氨基酸的分离纯化技术
纸层析法分离氨基酸
纸层析法分离氨基酸一、前言1、分离氨基酸的主要方法：(1) 离子交换法，根据氨基酸是两性电解质这一特征,以及目的氨基酸与杂质氨基酸pK、pI值的差异,利用离子交换树脂对各种氨基酸吸附能力的不同对氨基酸进行分离纯化。
离子交换法的分离步骤主要包括树脂的处理、装柱、平衡、加样、洗脱等步骤. 离子交换法也有自身的局限性，由于离子交换法是利用氨基酸等电点的不同，所以当两个或者多个氨基酸的等电点相近时，便无法分离，另外，氨基酸在树脂当中扩散速度较快，就要求料液的流速也相对较慢，这样自然造成了分离的缓慢，离子交换本身的生产原理也决定了反应难以连续还进行，这给工厂自动化生产带来影响，难以大规模地推广。
(2) 沉淀法，沉淀法是历史最悠久的分离纯化方法，目前仍在工业上发挥着重大的作用。
氨基酸工业中常用沉淀法有等电点沉淀法，特殊试剂沉淀法和有机溶剂沉淀法。
沉淀法原理是根据某些氨基酸可以与某些有机或者无机化合物结合而形成沉淀，可以利用这种性质向溶液中加入特定的沉淀剂，使目标氨基酸沉淀，与其他氨基酸分离，在分离后再将氨基酸与沉淀剂分离即可。
现在较为成熟的分离方法有精氨酸与苯甲醛在低温条件下，缩合成溶解度小的苯亚甲基精氨酸，从而析出沉淀，析出的沉淀用盐酸处理即可分离得到目标氨基酸精氨酸的盐酸盐；亮氨酸与邻-二甲苯-4-磺酸反应，可生成亮氨酸的磺酸盐。
沉淀法的优点是方法简单，选择性强，但是缺点同样明显，沉淀剂回收困难，造成废液排放污染加剧。
(3) 萃取法，萃取法主要包括反应萃取法、溶剂萃取法、反向微胶团萃取、液膜萃取法等。
其中，反应萃取法是选择适当的萃取剂，使萃取剂解离出来的离子与氨基酸解离出来的离子发生反应，生成可以溶于有机相的物质，从而使氨基酸从水相进入有机相，进而分离氨基酸。
溶剂萃取法，由于氨基酸是离子型化合物，氨基酸在物理萃取时难以高效提取的，因此常用化学发来萃取氨基酸。
(5) 电透析，由于氨基酸拥有不同的等电点，故可以通过控制溶液的PH值，使氨基酸带有正负电荷，即当PH大于等电点时，带有负电荷，将氨基酸放置在电场中，会带上负电，并且移向正极，相反，PH值小于等电点时，则带上正电荷，氨基酸向负极移动。
氨基酸的制作方法
氨基酸的制作方法
有多种制作氨基酸的方法，以下是其中几种常见的方法：
1. 微生物发酵法：一般采用大肠杆菌、酵母菌、屈菜花霉菌、酪酸乳杆菌等微生物，通过发酵将废弃物或廉价原料转化为氨基酸。
2. 化学合成法：该方法利用化学合成的原理，通过有机合成化学手段合成氨基酸，但是该方法制备成本高，且对环境污染严重。
3. 氨基酸水解法：氨基酸水解是指利用酸或酶水解蛋白质，使其分解成氨基酸和多肽，再进行脱离、纯化和分离。
4. 磷酸化反应法：该方法将含有羧基的物质与无水磷酸反应，生成关键的磷酸酯键，从而合成氨基酸。
总而言之，不同的制备方法适用于不同的氨基酸，其选择往往取决于经济性、产品纯度、工艺性能和环保性等因素。
实验七 氨基酸的分离鉴定
实验七氨基酸的分离鉴定——纸层析法一、目的通过氨基酸的分离，学习纸层析法的基本原理及操作方法。
二、原理纸层析法是用滤纸作为惰性支持物的分配层析法，它是利用不同的氨基酸在展层溶剂中的分配系数不同而得以分离的一种方法。
惰性支持物是新华一号滤纸，其上含有很多的羟基，与水有较强的亲和力因此把它看成是含有静止水相的惰性支持物。
水相因此称为静止相（固定相），有机溶剂称为流动相。
展层溶剂由两个互不相溶的有机溶剂和水组成，它们互相混合时便分成两相：一相是以水饱和了的有机相，另一相是以有机溶剂饱和了的水相。
分配系数(α)＝溶质在固定相的浓度/溶质在流动相的浓度。
当用滤纸进行分配层析时，流动相流经支持物时与固定相之间连续抽提，使氨基酸在两相之间不断分配而得以分离。
不同的氨基酸在一定的条件下，有其一定的Rf值，故可根据Rf值定性鉴定氨基酸，但通常用已知的标准氨基酸层析作对照，本实验就是如此。
●纸层析法是用滤纸作为惰性支持物的分配层析法。
●层析溶剂由有机溶剂和水组成●物质被分离后在纸层析图谱上的位置是用Rf值（比移值）来表示的：Rf=原点到层析点中心的距离/原点到溶剂前沿的距离在一定的条件下某种物质的Rf值是常数。
Rf值的大小与物质的结构、性质、溶剂系统；层析滤纸的质量和层析温度等因素有关。
本实验利用纸层析法分离氨基酸。
三、材料与方法（1）、材料：层析缸；毛细管；喷雾器；培养皿；层析滤纸；正丁醇；冰醋酸；分液漏斗；烧杯；培养皿；赖氨酸；脯氨酸；氨酸；苯丙氨酸；亮氨酸；茚三酮（2）操作步骤1. 配置层析液置于密闭的层析缸中。
2．准备滤纸：取层析滤纸一张。
在纸的一端距边缘2cm处用铅笔划一直线，在直线上每间隔2cm做一记号，标出5个原点。
3．点样：用毛细管将各氨基酸样品点在5个原点上，用量10～20μl，每点在纸上扩散的直径，最大不超过3 mm，边点样边用电吹风吹干，越小越好。
干后再点一次。
4．扩展用线将滤纸缝成筒状，纸的两边不能接触。
实验七 氨基酸的分离鉴定
实验七氨基酸的分离鉴定——纸层析法一、目的通过氨基酸的分离，学习纸层析法的基本原理及操作方法。
二、?原理纸层析法是用滤纸作为惰性支持物的分配层析法，它是利用不同的氨基酸在展层溶剂中的分配系数不同而得以分离的一种方法。
惰性支持物是新华一号滤纸，其上含有很多的羟基，与水有较强的亲和力因此把它看成是含有静止水相的惰性支持物。
水相因此称为静止相（固定相），有机溶剂称为流动相。
展层溶剂由两个互不相溶的有机溶剂和水组成，它们互相混合时便分成两相：一相是以水饱和了的有机相，另一相是以有机溶剂饱和了的水相。
分配系数(α)＝溶质在固定相的浓度/溶质在流动相的浓度。
当用滤纸进行分配层析时，流动相流经支持物时与固定相之间连续抽提，使氨基酸在两相之间不断分配而得以分离。
不同的氨基酸在一定的条件下，有其一定的Rf值，故可根据Rf值定性鉴定氨基酸，但通常用已知的标准氨基酸层析作对照，本实验就是如此。
●纸层析法是用滤纸作为惰性支持物的分配层析法。
●层析溶剂由有机溶剂和水组成物质被分离后在纸层析图谱上的位置是用Rf值（比移值）来表示的：Rf=原点到层析点中心的距离/原点到溶剂前沿的距离在一定的条件下某种物质的Rf值是常数。
Rf值的大小与物质的结构、性质、溶剂系统；层析滤纸的质量和层析温度等因素有关。
本实验利用纸层析法分离氨基酸。
三、材料与方法（1）、材料：层析缸；毛细管；喷雾器；培养皿；层析滤纸；正丁醇；冰醋酸；分液漏斗；烧杯；培养皿；赖氨酸；脯氨酸；氨酸；苯丙氨酸；亮氨酸；茚三酮（2）操作步骤1.配置层析液置于密闭的层析缸中。
2．准备滤纸：取层析滤纸一张。
在纸的一端距边缘2cm处用铅笔划一直线，在直线上每间隔2cm做一记号，标出5个原点。
3．点样：用毛细管将各氨基酸样品点在5个原点上，用量10～20μl，每点在纸上扩散的直径，最大不超过3mm，边点样边用电吹风吹干，越小越好。
干后再点一次。
4．扩展??用线将滤纸缝成筒状，纸的两边不能接触。
氨基酸分离纯化的研究进展
人［１０］研究了高 ｐＨ 范 围 内 ， ＴＯＭＡＣ 对 各 种 氨 基 酸 的 萃
取平衡， 研究表明不同氨基酸的萃取平衡常数有很大
２ 离子交换法
的差异， 色氨酸的萃取平衡常数最大， 它是甘氨酸萃取
离 子 交 换 法 仅 仅 是 利 用 各 种 氨 基 酸 等 电 点 的 差 平衡常数的 ２６０ 倍。
胱氨酸母液含大量无机盐的氨基酸料液。
从外相转移到内相， 而且内相 Ｌ－ 苯丙氨酸的浓度是外
反胶团萃取氨基酸的机理是： 氨基酸是以带电离 相的 ８ 倍。Ｔｈｉｅｎ［１９］等采用阳离子萃取剂 Ａｌｉｑｕａｎｔ３３６（ 氯
子状态被反胶团萃取的， 不同带电状态下被萃取的程 化甲基三辛基季铵盐） 为流动载体、ＫＣｌ 溶液为内相试
氨基酸是组成蛋白质的基本单元， 是生物有机体 存在多种生产方法 。发 酵 法 得 到 的 是 单 一 品 种 的 Ｌ－
的重要组成部分， 具有极其重要的生理功能。氨基酸广 氨基酸， 夹杂其它氨基酸的种类和含量较少； 蛋白质水
泛应用于食品、饲料添加剂以及医药领域， 也被用作合 解法得到的是多种氨基酸的混合物。与氨基酸发酵等
食品研究与开发
综述
纯化方法主要有： 沉淀法、离子交换法、萃取法 和膜分 纤维、无纺布、网、织物等多种形式应用。符若文 等 ［７￣８］ 研
离法等几种。
究用强酸性离子交换纤维 ＰＶＦ－ ｇ－ ＳＯ３Ｈ 对碱性氨基酸 Ｌ－ 组氨酸和 Ｌ－ 赖氨酸进行分离， 树脂吸附率和分辨
１ 沉淀法
率 要 高 于 ７３２ 型 树 脂 ， 强 酸 型 离 子 交 换 纤 维
［５］ 王 世 宾，等．益 生 菌 ＬＧＧ 研 究 进 展［Ｊ］．乳 业 科 学 与 技 术，２００２（２）：
氨基酸提取与制备
氨基酸提取与制备发布时刻:2006/12/20 16:03:00 文章来源:科技文献氨基酸提取与制备氨基酸的生产方式有4种：经典的提取法、化学合成法、微生物发酵法和酶法。
提取法是最先进展起来的，是生产氨基酸的最大体方式。
所谓提取法是指蛋白质或以含有蛋白质的物料为原料，经酸、碱、或酶水解以后提纯氨基酸的方式。
初期提取法是成立在溶剂抽提、等电点结晶和沉淀剂分离的基础上。
随着离子互换树脂的应用，使氨基酸的分离更为容易，简化了提炼工序，缩短了操作时刻，提高了氨基酸收率。
提取法的优势是原料来源丰硕，投产比较容易，但产量低，本钱高，三废较严峻。
在国外多数氨基酸生产已慢慢为微生物发酵法及化学合成法所取代。
在目前4种生产方式中，发酵法生产占主导地位。
酶拆分法也占相本地位。
化学合成法偏向于氨基酸衍生物的制备。
提取与分离是氨基酸生产的大体技术。
不管何种方式均有分离纯化工序。
即提纯也是提高氨基酸质量的关键步骤之一。
目前仍有必然数量品种如半胱氨酸、酪氨酸、羟脯氨酸、组氨酸、亮氨酸用提取方式生产，且占要紧的地位。
关于中国来讲，具有丰硕动物资源的角、骨、血、蹄、皮、毛发、羽毛及鱼鳞等，有待充分利用。
目前已综合利用的有人发、猪血、猪毛、羊毛、丝素丝胶、皮革边料、蚕蛹巢丝、水产品下脚料等。
提取法生产氨基酸要紧通过3个步骤。
即蛋白质水解、氨基酸提取分离及结晶精制。
氨基酸的生物活性及应用氨基酸是组成蛋白质的大体单元，也是合成机体抗体，激素和酶的原料，在人体内有特殊的生理功能，是维持生命现象的重要物质。
氨基酸以肽键结合而存在于各类功能与结构不同的蛋白质分子中。
蛋白质是生命的基础物质，它对机体的生长、维持、防御及生理功能极为重要。
迄今，氨基酸及其衍生物的品种超过100多种。
普遍地应用于食物、饲料、化工、农业及医药等方面。
氨基酸作为药物在医疗保健事业中是一类占有重腹地位和充满希望的分支。
由于人们对氨基酸普遍参与机体正常代谢和许多生理性能的熟悉不断加深，氨基酸代谢紊乱与疾病的关系和在防治某些疾病中的重要作用等，愈来愈被人们所注视。
纸层析法分离鉴定氨基酸
纸层析法分离鉴定氨基酸纸层析法是一种常用的分离和纯化化学物质的实验方法，被广泛应用于有机合成、生物化学和食品科学等领域。
本文将介绍纸层析法在氨基酸分析中的应用。
一、实验原理氨基酸的分离和鉴定是生物化学实验中常用的手段。
氨基酸分子中含有羧基和氨基，可以通过纸层析法实现其分离。
纸层析法是一种基于物质分子间不同的吸附性能而进行分离的方法。
在纸层析实验中，将试样涂在纸层析片（通常为滤纸）的一侧，并将其放入溶剂（通常为水、丙酮、甲醇等）中，溶剂会沿纸层析片向上移动，分离出不同物质组分。
氨基酸分子的羧基和氨基分别具有不同的亲水性和疏水性，因此在纸层析分离中会表现出不同的吸附行为。
例如，疏水性较强的疏水基团会被生物样品或溶剂吸附，从而较慢地从纸层析片上移动，这些氨基酸通常出现在较高位置；而亲水性较强的羧基团则会被水吸附，因此移动速度较快，这些氨基酸通常出现在较低位置。
二、实验步骤1、制备样品：取大约1mg的氨基酸标准品或被测样品，加入1mL的去离子水中，并轻轻搅拌，制成1mmol/L的溶液。
2、制备纸层析片：取一张长约50cm的滤纸，将其叠成4层，然后将中间部分剪成30cm的长条，每条的宽度为1cm左右，用铅笔在底部标记出位置，离开1cm到1.5cm的距离。
3、涂样：在每个标记位置上滴加不同氨基酸溶液，每次加约5µL。
所有样品均按照氨基酸的相对极性从小到大进行涂样，从左到右编号，以便于鉴定。
4、溶剂选择：选择一种适宜的溶剂，通常为水、丙酮、甲醇等。
将滤纸上端放入溶剂中，约1cm左右的位置即可。
5、开始实验：用三角架和夹子将滤纸张贴在玻璃板上，使其呈现较小的倾斜面。
在滤纸的底部悬挂一张白纸，以便于观察样品在纸层析上的位置变化。
待溶剂无法再升高时，实验结束。
6、结果读取：按照行（从上到下）顺序，观察样品的移动距离。
三、实验结果及分析纸层析法可以分离并识别出存在于试样中的氨基酸分子，在实验中，通过观察样品从纸层析片底部开始向上移动的情况，可以确认每个氨基酸的相对位置和含量。
蛋白质的提取、分离纯化及定量
实验一氨基酸的别离鉴定——纸层析法实验目的1.学习氨基酸纸层析的根本原理。
2.掌握氨基酸纸层析的操作技术。
实验原理纸层析法是用滤纸作为惰性支持物的分配层析法。
层析溶剂由有机溶剂和水组成，滤纸和水的亲和力强，与有机溶剂的亲和和弱，因此在展层时，水是固定相，有机溶剂是流动相。
将样品点在滤纸上〔原点〕，进展展层，样品中的各种AA在两相溶剂中不断进展分配，由于它们的分配系数不同，不同AA随流动相移动速率就不同，于是将这些AA别离开来，形成距原点距离不等的层析点。
溶质在滤纸上的移动速率用比移〔rate of flow ,Rf〕来表示Rf= 原点到层析点中心的距离〔*〕/原点到溶剂前沿的距离(Y)只要条件〔如温度、展层剂的组成〕不变，*种物质的Rf值是常数。
可根据R f 作为定性依据。
Rf值的大小与物质的构造、性质、溶剂系统、层析滤纸的质量和层析温度等因素有关。
样品中如有多种AA，其中有些AA的Rf值一样或相近，此时只用一种溶剂展层，就不能将它们分开，为此，当用一种溶剂展层后，将滤纸转90度再用另一种溶剂展层，从而到达别离的目的，这种方法叫双向层析。
仪器、试剂1、扩展剂：是水饱和的正丁醇和醋酸以体积比4：1进展混合得混合液。
将20 ml正丁醇和5 ml冰醋酸放入分液漏斗中，与15 ml水混合，充分振荡，静置后分层，放出下层水层，漏斗内即为扩展剂。
取漏斗内的扩展剂约5 ml置于小烧杯中做平衡溶剂，其余的倒入培养皿中备用。
2、氨基酸溶液⑴.单一氨基酸：5%赖氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、⑵.混合氨基酸：各5 ml混合。
3、显色剂：0.1%水合茚三酮正丁醇溶液。
4、层析缸、滤纸〔14*17〕、喷雾器、电吹风实验步骤1.放置平衡溶剂：用量筒量取约5 ml平衡溶剂，放入培养皿中，然后置于密闭的层析缸中。
2.准备滤纸：取层析滤纸〔长17㎝、宽14㎝〕一*。
在纸的一端距边缘2㎝处用铅笔划一条直线，在此直线上每间隔1.5㎝作一记号——点样线。
氨基酸分离纯化的膜分离工艺概述
氨基酸分离纯化的膜分离工艺概述
几乎所有的氨基酸分离纯化工艺均利用了氨基酸在不同的pH值时电荷量不同这一特性。
氨基酸的分离纯化方法主要有：沉淀法、离子交换法、萃取法、吸附法、膜分离法及结晶法等。
下面，小编为大家介绍一下膜分离工艺：
氨基酸纯化设备采用膜分离技术，膜法分离是利用特殊的薄膜对液体中的某些成分进行选择性透过的方法的统称。
膜分离的作用机理往往用膜孔径的大小为模型来解释，实质上，它是由分离物质间的作用引起的，同膜传质过程的物理化学条件以及膜与分离物质间的作用有关。
氨基酸纯化设备的膜分离过程不发生相变，因此能量转化的效率高。
氨基酸纯化设备的膜分离过程在常温下进行，因而特别适于对热敏性物料，如对果汁、酶、药物等的分离、分级和浓缩。
以上就是小编为大家介绍的膜分离工艺分离纯化氨基酸，希望对您有帮助。
氨基酸的分离纯化技术
氨基酸的分离纯化技术化学与材料科学学院2008级*** ***摘要:氨基酸是一种重要的生物化工产品,它广泛应用于食品、化妆品、饲料添加剂以及医药等领域。
在氨基酸的工业生产中,其分离及纯化是的一个重要环节,在总投资费用中占有很大比例。
本文对目前我国工业上常用的氨基酸分离提取方法的研究进展状况作了较全面的总结。
关键词:氨基酸;分离;纯化1 引言氨基酸是组成蛋白质的基本单元,是生物有机体的重要组成部分,具有极其重要的生理功能。
氨基酸广泛应用于食品、饲料添加剂及医药领域,也被用作合成特殊化学物质的中间体,如低热质甜味剂、螯合剂及多肽。
目前,多数氨基酸采用发酵法生产,与氨基酸发酵等生产技术的发展相比,其分离与纯化的成本可占总成本的50%以上,故提高氨基酸分离的选择性和产率及对分离纯化新技术的研究有着极其重要的现实意义。
2 氨基酸的性质氨基酸是一种具有两性官能团的物质。
氨基酸分子既含有氨基又含有羧基,氨基和羧基的电离取决于溶液的pH值和氨基酸的等电点pI:在pH低于等电点pI 时,羧基的电离被抑制,氨基酸带正电荷;在pH值高于等电点pI时,氨基的电离被抑制而带负电荷;在等电点时,氨基酸的溶解度最小,最易从溶液中析出。
按照侧链基团的不同,氨基酸可以分为3类:酸性氨基酸,中性氨基酸,和碱性氨基酸。
而各种氨基酸的等电点不同,(酸性氨基酸<中性氨基酸<碱性氨基酸)。
利用这个性质,可以把它们进行分离纯化。
3氨基酸的分离与纯化几乎所有的氨基酸分离纯化工艺均利用了氨基酸在不同的pH值时电荷量不同这一特性。
氨基酸的分离纯化方法主要有:沉淀法、离子交换法、萃取法、吸附法、膜分离法及结晶法等。
3.1 沉淀法沉淀法是最古老的分离、纯化方法,目前仍广泛应用在工业上和实验室中。
它是利用某种沉淀剂使所需要提取的物质在溶液中的溶解度降低而形成沉淀的过程。
该方法具有简单、方便、经济和浓缩倍数高的优点。
氨基酸工业中常用沉淀法有等电点沉淀法,特殊试剂沉淀法和有机溶剂沉淀法。
氨基酸制备中的萃取技术_王力
收稿日期:2006-12-03作者简介:王力,男(1986-)本科生氨基酸制备中的萃取技术王力1,汤家芳2*(1.华中科技大学生命科学与技术学院,武汉,430074;2.武汉大学生命科学学院,武汉,430072)摘要:总结了氨基酸制备中的三大萃取技术:离子交换反应萃取,液膜分离萃取和反相胶团萃取及其在毛发水解氨基酸萃取分离方面的应用。
关键词:氨基酸;水解氨基酸;萃取;分离;制备中图分类号:Q517文献标识码:A文章编号:1006-8376(2007)01-0042-05氨基酸是一种重要的生物化工产品,它广泛应用于食品、饲料添加剂以及医药领域,也被用作合成特殊化学物质的中间体,如低热质甜味剂、螯合剂以及多肽。
大部分氨基酸的生产是由微生物发酵完成的。
用作碳源的初级原材料一般为甜菜或甘蔗糖蜜。
与氨基酸发酵技术的发展相比较,分离、浓缩和纯化氨基酸产品的/下游0过程的技术发展显得不相适应。
通常,分离纯化的成本可以占到总成本的80%以上[1]。
最近20年来,提高氨基酸分离的选择性和产率的过程开发,引起了人们的浓厚兴趣。
对于氨基酸的分离和回收,较多采用离子交换树脂法[2]。
虽然该法处理量较大,工艺成熟,但在分离之前必须对发酵液进行预处理。
离子交换树脂法就其本质而言是分批操作过程,而且成本很高。
因此,有必要考虑和开发更为经济和有效的分离方法以及能连续操作的生产过程,以求降低生产成本和能耗,提高产品纯度与收率,更好地适应工业化大生产的需要。
1氨基酸水溶液的基本特征氨基酸是一种具有两性官能团的物质。
氨基酸含有一个A-氨基,一个A-羧基及一个侧链,通式为RC H(NH2)COOH。
氨基酸分子的净电荷符号和各类存在形态摩尔分数的大小,随溶液的pH 值变化而变化。
当介质的pH达到一定值时,氨基酸分子呈电中性,此时的p H称为氨基酸的等电点(pI)。
当介质p H低于等电点,氨基酸以阳离子状态存在;当pH高于等电点,氨基酸以阴离子状态存在。
氨基酸的纸层析
氨基酸的纸层析引言：纸层析是一种简单而有效的分离和检测化合物的方法，它通过利用化合物在固定相（通常是纸张）上的迁移速度差异来实现分离。
氨基酸是构成蛋白质的基本组成单元，对于研究蛋白质的组成和性质具有重要意义。
因此，氨基酸的纸层析成为了研究氨基酸的常用方法之一。
一、纸层析的原理纸层析是一种液相分离技术，其原理基于化合物在固定相和流动相之间的分配行为。
固定相通常是由纸张组成的，而流动相则是溶液。
当试样溶液被加到纸上时，流动相开始向上渗透，溶解试样中的化合物。
然后，随着流动相继续上升，化合物会在纸上产生不同的迁移速度，从而实现分离。
二、氨基酸的纸层析方法氨基酸的纸层析方法通常涉及以下几个步骤：1. 准备纸层析纸：选择适合的纸张作为固定相，常用的有滤纸和纸胶片。
纸张应具有较好的吸水性和化学稳定性。
2. 制备流动相：根据需要选择合适的溶剂和缓冲液，以便溶解样品和调节pH值。
3. 样品制备：将待测氨基酸样品溶解在适当的溶剂中，并进行必要的稀释和调节pH值。
4. 上样：用毛细管或吸管将样品涂抹在纸上，通常在距离纸底端2-3厘米处。
5. 纸层析：将纸张立起放入含有流动相的容器中，使纸底端浸入溶液中，然后盖上盖子避免溶剂挥发。
让溶剂上升至合适的高度，以保证分离的有效性。
6. 可视化：取出纸张，干燥后，利用适当的显色剂或检测剂将化合物可视化。
常用的显色剂有尼尼醛试剂和二硝基苯胺。
7. 定量分析：通过比较样品斑点的Rf值（迁移率）和标准氨基酸的Rf值，可以对氨基酸进行定性和定量分析。
三、氨基酸纸层析的应用氨基酸的纸层析在生物化学和生物医学领域中得到了广泛的应用。
以下是一些常见的应用：1. 氨基酸分析：通过纸层析可以快速、简便地对复杂的氨基酸混合物进行分析，包括氨基酸的组成和相对含量。
2. 蛋白质组成分析：蛋白质是由氨基酸组成的，通过纸层析可以分析蛋白质中各种氨基酸的相对含量，进而了解蛋白质的组成和结构。
3. 蛋白质纯化：纸层析可以用于蛋白质的初步纯化，通过分离出目标氨基酸，从而减少后续纯化步骤的复杂性。
氨基酸的分离提纯
氨基酸的分离提纯刘艳梅周关华(东华大学环境科学与工程学院上海200051)摘要国内外氨基酸分离与提纯的发展研究现状及其在生产实践中的应用。
关键词氨基酸分离提纯应用氨基酸及其衍生物是组成蛋白质的基本单元，广泛用于医药、食品、饲料、化妆品工业等领域。
例如，在食品加工和饲料工业，L-谷氨酸一钠可作为增鲜剂，L一天冬氨酸、甘氨酸和DI，-丙氨酸等也用作食品风味改良剂，另外，L一天冬酰苯丙氨酸甲酯作为低热量甜味剂fAspartame)，在国外已广泛应用于饮料等食品。
L-赖氨酸和DL蛋氨酸广泛应用于改进饲料成份的营养价值。
I，-赖氨酸还用于强化面粉和强化米的生产。
在医药卫生方面，除了大量应用结晶氨基酸输液外，某些氨基酸及其类似物也被用于治疗某些疾病。
例如L-多巴[L一3一(3，4一二轻基苯基)丙氨酸】是治疗帕金森氏病的重要药物，而仅一甲基一多巴为有用的降压药物。
L一谷酰胺及衍生物用于治疗胃溃疡，L_色氨酸和5一羟基一L一色氨酸是有效的抗抑郁剂。
另外某些氨基酸衍生物具有抗肿瘤的作用。
一些肽类例如催产素，血管紧张肽和促胃液激素等，它们具有医疗效果的激素效应。
氨基酸聚合物，例如聚一一甲基一谷氨酸已被用作人造革的原料。
总之，氨基酸及其衍生物将会随着科学研究和工业生产的发展，而被更加广泛地应用【l】。
然而，国内氨基酸的生产远不能满足其需求。
1氨基酸的性质氨基酸是一种具有两性官能团的物质。
氨基酸分子既含有氨基又含有羧基，在溶液中主要以一NH，，一COO一形式存在。
氨基和羧基的电离取决于溶液的pH值和氨基酸的等电点PI：在pH低于等电点P1时，羧基的电离被抑制，氨基酸带正电荷；在pH值高于等电点Pl时，氨基的电离被抑制而带负电荷。
在等电点时，氨基酸的溶解度最小，最易从溶液中析出。
按照侧链基团的不同，氨基酸可以分为3类：酸性氨基酸，中性氨基酸，和碱性氨基酸。
而各种氨基酸的等电点不同，酸性氨基酸<中性氨基酸<碱性氨基酸。
氨基酸类药物的生产方法
③粗制 升温至65～70℃，搅拌半小时，加活性炭16kg， 于80～90℃保温半小时，滤除活性炭。调滤液至 pH4.8，静置结晶，吸出上清液后，底部沉淀经离心 甩干得胱氨酸粗品（Ⅱ）。
④精制 中和 升温至70℃，加活性炭1.5～2.5kg，85℃ 搅 拌 半 小 时 ， 过 滤 ， 加 1.5 倍 体 积 蒸 馏 水 ， 升 温 至 75 ～ 80℃ ， 搅 拌 下 用 12 ％ 氨 水 （ 化 学 纯 ） 中 和 至 pH3.5～4.0，析出结晶，滤取胱氨酸结晶，蒸馏水洗 至无氯离子，真空干燥得L-胱氨酸成品。
胱氨酸和酪氨酸均难溶于水，但在热水中酪氨酸 溶解度较大，而胱氨酸溶解度变化不大，故可将混合 物中胱氨酸、酪氨酸及其它氨基酸彼此分开。
（2）特殊试剂沉淀法 系采用某些有机或无机试剂与 相应氨基酸形成不溶性衍生物的分离方法。
如邻二甲苯-4-磺酸能与亮氨酸形成不溶性盐沉淀， 后者与氨水反应又可获得游离亮氨酸；
1、 目前全世界天然氨基酸的年总产量在百万吨左 右，其中产量较大者有谷氨酸、蛋氨酸及赖氨酸，其 次为天门冬氨酸、苯丙氨酸及胱氨酸等。它们主要用 于医药、食品、饲料及化工行业中。
2、 目前构成天然蛋白质的20种氨基酸的生产方法 有天然蛋白质水解法、发酵法、酶转化法及化学合成 法等四种。
3、 氨基酸及其衍生物类药物已有百种之多，但主 要是以20种氨基酸为原料经酯化、酰化、取代及成盐 等化学方法或酶转化法生产。
一、水解法
（一）基本原理与过程
以毛发、血粉及废蚕丝等蛋白质为原料，通过酸、 碱或酶水解成多种氨基酸混合物，经分离纯化获得各 种药用氨基酸的方法称为水解法。
目前用水解法生产的氨基酸有L-胱氨酸、L-精氨 酸、L-亮氨酸、L-异亮氨酸、L-组氨酸、L-脯氨酸 及L-丝氨酸等。
氨基酸生产工艺
氨基酸生产工艺氨基酸是生命体内必不可少的基本组成元素之一，广泛应用于农业、医药、化工等领域。
氨基酸的生产工艺通常包括发酵、提纯和干燥三个主要步骤。
下面将为大家介绍一下氨基酸的生产工艺。
首先是发酵过程。
氨基酸的发酵主要是通过微生物对含有氮源和碳源的培养基进行发酵，产生氨基酸。
常用的微生物有大肠杆菌、窄叶蓝枯草菌等。
培养基中的碳源主要有葡萄糖、甘油等，而氮源则有酵母粉、角蛋白等。
发酵过程中，微生物在一定的温度、pH值和氧气条件下生长和繁殖，生成氨基酸。
发酵结束后，需要对发酵液进行提纯。
提纯过程中，一般通过离子交换、凝胶过滤和超滤等方法，将杂质和有机物去除，得到纯净的氨基酸产物。
其中，离子交换属于最常用的提纯方法之一，主要是通过树脂的吸附作用，将杂质和有机物与目标物质分离。
最后是干燥过程。
氨基酸经过提纯后，仍然是液体状态，需要经过干燥来得到固体产品。
干燥的方法有很多种，常用的有喷雾干燥和真空干燥。
其中，喷雾干燥是将液态的氨基酸通过喷雾器喷入高温的空气中，迅速使其蒸发和冷凝成粉末状。
而真空干燥则是通过减压操作，将氨基酸的水分蒸发出来，得到干燥的氨基酸。
整个氨基酸生产工艺需要控制各个环节的条件，以确保产品质量。
发酵过程中，需要控制好温度、pH值和氧气供应，以促进微生物的生长和产酸。
在提纯过程中，要选择适合的方法和条件，以达到高纯度的氨基酸产物。
干燥过程中，需要控制干燥温度和时间，以避免产物的降解和热敏性。
氨基酸生产工艺的优化是提高产量和降低成本的关键之一。
通过优化培养基的配方、改进发酵条件和提高纯化技术，可以提高氨基酸的产量和纯度，并减少废物的产生和处理成本。
总之，氨基酸的生产工艺是一个较为复杂的过程，需要依靠微生物的发酵和多种分离纯化技术的协同作用。
随着科学技术的进步，氨基酸的生产工艺将进一步优化，为人们提供更多高质量的氨基酸产品，促进农业和医疗卫生事业的发展。
谷氨酸分离提取工艺进展
谷氨酸分离提取工艺进展一、本文概述谷氨酸，作为一种重要的氨基酸，在生物体内发挥着至关重要的作用，包括蛋白质合成、能量代谢、神经传导等多个方面。
近年来，随着生物技术的不断发展和人们对谷氨酸需求量的增加，谷氨酸的分离提取工艺受到了广泛关注。
本文旨在综述谷氨酸分离提取工艺的最新进展，包括传统的提取方法、新型的分离技术，以及工艺优化和经济效益分析等方面。
通过对这些内容的探讨，希望能够为谷氨酸的生产和应用提供有益的参考，推动相关产业的可持续发展。
二、谷氨酸的传统分离提取工艺谷氨酸作为一种重要的氨基酸，其分离提取工艺一直是生物化学领域的研究重点。
传统的谷氨酸分离提取工艺主要基于发酵液的预处理等电点沉淀、离子交换、结晶和精制等步骤。
发酵液预处理是关键的一步，旨在去除发酵液中的杂质，如蛋白质、糖类、无机盐等，以提高后续分离提取的效率。
这一步通常包括离心、过滤和调节pH值等操作。
接下来，等电点沉淀法是利用谷氨酸在特定pH值下溶解度降低的特性，通过调整溶液的pH值至谷氨酸的等电点，使其沉淀析出。
这一方法操作简便，但谷氨酸的纯度和收率往往受到等电点附近其他杂质的干扰。
离子交换法则是利用离子交换树脂对谷氨酸的选择性吸附能力，将谷氨酸从发酵液中分离出来。
此方法对谷氨酸的纯度提升效果显著，但设备投资和操作成本相对较高。
在结晶步骤中，通过控制温度、浓度和pH值等条件，使谷氨酸以晶体的形式析出，进一步提高其纯度。
然而，结晶过程中可能出现的杂质共结晶现象会影响谷氨酸的质量。
精制步骤通常包括重结晶、脱色、脱盐等操作，以进一步提高谷氨酸的纯度。
精制后的谷氨酸产品可以满足不同领域的应用需求。
尽管传统的谷氨酸分离提取工艺已经相对成熟，但在操作成本、产品纯度、环境友好性等方面仍有改进空间。
因此，研究者们一直在探索更加高效、环保的谷氨酸分离提取新工艺。
三、谷氨酸分离提取工艺的新进展近年来，随着科学技术的不断进步，谷氨酸的分离提取工艺也取得了显著的进展。
膜分离技术纯化氨基酸
膜分离技术纯化氨基酸
氨基酸的分离纯化工艺利用氨基酸在不同PH值时电荷量不同的特性。
文章就膜分离技术特点及超滤和纳滤膜技术的分离的原理，膜分离技术在氨基酸分离纯化中应用进展及目前存在的问题和应用前景做了综述。
膜分离过程以选择透过性膜作为分离介质，通过在膜两侧施加某种推动力，使得原料侧组分有选择性地透过膜，从而达到分离、提纯和浓缩的目的。
传统氨基酸生产工艺：蛋白质水解液液→过滤或离心或大孔树脂吸附、萃取→浓缩→脱色→干燥→产品。
采用膜分离技术工艺可简化为：蛋白质水解液→超滤→纳滤→脱色→干燥→产品。
相对于传统工艺，膜分离技术具有设备简单、常温操作，无相变及化学变化，选择性高及能耗低，分离效率高，产品的收率和质量高等优点。
将膜分离技术应用在氨基酸分离纯化中，不仅提高氨基酸的质量和收率，还能减少其废水的排放量，从而减轻对环境的污染，符合清洁工艺的要求。
纸层析法分离氨基酸
注意：使用的溶剂系统需新鲜配制，并要摇匀。展层溶剂每
张约需25mL。
D、显色：待展层基本结束后, ，置65℃鼓风 箱中10-20min，鼓风保温，滤纸上即显出 紫红色/黄色斑点。
E、Rf值的计算：用尺测量显色斑点的中心与 原点(点样中心)之间的距离和原点到溶剂前 沿的距离，求出此值，即得氨基酸的Rf值。
溶剂的酸碱度增大则流动相的含水量增高，使极性物质的Rf值增加； 温度25℃，时间1h。 分配层析法是利用不同的物质在两个互不相溶的溶剂中的分配情况不同而使之得到分离的方法。
计算出 5种氨基酸在酸系统中的Rf值。 2、培养皿(直径115mm)。 (1) 剪洗比色法：将斑点剪下，用适当的溶剂洗脱后，通过分光光度计进行比色定量。 平衡一般在密闭的层析缸内进行。
按溶剂在滤纸上流动的方向不同，展开有上行、下行和环 行三种方式。
(1) 上行法：将滤纸点样的一端向下浸入溶剂中，溶剂因 毛细管引力的作用从下向上流动。 上行法操作简单，重现性好， 是最常用的展开方法，但展开时间较长。
(2) 下行法：在层析缸上部有一盛展开剂的液槽，将滤纸 点样的一端朝上浸入槽中，溶剂主要靠重力作用自上而下流动。 下行法展开速度快，但Rf值的重现性较差，斑点易扩散。
为了显示层析斑点位置，可根据物质的性质不同，采 用显色剂显示或紫外光显示。
(1) 显色剂显示： 被分离物质与显色剂生成有颜色的 化合物，显示斑点位置。常用喷雾法 、浸渍法或涂刷法。
(2) 紫外光显示：有些物质有紫外光吸收性质，如核 苷酸类物质。有些物质受紫外光照射会发出荧光，如维生 素B1、B2等，所以可在紫外光照射下观察到被分离物质的斑 点。
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氨基酸的分离纯化技术化学与材料科学学院2008级*** ***摘要：氨基酸是一种重要的生物化工产品，它广泛应用于食品、化妆品、饲料添加剂以及医药等领域。
在氨基酸的工业生产中，其分离及纯化是的一个重要环节，在总投资费用中占有很大比例。
本文对目前我国工业上常用的氨基酸分离提取方法的研究进展状况作了较全面的总结。
关键词：氨基酸；分离；纯化1 引言氨基酸是组成蛋白质的基本单元，是生物有机体的重要组成部分，具有极其重要的生理功能。
氨基酸广泛应用于食品、饲料添加剂及医药领域，也被用作合成特殊化学物质的中间体，如低热质甜味剂、螯合剂及多肽。
目前，多数氨基酸采用发酵法生产，与氨基酸发酵等生产技术的发展相比，其分离与纯化的成本可占总成本的50%以上，故提高氨基酸分离的选择性和产率及对分离纯化新技术的研究有着极其重要的现实意义。
2 氨基酸的性质氨基酸是一种具有两性官能团的物质。
氨基酸分子既含有氨基又含有羧基，氨基和羧基的电离取决于溶液的pH值和氨基酸的等电点pI：在pH低于等电点pI 时，羧基的电离被抑制，氨基酸带正电荷；在pH值高于等电点pI时，氨基的电离被抑制而带负电荷；在等电点时，氨基酸的溶解度最小，最易从溶液中析出。
按照侧链基团的不同，氨基酸可以分为3类：酸性氨基酸，中性氨基酸，和碱性氨基酸。
而各种氨基酸的等电点不同，（酸性氨基酸<中性氨基酸<碱性氨基酸）。
利用这个性质，可以把它们进行分离纯化。
3氨基酸的分离与纯化几乎所有的氨基酸分离纯化工艺均利用了氨基酸在不同的pH值时电荷量不同这一特性。
氨基酸的分离纯化方法主要有：沉淀法、离子交换法、萃取法、吸附法、膜分离法及结晶法等。
3．1 沉淀法沉淀法是最古老的分离、纯化方法，目前仍广泛应用在工业上和实验室中。
它是利用某种沉淀剂使所需要提取的物质在溶液中的溶解度降低而形成沉淀的过程。
该方法具有简单、方便、经济和浓缩倍数高的优点。
氨基酸工业中常用沉淀法有等电点沉淀法，特殊试剂沉淀法和有机溶剂沉淀法。
3．1．1 利用氨基酸的溶解度分离或等电点沉淀法在生产中常利用各种氨基酸在水和乙醇等溶剂中溶解度的差异，将氨基酸彼此分离。
如胱氨酸和酪氨酸在水中极难溶解，而其它氨基酸则比较易溶；酪氨酸在热水中溶解度大，而胱氨酸则无大差别。
根据此性质，即可把它们分离出来，并且互相分开。
另外，可以利用氨基酸的两性解离有等电点的性质。
由于氨基酸在等电点时溶解度最小，最容易析出沉淀，所以利用溶解度法分离氨基酸时，也常结合等电点沉淀法。
3．1．2特殊试剂沉淀法其某些氨基酸可以与一些有机或无机化合物结合，形成结晶性衍生物沉淀，利用这种性质向混合氨基酸溶液中加入特定的沉淀剂，使目标氨基酸与沉淀剂沉淀下来，达到与其它氨基酸分离的目的。
较为成熟的工艺有：揩氨酸与苯甲醛在碱性和低温条件下，可缩合成溶解度很小的苯亚甲基精氨酸，分离这种沉淀，用盐酸水解除去苯甲醛，即可得精氨酸盐酸盐；亮氨酸与邻一二甲苯一4一磺酸反应，生成亮氨酸的磺酸盐，后者与氨水反应得到亮氨酸；组氨酸与氯化汞作用生成组氨酸汞盐的沉淀，再经处理就可得到组氨酸。
特殊试剂沉淀法虽然操作简单、选择性强，但是由于沉淀剂回收困难，废液排放污染严重，残留沉淀剂的毒性等原因已逐渐被它方法取代。
3．2 离子交换法离子交换法是利用不溶性高分子化合物(即离子交换树脂)对不同氨基酸吸附能力的差异对氨基酸混合物进行分组或实现单一成分的分离。
离子交换树脂是一种具有离子交换能力的高分子化合物。
它不溶于水、酸和碱，也不溶于普通有机溶剂，化学性质稳定。
离子交换树脂作为固定相，本身具有正离子或负离子基团，和这些离子相结合的不同离子是可电离的交换基团(或称功能基团)。
在离子交换过程中，溶液中的离子自溶液中扩散到交换树脂的表面，然后穿过表面，又扩散到交换树脂颗粒内，这些离子与交换树脂中的离子互相交换，交换出来的离子扩散到交换树脂表面外，最后再扩散到溶液中去。
这样，当溶液和树脂分离后，其组成都发生了变化，从而达到分离纯化的目的。
在生产中，在适当的pH条件下，如在pH=5～6的蛋白质水解液中，碱性氨基酸解离成阳离子，酸性氨基酸就解离成阴离子，而中性氨基酸基本上呈电中性。
选择适当的交换树脂，就能实现单一的或者分组的选择性吸附。
然后用不同pH的洗脱液，可把各种氨基酸分别洗脱下来。
离子交换法提取氨基酸处理量大，工艺较成熟。
但由于该法是利用各种氨基酸之间等电点的差异，所以只有当欲被分离的混合氨基酸之间的等电点相差较大时才能较好的分开，对于等电点相近的混合氨基酸只能部分得以分开或根本就难以分离。
另外，氨基酸离子在树脂中的扩散速度较慢，因此一方面要求料液的流速较低，另一方面对于氨基酸浓度较高的料液在上离子交换柱前还要进行稀释，这就必然导致所需的设备太大。
3．3 萃取法3．3．1 反应萃取反应萃取就是选择适当的反应萃取剂，其解离出来的离子与氨基酸解离出来的离子发生反应，生成可以溶于有机相的萃取配合物，从而使氨基酸从水相进入有机相。
由于萃取剂与不同的氨基酸反应形成性质不同的萃合物，扩大了那些性质相近的氨基酸的性质差别，从而达到彼此分离和提纯的目的。
迄今为止，人们采用了两种不同形式的反应萃取剂，一类是在低pH值下萃取氨基酸阳离子，以酸性磷氧类萃取剂最为典型，如二(2-乙基己基)磷酸、十二烷基磷酸、十二烷基苯磺酸等。
且当这些萃取剂中添加诸如煤油、四氯化碳、苯、正辛烷、异戊醇时可增加分相速度。
另一种是在高pH值下萃取氨基酸阴离子、季铵盐，如甲基三辛基氯化铵是典型的阴离子萃取剂。
3．3．2 溶剂萃取由于氨基酸是离子型化合物，它们在非极性溶剂中的溶解度很低，因此物理萃取法难以用来提取氨基酸。
早期采用正己胺和含4～5个碳原子的低级醇作为萃取剂从蛋白水解液中萃取分离十几种氨基酸。
但这种萃取剂的分配系数低，分离系数差，对萃取柱的高度要求很高，一般要有30～40理论级才能有满意的分离效果。
近些年来先后开发了化学萃取法分离提取氨基酸，其中有机胺类和以有机磷酸为应用最多的两大类萃取剂嗍，尤其是在有机磷酸为萃取剂的萃取过程研究很多，并开发大量的工艺过程。
采用高级脂肪酸，如月桂酸、硬脂酸、棕榈酸和油酸可以有效地萃取分离碱性氨基酸。
这些脂肪酸无毒、价廉。
但是，碱性氨基酸比较容易用离子交换法有效地分离。
萃取法分离碱性氨基酸恐怕难有商业应用前景嗍。
利用氨基酸不溶于水，而易溶于液氨的性质，发展了液氨萃取技术。
应用这种技术，在蒸发了氨后，可获得氨基酸的极好结晶。
化学萃取法分离混合氨基酸主要也是利用不同氨基酸之间等电点差别，与离子交换法相似，只有当混合氨基酸之间的等电点相差足够大时才能被萃取分离开，对于等电点相近的氨基酸如中性氨基酸，它们的等电点几乎一致，因此化学萃取法是难以分离混合中性氨基酸的。
3．3．3 反向微胶团萃取反向微胶团是溶在有机溶剂中的表面活性剂自发形成的纳米级的一种聚体，表面活性剂的极性尾在外与非极性的有机溶剂接触，而极性头则排列在内形成极性核，极性核溶于水后就形成了“水池”。
当含有氨基酸的水溶液与含反相微胶团的有机溶剂相混合时，氨基酸以带电离子状态进入反相微胶团的“水池”内或微胶团球粒的界面分子膜层内而被分离。
反相微胶团对氨基酸具有相当强的萃取能力。
氨基酸是以离子状态被萃取的，不同带电状态的氨基酸离子的被萃取能力不同。
pH变化对氨基酸萃取分配比的影响是通过改变氨基酸在水溶液中的电离状态而影响氨基酸的总分配比的。
水溶液中的离子强度变化则是影响氨基酸离子与表面活性剂之间的静电作用强弱来影响氨基酸的被萃取能力的。
反相微胶团对氨基酸的萃取由于反萃用的是离子强度更大的盐溶液，所以反萃液尚需进一步将氨基酸与无机盐分离，才能得到纯的氨基酸。
到目前为止大多数研究的只是适用于低盐浓度的氨基酸料液如发酵液，对于同时含有多种氨基酸且盐浓度高的料液如胱氨酸母液则不能适用。
3．3．4 液膜萃取液膜萃取，也称液膜分离，是将第三种液体展成膜状以便隔开两个液相，利用液膜的选择透过性，使料液中的某些组分透过液膜进入接受液，然后将三者各自分开，从而实现料液组分的分离．液膜分离过程是由三个液相所形成的两个相界面上的传质分离过程，实质上是萃取与反萃取的结合液膜萃取兼有溶剂萃取和膜渗透两项技术的特点，按其结构可分为乳化液膜和支撑液膜两大类。
乳化液膜为液体表面活性剂形成的球面，将溶液分为内相和外相，液膜只有几个分子厚，单位体积设备的表面积可达1000～3000m2/m3 。
乳状液膜萃取法提取氨基酸是一种具有工业应用前景的分离氨基酸的新方法，它具有膜分离技术的优点，在常温下操作，能耗少，又不象固体膜需要高压操作，存在膜污染老化而需经常清洗、维修和更换的麻烦。
但是，目前大多数研究仍处于实验室阶段，未见工业报道。
乳状液膜萃取法要实现工业化，还必须研究解决萃取过程的乳化问题、低毒萃取剂的选择和萃取剂残留物对产品质量影响的问题及萃取平衡和传质速率问题。
支撑液膜是将起分离作用的液相借助毛细作用同定在多孔高分子膜中，由载体、有机溶剂（或称稀释剂）和多孔高分子膜（或称支撑体）三个组分组成，其体系由料液、支撑液膜和反萃取液三个连续相组成，支撑液膜可以使萃取与反萃取在液膜的两侧同时进行，从而避免载体负荷的限制、减少了有机相的使用量，解决了乳化液膜的乳化液稳定条件及破乳等问题。
而且支撑液膜因其结构简单的特点，可用于研究确定传递机理。
3．4 吸附法吸附法是利用恰当的吸附剂，在一定的pH条件下，使混合液中氨基酸被吸附剂吸附，然后再用适当的洗脱剂将吸附的氨基酸从吸附剂上解吸下来，达到浓缩和提纯的目的。
常用的吸附剂有高岭土、氧化铝、酸性白土等无机吸附剂。
吸附法具有很多优点，如：不用或少用有机溶剂；操作简便、安全，设备简单；吸附过程pH变化小等。
但是吸附法的选择性差，收率低，特别是一些无机吸附剂性能不稳定，不能连续操作，劳动强度大，尤其活性炭影响环境卫生。
所以吸附法曾有一段时间很少采用，几乎被其它方法所代替。
但随着大孔网状聚合物吸附剂的合成和不断发展，吸附法又重新被人们重视。
3．5 毛细电渗析电渗析也是对氨基酸发酵液脱盐浓缩的常用方法。
其中毛细电渗析以集成电路为基础的毛细电渗析，通过添加少量溶解聚合物，可明显提高肽缩氨酸和氨基酸的溶解与分离。
毛细电渗析已成为一种应用广泛的分离大范围多种类无机或有机化合物的方法。
它可以与传统的色谱分离方法相媲美。
因为它的高分离效率。
3. 6 膜分离法膜分离法可以实现混合溶液的分离是因为在膜和溶液的界面处存在以下机理：由于亲水性等原因所引起的选择性透过效应；与分子尺寸有关的筛分效应；膜与氨基酸的电荷效应。
国外膜分离工艺已应用于乳制品工业。
采用反渗透浓缩乳清，使用超滤法从乳清中制备浓缩蛋白质，使用微米膜分离乳清中的蛋白质、去除脱脂乳中的细菌，使用纳滤膜去除乳清中的矿物质。