03微生物控制菌检查方法薄膜过滤法验证方案

微生物控制菌检查方法(薄膜过滤法)

验证方案

微生物控制菌检查方法(薄膜过滤法) 验证方案

编码：表

一、验证方案的起草与批准

1.验证方案起草

起草人：起草时期：年月日

2.验证小组成员：

3.验证方案审核

4.验证方案批准

批准人：批准日期：

二、验证方案

1.验证目的和原理

1.1验证目的

本实验是关于的微生物控制菌检查试验的验证。验证结果应显示的微生物控制菌试验方法，对检品中可能存在的微生物没有抑制作用，符合验证要求。

1.2原理

按照已建立的药品微生物控制菌检查方法，通过已知菌数试液的对照菌的培训对照，验证其操作方法适合该药品的微生物控制菌的检测的正确性。

2.验证方法步骤

2.1验证前的准备：将所有的平皿和稀释剂都应该严格按照相关的灭菌程序消毒，以确保其对试验的结果没有影响。试验菌应选择相应的阴性对照菌。

2.2验证试验的操作计划：用3个不同批号产品按照微生物控制菌检测方法进行平行试验，通过观测是

否长菌来判断。

2.3试验结果可接受标准：用标准菌株评价方法“”的微生物控制菌检查试验对检品中微生物的抑菌性。试验结果应显示；阴性菌对照组不得检出阴性对照菌，试验组应检出试验菌。

3.试验实施

3.1试验前的准备

3.1.1主要仪器设备：恒温培养箱、生化培养箱、电子天平、高压蒸汽灭菌器、净化工作台。

3.1.2操作环境：操作间应该安装空气除菌过滤层装置。环境洁净度不应低于10000级，局部洁净度为100级（或放置同等级净化工作台）。操作间或净化工作台的洁净空气应该保持对环境形成正压，不低于5pa。

3.1.3试验样品：

批号：批号：批号：

3.1.4培养基：

3.1.5稀释液：PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液

以上经115℃高压蒸汽灭菌30min。

3.1.6验证用微生物名称及其编号

实验菌株的来源：

编号由菌名首字母—传代代数—制备日期组成。

3.1.7器具：无菌薄膜过滤器：（孔径0.45um直径50mm）、无菌培养皿（直径90mm）、无菌移液管（5ml）

4.验证方法

4.1试验菌种的制备和稀释

接种大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌的新鲜培养物至相应的营养肉汤或BL增菌液10ml中,30～35℃培养18～24小时。用无菌0.9%氯化钠溶液将上述培养物进行倍比递增稀释，制成每1ml含菌落数为50～100cfu的菌悬液。

4.2实验方法

A试验组

取1：10供试液10ml加至100ml稀释液中混匀，过滤并用稀释液冲洗滤膜3次，每次100ml，在最后一次冲洗液中加入50~100cfu大肠埃希菌，滤完后，将滤膜取出，接入到100mlBL增菌液中，30～35℃培养18～24小时。

B阴性对照组

采用金黄色葡萄球菌作为阴性对照用菌。方法同试验组。

5.试验结果

5.1验证用微生物的稀释度和接种量

5.2试验组和阴性对照组结果

注：＋为18～24小时有菌生长。

6.结论：

阴性对照菌试验：□检出阴性对照菌，大肠埃希菌18小时生长

用于该样品的控制菌检验。

检验人：复核人：

7.验证结果评价分析

质控部负责各项验证、试验结果记录，验证小组根据验证、试验结果进行评价，起草验证报告，报验证委员会。

验证委员会负责对验证结果进行综合评审，做出验证结论，发放验证证书。对验证结果的评审应包括：

（1）验证试验是否有遗漏；

（2）验证实施过程中对验证方案有无修改，修改原因、依据以及是否经过批准；

（3）验证记录是否完整；

（4）验证试验结果是否符合标准要求，偏差及对偏差的说明是否合理，是否需进一步补充试验。

8.最终审批

验证报告由验证组长审核后，报验证总负责人批准，并签发验证证书。

验证报告

年月日至年月日，验证小组根据批准的微生物控制菌检查方法（薄膜过滤法）验证文件对微生物限度检查法进行了相关的一系列验证工作，达到了预期效果，滋将有关事项说明如下：

1、验证方案在实施过程中未做修改。

2、验证方案各项性能指标在验证中未作变动，误差在允许范围内。

3、验证过程中结果符合规定要求，记录完整属实。

4、验证结果符合设计要求和GMP原则要求，可以投入使用。

5、组分或检验条件改变时须重新验证。

以上情况，请验证委员会审批！

验证小组：

年月日

试验报告审批表