Cole氏苏木素染色液(常规染色)使用介绍
苏木素染色液配制流程
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苏木染色方法
苏木染色方法苏木染色是一种常用的组织切片染色方法，常用于生物医学领域的组织学研究中。
苏木染色可以清晰地显示细胞核和细胞质，有助于观察细胞结构和组织形态。
下面将介绍苏木染色的方法步骤和注意事项。
1. 材料准备。
苏木染色所需材料包括，苏木精溶液、甲醛固定液、酒精、蜡块、切片、显微镜等。
其中，苏木精溶液和甲醛固定液是必不可少的试剂，其浓度和保存条件需严格控制。
2. 样本处理。
首先，将待染色的组织样本进行固定处理，一般采用甲醛固定液固定组织，固定时间视样本大小而定，一般为6-24小时。
固定后，进行脱水和透明化处理，使组织脱水透明。
3. 切片制备。
将处理后的组织样本进行包埋、切片，制备出5-8μm厚的切片。
切片后，将其放置在温水中，使切片展开并粘附在载玻片上。
4. 染色步骤。
将载玻片放置在苏木精溶液中浸泡，时间一般为5-10分钟，然后取出晾干。
接着，将载玻片放入蜡熔点略高于60℃的热蜡中，使切片蜡块包埋。
包埋后，切片放入苏木精溶液中浸泡，时间一般为2-5分钟。
最后，将切片取出，经过脱水、透明化处理后，封片即可。
5. 注意事项。
在进行苏木染色时，需要注意苏木精的浓度和染色时间，过浓的苏木精会使细胞核染色过深，影响观察效果；染色时间过长也会导致染色过深。
此外，切片的制备过程中要保持刀片锋利，切片厚度均匀，以确保染色效果。
总结。
苏木染色方法是一种简单易行的组织切片染色技术，通过对组织样本的固定、切片和染色处理，可以清晰地显示细胞核和细胞质的结构，为细胞学和组织学研究提供了重要的技术支持。
在实际操作中，需要严格控制各个步骤的条件和时间，才能获得理想的染色效果。
通过本文的介绍，相信大家对苏木染色方法有了更深入的了解，希望能够在实验操作中取得良好的结果。
祝大家实验顺利！。
形态学技能-苏木素-伊红染色
2.二甲苯：①染色前：溶解切片中的石蜡，以使染液可以进入细胞和组织，因此，石蜡的存在妨碍水和染料进入细胞；②染色后：透明切片的作用，以利于光线透过，否则组织切片透明度达不到光学显微镜观察时透光度的要求，在显微镜下看不清细胞和组织结构。
苏木素-伊红（HE）染色操作
【试剂和材料】
已烤片的石蜡切片、二甲苯、无水乙醇、90%乙醇、70%乙醇、Ehrlich苏木素颜色液、0.5%盐酸70%酒精分色液、稀氨水返兰液、1%伊红染色液、中性树胶、自来水、蒸馏水
【耗材和设备】
染缸、盖玻片、玻璃棒、显微镜
【具体步骤】
1.实验准备：按步骤顺序摆放好染缸，准备计时器用主要依靠盐酸在水中容易电离出氢离子，用来改变组织的电荷性质，使过染和吸附在组织表面的染料从组织中及表面脱落下来，从而达到分化的目的。根据盐酸的性质，盐酸在水中电离出的氢离子要比在乙醇中电离出的氢离子多，我们认为传统的盐酸乙醇用于分化乙醇在这里并不起作用，相反，由于乙醇的存在致使切片更易脱落，因为乙醇具有脱水及使组织收缩的作用，分化后水洗时组织又发生吸水、膨胀，而造成脱片。为此，改用盐酸水溶液进行分化，可避免脱片现象的发生。
分化和返兰的作用
1.分化作用：苏木素染色后，用水洗去为结合在切片中染液，但是对细胞核中结合过多的染料和细胞浆中吸附的染料必须用酸性分化液脱去，保证细胞核和细胞浆染色分明。
2.返兰作用：分化之后苏木精在酸性条件下处红色离子状态，呈红色，若在碱性条件下处于蓝色离子状态，呈蓝色，所以在酸性溶液中分化之后用水洗去酸而中止分化，后用弱碱水（稀氨水）使细胞核中苏木素呈蓝色，呈返兰作用。
Scott蓝化液使用说明书
北京索莱宝科技有限公司
Scott蓝化液使用说明书
货号：G1865
规格：500ml
保存：RT避光，12个月
产品说明：
苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合染色简称HE染色，是病理学和组织学最常用的一种染色方法。
苏木素为碱性天然染料，可使细胞核着色。
分化之后，苏木素在酸性条件下处于红色离子状态，呈红色；在碱性条件下处于蓝色离子状态，呈蓝色。
组织切片经酸性乙醇分化后呈红色或粉红色，立即用水除去组织切片上的酸而中止分化，再用弱碱性水使苏木素染上的细胞核呈现蓝色，这个过程称为返蓝作用或蓝化作用。
另外用自来水浸洗也可使细胞核返蓝，但所需时间较长。
Scott蓝化液全称为Scott Tap Water/Bluing，又称Scott促蓝液，主要由硫酸镁、碳酸氢钠等组成，多用于苏木素染色后蓝化，尤其适用于Gill苏木素染色液(Gill No.3)的蓝化。
操作说明(仅供参考)：
1.按实验具体要求操作。
一般蓝化2～60s。
注意事项：
1.切片脱蜡应尽量干净。
系列乙醇应经常更换新液。
2.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
第1页，共1页。
HOCHEST_染色
H o e c h s t染色的讨论H o e c h s t染色的具体步骤caspase8428：我看到资料上说，荧光染色的时候可以用DAB与荧光物质反应生成沉淀。
那么，Hoechst染色时，什么时候加DAB，浓度是多少，用什么稀释，最后怎么来终止反应？是不是还要用抗退色固片介质来封片？sunandsuny：Hoechst染色时无需用DAB来显色，它直接结合细胞的DNA ，经过紫外光激发后发出蓝色荧光。
如果你是用来染培养的细胞的话，可以参考下面的步骤（切片雷同）：细胞涂片：甲醇：冰乙酸（3：1）固定15分钟，PBS洗一次，加Hoechest 33258荧光染料37℃孵育15~30分钟，于荧光显微镜下观察。
凋亡细胞由于染色质固缩，细胞核呈致密浓染，或呈碎块状致密浓染。
操作比较容易的。
altbenair:想做肝癌细胞hepG2。
看过很多帖子还有文献上的方法，但是都不太具体大都是这样：固定（福尔马林4%），pbs洗三遍，加hoechst孵育1H，将细胞悬液滴于载玻片上荧光显微镜检测。
细胞悬液怎么做？我要做贴壁细胞用胰酶消化？drake015: .1．贴壁细胞，让细胞自己在盖玻片上爬片。
操作如下：A. 取普通洁净盖玻片于70%乙醇中浸泡5分钟或更长时间，无菌超净台内吹干或用细胞培养PBS 或0.9%NaCl等溶液洗涤三遍，再用细胞培养液洗涤一遍。
将盖玻片置于六孔板内，种入细胞培养过夜，使约为50%-80%满。
B. 刺激细胞发生凋亡后，吸尽培养液，加入0.5ml固定液，固定10分钟或更长时间（可4℃过夜）。
C. 去固定液，用PBS或0.9%NaCl洗两遍，每次3分钟，吸尽液体。
洗涤时宜用摇床，或手动晃动数次。
D. 加入0.5ml Hoechst 33258染色液，染色5分钟。
也宜用摇床，或手动晃动数次。
E. 用PBS或0.9%NaCl洗两遍，每次3分钟。
F. 滴一滴抗荧光淬灭封片液于载玻片上，盖上贴有细胞的盖玻片，尽量避免气泡。
医院常规苏木素-伊红(HE)染色操作规程
常规苏木素－伊红（HE）染色操作规程染色步骤：1、二甲苯Ⅰ：5－10min2、二甲苯Ⅱ：5－10min3、二甲苯Ⅲ：5－10min4、无水乙醇Ⅰ：1－3min5、无水乙醇Ⅱ：1－3min6、95%乙醇：1－3min7、80%乙醇:：1－3min8、水洗：1min9、苏木素：3－10min10、流水冲洗：1min11、酸乙醇分化：1－3S12、水洗：30S13、40%氨水或温水（40度左右）返蓝1min14、0.5%伊红液染色：1－3min15、水洗：10S16、80%乙醇：10S17、95%乙醇：1－3min18、无水乙醇Ⅰ：1－3min19、无水乙醇Ⅱ：1－3min20、二甲苯Ⅰ：3－5min21、二甲苯Ⅱ：3－5min22、二甲苯Ⅲ：3－5min中性树胶封固（湿封）以上1、2、3中二甲苯的作用：石蜡切片的常规染色必须先用二甲苯脱去切片中的石蜡，其作用是二甲苯可以溶解切片中的石蜡，以使染料易于进入细胞和组织，石蜡的存在妨碍水和染料进入细胞。
以上4、5、6、7中酒精的作用：酒精用于苏木素染色前由高浓度向低浓度逐渐下降处理切片，是为了洗脱用于脱蜡的二甲苯，使水能进入细胞和组织中，因为纯酒精可以中和二甲苯互溶，二甲苯经过二次纯酒精的洗涤，完全被除去，再经过95%、80%酒精使水分逐渐进入切片，以免引起细胞形太结构改变。
此时水洗作用：洗去未与切片结合的染液。
此时分化的作用：苏木素染色之后，用水洗去未结合在切片中的染液，但是在细胞核中结合过多的染料和细胞浆中吸附的染料必须用分化液0.5~1%盐酸酒精脱去，才能保证细胞核和细胞浆染色的分明，把这个过程称为染色的分化作用，因酸能破苏木素的醌型结构，使色素与组织解离，分化不可过度。
此时水洗的作用：为了除去分化液和脱下的染料中止分化作用。
此时水洗的作用：用水洗去未结合的染液，以防止大量伊红染液进入脱水的酒精中。
以上16、17、18、19中酒精的作用：为二甲苯进入细胞创造条件，这时必须彻底脱水，否则二甲苯不能进入细胞组织切片透明度达不到光符显微镜观察时透光度的要求，在显微镜下能显示清晰的细胞和组织结构。
苏木染色方法
苏木染色方法
苏木染色是一种常用的组织学染色方法，适用于对细胞核和胞质进行染色，能够清晰地显示细胞核和细胞器的结构。
本文将介绍苏木染色的方法和步骤，希望能够对您有所帮助。
首先，准备工作。
在进行苏木染色之前，需要准备好所需的试剂和材料，包括苏木精染色液、95%乙醇、脱水醋酸、显微镜玻片、组织切片等。
其次，取组织切片。
将需要染色的组织切片放置在玻片上，确保切片的平整和干燥，以便后续的染色步骤顺利进行。
然后，脱水处理。
将组织切片依次浸泡在70%乙醇、95%乙醇和绝对乙醇中，每次浸泡5分钟，以去除切片中的水分，使得染色效果更加明显。
接着，染色处理。
将脱水后的组织切片放入苏木精染色液中浸泡5-10分钟，然后取出放入脱水醋酸中浸泡1-2分钟，最后用95%乙醇洗涤切片，直至切片表面不再有染色液渗出。
最后，封片。
将染色后的组织切片放入透明胶水中，然后放置
在显微镜玻片上，用玻片压实，使得组织切片与玻片紧密结合，最
后晾干即可进行观察。
需要注意的是，在整个染色过程中，要注意操作的细节和步骤，确保每一个步骤都能够得到严格的执行。
另外，苏木染色后的组织
切片要小心保存，避免受潮或者受到其它污染。
总之，苏木染色是一种简单而有效的组织学染色方法，通过合
理的操作步骤和技巧，可以得到清晰的染色效果，为细胞学研究提
供了重要的帮助。
希望本文所介绍的苏木染色方法能够对您的实验
工作有所帮助。
苏木素染液的配制
苏木素染液的配制1) Harry`s苏木素苏木素 1g无水酒精10ml硫酸铝钾 20g蒸馏水 200ml氧化汞 0.5g冰醋酸 8ml分别用无水酒精溶解苏木素，蒸馏水加热溶解硫酸铝钾，然后两液混合并煮沸，加入氧化汞，继续加热和搅拌至溶液为深紫色，立即冷却，恢复至室温后过滤备用。
(2) 改良Lillie-Mayer`s苏木素苏木素 2.5g无水酒精 20ml硫酸铝钾 5g蒸馏水330ml碘酸钠250mg甘油150ml冰醋酸 10ml分别用无水酒精溶解苏木素，蒸馏水溶解硫酸铝钾，然后两液混合后，依次加入碘酸钠、甘油和冰醋酸。
(3) Mayer`s苏木素苏木素100mg蒸馏水100ml碘酸钠 20mg硫酸铝铵 5g柠檬酸100ml水合氯醛 5g用蒸馏水溶解苏木素后，依次加入碘酸钠、硫酸铝铵和水合氯醛，过滤后备（4）Ehrlich氏苏木素（1886）苏木素1g无水酒精50ml甘油50ml硫酸铝钾 7.5g蒸馏水50ml冰醋酸5ml将苏木素溶于无水酒精里，硫酸铝钾溶于蒸馏水中，然后所有的试剂都加在一起，充分搅拌均匀后，放于窗台上阳光充足的地，让其慢慢氧化成熟，大约需四个星期，才可使用。
该液量种很好的细胞核染色液，用它染后，细胞核染色清晰，不易过染。
对于用酸脱钙组织细胞核的染色，该试剂优于其它各种苏木素。
这种自然氧化成熟的苏木素，可长期使用，不会变质。
但染色时间较长，需要20分钟以上。
如需急用而苏木素又未成熟时，该液可加入20-30mg的碘酸钠，以促使其迅速氧化成熟，但这试剂配成后，就不是原来的苏木素，不能长期使用，但起码可用半年左右。
（5）Weigert氏铁苏木素A液：苏木素 1g无水酒精100ml将苏木素溶于酒精，让其慢慢氧化成熟，约四周以后，便可以使用，或者用成熟的10%的苏木素酒精配制，即时可用。
B液：29%三氯化铁水溶液 4ml蒸馏水95ml盐酸1ml临用时，取A液和B液等份混合，即可使用，在4小时内使用完毕，如果超时，这种试剂便过分氧化而失效。
苏木素染色液说明书
苏木素染色液说明书【产品名称】通用名称：苏木素染色液英文名称：EnVision TM FLEX Hematoxylin (Link)【包装规格】3×45mL【预期用途】用于对组织细胞切片中的细胞核染色。
【主要组成成分】苏木素水溶液【储存条件及有效期】室温下避光保存。
有效期12个月。
【适用仪器】组织染色机（Autostainer Link 48）【检测方法】1.检测步骤1)将抗原修复液按照1：50比例配制好，放置在免疫组化预处理系统（PT Link）中2)运行免疫组化预处理系统（PT Link）至65度，将切片放置在抗原修复液中3)加热至95度，持续20分钟，降温至65度4)将切片取出放置在洗脱缓冲液工作液中，5分钟后，放置在自动染色系统上染色5)过氧化物酶阻断剂5分钟6)洗脱缓冲液工作液冲洗7)一抗20分钟8)洗脱缓冲液工作液冲洗9)二抗20分钟10)洗脱缓冲液工作液冲洗11)DAB显色10分钟12)自来水冲洗13)苏木素染色液复染5分钟14)自来水冲洗15)70%酒精，80%酒精，90%酒精，100%酒精，100%酒精各2分钟16)二甲苯透明5分钟17)二甲苯透明5分钟18)封片2.质量控制程序1) 每次染色过程中都应当同时对一份已知的阳性对照标本进行染色，以确定染色时所使用的全部试剂是否有效。
若阳性对照标本没有出现阳性染色结果，此次检测样本的标记过程应当视为无效。
2) 应当同时采用阴性对照试剂对每份标本进行染色，以排除发生非特异性染色的可能性。
如果不能明确区分非特异性染色和特异性染色，此次检测样本的标记过程应当视为无效。
更多信息及使用说明请参见DAB染色液试剂盒（代码K8002）使用说明书和Dako自动染色系统（Autostainer Link 48）仪器操作手册。
【检测结果的解释】含有DAB的底物缓冲液可以在一抗所识别的目标抗原部位产生褐色。
阳性对照样本应当在其目标抗原的预期部位出现褐色。
(仅供参考)苏木素伊红染色液说明书
苏木素-伊红染色液（H-E）说明书【产品名称】苏木素-伊红染色液（H-E）H&E Staining System【产品编号】HE-500ml,HE-1000ml,HE-2500ml【包装规格】苏木素染色液500ml、1000ml2500ml；伊红染色液500ml、1000ml 2500ml；返蓝染色液500ml、1000ml2500ml。
【预期用途】主要用于对细胞组织进行染色。
【检验原理】苏木素-伊红染色液（H-E）由3部分组成：苏木素染色液、伊红染色液和返蓝染色液。
苏木素氧化后与金属媒染剂作用，可形成不可替代的细胞核颜料。
带有正电荷的苏木素-金属媒染剂复合体，易与细胞核内DNA上带负电荷的磷酸基团结合，因而使细胞核染色形成特定的蓝色。
伊红染色液是一种广泛用于组织学染色中与苏木素染色形成对比的染料（HE染色法）。
此染色法可观察到清晰的细胞结构。
样本中细胞核可经苏木素染色呈蓝色，细胞质经伊红染色呈粉红色。
伊红是一种阴离子染料，可将红细胞染成亮红色，同样也可对其他基本的细胞组分（细胞质，胶原及肌纤维）进行染色。
返蓝染色液为组织学染色试剂，可替代水洗，快速使核染色质和核膜显现蓝色。
由于其坚硬度和碱性，水冲洗后改变苏木素染核后的颜色。
使用BioGnost 返蓝染色液，粘附在玻片上的样本不会发生像使用其他返蓝染色液时发生降解。
【主要组成成分】苏木素：乙二醇、苏木素、碘酸钠、硫酸铝；伊红：伊红、乙醇；返蓝染色液：碳酸锂。
【储存条件及有效期】保证产品包装完整的情况下，储存温度在+15°C和+25°C 之间。
保持储存环境干燥，不要放置于寒冷的环境中，不要冷冻产品，避免直接阳光直射。
产品使用效期为2年，具体效期见标签。
【适用仪器】不适用【样本要求】使用合适的设备仪器收集组织样本，并标记清楚，根据操作说明进行实验。
为避免发生错误，染色及诊断过程最好由具相关专业知识的技术人员操作。
根据标准医疗诊断实验室标准镜检诊断。
苏木素染色液产品技术要求
苏木素染色液产品技术要求苏木素染色液是一种常用的染色液产品，广泛应用于纺织、印刷、造纸等行业。
它具有良好的染色效果和稳定的性能，能够满足不同材料的染色需求。
本文将从技术要求的角度，介绍苏木素染色液的相关内容。
一、染色液的成分和配方苏木素染色液的主要成分是苏木素染料和溶剂。
苏木素是一种天然有机染料，具有良好的亲水性和亲纤维性，能够有效地与纤维结合，实现染色效果。
而溶剂则是用于稀释苏木素染料，调整染色液的浓度和粘度。
常用的溶剂包括水、醇类、酮类等。
二、染色液的技术要求1. 良好的染色效果：苏木素染色液应能够均匀地染色纤维，使染色后的颜色鲜艳、均匀且持久。
2. 良好的染色适应性：苏木素染色液应适用于不同类型的纤维材料，如棉、麻、丝、毛等，且能够实现不同色彩的染色效果。
3. 良好的耐久性：苏木素染色液在染色后应具有良好的耐久性，不易褪色或变色，能够经受常规的洗涤和干洗处理。
4. 低毒无害：苏木素染色液应符合环保要求，不含有害物质，对人体和环境无毒无害。
5. 易操作性：苏木素染色液的操作应方便简单，能够快速地染色，且不易滴漏或飞溅。
6. 稳定性：苏木素染色液在储存和使用过程中应具有良好的稳定性，不易分解、变质或沉淀。
三、苏木素染色液的应用范围苏木素染色液广泛应用于纺织、印刷和造纸等行业。
在纺织行业中，苏木素染色液可用于棉、麻、丝、毛等纤维的染色，实现不同颜色和花样的纺织品生产。
在印刷行业中，苏木素染色液可用于印刷油墨的配制，实现高质量的印刷效果。
在造纸行业中，苏木素染色液可用于纸张的染色，使纸张呈现出丰富的色彩和纹理。
四、苏木素染色液的优缺点苏木素染色液具有以下优点：1. 良好的染色效果，能够实现鲜艳、均匀的染色效果。
2. 良好的染色适应性，适用于不同类型的纤维材料和不同色彩的染色需求。
3. 耐久性高，能够经受常规的洗涤和干洗处理。
4. 低毒无害，符合环保要求，对人体和环境无毒无害。
5. 操作简便，便于快速染色。
苏木素染色液英文名称DakoHarrisHematoxylin-Agilent
苏木素染色液说明书【产品名称】通用名称：苏木素染色液英文名称：Dako Harris Hematoxylin【包装规格】1L【预期用途】主要用于对组织细胞切片及涂片中的细胞核染色。
苏木素染色液预期用于给用福尔马林固定并用石蜡包埋的组织切片、冻结切片和细胞制片中的细胞核进行初步染色（蓝色）。
它是供在Dako CoverStainer仪器上使用的即用型试剂。
【主要组成成分】苏木素水溶液。
每瓶当中都含有1000 mL即用型试剂。
当把苏木素染色液加载到Dako CoverStainer仪器上后，应在5天内用掉或在处理完3000张载玻片后更换掉（取决于先发生的情况）。
配套产品代码CS711, Dako Modified Eosin Y代码CS702, Dako Bluing Buffer代码CS703, Dako Mounting Medium或代码CS705, Dako Toluene Free Mounting Medium代码CS704, Dako Cover Glass【储存条件及有效期】15℃～30℃避光保存，有效期12个月。
过了瓶上印刷的有效期后，请勿使用。
如果每天晚上都回收到瓶中，则试剂的机载稳定时间可达5天。
如果将试剂存储在其它任何非规定条件下，则用户须对条件进行验证。
没有显著标志标明本产品的不稳定性。
如果出现实验室的程序实施差异无法解释的不合理染色效果且怀疑是试剂出了问题时，请联系Dako的技术支持部。
生产日期、失效日期：见包装标签。
【适用仪器】在Dako CoverStainer仪器（组织染色机）上使用。
有关仪器及使用说明的更多信息，请参阅Dako CoverStainer仪器的《用户指南》。
【样本要求】石蜡切片：苏木素染色液可用于对用福尔马林固定并用石蜡包埋的组织切片进行初步染色。
冻结切片和细胞制片：苏木素染色液可用于对用丙酮固定的冻结切片或者固定的细胞制片进行初步染色。
【检验方法】苏木素染色液（代码CS709）是一种即用型试剂。
HOCHEST 染色的讨论
Hoechst染色的讨论Hoechst染色的具体步骤caspase8428：我看到资料上说，荧光染色的时候可以用DAB与荧光物质反应生成沉淀。
那么，Hoechst染色时，什么时候加DAB，浓度是多少，用什么稀释，最后怎么来终止反应？是不是还要用抗退色固片介质来封片？sunandsuny：Hoechst染色时无需用DAB来显色，它直接结合细胞的DNA ，经过紫外光激发后发出蓝色荧光。
如果你是用来染培养的细胞的话，可以参考下面的步骤（切片雷同）：细胞涂片：甲醇：冰乙酸（3：1）固定15分钟，PBS洗一次，加Hoechest 33258荧光染料37℃孵育15~30分钟，于荧光显微镜下观察。
凋亡细胞由于染色质固缩，细胞核呈致密浓染，或呈碎块状致密浓染。
操作比较容易的。
altbenair:想做肝癌细胞hepG2。
看过很多帖子还有文献上的方法，但是都不太具体大都是这样：固定（福尔马林4%），pbs洗三遍，加hoechst孵育1H，将细胞悬液滴于载玻片上荧光显微镜检测。
细胞悬液怎么做？我要做贴壁细胞用胰酶消化？drake015: .1．贴壁细胞，让细胞自己在盖玻片上爬片。
操作如下：A. 取普通洁净盖玻片于70%乙醇中浸泡5分钟或更长时间，无菌超净台内吹干或用细胞培养PBS 或0.9%NaCl等溶液洗涤三遍，再用细胞培养液洗涤一遍。
将盖玻片置于六孔板内，种入细胞培养过夜，使约为50%-80%满。
B. 刺激细胞发生凋亡后，吸尽培养液，加入0.5ml固定液，固定10分钟或更长时间（可4℃过夜）。
C. 去固定液，用PBS或0.9%NaCl洗两遍，每次3分钟，吸尽液体。
洗涤时宜用摇床，或手动晃动数次。
D. 加入0.5ml Hoechst 33258染色液，染色5分钟。
也宜用摇床，或手动晃动数次。
E. 用PBS或0.9%NaCl洗两遍，每次3分钟。
F. 滴一滴抗荧光淬灭封片液于载玻片上，盖上贴有细胞的盖玻片，尽量避免气泡。
苏木染色方法
苏木染色方法
苏木染色是一种常用的组织染色方法，主要用于生物医学研究
领域。
它能够使细胞和组织的结构清晰可见，有助于观察和研究细
胞形态、结构和功能。
下面将介绍苏木染色的方法和步骤。
首先，准备工作。
在进行苏木染色之前，需要准备好组织标本、苏木精染液、碱性碘液、脱水、透明和封片所需的试剂和设备。
第二步，固定组织。
将待染色的组织标本进行固定处理，常用
的固定剂有福尔马林、乙醇和醋酸。
第三步，脱水。
将固定后的组织标本经过一系列浓度逐渐增大
的乙醇溶液中脱水，使组织内水分逐渐被乙醇取代。
第四步，透明。
将脱水后的组织标本浸入透明剂中，使其透明
度增加，有利于显微镜观察。
第五步，染色。
将透明后的组织标本浸入苏木精染液中，经过
一定时间后取出，进行脱水、透明和封片处理。
第六步，封片。
将染色好的组织标本放在载玻片上，加入透明剂和封片剂，用封片纸盖好，待封片剂凝固后即可观察。
苏木染色方法简单易行，能够清晰地显示细胞和组织的形态结构，对于生物医学研究具有重要意义。
在进行苏木染色时，需要注意操作规范，避免污染和误操作，以确保实验结果的准确性和可靠性。
总之，苏木染色方法是一种重要的组织染色技术，能够为生物医学研究提供可靠的实验数据。
掌握好苏木染色的方法和步骤，对于开展细胞和组织学研究具有重要的意义。
希望本文介绍的苏木染色方法能够对您有所帮助。
苏木素-伊红染色试剂盒使用说明书
注意：当跳过此步骤时，不使用二甲苯透明，酒精将会保存于组织切片上，导致伊红从切片 上流出。
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杭州昊鑫生物科技股份有限公司
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13 封片：中性树胶封片，自然风干或烤干，显微镜观察。
注意事项 HE 染色是一个对经验要求非常高的染色，上述实验流程中所提供的染色时间都是参考时间， 要根据实验原理，结合具体情况而定。
染色较弱是由于：1）组织切片过薄；2）染色时间不足；3）随后 95%酒精分化过度。 染色过度是由于：1）染液浓度较高（可能是由于过度蒸发）；2）组织切片过厚；3）染色时 间过长；4）随后 95%酒精分化不足。
伊红染色未分化（一种颜色）是由于： 1）固定不彻底； 2）过度染色，a）染色时间过长；b）染液浓度过高。
3
4. 水洗：苏木素染色后，用水洗组织是非常重要的。这一步以及随后的水洗，可将多余的 染料，媒染剂等去除。适当的漂洗可以去除表面金属光泽，金属光泽可阻止苏木素的染色。 注意：跳过此步，将产生不好的结果，例如沉淀的形成，染液的稀释，表面金属光泽的存在。 5. 酸酒精：酸酒精分色剂 3~5sec。在苏木素染色方 注意：如果没有此步骤，组织切片将变为暗紫色。嗜酸结构，例如，胶原，将不会呈现明亮 的粉红色。组织结构之间将很难区分。很难对切片做出正确的判断。 分色过度可能是由于：1)酸浓度过高；2)脱色时间过长等。分色不足是由于：1)酸浓度过低； 2)脱色时间不足；3)在切片上有多余的蛋白或者明胶等。
结果 细胞核染为蓝色；细胞质染为红色。
温馨提示 1. 为了您的自身安全，使用试剂前，请做好防护，如穿实验服，戴手套等。 2. 试剂应保存于阴凉、干燥、通风良好的环境中。
储存温度 避光储存于室温。
包装清单 货号
HCY112A HCY112B
苏木素染色液说明书
苏木素染色液说明书【产品名称】通用名称：苏木素染色液英文名称：EnVision TM FLEX Hematoxylin (Link)【包装规格】3×45mL【预期用途】用于对组织细胞切片中的细胞核染色。
【主要组成成分】苏木素水溶液【储存条件及有效期】室温下避光保存。
有效期12个月。
【适用仪器】组织染色机（Autostainer Link 48）【检测方法】1.检测步骤1)将抗原修复液按照1：50比例配制好，放置在免疫组化预处理系统（PT Link）中2)运行免疫组化预处理系统（PT Link）至65度，将切片放置在抗原修复液中3)加热至95度，持续20分钟，降温至65度4)将切片取出放置在洗脱缓冲液工作液中，5分钟后，放置在自动染色系统上染色5)过氧化物酶阻断剂5分钟6)洗脱缓冲液工作液冲洗7)一抗20分钟8)洗脱缓冲液工作液冲洗9)二抗20分钟10)洗脱缓冲液工作液冲洗11)DAB显色10分钟12)自来水冲洗13)苏木素染色液复染5分钟14)自来水冲洗15)70%酒精，80%酒精，90%酒精，100%酒精，100%酒精各2分钟16)二甲苯透明5分钟17)二甲苯透明5分钟18)封片2.质量控制程序1) 每次染色过程中都应当同时对一份已知的阳性对照标本进行染色，以确定染色时所使用的全部试剂是否有效。
若阳性对照标本没有出现阳性染色结果，此次检测样本的标记过程应当视为无效。
2) 应当同时采用阴性对照试剂对每份标本进行染色，以排除发生非特异性染色的可能性。
如果不能明确区分非特异性染色和特异性染色，此次检测样本的标记过程应当视为无效。
更多信息及使用说明请参见DAB染色液试剂盒（代码K8002）使用说明书和Dako自动染色系统（Autostainer Link 48）仪器操作手册。
【检测结果的解释】含有DAB的底物缓冲液可以在一抗所识别的目标抗原部位产生褐色。
阳性对照样本应当在其目标抗原的预期部位出现褐色。
苏木色素 染色方法 -回复
苏木色素染色方法-回复「苏木色素染色方法」引言：苏木色素染色是一种常用的组织学染色方法，广泛应用于病理学诊断、生物学研究等领域。
本文将逐步介绍苏木色素染色的各个步骤及其原理，帮助读者了解该方法的操作流程和背后的科学原理。
第一步：试样制备苏木色素染色前，我们首先需要准备合适的组织样本。
这些样本可以是切片的组织、细胞涂片或细胞刮片等。
不同的样本类型需要不同的处理方法，以使得染色结果更加清晰、准确。
对于切片的组织，我们需要将其固定在载玻片上。
一般使用福尔马林或乙酸乙酯等成分的固定液进行组织固定，以确保样本的结构和形态被保持和固定。
固定后的组织样本可以进行下一步的处理。
对于细胞涂片或细胞刮片等样本，在制备之前，我们需要将样本放置在适当的培养基中进行培养和生长。
当细胞达到一定密度和生长状态后，可以用福尔马林等方法进行固定。
固定后的细胞样本也可以进行下一步的处理。
第二步：苏木色素染色液的制备苏木色素染色液的制备是苏木染色方法的关键步骤之一。
苏木色素染色液一般由苏木精、碘酒和醇酸液等成分组成。
制备方法如下：1. 取适量的苏木精溶解于染色瓶中，加入适量的碘酒，摇匀。
2. 将醇酸液加入混合液中，继续摇匀。
3. 检查溶液的颜色和透明度，确保染色效果。
第三步：苏木色素染色操作步骤苏木色素染色的具体操作步骤如下：1. 取固定后的样本载玻片，用清水或洗涤液小心洗涤，以除去固定液和其余的杂质。
2. 将载玻片放入苏木色素染色液中，浸泡一定时间。
浸泡时间的长短会根据样本类型和需要染色的结构而有所不同。
一般来说，细胞涂片需要几分钟至十几分钟的染色时间，而组织切片可能需要半小时以上的染色时间。
3. 取出载玻片，用清水轻轻冲洗，以除去多余的染色液。
4. 当载玻片表面没有染色液流出时，可用醇酸液或乙酸染液进行洗涤，以去除背景染色。
5. 冲洗后，将载玻片放入脱水液中，逐渐提高脱水液的浓度，使载玻片中的水分逐渐脱除。
6. 最后，将载玻片用透明介质（如双氧水）覆盖，待介质自然干燥后，观察染色结果。
凯基苏木素说明书
凯基苏木素说明书KeyGEN Haematorylin Assay Reagent Kit说明书修订日期：2019.07.04 Cat number：KGA223Store at RT for for one yearFor Research Use Only（科研专用）一、原理苏木素是一种天然染料，是组胚，病理，泌尿，妇产科及各实验室中最常用的染色剂，主要用于细胞核染色。
带正电荷的碱性染料苏木素与细胞核中带负电荷的酸性物质结合使细胞核染成蓝色。
二、试剂盒组份组份100ml储存温度苏木素染液1瓶RT三、储存条件及有效期本试剂盒应置室温密封保存，有效期一年。
四、操作步骤（一）样本染色前处理石蜡切片：1、脱蜡：常规二甲苯脱蜡，每次10～15分钟，共2缸2次。
2、梯度入水：95%、70%、30%乙醇各2分钟，温水2分钟，如果脱蜡不干净，需再次温水2 分钟。
此时玻片上除样本部分略有水分外，玻片其余部分均应无水珠。
冰冻切片1、回温：将预先制作好的并保存在-20℃冰箱中的冰冻切片取出回温，取以下方法中一种：①、室温放置回温约5～10分钟。
②、可放到37℃孵箱中进行回温。
③、在37℃水浴箱中放置一个小盒子，再将从冰箱中取出的切片放到小盒当中，目的是让冰冻切片回温到37℃。
2、水合：将回温好的切片放入水中浸泡30～60秒左右。
血涂片及骨髓涂片1、推片：取全血3微升左右置载玻片上，将推玻片保持与载玻片30度角，置于血滴正前方，稍往后移与血滴接触，血滴沿推片下缘散开，再匀速沿载玻片平面平稳向前滑动，至血液铺完血膜为止。
2、涂片空气中自然干燥，95%乙醇固定2～3 分钟，水洗约30～60秒。
（二）染色滴加苏木素染液数滴盖满样本，染色3～8分钟，流水冲洗30～60秒。
即可镜检。
一般可保存一年以上。
若想长期保存可进行封片操作。
玻片自然干燥，干后用中性树胶封片。
五、染色结果镜检结果：胞核呈蓝紫色。
六、注意事项染色太浅可复染。
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Cole氏苏木素染色液(常规染色)
产品说明：
苏木素是组织化学和免疫组织化学中最常用的染料之一，可以广泛用于组织切片或培养细胞的染色。
本染色液可以和免疫荧光染色或免疫组化染色等配合使用。
可以在苏木素染色液染色后进行免疫荧光染色或其它染料的染色，也可以在免疫组化染色后再进行苏木素复染。
染色步骤简单，操作时间短。
苏木素染色后细胞核呈现蓝色。
使⽤说明:
1、样品处理
a)对于石蜡切片：二甲苯中脱蜡5-10 分钟。
换用新鲜的二甲苯，再脱蜡5-10 分钟。
无水乙醇5 分钟。
90%
乙醇2 分钟。
70%乙醇 2 分钟，蒸馏水2 分钟，
b)对于冰冻切片：蒸馏水2 分钟，
c)对于培养细胞：用4%多聚甲醛固定10 分钟以上，蒸馏水洗涤2 分钟，换用新鲜的蒸馏水，再洗涤 2 分钟。
2、苏木素（HE）染色对于上述处理好的样品，用苏木素染色5-10 分钟（可以根据染色结果和要求调整时间），用自来水洗去残留的染色液，约10 分钟。
蒸馏水再洗涤一遍(数秒钟)。
3、脱水、透明、封片或进行其它染色
a)脱水、透明、封片：95%乙醇脱水2 分钟，换用新鲜的95%乙醇再脱水2 分钟；二甲苯透明 5 分钟，换用新鲜的二甲苯，再透明 5 分钟，用中性树胶或其它封片剂封片。
显微镜下观察，细胞核呈蓝色。
b)进行其它染色：如果进行免疫荧光染色或荧光染料染色，在苏木素染色后，70％乙醇洗涤2 次，每次 2 分钟。
再用PBS 或生理盐水或TBS 或TBST 等用
于荧光染色的溶液浸泡 5 分钟。
然后就可以进行免疫荧光染色或其它荧光染料的染色了。
注意事项：
1、第一次使用本试剂时建议先取1-2 个样品做预实验。
样品数量很多时，可使用染色架和染色缸，以便于操作。
2、本产品亦可反复使用多次，但染色效果会逐渐降低。
3、染色过程推荐浅染，通常只需能够分辨细胞核即可，颜色过深有可能影响细胞质颜色。
4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
产地：国产
提示：本品仅用于科研实验，不能用作医疗及临床诊断。
保存：室温避光储存，有效期至少12 个月。
关键词：Mayer'苏木素染液(免疫组化)
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