小柴胡片提取工艺的研究

小柴胡片提取工艺的研究

摘要：目的优选小柴胡片提取工艺最佳条件。方法：采用正交实验，以

提取率、柴胡皂苷a含量和干膏收率为指标，进行综合评分，筛选出最佳提取工艺。结果：药材以10倍量水煎煮3次，每次60分钟，为最佳提取条件。

关键词：小柴胡片；正交实验；最佳提取工艺

小柴胡片方出自张仲景《伤寒论》的“小柴胡汤”名方，现收载于国家标准《中国药典》2020年版一部[1]，处方由柴胡445g、姜半夏222g、黄芩167g、党

参167g、甘草167g、生姜167g、大枣167g组成，为临床常用中成药，具有解表

散热，疏肝和胃的作用，全方寒温并用，升降协调，有疏利三焦，通达上下，宣

通内外之功[2]。现代药理研究也显示柴胡、黄芩有显著的抗炎及抗病毒作用，柴

胡[3]中柴胡皂苷a具有抗炎、调节免疫等作用[4]，是小柴胡片治疗外感病，邪犯

少阳证的物质基础。因此，建立本品中柴胡皂苷a的含量测定方法，有助于更好

的控制本品的质量。本文采用正交实验的方法，对小柴胡片提取工艺条件进行考

察研究。

1 仪器与试药

1.1 仪器电热鼓风干燥箱（北京市永光明医疗仪器厂，型号规格101-

4AS）；电子天平CP114（奥豪斯仪器上海有限公司制造）；高效液相色谱仪（包

括四元梯度泵，自动进样器，二极管阵列检测器，柱温箱，型号：UltiMate3000，DIONEX，U.S）；色谱柱C18（4.6mm×250mm，5μm， S/N:0J7U73 ，Kromat Universil）；SK2200HP超声波清洗器（上海科导超声仪器有限公司）；分析天

平（型号AB265-SMETTLER TOLEDO, Switzerland，0.00001g）

1.2 材料乙腈和甲醇均为色谱纯（美国Tedia公司），柴胡皂苷A对照

品（中国药品生物制品检定所，供含量测定用，编号：VIP(AL)0202），乙醇，

纯化水，其他均为分析纯。柴胡、党参、大枣、姜半夏、甘草、黄芩、生姜经云

南中医学院中药鉴定教研室杨竹雅老师鉴定，符合《中国药典》2020年版（一部）的要求。

2 方法与结果

2.1 渗漉工艺研究取处方量1/3的姜半夏、生姜的量，碾磨成粗粉加入70%乙醇浸泡、渗漉，采用单渗漉法做单因素实验。取24h、48h、72h的浸泡时间，乙醇浓度70%，流出速度为慢速：1~3ml/min，溶媒量为药材5倍，收集渗漉液，浓缩至恒重，计算结果为72小时所得浸膏得率5.44%为最大。

2.2 药材吸水率测定取处方1/3的药材量加入10倍药材量水，每隔10

分钟测定一次剩余水量，计算吸水率。其结果为90min达到饱和吸水率为22%。

2.3 水提工艺研究以加水量、煎煮时间、煎煮次数为3因素，选用L9( 33) 正交设计安排试验，将柴胡、党参、大枣、甘草加水浸泡90min后煎煮，待煮沸

后加入黄芩，所得滤液浓缩、干燥。见表1、表2、表3。

2.4 柴胡皂苷a含量测定

2.4.1 照高效液相色谱法（中国药典2020年版一部附录VI D）测定。以

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以水为流动相B，检测波

长为210nm。

2.4.2 对照品溶液的制备取柴胡皂苷A对照品适量，精密称定，加70%乙

醇制成每1ml含40μg的溶液，即得。

2.4.3 供试品溶液的制备取重量差异项下的本品，研细，取约0.3g，精

密称定，置100ml量瓶中，加70%乙醇70ml，超声处理（功率250W，频率50kHz）30分钟，放冷，加70%乙醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.4.4 测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相

色谱仪，测定，即得。

2.5 实验数据

表1 正交实验因素水平表水平因素

加水量（A）（倍）

提取时间

（B）（分）

提取次数（C）

（次）

18301

210602

312903

表2 正交实验设计及结果

实

验编号

影响因素评价指标

水平组合A B C干膏重

（g）

柴胡皂苷a

（mg/g）

1A1

B1C1

830130.20.460

2A1

B2C2

860237.60.720

3A1

B3C3

890339.50.736

4A2

B1C2

10302330.502

5A2

B2C3

1060344.1 1.140

6A2

B3C1

1090128.10.372

7A3

B1C3

1230338.50.632

8A3

B2C1

1260124.70.242

9A3

B3C2

1290237.90.741

I35

.767

33

.900

27.66

7

37.400

II36

.067

35

.467

36.16

7

34.733

II I

33

.700

35

.167

40.70

32.400

极 2. 1.13.03 5.000