薄层色谱的应用

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简述薄层色谱法用于化学药品杂质检查的方法

简述薄层色谱法用于化学药品杂质检查的方法

简述薄层色谱法用于化学药品杂质检查的方法
薄层色谱法是一种常用的化学分析方法,广泛应用于化学药品杂质检查。

薄层色谱法的基本原理是利用不同物质在薄层色谱板上的吸附性质和迁移速度的差异来分离和检测样品中的化学物质。

其方法包括样品的制备、样品在色谱板上的上样、色谱板的开发等步骤。

在化学药品杂质检查中,薄层色谱法常用于检测药品中可能存在的杂质或掺假成分。

具体步骤包括样品的制备,通常是将药品与适量的溶剂混合后进行搅拌和过滤,得到样品溶液;然后将样品溶液倒在预先涂有吸附剂的薄层色谱板上,然后将色谱板放入开发槽中,使溶液中的化学物质按照一定的迁移速度在色谱板上分离;最后,通过显色、目视或者使用光谱仪等设备观察色谱板上化学物质的分离情况并进行定量或定性分析。

薄层色谱法具有操作简单、分离效果好、分析速度快等优点,因此在化学药品杂质检查中得到了广泛应用。

同时,还可以结合其他分析技术,如质谱联用,进一步提高分析的准确性和灵敏度。

薄层色谱法的应用

薄层色谱法的应用

薄层色谱法的应用薄层色谱法是一种离线色谱技术,操作步骤相对自立,具有比较好的灵便性。

薄层色谱可以同时分别、分析多个样品,往往与对比品在同样条件下举行,直观可比性较强口绽开后,可用多种办法检视,得到多方面的信息。

主要用于药物的鉴别和杂质检查。

一、鉴别可采纳与同浓度的对比品溶液,在同一块薄层板上点样、绽开与检视,供试品溶液所呈主斑点的色彩(或荧光)和位置(Rf)应与对比品溶液的主斑点全都,而且主斑点的大小与色彩的深浅也应大致相同。

或采纳供试品溶液与对比品溶液等体积混合,应显示单一、紧密的斑点。

或选用与供试品化学结构相像的药物对比品与供试液的主斑点比较,两者的Rf值应不同;或将上述两种溶液等体积混合,应显示两个清楚分别的斑点。

二、杂质检查可采纳杂质对比品法、供试品溶液的自身稀释对比法、杂质对比品法与供试品溶液的自身稀释对比法并用等办法。

供试品溶液除主斑点外的其他斑点应与相应的对比品溶液或系列浓度的对比品溶液的主斑点比较,或与供试品溶液的自身稀释对比溶液或系列自身稀释对比溶液的主斑点比较。

通常应规定杂质的斑点数和单一杂质量,当采纳系列自身稀释对比溶液时,也可规定估量的杂质总量。

三、测定时的注重事项 1.薄层板的活化与保存:自制薄层板和商品薄层板在用法前均应举行活化,活化后的薄层板应立刻置于有干燥剂的干燥器中保存。

保存时光不宜过长,最好随用随制,放入干燥箱中保存仅作为用法前的一种过渡。

2.供试品溶液的制备:溶剂挑选应适当,不能影响点样原点及分别后斑点的外形,普通应挑选极性小的溶剂;惟独在供试品的极性较大、薄层板的活性较大时,才挑选极性大的溶剂。

除特别状况外,试液的浓度要相宜,最好控制在使点样量不超过10ul(高效薄层板的点样量不超过5ul)。

3.点样:薄层板上供试品溶剂的负荷量极为有限,一般薄层板的点样量最好在10ul以下,高效薄层板在5ul以下。

点样量过多可造成原点“超载”,绽开剂产生绕行现象,使斑点拖尾。

薄层色谱法的原理及应用

薄层色谱法的原理及应用

薄层色谱法的原理及应用
1. 薄层色谱法的概述
•什么是薄层色谱法?
•薄层色谱法的特点
•薄层色谱法的分类
•薄层色谱法的基本步骤
2. 薄层色谱法的原理
•色谱基质的选择
•色谱分离机理
•薄层层析板的制备与选择
•纯化和检测方法
3. 薄层色谱法的应用
•生物学领域的应用
•化学分析中的应用
•药物研发与质量控制中的应用
•食品行业的应用
•环境监测中的应用
•其他相关领域的应用
4. 薄层色谱法的优缺点
•优点:高效、快速、灵敏度高、易操作、耗费样品少等
•缺点:分析物种类受限、分离能力较弱、仪器设备复杂等
5. 薄层色谱法的发展趋势
•技术改进与创新
•自动化与智能化发展
•应用领域的拓展
结语
通过本文,我们了解了薄层色谱法的原理和应用,它是一种重要的分析方法,
被广泛应用于各个领域,如生物学、化学、药物研发、食品行业和环境监测等。

虽然薄层色谱法具有一些局限性,但随着技术的改进和发展,它的优势将进一步发挥,应用领域也会不断拓展。

薄层色谱法的发展趋势将朝着更加高效、智能化和自动化的方向前进。

薄层色谱应用课件.pptx

薄层色谱应用课件.pptx

一、 实 验 目 的
❖ 了解薄层色谱的应用原理 ❖ 掌握薄层色谱的应用方法
二、实 验 原 理
二、实 验 原 理
应用薄层色谱检验、鉴定化合物的原理:
图1 365 nm下观察的结果
图2 硫酸乙醇显色结果
注:两边的是标准品,中间的是样品
二、实 验 原 理
➢ 固定相:硅胶,氧化铝,等。 ➢ 支持板:玻璃板,涤纶布,等。 ➢ 展开剂:根据样品的极性及溶解度选择,可采用单一溶剂,但更常用的
四、实 验 过 程
比移值( Rf 值)的计算:
五、 注 意 事 项
1. 制作薄层所用玻璃板要平滑、干净。 研磨要充分,保证所制的薄层面应平整均匀 存放薄层板时要注意保持干燥及避免污染。
五、 注 意 事 项
2. 样品浓度(浓度为0.01-0.1%): 太大,容易出现拖尾;
太小则会导致斑点不明显,难以观察。
五、 注 意 事 项
5. 标记斑点时:要轻轻勾画,避免铅笔将斑点处的硅胶碰掉,从而 影响后续显色结果的观察。
是混合溶剂。
三、实 验 试 剂 与 仪 器
点样样品 香草醛
间苯二酚
展开剂 石油醚 丙酮
四、实 验 过 程
薄层板 的制备
点样
展开
显色、定位
UV灯、显色剂
测定比移值
(Rf 值)
四、实 验 过 程
显色和定位 一般包括:一看、二照、三碘和四显四步。
❖ 一看:指先在自然光下观察 ❖ 二照:指分别在 254 nm 和 365 nm 下观察有无暗斑或荧光斑点 ❖ 三碘:对在自然光和紫外下均无斑点的物质可以用碘蒸汽显色 ❖ 四显:用显色剂显色 ➢ 实际操作中根据需要选择其中的两到三步。
五、 注 意 事 项

薄层色谱和柱层析

薄层色谱和柱层析

薄层色谱和柱层析一、薄层色谱(TLC)1.原理:薄层色谱是一种基于分子在固体表面和流动相之间相互作用的分离技术。

它使用薄层固定在玻璃或铝板上的吸附剂(例如硅胶或氧化铝)来分离混合物中的化合物。

在色谱板上涂覆样品后,通过液态或气态的流动相让混合物成分在吸附剂上移动,不同化合物的移动速度不同,从而实现分离。

2.应用:薄层色谱被广泛应用于药物化学、食品科学、环境科学和生命科学等领域。

它通常用于混合物的分析,确定混合物中是否存在特定化合物。

此外,它也可用于纯化样品中的化合物,通过可视化或其他检测方法来定位目标化合物位置。

3.操作步骤:薄层色谱的操作步骤主要包括:(1)准备色谱板:将吸附剂均匀涂覆在固定的玻璃或铝板上,使其成为薄层。

(2)样品的涂覆:将待分离的混合物溶解在适当的溶剂中,并用微量移液管将样品均匀地涂覆在色谱板上。

(3)开展分离:将涂覆了样品的色谱板悬挂在色谱槽中,加入合适的溶剂溶液,使之满足色谱板的一端。

(4)显色:在色谱板完全干燥后,通过目视或化学法将化合物可视化。

常用的显色剂包括碘、紫外线灯或化学染色剂。

二、柱层析(CC)1.原理:柱层析是一种基于分子在固定填料(固相)和流动相之间相互作用的分离技术。

根据样品的特性选择不同的固相材料,并将其装填在柱中。

当样品通过柱时,不同化合物与固相发生不同程度的相互作用,从而分离。

2.应用:柱层析广泛应用于化学和生物化学领域,用于分离和纯化化合物。

它可用于药物合成中的纯度检查、食品中毒素的分离、蛋白质的纯化等。

柱层析的分离效果通常较好,纯度高。

3.操作步骤:柱层析的操作步骤主要包括:(1)准备填料和柱子:根据需要选择适当的固相材料,并将其装填在柱子中。

(2)样品的预处理:将待分离的样品预处理,如溶解在适当的溶剂中,并清除杂质。

(3)样品注入:将样品注入柱中,注意控制样品体积和注入速度。

(4)洗脱:通过加入不同组成的洗脱液(流动相),使样品中不同化合物以不同速率从柱中洗脱。

薄层色谱法的应用

薄层色谱法的应用

(一)薄层色谱的应用薄层色谱技术的优点:薄层图谱以彩色图像呈现,直观、易于辨认;广泛的适用性,至今为多国药典用于植物药的鉴别;多样品在同板同时平行比较;色谱可供多层次分析,制成的摄影可长期保留;可利用不同参数进行多次分析计算,不必重复分离。

TLC在中药质量控制中的主要应用:鉴别、半定量评估、化合物定量分析。

在没有任何化学对照品的情况下,对比TLC板上相同位置斑点颜色,也能够很容易地识别不同药材。

半定量评估包括过程控制、稳定性测试、限量检查三个方面。

在cGMP环境下,记录原料在生产过程的每一步中如何转换/保存、如何与成品比较、每一批产品的组分如何保持稳定等很有必要。

利用HPTLC指纹图谱,通过比较斑点数目、顺序和相对强度(或者光密度扫描产生的峰)可以完成这些工作。

且可以用鉴定过的原料或有独立规范的成品作为参比物。

稳定性测试是HPTLC比较新的一个应用,用以确定提取物和成品的保质期。

测试是要确认产品在规定时间内能否保持稳定。

另一方面,方法要能检测到所有的降解产物。

倘若方法经过严格验证,可用半定量检测进行稳定性测试,对被测的标示物无需测定其绝对量。

采用定量配制的对照品对照或对照品稀释对照。

供试品溶液色谱中待检查的斑点应与对应的对照品溶液或系列对照品溶液的相应斑点比较,颜色(或荧光)不得更深。

或照薄层色谱扫描法操作,峰面积值不得大于对照品的峰面积值。

必要时应规定检查的斑点数和限量值。

化合物定量分析化合物定量分析对TLC来说是最高要求。

由于受到该技术分离能力的限制,像植物材料这样的复杂样品对其所有组分往往不能实现基线分离,因而大多数分析采用HPLC。

薄层色谱方法标准操作规程:薄层色谱是一开放体系,环境因素对色谱层析行为影响很大。

而薄层色谱实验过程各单元独立,实验人员参与的步骤操作多,因此不同人的操作技巧会明显地影响色谱质量。

同一份样品,往往在不同人或不同实验室得出完全不同的结果,这就要求必须建立薄层色谱SOP。

薄层色谱的原理及应用

薄层色谱的原理及应用

薄层色谱的原理及应用1. 薄层色谱的原理薄层色谱是一种常用的分离技术,它基于样品分子在涂覆在固定支持物上的薄层上的分配行为,通过溶剂系统的不同流动性和样品分子与固定相之间的相互作用,使得样品分子在固定相和溶剂之间发生分离。

薄层色谱既可以进行定性分析,也可以进行定量分析。

薄层色谱的原理包括以下几个方面:1.1 固定相薄层色谱的固定相是一种涂覆在均匀介质上的涂层,通常由硅胶、氧化铝或硅胶酸加工而成。

固定相的选择根据需要分离的样品的性质和分子结构来确定。

1.2 移动相移动相是薄层色谱中的另一个重要组成部分。

它是指用于浸透薄层板的溶剂,通常是一种含有有机试剂和一定量的无机物的溶液。

移动相的选择是根据样品分子与固定相之间的相互作用来决定的。

1.3 样品的上样在薄层色谱中,样品一般通过在薄层板的起始点上直接上样的方式进行。

上样量的选择要根据需要分离的样品的浓度和色谱带的宽度来确定。

1.4 薄层色谱的分离机理薄层色谱的分离机理主要包括两种方式:吸附作用和分配作用。

吸附作用是指样品分子与固定相表面之间的相互作用,样品分子通过与固定相表面的相互作用而停留在固定相上。

分配作用是指样品分子在固定相和移动相之间的分配行为,样品分子在固定相和移动相之间快速来回分配,从而实现分离。

2. 薄层色谱的应用薄层色谱广泛用于不同领域的化学分析和生物分析中,其中一些常见的应用包括:2.1 药物分析薄层色谱在药物分析中具有重要的应用价值。

它可以用于药物的质量控制、药物代谢产物的分离和鉴定等方面。

薄层色谱可以快速分离出复杂混合样品中的组分,并提供高灵敏度和高分辨率的分离结果,从而有助于药物分析的准确性和可靠性。

2.2 环境监测薄层色谱在环境监测中起着重要的作用。

它可以用于分离和鉴定水样、土壤样品中的污染物。

薄层色谱是一种高效、快速和经济的分析技术,可以有效地分离出不同种类的污染物,并提供定量和定性分析结果。

2.3 食品安全检测薄层色谱在食品安全检测中也得到了广泛应用。

高效薄层色谱法及其应用简介

高效薄层色谱法及其应用简介

高效薄层色谱法及其应用简介1薄层色谱技术简介薄层色谱(thin layer chromatography,TLC)是一种快速、简便、高效、经济、应用广泛的色谱分析方法。

薄层色谱的特点是可以同时分离多个样品,分析成本低,对样品预处理要求低,对固定相、展开剂的选择自由度大,适用于含有不易从分离介质脱附或含有悬浮微粒或需要色谱后衍生化处理的样品分析。

TLC广泛地应用于药物、生化、食品和环境分析等方面,在定性鉴定、半定量以及定量分析中发挥着重要作用。

常规的TLC法存在展开时间长、展开剂体积需求大和分离结果差等缺点。

高效薄层色谱法是近年来迅速发展的一种高效、快速、操作简便、结果准确、灵敏度高和重现性好的薄层色谱新技术,已广泛用于各个领域。

1.1常规的薄层色谱方法TLC分离的选择性主要取决于固定相的化学组成及其表面的化学性质。

常规薄层色谱的固定相为未改性的硅胶、氧化铝、硅藻土、纤维素和聚酰胺等,平均颗粒度20μm,点样量1~5μL,展开时间30~200min,检测限1~5ng。

以正相色谱占主导地位,设备简单,所需资金投入少;不足之处是分离所需时间长,有明显的扩散效应。

1.2高效薄层色谱高效薄层色谱(HPTLC)采用更细、更均匀的改性硅胶和纤维素为固定相,对吸附剂进行疏水和亲水改性,可以实现正相和反相薄层色谱分离,提高了色谱的选择性。

C2、C8和C18化学键合硅胶板为常见反相薄层板。

高效板厚平均100~250μm、点样量0. 1~0. 2μL,展距3~6cm,展开时间3~20min,最小检测量0. 1~0. 5μg,较常规TLC可改善分离度,提高灵敏度和重现性,适用于定量测定。

2薄层色谱的在应用化学领域的应用应用化学学科领域非常宽广,涉及石油化工、精细化工、药物分析、环境监测等多方面。

色谱分析技术在这些领域都有着广泛的应用。

当然随着技术的发展,气象色谱和高效液相色谱的应用范围越来越广,已将成为现代化学化工领域一种必不可少的分析方法。

薄层色谱的应用及常见问题

薄层色谱的应用及常见问题

薄层色谱法的基本操作过程
显色
• (1). 蒸气显色法:常用挥发性的酸、碱如盐酸、
硝酸、浓氨、二乙胺等蒸气显色。
• (2). 试剂显色法:常用喷雾法或浸渍法处理,显
色试剂常用硫酸、碘的氯仿溶液、碱性高锰酸钾 溶液、磷钼酸等。 检视
• (1). 有色物质:日光下直接观察或在紫外灯下观
察荧光斑点。
• (2). 无色物质:在紫外灯下(指定波长)下观察
薄层色谱法的原理
利用混合物中各组份的物理化学性质的差别,在层析过程 中,在不相溶的两个相中分布的不同,达到分离目的。这 两个相,一个是涂布在薄层板上的吸附剂,叫固定相,另 一个是在展开过程中流过固定相的展开剂(有机溶剂), 叫流动相。 将待分离的样品溶液点在薄层板的一端,在密闭的容器中 用适宜的溶剂(展开剂)展开,由于吸附剂对混合物中不 同物质的吸附力大小不同,对极性大的物质吸附力强,对 极性小的物质吸附力弱。因此当溶剂流过时,不同物质在 吸附剂和溶剂之间发生连续不断地吸附、解吸附、再吸附、 再解吸附。宜被吸附的物质(极性大、被附力作用强的物 质)相对移动较慢,在薄层板上移动的距离就小;反之, 较难被吸附的物质(极性小、被附力作用弱的物质)相对 移动较快一些,在薄层板上移动的距离则大。经过一段时 间的展开,混合物中各组份在薄层板上连续不断地进行吸 附和解吸附过程,从而使各组份移动的速度产生差异,不 同物质就被彼此被分开,最后形成互相分离的斑点。
色谱基础上发展起来的一种色谱技术。
• 薄层色谱法的特点:具有设备简单、操作
方便、分离快速、直观等特点。尤其对中 药分析,既可对已知有效成分的品种定性、 定量,又可对成分复杂的品种进行特征性 成分分析或进而作指纹图谱分析。
• 薄层色谱法柱色谱 的区别之一是除材料及容器外,外界 环境条件对被分离物质的层析行为影 响很大,分离机制也很复杂;其次由 于分析的全过程是横向的离线多步骤 操作,所以操作技巧明显影响色谱质 量,注意控制影响色谱质量的因素是 非常重要的。

[参考实用]薄层色谱法实验报告

[参考实用]薄层色谱法实验报告

[参考实用]薄层色谱法实验报告实验报告:薄层色谱法的原理和应用一、实验目的:1.了解薄层色谱法的原理和应用。

2.掌握薄层色谱法的操作方法。

3.通过实验实践,了解如何通过薄层色谱法鉴定和分离混合物中的成分。

二、实验原理:薄层色谱法是一种分离和鉴定化合物的有效方法,其原理基于化合物在固定相和流动相之间的不同相互作用。

薄层色谱法的基本原理可以总结如下:1.固定相:将固体材料均匀地涂在薄层色谱板上,固定相可以是硅胶、氧化铝等。

固定相的选择要考虑待测物质与之的相互作用。

2.流动相:通常是有机溶剂或溶剂混合物,用于带动化合物在固定相上的运移。

3.样品的加载:将待测物质溶解于溶剂中,直接在固定相的起点处或者利用载体(例如玻璃纤维纸)上进行负载。

4.运移:将色谱板插入含有流动相的色谱槽中,通过毛细现象使得溶剂沿着板缘上升,溶质随着溶剂一起上升,与固定相发生相互作用。

5.鉴定和检测:用合适的方法在运移完成后,对色谱板上的斑点进行检测和鉴定。

三、实验操作步骤:1.准备工作:将薄层色谱板切割成所需尺寸,用铅笔在起点处标记出一个细线,用玻璃纤维纸负载样品。

2.准备固定相:将固定相在玻璃片或铝箔上均匀涂布,并将其插入薄层色谱槽中。

3.准备流动相:根据待测物质的性质和需求,选择合适的有机溶剂或溶剂混合物,并将其倒入薄层色谱槽中,使其淹没固定相。

4.进行色谱分离:将负载有样品的玻璃纤维纸插入薄层色谱槽中,让溶剂自下而上地进行运移。

5.取出色谱板:当溶剂前端接近色谱板的上端时,取出色谱板并迅速将其干燥。

6.鉴定和检测:将干燥的色谱板放入紫外灯下,观察样品斑点的颜色和位置,并记录下来。

四、实验结果和分析:根据实验操作步骤,完成了一次薄层色谱分离实验。

观察样品在薄层色谱板上的斑点后,我们可以得到样品中的不同成分在固定相和流动相之间的相互作用性质。

通过与已知标准物质的比对,可以对未知物质进行鉴定分析。

五、实验总结:通过本次实验,我对薄层色谱法有了更深入的认识和理解。

薄层色谱的应用及常见问题

薄层色谱的应用及常见问题
1.薄层板
? 市售薄层板 ? 自制薄层板
(1)玻璃板: 10 ×10cm 、10 ×20cm 、5×20cm 、 20 ×20cm 等。表面及四边要求光滑、平整(四角 均为直角)、薄厚均匀、质地均匀。洗净后不应 附水珠,于无尘处晾干,不应有斑痕,备用。必 要时用前用酒精棉球擦净晾干。
(2)铺板器:能使吸附剂在载体 (玻璃板)上铺成一 层厚度符合要求的平整、均匀的薄层。分自动铺 板器和手动铺板器两种。手动铺板器包括铺板架 和涂布器,涂布器用金属或有机玻璃均可,规格 有0.2-1.0mm 不等。
? 最理想的Rf值为0.4~0.5,良好的分离,Rf值为
0.15~0.75,如果Rf值小于0.15或大于0.75则分离 不好。
? 一种物质在固定的条件下有固定的 Rf值,不同物
质在相同的条件下可有不同的 Rf值。
? 因此,未知物与已知物(标准物质)在相同条件
下进行展开比较Rf值可提供定性依据。
薄层色谱分析的实验器材
薄层板的制备:铺板,一般取一份吸附剂 加三份水,研磨调成糊状,调制时慢慢搅 拌,勿使产生气 泡。涂布厚度一般为0.30.5nm ,室温下晾干。
薄层板制备的好坏直接影响色谱的结果, 薄层应尽量铺得均匀,厚度在0.25~ 0.5mm 之间。
硅胶和氧化铝的粘性差,使用前必须加粘 合剂。市售的硅胶G 和氧化铝G 均已含有 粘合剂半水石膏,可直接加入水调匀后铺 层。
? 鉴别样溶解后,放入安瓿瓶中而不要放在蒸发皿
中。
? 对照品溶液及对照药材溶液的制备:按规定的方
法制备。
薄层板制备或准备:
? 取自制或市售薄层板置 110 ℃活化0.5小时,置干
燥器内备用, 1周内可使用,超出 1周,用前需再 次活化,不主张反复活化,长期使用。(“活化” 就是在高温除去水分)

薄层色谱及其在药物分析的应用

薄层色谱及其在药物分析的应用
原理
薄层色谱法的原理基于不同组分 在固定相和流动相之间的分配平 衡,通过控制组分的迁移速度, 实现各组分的分离。
薄层色谱法的历史与发展
历史
薄层色谱法最早由瑞典化学家赫维西在1903年发明,经过多年的发展,已成为 一种成熟、可靠的分离分析方法。
发展
随着科技的进步,薄层色谱法不断得到改进和完善,如提高分离效率、降低检 测限、发展自动化技术等,使其在药物分析、生物样品分析等领域得到广泛应 用。
选择合适的展开方式。
显色与检视
01
显色与检视是薄层色谱法的最 后步骤,通过显色剂或其他检 测手段使待分离组分在薄层板 上显现并检视。
02
显色与检视需注意选择合适的 显色剂和检测方法,以保证组 分的可见度和检出限。
03
常用的检测方法有荧光检测、 紫外可见吸收检测、化学发光 检测等,根据不同的组分选择 合适的检测方法。
药物中杂质的检查
杂质定性
通过与已知杂质对照,可以确定薄层 色谱中出现的斑点是否为药物中的杂 质。
杂质限量
通过测量杂质斑点与有效成分斑点的 相对大小,可以计算出杂质的限量, 确保药物的质量符合标准。
药物制剂的鉴别与质量控制
鉴别
通过比较不同制剂中有效成分的薄层色谱行为,可以确定制 剂的真伪。
质量控制
薄层色谱法的分类
根据固定相的物理状态
薄层色谱法可分为硅胶薄层色谱法、氧化铝薄 层色谱法和纤维素薄层色谱法等。
根据操作方式
薄层色谱法可分为手工操作和自动化操作两种 方式。
根据分离原理
薄层色谱法可分为吸附色谱、分配色谱和离子交换色谱等。
02
CATALOGUE
薄层色谱法的操作流程
薄层板的制备

TLC(薄层层析色谱)技术原理与应用

TLC(薄层层析色谱)技术原理与应用

TLC(薄层层析色谱)技术原理与应用一、薄层层析(TLC)简介薄层层析是将吸附剂或者支持剂(有时加入固化剂)均匀地铺在一块玻璃上,形成薄层。

把欲分离的样品点在薄层上,然后用适宜的溶剂展开,使混合物得以分离的方法。

由于层析在薄层上进行故而得名。

薄层层析是一种微量、快速的层析方法。

它不仅可以用于纯物质的鉴定,也可用于混合物的分离、提纯及含量的测定。

还可以通过薄层层析来摸索和确定柱层析时的洗脱条件。

根据分离的原理不同,薄层层析可以分为两类:用吸附剂铺成的薄层所进行的层析为吸附薄层层析,吸附薄层中常用的吸附剂为氧化铝和硅胶;用纤维素粉、硅胶、硅藻土为支持剂铺成的薄层,属于分配薄层层析。

吸附TLC→固定相为吸附剂→氧化铝、硅胶。

(较多用)TLC→分配TLC→固定相为液态(通常为水)→固定相吸附在支持剂上。

(一)吸附薄层的基本原理:吸附薄层主要是利用吸附剂对样品中各成分吸附能力不同,及展开剂对它们的解吸附能力的不同,使各成分达到分离。

吸附作用主要由于物体表面作用力、氢键、络合、静电引力、范德华力等产生。

吸附强度决定于吸附剂的吸附能力,还受被吸附成分的性质影响,更与展开剂的性质有关。

1.吸附薄层层析:在硅胶薄层板上,样品中的两成分是两种结构近似的染料,在展开剂四氯化碳的作用下。

在展开剂和薄层板之间不断地产生吸附、解吸,再吸附,再解吸,……。

由于对氨基偶氮苯的极性比偶氮苯的极性稍强一些,层析的结果,对氨基偶氮苯受到的吸附作用稍强于偶氮苯,从而将两者分离。

展开结束以后,会在薄层板上形成两个斑点,混合物中的成分得以分离。

中药中的有效成分复杂多样,结构近似者不少。

特别是对未知结构的成分分析,设计并摸索出合理的层析条件是首要任务。

只有先设计出可用的层析条件,再经摸索改进,才可能对未知或者已知成分进行成功地分离。

然后才能谈得上进一步的分析研究。

要设计出合理有效的层析条件,必须熟悉薄层层析条件的选择的基本要领。

下面对薄层层析条件的选择做一初步介绍。

薄层色谱技术在中药质量控制中的应用

薄层色谱技术在中药质量控制中的应用

薄层色谱技术在中药质量控制中的应用中药是我国历史悠久的传统医学,具有保健、治疗和预防疾病的功效。

但由于中药的组分复杂、质量易受环境和种植用药条件影响,因此,如何进行中药质量的控制和评价,一直是中药研究的重要课题。

薄层色谱技术是一种常用的色谱分析方法,具有分离简单、速度快、灵敏度高等优点,因此在中药质量控制中得到了广泛应用。

一、色谱技术在中药质量控制中的应用色谱技术作为一种分离、检测药物成分的有效手段,在中药质量控制中有着广泛的应用。

其中,薄层色谱技术具有以下几点优势:1. 分离简单:薄层色谱技术操作简单,分离时间较短,只需少量样品即可完成。

2. 灵敏度高:薄层色谱技术可对微量物质进行分析,灵敏度高。

3. 普适性强:由于薄层色谱技术适用于多种不同类型的物质,因此在中药质量控制中的应用领域很广。

二、薄层色谱技术在中药指纹图谱中的应用中药指纹图谱是中药研究中广泛采用的一种质量控制方法,是通过对中药制剂进行化学成分分析,建立起中药成分的“指纹图谱”,用于中药质量评价和鉴别。

薄层色谱技术被广泛应用于中药指纹图谱的建立中,其具体操作流程如下:1. 采用合适的溶剂体系,将中药中的有效成分溶解。

2. 用薄层硅胶板(TLC板)或多盘薄层板分别分离药物成分。

3. 根据上色的方式,经过展开,鉴别、扫描等操作,获得中药指纹图谱。

通过建立中药指纹图谱,可以进行中药质量的评价和鉴别,为中药的质量控制提供了基础依据。

三、薄层色谱技术在中药炮制过程中的应用中药炮制是指对中药材进行一定的预处理工序,以改变其内在成分组成、性质和药效等等,来达到提高其药效和质量的目的。

薄层色谱技术在中药炮制过程中的应用包括以下几方面:1. 对中药材的炮制过程进行有效的监测和评估,提高中药质量。

2. 对比分析研究不同炮制过程对中药材中活性成分的影响。

3. 对照标准,评价不同炮制工艺下中药材的质量,并确定优化的炮制工艺。

通过这些应用,薄层色谱技术在中药炮制过程中起到了重要的作用,以便更好地控制中药的质量。

薄层色谱法的应用

薄层色谱法的应用

薄层色谱法的应用
摘要
薄层色谱(TLC)是一种实用的分离检测方法,它可以分离出混合物中的多种组分,并且能够快速、简便准确地检测混合物中的成分。

薄层色谱法在药物分析、有机合成试验、农药残留检测、食品组分分析、污染控制等方面有广泛的应用。

本文将介绍薄层色谱的基本原理,以及其在化学鉴定、药物分析等方面的应用。

关键词:薄层色谱法;药物分析;有机合成试验;农药残留检测;食品组分分析
1.简介
薄层色谱是一种实用的分离检测方法,主要是基于物质在二维固体表面上的不同吸附性和分散性而实现物质的分离和识别[1]。

薄层色谱法是一种物理/化学的分离技术,它可以帮助科学家从混合物中分离出单一成分。

它可以更高效地获得精细、灵敏的结果,而且成本低廉。

薄层色谱法也被称为分子密度法,是一种实用的分离分析技术,可以用于分离出混合物中的多种组分,并且能够快速、简便准确地检测混合物中的成分。

它的主要步骤是将样品涂在薄层中,并使用溶剂溶解,然后使用物理/化学化学方法将溶解的组分区分开来。

薄层色谱的原理和应用

薄层色谱的原理和应用

薄层色谱的原理和应用1. 薄层色谱的简介•薄层色谱是一种分离技术,用于分离和鉴定化合物的混合物。

•薄层色谱基于物质在固定相和流动相之间的相互作用进行分离。

•薄层色谱主要用于分析和监测食品、药物、环境污染物等领域。

2. 薄层色谱的原理•色谱板:薄层色谱使用一张薄而平坦的玻璃或塑料板作为固定相的载体。

•固定相:固定相是一种吸附剂,涂在色谱板的一端,通常是硅胶或活性氧化铝。

•流动相:流动相是一种溶液,通过色谱板时与固定相发生相互作用。

•样品施加:样品由移液器或微量注射器在色谱板的起始点施加。

•色谱发展:色谱板在被施加了样品的位置上,沿固定相移动,以便分离样品。

•显色检测:分离后的样品通常通过加色剂或暗室中使用紫外线或其他检测方法进行显色。

3. 薄层色谱的步骤•准备色谱板:准备一张干净的色谱板,通常需要在玻璃或塑料板上涂上固定相。

•建立起始线:使用直尺和铅笔在色谱板上标记起始线。

•施加样品:使用移液器或微量注射器在起始线上滴加样品。

•开始发展:将色谱板放入合适的容器中,向容器中加入流动相溶液。

•发展过程:流动相沿固定相上升,带动样品分子向上运动。

•停止发展:当流动相在色谱板上移动到所需的距离后,停止发展。

•检测结果:使用适当的检测方法检测分离后的样品。

4. 薄层色谱的应用•食品分析:薄层色谱可用于检测食品中的添加剂、农药残留物和重金属。

•药物分析:薄层色谱用于药物的分离和鉴定,包括抗生素、激素和中药成分的分析。

•环境监测:薄层色谱可用于检测环境中的有机污染物和污染物的来源。

•生物化学研究:薄层色谱在生物化学研究中用于分离和纯化蛋白质、核酸和其他生物分子。

•物质鉴别:薄层色谱可用于鉴别不同样品中的物质成分。

5. 薄层色谱的优势和局限性5.1 优势•快速分离:薄层色谱的分离过程通常只需要几分钟到几小时。

•简单操作:薄层色谱的操作相对简单,不需要专门的仪器设备。

•灵敏检测:薄层色谱可以使用各种检测方法进行分离样品的检测。

薄层色谱法应用

薄层色谱法应用

薄层色谱法应用
薄层色谱法(Thin Layer Chromatography, TLC)是一种常用的分离和分析技术,广泛应用于药物分析、食品检测、环境监测、有机合成等领域。

以下是薄层色谱法的一些常见应用:
1. 药物分析:薄层色谱法可以用于药物的定性和定量分析。

通过比较样品与标准品在薄层色谱板上的迁移距离和颜色等特征,可以确定药物的成分和含量。

2. 食品检测:薄层色谱法可以用于食品中有害物质的检测,比如农药残留、食品中的添加剂等。

通过与标准品的比对,可以确定食品中是否存在有害物质及其含量。

3. 环境监测:薄层色谱法可用于环境样品中有机物的分析。

通过将样品提取后在薄层色谱板上展开,可以分离出不同成分并进行定性和定量分析,从而评估环境污染程度。

4. 有机合成中的反应监测:薄层色谱法可以用于有机合成反应的监测和优化。

通过在不同时间点采集反应物料,在薄层色谱板上进行分析,可以确定反应的进行程度和副反应产物的生成情况。

总之,薄层色谱法具有简单、快速、灵敏和经济等特点,广泛应用于各种领域的分析和研究中。

薄层色谱法在当前中药质量标准中的应用探讨

薄层色谱法在当前中药质量标准中的应用探讨

一、引言近年来,薄层色谱法作为一种简便、快速、准确的分析方法,得到了广泛应用。

特别是在中药质量标准的制定和审核中,薄层色谱法的应用越来越受到重视。

本文旨在探讨薄层色谱法在当前中药质量标准中的应用情况,并分析其优势和局限性。

二、薄层色谱法在中药质量标准中的应用1. 方法原理薄层色谱法是一种基于物质分离、鉴定和定量的分析方法。

它通过将样品溶液涂布在薄层板上,利用在固定相上运动的色谱分离原理,实现对不同化学成分的分离和定量。

在中药质量标准中,薄层色谱法通常用于中药原料药和中成药的质量鉴定、含量测定和成分分析。

2. 应用范围薄层色谱法可以对中药中的多种成分进行检测和鉴定,如生物碱、黄酮类、皂苷、挥发油等。

它适用于中药药材、中药饮片、中药提取物、中药制剂等各个环节的质量标准制定和审核。

在一些特殊的情况下,薄层色谱法还可以用于判断中药的真伪和地域来源。

3. 实际应用目前,薄层色谱法已经被纳入了我国《中华人民共和国药典》和《中药标准》等质量标准中。

许多中药的质量标准中都对薄层色谱法的操作规程、色谱条件和质量评价进行了详细规定。

在生产和质检过程中,许多医药企业也积极采用薄层色谱法进行中药成分的分析和控制。

三、薄层色谱法的优势1. 检测速度快相比于高效液相色谱法和气相色谱法,薄层色谱法的检测速度更快,一般情况下只需要几十分钟到数小时即可完成分析。

这对于需要大批量样品分析的中药生产企业来说,大大提高了检测效率。

2. 操作简便薄层色谱法的操作相对简单,不需要复杂的仪器设备,只需薄层板、样品溶液、显色剂等简单实用的试剂即可完成分析。

这降低了中小型企业引入该技术的门槛,也方便了基层医疗单位进行快速检测。

3. 成本低廉薄层色谱法所需的设备和试剂成本相对较低,对于一些经济条件有限的单位来说,采用薄层色谱法进行质量检测是一种经济实惠的选择。

四、薄层色谱法的局限性1. 分离效果受限由于薄层色谱法对于分离效果和分辨率的要求较高,对于某些复杂的中药成分,可能无法完全分离,导致检测结果不够准确。

薄层色谱点样仪应用领域

薄层色谱点样仪应用领域

薄层色谱点样仪应用领域薄层色谱点样仪是一种常用的分析仪器,广泛应用于化学、生物、医药、环境等领域。

下面将从这些领域分别介绍薄层色谱点样仪的应用。

1. 化学领域:薄层色谱点样仪在化学领域中有着广泛的应用。

首先,它可以用于分离和鉴定化合物。

通过在薄层色谱板上涂抹待分离的混合物,然后将其置于薄层色谱点样仪中进行分析,可以得到各个组分的相对迁移率和相对含量,从而实现化合物的分离和鉴定。

此外,薄层色谱点样仪还可以用于分析反应的进程和产物。

通过在反应过程中取样,然后在薄层色谱板上进行分析,可以了解反应的进程和产物的生成情况。

2. 生物领域:薄层色谱点样仪在生物领域中也有着重要的应用。

首先,它可以用于分离和鉴定生物样品中的化合物。

例如,可以用薄层色谱点样仪分离和鉴定植物中的活性成分,如生物碱、黄酮类化合物等。

此外,薄层色谱点样仪还可以用于分析生物样品中的代谢产物。

通过在薄层色谱板上进行分析,可以了解代谢产物的种类和含量,从而研究生物样品的代谢过程。

3. 医药领域:薄层色谱点样仪在医药领域中也有着广泛的应用。

首先,它可以用于药物的分离和鉴定。

通过在薄层色谱板上进行分析,可以得到药物的相对迁移率和相对含量,从而实现药物的分离和鉴定。

此外,薄层色谱点样仪还可以用于药物的质量控制。

通过比较待测样品与标准品的色谱图,可以判断待测样品中是否含有异常成分,从而保证药物的质量。

4. 环境领域:薄层色谱点样仪在环境领域中也有着重要的应用。

首先,它可以用于环境样品中有机污染物的分离和鉴定。

通过在薄层色谱板上进行分析,可以得到有机污染物的相对迁移率和相对含量,从而了解环境样品中有机污染物的种类和含量。

此外,薄层色谱点样仪还可以用于环境样品中有机污染物的监测。

通过定期对环境样品进行分析,可以了解有机污染物的变化趋势,从而评估环境的污染程度。

综上所述,薄层色谱点样仪在化学、生物、医药、环境等领域都有着广泛的应用。

它可以用于分离和鉴定化合物,分析反应的进程和产物,分离和鉴定生物样品中的化合物,分析生物样品中的代谢产物,药物的分离和鉴定,药物的质量控制,环境样品中有机污染物的分离和鉴定,以及环境样品中有机污染物的监测。

薄层色谱的适用范围

薄层色谱的适用范围

薄层色谱的适用范围薄层色谱(Thin Layer Chromatography,TLC)是一种常用的色谱技术,主要用于分离和鉴定化合物混合物中的成分。

其适用范围如下:1.有机物的分离和纯化:薄层色谱可用于分离和纯化各种有机化合物,包括天然产物、药物、染料、香料等。

2.化合物的鉴定和定量:薄层色谱可用于鉴定化合物的种类和纯度水平,通过与标准品对照,可以确定未知物的身份。

此外,薄层色谱还可用于定量分析,根据峰的面积或高度,可以估计化合物的含量。

3.食品和环境样品的分析:薄层色谱广泛应用于食品和环境样品中化合物的分析。

例如,可以用于检测食品中的添加剂、农药残留、毒素等,以及环境样品中的有机污染物、金属离子等。

4.药物代谢产物的研究:薄层色谱在药物代谢产物的研究中发挥重要作用。

通过分析药物在体内代谢的产物,可以了解其代谢途径和代谢酶的作用。

此外,还可以用于药物的药代动力学研究。

5.生物活性化合物筛选:对于天然产物或合成化合物库,薄层色谱可用于快速筛选具有生物活性的化合物。

通过与生物试剂(例如酶、受体、细胞)进行反应,观察哪些化合物有活性,进而进行进一步的分析和研究。

6.蛋白质和核酸分析:薄层色谱可以用于分析蛋白质和核酸的纯度和组分。

例如,可以通过在薄层色谱板上进行电泳分离,然后使用染色剂进行显色,来检测蛋白质或核酸的存在和纯度。

7.复杂混合物的组分分析:薄层色谱可以用于复杂混合物中多个化合物的分离和分析。

通过使用不同的固定相、溶剂体系和检测方法,可以达到较好的分离效果,并得到各个组分的定性和定量信息。

总的来说,薄层色谱是一种灵活、快速、经济的色谱技术,广泛应用于化学、生物、药学等领域。

它适用于分离和分析各种化合物,不仅可以提供物质鉴定和纯度评估,还可用于分析化合物的组分、结构和活性,具有广泛的应用前景。

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薄层色谱分析的实验器材
8.记录设备
• 示意图 • 普通相机或专业设备拍摄 • 薄层扫描仪(定量)
9.试剂
• (1). 样品处理用一般为分析纯,按样品稀释
要求处理。
• (2). 配制展开系统用分析纯,不能与被分离
物发生化学反应。
薄层色谱法的基本操作过程
薄层色谱法的ห้องสมุดไป่ตู้本操作过程
供试品溶液的制备:按规定的方法制备。
• 鉴别样溶解后,放入安瓿瓶中而不要放在蒸发皿
中。
• 对照品溶液及对照药材溶液的制备:按规定的方
法制备。
薄层板制备或准备:
• 取自制或市售薄层板置110℃活化0.5小时,置干
燥器内备用,1周内可使用,超出1周,用前需再 次活化,不主张反复活化,长期使用。(“活化” 就是在高温除去水分)
• 聚酰胺薄膜不需要活化
• 最理想的Rf值为0.4~0.5,良好的分离,Rf值为
0.15~0.75,如果Rf值小于0.15或大于0.75则分离 不好。
• 一种物质在固定的条件下有固定的Rf值,不同物
质在相同的条件下可有不同的Rf值。
• 因此,未知物与已知物(标准物质)在相同条件
下进行展开比较Rf值可提供定性依据。
薄层色谱分析的实验器材
• 以特征成分鉴别药材或处方中的药味 • 鉴别药材真伪 • 区别不同药用部位 • 毒性成分的检查 • 检查是否掺有伪品、色素等。 • 同时鉴别多个药材的多种成分 • 生物活性成分检测
比移值(Rf值)
• 在固定的条件下(吸附剂、温度、展开剂等),
不同化合物如甲和乙在薄层上以不同的速度移动, 当停止展开后,各组分的色斑在薄层上的位置可 用尺来测量,以比移值(Rf值)表示。
色谱基础上发展起来的一种色谱技术。
• 薄层色谱法的特点:具有设备简单、操作
方便、分离快速、直观等特点。尤其对中 药分析,既可对已知有效成分的品种定性、 定量,又可对成分复杂的品种进行特征性 成分分析或进而作指纹图谱分析。
• 薄层色谱法的特点:薄层色谱是一种
“敞开系统”的色谱技术,与柱色谱 的区别之一是除材料及容器外,外界 环境条件对被分离物质的层析行为影 响很大,分离机制也很复杂;其次由 于分析的全过程是横向的离线多步骤 操作,所以操作技巧明显影响色谱质 量,注意控制影响色谱质量的因素是 非常重要的。
常用吸附剂
• 硅胶G、硅胶GF254、硅胶H、硅胶HF254 • 聚酰胺 • 硅藻土 • 氧化铝 • 纤维素 • 表面改性固定相
硅胶:具有表面活性、略带酸性(pH4-5)的多孔 硅胶(Sio2·xH2O),是至今薄层色谱法使用得最 普遍的薄层材料。
聚酰胺:属特殊类型有机薄层材料。具有表面酰胺 基,对酚、羧酸、氨基酸等能形成氢键的物质具 有特别的选择性。常用来鉴别黄酮、酚类化合物。
薄层板的制备:铺板,一般取一份吸附剂 加三份水,研磨调成糊状,调制时慢慢搅 拌,勿使产生气 泡。涂布厚度一般为0.30.5nm,室温下晾干。
薄层板制备的好坏直接影响色谱的结果, 薄层应尽量铺得均匀,厚度在0.25~ 0.5mm之间。
硅胶和氧化铝的粘性差,使用前必须加粘 合剂。市售的硅胶G 和氧化铝G 均已含有 粘合剂半水石膏,可直接加入水调匀后铺 层。
薄层色谱分析的实验器材
6.展开容器(展开缸):
• 上行法:平底展开室、双槽展开室。以双
槽层析缸为佳,双槽层析缸具有节省溶剂 及方便预饱和等优点。
• 水平展开:水平式展开室
7.显色设备
• 喷雾器:不受试剂腐蚀并能使显色剂呈细
而均匀的雾状喷出。
• 显色剂浸渍槽:显色均匀但易扩散 • 紫外光灯:显色前或后观察
薄层色谱的应用及常见问题
薄层色谱法的定义
• 薄层色谱法(TLC)系将供试品溶液点于薄
层板上,在展开容器内用展开剂展开,使 供试品所含成分分离,所得色谱图与适宜 的对照物按同法所得的色谱对比,并可用 薄层扫描仪进行扫描,用于,鉴别、检查 或含量测定。
薄层色谱法的发展和特点
• 薄层色谱法的发展:从经典的柱色谱及纸
薄层色谱分析的实验器材
2. 干燥板架:用于放置铺好的薄层板 3. 干燥箱:温度易于调控,用于活化薄层板。 4.干燥器:用于放置活化后的薄层板。 5.点样器:最常用、最方便的为微升毛细 管,规格有0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、 10μl等。也有选用色谱用微量注射器(平 头)、半自动或自动点样器材。 点样模式:点状、条状
薄层色谱法的基本操作过程
显色
• (1). 蒸气显色法:常用挥发性的酸、碱如盐酸、
硝酸、浓氨、二乙胺等蒸气显色。
• (2). 试剂显色法:常用喷雾法或浸渍法处理,显
色试剂常用硫酸、碘的氯仿溶液、碱性高锰酸钾 溶液、磷钼酸等。 检视
• (1). 有色物质:日光下直接观察或在紫外灯下观
察荧光斑点。
• (2). 无色物质:在紫外灯下(指定波长)下观察
谢 谢!
薄层色谱法的原理
利用混合物中各组份的物理化学性质的差别,在层析过程 中,在不相溶的两个相中分布的不同,达到分离目的。这 两个相,一个是涂布在薄层板上的吸附剂,叫固定相,另 一个是在展开过程中流过固定相的展开剂(有机溶剂), 叫流动相。 将待分离的样品溶液点在薄层板的一端,在密闭的容器中 用适宜的溶剂(展开剂)展开,由于吸附剂对混合物中不 同物质的吸附力大小不同,对极性大的物质吸附力强,对 极性小的物质吸附力弱。因此当溶剂流过时,不同物质在 吸附剂和溶剂之间发生连续不断地吸附、解吸附、再吸附、 再解吸附。宜被吸附的物质(极性大、被附力作用强的物 质)相对移动较慢,在薄层板上移动的距离就小;反之, 较难被吸附的物质(极性小、被附力作用弱的物质)相对 移动较快一些,在薄层板上移动的距离则大。经过一段时 间的展开,混合物中各组份在薄层板上连续不断地进行吸 附和解吸附过程,从而使各组份移动的速度产生差异,不 同物质就被彼此被分开,最后形成互相分离的斑点。
化合物本身不同颜色的暗斑或荧光斑点,或显色 后按有色物质进行检视.
薄层色谱法的记录内容
• 实验时间、实验人员 • 温、湿度 • 供试品、对照物质制备过程 • 薄层板(自制或市售、类别) • 点样量 • 展开剂 • 显色剂、检视方法 • 图谱记录(最好拍摄照片) • 结果判定:供试品色谱中在与对照品色谱相应的
• 供试品的溶剂在原点的残留会改变展开的选择性,
因此点样时同步干燥或继后干燥以除去残留的溶 剂是需要的。
• 点样时注意不要损伤薄层板表面。薄层表面的机
械损伤对色谱质量优较大影响。
薄层色谱法的基本操作过程
展开
• 展开剂的制备:按比例配制,现配现用。
• 先将展开剂放在层析缸中,盖上缸盖,让缸内溶剂蒸
气饱和5~10min。(薄层色谱与柱色谱区别之一就是 溶剂的蒸气相在展开缸中参与色谱展开行成三维的层 析过程。)再将点好试样的薄层板样点一端朝下放入 缸内,浸入深度距底边0.5-1.0cm,距原点5mm为 宜,切勿使样点浸入溶剂中,盖好缸盖,展开剂因毛 细管效应而沿薄层上升,样品中组分随展开剂在薄层 中以不同的速度自下而上移动而导致分离。展距以7 -15cm为宜,展距过大,斑点扩散,精确度差,展 距过小,分离效果差。取出薄层板,放平,标明溶剂 前沿位置,晾干。
1.薄层板
• 市售薄层板 • 自制薄层板
(1). 玻璃板:10×10cm、10×20cm、5×20cm、 20×20cm等。表面及四边要求光滑、平整(四角 均为直角)、薄厚均匀、质地均匀。洗净后不应 附水珠,于无尘处晾干,不应有斑痕,备用。必 要时用前用酒精棉球擦净晾干。
(2). 铺板器:能使吸附剂在载体(玻璃板)上铺成一 层厚度符合要求的平整、均匀的薄层。分自动铺 板器和手动铺板器两种。手动铺板器包括铺板架 和涂布器,涂布器用金属或有机玻璃均可,规格 有0.2-1.0mm不等。
位置上,显相同颜色的斑点。
温湿度的影响
• 相对湿度:由于硅胶表面吸附水分的作用
是可逆的,在日常实验中薄层板的活性取 决于实验室的相对湿度,在其他条件相同 的情况下,相对湿度对色谱质量的影响是 很明显的。
• 温度:在相同湿度的条件下,一般在较高
温度展开时,Rf值高,在较低温度展开时, Rf值低。因温度不同,展开剂中各有机溶剂 因沸点、蒸气压、蒸发数目、相对密度等 不同蒸发程度各异,必然影响欲分离物质 的层析行为。
薄层色谱法的优点
1. 展开时间短,一般十至几十分钟; 2. 分离能力强,斑点集中; 3. 灵敏度高,通常几至几十微克的物质即可被检出; 4.显色方便,可直接喷洒腐蚀性的显色剂,如浓硫
酸等; 5.所用仪器简单,操作方便,可以普及; 6.薄层板价格低廉,一块板可同时检测多个样品; 7.色谱直观性强。
薄层色谱法的应用
薄层色谱法的基本操作过程
点样
• 点样量不能过大,原点直径不宜过大。圆点状直
径一般不大于3mm;条带状宽度一般为5-10mm、 高效板条带宽度一般为4-8mm。点样基线距底边 为10-15mm,高效板为8-10mm,距两边不少于 1.0cm,两个样点距离可视斑点扩散以不影响检 出为宜,一般为1.5-2.0cm,点样基线与薄层板地 边平行。
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