醇法提取荷叶中总黄酮的工艺研究

醇法提取荷叶中总黄酮的工艺研究

采用乙醇提取法对荷叶总黄酮进行提取，通过单因素试验分析，确定最佳的荷叶总黄酮提取工艺。荷叶黄酮醇法提取的最佳工艺是：料液比1：25，提取时间1h，提取温度80℃，乙醇浓度60%，验证试验证明实际提取率为3.82%。

标签：总黄酮；荷叶；乙醇提取法

荷叶为睡莲科植物莲的叶。荷叶中所含的黄酮类化合物，其主要成分是荷叶苷，其次是槲皮素、异槲皮素等常见的黄酮类物质。实验研究表明，黄酮类物质具有很高的生物活性，如抗氧化作用、抑菌作用、降血脂、减肥作用等[1]。本课题以荷叶为研究对象，利用乙醇提取法提取总黄酮，从而增加荷叶的附加值，将为荷叶在食品、药品中的应用提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 实验设备

电热恒温水浴锅、722型分光光度计、鼓风干燥箱、电子天平、粉碎机、旋转蒸发器等。

1.2 试验材料

原料：荷叶（湖北武汉）：新鲜、无污染荷叶，采摘后洗净，用烘箱60℃烘干。主要试剂：芦丁（生化试剂，国药集团化学试剂有限公司）；无水乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠等均为分析纯。

1.3 黄酮测定方法[2]

用NaN02-Al（N03）3-NaOH体系络合化学吸光法测定黄酮。用NaN02-Al （N03）3-NaOH体系络合化学吸光法测定黄酮。准确称取芦丁标准品0.625mg，用体积分数30%乙醇定容于100mL容量瓶中，得质量浓度为0.625mg/mL的标准储备液。分别吸取芦丁标准储备液0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0mL分别置于0、1、2、3、4、5、6号共7支10mL具塞试管中，用体积分数30%乙醇补充至5mL，分别加入0.3mL质量分数10%硝酸铝溶液，混匀，用体积分数30%乙醇标定至刻度线，放置10min后于510nm处，以0号试剂作为空白参比，测定其吸光度值。以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线，见图1所示。

得到回归曲线方程：y=0.5011x+0.0022，R2=0.9997。

式中：y，提取液的吸光度；x，提取液黃酮类物质的浓度，mg/mL。

1.4 荷叶总黄酮单因素试验与分析

称取荷叶，在不同反应条件下，测定总黄酮的提取率，比较选取最佳反应条件。

2 结果与分析

2.1 不同细度对荷叶总黄酮提取率的影响

称取0.2g荷叶，在浸提温度80℃、料液比1：25、乙醇浓度60%、提取时间1h的条件下，分别对不同细度的荷叶测定总黄酮含量。从图2看出，随着细度的提高，荷叶黄酮提取率不断升高。其中，荷叶在60目和80目条件下，黄酮提取率相差不大。综合考虑，选择粉碎60目的荷叶作为提取黄酮的原料。

2.2 不同料液比对荷叶总黄酮提取率的影响

称取荷叶0.2g，在浸提温度80℃、乙醇浓度60%、提取时间1h条件下，分别测定不同料液比的荷叶总黄酮含量。由图3可知，随着料液比的增加，黄酮提取率增加，当料液比超过1：25后，黄酮的提取率增加幅度不大，因此，选择料液比为1：25。

2.3 不同反应时间对荷叶总黄酮提取率的影响

称取荷叶0.2g，在浸提温度80℃、料液比1：25、乙醇浓度60%的条件下，分别测定不同反应时间测定荷叶总黄酮含量。由图4可知，通过反应时间为1h 时，荷叶黄酮提取率最高，因此选择反应时间为1h。

2.4 不同反应温度对荷叶总黄酮提取率的影响

称取荷叶0.2g，在料液比为1：25、乙醇浓度为60%、提取时间为1h的条件下，分别对不同反应温度的荷叶测定总黄酮的提取率。由图5可知，随反应温度的升高，黄酮提取率增加，在反应温度为80℃条件下，荷叶总黄酮提取率最高。

2.5 不同乙醇浓度对荷叶总黄酮提取率的影响

称取荷叶0.2g，在浸提温度80℃、料液比1：25、提取时间1h的条件下，分别测定不同乙醇浓度下的荷叶总黄酮的提取率。由图6可知，在乙醇浓度小于60%时，荷叶黄酮提取率随乙醇浓度的提高而增高，乙醇浓度大于60%时，提取率缓慢降低。因此，选取乙醇浓度60%。

3 结论

采用乙醇提取法对荷叶总黄酮进行提取，通过单因素试验分析，确定最佳的荷叶总黄酮提取工艺。荷叶黄酮醇法提取的最佳工艺是：料液比1：25，提取时

间1h，提取温度80℃，乙醇浓度60%，验证试验证明实际提取率为3.82%。

参考文献

[1]黄开颜，张志国.荷叶研究概况[J].中国药业，2008，17（11）：77-78.

[2]张蕾，乔旭光，占习娟等.超微粉碎对荷叶黄酮类物质醇提工艺的影响[J].食品与发酵工业，2006，32（11）：142-145.

[3]郭辉，罗宇倩，章华伟等.响应面法优化超声波辅助提取荷叶黄酮工艺研究[J].中国食品学报，2011，11（1）：119-125。

作者简介：何莉萍（1983-），女，汉族，硕士。