应用蒸发光散射检测器的含量计算1

高效液相色谱-蒸发光散射检测器法测定氟比洛芬酯注射液中大豆油含量

高效液相色谱-蒸发光散射检测器法测定氟比洛芬酯注射液中大豆油含量张勉;李超【摘要】目的建立测定氟比洛芬酯注射液中大豆油含量的高效液相色谱-蒸发光散射检测器法.方法以硅胶柱为色谱柱,以正己烷-异丙醇-冰醋酸(99.4∶0.5∶0.1)为流动相,流速为1.0 mL/min;蒸发光散射检测器,漂移管温度为70℃,雾化气压力为35.0 psi,进量为10μL.结果大豆油质量浓度在1.707 ～ 17.072 μg/mL(r =0.998)范围内与峰面积呈良好线性关系,平均加样回收率为100.34％,RSD为1.52％(n=9).结论该法用于测定氟比洛芬酯注射液中大豆油的含量,快速简便,专属性好,结果准确.【期刊名称】《中国药业》【年(卷),期】2014(023)007【总页数】2页(P26-27)【关键词】高效液相色谱-蒸发光检测器;氟比洛芬酯注射液;大豆油【作者】张勉;李超【作者单位】重庆市食品药品检验所,重庆 401121;重庆市食品药品检验所,重庆401121【正文语种】中文【中图分类】R927.2;R971+.1氟比洛芬酯注射液是以脂微球为药物载体的非甾体类镇痛剂。

药物进入体内靶向分布到创伤及肿瘤部位后，氟比洛芬酯从脂微球中释放出来，在羧基酯酶作用下迅速水解生成氟比洛芬，通过氟比洛芬抑制前列腺素的合成而发挥镇痛作用。

大豆油是制备乳剂的重要原辅料，其含量直接影响乳剂的成型质量，在氟比洛芬酯注射液中大豆油作为氟比洛芬酯的载体，有利于氟比洛芬酯达到靶向部位，更好地吸收。

但由于大豆油为长链甘油三酸酯，紫外特征不强，常规的紫外检测器无法完成对其的测定。

国内仅有一个厂家生产该品种，现行质量标准[1]中未对大豆油进行含量控制。

笔者采用高效液相色谱法分离，利用蒸发光散射检测器测定氟比洛芬酯注射液中大豆油的含量，有效地解决了大豆油在该注射剂中的检测问题，方法准确，操作简便。

1 仪器与试药Waters e2695型高效液相色谱仪。

应用蒸发光散射检测器的含量计算

应用蒸发光散射检测器的含量计算1.检测器响应和定量分析响应是随着散射范围的变化而变化，我们假设样品的范围很大，测得的峰面积与样品的质量有如下关系：A=am b（1）a、b是相关系数，它们与液滴大小、溶质浓度、溶质自然特征和蒸发温度等有关。

等式1反应出A和m是非线性关系；等式1取对数得到等式2，等式2中㏒A和㏒m是线性关系：㏒A=b㏒m＋㏒a（2）2.标准曲线的计算：例如：称取对照品3.10mg至10ml容量瓶中，定容，其含量为310ug/ml。

进样量5ul，得X1：310ug/ml×5/1000＝1.55×10-6，其得到的面积为Y1=79.50。

进样量10ul，得X2：310ug/ml×10/1000＝3.10×10-6，其得到的面积为Y2=203.61。

将上述对照品的各稀释浓度及其对应的面积，分别取对数列表如下：___∑（mi －m）（Ai－A）∑miAi－m∑Ai回归系数：b=----------------------------------=-----------------------------（1） __ ∑（m i －m ）2∑m i 2－m ∑m i 1.496149－0.340845×4.209170.061474 b=---------------------------------------------=-----------------=1.3567570.2776605－0.340845×0.681690.0453095__截距：a=A －bm （2）a=2.104585－1.356757×0.340845=1.64241设：Y=㏒Y1=194.35A,X=b ㏒m,C=㏒a,得：Y=X+C已知称取供试品0.5330g 至25ml 容量瓶中，加溶剂至刻度，其含量为213.2ug/ml 。

进样量10ul ，得X1：21.32×10/1000＝21320×10-6，其得到的面积为Y1=194.35。

蒸发光散射检测器知识

蒸发光检测器（ELSD）知识汇总一、定义：蒸发光检测器即ELSD检测器，是一种通用检测器，在辅助气体一般是氮气或者是经过净化的压缩空气的作用下，将流动相雾化，形成的液雾（雾珠）通过加热而蒸发，此时溶解在流动相中不易挥发的样品即形成颗粒物，这些颗粒物由辅助气体推动进入光束通道，造成光束散射。

通过测定散射光的强度即可预测样品颗粒的数量，从而测定样品浓度。

二、历史：虽然蒸法光散射检测器(Evaportive light Scattering,ELSD)已经开发生产15年，但是对于许多色谱工作者来说，它仍是一个新产品。

第一台ELSD是由澳大利亚的Union Carbide研究实验室的科学家研制开发的，并在八十年代初转化为商品，八十年代以激光为光源的第二代ELSD面世。

此后，通过不断设计提高了ELSD的操作性能。

现在ELSD越来越多的作为通用型检测器]用于高效液相色谱，超临界色谱（SFC）和逆流色谱中。

三、用途：蒸发光检测器是一种通用型的检测器，可检测挥发性低于流动相的任何样品，而不需要样品含有发色基团。

蒸发光散射检测器灵敏度比示差折光检测器高，对温度变化不敏感，基线稳定，适合与梯度洗脱液相色谱联用。

已被广泛应用于碳水化合物、类脂、脂肪酸和氨基酸药物以及聚合物等的检测。

ELSD用来测定那些不能用紫外检侧器检侧的组分，对HM的检测器是很重要的补充。

但ELSD对有紫外吸收的组分检测灵敏度相对较低．此外，它只适合流动相能完全挥发的色谱条件，若流动相含有难以挥发的缓冲剂时，就不能用ELSD进行检测。

四、优势：1.可检测挥发性低于流动相的任何样品；检测不含发色团的化合物，如：碳水化合物、脂类、聚合物、未衍生脂肪酸和氨基酸、表面活性剂、药物，并在没有标准品和化合物结构参数未知的情况下检测未知化合物。

2.流动相低温雾化和蒸发，对热不稳定和挥发性化合物亦有较高灵敏度；3.广泛的梯度和溶剂兼容性，无溶剂峰干扰；4.辅助载气提高了检测灵敏度，保持检测池内的清洁，避免污染；5.高精度雾化和蒸发温度控制，保证高精度检测；6.可与任何HPLC系统连接。

高效液相色谱—蒸发光散射检测器法测定中药茺蔚子中盐酸水苏碱的含量

高效液相色谱—蒸发光散射检测器法测定中药茺蔚子中盐酸水苏碱的含量目的建立中药茺蔚子中盐酸水苏碱的高效液相色谱-蒸发光散射检测器测定方法。

方法Asahipak NH2P 50 4E色谱柱（4.6 mm × 250 mm），流动相为乙腈-0.2%磷酸溶液（84∶16），体积流量1 mL/min，柱温30℃。

结果盐酸水苏碱在0.487～4.383 μg范围内线性关系良好，r = 0.9999，平均回收率为97.96%，RSD为0.92%。

结论该法灵敏度高，专属性强，可作为中药茺蔚子中盐酸水苏碱的定量测定方法。

[Abstract] Objective To establish HPLC-ELSD determination method of the hydrochloric acid stachydrine in Motherwort Fruit. Methods The separation by HPLC-ELSD was performed on Asahipak NH2P 50 4E column （4.6 mm × 250 mm）with acetonitrile-0.2% phosphoric acid solution （84∶16）as mobile phase，1 mL/min of flow rate and 30℃of column temperature. Results Hydrochloric acid stachydrine at 0.487-4.383 μg had good linear relationship，r = 0.9999，the average recovery was 97.96%，RSD was 0.92%. Conclusion The method is sensitive，specific，it can be used as quantitative determination method of the hydrochloric acid stachydrine in Motherwort Fruit.[Key words] Motherwort Fruit；Hydrochloric acid stachydrine；HPLC-ELSD中藥茺蔚子又名益母草子，为唇形科植物益母草Leonurus japonicus Houtt.的干燥成熟果实。

外标两点法对数方程

外标两点法对数方程是在应用高效液相色谱-蒸发光散射检测器（HPLC-ELSD）进行药物分析时的含量计算方法。

我们用蒸发光散射检测器时，由于散射光的信号为非线性的，根据ELSD的工作原理，进样质量（ug）和ELSD检测响应值（峰面积A）一般不呈现良好的线性。

因为信号相应值与物质质量的对数呈线性关系，如果对进样质量和峰面积分别取常用对数后，两者呈现良好的线性关系，但是它是一条不经过原点的直线，所以在含量测定时必须使用外标两点法，通常称作外标两点法对数方程。

进两个不同量的对照品（ul）, 将进样质量（ug）和对应的峰面积（A）取对数后，由两点确定方程，方法是将两组数值代入对数方程：lgA=KlgC+b，即可求出式中的K和b。

公式为：lgA=KlgC+b，
A：峰面积
K：为公式中参量
C：进样质量（ug）
b：为公式中参量
计算时将样品峰面积（A）代入方程lgA=KlgC+b，计算出IgC后，再取反对数就可以计算出C了。

高效液相色谱_蒸发光散射检测器测定脂肪酸和甘油酯的含量 - 文档网

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各物质色谱峰面积的自然对数与浓度的自然对数呈良好的线性关系,精密度RSD为0.%～2.75%,最低检测限为0.02～0.04μg,回收率测定值为93.2%～104.5%、快速地定量、定性分析各类混合脂肪酸甘油酯和游离脂肪酸,。

关键词:高效液相色谱;; 物,、二甘酯与三甘酯。

单甘酯、二甘酯是天然油脂代谢的中间产物,是一类重要的食品乳化剂[1]。

其中二甘酯除乳化性外,还具有许多独特的物理化学性质和生理作用,已广泛应用于食品、医药、化妆品等工业[2]。

研究表明,1,3-二甘酯被食用后,不像油脂那样在体内积累,因而在食物中添加二甘酯取代普通食用油脂,不仅不影响食欲,而且可以抑制体重的增加[3]。

另外,1,3-二甘酯对胆汁酸的分泌有抑制作用,可用于腹泻的预防和治疗[4]。

目前,单甘酯和二甘酯的生产方法主要是化学法和酶法,因此对由不同原料合成的甘油酯进行单甘酯、二甘酯与三甘酯的定量、定性至关重要。

蒸发光散射检测器使用说明书1

UM-3000蒸发光散射检测器使用说明书Unimicro Technologies Inc.4713 First Street, 225, Pleasanton, CA 94566, USATel.: (925)846-8638 Fax: (925)846-3687Web: 上海张江高科技园区松涛路489号C01座上海通微分析技术有限公司电话：(021)50801569 传真：(021)38953636网址：为保证仪器安全使用，请在使用前仔细阅读本说明书。

目录1. 简介 (1)1.1 UM-3000 ELSD检测器介绍 (1)1.2 操作原理 (2)2. 检测器的安装 (3)2．1 必需组件 (3)2．2 拆箱 (4)2．3 检测器的安装位置 (4)2．4 电源要求 (4)2．5 气路连接 (4)2．5．1 气体供应输入连接 (5)2．5．2 气阀的连接 (5)2．5．3 气体出口的连接 (5)2．6 数据线连接 (5)3．日常操作 (5)3．1 安全 (5)3．2 操作注意事项 (6)3．3 开机运行 (6)3．4 关机操作 (7)4. 日常维护和清洁 (7)4．1 日常维护 (7)4．1．1 雾化器维护 (7)4．1．2 激光光源的更换 (8)．2 日常清洁 (8)4．2．1 流通渠道清洁 (8)4．2．2 雾化器清洁 (8)4．2．3 蒸发室清洁 (9)4．2．4 检测室清洁 (9)5. 诊断和故障排除 (9)5．1 检测器故障 (9)5．2 基线噪声大 (10)5．3 系统故障 (12)6. 附录 (13)6．1 仪器规格 (13)6．2 相关配件 (13)6．2 挥发性流动相改性剂 (13)1. 简介1.1 UM-3000 ELSD检测器介绍UM-3000型蒸发光散射检测器（Evaporative Light Scattering Detector）设计用于高效液相色谱系统，分析任何挥发性低于流动相的化合物。

高效液相色谱法蒸发光散射检测器测定酸枣仁中酸枣仁皂苷A及B的含量

高效液相色谱法蒸发光散射检测器测定酸枣仁中酸枣仁皂苷A 及B 的含量李会军李萍(中国药科大学生药学教研室南京 210038)摘要目的:建立酸枣仁中酸枣仁皂苷A 及B 的含量测定方法,为该药材提供质量控制标准。

方法:应用高效液相色谱法-蒸发光散射检测器(HPL C-EL SD),Allspere ODS-2(250mm 4 6mm ,5 m)色谱柱,甲醇-水-冰醋酸(70 30 1)为流动相,测定了酸枣仁中酸枣仁皂苷A 及B 的含量。

结果:分析了11批商品药材。

酸枣仁皂苷A 及B 的平均回收率分别为92 4%(RSD =3 8%)和91 8%(RSD =3 9%)。

结论:方法快速简便,重现性良好,可用于酸枣仁药材的质量控制。

关键词酸枣仁高效液相色谱法蒸发光散射检测器酸枣仁为鼠李科植物酸枣Ziz ip hus j uj uba var sp inosa (Bunge)H u ex H. F.Chou 的干燥成熟种子,具有养心安神的功效,是较为常用的镇静催眠中药。

酸枣仁皂苷A 及B 为其镇静催眠的有效成分之一[1],含量测定方法报道的有一阶导数光谱法[2]及薄层扫描法[3],本文首次采用高效液相色谱法利用蒸发光散射检测器(ELSD)对酸枣仁皂苷A 及B 进行了含量测定研究。

实验结果表明该法灵敏度、稳定性和重现性均能满足要求,是一种检测皂苷类成分的有效方法。

1 仪器与试剂日本岛津LC -10AD 液相色谱仪;法国SEDEX55型蒸发光散射检测器;H S 色谱数据工作站(杭州英谱科技开发有限公司);各地酸枣仁药材样品(见表1)均经作者鉴定;酸枣仁皂苷A 及B 对照品由中国药品生物制品检定所提供,纯度 98 5%;试验用水为上海获特满公司产纯净水;甲醇为淮阴化学试剂厂产色谱纯;其它试剂均为南京化学试剂厂产分析纯。

2 色谱及检测条件色谱柱:Allspere ODS-2(250mm 4 6mm ,5 m );预柱:Pellicular C 18(7 5mm 4 6mm);流动相:甲醇-水-冰醋酸(70 30 1);流速:1mL min-1。

高效液相色谱蒸发光散射检测器

01
02
03
色谱柱选择
根据目标化合物的性质选择合适的色谱柱，如C18、 C8、氨基柱等。
流动相选择
根据目标化合物的极性和溶解度选择合适的流动相，如水、甲醇、乙腈等。
洗脱程序优化
通过调整洗脱程序中的梯度、流速等参数，实现目标化合物的有效分离和检测。
数据采集、处理及分析方法
01
02
03
04
研究生物大分子、细胞和组织的相互作用，揭示生命活动的奥秘。
政策法规影响及市场机遇挑战
1 2 3
政策法规推动
各国政府加强对食品药品安全和环境保护的监管，推动高效液相色谱蒸发光散射检测器的需求增长。
市场机遇
随着全球经济的复苏和科技创新的加速，高效液相色谱蒸发光散射检测器市场将迎来新的发展机遇。
高效液相色谱蒸发光散射检测器
目录
• 引言 • 蒸发光散射检测器结构与工作原理 • 高效液相色谱蒸发光散射检测器实验方法 • 结果讨论与实际应用案例 • 仪器维护与故障排除指南 • 发展趋势与未来展望
01 引言
高效液相色谱技术概述
高效液相色谱（HPLC）是一种广泛应用于化学、生物、医药等领域的分离分析技术。 HPLC基于样品中各组分在固定相和流动相之间的分配系数不同，实现组分的分离。
常见故障类型及诊断方法
压力异常
可能原因包括堵塞、泄漏、气泡等，应检查相应部件并采取相应措施。
灵敏度下降
可能原因包括检测器污染、光源衰减等，应清洗检测器或更换光源。
基线不稳
可能原因包括光源老化、流动相污染等，应更换相应部件或清洗流路。
色谱峰异常
可能原因包括色谱柱老化、样品污染等，应更换色谱柱或重新处理样品。

外标两点法

外标两点法对数方程是在应用高效液相色谱-蒸发光散射检测器（HPLC-ELS D）进行药物分析时的含量计算方法。

大家都知道在用高效液相色谱-蒸发光散射检测器（HPLC-ELSD）的定量用外标两点法对数方程，并且药典也要求如此！比如银杏叶、知母、黄芪、人参、署预、（中药含有皂苷的），化药也有一些。

但对数方程的列法却各不相同，有很多人是3楼的列法：峰面积和进样量同时去对数。

但就药典的文字理解：“对数方程”是指在方程里有一个对数，而同时取对数列出来的方程叫双对数方程。

根据最小二乘法应该是进样量(ug)与峰面积的对数的线性方程。

我们用蒸发光散射检测器时，由于散射光的信号为非线性的，根据ELSd的工作原理，进样质量和ELSD检测响应值（峰面积）一般不呈现良好的线性。

因为信号相应值与物质质量的对数呈线性关系，如果对进样质量和峰面积分别取常用对数后，两者呈现良好的线性关系，但是它是一条不经过原点的直线，所以在含量测定时必须使用外标两点法，通常称作外标两点法对数方程，在中国药典20 00版2002增补本以及2005版、2010版中，凡采用HPLC-ELSD方法进行含量测定时，均有“采用外标两点法对数方程计算含量”一句。

进两个不同浓度的对照品, 将进样量和对应的峰面积取对数后，由两点确定方程，方法是将两组数值代入直线方程：y=Kx+b，即可求出式中的K和b。

再将求出的K和b代入公式：InA=KInC+b ，即可求出对数方程。

公式为：InA=KInC+bA：峰面积K：为公式y=Kx+b中的KC：进样量b：为公式y=Kx+b中的b计算时将样品峰面积（A）代入方程InA=KInC+b，计算出InC后，再取反对数就可以计算出C了．再电子表格计算较为方便．在Excel中进行直线回归，可得出该方程，最后求出带入计算，就OK了！解析外标两点对数方程计算黄芪药材含量方法：照高效液相色谱法，ODS柱，以乙腈-水（32：68）为流动相，流速1ml/min，经蒸发光检测器检测，用外标两点对数方程计算黄芪药材中黄芪甲苷的含量。

蒸发光散射检测器

通用性－物质结构对响应值的贡献
头孢替唑响应因子
变化量
头孢唑林 533632
530865
1
+0.5%
通用性－物质结构对响应值的贡献
• 西林中的五元N、S杂环变为头孢中的六元
环，引起ELSD响应值大幅度增加。

其原因可能涉及原子排布变化，引起分子极性分布和分子体积变化有关，这些因素也可能影响分子的聚集和所形成颗粒的大小。
名称
R1
R2
双键*
西索米星
奈替米星威替米星依替米星
H
-C2H5 -C2H5 -C2H5
H
H -CH3 H

+ + －
CH2NH2 HO HO
O HO O NH2 O NH
O
CH2OH OH NH2 OH NH2 O
OH
HO H
阿米卡星
响应因子一致性－氨基糖苷类
1 硫酸盐 2 阿米卡星 3 西索米星 4 奈替米星 5 依替米星 6 威替米星
2.1通用性－响应值与物质结构
3.E+07 2.E+07
© ¨mv£ ý £ æ » · å Ã
2.E+07 Midecamycin 1.E+07 Rapamycin Cefo 5.E+06 Í ×² ¼ Ã ¹ Ë Ø NaCl 0.E+00 0 5 10 15 20 25 30 35
ï Î Ê Ö Ä µ ø ½ ù Ñ ¿ Á ¨ £ ug© £
• 取对数：
lgI＝blgm＋lgk m：待测组分的粒子质量和 I：待测组分所产生的散射光光强 k,b：常数
2.1通用性－响应值与物质结构

高效液相色谱_蒸发光散射检测器测定脂肪酸和甘油酯的含量

(北京化工大学生命科学与技术学院 ,100029 北京市)
摘要 :建立了一种利用反相高效液相色谱 - 蒸发光散射检测、通过梯度洗脱测定油脂中脂肪酸、单甘酯、二甘酯与三甘酯含量的方法 ,色谱柱是 C18反相柱 ,流动相为乙腈 (0. 05 %醋酸 V/ V) 二氯甲烷 ,流速 1. 0 mL/ min ;蒸发光散射检测器漂移管温度 70 ℃,载气流速 1. 7 L/ min 。各物质色谱峰面积的自然对数与浓度的自然对数呈良好的线性关系 ,精密度 RSD 为 0. 43 %～2. 75 % ,最低检测限为 0. 02～0. 04μg ,回收率测定值为 93. 2 %～104. 5 %。该方法不仅可以准确、快速地定量、定性分析各类混合脂肪酸甘油酯和游离脂肪酸 ,而且还可以分离具有立体异构的单甘酯和二甘酯。
lnA = a + b ln C 式中 : A ———峰积分面积 ;
C ———进样浓度 μ, g/μL 。
表 2 甘油酯和脂肪酸的线性范围和线性方程
组分名称
1 - 棕榈酸甘油酯 1 ,3 - 二油酸甘油酯 1 ,3 - 二棕榈酸 - 2 - 油酸甘油酯三棕榈酸甘油酯棕榈酸
线性方程相关系数
表 4 样品中脂肪酸和甘油酯的含量( %)
组分名称
棕榈油乌桕脂
棕榈油甘油解产物
乌桕脂甘油解产物
2 - 油酸甘油酯
-
-
2. 3
2. 3
1 - 油酸甘油酯
-
-
0. 9
-
1 - 棕榈酸甘油酯
-
-
8. 1
21. 6
油酸
-
-
0. 6
2. 4
棕榈酸
-
-
1. 1

蒸发光散射高效液相色谱法测定黄芪饮片中的黄芪甲苷含量

ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ－ｗａｔｅｒ（３２：６８）ｗａｓａｓｔｈｅｍｏｂｉｌｅｗｉｔｈｔｈｅｌｆｏｗｒａｔｅｏｆ１．０ｍＬ／ｍｉｎ，ｔｈｅｄｒｉｆｔｔｕｂｅｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｗａｓ８０ｏＣ．
Ｔｈｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｌｉｍｉｔｏｆｔｈｅｍｅｔｈｏｄｗａｓ１．５ｇ／ｍＬ．Ｔｈｅｌｉｎｅａｒｒａｎｇｅｗａｓ２－１２ｇ／ｍＬ（ｒ￣＝０．９９９６）．ＴｈｅＲＳＤｏｆｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｒｅｓｕｌｔｓｗａｓ０．６５％６）．Ｔｈｅａｖｅｒａｇｅｒｅｃｏｖｅｒｙｏｆａｓｔｒａｇａｌｏｓｉｄｅ１Ｖｗａｓ９９．６％．Ｔｈｉｓｍｅｔｈｏｄｉｓａｃｃｕｒａｔｅ，
ＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＡｓｔｒａｇａｌｏｓｉｄｅＩＶｉｎＡｓｔｒａｇａｌｕｓＤｅｃｏｃｔｉｏｎＰｉｅｃｅｓｂｙＨＰＬＣ－ＥＬＳＤ
ＸｕｎＱｉｎｉｎｇ，ＨｏｕＱｉａｎｑｉａｎ，ＬｉｕＺｈｉｊｕａｎ，ＸｕＦｅｎｇ，ＺｈａｎｇＷｅｎｓｈｅｎ，ＬｉｕＸｉａ，ＪｉＫｅｊｉａｎ

高效液相色谱-蒸发光散射检测法

高效液相色谱-蒸发光散射检测法高效液相色谱-蒸发光散射检测法同时测定四君子丸中的5种有效成分四君子丸为四君子汤的现代剂型，由党参、白术、茯苓、炙甘草组成，被《中华人民共和国药典》(2005版)收载［1］。

现代药理学研究证明，四君子汤可增强机体的抵抗力，调节机体各方面的功能，对垂体、心血管功能、消化道运动功能和免疫功能有明显的改善作用［2］。

四君子丸含有党参炔苷、茯苓酸、甘草酸、苍术内酯Ⅲ和白术内酯Ⅰ等主要活性成分［3－7］。

对于党参炔苷、茯苓酸、甘草酸、苍术内酯Ⅲ和白术内酯Ⅰ的定量分析方法，已有的文献报道均是对其中的一种或两种成分进行测定［8－14］，尚未见对上述5种活性成分同时测定的报道。

按照药典［1］的规定，对四君子丸的鉴定仅依靠薄层色谱法进行，结果比较粗放。

本文对四君子丸中的上述5种活性成分同时进行了含量测定，可为四君子丸的全面质量控制提供实验依据。

1实验部分1.1仪器与试药LC7000高效液相色谱仪(海能仪器)，包括LC7011输液泵，LC7070蒸发光散射检测器;HanonClatity色谱工作站。

HIQ SIL C18V 色谱柱(250mm× 4.6mm，5μm)。

甲醇(色谱纯)，二次蒸馏水(自制)，冰醋酸(分析纯);党参炔苷、苍术内酯Ⅲ、白术内酯Ⅰ、茯苓酸和甘草酸铵对照品;党参、白术、茯苓、甘草均购于济南漱玉平民药店;用于方法优化的四君子丸样品为自制，每丸平均质量为3.0g，符合中国药典对丸剂的各项规定要求。

测定的四君子丸实际样品分别为5个药品生产厂家的产品。

1.2对照品溶液的制备分别精密称取党参炔苷、茯苓酸、甘草酸、苍术内酯Ⅲ和白术内酯Ⅰ对照品适量，分别配制质量浓度为6. 03，3.78，12.24，3.62，7.80g/L的储备液。

将上述5种储备液各取500μL混合、摇匀，即得含党参炔苷1.21g/L、茯苓酸0.76g/L、甘草酸2.45g/L、苍术内酯Ⅲ0.72g/L和白术内酯Ⅰ1.56g/L的混合对照品储备液。

HPLC-ELSD法测定玉屏风颗粒中甘露醇的含量

HPLC-ELSD法测定玉屏风颗粒中甘露醇的含量目的：建立用液相色谱法联用蒸发光散射检测器（HPLC-ELSD）测定玉屏风颗粒中辅料甘露醇的含量。

方法：采用Prevail Carbohydrate ES 柱（Φ4.6 mm×250 mm，5 μm），流动相为乙腈—水（75∶25），流速1.0 mL·min-1，蒸发光检测器。

结果：线性范围1.509 76～11.323 2 μg，r＝0.999 9；平均回收率为99.3％，RSD＝1.44％（n＝6）。

结论：该法快速、准确、可靠；可作为玉屏风颗粒辅料甘露醇的检查。

标签：液相色谱法联用蒸发光散射检测器；玉屏风颗粒；辅料；甘露醇；含量玉屏风颗粒收载于《中国药典》2010年版一部［1］，由黄芪、防风及炒白术3味药组成，具有益气，固表，止汗之功效。

主要用于表虚不固，自汗恶风，面色晄白，或体虚易感风邪者。

玉屏风颗粒为国家中药保护品种，全国独家生产，生产厂家为广东环球制药股份有限公司。

甘露醇是玉屏风颗粒中的稀释剂，较传统稀释剂有易溶解等优点，但具有对人体肠道的清理和轻微的脱水作用。

为考察其辅料的投料情况，此次试验建立了HPLC-ELSD法测定玉屏风颗粒中辅料甘露醇的含量，为辅料的添加及控制提供了科学依据。

1仪器和试药Agilent1200高效液相色谱仪，带四元泵；瓦里安300蒸发光散射检测器；自动进样器；在线真空脱气机；智能化柱温箱及HP化学工作站；乙腈为HPLC 级，水为超纯水。

甘露醇对照品（中国药品生物制品检定所，含量测定用，批号：111522-200607）。

26批玉屏风颗粒样品均由广东环球制药股份有限公司提供。

2色谱条件色谱柱：Prevail Carbohydrate ES 柱（Φ4.6 mm×250 mm，5 μm）；流动相：乙腈—水（75∶25）；流速：1.0 mL·min-1；柱温：30 ℃；蒸发光检测器，雾化器温度：90 ℃；漂移管温度：60 ℃；气体流速：2.0 L·min-1。

蒸发光散射检测器_ELSD_应用概况

中华中医药学刊蒸发光散射检测器(E LS D )应用概况张悦晗,甄汉深,成　莉(广西中医学院,广西南宁530001) 摘　要:目的:介绍蒸发光散射检测器(E LS D )的仪器构造,特点,工作原理,应用等。

总结其在中药成分分析中的优势和应用情况。

方法:对有关高效液相色谱蒸发光散射检测器法测定中药成分的文章进行综述。

结果:蒸发光散射器在测定没有紫外吸收或仅在紫外末端有吸收的成分上有较大的优势和较广泛的应用。

结论:蒸发光散射检测器在中药成分分析中有广泛的应用前景。

关键词:蒸发光散射检测器;高效液相色谱法;工作原理;应用中图分类号:R284.1 文献标识码:A 文章编号:1673-7717(2007)04-0831-03The App li ca ti o n o f I n tr o duced Evapo ra tive L i gh t -Sca tte ring D e tec t o r (ELSD )ZHANG Yue 2han,Z HE N Han 2shen,CHE NG L i(Guangxi Traditi onal Chinese M edical University,nanning 530001,Guangxi,China ) Ab s trac t:O bjective:I ntr oduced evaporative light -scattering detect or (E LS D )instru ment structure,characteristic,p rinci p le of work,app licati on and s o on .Analyze in Chinese native medicine ingredient analysis superi ority and app lica 2ti on situati on .M ethods:E LS D deter m inati on Chinese native medicine ingredient article t o the related highly effective liq 2uid chr omat ography t o carry on the su mmary .R esu lts:E LS D or only has the abs or p ti on in the deter m inati on not ultravi olet abs or p ti on in the ultravi olet ter m inal on the ingredient t o have the big superi ority and the wides p read app licati on .Conclusion:E LS D have the wides p read app licati on p r os pect in the Chinese native medicine ingredient analysis. Ke y wo rd s:E LS D;HP LC;p rinci p le of work;app licati on 收稿日期:2006-11-13作者简介:张悦晗(1980-),女,江西南昌人,2004级硕士研究生,主要从事药物质量与成分分析的研究。

高效液相色谱-蒸发光散射检测器测定复方黄芪益气口服液中黄芪甲苷的含量

气化温度７０℃，雾化温度５０℃，流速１／ｉ。结果：芪甲苷在２０ｇ１．１ｔ．ｍＬｍｎ２黄．２Ｉ－００ｘ０ｘｇ范围内线性关系良好，０９９ｒ．＝９
４平均回收率９－ＲＤ为０３％。结论：方法简便、：９２％．Ｓ．５该准确，复性好，用于复方黄芪益气口服液的质量控制。重适
ＡｂｔａｔＯｂｅｔｅＴｓｂｉｅｍｔｏｆｅｅｔｇａｔｇｌｓｌｃｓｅｃｎｅｔｎＦｆｎｕｎｑＹｑｏａｌｕｄｓｒｃｊｃｉ：ｏｅｔｌｈｔｅｈｄｏｔｃｉｓａａｕｙｏｉｏｔｎｕａｇＨａｇｉｉｉｒｌｉｉｖａｓｈｄｎｒｇｄｉｑ
关键词高效液相色谱：芪甲苷：方黄芪益气口服液黄复
中图分类号：２９５Ｒ８．
文献标识码：Ａ
文章编号：６１０５（００）３０２ — ３１７ — ２８２１０ — ０９０
ＤｅｅｍｉｔｏｏｔａａｕＧｌｃｓｄＣｏｅｉｔｒｎａｉｎｆＡｓｒｇｌｓｙｏｉｅｎｔｎｔｎＦｕｆｎｇａＨｕｎｇｉａｑＹｉｉＯｒｌＬｉｉＰＬＣ—ＥＶｐ０ａｉｎＬｉｈａｔｒｎｇＤｅｅｔｒｑａｑｕｄｂｙＨａｒｔ０ｇｔＳｃｔｅｉｔｃｏ
ｍｉ．ＲｅｕｔＴｅｌｎｒｒｎｅｏｓｒｇｌｓｇｙｏｉｅｗａ．０￣－１．ｘ，＝．９ａｅａｅｒｃｖｒａ９２，ｎｓｌ：ｈｉｅａｇｆａｔａｕｌｃｓｄｓ２０２ｐｇ００１Ｉｇｒ０９９４；ｖｒｇｅｏｅｙｗｓ９．％ａ

蒸发光散射检测器

蒸发光散射检测器蒸发光散射检测器（evaporative light scattering derector ELSD）是 20 世纪 90年代出现的最新型的通用检测器，但是对于许多色谱工作者来说，它仍是一个新产品。

第一台 ELSD 是由澳大利亚的 Union Carbide研究实验室的科学家研制开发的，并在80 年代初转化为商品，80 年代以激光为光源的第二代 ELSD 面世，通过不断设计提高了ELSD 的操作性。

蒸发光散射检测器的出现为没有紫外吸收的样品的样品组分的检测提供了新的手段。

现在 ELSD 越来越多地作为通用型检测器用于高效液相色谱、超临界色谱逆流色谱中。

一、检测原理蒸发光散射检测器的工作原理如下：样品从色谱柱后流出，进入检测器后，经历了雾化、流动相蒸发和激光束检测三个步骤。

样品色谱柱流出液进入雾化器形成微小液滴，与通人的气体（通常是氮气，有时也用空气）混合均匀，经过加热的漂移管，蒸发除去流动相，样品组分形溶胶，用强光或激光照射气溶胶，产生光散射，用光电二极管检测散射光。

I=кm或 IgI=bIgm+Igк式中 к 和 b 为蒸发室（漂移管）温度、雾化气体压力及流动相性质等实验条件有关的常数二、仪器结构ELSD 一般都是由三部分组成，即雾化器、加热漂移管和光散射池。

如图 1220 所示。

雾化器与分析柱出口直接相连，柱洗脱液进入雾化器针管，在针的未端，洗脱液和充入的气体（通常为氮气）混合形成均匀的微小液滴，可通过调节气体和流动相的流速来调节雾化器产生的液滴的大小。

漂移管的作用在于使气溶胶中的易挥发组分挥发，流动相中的不挥发成分经过漂移管进入光散射池。

在光散池中，样品颗粒散射光源发出的光经检测器检测产生光电信号。

图 1220 ELSD 结构示意图目前，已有多种商品化的蒸发光散射检测器，如 SEDERE 的 SEDEX55/75，Alltech Associates 的 Alltech800/LTA 和 Alltech2000/LTA; Waters 的 Waters2420 ELSD 等，目前，各厂家的ELSD 所采用的光源除 Alltech800/2000 使用 670nm 激光二极管外，其余均使用卤素灯。

L-3530用户操作指南

RIGOL L-3530用户操作指南一、原理简介：L-3530蒸发光散射检测器用于检测高效液相色谱系统（HPLC），凝胶渗透色谱系统（GPC），制备高效液相色谱系统，快速色谱系统或逆流色谱（CCC）系统中的洗脱组分。

当洗脱溶液流速处于100μL/min到5mL/min之间时，L-3530蒸发光散射检测器均可进行检测。

蒸发光散射检测器技术应用非常广泛，可以检测任何非挥发性分析物质。

与其它类型的检测器（如UV 检测器）不同，它不依赖于放射线的吸收，也并不受溶剂吸收特性影响。

因此，可使用具有紫外放射线吸收的溶剂。

由于溶剂会完全蒸发，可执行梯度操作以优化分离效果。

检测器通过前面板上的键盘和数字显示器控制。

此外，也可通过RS-232端口连接外部电脑控制检测器。

输出结果可发送至记录仪，积分仪或数据站。

检测器包含雾化池，蒸发管和检测舱。

运行过程中蒸发管会被加热，以实现溶剂的蒸发。

检测器操作包含三个独立步骤：洗脱溶液雾化，溶剂蒸发和组分检测（见下图）。

雾化指将洗脱溶液转化为细微的气溶胶。

转化后的气溶胶进入蒸发器蒸发溶剂，蒸发形成的雾经光源照射，照射所产生的散射光由光电倍增管进行测量，该过程与样品组分浓度相关。

二、仪器操作：1、开机a) 按下后面板的开关按钮启动检测器；b) 接通气源并打开气体分配阀并将压力设置为3.5bar（51 Psi），压力将在状态界面显示；c) 确保雾化室虹吸溢流管中有足够的液体。

如果需要的话，可通过仪器抽取几毫升的溶剂填入虹吸管；d) 启动流动相，并稳定一段时间，以保证所有的组件都达到平衡，基线保持稳定。

2、参数设置1）通过外部按键设置（适用于非Rigol CWS工作站软件反控）：初始界面：a) 设置最优温度：在上述界面显示模式下连续两次按下按钮可进入温度/增益界面设置温度如果使用的是水性流动相，则初始温度应当设定在60℃，如果使用的是有机流动相(流速为lmL／min)，则初始温度应当设定为40℃。

应用蒸发光散射检测器的含量计算1

应用蒸发光散射检测器的含量计算1.检测器响应和定量分析响应是随着散射范围的变化而变化，我们假设样品的范围很大，测得的峰面积与样品的质量有如下关系：A=am b（1）a、b是相关系数，它们与液滴大小、溶质浓度、溶质自然特征和蒸发温度等有关。

等式1反应出A和m是非线性关系；等式1取对数得到等式2，等式2中㏒A和㏒m是线性关系：㏒A=b㏒m＋㏒a（2）2.标准曲线的计算：例如：称取对照品3.10mg至10ml容量瓶中，定容，其含量为310ug/ml。

进样量5ul，得X1：310ug/ml×5/1000＝1.55×10-6，其得到的面积为Y1=79.50。

进样量10ul，得X2：310ug/ml×10/1000＝3.10×10-6，其得到的面积为Y2=203.61。

将上述对照品的各稀释浓度及其对应的面积，分别取对数列表如下：___∑（m i－m）（A i－A）∑m i A i－m∑A i回归系数：b=----------------------------------=-----------------------------（1）__∑（m i－m）2∑m i2－m∑m i1.496149－0.340845×4.209170.061474b=---------------------------------------------=-----------------=1.3567570.2776605－0.340845×0.681690.0453095__截距：a=A－bm（2）a=2.104585－1.356757×0.340845=1.64241设：Y=㏒Y1=194.35A,X=b㏒m,C=㏒a,得：Y=X+C已知称取供试品0.5330g至25ml容量瓶中，加溶剂至刻度，其含量为213.2ug/ml。

进样量10ul，得X1：21.32×10/1000＝21320×10-6，其得到的面积为Y1=194.35。