微生物大小及菌群数量的测定实验
实验九微生物菌体大小及菌群数量的测定
实验九微生物菌体大小及菌群数量的测定生科15.2 周罡 201500181104【实验目的】1. 学习并掌握使用显微测微尺测定微生物大小的方法。
2. 学习并掌握使用血细胞计数板测定微生物细胞或孢子数量的方法。
【实验原理】（一）微生物菌体大小的测定微生物大小的测定，需借助于特殊的测量工具——显微测微尺，它包括目镜测微尺和镜台测微尺两个互相配合使用的部件。
镜台测微尺（图1）是一个在特制载玻片中央封固的标准刻尺，其尺度总长为1mm，精确分为10个大格，每个大格又分为10个小格，共100个小格，每一小格长度为0.01mm，即10μm。
刻线外有一直径为Φ3，线粗为0.1mm的圆，以便调焦时寻找线条。
刻线上还覆盖有厚度为0.17mm的盖玻片，可保护刻线久用而不损伤。
镜台测微尺并不直接用来测量细胞的大小，而是用于校正目镜测微尺每格的相对长度。
图1 镜台测微尺图2 目镜测微尺目镜测微尺（图2）是一块可放入接目镜内的圆形小玻片，其中央有精确的等分刻度，一般优彼等分为50小格和100小格两种。
测量时，需将其放在接目镜中的隔板上，用以测量经显微镜放大后的细胞物像。
由于不同显微镜或不同的目镜和物镜组合放大倍数不同，目镜测微尺每小格在不同条件下所代表的实际长度也不一样。
因此，用目镜测微尺测量微生物大小时，必须先用镜台测微尺进行校正，以求出该显微镜在一定放大倍数的目镜和物镜下，目镜测微尺每小格所代表的长度。
然后根据微生物细胞相当于目镜测微尺的格数，即可计算出细胞的实际大小。
（二）显微镜计数显微技术法是将少量待测样品的悬浮液置于一种特定的具有特定容积的载玻片上（又称计菌器），于显微镜下直接观察、计数的方法。
目前国内外常用的计菌器有：血细胞计数板、Peteroff-Hauser计菌器以及Hawksley计菌器等，它们可用于各种微生物单细胞（孢子）悬液的计数，基本原理相同。
其中血细胞计数板较厚，不能使用油镜，常用于个体相对较大的酵母菌细胞、霉菌孢子等的计数，而后两种计数器较薄，可用油镜对细菌等较小的细胞进行观察和计数。
微生物大小测定及计数
2、在不改变目镜和目镜测微尺，而改用不同放大倍数的物镜来测定同一菌体大小时，其测定结果是否相同，为什么？
答：测定结果不相同。因为在不同倍数的目镜下，细菌大小发生变化，而目镜测微尺每格大小不变，所以测定结果不同。
四、仪器和其他用品：载玻片、盖玻片、显微镜、镊子、接种环、血球计数板、显微测微尺、滴管、酒精灯
五、操作步骤：
1、微生物大小的测定
（1）取下显微镜右目镜，将目镜测微尺放在目镜镜筒内的隔板上，然后放上目镜透镜，将目镜装回镜筒。
（2）校正目镜测微尺：在低倍镜下调节焦距，当清晰看到镜台测微尺的刻度后，用推进器移动镜台测微尺，使两尺在某一区域内两线完全重合，然后分别输出两重合线之间镜台测微尺和目镜测微尺所占的格数。
（2）将血球计数板盖上盖玻片，用无菌毛细管吸取少量摇匀的酿酒酵母菌液，滴在盖玻片的一个顶点，待菌液从盖玻片另一对角流出为满。
（3）先在低倍镜下找到计数室，再用高倍镜计数。每小格内的菌数不能超过8个为宜。当每小格内的菌数过多时，适当稀释。
（4）任选5个中格计数（5个中格不可以挨着；酵母菌出芽计1个菌体；计数时，位于边线上的细胞，记上不记下，计左不计右）
（3）用同样的方法在高倍镜下和油镜下进行校正。并计算目镜测微尺每小格所代表的实际长度。
（4）制酵母菌玻片：用接种环取菌在蒸馏水中涂抹，加热干燥，用美兰染色1’30”，流水脱色，自然干燥。
（5）先在低倍镜和高倍镜下找到菌株，再在油镜下测出酵母菌的长度和宽度。重复3次并记下平均值。
2、酵母菌的显微计数
（1）将血球计数板洗净，再用95%乙醇棉球擦洗，自然干燥。
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微生物大小及数量测定
一、实验目的：
微生物实验微生物数量和大小测定
目镜测微尺 镜台测微尺
1.利用镜台测微尺 测定目镜测微尺旳 每格绝对值
2.目镜测微尺每格 长度（um）＝两 重叠线间镜台测微 尺格数×10/两重 叠线间目镜测微尺 格数
测定细胞数量旳常用措施 ➢稀释平板计数法 对样品稀释培养，据形成旳菌落数计数。 优点：活菌计数措施，对设备要求不高。 缺陷：操作复杂。
➢显微镜直接计数法 使用血球计数板在显微镜下直接计数。 优点：操作简便，计数直观。 缺陷：计数成果为活细菌和死菌体旳总和。
➢光电比浊法
光电比浊法是利用在一定旳范围内，微生物细 胞浓度与透光度成反比旳原理。当细菌细胞在 溶液中数量越多，浊度越大，在光电比色计中 测定时所吸收旳光线越多。
2、细胞大小旳测量
酵母菌悬液滴在载玻片上，盖上盖玻片，置显微镜 载物台上。用目镜测微尺测量细胞宽和长。
三、试验成果
1.计算出目镜测微尺校正成果（物10×和40×） 2.酵母菌大小测定酵母菌大小测定,选择5-8个 酵母菌，测定其40×大小范围。
四、思索题 p51 2(2)
试验(二) 微生物数量旳测定
微生物实验微生物数 量和大小测定
试验(一) 微生物大小旳测定
一、目旳要求
学习使用镜台测微尺和目镜测微尺；在显微镜下测定微生 物大小。
二、试验原理
镜台测微尺是中央部分刻有精确等分线旳载玻 片，一般是l mm等分为100格，每格长0.01 mm(即10 um) ，用于校正目镜测微尺每格旳相 对长度。
一、目旳要求
1、明确血细胞计数板计数旳原理。 2、掌握使用血细胞计数板进行微 生物计数旳措施。
微生物大小的测定报告
微生物大小的测定报告微生物大小的测定报告微生物是生物界中一类非宏观、非个体、非生物和非细胞的微小生物的总称。
它们具有体积小、数量大、分布广、种类多、生命力旺盛等特点，与人类的生产、生活密切相关。
微生物大小的测定是微生物学研究中的一项基本技术，对于了解微生物的种类、生长和繁殖等方面具有重要意义。
本文将详细介绍微生物大小的测定方法、测定步骤以及结果分析等方面的内容。
一、测定方法微生物大小的测定方法有很多，如显微测量法、压滤法、离心法等。
其中，显微测量法是最常用的一种方法，其原理是利用显微镜对微生物的大小进行直接测量。
具体步骤如下：1.准备显微镜、血球计数板、盖玻片、吸管等实验器材。
2.用吸管吸取一定量的微生物培养液，轻轻滴在血球计数板上，然后盖上盖玻片。
3.在显微镜下观察并计数，记录每个视野中的微生物数量和大小。
4.重复以上步骤多次，求平均值，即可得到微生物的平均大小。
二、测定步骤1.准备试剂和器材（1）试剂：无菌水、生理盐水、无菌玻璃珠、无菌平皿等。
（2）器材：移液器、无菌吸管、无菌涂布器、无菌镊子、电子天平等。
2.制备菌悬液（1）用电子天平称取适量的细菌干粉，加入无菌生理盐水，摇匀。
（2）用移液器吸取上述菌悬液，加入无菌平皿中，加入无菌玻璃珠，摇匀。
（3）用无菌涂布器将上述菌悬液涂布到平皿表面，静置片刻，让细菌贴壁生长。
3.测定菌落大小（1）在上述平皿中加入无菌水，让水面覆盖平皿表面。
（2）用无菌镊子将平皿翻转，让细菌接种到无菌水表面，涂布均匀。
（3）静置约30分钟，让细菌形成单个菌落。
（4）用游标卡尺测量每个菌落的大小，记录数据。
4.数据处理和分析（1）对每个平皿中的菌落数量和大小进行统计，求出平均值。
（2）将平均值与对照组进行比较，判断细菌的生长情况。
三、结果分析通过上述测定步骤，我们得到了微生物的大小数据。
根据数据可以得出以下结论：1.同一时间内，不同微生物的大小有差异。
例如，细菌和原生动物的大小相差很大，这与它们的生物学特性有关。
微生物大小的测定及显微镜直接计数法
微生物大小和数量的测定一、目的要求1．学习并掌握使用显微镜测微尺测定微生物大小的方法。
2．增强微生物细胞大小的感性认识。
3．了解血球计数板的构造、明确其计数原理。
4．学习并掌握使用血球计数板测定微生物细胞或孢子数量的方法。
二、基本原理l.显微测微尺显微测微尺可用于测量微生物细胞或孢子的大小，包括镜台测微尺和目镜测微尺两个部件。
目镜测微尺（图1）是一块可放入接目镜内的圆形小玻片，其中央有精确的等分刻度，有等分为50小格和100小格两种。
测量时，需将其放在接目镜中的隔板上，用以测量经显微镜放大后的细胞物象。
由于不同显微镜或不同的目镜和物镜组合放大倍数不同，目镜测微尺每小格所代表的实际长度也不一样。
因此，用目镜测微尺测量微生物大小时，必须先用镜台测微尺进行校正，以求出该显微镜在一定大放大倍数的目镜和物镜下，目镜测微尺每小格所代表的相对长度。
然后根据微生物细胞相当于目镜测微尺的格数，即可计算出细胞的实际大小。
镜台测微尺全长1mm，等分为100格，每格0.01mm。
用于校正目镜测微尺每小格的长度.目镜测微尺每格长度（μm）=两重合线间镜台测微尺格数×10两重合线间目镜测微尺格数2.表示方法球菌用直径来表示其大小；杆菌则用宽和长的范围来表示。
如金黄色葡萄球菌直径约为0.8µm，枯草芽孢杆菌大小为0.7~0.8×2~3µm。
图1：目镜测微尺和镜台测微尺3．显微直接计数法：将小量待测样品悬浮液置于计菌器上，于显微镜下直接计数的一种简便、快速、直观的方法。
显微计数法适用于各种含单细胞菌体的纯培养悬浮液，如酵母、细菌、霉菌孢子等。
菌体较大的酵母菌或霉菌孢子可采用血球计数板，一般细菌则采用彼得罗夫·霍泽（Petrof Hausser）细菌计数板或Hawksley计数板。
三种计数板的原理和部件相同，只是细菌计数板较薄，可以使用油镜观察。
而血球计数板较厚，不能使用油镜，计数板下部的细菌不易看清。
微生物大小的测定及数量的测定
微生物的大小测定与数量的测定一、实验目的1．学习了解测微尺的结构，掌握测定微生物大小的方法。
2．观察酵母菌的形态，掌握鉴别死活酵母菌的方法。
3．学习了解血球计数板的结构，掌握微生物数量测定的方法。
二、实验内容1．在低倍镜和高倍镜下求出目镜测微尺的校正值。
（1）目镜测微尺和镜台测微尺目镜测微尺是一块圆形玻片，在玻片的中央刻有一小尺，它是在 5 毫米内作50 等分刻制的，每一等份为0.1 毫米。
另一规格是 5 毫米作100 等分，每等分为0.05毫米。
镜台测微尺是刻在载玻片中央的小尺，它是在1 毫米内作100 等分刻成的，每等分10 微米。
（2）目镜测微尺校正的方法将镜台测微尺上面的透镜片取下，把目镜测微尺放在光阑上，刻度朝下。
把镜台测微尺置于载物台上，用低倍物镜检视，使测微尺位于视野中央。
注意区分视野内两把尺哪个是目镜测微尺，哪个是镜台测微尺。
利用推进器或转动目镜使两尺的第一条线（0 线）互相重合，然后找出另一条重合线。
如重合线较多选取距0 线最远的重合线。
记下两条重合线之间两尺的刻度，依公式算出目镜测微尺的校正值。
目镜测微尺校正值（每刻度微米数）= 两重叠刻度间镜台测微尺格数×10两重叠刻度间目镜测微尺格数2．用美兰水浸片法观察酿酒酵母（saccharomyces cerevisiac）的形态，注意出芽繁殖和死活酵母菌的染色形态，并测量大小。
3．用血球板计算黑曲霉孢子的数量。
（1）血球计数板3．用血球板计算黑曲霉孢子的数量。
（1）血球计数板利用血球计数板在显微镜下直接计数是一种常见的微生物计总数的方法。
因为计数板载片和盖片间的容积一定，所以可以根据显微镜下观察到的微生物数目来计算单位体积内微生物总数。
血球计数板是一只特制载玻片。
载片上有两个方格网，每一方格网共分九个大方格，其中间的一个大方格用来做微生物计数，所以又称为计数室。
计数室的刻度一般有两种，一种是每个大方格分成16 个中方格，每中方格又分成25个小方格。
微生物大小与菌群数量的测定实验 史倩
微生物大小与菌群数量的测定实验一、实验目的1.学习并掌握微生物大小及菌落数量的测量方法2.了解血细胞计数板和显微镜测微尺的使用二、实验原理酵母菌（yeast）是一群单细胞的真核微生物。
这个词语为无分类学意义的普通名称，通常用于以裂殖或芽殖来进行无性繁殖的单细胞真菌，以与霉菌分开。
大多数酵母菌为单细胞，在光学显微镜下，一般呈卵圆形、圆形、圆柱形或柠檬形。
大小约为（1-5）μm╳（5-30）μm，最大可达100μm。
各种酵母菌有其一定的大小和形态，但也随菌龄和环境条件而异。
枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）是芽孢杆菌属的一种。
单个细胞0.7～0.8×2～3μm，着色均匀。
无荚膜，周生鞭毛，能运动。
革兰氏阳性菌，芽孢0.6～0.9×1.0～1.5μm，椭圆到柱状，位于菌体中央或稍偏，芽孢形成后菌体不膨大。
显微测微尺包括镜台测微尺和目镜测微尺两部分。
镜台测微尺是中央部分刻有精确等分线的载玻片，一般将1mm等分为100格，每格长l0μm（即0.0lmm），是专门用来校正目镜测微尺的。
校正时，将镜台测微尺放在载物台上，由于镜台测微尺与细胞标本是处于同一位置，都要经过物镜和目镜的两次放大成象进入视野，因此从镜台测微尺上得到的读数就是细胞的真实大小，所以可求出目镜测微尺每格所代表的长度，然后移去镜台测微尺，换上待测标本片，用校正好的目镜测微尺在同样放大倍数下测量微生物大小。
目镜测微尺是一块可放在接目镜内的隔板上的圆形小玻片，其中央刻有精确的刻度，等分成100小格两种，每5小格间有一长线相隔。
由于所用接目镜放大倍数和接物镜放大倍数的不同，目镜测微尺每小格所代表的实际长度也就不同，因此，目镜测微尺不能直接用来测量微生物的大小，在使用前必须用镜台测微尺进行校正，以求得在一定放大倍数的接目镜和接物镜下该目镜测微尺每小格的相对值，然后才可用来测量微生物的大小。
镜台测微尺是一个特制载玻片中央封固的标准刻尺，其尺度总长为1mm，精确分为10个大格，每个大格又分为10个小格，共100个小格，每一个小格长度为0.01mm，即10μm。
微生物菌体大小及菌群数量的测定
姓名系年级 2011级生科2班组别四同组者科目微生物学实验题目霉菌的形态观察学号霉菌的形态观察一．实验目的1．掌握配制合成马铃薯培养基的一般方法。
2．学习并掌握观察霉菌形态观察法——小室培养。
3．了解并掌握青霉、根霉、毛霉、黑曲霉四种霉菌的形态结构。
二．实验器材1．菌种：青霉、根霉、毛霉、黑曲霉。
2．试剂：马铃薯、葡萄糖、琼脂、水、氢氧化钠、盐酸、蒸馏水、20%甘油3．仪器或其他用具：显微镜、载玻片、酒精灯、接种环、盖玻片、平皿、U型管、滤纸、解剖刀、吸管、镊子三．实验原理1.霉菌：霉菌是形成分枝菌丝的真菌的统称，在固体基质上生长时，部分菌丝深入基质吸收养料，称为基质菌丝或营养菌丝；向空中伸展的称气生菌丝，可进一步发育为繁殖菌丝，产生孢子。
大量菌丝交织成绒毛状、絮状或网状等，称为菌丝体。
菌丝体常呈白色、褐色、灰色，或呈鲜艳的颜色（菌落为白色毛状的是毛霉，绿色的为青霉,黄色的为黄曲霉），有的可产生色素使基质着色。
2.根霉：根霉的菌丝无隔膜、有分枝和假根，营养菌丝体上产生匍匐枝，匍匐枝的节间形成特有的假根，从假根处向上丛生直立、不分枝的包囊梗，顶端膨大形成圆形的孢子囊，囊内产生孢囊孢子。
孢姓名系年级 2011级生科2班组别四同组者科目微生物学实验题目霉菌的形态观察学号子囊内囊轴明显，球形或近球形，囊轴基部与梗相连处有囊托。
根霉除了有无性生殖外还有有性生殖，即产生接合孢子进行接合生殖。
3.毛霉：菌丝无隔、多核、分枝状，在基物内外能广泛蔓延，无假根或匍匐菌丝。
不产生定形淡黄色菌落。
菌丝体上直接生出单生、总状分枝或假轴状分枝的孢囊梗。
各分枝顶端着生球形孢子囊，内有形状各异的囊轴，但无囊托。
囊内产大量球形、椭圆形、壁薄、光滑的孢囊孢子。
孢子成熟后孢子囊即破裂并释放孢子。
有性生殖借异宗配合或同宗配合，形成一个接合孢子。
某些种产生厚垣孢子。
毛霉菌丝初期白色，后灰白色至黑色，这说明孢子囊大量成熟。
4.黑曲霉：菌落呈黑褐色，顶囊大球形，小梗双层，分生孢子为球形，呈黑、黑褐色，平滑或粗糙。
微生物大小与数量的测定实验报告
微生物大小与数量的测定实验报告一、实验目的本次实验旨在掌握使用显微镜测量微生物大小的方法，以及学会运用血球计数板对微生物数量进行测定。
通过实验操作和数据处理，深入了解微生物的形态特征和种群密度，为后续的微生物学研究打下基础。
二、实验原理（一）微生物大小的测定微生物细胞的大小是微生物的基本特征之一。
使用显微镜测微尺可以较为准确地测量微生物细胞的长度、宽度和直径等参数。
显微镜测微尺包括目镜测微尺和镜台测微尺。
目镜测微尺是一块可放在目镜内的圆形小玻片，上面刻有刻度；镜台测微尺是一块特制的载玻片，中央有精确的刻度，用于校正目镜测微尺。
（二）微生物数量的测定血球计数板是一种专门用于计算较大单细胞微生物数量的工具。
它由一块特制的厚玻璃片制成，玻片上有四个槽构成三个平台。
中间的平台又被一短横槽隔成两半，每半边上面各刻有一个方格网。
方格网上刻有 9 个大方格，其中只有中间的一个大方格为计数室。
计数室的刻度一般有两种规格，一种是一个大方格分成 16 个中方格，而每个中方格又分成 25 个小方格；另一种是一个大方格分成 25 个中方格，而每个中方格又分成 16 个小方格。
但无论哪种规格，每个大方格的边长均为 1 毫米，盖上盖玻片后，计数室的容积是一定的。
因此，在一定体积的菌液中，通过计算微生物在计数室中的数量，就可以换算出菌液中微生物的数量。
三、实验材料与仪器（一）材料枯草芽孢杆菌、酿酒酵母的菌悬液。
（二）仪器显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、血球计数板、盖玻片、滴管、擦镜纸、吸水纸等。
四、实验步骤（一）微生物大小的测定1、安装目镜测微尺将目镜测微尺装入目镜的隔板上，注意有刻度的一面朝下。
2、校正目镜测微尺（1）将镜台测微尺置于载物台上，先用低倍镜观察，找到镜台测微尺的刻度线。
（2）移动镜台测微尺，使镜台测微尺与目镜测微尺的刻度线平行，并使两者的“0”刻度线重合。
（3）换用高倍镜观察，找出两尺再次重合的刻度线。
分别记录目镜测微尺和镜台测微尺在重合线段内各自的格数。
微生物细胞大小的测定方法
微生物细胞大小测定一、实验目的了解目镜测微尺和镜台测微尺的构造和使用原理，掌握微生物细胞大小的测定方法。
二、实验原理微生物细胞的大小是微生物重要的形态特征之一，由于菌体很小，只能在显微镜下来测量。
用于测量微生物细胞大小的工具有目镜测微尺和镜台测微尺。
目镜测微尺（图-1）是一块圆形玻片，在玻片中央把5mm长度刻成50等分，或把10 mm长度刻成100等分。
测量时，将其放在接目镜中的隔板上(此处正好与物镜放大的中间像重叠)来测量经显微镜放大后的细胞物象。
由于不同目镜、物镜组合的放大倍数不相同，目镜测微尺每格实际表示的长度也不一样，因此目镜测微尺测量微生物大小时须先用置于镜台上的镜台测微尺校正，以求出在一定放大倍数下，目镜测微尺每小方格所代表的相对长度。
镜台测微尺（图20-2）是中央部分刻有精确等分线的载玻片，一般将lmm等分为100格，每格长l0μm（即0.0lmm），是专门用来校正目镜测微尺的。
校正时，将镜台测微尺放在载物台上，图1目镜测微尺图2 镜台测微尺由于镜台测微尺与细胞标本是处于同一位置，都要经过物镜和目镜的两次放大成象进入视野，即镜台测微尺随着显微镜总放大倍数的放大而放大，因此从镜台测微尺上得到的读数就是细胞的真实大小，所以用镜台测微尺的已知长度在一定放大倍数下校正目镜测微尺，即可求出目镜测微尺每格所代表的长度，然后移去镜台测微尺，换上待测标本片，用校正好的目镜测微尺在同样放大倍数下测量微生物大小。
三、实验器材1．活材料：酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、枯草杆菌(Baccillus subtilis)染色标本片。
2．器材：显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、擦镜纸。
四、实验方法1．目镜测微尺的校正把目镜的上透镜旋下，将目镜测微尺的刻度朝下轻轻地装入目镜的隔板上，把镜台测微尺置于载物台上，刻度朝上。
先用低倍镜观察，对准焦距，视野中看清镜台测微尺的刻度后，转动目镜，使目镜测微尺与镜台测微尺的刻度平行，移动推动器，使两尺重叠，再使两尺的“0”刻度完全重合，定位后，仔细寻找两尺第二个完全重合的刻度，计数两重合刻度之间目镜测微尺的格数和镜台测微尺的格数。
微生物的计数实验报告
微生物的计数实验报告引言微生物是一类生活在我们周围、无法肉眼直接观察到的微小生物体，它们在自然界中起着重要的作用。
为了了解微生物的分布和数量，科学家们开展了许多微生物计数实验。
本实验旨在通过简单的计数实验方法，了解微生物的数量和分布情况。
材料与方法实验材料•试管•试管架•高倍显微镜•盖玻片•种植平板•物理盐水•洗净的玻璃滴管•显微镜目镜刻度尺实验步骤1.准备工作：将试管和盖玻片用70%乙醇消毒，待干燥后用吹吸管将物理盐水加入到试管中。
2.取一定量的样品：将待测样品取出一定量加入到试管中，摇匀使样品均匀分布。
3.进行稀释：根据需要，将待测试样品进行适当稀释。
4.取样：用洗净的玻璃滴管取出适量的稀释液，滴于盖玻片上。
5.进行计数：将盖玻片放置在显微镜下，调节到适当倍数，使用显微镜目镜刻度尺计数。
计数时应随机选取视野内的区域进行计数，统计每个区域内微生物的数量，并计算平均值。
6.记录结果：记录每个区域的计数结果，并将结果求平均得到最终的微生物数量。
结果与讨论通过以上实验步骤，我们得到了微生物的数量统计结果。
根据实验结果，我们可以得出一些结论和讨论。
首先，微生物的数量和分布与样品来源和环境密切相关。
我们可以通过对不同样品的计数实验，对微生物的数量和分布情况进行比较研究。
这有助于我们了解微生物在不同环境中的生长和繁殖情况。
其次，微生物计数实验也可以评估环境中微生物的污染程度。
通过对环境样品的计数实验，我们可以判断环境是否存在微生物污染，进而采取相应的措施进行清洁和消毒。
此外，微生物计数实验还可以用于研究微生物的生命周期和生长速率。
通过定期进行微生物计数实验，我们可以观察微生物数量的变化，进而了解其生命周期和生长速率。
结论微生物的计数实验是研究微生物数量和分布的重要手段。
通过本实验，我们了解了微生物计数实验的基本步骤，并对微生物数量和分布进行了一定的观察和分析。
微生物计数实验对于环境监测、食品安全、医学研究等领域具有重要意义，有助于我们更好地了解和控制微生物的生长和繁殖。
水产微生物实验—微生物大小及数量测定
实验八微生物大小及数量测定一、基础知识（一）微生物大小测定微生物细胞的大小是微生物基本的形态特征，也是分类鉴定的依据之一。
微生物大小的测定，需要在显微镜下，借助于特殊的测量工具——测微尺，包括目镜测微尺和镜台测微尺。
镜台测微尺是中央部分刻有精确等分线的载玻片，一般是将lmm等分为100格，每格长 m)。
镜台测微尺并不直接用来测量细胞的大小，而是用于校正目镜测微尺0．01mml(即10每格的相对长度。
目镜测微尺是一块可放入接目镜内的圆形小玻片，其中央有精确的等分刻度，有等分为50小格和100小格两种。
测量时，需将其放在接目镜中的隔板上，用以测量经显微镜放大后的细胞物象。
由于不同显微镜或不同的目镜和物镜组合放大倍数不同，目镜测微尺每小格所代表的实际长度也不一样。
因此，用目镜测微尺测量微生物大小时，必须先用镜台测微尺进行校正，以求出该显微镜在一定放大倍数的目镜和物镜下，目镜测微尺每小格所代表的相对长度。
然后根据微生物细胞相当于目镜测微尺的格数，即可计算出细胞的实际大小。
球菌用直径来表示其大小，杆菌则用宽和长的范围来表示。
如金黄色葡萄球菌直径约为0．8µm。
枯草芽孢杆菌大小为0.7-0.8×2-3µm。
（二）微生物数量的测定单细胞微生物个体生长时间较短，很快进入分裂繁殖阶段，因此，个体生长难以测定，除非特殊目的，否则单个微生物细胞生长测定实际意义不大。
微生物的生长与繁殖(个体数目增加)是交替进行的，它们的生长一般不是依据细胞的大小，而是以繁殖，即群体的生长作为微生物生长的指标。
群体生长表现为细胞数目的增加或细胞物质的增加。
测定细胞数目的方法有显微镜直接计数法、平板菌落计数法、光电比浊法、最大近似值法(MPN)，以及膜过滤法等，测定细胞物质的方法有细胞干重的测定，细胞某种成分如氮的含量、RNA和DNA的含量测定，代谢产物的测定等。
总之，测定微生物生长量的方法很多，各有优缺点，工作中应根据具体情况要求加以选择。
实验 微生物的大小测量
实验四微生物的大小测量、微生物的计数一、实验目的和要求1.了解测微尺的构造和原理,学习接目测微尺的校正方法及微生物大小的测定。
2.学习利用血球计数板对微生物进行计数的原理和方法。
二、实验原理微生物细胞的大小是微生物形态特征之一.也是分类鉴定的依据之一.其大小的测量是在显微镜下用接目测微尺来测量.由于在目镜中观测到的是显微镜放大后的物像,又因为放大倍数不同时,目镜测微尺每格实际代表的长度也随之变化,因此目镜测微尺在使用前必须用标准物镜尺进行校正.接目测微尺是一块圆形玻璃片,其中央尺等分成100格.物镜测微尺又称标准尺.是一块中央刻有精确刻度的载玻片,放在载物台上使用的,专用于校正接目测微尺.常用的是0.01毫米物镜测微尺.是将长1毫米的直线等分成100个小格,每格长度即为0.01毫米(10微米),利用血球计数板在显微镜下直接计数,是一种常用的微生物计数方法.此法是将单细胞微生物的菌悬液或孢子悬液,注入血球计数板与盖玻片之间的计数室中,在显微镜下在进行计数的.由于计数室的容积是一定的,所以可根据显微镜下观察的微生物的数量计算出单位体积内的微生物总数.血球计数板的计数室如下图所示,其中央为计数室,通常有两种规格25×16型或16×25型.常用的为25×16型,其长和宽各为1毫米,盖上盖玻片后,其间的距离为0.1毫米,因此计数室的容积为0.1立方毫米.细胞数（CFU/mL）=50000×A×B式中：A－5个中方格中细胞总数B－菌液的稀释倍数血球计数扳的构造a.平面图(中间平台分为两半，各刻有一个方格网)b.侧面图(中间平台与盖玻片之间有高度为0.1毫米的间隙)血球计数板计数网的分区和分格三、实验材料和器材1、菌种: 固体斜面培养18-24小时酵母菌2、培养基及试剂:马铃薯固体培养基、二甲苯、95％乙醇、苯酚等3、器材及耗材:双目显微镜、恒温培养箱、恒温干燥箱、洁净工作台、紫外线灯管、紫外线灭菌手推车、血球计数板、接种环、试管、酒精灯、滤纸、擦镜纸、盖玻片、载玻片、打火机、棉花、滴瓶、圆塑料篓、长塑料篓、血红蛋白吸管、10mL 塑料离心管、物镜物镜测微尺、目镜测微尺等四、实验操作步骤一）微生物大小测量1.校正目镜测微尺：将目镜头上的透镜旋下，把目镜测微尺裝入镜筒内，在显微镜里看到目镜测微尺的刻度。
实验五微生物数量和大小测定霉菌的观察
生长条件
霉菌可以在多种环境条 件下生长，如湿度、温
度、pH等。
分布广泛
霉菌在自然界中分布广 泛，可在土壤、空气、
水体等环境中生长。
03 实验步骤
样品采集与制备
样品采集
选择具有代表性的样品，如食品、土壤、水等，采集时要避免污染和交叉感染。
样品制备
将采集的样品进行适当处理，如破碎、稀释、过滤等，以便后续的实验操作。
实验五：微生物数量和大小测定霉菌的观察
目 录
• 实验目的 • 实验原理 • 实验步骤 • 实验结果与分析 • 结论与讨论 • 参考文献
01 实验目的
了解微生物数量和大小的测定方法
01
02
03
显微镜计数法
通过显微镜观察并计数样 品中的微生物数量，根据 视野范围和放大倍数计算 出微生物的数量。
平板计数法
将样品稀释后涂布在培养 基上，培养后统计菌落数 量，计算出样品中的微生 物数量。
流式细胞术
利用流式细胞仪对微生物 进行计数和大小测量，具 有快速、准确和高通量的 特点。
学习观察霉菌的方法和技巧
Hale Waihona Puke 010203
04
培养基制备
选择适合霉菌生长的培养基， 如PDA培养基，按照配方配
制培养基并灭菌。
接种与培养
参考文献
霉菌的形态特征
霉菌在显微镜下呈现丝状或分支状结构，通常为白色或灰色。
观察培养基
选择适合霉菌生长的培养基，如孟加拉红培养基或察氏培养基，以 促进霉菌的生长和观察。
计数方法
采用菌落计数法，通过在显微镜下观察培养基表面上的霉菌菌落数 量，计算出每克或每毫升样品中的霉菌数量。
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实验二：微生物细胞大小与数量的测定
实验二：微生物细胞大小与数量的测定一、实验目的与要求：（1）了解显微镜测定微生物大小与血球计数板测定微生物数量的原理。
（2）学习并掌握显微镜下测定微生物细胞大小的技术，包括目镜测微尺、物镜测微尺的校正技术与测定细胞大小的技术。
（3）了解血球计数板的结构，学习并掌握血球计数板计数微生物数量的技术，包括样品的点样、菌数计数的方法与计算。
二、实验原理1.微生物大小测定原理微生物细胞的大小，是微生物重要的形态特征之一，也是分类鉴定的依据之一。
由于菌体很小、只能在显微镜下来测量。
用于测量微生物细胞大小的工具有目镜测微尺和镜台测微尺。
目镜测微尺（图20-1）是一块圆形玻片，在玻片中央把5mm长度刻成50等分，或把10 mm长度刻成100等分。
测量时，将其放在接目镜中的隔板上(此处正好与物镜放大的中间像重叠)来测量经显微镜放大后的细胞物象。
由于不同目镜、物镜组合的放大倍数不相同，目镜测微尺每格实际表示的长度也不一样，因此目镜测微尺测量微生物大小时须先用置于镜台上的镜台测微尺校正，以求出在一定放大倍数下，目镜测微尺每小格所代表的相对长度。
镜台测微尺（图20-2）是中央部分刻有精确等分线的载玻片，一般将lmm等分为100格，每格长l0μm（即0.0lmm），是专门用来校正目镜测微尺的。
校正时，将镜台测微尺放在载物台上，图 20-1目镜测微尺由于镜台测微尺与细胞标本是处于同一位置，都要经过物镜和目镜的两次放大成象进入视野，即镜台测微尺随着显微镜总放大倍数的放大而放大，因此从镜台测微尺上得到的读数就是细胞的真实大小，所以用镜台测微尺的已知长度在一定放大倍数下校正目镜测微尺，即可求出目镜测微尺每格所代表的长度，然后移去镜台测微尺，换上待测标本片，用校正好的目镜测微尺在同样放大倍数下测量微生物大小。
2.血球计数板测定微生物数量的原理镜检计数法适用于各种含单细胞菌体的纯培养悬浮液，如有杂菌或杂质常不易分辨。
菌体较大的酵母菌或霉菌泡子可采用血球计数板；一般细菌则采用彼得罗夫·霍泽(Petroff Hausser)细菌计数板。
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微生物大小及菌群数量的测定实验
王康周三下午第一排
摘要：本次实验中，通过校正目镜测微尺，然后将染色的枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）、
酿酒酵母（Saccharomy cescerevisiae）至于镜下，分别测量长宽、并计算得到它们的大小；在血细胞计数板上滴加酿酒酵母，然后在高倍镜下进行计数，计算得到每毫升中酵母菌的总数。
关键词：测微尺；校正；血细胞计数板
前言：微生物细胞大小，是其形态特征重要标志之一。
每一种微生物在一定条件下，有其
相对固有的大小形态。
它是分类鉴定的依据之一。
微生物的大小测定可用测微尺测量，测微尺分为目镜测微尺和镜台测微尺两部分。
镜台测微尺是特制的载玻片，其中央有一全长1mm的刻度标尺，等分成100小格，每格长度为10um，可用它来校正目镜测微尺每小格的长度。
目镜测微尺是一块可放在目镜内的圆形薄片，其中央刻有50等分的小格，每小格的长度随目镜物镜放大倍数的大小而变动，在测量微生物菌体的大小之前，应预先用镜台测微尺来校正并计算出在某一放大倍数物镜下，目镜测微尺每小格所代表的实际长度，再以它作为测量微生物细胞的尺度，再计算出微生物的大小。
显微镜直接计数法是将小量待测样品的悬浮液置于一种特别的具有确定面积和容积的载玻片上(又称计菌器)，于显微镜下直接计数的一种简便、快速、直观的方法。
用血细胞计数板在显微镜下直接计数是一种常用的微生物计数方法。
该计数板是一块特制的载玻片，其上由四条槽构成三个平台；中间较宽的平台又被一短横槽隔成两半，每一边的平台上各列有一个方格网，每个方格网共分为九个大方格，中间的大方格即为计数室。
每一个大方格边长为lmm，则每一个大方格的面积为lmm2，盖上盖玻片后，盖玻片与载玻片之间的高度为0.lmm，所以计数室的容积为0.lmm3。
以25个中方格为例，5个中方格总菌数为A，菌落稀释倍数为B，则 1mL菌液中总菌数=A÷5×25×104×B。
1．材料和方法
1.1材料
1.1.1菌种酿酒酵母（Saccharomy cescerevisiae）枯草芽孢杆菌
（Bacillus subtilis）
1.1.2 溶液和试剂美蓝染液，蒸馏水
1.1.3 仪器和其他用品酒精灯，血细胞计数板，盖玻片，镊子，显微镜，双层瓶（内装香柏油和二甲苯），擦镜纸，滴管等。
1.2方法
1.2.1 菌体大小测定
1.2.1.1 目镜测微尺的安装把目镜的上透镜旋开，将目镜测微尺轻轻放在目镜的隔板上，使有刻度的一面朝下。
旋上目镜透镜，再将目镜插入镜筒内。
1.2.1.2校正目镜测微尺将镜台测微尺放在显微镜的载物台上，使有刻度的一面朝上。
先用低倍镜观察，调焦距，待看清镜台测微尺的刻度后，转动目镜，使目镜测微尺的刻度与镜台测微尺的刻度相平行，并使两尺左边的一条线重合，向右寻找另外一条两尺相重合的直线。
用同样方法校正高倍镜和油镜。
目镜测微尺每个的长度（μm）=两条重合线间镜台测微尺格数×10÷两条重合线间目镜测微尺的格数
1.2.1.3菌体大小测定将镜台测微尺取下，换上细菌染色制片，先在低倍镜和高倍镜下找到目的物，然后在油镜下用目镜测微尺测量菌体的大小。
先量出菌体的长和宽占目镜测微尺的格数，再以目镜测微尺每格的长度计算出菌体的长和宽。
1.2.1.4测定完毕测定完毕取出目镜测微
尺，将目镜放回镜筒，然后将目镜测微尺和镜台测微尺擦拭干净，放回盒内保存。
1.2.2 显微镜计数
1.2.2.l菌悬液制备以无菌生理盐水将酿酒酵母制成浓度适当的菌悬液。
1.2.2.2 检查血细胞计数板
1.2.2.3 加样品将清洁干燥的血细胞计数板盖上盖玻片，再用无菌的毛细滴管将摇匀的酿酒酵母菌悬液由盖玻片边缘滴一小滴，让菌液沿缝隙靠毛细渗透作用自动进入计数室，一般计数室均能充满菌液。
1.2.2.4 显微镜计数加样后静止5min，然后将血细胞计数板置于显微镜载物台上，先用低倍镜找到计数室所在位置，然后换成高倍镜进行计数。
在计数前若发现菌液太浓或太稀，需重新调节稀释度后再计数。
一般样品稀释度要求每小格内约有5-10个菌体为宜。
每个计数室选5个中格(可选4个角和中央的一个中格)中的菌体进行计数。
位于格线上的菌体一般只数上方和右边线上的。
如遇酵母出芽，芽体大小达到母细胞的一半时，即作为两个菌体计数。
计数一个样品要从两个计数室中计得的平均数值来计算样品的含菌量。
1.2.2.5 清洗使用完毕后将血细胞计数板及盖玻片进行清洗干燥，放回盒内。
2．结果与分析
2.1 结果
2.1.1 菌体大小测定
2.1.2 显微镜计数
2.2分析
2.2.1 由实验结果表-2、表-3，枯草芽孢杆菌长度为5.2μm，宽1.0μm，酿酒酵母的平均宽度为6.1μm长度7.6μm，同一种细菌或真菌不同细胞之间存在着个体差异，但变化相对较小，分类学指标价值大。
2.2.2由实验统计结果表-5，显微镜下每个中方格内酵母菌的数量为10～20个，各个中方格中总菌数差距不大，第二室的总菌数要与第一室的总菌数差不多，酿酒酵母液体培养基中每毫升的菌数为 6.9×107个，可见微生物在适宜的条件下繁殖迅速，数量大。
小结通过本次试验掌握了微生物大小和数量的测定技术，并达到实验观察的目的。
但
仍然存在一些不足之处，所以通过本次实验，总结了几点注意事项：
（1）在校正目镜测微尺或观察时，光线不宜过强，否则难以观察，务必十分小心，防止接物镜压坏镜台测微尺和损坏镜头。
（2）菌体个体较小，在进行细胞测定大小时一般用油镜，以减少误差。
（3）计数板上的技术室的刻度非常精细，清洗时切勿使用刷子，也不要用酒精灯烘烤。
（4）取样时先要摇匀菌液，加样时计数室不可有气泡。
（5）活菌是透明的，计数时应适当减低视野亮度，以增大反差。
（6）进行显微计数时，先在低倍镜下找到大方格的位置，再将其移至高倍镜下观察和计数。
（7）计数时四边不能均计数，应按照“计左不计右，计上不计下”的原则。
（8）遇到有出芽的酵母菌，只有当芽体与母细胞一样大时才计为两个。
参考文献
【1】沈萍陈向东，《微生物实验》，高等教育出版社
【2】沈萍陈向东，《微生物》，高等教育出版社。