金莲花化学成分提取及抗菌作用研究_李世相

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3.47(1H,m,H-4'''),3.43(1H,t,J=9.15 Hz,H-4''), 81.9(C -5''),78.7(C -1''),73.5(C -2''),70.9(C -
d ,J = 7 . 45 Hz ,H - 1'''),3 . 79 brd (J =10.9 Hz), (C-2',6'),121.7 (C-1'),115.9 (C-3',5'),104.7
3.58 m(2H,H-6''),3.50(1H,t,J=8.88 Hz,H-3''), (C -8),104.1(C -10),102.5(C -3),98.2(C -6),
取干燥金莲花 6.0 kg,加 10 倍量水提取 3 次,
a
6.25
12.50
12.50
6.25
b
6.25
6.25
6.25
6.25

c
12.50
25.00
25.00
12.50
d
6.25
50.00
12.50
12.50



由表 1 可以看到,醇提物 a 对金黄色葡萄球 究
将提取液分成 2 份。取 1/4 量合并提取液并浓缩至 菌、绿脓杆菌、枯草芽孢杆菌的抑菌活性较高,水
海拔 1 000-2 000 m 的山地草坡或疏林地带。金

作者简介:李世相(1963-),男,高级工程师,主要从事新药研究与教学。 莲花在中药、蒙药中均有很高的医用价值。现代药

通讯作者:赵凤舞,主要从事生物学研究,E-mail:529166266@.com
理研究表明,其水煎液对多种细菌有显著的抑制
Sephadex LH-20、MCI 柱色谱分离纯化,得化合物 2.3 结构鉴定
1(130 mg)、2(105 mg)、3(120 mg)、4(200 mg)、
化合物 1:白色粉末;ESI-MS m/z:39.3。1H-
5(110 mg)。将其余提取液浓缩至 1.5 kg/L,加乙醇 至体积分数为 80%,静置 12 h,回收乙醇,得浸膏
氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取。氯仿萃取物(9.6 g) 2.92(1 H,d,J =16.0 Hz,H -3),2.82(1H,d,J =13.75
经硅胶柱、正己烷丙酮梯度洗脱,得到化合物 6 Hz,H -5),2.54 (1H,d,J =16.5 Hz,H -3);13C -NMR
(50 mg)、7(7 mg)、8(10 mg)和 9(5 mg)。乙酸乙 (125 M Hz,CD3OD)δ:176.2 (C -1),170.5 (C -4), 酯萃取物(20.0 g)经硅胶柱、氯仿甲醇梯度洗脱, 156.1(C-4'),131.2(C-2',C-6'),126.4(C-1'),114.4
WANG Ming-gang1,2,YU Guo-qing2,ZHANG Xin-guo2,YANG Zhong-duo2,PENG Yi-nan2, ZHANG Chun-sheng2,LIU Ying-juan2
(Key Laboratory for Yak Genetics,Breeding & Reproduction Engineering of Gansu Province,Lanzhou Gansu 730050;College of Life Science and Engineering,Lanzhou University of Technology, Lanzhou Gansu 730050,China)
文献标志码:A 文章编号:1000-6354(2013)05-0008-05
金莲花为毛蓑科植物长瓣金莲花的干燥花, 有旱金莲、金梅草、旱地莲、金芙蓉等之称,主要分 8
布于我国河北、山西、黑龙江、内蒙古等省区,生于
收稿日期:2013-07-20

基金项目“:十二五”农村领域国家科技计划(2011AA10A214)
理化性质不同的 10 个化合物。醇提物 a 对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、枯草芽孢杆菌的抑菌
活性较高,水提物 b 对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌的抑制作用优于双黄连提取物 d,乙酸乙酯
提取物 c 抑菌活性与双黄连提取物 d 相近。结果表明河北围场金莲花具有抗菌活性。
关键词:金莲花;抗菌活性;有效成分
中图分类号:S853.74
稠膏,加 300 g 硅胶拌样,晾干,研细,上样于 1 500 g 提物 b 对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌的抑制作用
硅胶(200-300 目)柱,用氯仿-甲醇(10∶0-7∶3)梯度 优于双黄连提取物 d,乙酸乙酯提取物 c 抑菌活
洗脱,薄层检查,合并相同组分,再经硅胶柱色谱、 性与双黄连提取物 d 相近。
得到化合物 10(7 mg)。
(C-3',C-5'),75.6(C-2),44.1(C-3),42.4(C-5)。
2.2 抑菌活性的测定
以 上 数 据 与 文 献 [4] 报 道 的 对 羟 基 苯 甲 苹 果 酸
2.2.1 供试菌种 大肠杆菌(Escherichia coli)、金 数据基本一致,可确定为对羟基苯甲苹果酸。
萄球菌、绿脓杆菌、枯草芽孢杆菌为受试菌,采用 制 好 不 同 浓 度 各 化 合 物 溶 液 和 灭 菌 MH 培 养 基
体 外 抑 菌 研 究 发 现 , 金 莲 花 水 提 物 体 积 分 数 为 按 1 ∶9 配 制 成 含 药 浓 度 为 200、100、50、25、12.5、
80%的乙醇溶解部分的氯仿萃取物对革兰氏阳性 6.25、3.12 μg/mL 琼 脂 平 板 , 冷 却 后 将 制 备 好 的
[7] Shama M. The isoquinoline alkaloids [M]. New
中 4 种生物碱[J].色谱,2013,31(3):249-253.
York: A cademic press,1972:218.
[10] 刘 虹,郝 彧,朱晓月,等.HPLC 测定血浆中
[8] 刘玉霞,刘 斌,石任兵,等.RP-HPLC 法测定
( 温度未校正,日本 Yanaco 公司);薄层色谱用硅 提取物 大肠杆菌 金黄色葡萄球菌 绿脓杆菌 枯草芽孢杆菌
胶 GF254 和柱色谱用硅胶(51-71 μm,青岛海洋化 工 厂);其 他 试 剂 均 为 分 析 纯 ;所 用 药 材 由 甘 肃 省 药检所鉴定。 2 方法与结果 2.1 金莲花化学成分的分离提取
Abstract:Objective: To determinate the plasma concentration of N -methyl asimilobine,an acetyl cholinesterase inhibitor,by HPLC in rat. Methods: Plasma samples were cleaned up by extraction with acetic ether. The chromatogram was monitored by UV detection at a wavelength of 270 nm. The mobile phase consisted of Methanol-Water-TEA(65∶35∶0.1). The flow rate was l.0 mL/min. Results: The linear range was 10-400 g/mL,the lower limit of detection was 5 g/mL. The intra-and inter-run precision were lower than 3.7% and 3.1% (n=5),respectively.The extraction recovery was 98.03%~105.42% (n=5). Conclusion: The method is shown to be accurate, repetitive, simple to operate, and suitable for monitoring biological sample,clinical pharmacology and pharmacokinetic study.
1 仪器பைடு நூலகம்材料
表 1 目标化合物的最小抑菌浓度 MIC/μg·mL-1
Bruker-Am 400 MHz 核磁共振仪(D2O、DMSO-d6 为溶剂,TMS 为内标);MP S3 型显微熔点测定仪
Table 1 Minimal inhibitory concentration of target compounds/μg·mL-1
所提供。
H-2'),6.87 (1H,d,J=8.6 Hz,H-5'),6.62(1H,s,
2.2.2 测定方法与结果 采用琼脂平板稀释法测 H -3),6.21(1H,s,H -6),4.79(1H,d,J =9.75 Hz,
J TCVM
2013 年 第 5 期
H-1'),4.04(1H,t,J=9.18 Hz,H-2''),3.91(1H, 7),161.2(C-4'),160.5(C-5),156.1(C-9),129.1
NMR(500 MHz,CD3OD)δ:7.05(2H,d,J =8.6 Hz, H-3',5'),6.66 (2H,d,J=8.55 Hz,H-2',6'),3.33
920 g。取浸膏 460 g,溶解于 900 mL 水中,依次用 (1H,s,OH -2),2.93 (1H,d,J =13.75 Hz,H -5),
荷叶碱的浓度及其在大鼠体内药代动力学研
Beagle 犬血浆中荷叶碱的浓度 及 药 动 学 研 究
究[J].中国实验方剂学杂志,2010,16(12):156-
[J]. 药物分析杂志,2008,28(9):1418.
168.
Determination of plasma concentration of N-methyl asimilobine,an acetyl cholinesterase inhibitor,by HPLC in rat
菌具有抑制作用,而乙酸乙酯萃取物对革兰氏阳 菌液接种于平板表面,每点菌数约为 104 cfu,置
性菌和阴性菌均具有抑制作用。通过色谱和波谱 于恒温培养箱 35 ℃培养 24 h 后 ,观 察 各 化 合 物
数据分析,从中分离并鉴定了 10 个化合物,其中 抑菌活性,测定结果见表 1。
化合物 2-4 为首次从该属植物中分离得到。
黄 色 葡 萄 球 菌(Staphyloccocus aureus)、绿 脓 杆 菌
化合物 2:黄色粉末;ESI-MS m/z:611。1H-NMR
(Pseudomonas aeruginosa)、枯草芽孢杆菌(Bacillus (500 MHz,DMSO -d6)δ:13.15(1H,s,5 -OH),7.52 subtilis),由中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究 (1H,dd,J=8.3,2.3 Hz,H-6'),7.47(1H,d,J=2.3 Hz,
2013 年 第 5 期
J TCVM
金莲花化学成分提取及抗菌作用研究
李世相 1,赵凤舞 2
(1.山西药科职业学院,山西太原 030031;2.兰州职业技术学院,甘肃兰州 730070)
摘 要:提取河北围场金莲花化学成分,考察其 3 种不同溶媒提取物的体外抗菌活性。
通过硅胶柱色谱、Sephadex LH-20 柱色谱等分离方法, 进行波谱数据分析及鉴定结构,得到

!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! [6] 杨中铎,张 旭.一种荷叶提取物及其单体成 [9] 亓 亮,张 婧,张志琪.以离子液体作流动相
分和用途[P]. CN,200910117596,2010-05-26.
添加剂的高效液相色谱法测定复方苦参注射液
Key words:HPLC;N-methyl asimilobine;plasma concentration
J TCVM
2013 年 第 5 期
作用,临床对急慢性扁桃体炎、咽炎及上呼吸道感 定化合 物 抑 菌 活 性 ,以 双 黄 连 提 取 物 d(郑 州 鼎
染等疗效显著[1-3]。笔者等以大肠杆菌、金黄色葡 驰科技有限公司生产)原药作阳性对照。将已配
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