基因工程试卷
基因工程技术考试试题
基因工程技术考试试题一、选择题（共10题，每题2分，共计20分）1. DNA是由以下哪种分子组成的？A. 蛋白质B. 脂质C. 糖类D. 细胞膜2. 下列哪种是基因工程技术的一种应用？A. 组织工程B. 基因治疗C. 生物降解D. 太阳能发电3. PCR技术用于什么目的？A. 基因克隆B. 基因敲除C. 基因突变D. 基因治疗4. 基因工程技术最早起源于哪个国家？A. 美国B. 英国C. 中国D. 日本5. 下列哪种是基因编辑的一种主要方法？A. RNA干扰B. 全基因组测序C. 基因枪D. CRISPR-Cas96. 基因工程技术在农业领域的主要应用是什么？A. 作物抗虫性改良B. 增加作物产量C. 提高作物口感D. 减少作物生长周期7. 双链RNA干扰主要用于什么目的？A. 基因敲除B. 基因突变C. 基因治疗D. 基因表达调控8. 基因工程技术在医药领域的主要应用是什么？A. 生产抗生素B. 疾病诊断C. 组织工程D. 基因改良9. 基因工程技术是否可以用于人类克隆？A. 可以B. 不可以10. 基因工程技术是否会对生态环境造成影响？A. 会B. 不会二、简答题（共5题，每题10分，共计50分）1. 请简要介绍基因工程技术的原理和主要方法。
2. 基因工程技术在农业领域的应用有哪些？请举例说明。
3. 什么是基因编辑？请详细描述CRISPR-Cas9基因编辑系统的工作原理。
4. 简要介绍基因工程技术在医药领域的应用，包括基因治疗和药物生产。
5. 基因工程技术是否存在伦理道德问题？请阐述你的观点。
三、论述题（共1题，30分）请阐述基因工程技术对人类社会和生态环境的影响，包括积极和消极两方面。
基因工程练习试题带答案
1．在基因工程中，切割载体和含有目的基因的 DNA 片段中，普通需使用A. 同种限制酶B.两种限制酶C. 同种连接酶D.两种连接酶2．基因工程常用的受体有①大肠杆菌②枯草杆菌③结核杆菌④动植物细胞A. ①②③④B. ①②③C. ②③④D.①②④3．有关基因工程的表达正确的选项是A.限制酶只在获得目的基因时才用B.重组质粒的形成是在细胞完成的C.质粒都可作为载体D.蛋白质的构造成份为合成目的基因提供资料4．以下哪项不是基因工程中时常使用的用来运载目的基因的载体 A.细菌质粒 B.噬菌体 C.动植物病毒 D.细菌核区的 DNA5．基因工程是在 DNA 份子水平上发展设计施工的。
在基因操作的根本步骤中，不发展碱基互补配对的是A.人工合成目的基因B. 目的基因与运载体结合C.将目的基因导入受体细胞D. 目的基因的检测表达6．不是基因工程法生产的药物是A.干扰素B.白细胞介素C.青霉素D. 乙肝疫苗7．在基因工程中用来修饰改造基因的工具是A.限制酶和连接酶B.限制酶和水解酶C.限制酶和运载酶D.连接酶和运载酶8．以下哪项表达不是运载体必须具备的条件A.具有某些标记基因B.决定宿主细胞的生存C.能够在宿主细胞中复制D.有一个或者多个限制酶切点9．水母发光蛋白由 236 个氨基酸构成，其中有三种氨基酸构成发光环，现已将这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记。
在转基因技术中，这种蛋白质的作用A.促使目的基因导入宿主细胞中B.促使目的基因在宿主细胞中复制C.使目的基因容易被检测和选择D.使目的基因容易成功表达 10．应用基因工程技术诊断疾病的过程中必须使用基因探针才干到达检测疾病的目的。
这里的基因探针是指A.用于检测疾病的医疗器械B.用放射性同位素或者荧光份子等标记的 DNA 份子C.合成β—球蛋白的 . DNA .D.合成苯丙氨酸羟化酶的 DNA 片段11．基因工程第一步的一种法是把所需的基因从供体细胞别离出来，这要利用限制性切酶。
基因工程试题及答案解析
基因工程试题及答案解析一、选择题1. 基因工程中常用的限制酶是：A. 蛋白酶B. DNA聚合酶C. 核糖核酸酶D. 限制性核酸内切酶答案：D2. 基因工程中，用于将目的基因导入植物细胞的方法是：A. 电穿孔法B. 显微注射法C. 农杆菌转化法D. 脂质体介导法答案：C3. 下列哪项不是基因工程的基本步骤？A. 目的基因的获取B. 基因表达载体的构建C. 目的基因的扩增D. 目的基因的检测与鉴定答案：C二、填空题1. 基因工程中，常用的运载体有____、____和____。
答案：质粒、噬菌体、动植物病毒2. 基因工程中，常用的筛选标记基因有____、____和____。
答案：抗性基因、荧光蛋白基因、酶基因三、简答题1. 简述基因工程的应用领域。
答案：基因工程的应用领域包括农业、医学、工业、环境保护等。
在农业中，基因工程可以用于培育抗病、抗虫、抗旱等性状的作物；在医学领域，基因工程可以用于生产重组蛋白药物、基因治疗等；在工业上，基因工程可以用于生产酶、疫苗等；在环境保护方面，基因工程可以用于生物修复、污染物降解等。
2. 基因工程中，如何确保目的基因在宿主细胞中正确表达？答案：确保目的基因在宿主细胞中正确表达需要考虑以下几个方面：首先，目的基因需要有合适的启动子和终止子，以确保其在宿主细胞中得到正确转录和终止；其次，需要考虑目的基因的密码子偏好性，以确保其在宿主细胞中能被高效翻译；再次，需要考虑目的基因的稳定性，避免其在宿主细胞中被降解；最后，还需要考虑目的基因产物的后翻译修饰和定位。
四、论述题1. 论述基因工程在医学领域的应用及其可能带来的伦理问题。
答案：基因工程在医学领域的应用主要包括生产重组蛋白药物、基因治疗、疾病诊断和基因疫苗等。
重组蛋白药物可以用于治疗糖尿病、侏儒症等疾病；基因治疗可以用于治疗遗传性疾病；疾病诊断可以通过基因检测来实现；基因疫苗可以用于预防某些遗传性疾病。
然而，基因工程的应用也带来了伦理问题，如基因隐私权、基因歧视、基因治疗的安全性和有效性等。
(完整版)高中生物基因工程试题
阶段质量检测（一）基因工程（时间:45分钟，满分:100分）一、选择题（每小题3分，共45分）1.下列有关基因工程技术的叙述，正确的是（）A.重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和载体B.所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列C.只要是细菌中的质粒都可以直接作为基因工程中的载体D.载体必须具备的条件之一是有多个限制酶切割位点，以便与外源基因进行连接2.（浙江高考）天然的玫瑰没有蓝色花，这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因B，而开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知的基因B。
现用基因工程技术培育蓝玫瑰，下列操作正确的是（）A.提取矮牵牛蓝色花的mRNA,经逆转录获得互补的DNA，再扩增基因BB.利用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛的基因文库中获取基因BC.利用DNA聚合酶将基因B与质粒连接后导入玫瑰细胞D.将基因B直接导入大肠杆菌，然后感染并转入玫瑰细胞3.日本下村修、美国沙尔菲和钱永健因在发现绿色荧光蛋白（GFP）等研究方面做出突出贡献，获得2008年度诺贝尔化学奖。
GFP在紫外光的照射下会发出绿色荧光。
依据GFP 的特性，你认为该蛋白在生物工程中的应用价值是（）A.作为标记基因，研究基因的表达B.作为标记蛋白，研究细胞的转移C.注入肌肉细胞，繁殖发光小白鼠D.标记噬菌体外壳，示踪DNA路径4•下列有关质粒的叙述，正确的是（）A.质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器B.质粒是细菌细胞质中能自主复制的小型环状DNAC.质粒只有在侵入宿主细胞后，才能在宿主细胞内复制D.基因工程中常用的载体除了质粒外，还有核DNA、动植物病毒以及入噬菌体的衍生物5•下列有关基因工程的叙述正确的是（）A.用同种限制性核酸内切酶切割载体与含目的基因的DNA片段可获得相同的黏性末端B.以蛋白质的氨基酸序列为依据合成的目的基因与原基因的碱基序列相同C.检测到受体细胞中含有目的基因就标志着基因工程育种已经成功D.质粒上抗生素的抗性基因有利于质粒与外源基因连接6•下列有关基因工程和蛋白质工程步骤的叙述不正确的是（）A.将基因表达载体导入小鼠的受精卵中常用显微注射法B.设计扩增目的基因的引物时不必考虑表达载体的序列C.蛋白质工程是通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新蛋白质的技术D.蛋白质工程可合成自然界中不存在的蛋白质7.利用细菌大量生产人的胰岛素，下列叙述错误的是（）A.用适当的酶对载体与人的胰岛素基因进行切割与黏合B.用适当的化学物质处理受体细菌表面，将重组DNA导入受体细菌C.通常通过检测目的基因产物来检测重组DNA是否已导入受体细菌D.重组DNA必须能在受体细菌内进行复制与转录，并合成人的胰岛素8.下列关于图中P、Q、R、S、G的描述，正确的是（）A.P代表的是质粒RNA，S代表的是外源DNAB.Q表示限制酶的作用，R表示RNA聚合酶的作用C.G是RNA与DNA形成的重组质粒D.G是转基因形成的重组质粒DNA9.下列关于目的基因的检测与鉴定的叙述，错误的是（）A.目的基因在真核细胞中能否稳定遗传的关键是目的基因是否插入质粒DNA中B.检测受体细胞是否含有目的基因及其是否成功转录的方法都是分子杂交法C.目的基因的鉴定通常是在个体水平上进行的D.如在受体细胞内检测到目的基因表达的蛋白质，可确定目的基因首端含有启动子10.科学家利用生物技术将人的生长激素基因导入小鼠受精卵的细胞核中，经培育获得一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中，在医学研究及相关疾病治疗方面都具有重要意义。
高中基因工程试题及答案
高中基因工程试题及答案一、选择题1. 基因工程是指：A. 基因的自然选择B. 基因的人工选择C. 基因的人工重组D. 基因的自然重组答案：C2. 基因工程中常用的载体是：A. 质粒B. 病毒C. 染色体D. 线粒体答案：A3. 基因枪法属于哪种基因转移技术？A. 化学法B. 物理法C. 生物法D. 机械法答案：B4. 以下哪个不是基因工程的步骤？A. 目的基因的获取B. 目的基因的克隆C. 目的基因的表达D. 目的基因的自然选择答案：D5. 基因工程在医学领域的应用不包括：A. 基因治疗B. 基因检测C. 基因编辑D. 基因克隆答案：D二、填空题6. 基因工程的核心技术是________。
答案：重组DNA技术7. 基因工程中常用的受体细胞有________和________。
答案：大肠杆菌、酵母菌8. 基因工程在农业上的应用包括________和________。
答案：转基因作物、基因改良9. 基因工程在环境保护中的应用包括________和________。
答案：生物修复、污染物降解10. 基因工程在工业生产中的应用包括________和________。
答案：生物催化剂、生物制药三、简答题11. 简述基因工程的基本原理。
答案：基因工程的基本原理是利用分子生物学技术，将目的基因从一种生物体中提取出来，然后通过重组DNA技术将其插入到另一种生物体的基因组中，使其在新的宿主细胞中表达，从而获得具有特定性状的生物体或生产特定的生物产品。
12. 基因工程在医学领域有哪些应用？答案：基因工程在医学领域的应用包括基因治疗，通过将正常基因导入患者体内以治疗遗传性疾病；基因检测，用于疾病诊断和风险评估；基因编辑，通过修改基因序列来治疗疾病；以及生产生物药物，如胰岛素、干扰素等。
四、论述题13. 论述基因工程的伦理问题及其解决途径。
答案：基因工程的伦理问题主要包括对人类基因组的修改可能带来的未知风险、基因歧视、生物多样性的减少等。
大学基因工程试题及答案
大学基因工程试题及答案一、选择题1. 基因工程中常用的限制酶属于哪一类酶？A. 核酸酶B. 蛋白酶C. 脂肪酶D. 淀粉酶答案：A2. 以下哪个不是基因工程的基本步骤？A. 目的基因的克隆B. 目的基因的表达C. 目的基因的检测D. 目的基因的复制答案：D3. 基因工程中常用的运载体有哪些？A. 质粒B. 噬菌体C. 动植物病毒D. 所有以上答案：D二、填空题1. 基因工程中常用的_________技术可以用于目的基因的检测。
答案：PCR2. 基因工程中，_________是将目的基因导入受体细胞的关键步骤。
答案：转化3. 在基因工程中，_________是将目的基因插入到运载体中形成重组DNA分子的过程。
答案：克隆三、简答题1. 简述基因工程在医学领域的应用。
答案：基因工程在医学领域的应用包括生产重组药物、基因治疗、疾病诊断和疫苗开发等。
2. 描述基因工程中目的基因的克隆过程。
答案：目的基因的克隆过程包括提取目的基因、构建基因文库、筛选含有目的基因的克隆、目的基因的扩增和纯化等步骤。
四、论述题1. 论述基因工程技术在农业中的应用及其可能带来的问题。
答案：基因工程技术在农业中的应用包括改良作物品质、提高作物产量、增强作物抗病虫害能力等。
可能带来的问题包括生态平衡的破坏、基因污染、食品安全问题等。
2. 分析基因工程中目的基因表达调控的重要性及其策略。
答案：目的基因表达调控在基因工程中至关重要，它决定了基因工程产品的功能和产量。
调控策略包括启动子的选择、增强子的应用、转录后调控等。
基因工程试题及答案
基因工程试题及答案# 基因工程试题及答案## 一、选择题1. 基因工程中常用的工具酶是：A. 限制性内切酶B. DNA聚合酶C. 逆转录酶D. DNA连接酶2. 基因工程中，用于目的基因的克隆通常使用：A. 质粒B. 噬菌体C. 人工染色体D. 转座子3. 下列哪项不是基因工程的应用领域？A. 农业改良B. 疾病治疗C. 能源开发D. 武器制造## 二、填空题1. 基因工程中，常用的宿主细胞包括________、________和________。
2. 基因枪法是一种________技术，可以将目的基因直接导入植物细胞。
## 三、简答题1. 简述基因工程的基本操作步骤。
2. 基因工程在医药领域的应用有哪些？## 四、论述题1. 论述基因工程对现代农业的影响及其潜在风险。
## 参考答案### 一、选择题1. 答案：A, D。
限制性内切酶和DNA连接酶是基因工程中用于切割和连接DNA片段的常用工具酶。
2. 答案：A。
质粒是基因工程中常用的载体，用于克隆和表达目的基因。
3. 答案：D。
基因工程的应用领域广泛，但武器制造不属于其应用范围。
### 二、填空题1. 答案：大肠杆菌、酵母菌、哺乳动物细胞。
这些是基因工程中常用的宿主细胞，用于表达外源基因。
2. 答案：基因转移。
基因枪法是一种基因转移技术，通过高速微粒子将DNA射入细胞内。
### 三、简答题1. 答案：基因工程的基本操作步骤包括：目的基因的获取、载体的选择与构建、目的基因与载体的连接、转化宿主细胞、筛选含有目的基因的细胞、目的基因的表达与检测。
2. 答案：基因工程在医药领域的应用包括：生产重组蛋白药物、基因治疗、疫苗开发、疾病诊断等。
### 四、论述题1. 答案：基因工程对现代农业的影响主要体现在作物改良、提高产量、增强抗病虫害能力等方面。
通过基因工程，可以培育出抗旱、抗盐碱、抗病的作物新品种，提高作物的适应性和产量。
然而，基因工程也存在潜在风险，如基因流可能导致非目标物种的基因改变，以及转基因作物对生态环境的影响等。
高考生物《基因工程》真题练习含答案
高考生物《基因工程》真题练习含答案1．[2024·山东卷]关于“DNA的粗提取与鉴定”实验，下列说法正确的是()A．整个提取过程中可以不使用离心机B．研磨液在4 ℃冰箱中放置几分钟后，应充分摇匀再倒入烧杯中C．鉴定过程中DNA双螺旋结构不发生改变D．仅设置一个对照组不能排除二苯胺加热后可能变蓝的干扰答案：A解析：研磨后，可以将研磨液过滤到烧杯中，在4 ℃冰箱中放置几分钟后，再取上清液，可以不使用离心机，A正确，B错误。
鉴定过程中的沸水浴加热可使DNA双螺旋结构发生改变，C错误。
该实验中，为排除二苯胺加热后可能变蓝对实验结果造成干扰，可设置加二苯胺不加DNA的对照组，D错误。
2．[2023·新课标卷]某同学拟用限制酶(酶1、酶2、酶3和酶4)、DNA连接酶为工具，将目的基因(两端含相应限制酶的识别序列和切割位点)和质粒进行切割、连接，以构建重组表达载体。
限制酶的切割位点如图所示。
下列重组表达载体构建方案合理且效率最高的是()A．质粒和目的基因都用酶3切割，用E.coli DNA连接酶连接B．质粒用酶3切割、目的基因用酶1切割，用T4 DNA连接酶连接C．质粒和目的基因都用酶1和酶2切割，用T4 DNA连接酶连接D．质粒和目的基因都用酶2和酶4切割，用E.coli DNA连接酶连接答案：C解析：只用一种限制酶切割质粒和目的基因，会使质粒和目的基因发生自身环化或者使目的基因在质粒中反向连接，A错误；用酶1切割目的基因，产生的是黏性末端，用酶3切割质粒，产生的是平末端，无法连接，B错误；质粒和目的基因都用酶1和酶2切割后，可使用T4 DNA连接酶连接，使目的基因定向插到质粒中，C正确；酶2和酶4切割后产生的黏性末端相同，易导致目的基因和质粒自身环化或者使目的基因在质粒中反向连接，并且用酶4切割会破坏标记基因，D错误。
3.[2023·浙江6月]某研究小组利用转基因技术，将绿色荧光蛋白基因(GFP)整合到野生型小鼠Gata3基因一端，如图甲所示。
生物选修基因工程试题及答案
生物选修基因工程试题及答案一、选择题1. 基因工程中，常用的运载体不包括以下哪一项？A. 质粒B. 噬菌体C. 病毒D. 染色体答案：D2. 基因枪法是一种用于将外源基因导入植物细胞的方法，它主要利用了什么原理？A. 电穿孔B. 显微注射C. 基因重组D. 粒子轰击答案：D3. 在基因工程中，PCR技术的主要作用是什么？A. 基因测序B. 基因克隆C. 基因扩增D. 基因编辑答案：C二、填空题4. 基因工程中，常用的限制性内切酶能够识别特定的_______序列，并在这些序列的特定位置切割DNA分子。
答案：核苷酸5. 基因工程中，将目的基因插入到运载体中后，需要通过_______技术将重组DNA导入宿主细胞。
答案：转化三、简答题6. 请简述基因工程在医学领域的应用。
答案：基因工程在医学领域的应用主要包括生产重组药物、基因治疗、疾病诊断等。
例如，利用基因工程技术生产胰岛素、干扰素等生物药物；通过基因编辑技术治疗遗传性疾病；利用基因芯片技术进行疾病相关的基因检测。
四、论述题7. 论述基因工程在农业中的应用及其潜在的伦理问题。
答案：基因工程在农业中的应用主要包括转基因作物的培育、抗病抗虫作物的开发、作物品质改良等。
例如，通过基因工程培育出抗虫害的棉花、抗旱的玉米等。
然而，基因工程也引发了一些伦理问题，如转基因作物对环境的影响、对生物多样性的潜在威胁、以及公众对食品安全的担忧等。
结束语：通过本试题，我们对基因工程的基本概念、技术方法及其在不同领域的应用有了更深入的了解。
同时，我们也认识到了基因工程在实际应用中可能遇到的伦理和环境问题，这需要我们在进行基因工程研究和应用时，更加谨慎和负责任。
基因工程测试题(附解析)
基因工程测试题（附解析）一、基础题点练1．(2019·徐州模拟)已知限制性内切酶Xma Ⅰ和Sma Ⅰ的识别序列分别为C CCGGG 和CCC GGG。
有关这两种酶及应用的叙述，错误的是()A．这两种酶作用的底物都是双链DNAB．DNA 中出现这两种酶识别序列的几率不同C．Xma Ⅰ切割DNA 形成的黏性末端是—GGCCD．使用这两种酶时需注意控制反应温度、时间等解析：选B 限制酶作用的底物是双链DNA 分子；这两种限制酶作用的核苷酸序列相同，所以这两种识别序列在DNA 中出现的的几率相同；根据碱基互补配对原则，CCCGGG 的互补链是GGGCCC，并根据Xma Ⅰ的切割位点可知，切割后的黏性末端是—CCGG；温度能影响酶的活性，所以使用酶时需要注意控制反应温度和时间等。
2．如图表示的是三种黏性末端，下列说法正确的是( ) ↓↓A．图中所示黏性末端是由同种限制酶切割形成B．若图甲中的G 碱基处发生突变，限制酶可能无法识别该切割位点C．图中所示黏性末端是限制酶断开氢键形成D．目前常用的运载体有质粒、噬菌体和动植物病毒等几类原核生物GAATTC 解析：选B 产生甲黏性末端的限制酶的识别序列为CTTAAG =====，产生乙黏性末端的限制酶CAATTG CTTAAG 的识别序列为GTTAAC =====，产生丙黏性末端的限制酶的识别序列为GAATTC =====，可见甲、乙、丙黏性末端是由3种限制酶作用产生的；限制酶具有专一性，能够识别双链DNA 分子的某种特定核苷酸序列，如果甲中的G 发生突变，限制酶可能无法识别该切割位点；图中所示黏性末端是限制酶断开磷酸二酯键形成的；质粒是环状DNA 分子，噬菌体和动植物病毒都没有细胞结构，它们都不属于原核生物。
3．下列关于蛋白质工程的叙述，错误的是()A．蛋白质工程的基础是基因工程B．蛋白质工程遵循的原理包括中心法则C．蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作，定向改变分子的结构D．蛋白质工程能产生出自然界中不曾存在过的新型蛋白质分子解析：选C 蛋白质工程是通过基因修饰或基因合成对现有蛋白质进行改造，或合成新的蛋白质，故蛋白质工程的基础是基因工程；蛋白质工程遵循的原理包括中心法则；蛋白质工程是通过改造基因来实现对蛋白质分子的改造的；蛋白质工程能产生出自然界中不曾存在过的新型蛋白质分子。
基因工程试题
基因工程试题一、选择题1. 基因工程是指：A. 通过人工手段改变生物体的基因组成B. 通过自然选择优化生物体的基因C. 通过杂交育种改良植物品种D. 通过辐射诱导生物体基因突变2. 下列关于DNA的限制酶切割，说法正确的是：A. 限制酶具有特异性，只能识别特定的核苷酸序列B. 所有限制酶切割DNA后产生的末端都是平末端C. 限制酶不能在体外进行切割D. 限制酶的活性受温度的影响3. 在基因工程中，常用的转基因方法不包括：A. 微注射法B. 农杆菌介导法C. 基因枪法D. 选择育种法4. 关于PCR技术，以下描述错误的是：A. PCR技术可以用于扩增特定的DNA片段B. PCR技术需要一对特定的引物C. PCR技术只能在活细胞内进行D. PCR技术可以用于基因克隆和DNA指纹分析5. 基因治疗的目的不包括：A. 治疗遗传性疾病B. 增强机体的免疫能力C. 改变生物体的形态特征D. 治疗肿瘤二、填空题1. 基因工程的核心工具酶是__________，它可以切割DNA分子，用于基因的克隆和重组。
2. 在基因工程中，__________是一种常用的将外源基因导入植物细胞的方法。
3. 通过基因工程改造的生物体被称为__________，它们在农业、医学和工业生产等领域有广泛的应用。
4. __________是一种可以用于检测基因表达的实验技术，通过它我们可以了解基因在特定条件下的活性状态。
5. 基因治疗是一种通过将外源基因导入患者体内，以治疗或预防疾病的医疗手段，其治疗的疾病类型主要包括__________和某些遗传性疾病。
三、简答题1. 请简述CRISPR-Cas9系统的原理及其在基因工程中的应用。
2. 基因工程在农业上的应用有哪些？请举例说明。
3. 转基因食品的安全性一直是公众关注的焦点，请阐述转基因食品的潜在风险和目前的管理措施。
四、论述题基因工程技术的发展为人类社会带来了巨大的利益，但同时也引发了伦理和安全方面的争议。
高考生物基因工程试题及答案
高考生物基因工程试题及答案一、选择题1. 下列关于基因工程的叙述，正确的是（）A. 基因工程中目的基因的获取是基因工程的核心步骤B. 基因工程中限制酶只能从原核生物中分离得到C. 基因工程中运载体必须具备限制酶的切割位点D. 基因工程中目的基因的检测与鉴定是基因工程的最后步骤答案：A2. 基因工程中常用的运载体是（）A. 质粒B. 噬菌体C. 动植物病毒D. 以上都是答案：D3. 基因工程中，将目的基因导入植物细胞最常用的方法是（）A. 农杆菌转化法B. 基因枪法C. 脂质体法D. 电穿孔法答案：A4. 基因工程中，用于检测目的基因是否导入受体细胞的方法是（）A. DNA分子杂交技术B. 抗原-抗体杂交技术C. 核酸探针技术D. 以上都是答案：D5. 基因工程中，用于检测目的基因是否转录出了mRNA的方法是（）A. DNA分子杂交技术B. 抗原-抗体杂交技术C. 核酸探针技术D. 以上都是答案：C二、填空题1. 基因工程的基本操作步骤包括____、____、____和____。
答案：目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。
2. 限制酶具有特异性，能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并在特定位点上切割磷酸二酯键，具有这种特性的核苷酸序列被称为____。
答案：限制酶的识别序列。
3. 在基因工程中，常用的运载体有____、____和____等。
答案：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒。
4. 基因工程中，将目的基因导入动物细胞最常用的方法是____。
答案：显微注射技术。
5. 基因工程中，用于检测目的基因是否翻译成蛋白质的方法是____。
答案：抗原-抗体杂交技术。
三、简答题1. 简述基因工程的原理。
答案：基因工程的原理是基因重组，即按照人们的意愿，把一种生物的个别基因复制出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传性状。
2. 简述基因工程在农业上的应用。
基因工程技术考核试卷
3.请阐述基因治疗的基本概念、分类及其在临床应用中的挑战。
4.基因工程在农业领域的应用广泛，请举例说明基因工程技术如何提高作物产量和抗逆性，并讨论其可能带来的生态和食品安全问题。
标准答案
一、单项选择题
1. A
2. B
A.农杆菌转化法
B.显微注射法
C.基因枪法
D.PEG介导转化法
6.下列哪个不是基因工程技术的应用？（）
A.转基因作物
B.基因治疗
C.蛋白质工程
D.景观设计
7.基因工程中，哪种技术可以用于检测目的基因是否成功导入受体细胞？（）
A. PCR
B. Southern blot
C. Northern blot
11. ABCD
12. ABC
13. ABCD
14. ABCD
15. ABCD
16. ABCD
17. ABCD
18. ABCD
19. ABCD
20. ABCD
三、填空题
1.基因转移
2.识别
3. Cas9蛋白
4.病毒载体
5. CHO细胞
6. Northern blot
7.基因打靶
8.连接酶
9. PCR
3. C4Biblioteka A5. B6. D
7. A
8. D
9. C
10. D
11. C
12. D
13. C
14. B
15. C
16. C
17. D
18. B
19. C
20. B
二、多选题
1. ABCD
基因工程测试题及答案
基因工程测试题及答案一、选择题（每题2分，共10分）1. 基因工程中常用的限制酶主要来源于：A. 病毒B. 细菌C. 真菌D. 植物答案：B2. 下列哪项不是基因工程的基本步骤？A. 目的基因的获取B. 目的基因的克隆C. 目的基因的表达D. 目的基因的降解答案：D3. 基因工程中常用的载体不包括：A. 质粒B. 噬菌体C. 人工染色体D. 病毒答案：D4. 基因工程中，用于连接目的基因和载体的酶是：A. 限制酶B. DNA连接酶C. DNA聚合酶D. 反转录酶答案：B5. 基因工程中，用于将重组DNA导入受体细胞的方法不包括：A. 转化B. 转染C. 转导D. 转录答案：D二、填空题（每题2分，共10分）1. 基因工程中，将外源基因导入植物细胞的方法主要有______和______。
答案：农杆菌介导法；基因枪法2. 在基因工程中，______是将目的基因插入到载体DNA分子中的关键步骤。
答案：克隆3. 基因工程中，______是将重组DNA导入受体细胞的常用方法。
答案：转化4. 基因工程中，______是将目的基因表达成蛋白质的步骤。
答案：表达5. 在基因工程中，______是检测目的基因是否成功表达的重要手段。
答案：分子杂交三、简答题（每题5分，共20分）1. 简述基因工程在医学领域的应用。
答案：基因工程在医学领域的应用包括生产重组蛋白药物、基因治疗、疾病诊断、疫苗开发等。
2. 描述基因工程中目的基因的获取方法。
答案：目的基因的获取方法包括从基因文库中筛选、利用PCR技术扩增、人工合成等。
3. 解释基因工程中载体的作用。
答案：载体在基因工程中的作用是携带目的基因进入受体细胞，并在其中复制和表达。
4. 阐述基因工程中转化过程的重要性。
答案：转化过程是将重组DNA导入受体细胞的关键步骤，它决定了目的基因能否在受体细胞中稳定存在和表达。
四、论述题（每题10分，共20分）1. 论述基因工程在农业领域的应用及其可能带来的问题。
小学基因工程试题及答案
小学基因工程试题及答案一、选择题（每题2分，共20分）1. 基因工程中常用的运载体是：A. 质粒B. 病毒C. 线粒体D. 叶绿体答案：A2. 基因工程的基本操作步骤不包括：A. 目的基因的获取B. 目的基因的表达C. 目的基因的复制D. 目的基因的检测和表达产物的鉴定答案：C3. 基因工程中，限制性核酸内切酶的主要作用是：A. 连接目的基因和运载体B. 切割目的基因C. 切割运载体D. 切割DNA分子答案：D4. 基因工程中，用于检测目的基因是否导入受体细胞的方法是：A. DNA分子杂交技术B. 抗原-抗体杂交技术C. 核酸探针技术D. 以上都是答案：D5. 基因工程在农业上的应用不包括：A. 培育抗虫作物B. 培育抗病作物C. 培育抗旱作物D. 培育抗酸雨作物答案：D二、填空题（每空1分，共20分）1. 基因工程是指按照人们的意愿，对生物的基因进行改造，使生物表现出人们所希望的_________。
答案：性状2. 基因工程中，常用的运载体必须具备的条件包括：能在宿主细胞中稳定存在并复制、具有_________位点、具有标记基因等。
答案：限制酶3. 基因工程中，目的基因与运载体结合后，需要通过_________技术将重组DNA导入受体细胞。
答案：转化4. 基因工程在医学上的应用包括：生产_________、生产疫苗、基因治疗等。
答案：干扰素5. 基因工程在环境保护上的应用包括：利用基因工程菌处理污水中的_________，利用基因工程植物处理重金属污染等。
答案：有机物三、简答题（每题10分，共20分）1. 简述基因工程在医药领域的应用。
答案：基因工程在医药领域的应用主要包括生产重组蛋白药物、生产疫苗、基因治疗等。
通过基因工程技术，可以将目的基因导入微生物、动物或植物细胞中，使其表达出所需的药物蛋白或疫苗成分，从而用于疾病的预防和治疗。
2. 阐述基因工程在农业上的主要应用。
答案：基因工程在农业上的主要应用包括：培育抗虫、抗病、抗旱等抗逆性作物，提高作物的产量和品质；通过基因工程改良作物的营养成分，如提高作物中的维生素和蛋白质含量；利用基因工程改良作物的生长周期，使其适应不同的气候和土壤条件。
高中基因工程试题及答案
高中基因工程试题及答案一、选择题1. 下列关于基因工程的描述，错误的是：A. 基因工程是一种在体外对DNA分子进行改造的技术B. 基因工程可以用于生产重组蛋白C. 基因工程可以用于治疗遗传性疾病D. 基因工程不能用于植物的遗传改良答案：D2. 在基因工程中，限制性内切酶的主要作用是：A. 连接目的基因和运载体B. 切割目的基因和运载体C. 提取目的基因D. 将目的基因导入受体细胞答案：B3. 基因工程中常用的运载体不包括：A. 质粒B. 噬菌体C. 动植物病毒D. 细菌答案：D4. 基因工程中，将目的基因导入植物细胞最常用的方法是：A. 显微注射法B. 农杆菌转化法C. 电穿孔法D. 脂质体介导法答案：B5. 基因工程中，检测目的基因是否成功表达的方法不包括：A. 分子杂交技术B. 抗原-抗体杂交技术C. DNA测序D. 基因枪法答案：D二、填空题1. 基因工程的基本操作步骤包括____、____、____、____。
答案：目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。
2. 限制性内切酶具有____性，能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并在特定的切点上切割磷酸二酯键。
答案：特异性3. 在基因工程中，常用的筛选标记基因有____、____等。
答案：抗生素抗性基因、荧光标记基因4. 基因工程中，____是将目的基因导入微生物细胞最常用的方法。
答案：转化5. 基因工程中，____是将目的基因导入植物细胞最常用的方法。
答案：农杆菌介导的转化三、简答题1. 简述基因工程的应用领域。
答案：基因工程的应用领域包括：- 农业：通过基因工程改良作物的抗病、抗虫、抗旱等特性，提高作物产量和品质。
- 医学：利用基因工程技术生产重组蛋白药物，如胰岛素、干扰素等，以及用于基因治疗。
- 工业：利用基因工程生产工业用酶、生物燃料等。
- 环保：利用基因工程处理环境污染，如利用基因工程菌处理污水。
基因工程考试试题
基因工程考试试题基因工程作为现代生物技术的核心领域，对于推动生命科学的发展和解决人类面临的诸多问题具有重要意义。
以下是一套涵盖基因工程多个方面的考试试题，旨在检验您对这一重要学科的理解和掌握程度。
一、选择题（每题 3 分，共 30 分）1、基因工程中常用的限制性内切酶作用于（）A 氢键B 肽键C 磷酸二酯键D 高能磷酸键2、下列哪项不是基因工程中常用的载体（）A 质粒B 噬菌体C 动植物病毒D 细菌核区的 DNA3、有关 PCR 技术的说法，不正确的是（）A PCR 是一项在生物体外复制特定 DNA 片段的核酸合成技术B 延伸过程中需要 DNA 聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸C 利用 PCR 技术获取目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列D PCR 技术中以解开的双链作为模板，在热稳定 DNA 聚合酶的作用下合成新链4、基因工程的操作步骤：①使目的基因与运载体相结合；②将目的基因导入受体细胞；③检测目的基因的表达是否符合特定性状要求；④提取目的基因。
正确的操作顺序是（）A ③②④①B ②④①③C ④①②③D ③④①②5、下列关于基因表达载体构建的相关叙述，不正确的是（）A 需要限制酶和 DNA 连接酶B 启动子位于目的基因的首端，是启动翻译的一段 DNAC 标记基因的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因D 基因表达载体的构建是基因工程的核心6、为了培育抗虫棉，科研人员将苏云金芽孢杆菌的 Bt 毒蛋白基因导入棉花细胞中，该过程采用的生物技术是（）A 杂交育种B 诱变育种C 基因工程D 单倍体育种7、下列不属于目的基因获取方法的是（）A 从基因文库中获取B 利用 PCR 技术扩增C 人工合成目的基因D 直接从生物体细胞内获取8、基因工程中，将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是（）A 农杆菌转化法B 花粉管通道法C 基因枪法D 显微注射法9、蛋白质工程的基本流程正确的是（）①设计预期的蛋白质结构②推测应有的氨基酸序列③找到相对应的脱氧核苷酸序列A ①②③B ③②①C ②①③D ③①②10、下列关于基因工程应用的叙述，正确的是（）A 基因治疗就是把缺陷基因诱变成正常基因B 利用基因工程生产乙肝疫苗时，目的基因来自于乙肝病毒C 运用基因工程技术让牛合成并分泌人类抗体，该技术将导致定向变异D 基因诊断的基本原理是 DNA 分子杂交二、填空题（每题 4 分，共 20 分）1、基因工程的工具酶包括____________和____________。
基因工程试题及答案
《基因工程》一、选择题（每小题1.5分，共15分）1．基因工程的创始人是 ( )。
A A. KornbergB W. GilbertC P. BergD S. Cohen2．关于宿主控制的限制修饰现象的本质，下列描述中只有( )不太恰当。
A 由作用于同一DNA序列的两种酶构成B 这一系统中的核酸酶都是Ⅱ类限制性内切核酸酶C 这一系统中的修饰酶主要是通过甲基化作用对DNA进行修饰D 不同的宿主系统具有不同的限制-修饰系统3．在DNA的3’-5’链上，基因的起始密码子是 ( )A ATG（或GTG）B AGTC TAGD TGA4．II限制性内切核酸酶可以特异性地识别 ( )。
A 双链DNA的特定碱基对B 双链DNA的特定碱基序列C 特定的三联密码D 以上都正确5．末端转移酶是合成酶类，具有( )活性。
A 3’→5’DNA聚合酶B 5’→3’DNA聚合酶C 5’→3’DNA内切酶D 5’→3’DNA外切酶6．下面关于松弛型质粒(relaxed plasmid)性质的描述中，( )是不正确的。
A 质粒的复制只受本身的遗传结构的控制，因而有较多的拷贝数。
B 可以在氯霉素作用下进行扩增。
C 通常带有抗药性标记。
D 同严紧型质粒融合后，杂合质粒优先使用松弛型质粒的复制子。
7．关于cDNA的最正确的说法是( )。
A 同mRNA互补的单链DNAB 同mRNA互补的双链DNAC 以mRNA为模板合成的双链DNAD 以上都正确8．关于T4 DNA Ligase，下列说法中哪一项不正确? ( )A 是最常用的DNA连接酶。
B 不但能连接粘性末端，还能连接齐平末端。
C 不但能连接粘性末端。
D 最适温度37 ℃。
9．下列关于建立cDNA文库的叙述中，( )是错误的?A 从特定组织或细胞中提取DNA或RNAB 用反转录酶合成mRNA的对应单链DNAC 以新合成的单链DNA为模板合成双链DNAD 新合成的双链DNA克隆到载体上，并导入受体细胞10．用下列方法进行重组体的筛选，只有( )说明外源基因进行了表达。
基因工程考试试题题库
基因工程考试试题题库一、选择题1. 基因工程中常用的载体是：A. 质粒B. 噬菌体C. 人工染色体D. 所有以上选项2. 基因枪法是一种：A. 基因克隆技术B. 基因测序技术C. 基因转移技术D. 基因表达技术3. 以下哪个不是基因工程中常用的限制性内切酶？A. EcoRIB. BamHIC. Taq酶D. HindIII4. 基因工程中，目标基因的克隆通常需要以下哪个步骤？A. 基因测序B. 基因表达C. 基因扩增D. 基因编辑5. 转基因生物的安全性问题不包括：A. 环境安全B. 食品安全C. 经济安全D. 社会安全二、填空题1. 基因工程的核心技术是_________，它允许科学家将一个生物体的基因转移到另一个生物体中。
2. 基因工程中，常用的基因表达载体包括_________、_________等。
3. 基因工程在医学领域的应用包括_________、_________等。
4. 基因工程在农业领域的应用包括_________、_________等。
5. 基因工程中，_________是将目的基因导入受体细胞的关键步骤。
三、简答题1. 简述基因工程的基本操作步骤。
2. 解释什么是转基因生物，并举例说明其在日常生活中的应用。
3. 讨论基因工程在环境保护方面的潜在应用。
四、论述题1. 论述基因工程在提高作物产量和改良作物品质方面的应用及其可能带来的问题。
2. 分析基因工程对生物多样性的影响，并提出相应的管理策略。
五、案例分析题阅读以下关于基因编辑技术CRISPR-Cas9的案例，并回答问题：- 描述CRISPR-Cas9技术的工作原理。
- 讨论CRISPR-Cas9技术在医学研究和治疗中的应用前景。
- 分析CRISPR-Cas9技术可能引发的伦理和社会问题。
请注意，以上内容仅为示例，实际考试试题应根据具体的教学大纲和课程内容进行设计。
基因工程试题库+参考答案
基因工程试题库+参考答案一、单项选择题1. 下列哪项不是基因工程的基本操作步骤？A. 目的基因的获取B. 基因表达载体的构建C. 目的基因的检测与鉴定D. 细胞融合答案：D2. 下列哪种酶在基因工程中用于切割DNA分子？A. 核酸酶B. 限制性内切酶C. 逆转录酶D. 聚合酶答案：B3. 下列哪个过程不是基因表达的过程？A. 转录B. 剪接C. 翻译D. RNA干扰答案：D4. 下列哪种方法不是获取目的基因的方法？A. 基因文库筛选B. PCR扩增C. 化学合成D. 细胞工程答案：D5. 下列哪种技术不是基因工程的应用领域？A. 基因治疗B. 基因农业C. 基因制药D. 心理咨询答案：D二、多项选择题1. 基因工程中的工具酶包括哪些？A. 限制性内切酶B. 连接酶C. 核酸酶D. 逆转录酶答案：AB2. 基因表达载体构建的目的包括哪些？A. 使目的基因在受体细胞中稳定存在B. 使目的基因能够表达和发挥作用C. 使目的基因便于检测和分离D. 提高目的基因的复制速度答案：ABC3. 基因工程在农业方面的应用包括哪些？A. 转基因作物B. 转基因动物C. 生物农药D. 生物肥料答案：ABCD4. 基因治疗的基本原理包括哪些？A. 替换异常基因B. 修复异常基因C. 插入正常基因D. 抑制异常基因表达答案：ACD三、判断题1. 基因工程可以用于治疗遗传病。
答案：正确2. 基因工程中的连接酶是用来连接DNA分子的。
答案：正确3. 基因工程在农业方面的应用主要是通过转基因作物来提高产量和抗病性。
答案：正确4. 目的基因在受体细胞中稳定存在是基因工程的基本操作步骤之一。
答案：正确5. 基因工程可以用于制造生物武器。
答案：错误四、简答题1. 请简要说明基因工程的基本操作步骤。
答案：基因工程的基本操作步骤包括目的基因的获取、基因表达载体的构建、目的基因的检测与鉴定、目的基因的转移与表达。
2. 请简要说明基因表达载体的构建目的。
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华中农业大学本科课程考试评分标准考试课程与试卷类型：基因操作原理姓名：学年学期：学号：考试时间：班级：一、填空题（每小题2分，共30分）1.PCR技术应用广泛，以下不属于PCR应用的为 ___D_____：(A) 随机扩增多态性DNA(RAPD)； (B) 扩增片段长度多态性(AFLP)； (C) RACE； (D) S1 酶作图。
2.λ噬菌体线性 DNA 分子的两端各有一个____12_____个碱基组成的天然黏性末端。
3.PCR扩增有时会出现弥散的条带，以下原因阐述不正确的是___B______：(A) 退火温度过低； (B) 退火温度过高； (C) dNTP 浓度过高； (D) 循环次数过多。
4.下列哪一种酶作用时需要引物____B_____：(A) 末端转移酶； (B) 反转录酶；(C) DNA连接酶； (D) 限制酶。
5.Cosmid 实际上是由_λ噬菌体__和__质粒_____构成的杂合载体，也可以说是带有__cos__序列的质粒。
6.限制性内切酶的命名主要根据__来源菌株属名第一个字母，种名头两个字母以及菌株号、序号_____来确定，以下各种书写方式中哪种或哪几种是正确的____AC____：(A) Pst I;(B) KpnI； (C) Hin dIII; (D) Hind III; (E) T th111I; (F) Bsp1286I； (G) XbaI7.在分子克隆常用的E.coli菌株中Dam 和Dcm 甲基化酶都是有活性的，它们可在DNA的特定位点作甲基化修饰。
而许多限制性内切酶对甲基化是敏感的，一旦所识别的酶切位点被甲基化就不能切割该位点，如Cla I (AT/CGAT)。
请问Cla I不能切割以下哪个或哪些来自dam+ dcm+ E.coli菌株的DNA序列____C_____。
(A) ATCGATA； (B) ATCGATG；(C) ATCGATC； (D) ATCGATT。
8.限制性内切酶有其特定的识别位点，如Eco RI 的识别位点为 ___GAATTC___；有些限制性内切酶切割DNA后可产生带有相同末端的DNA产物，这些酶称为同尾酶，例如__Bam HI__限制性内切酶与___Sau3AI_________限制性内切酶切割DNA形成的末端相同。
（任举一例都可以）9.在基因操作过程中会使用一些多对人体有害的物质, 操作时应小心谨慎, 常用的有害物质有UV light、DEPC、____EB___和____苯酚____等。
（任举一例都可以）10.根据构建方法的不同，基因文库分为基因组文库、cDNA文库等。
在下列文库中_C_是cDNA文库。
(A) YAC文库； (B) PAC文库； (C) 扣减文库； (D) BAC文库。
11.M13KO7是一种辅助噬菌体，可用它帮助噬菌粒制备单链DNA，这是因为以下原因_B_：(A) M13KO7能够进行滚环复制，得到大量的单链噬菌体DNA； (B) M13KO7能够提供成熟包装的蛋白； (C) M13KO7提供了成熟包装所需的信号； (D) M13KO7的10个基因都是正常的。
12.在制作DNA嵌套缺失突变体时主要有3种方法，其核心技术都使用了一种核酸酶，它们分别是__外切核酸酶III__、__BAL31__和___DNaseI___。
13.在核酸杂交过程中，一般都要先做预杂交，这是为了__B__：(A) 做预备试验，寻找最佳反应条件； (B) 封闭背景； (C) 使杂交信号更强； (D) 减少非特异性杂交信号。
14.在许多克隆载体中都使用了 -互补机制来做筛选标记，也就是俗称的“蓝白菌落”筛选，在应用过程中使用了两种引起颜色变化的试剂，它们是___x-gal__和____IPTG__。
15.在基因操作中有些不同的名称具有相同的缩写，例如RT-PCR, 可以是___实时定量PCR__或___反转录PCR___的缩写。
二、名词解释（每小题3分，共21分）1．Star Activity (in restriction enzymes)星星活性，（1’）极端非标准条件下，限制性内切酶切割与识别序列相似的序列，这个改变的俄特殊性称星星活性。
（2’）2．Northern blottingNorthern 杂交，（1’）即DNA与RNA的杂交，与Northern杂交的不同之处在于转移的是RNA而不是DNA。
（1’）Northern 杂交是转录水平的检测，用于检测样品中是否有与探针同源的mRNA分子。
（1’）3．Shuttle vector穿梭载体，（1’）能够在两类不同的宿主中复制、选择和增殖的载体。
（2’）4．Chromosome Walking染色体步查，（1’）采用一段分离自某一重组体一端的非重复DNA片段作为探针，以鉴定含有相邻序列的重组克隆的方法称染色体步查。
（2’）5．Klenow fragmentKlenow片段，（1’）大肠杆菌DNA聚合酶经枯草杆菌蛋白酶水解的大片段。
（1’）具有5’—3’聚合和3’—5’外切活性。
（1’）6．Universal primer通用引物，（1’）参照载体上多克隆位点两侧的一段固定DNA序列设计的引物，（1’）用于分析插入片段的序列。
（1’）7．Competent cells感受态细胞，（1’）能够吸收外源DNA的细胞称作感受态细胞。
（2’）三、分析简答题（每小题5分，共25分）1. 人类基因组的大小约为3000Mb，测序方法有两种，即图谱测序法和全基因组鸟枪法。
这两种测序结果和分析于2001年分别发表在《Nature》和《Science》杂志上。
在第一种方法中，首先将靶基因组部分酶切产生大分子DNA片段，经电泳分离纯化克隆到BAC载体中。
根据分子标记和指纹图谱构建BAC克隆重叠群，挑选单个克隆采取鸟枪法测序。
在每个BAC克隆内根据测序结果进行顺序拼接，并与BAC克隆重叠群物理图谱对比，完成全部主体顺序的组装(The International Human Genome Sequencing Consortium. Initial sequencing and analysis of the human genome. Nature, 2001, 409: 860~921)。
假如你是测序工作组中的一员，由你负责某个BAC克隆子中约100kb的序列测定，该如何实施？①分离纯化该质粒，构建外源DNA片段大小2-5kb的亚文库。
（1’）②用构建亚文库的载体上的通用引物作大规模末端测序。
（1’）③测序的各reads 拼接，得到contig。
（1’）④借助PCR等手段，填补contig中的gap。
（1’）⑤通过酶切图谱验证测序结果。
（1’）体是常用的一种。
A/T载体也有多种工作方式，下图是pCR2.1-TOPO 载体的核心工作原理示意图。
请说出A/T载体克隆PCR产物的一般原理，以及pCR2.1-TOPO 载体所拥有的特殊工作方式。
①用不具有3’-5’外切活性的高温DNA polymerase（如Taq）作PCR扩增时，其产物3’多一个碱基A。
（1’）②在A/T载体的3’未端各有一个突出的碱基T，用于和A配对，从而克隆Taq polymerase的PCR产物。
（2’）③Topoisomerase第274位的酪氨酸与DNA 5’端磷酸之间形成的磷酸二酯键是不稳定的，容易受到DNA 3’羟基的攻击。
TOPO 载体利用其末端自身携带的Topoisomerase形成磷脂键，不需要外加连接酶。
（2’）3. 从苏云金芽胞杆菌拟步行甲亚种YBT-1765中克隆得到一个质粒pBMB175，选用限制性内切酶Cla I和Xba I对该质粒进行酶切分析，得到以下如表所示的结果。
请根据所得的酶切片段大小，标出Cla I酶切位点在质粒pBMB175上的位置。
Xba限制片段的大小（kb）片段序号ClaⅠ XbaⅠ Cla I+Xba I1 11.0 8.8 7.62 4.2 5.4 3.03 1.0 2.44 1.25 1.0总计15.2 15.2 15.23.0kb 和14.0 kb ，答对一处给2分4．许多限制性内切酶切割DNA 后可产生相同的突出末端，这些产物彼此之间可进行粘端连接。
但在连接产物中相应位置的酶切位点就不存在了。
例如某DNA 片段用Cla I (AT/CGAT)酶切后，可与Acc I (GT/CGAC)切割的载体连接，但在连接点处的Cla I 和Acc I 位点都消失了，相应的序列变成了ATCGAC 。
下图最上面的序列为Cla I/ Acc I 连接处的DNA 序列。
通过这些步骤可在连接点处恢复Cla I 位点，请指出每一步所用的关键酶和底物。
1.Sph I2.Klenow （或T 4 T 7 polymerase ）3.过量dATP4.S1酶（或绿豆核酸酶）5.ligase 每空一分Recovering Cla I--ATCGACAAGCTT----TAGCTGGCC AA----ATCGA TT-- --TAGCT AA----ATCGATT-- --TAGCTAA----ATCGA CCGGCATGCAAGCTT----TAGCT GGCCGTACGTTCGAA----ATCGACCGGCATG CAAGCTT----TAGCTGGCC GTACGTTCGAA--D ( 5 )C ( 4 )B ( 2 ， 3 )A( 1 )5. 用于cDNA 克隆的方法很多,下图是 SMART 技术构建全长cDNA 文库的基本原理流程图。
请叙述其核心步骤。
①polyT 引物合成cDNA 第一链，反转录酶具有末端转移酶活性，自动在产物末端加上几个d （C ）。
（2’）②反转录过程中同时添加了带有3个d （G ）的引物，以该引物合成第一链的互补链，锚定全长cDNA 。
（2’）③引物延伸或长距离PCR 得到双链cDNA 。
（1’）四、问答题 （每小题8分，共24分）1. 通过生物测定，发现一种真菌具有抗某种细菌的抗菌活性。
通过生物化学的方法从该真菌中分离到一个具有抗细菌活性的蛋白质，该蛋白表现出良好的开发成蛋白药物的潜力。
若要在E.coli 或酵母菌中大量表达并制备该抗菌蛋白质，试问如何分离得到该蛋白的编码基因。
①测定该蛋白质的N 未端氨基酸序列（1’）②根据氨基酸序列设计简并引物，用作基因克隆的探针（2’） ③构建真菌的cDNA 文库（2’）④用探针作Southern 杂交，从文库中筛选含该基因的重组子（2’） ⑤重组子的纯化、验证测序（1’）①中如果是制备该蛋白的抗体③构建表达文库，从中筛选则该题亦可给分。
2. 魔芋 (Amorphophallus ) 是单子叶植物纲 (Monocotyledoeae )、泽泻目 (Alismatales )、天南星科 (Areaceae ) 的多年生草本块茎植物。