱度对土壤微生物种类和数量产生一定影响，需要合理调节土壤pH值以促进植物健康生长。
4. 进一步研究土壤微生物的群落结构和功能，对于指导农业生产和土壤生态修复具有重要意义。
建议和展望：鉴于本实验的结果，建议在实际农业生产中注重土壤微生物的保护和增殖，以提高土壤肥力和植物产量。
同时，通过调节土壤pH值，合理利用微生物降解有机肥料，减少化肥的使用，以实现可持续农业发展的目标。
土壤分离微生物实验报告
土壤分离微生物实验报告土壤分离微生物实验报告一、引言土壤是地球上最为丰富的自然资源之一，其中存在着丰富的微生物群落。
这些微生物在土壤生态系统中发挥着重要的作用，包括有机质分解、养分循环、植物生长促进等。
本实验旨在通过分离土壤中的微生物，了解土壤微生物的多样性和功能。
二、实验方法1. 样品采集在实验开始前，我们选择了三个不同的土壤样品，分别来自农田、森林和草地。
使用无菌勺子将土壤样品采集到无菌离心管中，并尽量避免与外界环境接触。
2. 稀释与涂布将采集到的土壤样品分别加入无菌的盐水中进行稀释，制备出一系列不同浓度的土壤悬浮液。
然后，将这些悬浮液均匀涂布在含有富营养培养基的琼脂平板上。
3. 培养与分离将涂布好的琼脂平板置于恒温培养箱中，在适宜的温度下培养一段时间。
待菌落形成后，使用无菌勺子将单个菌落分离到含有富营养培养基的琼脂管中，形成单菌株。
4. 鉴定与保存对于分离得到的单菌株，我们进行了形态学观察、生理生化特性测试以及16S rRNA基因测序等鉴定工作。
同时，我们将这些单菌株保存在低温条件下，以备后续的实验研究。
三、实验结果通过上述实验方法，我们成功分离出了大量的土壤微生物。
经过鉴定和分类，我们发现这些微生物主要包括细菌、放线菌和真菌等不同类群。
其中，细菌是数量最多的一类，占据了总菌落数的70%以上。
进一步的研究表明，这些细菌在形态、生理和生化特性上存在较大的差异。
有些细菌形成了光滑的菌落，而另一些则呈现出粗糙的表面。
此外，它们对不同的碳源和氮源的利用能力也有所差异，表明这些微生物在土壤中具有不同的功能和代谢特性。
四、讨论与分析土壤微生物的多样性和功能对土壤生态系统的稳定性和健康发展起着至关重要的作用。
通过本实验的分离与鉴定工作，我们初步了解了土壤微生物的多样性，并发现了它们的形态、生理和生化特性的差异。
这为进一步研究土壤微生物的生态功能提供了基础。
然而，本实验仅仅是初步的分离与鉴定工作，还需要进一步的研究来揭示土壤微生物的生态功能。
土壤微生物实验报告
一、实验目的1. 了解土壤微生物的基本组成和分布特点；2. 掌握土壤微生物分离纯化的方法；3. 学习观察和记录土壤微生物的菌落形态特征；4. 培养无菌操作和实验报告撰写能力。
二、实验原理土壤微生物是土壤生态系统的重要组成部分，它们在土壤肥力、物质循环、环境净化等方面发挥着重要作用。
本实验通过分离纯化土壤微生物，观察其菌落形态特征，了解土壤微生物的种类和数量。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：土壤样品、牛肉膏蛋白胨培养基、琼脂、无菌水、无菌器械等；2. 实验仪器：高压蒸汽灭菌器、恒温培养箱、显微镜、酒精灯、接种环等。
四、实验步骤1. 土壤样品采集：在校园内选取一块土壤，采集土壤样品约100g；2. 培养基制备：按照牛肉膏蛋白胨培养基的配方，称取相应量的牛肉膏、蛋白胨、琼脂等，加入适量蒸馏水，溶解后定容至1000ml，用高压蒸汽灭菌器灭菌；3. 分离纯化：将土壤样品加入无菌水中，充分搅拌后静置，取上层悬液作为实验材料；4. 接种：取适量悬液，分别用稀释平板法和划线分离法进行接种；5. 培养与观察：将接种后的平板放入恒温培养箱中，在适宜的温度下培养，观察菌落生长情况；6. 记录与绘图：记录菌落形态特征，如菌落大小、颜色、边缘、表面等，并绘制菌落图谱。
五、实验结果与分析1. 菌落形态特征：根据菌落的大小、颜色、边缘、表面等特征，将分离得到的菌落分为不同类型，如细菌、放线菌、真菌等；2. 菌落生长情况：在恒温培养箱中，观察菌落生长情况，记录生长速度、菌落形态等；3. 菌落图谱：绘制分离得到的菌落图谱，分析土壤微生物的种类和数量。
六、实验结论1. 土壤中存在丰富的微生物资源，包括细菌、放线菌、真菌等多种类型；2. 通过分离纯化方法，可以有效地从土壤中分离得到纯种微生物；3. 观察和记录土壤微生物的菌落形态特征，有助于了解土壤微生物的种类和数量。
七、实验心得与体会1. 通过本次实验，我了解了土壤微生物的基本组成和分布特点，掌握了土壤微生物分离纯化的方法；2. 在实验过程中，我学会了无菌操作技术，提高了实验技能；3. 通过观察和记录土壤微生物的菌落形态特征，我对微生物的分类和鉴定有了更深入的认识。
土壤真菌培养实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的本次实验旨在从土壤中分离和培养真菌，掌握真菌纯化、分离和培养的基本方法，了解真菌在土壤中的分布和生长特性。
二、实验原理土壤是微生物生活的大本营，真菌作为土壤微生物的重要组成部分，在土壤生态系统中扮演着重要角色。
通过分离和培养土壤中的真菌，可以了解其种类、数量和生长条件，为土壤微生物生态学研究和真菌资源的开发利用提供基础。
三、实验材料与仪器1. 材料：- 新鲜土壤- PDA培养基（含2ml链霉素）- 孟加拉红培养基- 无菌水- 无菌培养皿- 无菌吸管- 酒精灯- 培养箱2. 仪器：- 电子天平- 高压蒸汽灭菌器- 烧杯- 玻璃棒- 移液器四、实验方法1. 土壤稀释液的制备：- 称取10g新鲜土壤，加入90ml无菌水，充分混匀，制成土壤悬液。
- 将悬液进行10^-1至10^-5的系列稀释，分别加入无菌培养皿中。
2. 平板接种：- 将PDA培养基和孟加拉红培养基分别加热融化，待冷却至50℃左右，分别倒入无菌培养皿中，制成平板。
- 将稀释后的土壤悬液，用无菌移液器吸取适量，涂布于PDA平板和孟加拉红平板上。
- 将平板倒置，放入28℃培养箱中培养。
3. 挑菌纯化：- 在培养箱中培养3-5天后，观察平板上的菌落生长情况。
- 挑取单个菌落，分别接种于PDA平板上，重复培养，直至获得纯化后的真菌菌落。
4. 菌落计数：- 计算平板上每个菌落的数量，记录结果。
五、实验结果1. 菌落观察：- PDA平板上，菌落呈白色，表面光滑，边缘整齐。
- 孟加拉红平板上，菌落呈红色，表面光滑，边缘整齐。
2. 菌落计数：- PDA平板上，每个菌落平均数量为10^5个。
- 孟加拉红平板上，每个菌落平均数量为10^4个。
六、实验讨论1. 土壤中的真菌种类繁多，本实验中分离得到的真菌菌落，可能是土壤中真菌的代表。
2. PDA培养基和孟加拉红培养基均适合真菌的生长，但孟加拉红培养基对真菌的抑制效果较好，可用于分离纯化真菌。
土壤微生物的分离和纯化实验报告
土壤微生物的分离和纯化实验报告
土壤微生物是土壤中最为丰富的生物群体之一，它们在土壤中扮演着重要的角色，如分解有机物质、固氮、矿物质转化等。
因此，对土壤微生物的研究具有重要的意义。
本文将介绍土壤微生物的分离和纯化实验。
一、实验目的
1.了解土壤微生物的分离和纯化方法；
2.掌握土壤微生物的培养技术；
3.观察土壤微生物的形态特征。
二、实验步骤
1.取一定量的土壤样品，加入适量的生理盐水中，摇匀后过滤；
2.将过滤液分别接种在不同的培养基上，如营养琼脂、马铃薯葡萄糖琼脂等；
3.将培养皿放置在恒温培养箱中，控制温度、湿度等条件；
4.观察培养皿中的微生物生长情况，挑选单一菌落进行分离和纯化；
5.将单一菌落接种在新的培养基上，重复以上步骤，直至获得纯种菌株。
三、实验结果
经过培养和观察，我们成功地分离出了多种土壤微生物，如放线菌、链霉菌、芽孢杆菌等。
其中，放线菌的形态特征为菌落呈灰白色，表面有细小的颗粒状物质，形似细长的线条；链霉菌的形态特征为菌落呈灰白色，表面有细小的颗粒状物质，形似细长的链条；芽孢杆菌的形态特征为菌落呈白色，表面有光滑的质地，形似细长的杆状物质。
四、实验结论
通过本次实验，我们了解了土壤微生物的分离和纯化方法，掌握了土壤微生物的培养技术，观察了土壤微生物的形态特征。
这些都为我们深入研究土壤微生物的生态学、生理学、遗传学等方面提供了基础。
同时，我们也认识到了土壤微生物在土壤生态系统中的重要作用，应该加强对其研究和保护。
土壤微生物实验报告
土壤微生物实验报告一、实验背景土壤是地球上生命存在的重要基础之一，其中栖息着丰富多样的微生物群落。
这些微生物在土壤的生态系统中发挥着至关重要的作用，如养分循环、有机物分解、土壤结构形成等。
了解土壤微生物的种类、数量和活性对于评估土壤质量、生态平衡以及农业可持续发展具有重要意义。
二、实验目的本实验旨在探究不同土壤类型中微生物的数量和种类差异，以及环境因素对土壤微生物群落的影响。
三、实验材料与方法（一）实验材料1、采集自不同地点的土壤样本，包括农田、森林、草地等。
2、培养基：牛肉膏蛋白胨培养基（用于细菌培养）、马丁氏培养基（用于真菌培养）、高氏一号培养基（用于放线菌培养）。
3、实验仪器：无菌操作台、恒温培养箱、显微镜、移液器、灭菌锅等。
（二）实验方法1、土壤样本采集选择具有代表性的采样地点，使用无菌采样工具采集表层（0 20 厘米）土壤，每个地点采集多个重复样本。
将采集的土壤样本放入无菌袋中，标记好采样地点和时间，迅速带回实验室进行处理。
2、微生物的分离与培养称取一定量的土壤样本，加入无菌水制成土壤悬液。
通过系列稀释法将土壤悬液稀释至合适的浓度。
分别取不同稀释度的悬液涂布于相应的培养基上，每个稀释度设置多个重复。
将涂布好的培养基倒置放入恒温培养箱中培养，细菌培养温度为 37℃，培养时间为 1 2 天；真菌培养温度为 28℃，培养时间为 3 5 天；放线菌培养温度为 28℃，培养时间为 5 7 天。
3、微生物的计数与鉴定培养结束后，对培养基上的菌落进行计数，并根据菌落的形态、颜色、大小等特征初步判断微生物的种类。
选取典型的菌落进行进一步的显微镜观察和生理生化实验，以确定微生物的种类。
四、实验结果（一）不同土壤类型中微生物的数量在农田土壤中，细菌数量最多，其次是放线菌，真菌数量相对较少。
在森林土壤中，真菌的数量相对较多，细菌和放线菌的数量相对较少。
草地土壤中的微生物数量介于农田和森林土壤之间。
（二）微生物的种类通过显微镜观察和生理生化实验，鉴定出了多种细菌、真菌和放线菌。
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广州大学综合设计性实验报告课程：微生物实验实验课题：土壤中产淀粉酶芽孢杆菌的筛选及淀粉酶活力的测定学院：生命科学学院姓名：徐嘉宽学号：1414300030班级：生技142小组成员：一实验摘要本次实验通过采用5点采样方法在校园中采取2处土壤样品，运用梯度稀释的方法分离培养出不同生长形态的细菌，镜检后挑选几个菌落进行纯培养，用淀粉培养基鉴定其是否产淀粉酶，通过单染色、芽孢染色、革兰氏染色确定菌株的形态及革兰氏阴阳性，再通过各株菌株其中一株为蜡状芽孢杆菌。
2种生化试验鉴定菌株的特性，确定了我们所分离的．二实验目的1.掌握从土壤等复杂的微生物环境中分离纯化技术2.掌握培养基的配置方法及常用的微生物培养方法3.掌握常用的微生物形态学鉴定方法、生理生化鉴定方法4.了解微生物的16SrRNA序列鉴定方法、免疫学鉴定方法5.掌握淀粉酶活力测定的原理及方法6.掌握菌种保藏技术7.培养数据统计、分析能力8.培养团队协作精神，增强沟通合作能力9.与其他小组交流合作、数据共享，进行更深入的探讨10.学会查找、收集、整理资料三实验原理芽孢杆菌(BaciUus)是一类好氧或兼性厌氧、产生抗逆性内生孢子的杆状细菌。
这类细菌多数为腐生菌,主要分布于土壤、植物体表面及水体中,由于它们能够产生对热、紫外线、电磁辖射和某些化学药品有很强抗性的芽孢,因此能忍受多种不良环境。
土壤中蕴含着丰富的微生物资源,芽孢杆菌是其中具有重要应用价值的微生物类群。
有些菌种可以分泌多种酶,可应用于工业生产;有些菌种能产生对昆虫毒性较强的蛋白,可生产微生物农药;有些菌种可作为多种分泌蛋白基因表达受体,在基因工程领域中有较高的应用价值。
土壤具有微生物进行生长繁殖和生命活动中所需的各种条件，是微生物生活最适宜的环境。
其中的微生物的数量因土壤类型、季节、土层深度与层次等不同而异。
一般地说，在土壤表面，由于日光照射及干燥等因素的影响，微生物不易生存，离地表10cm～30cm的土层中菌数最多，随土层加深，菌的数量减少。
淀粉酶是水解淀粉和糖原酶类的总称,是用于酿酒、食品、医药、纺织、饲料等具有商业价值的重要酶类。
广州大学城四面环江，地处南亚热带,其气候属南亚热带典型的季风海洋气候。
芽孢杆菌资源非常丰富。
本方案在广州大学城预定区域釆集土壤样品,采用纯培养的方法,分离获得芽孢杆菌。
对菌株进行形态学观察及生理生化分析,以挑选出可产淀粉酶的菌株。
．四实验材料1.试剂与配方试剂：牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂、马铃薯、葡萄糖；可溶性淀粉、K2HPO4、KNO3、MgSO4?7H2O、FeSO4?7H2O、95%乙醇、0.5%番红色液、蒸馏水等工具:取样：铁锹、尺子、塑料袋等培养：接种环（针）、培养皿、试管、试管架、锥形瓶、塞子、标签纸、打火机、酒精灯、报纸、橡皮筋、无菌棉签、载玻片、香柏油、二甲苯、擦镜纸、精密pH试纸、吸水纸、培养基平板，无菌水，试管架，酒精灯，酒精瓶，记号笔，废物缸，牙签等；其他工具：无菌操作台、恒温振荡培养箱、恒温培养箱配方：1)牛肉膏蛋白胨培养基：营养琼脂3.3%、蒸馏水100mL、pH7.2-7.4。
2)营养肉汤:牛肉膏0.3%、蛋白胨 1.0%、NaCl0.5%、蒸馏水100ml、pH（5.7、7.2→对照）。
3)半固体培养基(运动性试验）:琼脂0.5%、牛肉膏0.3%、蛋白胨 1.0%、NaCl0.5%、蒸馏水100ml、pH7.2-7.4。
4)酪素水解培养基（酪素水解试验):取5g脱脂奶粉与一号三角瓶中，加入50ml蒸馏水，110℃灭菌。
另称 1.5g 琼脂置于含50mL蒸馏水的二号三角瓶中,120℃灭菌,待冷至45-50°C时,将两液混匀倒成平板,即为牛奶平板。
将平板倒置过夜,使表面水分干燥。
5)淀粉水解培养基:营养琼脂3.3%、可溶性淀粉2%、蒸馏水100ml、PH7.2-7.46)卵黄反应培养基：无菌条件下去卵黄加等量的生理盐水，摇匀后，取5ml加入到融化的约50-55℃的100ml的营养琼脂中（内含1g葡萄糖)，混匀后倒入培养皿内。
制成的卵黄平板过夜后即可使用。
7)硝酸盐还原实验培养基:胰蛋白胨1.0%,酵母浸粉0.5%,NaCl1.0%,KN030.1%,蒸馏水1OOmL,调节pH7.0。
8)发酵培养基:玉米粉2%、黄豆饼粉 1.5%、CaCl20.02%、MgSO40.02%、NaCl0.25%、K2HPO40.2%、柠檬酸钠0.2%、硫酸氨0.075%(溶解后加)、Na2HPO40.2%,pH值7.0。
9)明胶培养基：NaCl0.5%、蛋白胨 1.0%、牛肉膏0.3%、明胶12%、蒸馏100mL，调pH。
7.2-7.4．10)西蒙斯氏柠檬酸钠盐培养液：柠檬酸钠0.2%、NaCl0.5%、MgSO40.02%、磷酸二氢钾0.1%、磷酸氢氨0.1%、溴麝香草酚蓝水溶液1ml、琼脂2%、蒸馏水100ml、PH7.2-7.4。
11)耐盐试验培养基（2%、5%、7%、10%）：营养琼脂3.3%、NaCl（0.2%、0.5%、0.7%、1.0%）、蒸馏水100ml、PH7.2-7.4。
12)糖发酵培养基（110℃灭菌）12-1葡萄糖发酵培养基：葡萄糖1.0%、蛋白胨0.2%、NaCl0.5%、磷酸氢二钾0.02%、溴钾分子0.2%（最后加入）、PH7.2-7.4。
12-2乳糖发酵培养基：乳糖1.5%、蛋白胨0.2%、NaCl0.5%、磷酸氢二钾0.02%、溴钾分子0.2%（最后加入）、PH7.2-7.4。
12-3木糖发酵培养基：木糖1.0%、蛋白胨0.2%、NaCl0.5%、磷酸氢二钾0.02%、溴钾分子0.2%（最后加入）、PH7.2-7.4。
12-4阿拉伯糖培养基：阿拉伯糖1.0%、蛋白胨0.2%、NaCl0.5%、磷酸氢二钾0.02%、溴钾分子0.2%（最后加入）、PH7.2-7.4。
12-5甘露醇发酵培养基：甘露醇1.0%、蛋白胨0.2%、NaCl0.5%、磷酸氢二钾0.02%、溴钾分子0.2%（最后加入）、PH7.2-7.4。
13)葡萄糖蛋白胨培养基(VP、MR试验）（110℃灭菌）：葡萄糖0.5%、蛋白胨0.5%、NaCl0.5%、PH7.2-7.4。
14)蛋白胨水培养基（吲哚试验）：蛋白胨1.0%、NaCl0.5%、PH7.2-7.4。
15)酪氨酸培养基（酪氨酸水解试验）：L-酪氨酸0.5g悬浮于10ml蒸馏水中，20min110℃灭菌，与100ml无菌营养琼脂混合，即成酪氨酸水解平板。
16)1%麦芽糖溶液取0.1g麦芽糖,加入蒸馏水定容至100ml。
17)0.85%无菌生理盐水称取0.85g NaCl于100ml蒸馏水中，摇匀，120℃灭菌。
18)1%3,5-二硝基水杨酸试剂称取1g3,5-二硝基水杨酸,溶于20ml浓度2mol/L氢氧化钠溶液中,加入50ml蒸馏水,再加入30g四水酒石酸钾钠(C4H4KNaO6·4H2O),待溶解后用蒸馏水定容至100ml,盖紧瓶塞,勿使CO2进入。
19)2%淀粉溶液:称取2g可溶性淀粉溶于100ml浓度0.1mol/ml pH值 5.6柠檬酸缓冲液中。
20)生化鉴定：草酸铵结晶紫染色液、路哥氏碘液、95%乙醇、0.5%番红染液、香柏油、萘酚溶液、甲基红试剂等-5%α、40%KOH二甲苯、乙醚、碘液、吲哚试剂、．五实验步骤1.土壤取样分别在网球场旁的草地和体育馆后面的草地采集5-20㎝深度的土壤，五点采样，依次编号“1、2、3…”样品装在无菌纸袋中。
分别标记为样品一和样品二。
记录采样时间、地点、环境、土壤类型、pH等。
样品4℃保存备用。
2.分离纯化称取5g土样加入45mL无菌生理盐水中,混勻，80°C水浴30min,以杀死无芽孢细菌。
10倍梯度稀释10-2-10-5倍。
用一支新的无菌枪头从各浓度土壤稀释液中分别吸取0.2mL涂布于已标记好稀释度的牛肉膏蛋白胨培养基上,每个浓度梯梯度取两个重复,标记日期、时间、组别，置于37℃培养箱中培养24h。
观察已培养的细菌，将形态不同的菌落在皿底用记号笔编号“A01、A02、A03…”后，进行划线纯化。
先在已经平板培养基的一边作第1次平行划线3~4条，再转动培养皿约60°角，并将接种环上剩余物烧掉，待冷却后通过第1次划线部分作第2次平行划线，再用同法通过第2平行划线部分作第3次平行划线和通过第3次平行划线部分作第4次平行划线。
划线完毕，在培养皿底部和顶部写上菌落编号和对应的纯化次数“A01-1、A02-1、A03-1…”。
标记日期、时间、组别后，将培养皿倒置于28~29℃恒温培养箱中培养约20h。
再继续分区划线2次，以获得较纯的菌种。
每次划线完毕，在培养皿底部和顶部写上菌落编号和对应的划线次数，标记日期、时间、组别。
注意观察记录菌落形态、表面及边缘特征等，为“4.3、初步鉴定”提供基础。
纯化三、四次后镜检，挑取纯化的菌种进行单染色，观察细菌是否为杆状，以及细菌的大小、两端形态、粗细、着色深浅等是否一致。
若不全为杆状，则弃用，若个体形态不一致，且形态不一致的两种或多种细菌数量相当，则再次纯化，直至个体形态一致。
3.产淀粉酶芽孢杆菌的筛选用接种沾取纯化的菌落分别点种到含淀粉培养基的无菌平板上，并标记菌落编号、日期、时间、组别，放置在37℃恒温培养箱中培养48h。
取出平板滴加路哥氏碘液，缓慢摇晃至碘液将平板覆盖均匀，静置，产生透明圈的菌株初步定为淀粉酶产生菌株!同时，测定产生透明圈的宽度，选择比较大的且菌落形态不同的两株菌株进行芽孢染色和革兰氏染色。
从试管中沾取备份菌株接种于牛肉膏蛋白胨培养基，37℃培养12h进行革兰氏染色，培养24h进行芽孢染色。
若未观察到芽孢，挑取与之前挑取位置不同位置的菌落再次染色观察。
若仍未观察到芽孢，从试管中挑取形态与选取的．菌株不同的菌株进行活化、染色。
4.单染色方法：1、涂片：用1%盐酸清洁玻片后，在玻片中央滴上一小滴蒸馏水，再用无菌操作的方法挑菌少许于玻片的水中，并充分混匀涂成薄膜。
2、干燥：将涂片置火焰高处微热烘干或自然干燥。
3、固定：涂面朝上，通过微火2-3次。
4、染色：待玻片冷却后加结晶紫（或者石炭酸复红）1-2滴于涂片上，覆盖涂面染色1-2分钟。
5、水洗：倾去染色液，用水自玻片一端轻轻冲洗至流下的水变无色为止（注：勿冲去菌体）。
6、干燥：自然干燥，或用吸水纸吸干。
7、镜检：油镜观察并绘图。
将纯化得到的单菌落分为两份，其中一部分接种于试管斜面培养基37℃培养24h后，于4℃保存备用，每个菌株做两个重复备份，将菌株的原有编号中的A替换为B，添加重复序号后编号，如“B01-3-1、B01-3-2、B02-3-1”；另一部分用来做产淀粉酶的芽孢杆菌筛选。