实验1食用菌母种(一级种)制作 食用菌学课件
《食用菌菌种的制备》PPT课件
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• （2）棉籽壳培养基
• 以棉籽壳为主料，是一种应用较广泛的培 养基。配方主要有：
• ①棉籽壳78％，麸皮或米糠20％，蔗糖1％， 石膏粉1％，料水比1:1.2～1.4；
（1）拌料机或拌料槽及拌料、配料工具；
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• （2）衡器 磅称、工业天平、量杯等；
• （3）分装操作台（台高80cm左右）及分 装工具（装瓶机、装袋机；如人工装瓶， 需有压板，打孔棒等。）
• 2、灭菌室 应有灭菌设备，这里专指用于培养基
和其他物品消毒灭菌的灭菌锅。
（1）高压蒸汽灭菌锅； （2）常压蒸汽灭菌锅。
扩繁 ↓
原种培养基制备→灭菌→接种→培养→原种 ↓
↓▔▔▔▔▔▔▔▔ 栽培种培养基制备→灭菌→接种→培养→栽培用种
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二、常用设备仪器和药品
（一）设备
食用菌菌种生产流程应呈流水作业，菌种厂 应有配料室、灭菌室、冷却室、接种室、 培养室、贮藏室等。
1、配料室 要求地面平整光滑，有水电，并配备
下列用具、物品：
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第五步：摆斜面、无菌检查
• 灭菌锅压力降到0时，开锅取出试管，待其 温度降到约60℃时即可摆斜面，做法是： 在桌面平放2厘米厚的木条，将试管斜放在 木条上，培养基冷却后即凝固成斜面。斜 面长度一般为试管长度的1/2。无菌检查是 将斜面培养基放在37℃恒温箱中培养24小 时，培养基表面无任何杂菌长出即为合格 的培养基。
• （4）木屑浸出汁培养基
木屑500克，琼脂20克，细米糠100克，硫酸铵1 克，葡萄糖（或蔗糖）20克，水1000毫升。此配 方适用于木腐菌类的菌种分离与培养。
一般食用菌母种(一级种)制作
一般食用菌母种(一级种)制作母种制作的基本工艺流程为母种(由科研单位、大专院校、菌种保藏专门机构引进)一培养基制备一接种一培养检查一成品。
(一)常用培养基及配方培养基是食用菌菌种生长所需营养的基质。
培养基要具备四个条件，第一，要含有所培养的菌株生长所需要的各种营养物质，如糖类、有机氮、矿物质等。
第二，所含养分浓度和状态要利于食用菌的吸收和利用。
如食用菌母种培养基使用葡萄糖的浓度多在2％左右，过高和过低都不利于菌丝的生长；食用菌对氮素的吸收优先吸收有机氮，因此，原种和栽培种的培养基中应添加有机氮源，如麦麸、米糠等。
第三，要有适宜的酸碱度(pH)，食用菌多数喜偏酸性，pH5.0～6.5。
第四，经过严格灭菌，保持无菌状态。
这最后一点是要通过灭菌才能达到的，然而，灭菌的高温能破坏培养基中的许多化学成分，并能降低pH。
这一点必须在配制时就考虑到。
这就要求从使用的营养型药品试剂上，要尽量选用热稳定性好的种类，配制时，灭菌前的pH要略高于使用时所需的适宜酸碱度。
一般高压蒸汽灭菌0．1～0．12兆帕30分钟，培养基的pH下降0．1～0．3。
高压灭菌切勿压力过高，时间过长，以利培养基保持良好的营养和适宜的pH。
目前食用菌母种生产上使用的都是固体培养基，以琼脂(洋菜)为凝固剂，琼脂的用量从10～24克不等，这依琼脂的质量而定，使用时用量要参考产品使用说明书。
此外，当制作相同培养基时，高温季节要较常量多用些，以利凝固，低温季节可按常量使用；较酸的培养基也要较pH较高的培养基琼脂用量多些。
1．通用培养基通用培养基有多种配方，几乎通用于各类食用菌，常用的配方如下：(1)PDA培养基(马铃薯葡萄糖琼脂培养基) 马铃薯(去皮)200克，葡萄糖20克，琼脂10或20克，水1升。
(2)综合马铃薯培养基马铃薯(去皮)200克，葡萄糖20克，磷酸二氢钾2克，硫酸镁0．5克，琼脂10或20克，水1升。
(3)马铃薯麦麸综合培养基马铃薯200克，麦麸100克，葡萄糖20克，磷酸二氢钾2克，硫酸镁0．5克，琼脂10或20克，水1升。
食用菌母种制作-实验一
实验一食用菌母种制作一、目的要求：1、了解母种培养基制作过程，理解灭菌原理；2、掌握母种培养基的制备方法；3、了解无菌操作基本原理，掌握母种的无菌接种培养方法。
4、了解和掌握食用菌组织分离法的方法步骤；5、熟练分离出栽培用菌种。
二、主要仪器设备及药品材料：灭菌锅、超净工作台、酒精灯、电炉、铝锅、漏斗、纱布、菜刀、砧板、烧杯、捆扎绳、硅胶试管塞、试管（18x180mm）、手术刀、镊子、75%酒精、马铃薯、葡萄糖、琼脂、平菇子实体。
三、实验步骤与方法:①培养基的制作1 PDA培养基配方马铃薯200克,葡萄糖20克,琼脂20克,水1000毫升.2. 母种培养基的配制(1)熬制。
马铃薯洗净，挖芽去皮。
称取200克，切成玉米大小颗粒或薄片。
量筒量取1000毫升水，铝锅中煮沸后记时30分钟。
四层纱布过滤于量杯中。
滤液倒入锅中文火加热，加入葡萄糖和琼脂，不断搅拌，直到琼脂溶化。
补足水量至1000毫升。
(2)分装试管。
将熬制的培养基用小漏斗趁热分装。
培养基高度为试管长度的1/5左右，注意避免培养基沾于试管口外。
分装完成后，盖紧硅胶塞。
（3）捆把。
7支试管为一捆，用牛皮纸包裹试管口，用捆扎绳扎紧。
贴上标签，准备灭菌。
（4）灭菌。
注意加足水量和排气，灭菌完成后降压不能太快。
（5）摆斜面，培养基长度约为试管长度的1/2。
斜面试管上覆盖洁净的厚毛巾或几层纱布，防止试管内产生过多的冷凝水。
①菌种分离与培养（1）种菇选择。
选取无杂菌感染，无病虫害，出菇均匀，适应性强的子实体，要求个体健壮，朵大肉厚，外形规整，出菇早，约七八成熟的新鲜子实体。
子实体采收后切去大部分菌柄，放入干净器皿内备用。
（2）母种分离（组织分离法）。
在分离前用75%的酒精棉球擦菇体进行表面消毒，在超净工作台内将子实体撕开，用消毒刀片在菌盖与菌柄交接处的组织上取一小块（绿豆大小）移至试管斜面培养基的适当位置，迅速塞上硅胶塞。
将分离的试管放在室内避光培养7-8天，检查菌丝生长情况。
第3章食用菌菌种的制作ppt课件
培养基的灭菌
培养基装好后就要立即进行灭菌；将其中的杂 菌杀死，然后才能接入我们所需要的纯菌种， 进行培养。 不论是母种分离时用的斜面培养基，还是原种、 栽培种瓶培养基或聚丙烯塑料袋培养基，一般 都采用热力灭菌法。
高压蒸汽灭菌法：
若是斜面试管培养基，应在1 kg/cm2 （121℃） 压力下维持30分钟，即可达到灭菌目的。开锅 取试管时，趁热放成斜面。
第二节 培养基
根据各种食用菌生长时对营养物质的要求，用 人工方法配制而成的营养基质，供菌丝生长发 育，把这种营养物质叫培养基。它如同农作物 需要土壤、肥料，动物需要饲料一样。 目前，人们采用的培养基相当多，种类各不相 同。不论哪种培养基都有共同特点：一般都含 有水分、碳源、氮源、无机盐以及生长因子等。
培养基中的无机盐虽用量不多；但不可缺少，它主要是 酶类的组成成分，调节各种生命代谢活动，如磷酸二氢 钾、硫酸镁。
生长因子需要量很少，是培养基中的特殊营养物质，它 是维持食用菌正常生长所不可缺少的生长因素。如马铃 薯、 麸皮、米糠等都含有丰富的生长因子，维生素也属 此类。
马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）：
碳源是构成细胞物质的主要元素，也是食用菌生长发膏 所需能量来源。碳源的主要原料是糖类、淀粉、纤维素 物质。代表物质是葡萄糖、蔗糖、玉米粉、麸皮、米糠、 锯木屑、棉籽壳等。
氮源是食用菌细胞质和细胞核中蛋白质和核酸的主要元 素，蛋白质和核酸是生命的基本物质。一切生命活动都 离不开这些物质。氮源主要有氨基酸、蛋白胨、尿素、 硫酸铵、含有氮素的物质有玉米、棉籽壳。
第三章食用菌菌种的制作
第一节 食用菌菌种的概述
一、母种，也称 一级菌种或试管 种
•母种鉴定： 洁白，健壮，无 虫害，有蘑菇香 味
食用菌菌种的制作与保藏_minimizer-优秀PPT文档
来。
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3、菌索分离法
它是从食用菌菌索种分离培养得到纯菌丝的方法。如
蜜环菌、假蜜环菌等食用菌在人工培养条件下不易形成
子实体，也不产生菌核，它们是以特殊结构的菌索来进
行繁殖的，因此这类菌可用菌索分离菌种。
将风干的菌索放入灭菌消毒过的接种箱中或超净工
作台上，挑取生命力旺盛的菌索尖端部分，用75%酒精
棉球擦洗表面，以无菌的解剖刀除去菌索的黑色的外皮
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一、菌种分离概念
概念：将子实体的局部组织或孢子移接在斜面 试管培养基上，获得纯培养菌丝的操作称为菌 种分离。菌种分离主要指一级种(母种)的分离。
有些与高等植物共生的菌根菌，如红菇、松 菇以及有些要在动物（如白蚁）存在下才产生 子实体的菌类，因营养条件复杂，在目前实验 条件下，较难在简单的培养基上获得纯菌种。
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五、菌种保藏设备
保藏母种：冰箱（4℃）左右
保藏原种、栽培种：
远离污染源
贮藏室
低温（4~8℃） 干燥、通风、遮光
用前要严格消毒杀虫
地面常撒石灰粉
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六、菌种厂的布局
根据菌种生产流程合理设置
仓库
配料室
灭菌室
接种室
门 口
晒料场
栽培棚 办公室 培养室
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第三节 食用菌菌种分离
一、菌种分离概念 二、菌种分离方法 三、菌种分离提纯 四、出菇试验
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二、菌种类型
使用目的的不同
保藏用菌种 实验用菌种
生产用菌种
培养对象和培养料的不同
木质菌种 草质菌种
菌种类型
物理性状
固化菌种 固体菌种 液体菌种
培养 容器
外观形态
颗粒状菌种 片状菌种 砖状菌种
组织分离制食用菌母种PPT课件
复习上一节 母种培养基的配制步骤
• 1.按配方称量：见下面的配方 • 2.煮制 • 3.分装 • 4.灭菌 • 5.排斜面
母种培养基配方：
1.土豆200g、糖20g、琼脂20g、水1000ml
2.去皮马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂20g、 水1000ml、PH值自然，另外添加：麸皮20g、 玉米面5g或黄豆粉5g、磷酸二氢钾2g，硫酸 镁2g，VB11片（10mg）。 此配方适用于大多数菌种，金针菇、黑木耳、 灵芝生长尤其茁壮。 可作黑木耳、香菇的复壮培养基，效果显著。
2.记录你制作的母种的生长状态; 3.是否有杂菌污染,如有分析其原因.
再见!
写在最后
成功的基础在于好的学习习惯
The foundation of success lies in good habits
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谢谢聆听
·学习就是为了达到一定目的而努力去干, 是为一个目标去 战胜各种困难的过程,这个过程会充满压力、痛苦和挫折
人操作； 第二大组可在无菌室内操作；
第一大组采用菌盖与菌柄交界处组织进 行分离，第二大组采用菌盖带菌褶部分 进行组织分离，作对比观察。
分组辅导
注意同学们的操作； 及时纠正不规范动作。 接种操作完毕，收集试管进行培养。
数显式恒温培养训第三大部分
结果观察
培养基的高压灭菌
使用高压蒸汽灭菌锅应注意的事项？ （提问同学） (1)锅内装物品不应过紧； (2)注意排出冷气，否则不能保证灭菌效果； (3)加热排冷气后，使温度达到121.3℃，压
力在0.1－0.15 MPa之间维持30 min； (4)不耐高热高压之物品，不能用此法灭菌。
（四）组织分离操作的主要步骤：
《食用菌实验》课件
食用菌的培养条件与方法
温度
根据不同食用菌的需求，控制培养温度在 20℃-30℃之间。
光照
部分食用菌需要在光照条件下生长，如灵芝 等，而有些则不需要光照，如平菇等。
湿度
保持培养环境相对湿度在60%-70%之间， 以防止培养基干燥和杂菌污染。
空气
保持通风良好，以满足食用菌对氧气的需求 。
04 食用菌的鉴定与分类
食用菌的烹饪与加工技术
总结词
食用菌的烹饪与加工技术是将其转化为可食用食品的重要手段，通过合理的加 工处理，可以提升食用菌的口感和营养价值。
详细描述
食用菌的烹饪方法包括炒、炖、煮、烤等，加工技术包括干制、腌制、罐装等 。在烹饪和加工过程中，应注意保持菌体的完整性和营养成分，避免过度加热 或添加有害物质，以保证食用菌的安全和健康。
实验材料准备
食用菌子实体
选择新鲜、健康的食用 菌子实体作为实验材料 ，确保其无病虫害、无
污染。
培养基
根据实验需要选择适宜 的培养基配方，如PDA 培养基、麦芽汁培养基
等。
实验器具
包括接种工具、显微镜 、培养皿、酒精灯等。
试剂
如消毒剂、抗菌剂等， 用于实验过程中的消毒
和防止污染。
实验操作流程
接种
将食用菌菌种接种到培养基上 ，按照规范的操作要求进行。
感谢您的观看
观察食用菌在培养基上的生长 情况，记录生长速度、菌落特
征等信息。
记录形态特征
记录食用菌子实体的形态特征 ，如菌盖、菌柄、孢子等特征 。
测量数据
对食用菌的菌落直径、菌丝密 度等进行测量，并记录数据。
拍照与绘图
对实验材料和结果进行拍照和 绘制图表，以便于结果分析和
医学课件第三章食用菌制种
⑵ 谷粒培养料的配制
谷粒因其营养较丰富，制作的菌种具有菌 丝萌发早、吃料快、抗衰老能力强、产量高 等优点，在生产中应用较多。一般是采用浸 泡法或煮熟法，也可用石灰水浸泡。
4.装袋或装瓶 将培养料拌匀装入菌种瓶（或袋）内、
装料松紧适宜，上下一致，装料高度以齐瓶 （袋）肩为宜。然后用锥形木棒在瓶的中央 向下插一个小洞，塞上棉塞。装好的料瓶 （袋）要当天灭菌，以免培养料发霉变质。
②.去皮马铃薯100克，玉米粉30克，葡萄糖20 克，琼脂20克，磷酸二氢钾0.5克，磷酸氢二 钾0.1克，硫酸镁0.5克，蛋白胨2克，水1000亳 升，PH值自然。
③.去皮马铃薯100克，玉米粉15克，麸皮15克， 葡萄糖20克，琼脂20克，磷酸二氢钾0.5克， 磷酸氢二钾0.1克，硫酸镁0.5克，蛋白胨2克， 水1000亳升，PH值自然。
5.培养基的灭菌
通常采用高压蒸气灭菌法和常压蒸气灭 菌法以达到灭菌的目的。高压灭菌2小时或常 压灭菌于100℃维持8-10小时，灭菌后培养基 最好放在适温下，空白培养5-7天，以检查培 养基灭菌的效果。如在此期间没有出现任何 杂菌，说明灭菌效果良好。待其冷却30℃以 下可接种。
三、栽培种培养基的制备及接种培养
2.培养基配方：
① 木屑培养基：木屑78%，麸皮或米糠 20%，石膏1%，糖1%，水适量。适用于培养 平菇、木耳、香菇、猴头。
② 棉子壳培养基：棉子壳99.5%，石膏 0.3%，水适量。适用于培养平菇、猴头、金 针菇、鸡腿菇。
3.培养料的配制 ⑴ 木屑、棉籽壳培养料的拌料配制
木屑、棉籽壳培养料按配方称量后，堆制 混和，加水拌料，配方中的糖也可先溶于水 中再拌入。拌料时要控制料的含水量在60﹪ 左右 。
一、母种培养基的制备及接种培养
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其制种的技术。 三、培养基配方 马铃薯硫酸铵培养基: 马铃薯200 g，硫酸铵2g，蛋白胨1g， 葡萄糖20g，磷酸二氢钾1g，硫酸镁1g， 琼脂20g，pH6.5-7 ,水1000mL
四、方法与步骤 母种培养基制作流程：
马铃薯去皮、切粒→煮8-10分钟后 取汁使用→加药品溶化→琼脂溶化→ 混合定容→调节pH值→分装→灭菌→ 倒斜面→接种→培养→母种（一级 种）。
《食用菌学》实验
华南师范大学《食用菌学》课程教学网站网址：
/life/teacher/zhang范大学生命科学学院
使用教材：黄文芳,张 松.微生物
学实验指导.暨南大学出版社,2003 年出版
二、目的要求 通过母种（一级种）的制作，掌握