改良Masson 三色染色液使用说明
Masson三色染色试剂盒甲苯胺蓝
Masson 三色染色试剂盒（甲苯胺蓝）说明书修订日期：2018.07.31Cat number：KGMST-8004Store at 2-8℃ for 12 monthsFor Research Use Only（科研专用）【适用范围】Masson 三色染色试剂盒主要用于结缔组织染色。
用于判定各种组织、器官的病变程度与修复情况，以不同色调显示与区分某些非结缔组织及物质成分；如显示与区分肌肉及其肿瘤组织的正常或异常成分。
尤适用于软组织肿瘤的鉴别诊断。
【主要成分】【染色步骤】1、切片脱蜡处理至水。
2、滴加 1 滴（50-100µl）苏木素染色液（试剂 A）染色 5-10 分钟。
蒸馏水冲掉染液。
3、蒸馏水或自来水冲洗 2-5 分钟。
4、滴加 1 滴（50-100µl）复合染色液（试剂 B）染色 5 分钟。
5、蒸馏水或自来水冲洗一下（2-3 秒，冲掉染液即可）。
6、滴加 1 滴（50-100µl）磷钼酸（试剂 C）染色 1 分钟。
7、甩干或自然晾干。
8、滴加 1 滴（50-100µl）甲苯胺蓝染色液（试剂 D）染色 5min 左右。
9、蒸馏水或自来水冲洗一下（2-3 秒，冲掉染液即可）。
10、放入烘箱（50－60 摄氏度）烘干。
中性树胶封片。
【结果】胶元纤维、黏液、软骨、神经纤维呈蓝色；肌肉、弹力纤维呈红色；神经轴索呈粉红色；纤维素呈紫红色；红血球呈橘红色。
细胞核呈蓝紫色。
【注意事项】1、不同的固定液或固定时间以及不一样的组织，染色效果可有差异，要根据显微镜下观察来掌握染色或分化时间。
2、染色液必须充分淹盖组织。
3、每次染色宜用阳性切片作对照。
【有效期】12 个月仅供研究、不用于临床诊断。
Masson染色的操作
贝博Masson染色试剂盒利用不同阴离子染料先后作用完成染色，根据组织不同的渗透 性，选择分子大小不同的阴离子染料进行染色，区分不同组织成分。操作简捷，性能稳定， 显色清晰。
注意事项： 1、 每个染色步骤均要保持玻片湿润。 2、 分色后不需冲洗，直接复染。 3、 镜检观察时若胶原纤维部分蓝色着色太浅，可用复染液复染 2-3 分钟，至颜色合适 为止。复染液染色时间不宜过长，否者颜色过深会造成对比不强烈。 4、 若整体染色效果不佳，可用水浸泡 60-90 分钟，褪色后，再重复染色。
传真：021-60853530
本产品仅供科学研究使用！
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BestBio-贝博
3、水合：蒸馏水中浸泡 2 分钟。 4、漂洗：30-40℃水漂洗两次，每次 30-60 秒。
产品说明书
样本的染色 1、 用蒸馏水润湿玻片 30-60 秒。 2、 核染液染色 60 秒左右，冲洗液冲洗 30 秒。 3、 浆染液染色 30-60 秒，冲洗液冲洗 30 秒。 4、 分色液分色 6-8 分钟。 显微镜下观察，样本中胶原纤维部分褪成淡的粉红色为 宜。如果褪色效果不佳，可适当延长时间。 5、 复染液染色 5 分钟，用无水乙醇冲洗干净。 6、 吹干后，用封固剂封片。 7、 结果观察。染色试剂盒
产品组成：
产品编号 试剂组分 核染液 浆染液 分色液 复染液 冲洗液
403023 20ml * 8
20 ml 20 ml 20 ml 20 ml 20ml * 4
储存条件： 室温保存。
有效期： 一年。
产品简介： Masson染色是用于显示组织中纤维的染色方法之一，是胶原纤维（collagen fiber）染
改良Masson 三色染色液使用说明书
改良Masson三色染色液使用说明书货号：G1345规格：8×50ml/8×100ml有效期：室温保存，12个月有效产品简介：结缔组织狭义上是指其含有的三种纤维：胶原纤维、网状纤维、弹力纤维、而胶原纤维（collagen fiber）是分布最广、含量最多的一种纤维。
Masson三色染色又称马松染色，是结缔组织染色中最经典的一种方法，是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。
所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。
该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关：分子的大小由分子量来体现，小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织，而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。
然而，淡绿或苯胺蓝的分子量很大，因此Masson染色后肌纤维呈红色，胶原纤维呈绿色或蓝色，主要用于区分胶原纤维和肌纤维。
改良Masson三色染色与常规Masson三色染色的区别在于采用天青石蓝苏木素淡染细胞核。
其特点在于：分化时间短(1～2分钟)；色彩清晰鲜艳；适用范围广，适宜于组织的石蜡切片、冰冻切片等染色；所染切片保存时间长且不易褪色。
改良Masson染色胶原纤维呈蓝色，肌纤维、胞质、纤维素、角蛋白和红细胞呈红色，细胞核呈蓝色，主要用于区分胶原纤维和肌纤维。
产品组成：名称规格8×50ml8×100ml Storage试剂(A):Bouin液50ml100ml RT试剂(B):天青石蓝染色液50ml100ml4℃避光试剂(C):Mayer苏木素染色液50ml100ml4℃避光试剂(D):酸性乙醇分化液50ml100ml RT试剂(E):丽春红品红染色液50ml100ml RT避光试剂(F):磷钼酸溶液50ml100ml RT避光试剂(G):苯胺蓝染色液50ml100ml RT避光试剂(H):弱酸溶液50ml100ml RT使用说明书1份自备材料：10%的福尔马林、蒸馏水、系列乙醇、二甲苯、染缸操作步骤（仅供参考）：1、组织固定于10%的福尔马林中，常规脱水包埋。
Masson三色染色试剂盒说明书
Masson三色染色试剂盒说明书Masson 三色染色试剂盒说明书（南京森贝伽生物科技有限公司）【产品介绍】Masson 染液是显示组织中纤维染色的主要方法之一，是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。
该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关。
分子的大小由分子量来体现，小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织，而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。
淡绿分子量最大。
因此Masson 染色肌纤维红色，胶原纤维绿色，主要用于区分胶原纤维和肌纤维。
【用途】主要用于胶原纤维染色。
【产品特点】①染色稳定；②分化时间短，1～2 分钟；③色彩清晰鲜艳；④适用范围广，适宜于组织的石蜡切片、冰冻切片等染色；⑤所染切片保存时间长且不易褪色。
固定：甲醛升汞或甲醛盐溶液。
切片：所有类型。
【产品组成】编号名SBJ0126（7×50ml）SBJ0126（7×100ml）SBJ0126（7×500ml）Storage试剂（A）A1：苏木素染色液25ml 100ml 500ml RTA2：三氯化铁水溶液25ml 100ml 500ml RT 临用时取A1、A2 等量混合，成为试剂（A），不可预先配制后放置，因染色液的色素根与铁会化合，形成不容性沉淀，等量混合后，一般24h 后失去染色力。
试剂（B）: 盐酸乙醇分化液50ml 100ml 500ml RT 试剂（C）: 氨水水溶液50ml 100ml 500ml RT 试剂（D）: 丽春红酸性品红染色液50ml 100ml 500ml RT 试剂（E）: 乙酸水溶液50ml 100ml 500ml RT 试剂（F）: 磷钼酸水溶液50ml 100ml 500ml RT 试剂（G）: 苯胺蓝染色液50ml 100ml 500ml RT 【参考操作步骤】1、切片脱蜡至水。
2、试剂（A）染色5min～10min。
3、试剂（B）分化、水洗，试剂（C）返蓝、水洗。
马松三色染色法
马松三色染色法马松三色染色法是一种用于显示组织中纤维的染色技术，特别适用于结缔组织的染色。
该方法使用三种染料：苏木精、酸性品红和丽春红，分别染色细胞核、肌纤维和胶原纤维。
首先，切片需要经过常规脱蜡至水的过程，以确保染色剂能够充分渗透到组织中。
然后，使用配制好的Weigert氏铁苏木素染色液对组织进行染色，以突出显示细胞核。
染色完成后，需要充分水洗，以去除未结合的染料。
接下来是酸性品红染色，用于标记肌纤维。
这个步骤需要在弱酸环境中进行分化处理，以将染色剂与组织中的碱性物质区分开来。
弱酸还能帮助酸性品红更好地渗透到组织中。
最后，使用丽春红品红染色液对胶原纤维进行染色。
在这个步骤中，需要使用弱酸工作液来洗去未结合的染料。
在整个染色过程中，组织固定起着非常重要的作用。
不同的固定液会影响染色时间，因此需要根据具体情况进行调整。
在完成染色后，需要进行常规脱水、透明和封固处理，以便在显微镜下观察。
马松三色染色法的优点在于它能够清晰地显示结缔组织中的胶原纤维和肌纤维，特别是在病理情况下，如器官硬化性疾病和瘢痕组织的鉴别诊断中，该方法能够提供有价值的信息。
此外，该方法具有较高的特异性和灵敏度，能够检测出病理变化中较小的差异。
然而，该方法也有一些局限性。
首先，该方法需要使用多种染料和化学试剂，这使得操作过程相对复杂。
其次，某些组织可能需要特定的处理步骤，例如脱蜡、脱水和固定等。
这需要技术人员具备一定的经验和技术水平。
尽管存在这些局限性，马松三色染色法仍是一种非常重要的病理学技术。
它可以提供关于组织结构和功能的重要信息，有助于病理医生做出准确的诊断和制定治疗方案。
Masson三色法
Masson三色法（根据Masson,1929）一、试剂配制（一）Weigert氏铁苏木素液（可用Herris苏木素代替）甲液：苏木素1g无水酒精（或95％酒精）100ml乙液：29％三氯化铁水溶液4ml蒸馏水95ml （30%三氯化铁溶液则为100ml）盐酸1ml临用时，取甲、乙液等量混合即可应用。
混合时应将乙液加人甲液内，染液呈紫黑色。
铁苏木素不能象明矾苏木素一样配制后可放置贮存备用，因铁与染色剂的色素根会化合生成不溶性沉淀，所以铁作媒染液时，必须与染液分别配制和分别保存，染片时临时混合应用。
由于这是一种铁苏木素，它将胞核染成黑色。
能抵抗在对比染色液中所含分色剂的脱色作用，且不会被光线退色，因此比钾矾苏木素染色较为持久。
（二）丽春红酸性品红液丽春红（Ponceau 2R）0.7g酸性品红（acid fuchsin）0.3g蒸馏水99ml冰醋酸(glacial acetic acid) 1ml（三）1%磷钼酸水溶液磷钼酸（phosphomolybdic acid）1g蒸馏水加至100ml（四）2%苯胺蓝液苯胺蓝（aniline blue）2g冰醋酸（glacial acetic acid ）2ml蒸馏水加至100ml（五）亮绿液亮绿（light green）1g蒸馏水99ml冰醋酸（glacial acetic acid ）1ml（六）Bouin氏液苦味酸饱和液（1.22％）75ml福尔马林25ml冰醋酸5ml此液一般在临用时配制，对皮肤及肌腱有软化作用。
二、操作方法1．组织固定于Bouin氏液，流水冲洗一晚，常规脱水包埋。
2．切片脱蜡至水：（1）二甲苯中脱蜡10分钟×3次，用吸水纸吸干液体；（2）100%乙醇5分钟×2次，用吸水纸吸干液体；（3）95%乙醇5分钟×2次，用吸水纸吸干液体；；（4）流水2分钟，用吸水纸吸干水分；3．Weiger氏铁苏木素染5-10分钟。
Masson三色染色液G1006
Masson 三色染色液30ml+20ml*5RT产品简介：由Mallory 三色染色改造，利用两种或三种阴离子染料混合一起或先后作用完成染色，与阴离子染料分子的大小和组织的渗透性有关。
根据组织不同的渗透性能，选择分子大小不同的阴离子的染料进行染色，便可把不同组织成分显示出来。
包装内容：产品货号产品名称规格G1006-1重铬酸钾媒染剂30ml G1006-2Weigert 铁苏木素A 液20ml G1006-3Weigert 铁苏木素B 液20ml G1006-4丽春红酸性品红染液20ml G1006-5磷钼酸溶液20ml G1006-6苯胺蓝染液20ml保存条件：室温保存，有效期1年。
操作说明：1、石蜡切片脱蜡至水：依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min ，自来水洗。
2、重铬酸钾染色：切片入重铬酸钾浸泡过夜，自来水洗。
3、铁苏木素染色：铁苏木素A 液与B 液等比混合成铁苏木素染液，切片入铁苏木素3min ，自来水洗，盐酸酒精溶液分化，自来水冲洗。
4、丽春红酸性品红染色：切片入丽春红酸性品红浸染5-10min ，自来水漂洗。
5、磷钼酸染色：磷钼酸水溶液浸染1-3min 。
6、苯胺蓝染色：磷钼酸之后不用水洗，直接入苯胺蓝染液染3-6min 。
7、分化：切片用1%冰醋酸分化，两缸无水乙醇脱水。
8、透明封片：切片放入第三缸无水乙醇5min ，二甲苯5min 透明，中性树胶封片。
9、显微镜镜检，图像采集分析。
染色结果：胶原纤维、粘液、软骨呈蓝色。
弹力纤维呈棕色。
肌纤维、纤维素和红细胞染红色。
细胞核染蓝黑色。
G 1006注意事项：1、Weigert铁苏木素分A、B两液，临用前将两液等比例混合使用。
不宜预先混合，否则容易氧化沉淀而失去染色力。
2、重铬酸钾染完后水洗要稍快，切片洗干净即可。
3、根据切片的数量对铁苏木素染液进行更换，也可以现配现用；4、丽春红的染色程度要控制好，胶原部分不能是红色或者太红，会影响后续苯胺蓝的着色；5、冰醋酸分化苯胺蓝的过程中，若是分化过度，胶原蓝色太浅，若分化不足，易与丽春红的颜色叠加呈紫蓝色。
masson染色步骤(临床医学研究中心总结)
试剂名：改良 Masson 三色染色液货号：G1345 品牌：索莱宝1、石蜡切片65℃烘烤1h（使组织更贴合玻片，并溶解石蜡。
如果是刚切好的切片，则烘烤2-3h），立即放入脱蜡剂中脱蜡；2、脱蜡：脱蜡剂Ⅰ（15min）、脱蜡剂Ⅱ（15min）水化：无水乙醇I（5min）、无水乙醇 II（5min）、95%乙醇I（5min）、95%乙醇II （5min）、85%乙醇（5min）、75%乙醇（5min）脱蜡处理，蒸馏水3min3、将 Bouin 液滴在组织上，于室温作用一晚或置入 37℃的温箱内 2h 进行媒染，然后流水冲洗至切片组织上的黄色消失。
4、天青石蓝染色液滴染3min，稍水洗玻片上无染料即可。
5、Mayer 苏木素染色液滴染3min，稍水洗玻片上无染料即可。
（显微镜下观察，细胞核呈现深蓝色，细胞质有蓝色）6、酸性乙醇分化液分化3-5s，流水冲洗 10min返蓝。
（细胞核呈现灰蓝色，细胞质应相对透明无色）7、丽春红品红染色液染 2-5min，稍水洗玻片上无染料即可。
（容易造成深红或紫红色，基本看不清细胞核。
建议先染色30s-1min，显微镜下观察，适当增加时间）8、磷钼酸溶液浸泡10min，倾去上液，切片不用水洗，直接滴入苯胺蓝染色液染 5-10min。
（如果丽春红染色过深，苯胺蓝也应该适当染久一些，最终应该是红蓝色分明，能明显分辨出胶原显微）9、弱酸溶液处理 2min。
10、透明：切片直接依次放入无水乙醇 I（5min）-无水乙醇 II（5min）- 脱蜡剂Ⅰ（5min）- 脱蜡剂Ⅱ（5min）。
然后用纸巾擦干玻片上残余脱蜡剂，或直接铺平玻片在通风橱内，干燥脱蜡剂。
使用中性树脂封片。
注：masson染色不像HE可以把颜色洗脱再重复步骤，建议使用同一批切片，先摸索染色时间。
Masson三色法
Masson三色法（根据Masson,1929）一、试剂配制（一）Weigert氏铁苏木素液（可用Herris苏木素代替）甲液：苏木素1g无水酒精（或95％酒精）100ml乙液：29％三氯化铁水溶液4ml蒸馏水95ml （30%三氯化铁溶液则为100ml）盐酸1ml临用时，取甲、乙液等量混合即可应用。
混合时应将乙液加人甲液内，染液呈紫黑色。
铁苏木素不能象明矾苏木素一样配制后可放置贮存备用，因铁与染色剂的色素根会化合生成不溶性沉淀，所以铁作媒染液时，必须与染液分别配制和分别保存，染片时临时混合应用。
由于这是一种铁苏木素，它将胞核染成黑色。
能抵抗在对比染色液中所含分色剂的脱色作用，且不会被光线退色，因此比钾矾苏木素染色较为持久。
（二）丽春红酸性品红液丽春红（Ponceau 2R）0.7g酸性品红（acid fuchsin）0.3g蒸馏水99ml冰醋酸(glacial acetic acid) 1ml（三）1%磷钼酸水溶液磷钼酸（phosphomolybdic acid）1g蒸馏水加至100ml（四）2%苯胺蓝液苯胺蓝（aniline blue）2g冰醋酸（glacial acetic acid ）2ml蒸馏水加至100ml（五）亮绿液亮绿（light green）1g蒸馏水99ml冰醋酸（glacial acetic acid ）1ml（六）Bouin氏液苦味酸饱和液（1.22％）75ml福尔马林25ml冰醋酸5ml此液一般在临用时配制，对皮肤及肌腱有软化作用。
二、操作方法1．组织固定于Bouin氏液，流水冲洗一晚，常规脱水包埋。
2．切片脱蜡至水：（1）二甲苯中脱蜡10分钟×3次，用吸水纸吸干液体；（2）100%乙醇5分钟×2次，用吸水纸吸干液体；（3）95%乙醇5分钟×2次，用吸水纸吸干液体；；（4）流水2分钟，用吸水纸吸干水分；3．Weiger氏铁苏木素染5-10分钟。
Masson三色染色操作规程
Masson染色,操作规程实验目的： Masson染色,用于显示组织中纤维的染色方法之一实验原理：Masson氏染色时胶原纤维呈蓝色(被苯胺蓝所染),肌纤维呈红色(被酸性品红和丽春红所染),这与阴离子染料分子的大小和组织的渗透性有关。
不同的组织和细胞成分,它们的孔隙大小是不同的。
孔隙的大小,决定了组织的渗透性。
如孔隙小,组织结构致密,渗透性低；孔隙宽,组织结构疏松,渗透性高。
如已固定的组织用一系列阴离子水溶性染料先后或混合染色,则可发现红细胞被最小分子的阴离子染料着染.肌纤维与胞质被中等大小的阴离子染料着染,而胶原纤维则被大分子的阴离子染料着染。
由此说明了红细胞对阴离子染料的渗透性最小,肌纤维与胞质次之,而胶原纤维具有最大的渗透性。
根据组织不同的渗透性能,选择分子大小不同的阴离子染料进行染色,便可把不同组织成分显示出来.而染料分子的大小,主要由其分子量来体现。
小分子量者易于穿透结构致密、渗透性低的组织,而大分子最者则只能进入结构疏松,渗透性高的组织。
一般来说,结构疏松,渗透性高的组织多选择大分子染料,而结构致密,渗透性低的组织多选择小分子染料。
试剂仪器：Harris 氏苏木精：苏木精0.4g，硫酸铝钾6g，黄色氧化汞0.16g，蒸馏水80ml。
将蒸馏水预热,预热过程中加入硫酸铝钾，沸腾后拔下电源，加入苏木精，接通电源再度沸腾后，拔掉电源，缓慢加入氧化汞，搅拌混匀，冷却后第二天加入5%比例的冰醋酸即可用。
透明玻璃瓶装缓慢氧化可省略冰醋酸，长期有效。
Masson丽春红酸性复红液：丽春红0.7g，酸性复红0.3g，蒸馏水99ml，冰醋酸1ml。
1%冰醋酸水溶液：冰醋酸1 ml，蒸馏水100 ml。
1%磷钼酸水溶液：磷钼酸1g，蒸馏水100 ml。
1%苯胺蓝水溶液：苯胺蓝1g，蒸馏水100 ml，冰醋酸2 ml。
1%光绿水溶液：光绿 1g，蒸馏水100 ml实验操作程序：1、石蜡切片脱蜡至水。
2、铬化处理或去汞盐沉淀（甲醛固定的组织此步可略）。
一种不易褪色的masson三色染色方法及其应用
一种不易褪色的masson三色染色方法及其应用
Masson三色染色法是一种染色方法，用于检测细胞中的蛋白
质和核酸，是一种不易褪色的染色法。
Masson三色染色法的原理是：将需要染色的细胞或组织切片，用三种不同的染料分别染色，分别指示蛋白质，核酸和细胞壁结构。
染料的种类有：碘酒素、亚硝酸盐和胭脂红。
碘酒素用于染色蛋白质，亚硝酸盐用于染色核酸，胭脂红用于染色细胞壁结构。
Masson三色染色法可以用于显示细胞结构，也可以用于检测
细胞中的蛋白质和核酸的分布情况。
它可以用于细胞结构的分析，也可以用于病理学的诊断。
此外，Masson三色染色法还
可以用于细胞培养，观察细胞的生长及其他变化。
弹性组织改良三色
弹性纤维- 改良弹性三色染色目的：用于鉴别一张组织切片中不同类型的结缔组织。
原理：Verhoff’s 苏木精染弹性纤维，改良Masson’s三色用于染其他的结缔组织成分。
固定：10%甲醛或Zenker’s技术：石蜡切片4µ or 5µ。
设备：蒸馏水清洗染色缸。
微波炉。
试剂：Weigert’s 碘液：详见微波三色。
5% Hypo(硫代硫酸钠)：详见备用液。
Zenker’s 固定液：蒸馏水500.0 ml氯化汞25.0 gm重铬酸钾12.5 gm硫酸钠 5.0 gm混合溶解，标签，日期和签名。
保存期未能确定。
工作液：使用前配制，Zenker’s 50 ml 加入冰醋酸 5 ml，用后丢弃。
警告：腐蚀性，毒性，弃置于有标签的玻璃容器。
Verhoeff’s 苏木精：5% 酒精苏木精20.0 ml10% 三氯化铁8.0 mlLugol’s 碘液8.0 ml按特定顺序加入混合溶解。
新鲜配制。
染色完毕后丢弃。
警告：易燃性，避免接触和吸入。
比布里希猩红：详见Masson’s 三色。
磷钼酸/磷钨酸溶液：详见Masson’s 三色。
苯胺蓝：详见Masson’s 三色。
1% 醋酸：详见Masson’s 三色安全：戴丁腈手套和白大衣，戴微过滤口罩，在通风橱中使用。
保持所有打开盖的热溶液于通风橱中。
避免接触和吸入。
Zenker’s固定液：氯化汞：剧烈的皮肤和眼睛刺激性。
通过呼入和摄入途径影响靶器官为生殖、泌尿、呼吸胃肠和胎儿系统。
重铬酸钾：吸入粉尘和摄入毒性，影响靶器官为生殖和胎儿系统。
固体对眼睛、皮肤和粘膜有腐蚀性。
碘：加热产生大量有毒浓烟。
皮肤致敏，皮肤、眼睛和呼吸系统刺激物，腐蚀性。
硫代硫酸钠：摄入毒性，对胃有刺激性。
皮肤、眼睛和呼吸道刺激物。
程序：1. 常规脱蜡至蒸馏水。
2. Weigert’s碘液媒染, 微波45 seconds。
3. 蒸馏水稍洗。
4. 5% hypo 脱色, 蒸馏水稍洗。
5. Zenker’s液媒染, 微波60 seconds。
改良Gomori三色染色液使用说明书
改良Gomori三色染色液使用说明书货号：G3510规格：4×50ml/4×100ml保存：RT避光，6个月有效。
产品内容：名称4×50ml4×100ml Storage试剂(A):Weigert铁苏木素A1:Weigert染液A25ml50ml RT避光A2:Weigert染液B25ml50ml RT避光临用前，取A1、A2等量混合即为Weigert铁苏木素染色液，不宜提前配制。
试剂(B):酸性分化液50ml100ml RT试剂(C):Gomori染色液50ml100ml RT避光试剂(D):Gomori分化液50ml100ml RT产品简介：Masson三色染色又称马松染色，是结缔组织染色中最经典的一种方法，是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。
所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。
该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关：分子的大小由分子量来体现，小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织；而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。
Gomori染色液采用媒染剂和促染剂同时染色，可使结缔组织中的多种成分着色。
改良Gomori三色染色液可将胶原纤维染成绿色，肌纤维染成红色，细胞核染成蓝色。
操作步骤(仅供参考)：1、新鲜肌肉组织取材后立即进行冰冻切片，切片厚度为10-15µm。
2、用配制好的Weigert铁苏木素染色5-10min。
水洗。
3、流水冲洗5-10min，镜下观察。
如果染色过深，可用酸性分化液分化数秒（镜下观察）。
4、水洗返蓝，蒸馏水洗2-3次。
5、加入Gomori染色液染色20-40min，流水冲洗。
6、在上述操作过程中按蒸馏水：Gomori分化液=4:1比例配制Gomori分化工作液。
7、用Gomori分化工作液洗30s-90s，以镜下观察适当为宜，流水冲洗。
8、95%乙醇快速脱水，无水乙醇脱水3次，每次5-10s。
冰冻切片胶原纤维(MASSON)染色试剂盒产品说明书
GENMED SCIENTIFICS INC. U.S.A GMS80013.2 v.A GENMED冰冻切片胶原纤维（MASSON）染色试剂盒产品说明书（中文版）主要用途GENMED冰冻切片胶原纤维（MASSON）染色试剂是一种旨在使用胞核－胞浆－胶原蛋白三色染料（trichrome），分析和区分存档中的冰冻组织切片中的胶原纤维（collagen fiber）的权威而经典的技术方法。
该技术由大师级科学家精心改良传统方法、成功实验证明的。
主要适用于胶原蛋白和平滑肌的鉴别分析。
广泛用于结缔组织、肌肉组织和胶原蛋白的研究等。
产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，显色清晰。
技术背景基于摩罗利（mallory）首次应用三色系统的方法，马森（masson）进行了改良，在三色复合染料体系中，使用苯胺篮（aniline blue）替代绿篮，作为胶原蛋白的染色。
三色复合染料选择性地染色肌肉、胶原纤维、纤维蛋白（fibrin）和红细胞。
肝肾疾病，例如纤维化（cirrhsis）等，其胶原蛋白增多。
产品内容GENMED清理液（Reagent A）XX毫升GENMED包氏液（Reagent B）XX毫升GENMED韦格液（Reagent C）XX毫升GENMED比氏液（Reagent D）XX毫升GENMED酸性液（Reagent E）XX毫升GENMED染色液（Reagent F）XX毫升GENMED修正液（Reagent G）XX毫升产品说明书1份保存方式保存在4℃冰箱里，避免光照；试剂具有腐蚀性，注意安全；有效保证6月用户自备小型玻璃染色缸：用于组织或切片处理的容器培养箱：用于样品反应孵育微波炉：用于样品反应孵育处理载玻片和盖玻片：用于切片后铺片中性树脂：用于切片封片光学显微镜：用于切片染色后观察分析实验步骤操作一：标准染色1．准备好XX微米厚的冰冻切片2．小心加上XX微升GENMED清理液（Reagent A）在切片上，铺满整个切片样品表面3．室温下孵育XX分钟4．小心移去切片上的GENMED清理液（Reagent A）5．小心加入XX微升GENMED包氏液（Reagent B）在切片上，铺满整个切片样品表面6．放进60℃恒温培养箱孵育XX分钟（注意：避免干枯；如果强化效果，可以室温孵育16小时） 7．小心移去GENMED包氏液（Reagent B）8．室温下，小心将切片置入XX毫升GENMED清理液（Reagent A）中孵育2分钟9．小心移去切片上的GENMED清理液（Reagent A）10．小心加入XX微升GENMED韦格液（Reagent C）在切片上，铺满整个切片样品表面11．室温下孵育XX分钟12．小心移去GENMED韦格液（Reagent C）13．室温下，小心将切片置入XX毫升GENMED清理液（Reagent A）中孵育XX分钟14．小心移去切片上的GENMED清理液（Reagent A）15．小心加入XX微升GENMED比氏液（Reagent D）在切片上，铺满整个切片样品表面16．室温下孵育XX分钟（注意：可以延长至15分钟，增强染色效果）17．小心移去GENMED比氏液（Reagent D）18．小心加入XX微升GENMED清理液（Reagent A）在切片上，铺满整个切片样品表面19．小心移去切片上的GENMED清理液（Reagent A）20．重复实验步骤18至19二次21．小心加入XX微升GENMED酸性液（Reagent E）在切片上，铺满整个切片样品表面（注意：可以孵育15分钟，增强染色效果）22．小心移去切片上的GENMED酸性液（Reagent E）23．小心加上XX微升 GENMED染色液（Reagent F）在切片上，铺满整个切片样品表面24．室温下孵育XX分钟，避免光照（注意：可以延长至10分钟，增强染色效果）25．小心移去切片上的GENMED染色液（Reagent F）26．小心加上XX微升 GENMED修正液（Reagent G）在切片上，铺满整个切片样品表面27．室温下孵育XX分钟28．小心移去切片上的GENMED修正液（Reagent G）29．室温下，小心将切片置入XX毫升GENMED清理液（Reagent A）中孵育XX分钟30．小心移去切片上的GENMED清理液（Reagent A）31．放上盖玻片或封片（中性树脂）32．即刻在一般光学显微镜下观察：细胞核――呈现黑色细胞质――呈现红色肌纤维――呈现红色红细胞――呈现红色胶原纤维――呈现蓝色操作二：热处理染色1．准备好XX微米厚的冰冻切片2．小心加上XX微升GENMED清理液（Reagent A）在切片上，铺满整个切片样品表面 3．室温下孵育XX分钟4．小心移去切片上的GENMED清理液（Reagent A）5．准备1个XX毫升烧杯或小型染色缸6．加入XX毫升GENMED包氏液（Reagent B）7．小心放进上述脱腊处理的切片8．放进微波炉（600瓦）加热XX分钟9．室温下静置15分钟10．取出切片，小心移去切片上的GENMED包氏液（Reagent B）11．室温下，小心将切片置入XX毫升GENMED清理液（Reagent A）中孵育5分钟 12．小心移去切片上的GENMED清理液（Reagent A）13．小心加入XX微升GENMED韦格液（Reagent C）在切片上，铺满整个切片样品表面 14．室温下孵育XX分钟15．小心移去GENMED韦格液（Reagent C）16．室温下，小心将切片置入XX毫升GENMED清理液（Reagent A）中孵育5分钟 17．小心移去切片上的GENMED清理液（Reagent A）18．小心加入XX微升GENMED比氏液（Reagent D）在切片上，铺满整个切片样品表面 19．室温下孵育XX分钟（注意：可以延长至15分钟，增强染色效果）20．小心移去GENMED比氏液（Reagent D）21．小心加入XX微升GENMED清理液（Reagent A）在切片上，铺满整个切片样品表面 22．小心移去切片上的GENMED清理液（Reagent A）23．重复实验步骤21至22二次24．小心加入XX微升GENMED酸性液（Reagent E）在切片上，铺满整个切片样品表面 25．室温下孵育XX分钟（注意：可以延长至15分钟，增强染色效果）26．小心移去切片上的GENMED酸性液（Reagent E）27．小心加上XX微升 GENMED染色液（Reagent F）在切片上，铺满整个切片样品表面 28．室温下孵育XX分钟，避免光照（注意：可以延长至10分钟，增强染色效果） 29．小心移去切片上的GENMED染色液（Reagent F）30．小心加上XX微升 GENMED修正液（Reagent G）在切片上，铺满整个切片样品表面 31．室温下孵育XX分钟32．小心移去切片上的GENMED修正液（Reagent G）33．室温下，小心将切片置入XX毫升GENMED清理液（Reagent A）中孵育2分钟 34．小心移去切片上的GENMED清理液（Reagent A）35．放上盖玻片或封片（中性树脂）36．即刻在一般光学显微镜下观察：细胞核――呈现黑色细胞质――呈现红色肌纤维――呈现红色红细胞――呈现红色胶原纤维――呈现蓝色注意事项1．本产品为50次操作2．操作时，须戴手套3．试剂具有腐蚀性，注意操作安全4．建议使用玻璃染色缸5．每次更换试剂溶液时，保持切片面基本晾干6．试剂溶液在切片表面时，避免有气泡存在，同时确保铺满切片表面7．整个操作，在避光状态下进行8．染色完成后，即刻进行光学显微镜观察9．样品染色后保存，避免光照10．本公司提供系列特定组织染色试剂产品质量标准1．本产品经鉴定性能稳定2．本产品经鉴定显色清晰使用承诺杰美基因秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。
MASSONS三色
胶原纤维- MASSON'S 三色(TRI)目的：用于鉴别胶原纤维和平滑肌肿瘤，肝硬化的胶原纤维增生。
肝肾活检组织的常规染色。
原理：与名称暗示的一样，三种染料分别着染肌肉、胶原纤维、纤维蛋白和红细胞。
三色染色的基本原理是孔隙较小的组织被最小的染料分子着染。
只要大分子的染料能够穿透组织，而损失的总是较小的染料分子。
建议染色时首先染酸性染料。
比布里希猩红能与嗜酸性组织成分结合。
当用磷酸处理时，只有渗透性较小组织成分能保留红色，胶原纤维组织的红色被冲出。
同样原理使胶原纤维与苯胺蓝结合。
固定：首选Bouin's液，10%甲醛。
技术：石蜡切片4μm。
设备：蒸馏水清洗玻璃器皿，染色缸，60°C 烤箱或水浴箱，微波炉。
试剂：Bouin’s 固定液饱和苦味酸1500.0 ml甲醛500.0 ml冰醋酸100.0 ml混合溶解，标签，日期和签名。
保存期2年。
警告：致癌物质，刺激性。
比布里希猩红：比布里希猩红 2.7 gm酸性品红0.3 gm蒸馏水300.0 ml冰醋酸 3.0 ml混合溶解，标签，日期和签名。
保存期6个月。
警告：避免接触和吸入。
Weigert's铁苏木精原液A：苏木精 5.0 gm95% 酒精500.0 ml混合溶解，标签，日期和签名。
保存期1年。
警告：易燃性，避免接触和吸入。
原液B：29%三氯化铁20.0 ml蒸馏水475.0 ml盐酸 5.0 ml混合溶解，标签，日期和签名。
保存期1年。
Weigert's 苏木精工作液溶液A 25.0 ml溶液B 25.0 ml混合溶解，溶液可保留3-4。
磷钼酸/磷钨酸溶液：磷钼酸25.0 gm磷钨酸25.0 gm蒸馏水1000.0 ml混合溶解，标签，日期和签名。
保存期6个月。
警告：避免接触和吸入。
苯胺蓝：苯胺蓝 2.5 gm蒸馏水100.0 ml冰醋酸 1.0 ml混合溶解，标签，日期和签名。
保存期6个月。
警告：避免接触和吸入。
Masson三色染色液染色步骤及注意事项
Masson三色染色液染色步骤及注意事项步骤一：预处理1. 切片：将需要染色的组织标本切成厚度约为5um的切片，将切片均匀地放置在已经预先烘干和标记好的玻片上。
2.固定：用10%中性缓冲福尔马林固定切片，固定时间约为24小时。
步骤二：染色1. 染色剂的准备：将Masson三色染色液购买回来后，根据品牌推荐比例稀释至适当浓度。
不同品牌染色液稀释比例可能有所不同，因此以具体品牌的说明为准。
2.染色操作：(1)将切片放入染色盒中，并将染色盒放入水浴中加热，温度为60-70摄氏度，时间为20-30分钟。
(2)将加热后的染色盒取出，用水冲洗2-3分钟，直至明显的污染物被冲走。
(3)将切片置于70%酒精中，时间为5分钟。
(4)在20%盐酸酒精中浸泡1-2秒钟，然后立即将切片漂洗至酸性的第一盐酸酒精。
(5)在酸性的第一盐酸酒精中浸泡30秒至1分钟，然后漂洗至酸性的第二盐酸酒精中。
(6)在酸性的第二盐酸酒精中浸泡30秒至1分钟，然后漂洗至蒸馏水中。
(7)转移到可溶性亮蓝GR中染色5分钟。
(8)快速漂洗后，放入蒸馏水中清洗1-2分钟。
(9)再次转移到1%醋酸中染色1分钟。
(10)最后，在6%石蜡溶液中浸泡5-10分钟。
步骤三：封片1.脱水：将切片放入95%乙醇中，时间为1-2分钟，然后放入绝对乙醇脱水2-3分钟。
2.渗透：将切片放入二氯甲烷中，时间为5分钟，再在房温下放置3-5分钟以充分渗透。
3. 封片：将切片放入500-1000ml锡兰红封片剂中，时间为1-2分钟，然后将切片转到盖玻片上，将封片剂挤满，盖上玻片，压平后放在60摄氏度的烘箱中加热2-3小时。
注意事项：1.操作中应注意个人防护，佩戴手套和口罩，避免接触有害物质。
2.染色过程中要严格控制温度和时间，避免染色过程中出现偏差。
3.在脱水和封片过程中要注意将切片完全浸透，防止切片变形或脱落。
4.染色溶液和液体处理过程中，应注意防止溅溢和污染，保持操作环境清洁。
Masson染色
Masson染色Masson染色,用于显示组织中纤维的染色方法之一。
试剂：Regaud 氏苏木精：苏木精1g，95%酒精10ml，甘油10ml，蒸馏水80ml。
将苏木精加入蒸馏水内加温溶解,冷却后加入酒精和甘油,放数日后即可应用。
Masson丽春红酸性复红液：丽春红0.7g，酸性复红0.3g，蒸馏水99ml，冰醋酸1ml。
0.2%冰醋酸水溶液：冰醋酸0.2 ml，蒸馏水100 ml。
1%磷钼酸水溶液：磷钼酸1g，蒸馏水100 ml。
苯胺蓝水溶液：苯胺蓝2g，蒸馏水98 ml，冰醋酸2 ml。
1%光绿水溶液：光绿 1g，蒸馏水100 ml。
Masson三色法步骤1、石蜡切片脱蜡至水。
2、铬化处理或去汞盐沉淀（甲醛固定的组织此步可略）。
3、依次自来水和蒸馏水洗。
4、用Regaud苏木精染液或Weigert苏木精液染核5-10min。
5、充分水洗,如过染可盐酸酒精分化。
6、蒸馏水洗。
7、用Masson 丽春红酸性复红液5-10min。
8、以2%冰醋酸水溶液浸洗片刻。
9、1%磷钼酸水溶液分化3-5min。
10、不经水洗,直接用苯胺蓝或光绿液染5min。
11、以0.2%冰醋酸水溶液浸洗片刻。
12、95%酒精、无水酒精、二甲苯透明、中性树胶封固。
结果：胶原纤维、粘液、软骨呈蓝色(如光绿液染色为绿色)，胞浆、肌肉、纤维素、神经胶质呈红色，胞核黑蓝色。
体会与说明：1、控制好染色步骤。
2、组织固定起着很重要的作用，根据不同的固定液可延长或缩短染色时间。
3、0.2%冰醋酸水溶液洗，可使色调清晰鲜艳。
4、磷钼酸水溶液对丽春红、酸性复红有分化作用，分化时镜下控制，肌纤维和纤维素呈红色，胶原纤维呈淡粉红色即可。
masson三色染色液使用方法
Masson三色染色液说明书【产品名称】Masson三色染色液【包装规格】货号：DC0032套组包装规格：8×20ml/盒、8×100ml/盒、8×250ml/盒【预期用途】主要用于组织中结缔组织、肌肉和胶原纤维的组织细胞学染色。
【检验原理】Masson三色染色又称马松染色，是胶原纤维染色权威而经典的技术方法，所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。
该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关：分子的大小由分子量来体现，小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织；而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织，苯胺蓝的分子量很大，染色后肌纤维呈红色，胶原纤维呈蓝色，主要用于区分胶原纤维和肌纤维。
【主要组成成分】试剂组成主要成分1、Weigert铁苏木素A液苏木素2、Weigert铁苏木素B液三氯化铁3、酸性乙醇分化液乙醇4、蓝化液碳酸盐5、丽春红品红染色液丽春红、品红6、乙酸溶液乙酸7、磷钼酸溶液磷钼酸8、苯胺蓝染色液苯胺蓝【储存条件及有效期】5℃～35℃保存，原包装未开封染色液的有效期为l8个月，在有效期内的已开封染色液建议在开封后6个月内使用完，每次用后应及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。
【样本要求】组织片充分固定和脱蜡。
【检验方法】1、组织固定于Bouin氏固定液(另购)或Zenker氏固定液(另购)或10%中性福尔马林固定液(另购)等，流水冲洗，常规脱水包埋；2、切片常规脱蜡至水；3、取适量的Weigert铁苏木素A液和Weigert铁苏木素B液等量混合,即为Weigert铁苏木素染色液，用Weigert铁苏木素染色液染色，流水稍洗；4、酸性乙醇分化液分化数秒，流水冲洗数分钟；5、蓝化液返蓝数秒，流水冲洗数分钟；6、丽春红品红染色液染色数分钟，流水稍冲洗；7、将蒸馏水:乙酸溶液按一定的比例配制乙酸工作液，用乙酸工作液洗切片；8、磷钼酸溶液处理后，倾去玻片上磷钼酸溶液(不用水洗)；9、苯胺蓝染色液复染，倾去玻片上染色液(不用水洗)；10、用乙酸工作液处理切片，至切片无蓝色脱出(必要时镜下控制)；11、95%乙醇迅速脱水，无水乙醇脱水数次后，二甲苯透明，中性树胶封固。
病理学技术特殊染色Masson三色染色法
病理学技术特殊染色Masson三色染色法
试剂：
①Regaud苏木精：苏木精1克溶于蒸馏水80毫升，加温溶解，冷却；加95%酒精和甘油各10毫升，数日后使用
②丽春红G酸性品红液：丽春红G 0.7克，酸性品红0.3克，蒸馏水 99毫升，冰醋酸1毫升
③0.2%醋酸水溶液：冰醋酸1毫升，蒸馏水200毫升
④1%磷钼酸水溶液：磷钼酸1克，蒸馏水100毫升
⑤蓝水溶液：苯胺蓝2克，蒸馏水98毫升，冰醋酸2毫升
⑥1%亮绿水溶液：亮绿1克，蒸馏水100毫升，冰醋酸1毫升
方法：
⑴石蜡切片脱蜡至水
⑵含汞固定者须脱汞去碘
⑶自来水洗，蒸馏水洗
⑷Regaud苏木精或Weigert苏木精染细胞核5~10分钟，充分水洗
⑸过染用盐酸酒精分色，蒸馏水洗
⑹丽春红G酸性品红液染色5~10分钟
⑺0.2%醋酸水溶液分色短时
⑻1%磷钼酸水溶液1~3分钟
⑼直接用苯胺蓝或亮绿液染5分钟
⑽0.2%醋酸水溶液洗短时
⑾95%酒精及无水酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封片
结果：
胶原纤维、黏液、软骨蓝色或绿色（亮绿染色）；
细胞质、肌肉、纤维素、神经胶质红色；
细胞核蓝黑色。
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改良Masson三色染色液使用说明
货号：G1345
规格：8×50ml/8×100ml
有效期：12个月有效
产品简介：
结缔组织狭义上是指其含有的三种纤维：胶原纤维、网状纤维、弹力纤维、而胶原纤维（collagen fiber）是分布最广、含量最多的一种纤维。
Masson三色染色又称马松染色，是结缔组织染色中最经典的一种方法，是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。
所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。
该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关：分子的大小由分子量来体现，小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织，而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。
然而，淡绿或苯胺蓝的分子量很大，因此Masson染色后肌纤维呈红色，胶原纤维呈绿色或蓝色，主要用于区分胶原纤维和肌纤维。
改良Masson染色胶原纤维呈蓝色，肌纤维、胞质、纤维素、角蛋白和红细胞呈红色，胞核呈蓝褐色，主要用于区分胶原纤维和肌纤维。
改良Masson三色染色与常规Masson三色染色的区别在于采用天青石蓝苏木素淡染细胞核。
其特点在于：分化时间短(1～2分钟)；色彩清晰鲜艳；适用范围广，适宜于组织的石蜡切片、冰冻切片等染色；所染切片保存时间长且不易褪色。
改良Masson染色胶原纤维呈蓝色，肌纤维、胞质、纤维素、角蛋白和红细胞呈红色，细胞核呈蓝色，主要用于区分胶原纤维和肌纤维。
产品组成：
规格
8×50ml8×100ml Storage
名称
试剂(A):Bouin液50ml100ml RT
试剂(B):天青石蓝染色液50ml100ml4℃避光
试剂(C):Mayer苏木素染色液50ml100ml4℃避光
试剂(D):酸性乙醇分化液50ml100ml RT
试剂(E):丽春红品红染色液50ml100ml RT避光
试剂(F):磷钼酸溶液50ml100ml RT避光
试剂(G):苯胺蓝染色液50ml100ml RT避光
试剂(H):弱酸溶液50ml100ml RT
自备材料：
10%的福尔马林、蒸馏水、系列乙醇、二甲苯、染缸
操作步骤（仅供参考）：
1、组织固定于10%的福尔马林中，常规脱水包埋。
2、切片厚4μm，常规脱蜡至水。
3、切片入Bouin液，于室温作用一晚或置入37℃的温箱内2h进行媒染，然后流水冲
洗至切片上的黄色消失。
4、天青石蓝染色液滴染2~3min。
稍水洗。
5、Mayer苏木素染色液滴染2~3min。
稍水洗。
6、酸性乙醇分化液分化数秒。
流水冲洗10min。
7、丽春红品红染色液滴染10min。
蒸馏水稍冲洗。
8、磷钼酸溶液处理约10min。
9、倾去上液，切片不用水洗，直接滴入苯胺蓝染色液染5min。
10、弱酸溶液处理2min。
11、95%的乙醇快速脱水。
无水乙醇脱水3次，每次5~10s。
12、二甲苯透明3次，每次1~2min。
13、中性树胶封固。
染色结果：
胶原纤维蓝色
肌纤维、胞质、纤维素、角蛋白和红细胞红色
胞核蓝褐色
注意事项：
1、切片脱蜡应尽量干净。
2、酸性乙醇分化液的分化时间应该依据切片薄厚，组织的类别和新旧而定。
3、磷钼酸溶液的作用一方面是使染上红色的胶原纤维被分化成无色或淡红色，而肌纤
维纤维素等仍呈鲜红色；另一方面对胶原纤维又起媒染作用。
使胶原纤维与大分子染料的苯胺蓝液较易结合。
4、苯胺蓝液染色后用弱酸溶液处理，目的是除去原浆内的蓝色，是染色鲜艳和清晰。
如Zenker液固定的组织，弱酸溶液处理可延长至5min。
5、弱酸溶液可使色彩更清晰鲜艳，如使用量大可自行配置0.1-0.3%乙酸溶液予以替
代。
6、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。