植物组织培养第十二章2几种花卉的组织培养

花蕾（开花前数日的）
酒精70％擦拭
花蕾表面
酒精灯上灼烧3～5s
剥
开花蕾（无菌培养皿内）
分别切取花丝、
子房、花柱等（3～5mm）
接种。
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（2）培养基
花柱（花梗、茎段等）：MS + IAA l.0 + BA 0.2 ； 叶片用：MS+NAA 1.0+BA 0.1 ； 植株分化：MS + NAA 2.0 + IBA 0.4 + Kt0.05； 以上均附加：蔗糖3％和琼脂0.7％，pH5.8～6.2。
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二、传统的繁殖方法
1.分球法：百合母球生长过程中，于茎轴上逐渐
形成小鳞茎，称“茎生小球”，经一年栽培，可分 生1～3个甚至7～9个小球。
2.鳞片扦插法：于8～9月，取成熟健壮的老鳞茎，
阴干后剥下鳞片，斜插于湿润木屑或颗粒泥炭中，在 适宜温度、湿度下，经2～4个月生根发叶，并在鳞片 基部生长出小磷片，1片鳞片可获50～60个子球，
第十二章
(2)
几种花卉的组织培养
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本章内容与目的要求：
➢ 掌握百合生物学特性和快速繁殖方法
➢ 掌握兰科植物组培的大致过程 ➢ 掌握胡蝶兰花梗组培的方法
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第一节 百合的组织培养
★ 全世界已发现百合约89余种，主要分布地区是中 国、日本、北美和欧洲等温带地区；
★ 北美百合协会将百合园艺品种划分为10个种系； ★ 观赏栽培的主要是4个种系，即：亚洲百合杂种
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三、百合的组织培养
★本方法自20世纪70年代后期开始，日本人以叶 片为外植体诱导出大花卷丹的小植株； ★我国于80年代初由兰洲百合的花药、花丝等培 育出完整小植株。 ★ 80年代以后，培养出去病毒的百合种苗和通过 胚培养获得远缘杂交的新品种。
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1、花器的组织培养
(1)取材和灭菌
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花梗 茎尖
(3)培养条件：
光照强度2000Lx，光照时间13h/d，保持恒温 25℃。
（4）移栽：
生根之前可以进行过渡培养，不加激素。试管 苗的移栽用苔藓作基质。
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复习思考题
(1)百合的生物学特性怎样?怎样用鳞茎进行组 织培养? (2)兰科植物培养过程包括哪几个环节?
1.茎尖培养
(1) 将芽外植体消毒：除去叶后，用水冲洗，10
％的漂白粉灭菌15min。除去叶原基后，用5％的漂 白粉灭菌l0min，以后用无菌水冲洗3～5次。
(2) 接种：切取茎尖和各叶基部的腋芽，约2～
3mm大小，接种到培养基中。
(3) 培养基：采用VW培养基，添加15％CM进行液
体培养，或进行固体培养。
★愈伤组织转移到分化培养基10周后，逐渐膨大，分源自文库出 许多大小不等的鳞茎，并在基部长出许多粗壮的根。
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（5）试管苗移栽
★ 首先应把根部的培养基清洗干净。
★ 移栽前，放在4～10℃低温条件下锻炼2～3周， 这样移栽后的幼苗生长更加健壮。
★ 移栽幼苗最好用消毒的腐殖土或泥炭土加蛭石的 混合基质，育苗盘必须清洗消毒。
(3)蝶兰怎样用花梗组织培养方法繁殖?
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★法国Morel(1952年)等观察到虎头兰的茎尖在无菌培养基上
能形成扁圆形的小球体，这些小球体与种胚发育成的原球体 非常相似，即原球茎，是兰花培养成功的关键。
★原球茎增殖很快，并可形成幼苗。这一方法和技术在兰花
生产上得到广泛的应用，造就了现在的“兰花工业”的发展。
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国 兰 原 球 茎 的 增 殖
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3.继代培养
★ 接种后1～2个月培养的茎尖即可形成原球茎球 状体，以后即发芽生根长叶。
★ 发芽前把它切成小块进行转移，让它继续不断 地形成原球茎球状体。
★ 这样连续的进行继代培养，短时间可以得到大 量的原球茎球状体。
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4、试管苗的移栽
★ 苗有3～4叶大小，根2～3条时可移植。
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麝香百合
一、形态特性和生物学习性
★百合是百合科百合属植物的统称，为多年生的草 本植物。 ★鳞茎无皮，广卵形，直径5 ~ 8cm，白色或黄白色， 茎高30~90cm，直立，叶多而散生，披针形，光滑。 ★花单生或数花横向着生茎顶，花朵呈喇叭状、筒 状，有清香。花被先端外卷，花被筒深处淡绿色。 ★百合属于球根花卉，要求肥沃、疏松和排水良好 的沙壤土，以有利于鳞茎发育膨大。
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2、鳞片组织培养
对于扩大培养材料来源，加快繁殖速度和培养得到 无病毒苗等皆有重要意义。
（1）取材与消毒：以鳞片外植体，受土壤微生物的影响，
所以污染率相当高。为此外植体消毒要严加注意，可应用几种 消毒剂并用的方法，切取0.5cm2鳞片接种。
（2）初代培养基：MS + 2,4–D 1.0 + IAA 1.0 + Kt 0.5 继代培养：MS + NAA 2 + IBA 0.4 + Kt 0.05
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茎尖
(4) 培养条件
★ 温度25℃，光照强度2000Lx，照明16～24h。 ★ 液体培养基用60r／min的速度进行振荡培养，培 养7～10d再转移到新的培养基，培养1个月后转移到 固体培养基。
★ 培养1个月即可形成原球茎球状体，以后再进行继 代培养，不断繁殖原球茎球状体。
★ 移栽后注意湿度管理，相对湿度控制在80～90％， 防止烈日曝晒，后期幼苗不宜浇水过多，并及时喷 洒药剂预防病虫危害。
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四、鳞茎打破休眠的方法
百合栽培中首先避免因球根的休眠而导致发芽率不高及盲 花。仅靠贮藏无法打破休眠，需要人工打破休眠，方法有：
1.冷藏：13～15℃预冷，3～5℃冷藏6-7周。 2.温水浸泡：于48℃的温水中，每隔2～3min提起再泡入，
（3）培养条件
光照度2000Lx，每天照用15h，保温 20℃。
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(4)生长情况
★ 花器部位：以花丝的部位为好，成活率很高， 发芽较多；其次为子房和花柱部分。 ★ 子球形成途径：一是从切中处形成愈伤组织， 以后再发芽；或是从切口直接产生芽。 ★ 麝香百合花器培养得到的植株，生长约6个月 即可开花，未发现不正常现象，只是母株的花 较大，且全株无病毒症状。
(1)从试管内取的苗用水将琼脂冲洗掉，冲洗不彻 底 会发生霉菌腐烂。 (2)经水冲洗的苗吸干水分阴晾1h再定植。 (3)移栽后保证，50％的弱光，温度20～25℃，保持 一定的湿度，不能完全密闭，也要注意通风。根在 开始生长后可1周浇一次1000倍的复合肥料。
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第三节 蝴蝶兰的培养
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传统机械按键结构 层图：
按
PCB
键
A
开关 键
传统机械按键设计要点：
1.合理的选择按键的类 型，尽量选择平头类的 按键，以防按键下陷。
2.开关按键和塑胶按键 设计间隙建议留 0.05~0.1mm，以防按键 死键。
一、概述
★兰花系兰科植物，在自然条件下主要靠分株繁殖，繁殖率
一年只有几倍，所以无法大量繁殖生产，而且由于长期进行 无性繁殖，带病毒株增多，逐渐使种性降低，影响生长。
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国 兰 幼 苗 的 形 成
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二、培养部位
主要部位是：顶芽侧芽和花梗等
1.新芽的茎尖
茎尖是细胞分裂最旺盛的部分，也是培养成功 率最高的部位。
2.花梗
当兰花开花约一个月后，剪取其花梗顶端及若干 个花梗腋芽。
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三、茎尖的选取、灭菌和接种
1.芽的准备和灭菌
灭菌：切取2～6cm大小的芽
流水冲洗
去掉1～2片苞叶
10％次氯酸钠或漂白粉溶液
中浸10 ～ 15 min
接种。
剥离和切割：
在切割时应将芽放在无菌水中操作，减少褐变的机会。 以消除病毒为目的时要尽量小些，可以小到0.1mm：若以繁 殖为目的，培养物可在2～5mm左右。
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2、培养基
★ 大多兰花以MS培养基最好，另外KC培养基也 不错。 ★ 大多品种兰的茎尖接种以固体培养基为好； ★ 蕙兰属在液体培养基培养形成原球茎后则用 固体培养基进行继代培养； ★ 卡德兰属和石斛属这一类易变褐枯死，以在 液体培养基为好。
反复2～3次，后在45℃温水中浸泡1h，严格掌握水温。
3.激素处理：用1000xGA溶液浸泡，为避免发根阻碍，可
先将球根倒置浸泡一半，而后恢复正常位置予以静置。
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第二节 兰花的组织培养技术
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1.什么是传统机械按键设计？
传统的机械按键设计是需要手动按压按键触动 PCBA上的开关按键来实现功能的一种设计方式。
系、茶香百合杂种系、东方百合杂种系、麝香百 合杂种系； ★ 以上四品系株形端正，花色清白给人以清纯、高 雅的印象，是切花中的佳品。
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亚洲百合
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我国昆明、上海、 深圳的百合切花 生产发展较快， 已形成三大生产 基地。
目前国内切花 栽培的百合大多 是亚洲型，主要 从荷兰、日本引 进，经过几年的 栽培试验，已筛 选出一批适合我 国生产的品种。
（3）培养条件：25土 2℃，照光 9-10 h／d，光强1200 Lx。
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（4）生长情况
★ 接种2周后，即有98％左右的鳞片切块在近轴面或边缘 上有淡黄色的不定芽原基呈环状突起（2～4个/块），4周 后，可形成中间抽出绿色的白色小鳞茎，其基部发生一些 粗壮的根。
★ 将幼苗切成1.5～2cm长的片断，接种到诱导愈伤组织的 培养基上，3周后叶子的基部、叶脉、叶缘上均可诱导出 一团团淡黄色的愈伤组织。
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2、花梗腋芽的培养
(1)表面消毒:
带腋芽花梗
自来水冲洗
10％漂白粉溶液浸
泡20min
除去腋芽的苞叶
5％的漂白粉溶
液中浸泡3min
无菌水冲洗（3～4次） 接种。
(2)培养基：
诱芽培养基：MS + BA 3; 诱导原球茎培养基：MS + BA 5 + NAA 0、5; 增殖培养基：MS + BA 3 + NAA 0、2 + 炭1.5克/L; 生根培养基：1/2MS + BA 1 + NAA 0.5 （PH：5.4）