大鼠麻醉
大鼠水合氯醛麻醉心得[参考内容]
大鼠水合氯醛麻醉心得本人所做的模型需要使用水合氯醛麻醉,所使用的是医院里配制的用于儿科灌肠的10%水合氯醛。
在先前的实验中,剂量为0.3mL/100g(这个剂量来自于师姐使用的经验),麻醉完全清醒时间约4h(当初没有记录开始清醒的时间)现在由于实验方案有所改动,希望麻醉的时间尽量缩短(1~1.5h),而麻醉深度保持不变,这样在侧脑室注射操作后,大鼠能够尽快的恢复清醒状态,便于后续的实验操作。
因此,对水合氯醛麻醉的剂量与药效进行了摸索,我把它贴出来,跟大家分享一下。
动物:雄性SD大鼠4只,平均体重356g(这里就不算标准差了),水合氯醛浓度分为4%、7%、10%三个水平。
结果:如下表格所示:水合氯醛浓度 4% 7% 7% 10% 10%水合氯醛剂量 0.5mL/100g 0.3mL/100g 0.2mL/100g 0.2 mL/100g 0.3 mL/100g诱导时间约7min 约4min 约7min 约4min 约4min麻醉深度浅麻醉水平中度麻醉浅麻醉深度麻醉深度麻醉麻醉开始清醒时间约90min 约100min 未观察约68min 114min 结论:1、麻醉的诱导,似乎从4%到(7%、10%),随着浓度的增加,麻醉诱导的时间缩短。
但在7%及10%这两个浓度,麻醉时间基本一致。
2、麻醉时间的长度与水合氯醛的总剂量可能成正相关。
3、麻醉的深度跟与水合氯醛的浓度可能成正相关在之前甲醛《做动物实验前必须给予阿托品吗?》的这篇中,有战友提出“把水合氯醛配成4%的,而不是10%的,这样就拉开了麻醉剂量和致死剂量之间的差距,可安全了”,我的经验是这样:(1)确实,4%的水合氯醛在实验中比较安全,我们一般用于追加麻醉的时候,4%水合氯醛每次1mL,追加一到两次,安全度颇高。
(2)而水合氯醛的致死剂量,我不是很了解,希望知道的战友能够告知一声。
对于10%的水合氯醛,我们用到0.3mL/100g也很安全,应该距离致死剂量还有一段距离,麻醉深度与维持时间也很确切。
大鼠麻醉
10%水合氯醛溶液经预试确定麻醉剂量为4. 5 ml/kg;按文献(刘忠和等,2006)戊巴比妥钠配 制为1%溶液,麻醉剂量为6ml/kg。麻醉方法均为 腹腔注射。
②将大鼠固定,腹腔注射。
③计时观察与判断大鼠的麻醉程度及苏醒时 间。水合氯醛 麻醉起效时间 3.3±1.9 分钟, 麻醉维持时间为 85.3±25.3 分钟,麻醉死亡率 为 10.0 %,总死亡率为15.0%。
特点:作用不够稳定,而且常需加佐剂麻醉 效果才能理想。因而,多数实验室不选用这类麻 醉剂进行麻醉。
乙醚
(1)药理学作用:乙醚在简便装置中也容易挥发。乙醚的使 用是比较安全的,因为它很少因为过量而致动物死亡。
(2)不良反应:动物诱导时不舒服,而且乙醚对粘膜的刺激 可导致咳嗽、大量的支气管和唾液腺分泌物,偶尔还会 导致喉痉挛。乙醚还能在动物的麻醉苏醒期后诱发既有 的慢性呼吸系统疾病急性发作,特别是兔和啮齿类动物。 乙醚是可燃的,和空气或氧气构成爆炸性混合物。
肌肉或皮下注射,剂量1~1.5g/kg,宜用于鼠类。 作用温和持久,有效麻醉时间可长达6~10小时, 对于深度外科麻醉,呼吸及循环均无明显抑制。但 此药本身有致癌作用,不能用作与肿瘤有关的实验。 工作人员亦应小心,禁止长期接触。使用此药的动 物,用后即作为有害废弃物,严格按照规定深埋或 作其他无害处理。
2.局部麻醉
浸润麻醉。根据手术,按皮下、筋膜、肌 肉、腹膜、骨膜等顺序逐步深入注射到术野周围。
3. 麻醉的基本原则
• 注意不同个体的耐受性 • 及时判断麻醉的深浅 • 静脉麻醉坚持先快后慢原则 • 补充麻醉
(三) 麻醉前准备:
• 禁食8~12h,防止呕吐,可饮水。 • 犬、猪、猴等大动物可在麻醉前给予一些药物以减
大鼠麻醉
2.局部麻醉
浸润麻醉。根据手术,按皮下、筋膜、肌 肉、腹膜、骨膜等顺序逐步深入注射到术野周围。
3. 麻醉的基本原则
• • • •
注意不同个体的耐受性 及时判断麻醉的深浅
静脉麻醉坚持先快后慢原则
补充麻醉
(三) 麻醉前准备:
• 禁食8~12h,防止呕吐,可饮水。 • 犬、猪、猴等大动物可在麻醉前给予一些药物以减
(六) 不同麻醉方法操作
• 1.吸入麻醉法
①将乙醚棉球投入密闭容器中,放入大鼠。
②计时观察与判断大鼠的麻醉程度及苏醒时间。
当大鼠倒下,四肢紧张明显减轻,皮肤痛觉消失,则表示 其已进入麻醉状态。
• 注意事项
1.乙醚易挥发,易燃,应远离火源。 2.实验过程中避免大鼠逃脱。
• 2.注射麻醉法
`
① 实验开始时,应先称重,确定大鼠的药物 用量。
少动物紧张,减少支气管分泌。
• 实验开始时,首先应当根据实际条件,确定动物的
药物用量。剂量太小,作用不明显,剂量太大,又 可能引起动物死亡。
(四) 麻醉时的注意事项
• ⑴静脉注射必须缓慢,同时观察肌肉紧张性、角膜
反射和对皮肤夹捏的反应,当这些活动明显减弱或 消失时,立即停止注射。(配制的药液浓度要适中, 不可过高,以免麻醉过急;但也不能过低,以减少 注入溶液的体积。)
实验大鼠的麻醉
2014年3月5日
1
2 3
常用麻醉剂 麻醉方法分类 麻醉准备
5 麻醉的效果观察 6 不同麻醉方法操作 7 麻醉后生化指标变化 8 其他
4 麻醉时的注意事项
引言
麻醉(anesthesia)的基本任务是消除实验过程 中所致的疼痛和不适感觉,保障实验动物的安全, 使动物在实验中服从操作,确保实验顺利进行。
大鼠的麻醉
用量:0.25ml/100g
6、2%戊巴比妥钠50mg/kg,书上推荐的剂量是40~50mg/kg(ip);或者苯巴比妥钠+乙醚麻醉,效果也可以.。
7、在建立肠道缺血再灌注损伤模型中使用戊巴比妥钠,是沿用了很多同事的方案。使用中麻醉很平稳。效果很不错。估计肾脏移植模型和肠道相差不大,不知对否。
二、异氟醚大鼠麻醉
安全且具有麻醉科特色。
我们是用异氟醚(应该是国产的吧)麻醉的,用那种市面上常见的可以提的比较大的带盖塑料水杯自制一个封闭的小麻醉空间,水杯是那种直桶透明,盖子类似特百惠按盖,上有一个约2cm饮水孔的那种,用一个合适的注射器前端堵住饮水孔。使用时打开盖子,将杯子对着大鼠,大鼠顺势会自己进去,然后竖起杯子盖上盖,连抓大鼠都省了,超级安全!然后接麻醉机(临床淘汰的机型,不过作试验足够了),注意要事先准备好连接管道(临床上各种管子都是可以互相接口的),打开挥发器就行了。我们一般先开最大,大鼠一会儿不动了就麻好了(杯子要求至少半透明)。
4、3%的戊巴比妥钠,1ml~1.5ml/kg,但要体重称准。
5、戊巴比妥钠,40mg/kg,但不安全,用水合氯醛腹腔注射最安全,300mg/kg。或是用乌拉坦。用复合麻醉,2小时左右很有效。
配方:
戊巴比妥钠:0.886g
水合氯醛:4.25g
硫酸镁:2.12g
无水酒精:14.25ml
丙二醇:33.8ml
3、水合氯醛和戊巴比妥钠均可以的,前者的麻醉持续时间短些,看你的手术需要了,前者的一般剂量为350~400mg/kg,后者的剂量一般可为30mg/kg,均是ip注射,安全性是很好的。戊巴比妥钠最好用进口分装的,上海试剂公司有售。??
注:我们一般同时接着氧气,所以安全过程中的维持麻醉一般也采用吸入麻醉,与诱导时基本类似。取出诱导好的大鼠,快速固定四肢在操作板上,给大鼠口鼻处罩上剪下的合适注射器(好像是20或30ml注射器)前端,注射器头接诱导时的麻醉管道,连接到麻醉机上,一般维持时开到2,同时供氧,没有给它们插过气管插管,也没有出现窒息的(至少我没见过)。可作除开胸外的手术,一般切皮处给予少量局麻。作过颈部血管手术和股动静脉穿刺置管效果都很好。
大鼠水合氯醛麻醉心得
大鼠水合氯醛麻醉心得大鼠水合氯醛麻醉心得本人所做的模型需要使用水合氯醛麻醉,所使用的是医院里配制的用于儿科灌肠的10%水合氯醛。
在先前的实验中,剂量为0.3mL/100g (这个剂量来自于师姐使用的经验),麻醉完全清醒时间约 4h (当初没有记录开始清醒的时间)现在由于实验方案有所改动,希望麻醉的时间尽量缩短( 1~1.5h ),而麻醉深度保持不变,这样在侧脑室注射操作后,大鼠能够尽快的恢复清醒状态,便于后续的实验操作。
因此,对水合氯醛麻醉的剂量与药效进行了摸索,我把它贴出来,跟大家分享一下。
动物:雄性SD 大鼠4只,平均体重356g (这里就不算标准差了),水合氯醛浓度分为 4%、7%、 10%三个水平。
结果:如下表格所示:水合氯醛浓度 4% 7% 7% 10% 10%水合氯醛剂量0.5mL/100g 0.3mL/100g 0.2mL/100g 0.2 mL/100g 0.3mL/100g诱导时间约 7min 约 4min 约 7min 约 4min 约 4min麻醉深度浅麻醉水平中度麻醉浅麻醉深度麻醉深度麻醉麻醉开始清醒时间约90min 约 100min 未观察约 68min 114min结论:麻醉的诱导,似乎从 4%到( 7%、10%),随着浓度的增加,麻醉诱麻醉时间的长度与水合氯醛的总剂量可能成正相关。
麻醉的深度跟与水合氯醛的浓度可能成正相关在之前甲醛《做动物实验前必须给予阿托品吗?》的这篇中,有战友提出氯醛配成4%的,而不是10%的,这样就拉开了麻醉剂量和致死剂量之间的差距,可安全了” ,我的经验是这样:导的时间缩短。
但在7%及 10%这两个浓度,麻醉时间基本一致把水合(1)确实,4%的水合氯醛在实验中比较安全,我们一般用于追加麻醉的时候,4%水合氯醛每次ImL,追加一到两次,安全度颇高。
(2)而水合氯醛的致死剂量,我不是很了解,希望知道的战友能够告知一声。
对于10%的水合氯醛,我们用到0.3mL/100g 也很安全,应该距离致死剂量还有一段距离,麻醉深度与维持时间也很确切。
大鼠水合氯醛麻醉的方法
中的心得
专业:中西医结合基础
动物手术常用麻醉药
✓ 戊巴比妥钠 ✓ 水合氯醛 ✓ 乌拉坦 ✓ 氯胺酮 ✓ 乙醚 ✓ α-氯醛糖
水合氯醛常用浓度及剂量
1.常用浓度有5%、7%、10% 2.剂量可分别为0.7ml/100g、0.5ml/100g、
0.3ml/100g 3.麻醉有效时间约3-5min,维持时间2-3h
大鼠之间的个体差异,使每只对其耐受程度 不同,壮年及雄性大鼠对其耐受性强,体弱 或雌性大鼠相反,导致致死量相对减少
10%水合氯醛,一般200g左右0.25差不多 ,300g以上要0.3-0.35,当个别大鼠一次麻 不倒,一般按25%首剂量追加
麻醉效果观察
➢ 呼吸
由不规则变为规则且平稳
➢ 反射活动
角膜反射迟钝
➢ 肌张力
全身肌肉松弛
➢ 皮肤夹捏反应 度,心电图,血压,体温
水合氯醛对机体的影响
水合氯醛对离体十二指肠平滑肌收缩性的 抑制作用最大,抑制率为99.5%
相对其他麻醉剂,发现水合氯醛降低脑温 的时间最长
大剂量水合氯醛引起心律失常,小剂量没 有明显毒性作用
麻醉注意事项
注意动物个体差异 注意麻醉剂的新鲜度 注意体重与麻醉剂量的关系 注意麻醉过量和致死剂量的关系 注意补加麻醉剂的方法 注意保温
1. 麻醉剂要现用现配以保持新鲜度
2. 严格按照动物体重来计算麻醉剂量 3. 10%水合氯醛LD50为480mg/kg,麻醉剂量
与致死剂量较近,一麻醉过量容易致死
4. 麻醉过程中会伴有体温下降,可采取保温 措施
注意
水合氯醛麻醉后大鼠很容易腹胀而死,是 由于水合氯醛浓度太高了,可选用5-7%的水 合氯醛,给药原则是一次给齐,忌讳反复追 加注射,否则很容易肠道胀气。
电生理实验室电极植入手术基本流程
动物头部电极植入手术操作流程一、大鼠麻醉选择与使用:1、麻醉剂选择:戊巴比妥钠 40~60mg/kg,体重小于300g时,可考虑55mg/kg或酌情减少用量(2-3%浓度);或乌拉坦1~1.5g/kg(20-25%浓度)2、根据体重换算出麻药用量,注意所配药品浓度,根据需要的mg数,决定注射的ml.3、给药途径:腹腔注射4、操作流程:右手轻轻捉住大鼠尾巴,将大鼠放置在鼠笼上方或操作台上,待其安静后,可用左手的姆指和食指捏住耳后枕颈部皮肤即可提起,掌心向上将鼠体置于掌心中,用无名指和小指将鼠尾压住。
腹腔注射位置:两大腿根部水平线,中线旁1-2cm.腹腔平面向上倾斜45°,插入时有落空感,回抽无血,匀速注入。
5、电极植入中麻醉维持:如手术时间过长,动物麻醉效果减轻时,可用乙醚适当吸入麻醉。
二、电极制作实验中所用电极应预先准备,根据实验目的和要求,选择不同电极。
1、皮层电极,可选用小不锈钢螺钉(眼镜/手表用螺钉)2、深部电极,采用绝缘金属丝制作三、手术流程1、术前准备:(1)手术器件准备:大、小手术剪各1把,弯头止血钳4-6把(用于暴露手术视野),手术刀柄及刀片,直止血钳1-2把(用于手术中夹持止血),持针器1把(用于皮肤缝合),手术针(弯针),缝线若干,小螺丝刀1把(用于固定螺钉电极),有齿镊1把,小手术镊1-2把,钻头1-2个(大小根据实验需要确定),手术盘(手术中放置手术器件)1个,器件盒1个(用于手术器件消毒保存)上述手术器件需要进行消毒灭菌处理(高温高压消毒或75%酒精浸泡30分钟。
(2)其它实验所需物品玻璃器皿(盛水,用于丢弃毛发),消毒棉棒,明胶海绵(止血用,需要事先剪成小块),小号培养皿1个(用于调制牙托粉),颅钻,手术台灯,加热垫(用于动物麻醉后保温),消毒手术巾若(用于保护手术视野),电极及接插件(事先制作好),废报纸若干(垫在大鼠下面,便于实验后清洁),动物台秤,普通剪刀,2、实验药品准备(1)麻药:事先按要求浓度配好,冰箱冷藏,手术前提前取出,温度低是适当加温(2)牙科水泥及牙科水(用于电极固定)(3) 75%酒精,碘酒,用于手术部位皮肤消毒(4)庆大霉素针剂或粉剂,电极植入完成后,皮肤缝合前的消炎处理3、手术过程(1)大鼠称重:打开电子天平开关后,将称容器放在天平上,去皮清零。
SD大鼠麻醉
一、SD大鼠的麻醉1、SD大鼠腹腔麻醉把异氟烷和脂肪乳混合做成乳化异氟烷,腹腔注射,3分钟麻醉,30分钟清醒。
乳化异氟烷制备:用30%的脂肪乳为载体,在室温下(20℃)应用玻璃瓶法,配制成8%的乳化异氟烷。
即将1.2ml的液态异氟烷和21.3ml的30%脂肪乳加入至一个气密性良好的25~30ml玻璃容器内,在振荡器上以2000r/min的速度剧烈震荡30s,静置30s,然后再以2000r/min速度剧烈震荡50min,达到平衡后放置于4℃冰箱保存备用。
乳化异氟烷,大鼠腹腔注射的半数有效量(ED50)相当于液态异氟烷0.51~0.64ml/kg,半数致死量(LD50)相当于液态异氟烷1.10~1.46ml/kg,治疗指数(TI)为2.24。
致死量大鼠表现为呼吸抑制、心律失常,继而心跳停止。
病理解剖显示腹腔注射乳化异氟烷不会引起心、肺、肝、肠系膜的病理改变。
2、SD大鼠吸入麻醉可以作一个小金鱼缸(四方形)算出体积,钻个眼用橡皮塞塞住,老鼠装进去封住缸口,从橡皮塞插上注射器给液态吸入麻醉药(如1ml异氟烷可挥发成196ml的气体),算出需要的浓度就会算出需要的液态麻醉药量,一般一个MAC 就够了,老鼠的异氟烷MAC大约是2%。
3、SD大鼠经口气管插管腹腔麻醉,四肢仰面固定,上下切牙用丝线系住作牵引,操作者头戴额镜(五官科检查耳朵用的),对面放置好光源(一个射灯),牵出舌头和下切牙丝线一起由左手捏住,上切牙丝线由助手提着或用止血钳夹住用自己的前胸固定,拉动丝线使头部上提和口充分张开,右手持18G或16G套管针(戴芯但不超过管口),看到声门(鱼口状)既可插管。
二、异氟醚大鼠麻醉安全且具有麻醉科特色。
我们是用异氟醚(应该是国产的吧)麻醉的,用那种市面上常见的可以提的比较大的带盖塑料水杯自制一个封闭的小麻醉空间,水杯是那种直桶透明,盖子类似特百惠按盖,上有一个约2cm饮水孔的那种,用一个合适的注射器前端堵住饮水孔。
大鼠水合氯醛麻醉心得
大鼠水合氯醛麻醉心得本人所做的模型需要使用水合氯醛麻醉,所使用的是医院里配制的用于儿科灌肠的10%水合氯醛。
在先前的实验中,剂量为0.3mL/100g(这个剂量来自于师姐使用的经验),麻醉完全清醒时间约4h(当初没有记录开始清醒的时间)现在由于实验方案有所改动,希望麻醉的时间尽量缩短(1~1.5h),而麻醉深度保持不变,这样在侧脑室注射操作后,大鼠能够尽快的恢复清醒状态,便于后续的实验操作。
因此,对水合氯醛麻醉的剂量与药效进行了摸索,我把它贴出来,跟大家分享一下。
动物:雄性SD大鼠4只,平均体重356g(这里就不算标准差了),水合氯醛浓度分为4%、7%、10%三个水平。
结果:如下表格所示:水合氯醛浓度 4% 7% 7% 10% 10%水合氯醛剂量 0.5mL/100g 0.3mL/100g 0.2mL/100g 0.2 mL/100g 0.3 mL/100g诱导时间约7min 约4min 约7min 约4min 约4min麻醉深度浅麻醉水平中度麻醉浅麻醉深度麻醉深度麻醉麻醉开始清醒时间约90min 约100min 未观察约68min 114min 结论:1、麻醉的诱导,似乎从4%到(7%、10%),随着浓度的增加,麻醉诱导的时间缩短。
但在7%及10%这两个浓度,麻醉时间基本一致。
2、麻醉时间的长度与水合氯醛的总剂量可能成正相关。
3、麻醉的深度跟与水合氯醛的浓度可能成正相关在之前甲醛《做动物实验前必须给予阿托品吗?》的这篇中,有战友提出“把水合氯醛配成4%的,而不是10%的,这样就拉开了麻醉剂量和致死剂量之间的差距,可安全了”,我的经验是这样:(1)确实,4%的水合氯醛在实验中比较安全,我们一般用于追加麻醉的时候,4%水合氯醛每次1mL,追加一到两次,安全度颇高。
(2)而水合氯醛的致死剂量,我不是很了解,希望知道的战友能够告知一声。
对于10%的水合氯醛,我们用到0.3mL/100g也很安全,应该距离致死剂量还有一段距离,麻醉深度与维持时间也很确切。
大鼠的麻醉
大鼠的麻醉点击次数:3690 发表于:2008-06-25 22:38转载请注明来自丁香园来源:<a href=''>丁香园</a>一、SD大鼠的麻醉1、SD大鼠腹腔麻醉把异氟烷和脂肪乳混合做成乳化异氟烷,腹腔注射,3分钟麻醉,30分钟清醒。
乳化异氟烷制备:用30%的脂肪乳为载体,在室温下(20℃)应用玻璃瓶法,配制成8%的乳化异氟烷。
即将1.2ml的液态异氟烷和21.3ml的30%脂肪乳加入至一个气密性良好的25~30ml玻璃容器内,在振荡器上以2000r/min的速度剧烈震荡30s,静置30s,然后再以2000r/min速度剧烈震荡50min,达到平衡后放置于4℃冰箱保存备用。
乳化异氟烷,大鼠腹腔注射的半数有效量(ED50)相当于液态异氟烷0.51~0.64ml/ kg,半数致死量(LD50)相当于液态异氟烷1.10~1.46ml/kg,治疗指数(TI)为2.24。
致死量大鼠表现为呼吸抑制、心律失常,继而心跳停止。
病理解剖显示腹腔注射乳化异氟烷不会引起心、肺、肝、肠系膜的病理改变。
2、SD大鼠吸入麻醉可以作一个小金鱼缸(四方形)算出体积,钻个眼用橡皮塞塞住,老鼠装进去封住缸口,从橡皮塞插上注射器给液态吸入麻醉药(如1ml异氟烷可挥发成196ml的气体),算出需要的浓度就会算出需要的液态麻醉药量,一般一个MAC就够了,老鼠的异氟烷MA C大约是2%。
3、SD大鼠经口气管插管腹腔麻醉,四肢仰面固定,上下切牙用丝线系住作牵引,操作者头戴额镜(五官科检查耳朵用的),对面放置好光源(一个射灯),牵出舌头和下切牙丝线一起由左手捏住,上切牙丝线由助手提着或用止血钳夹住用自己的前胸固定,拉动丝线使头部上提和口充分张开,右手持18G或16G套管针(戴芯但不超过管口),看到声门(鱼口状)既可插管。
二、异氟醚大鼠麻醉安全且具有麻醉科特色。
我们是用异氟醚(应该是国产的吧)麻醉的,用那种市面上常见的可以提的比较大的带盖塑料水杯自制一个封闭的小麻醉空间,水杯是那种直桶透明,盖子类似特百惠按盖,上有一个约2cm饮水孔的那种,用一个合适的注射器前端堵住饮水孔。
大鼠脑脊液骨髓的采集方法
大鼠脑脊液骨髓的采集方法步骤一:麻醉大鼠将大鼠置于麻醉箱中,使用一般常用的麻醉方法,如使用注射器将麻醉剂注射到大鼠体内,或将大鼠放入具有麻醉效果的气体环境中(如氧化乙烯、异氟醚等),使大鼠进入深度麻醉状态。
步骤二:准备工具和材料准备需要的实验器材和材料,包括注射器、微量注射器、针头、创口贴、消毒液、手套等。
步骤三:固定大鼠的头部将麻醉好的大鼠放到一块柔软的垫子上,然后将大鼠的头部固定在取样位置上,以保证操作时头部不会有移动。
步骤四:刮除毛发并消毒使用刀片或电动剃刀将取样部位的毛发刮除干净,并用消毒液进行彻底消毒,以避免感染。
步骤五:穿刺脊髓采用腰椎穿刺法,使用无菌注射器和针头将其插入到脊髓腔内。
刺穿脊髓后,抽取相应的脑脊液样品。
步骤六:收集脑脊液利用微量注射器收集抽取的脑脊液样品,注意避免气泡的产生。
收集足够的脑脊液样品用于后续实验。
步骤七:处理采集部位在完成采集后,将针头缓慢地拔出,然后用无菌纱布或创口贴轻轻按压采集部位,以止血,防止感染。
大鼠骨髓的采集方法:步骤一:麻醉大鼠将大鼠置于麻醉箱中,使用一般常用的麻醉方法,如使用注射器将麻醉剂注射到大鼠体内,或将大鼠放入具有麻醉效果的气体环境中(如氧化乙烯、异氟醚等),使大鼠进入深度麻醉状态。
步骤二:准备工具和材料准备需要的实验器材和材料,包括注射器、微量注射器、针头、创口贴、消毒液、手套等。
步骤三:固定大鼠的肢体将麻醉好的大鼠放到一块柔软的垫子上,然后将大鼠的肢体固定在取样位置上,以保证操作时肢体不会有移动。
步骤四:消毒使用适当的消毒液对骨髓采集部位进行消毒,以避免感染。
步骤五:穿刺骨髓用带有针头的注射器穿刺骨髓。
穿刺一般选择胫骨、肱骨或股骨中的一根较粗的部位,并确保穿刺角度和力度适合。
步骤六:采集骨髓通过注射器吸取骨髓样品,并将其收集在一支干燥、清洁的离心管中。
确保采集到足够的骨髓样本以供后续实验使用。
步骤七:处理采集部位在完成采集后,将针头缓慢地拔出,然后用无菌纱布或创口贴轻轻按压采集部位,以止血,防止感染。
大鼠的麻醉
大鼠的麻醉一、SD大鼠的麻醉1、SD大鼠腹腔麻醉把异氟烷和脂肪乳混合做成乳化异氟烷,腹腔注射,3分钟麻醉,30分钟清醒。
乳化异氟烷制备:用30%的脂肪乳为载体,在室温下(20℃)应用玻璃瓶法,配制成8%的乳化异氟烷。
即将1.2ml的液态异氟烷和21.3ml的30%脂肪乳加入至一个气密性良好的25~30ml玻璃容器内,在振荡器上以2000r/min的速度剧烈震荡30s,静置30s,然后再以2000r/min速度剧烈震荡50min,达到平衡后放置于4℃冰箱保存备用。
乳化异氟烷,大鼠腹腔注射的半数有效量(ED50)相当于液态异氟烷0.51~0.64ml/kg,半数致死量(LD50)相当于液态异氟烷1.10~1.46ml/kg,治疗指数(TI)为2.24。
致死量大鼠表现为呼吸抑制、心律失常,继而心跳停止。
病理解剖显示腹腔注射乳化异氟烷不会引起心、肺、肝、肠系膜的病理改变。
2、SD大鼠吸入麻醉可以作一个小金鱼缸(四方形)算出体积,钻个眼用橡皮塞塞住,老鼠装进去封住缸口,从橡皮塞插上注射器给液态吸入麻醉药(如1ml异氟烷可挥发成196ml的气体),算出需要的浓度就会算出需要的液态麻醉药量,一般一个MAC就够了,老鼠的异氟烷MAC大约是2%。
3、SD大鼠经口气管插管腹腔麻醉,四肢仰面固定,上下切牙用丝线系住作牵引,操作者头戴额镜(五官科检查耳朵用的),对面放置好光源(一个射灯),牵出舌头和下切牙丝线一起由左手捏住,上切牙丝线由助手提着或用止血钳夹住用自己的前胸固定,拉动丝线使头部上提和口充分张开,右手持18G或16G套管针(戴芯但不超过管口),看到声门(鱼口状)既可插管。
二、异氟醚大鼠麻醉安全且具有麻醉科特色。
我们是用异氟醚(应该是国产的吧)麻醉的,用那种市面上常见的可以提的比较大的带盖塑料水杯自制一个封闭的小麻醉空间,水杯是那种直桶透明,盖子类似特百惠按盖,上有一个约2cm饮水孔的那种,用一个合适的注射器前端堵住饮水孔。
描述大鼠剥取脑组织的步骤操作要点,注意事项
描述大鼠剥取脑组织的步骤操作要点,注意事项大鼠剥取脑组织是一项非常重要的实验操作,需要严格按照步骤进行,以保证实验结果的准确性。
下面是描述大鼠剥取脑组织的步骤操作要点和注意事项:
步骤操作要点:
1. 麻醉大鼠:使用适当的麻醉剂将大鼠麻醉,注意麻醉剂的剂量和作用时间,以免对实验结果产生影响。
2. 体表消毒:在开始操作之前,对大鼠的手术部位进行消毒,以避免感染。
3. 穿刺颅骨:使用适当的工具在大鼠头部穿刺颅骨,以便进行脑组织的剥离。
4. 剥离脑组织:使用适当的工具将脑组织分离出来,注意不要损伤脑组织,以保证实验结果的准确性。
5. 存储脑组织:在完成剥离后,将脑组织存储在适当的容器中,以便进行后续实验操作。
注意事项:
1. 需要遵守实验室安全规定,穿戴适当的个人防护用品,如手套、口罩等。
2. 在操作过程中,需要保持手术部位的清洁,并注意避免感染。
3. 在麻醉大鼠时,需要根据大鼠的体重和生理状态确定适当的麻醉剂剂量,并在麻醉过程中监测大鼠的生命体征,如呼吸、心率等。
4. 在剥离脑组织时,需要使用适当的工具,并注意不要损伤脑
组织。
5. 在存储脑组织时,需要选择适当的容器,并注意储存条件,如温度、湿度等。
SD大鼠麻醉
一、SD大鼠的麻醉1、SD大鼠腹腔麻醉把异氟烷和脂肪乳混合做成乳化异氟烷,腹腔注射,3分钟麻醉,30分钟清醒。
乳化异氟烷制备:用30%的脂肪乳为载体,在室温下(20℃)应用玻璃瓶法,配制成8%的乳化异氟烷。
即将1.2ml的液态异氟烷和21.3ml的30%脂肪乳加入至一个气密性良好的25~30ml玻璃容器内,在振荡器上以2000r/min的速度剧烈震荡30s,静置30s,然后再以2000r/min速度剧烈震荡50min,达到平衡后放置于4℃冰箱保存备用。
乳化异氟烷,大鼠腹腔注射的半数有效量(ED50)相当于液态异氟烷0.51~0.64ml/kg,半数致死量(LD50)相当于液态异氟烷1.10~1.46ml/kg,治疗指数(TI)为2.24。
致死量大鼠表现为呼吸抑制、心律失常,继而心跳停止。
病理解剖显示腹腔注射乳化异氟烷不会引起心、肺、肝、肠系膜的病理改变。
2、SD大鼠吸入麻醉可以作一个小金鱼缸(四方形)算出体积,钻个眼用橡皮塞塞住,老鼠装进去封住缸口,从橡皮塞插上注射器给液态吸入麻醉药(如1ml异氟烷可挥发成196ml的气体),算出需要的浓度就会算出需要的液态麻醉药量,一般一个MAC 就够了,老鼠的异氟烷MAC大约是2%。
3、SD大鼠经口气管插管腹腔麻醉,四肢仰面固定,上下切牙用丝线系住作牵引,操作者头戴额镜(五官科检查耳朵用的),对面放置好光源(一个射灯),牵出舌头和下切牙丝线一起由左手捏住,上切牙丝线由助手提着或用止血钳夹住用自己的前胸固定,拉动丝线使头部上提和口充分张开,右手持18G或16G套管针(戴芯但不超过管口),看到声门(鱼口状)既可插管。
二、异氟醚大鼠麻醉安全且具有麻醉科特色。
我们是用异氟醚(应该是国产的吧)麻醉的,用那种市面上常见的可以提的比较大的带盖塑料水杯自制一个封闭的小麻醉空间,水杯是那种直桶透明,盖子类似特百惠按盖,上有一个约2cm饮水孔的那种,用一个合适的注射器前端堵住饮水孔。
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乙醚
(1)药理学作用:乙醚在简便装置中也容易挥发。乙醚的使 用是比较安全的,因为它很少因为过量而致动物死亡。
(2)不良反应:动物诱导时不舒服,而且乙醚对粘膜的刺激 可导致咳嗽、大量的支气管和唾液腺分泌物,偶尔还会 导致喉痉挛。乙醚还能在动物的麻醉苏醒期后诱发既有 的慢性呼吸系统疾病急性发作,特别是兔和啮齿类动物。 乙醚是可燃的,和空气或氧气构成爆炸性混合物。
• 2.非挥发性麻醉剂
这类麻醉剂种类较多,包括苯巴比妥钠、戊巴 比妥钠等巴比妥类的衍生物,氨基甲酸乙脂和水合 氯醛。
这些麻醉剂使用方便,一次给药可维持较长的 麻醉时间,麻醉过程较平衡,动物无明显挣扎现象。 但缺点是苏醒较慢。
• 3.中药麻醉剂
动物实验时用的麻醉剂
• 由于动物种属间的差异等情况,所采用的麻醉方法和选
用的麻醉剂亦有不同。
• 动物实验中常用的麻醉剂分为三类,即挥发性麻醉剂、
非挥发性麻醉剂和中药麻醉剂。
• 1.挥发性麻醉剂
这类麻药包括乙醚、氯仿等。 机制:抑制中枢神经系统。乙醚吸入麻醉适用于各 种动物,其麻醉量和致死量差距大,所以安全度亦大, 动物麻醉深度容易掌握,而且麻醉后苏醒较快。其缺点 是对局部刺激作用大,可引起上呼吸道粘膜液体分泌增 多,再通过神经反射可影响呼吸、血压和心跳活动,并 且容易引起窒息,故在乙醚吸入麻醚时必需有人照看, 以防麻醉过深而出现上情况。
.
(二)麻醉方法分类
• 1.全身麻醉
包括:吸入法和腹腔、静脉给药麻醉法。
(1)吸入法
用一块圆玻璃板和一个钟罩 或一个密闭的玻璃箱作为挥发 性麻醉剂的容器,多选用乙醚 作麻药。麻醉时用几个棉球, 将乙醚倒可其中,迅速放入钟 罩或箱内,让其挥发,然后把 待麻醉动物投入,约隔4-6分钟 即可麻醉,麻醉后应立即取出, 并准备一个蘸有乙醚的棉球小 烧杯,在动物麻醚变浅时给套 在鼻上使其补吸麻药。
肌肉或皮下注射,剂量1~1.5g/kg,宜用于鼠类。 作用温和持久,有效麻醉时间可长达6~10小时, 对于深度外科麻醉,呼吸及循环均无明显抑制。但 此药本身有致癌作用,不能用作与肿瘤有关的实验。 工作人员亦应小心,禁止长期接触。使用此药的动 物,用后即作为有害废弃物,严格按照规定深埋或 作其他无害处理。
• ⑵麻醉时需注意保温。
麻醉期间,动物的体温调节机能往往受到 抑制,出现体温下降,可影响实验的准确性。此 时常需采取保温措施。保温的方法有,实验桌内 装灯,电褥,台灯照射等。无论用哪种方法加温 都应根据动物的肛门体温而定。 大鼠为39.3℃±0.5℃。
• ⑶作慢性实验时,在寒冷冬季,麻醉剂在注射
.
神经安定镇痛药
• 神经安定镇痛合剂由强麻醉性镇痛药和
神经安定药组成。如氟芬合剂。神经安 定镇痛合剂对大多数动物可产生良好的 麻醉作用,给药途径有肌肉、腹腔或静 脉注射,单独使用神经安定镇痛合剂, 适用于无需肌肉松弛的表浅外科小手术。
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乌拉坦
• 用20%溶液静脉注射,剂量1g/kg;亦可作腹腔、
实验大鼠的麻醉
2014年3月5日
1 常用麻醉剂
2 麻醉方法分类
3
麻醉准备
4 麻醉时的注意事项
5 麻醉的效果观察
6 不同麻醉方法操作
7 麻醉后生化指标变化
8
其他
引言
麻醉(anesthesia)的基本任务是消除实验过程 中所致的疼痛和不适感觉,保障实验动物的安全, 使动物在实验中服从操作,确保实验顺利进行。
2.局部麻醉
浸润麻醉。根据手术,按皮下、筋膜、肌 肉、腹膜、骨膜等顺序逐步深入注射到术野周围。
3. 麻醉的基本原则
• 注意不同个体的耐受性 • 及时判断麻醉的深浅 • 静脉麻醉坚持先快后慢原则 • 补充麻醉
(三) 麻醉前准备:
• 禁食8~12h,防止呕吐,可饮水。 • 犬、猪、猴等大动物可在麻醉前给予一些药物以减
.
水合氯醛
• 用5%溶液;犬静脉注射100mg/kg,腹腔
注射150mg/kg,兔和鼠用后常有肌肉紧张, 宜与乌拉坦合用;临用前将两药等量混合, 用60℃等渗盐水配制成5%~10%注射液, 按1~2m1/kg静脉注射。麻醉持续时间长, 深度较浅,苏醒期常有激惹现象。一般只用 于不要求存活的刺激较轻的手术。
• (2)腹腔和静脉给药麻醉法
非挥发性和中药麻醉剂均可用作腹腔和静脉注射麻醉,操作简便,是 实验室最常采用的方法之一。腹腔给药麻醉多用于大鼠和豚鼠,较大的 动物如兔、狗等则多用静脉给药进行麻醉。由于各麻醉剂的作用长短以 及毒性的差别,所以在腹腔和静脉麻醉时,一定控制药物的浓度和注射 量。
下腹部腹中线两侧。
• 苯. 巴比妥钠:长效巴比妥类
氯胺酮
• 适用于大多数实验动物。肌肉、腹腔或静脉注射皆
可。对犬等体型较大动物,呼吸抑制不明显,但对 鼠类则常有严重呼吸抑制,对免和鼠的镇痛效果不 可靠。单独使用氯胺酮亦有骨骼肌紧张、唾液和气 管支气管分泌物增多以及咽反射消失过迟等缺点, 与安定合用可纠正此类缺点。静注诱导剂量,为1% 氯胺酮溶液2~5ml/kg,复合安定1~2mg/kg。维 持剂量每次用诱导量的1/3~1/2。肌肉或腹腔注射 氯胺酮用5%~10%溶液4~10 m1诱导。
少动物紧张,减少支气管分泌。
• 实验开始时,首先应当根据实际条件,确定动物的
药物用量。剂量太小,作用不明显,剂量太大,又 可能引起动物死亡。
(四) 麻醉时的注意事项
• ⑴静脉注射必须缓慢,同时观察肌肉紧张性、角膜
反射和对皮肤夹捏的反应,当这些活动明显减弱或 消失时,立即停止注射。(配制的药液浓度要适中, 不可过高,以免麻醉过急;但也不能过低,以减少 注入溶液的体积。)
.
巴比妥类
• 硫喷妥钠:超短效巴比妥类
• 戊巴比妥钠:短效巴比妥类,多用3%溶液。静脉一
次注射,犬用40mg/kg,兔、鼠用30mg/kg,腹 腔注射剂量增加20%,可维持持2小时有效全麻, 在外科麻醉中,对呼吸和循环系统都有严重抑制。 用于兔、鼠死亡率较高;用于大等较大动物,亦需 要辅助呼吸和其他复苏措施,且完全苏醒需要6~8 小时。