25-羟基维生素D测定试剂盒(免疫荧光法)临床评价报告-全血-EDTA-K

体外诊断试剂临床评价报告

产品名称：25-羟基维生素D测定试剂盒（免疫荧光法）

标本类型：全血标本-EDTA K抗凝(参比与考核一致)

方案版本：V1.1

方案日期：2019年08月01日

试验时间：2019年09月至2019年10月

试验地点：*********

产品注册申请人（盖章）：*********有限公司

注册申请联系人：

注册申请联系人电话：QQ22602207

报告版本：V1.1

报告日期：2019年10月18日

保密声明

本报告中所包含的所有信息的所有权归*********有限公司。因此，仅提供给研究者和监督管理部门等相关的医疗机构审阅。在未得到申办者书面批准的情况下，严禁将任何信息告知与本研究无关的第三方。

研究摘要

目的：评价*********有限公司生产的25-羟基维生素D测定试剂盒（免疫荧光法）用于25-羟基维生素D检测时，其诊断检测能力与已上市的同类试剂盒无差异。

方法：本次临床试验采用同步盲法对比试验。

结果：*********医院共检测112例受试者样本，按方案剔除标准共剔除样本0例，其中0例为线性范围外标本，0例为离群值标本，剔除率为0.00%，最终纳入分析112例，其中男性54例，女性58例，平均年龄43.46±27.77岁。

本次临床试验结果的Pearson相关系数接近1，说明两种试剂的相关关系越密切。回归方程的截距（a）的95%CI包括0，斜率（b）接近1，说明两种试剂的一致性比较好。根据说明书中对准确度允许偏差的标准，医学决定水平处偏倚均在允许偏差范围内。

考核试剂与参比试剂检测浓度的差值Bland-Altman散点图显示：两种试剂检测浓度差值为0.0377±1.1505ng/mL（均值±标准差），两种试剂检测浓度差值的均值±1.96SD范围在-2.2173ng/mL到2.2927ng/mL之间。超出置信区间的百分比为：3.57%。

考核试剂与参比试剂检测浓度比值的Bland-Altman散点图显示：两种试剂检测浓度比值为1.0001±0.0264（均值±标准差），两种试剂检测浓度比值的均值±1.96SD范围在0.9483到1.0519之间。超出置信区间的百分比为：0.00%。

经计算，考核试剂定性检测结果参考范围外标本符合率为93.94%（90.18%,96.32%)，参考范围内标本符合率为100.00%（98.43%,100.00%)，总符合率为98.21%（95.63%,99.28%)。进行Kappa一致性分析，Kappa值k=0.9563。对含干扰物质样本的检测，考核试剂和参比试剂检测结果无差异，表明考核试剂和参比试剂的抗干扰性能有较好的一致性。

结论：本中心在本次临床试验共检测112例有效样本，通过对考核试剂和参比试剂检测浓度的Pearson相关系数、回归方程、Bland-Altman图进行分析，显示两种试剂检测全血25-羟基维生素D浓度有良好的一致性。符合率及Kappa 一致性分析显示考核试剂与参比试剂对结果的判断有良好的一致性。

一、基本内容

1.1引言

1.1.1临床试验背景

25-羟基维生素D是维生素D在体内的主要存在形式。维生素D为类固醇衍生物，属于脂溶性维生素。维生素D主要由人体皮肤经紫外线照射后合成。少部分从食物或补品中摄入。维生素D不仅仅影响钙磷代谢，而且具有广泛的生理作用，是维持人体健康、细胞生长和发育的必不可少的物质，与多种疾病密切相关。血液中25-羟基维生素D的高低可以反映人体维生素D的储存水平，并且与维生素D缺乏的临床症状是相关的。

由于25-羟基维生素D是人体内维生素D的主要储存形式，因此，通过检测25-羟基维生素D可以确定总体维生素D的情况。25-羟基维生素D检测的临床应用主要与佝偻病（儿童），骨软化症、绝经后骨质疏松和肾性骨病的诊断、治疗和监测有关。维生素D缺乏还和许多其他的疾病、自身免疫性疾病、糖尿病和抑郁症。测定25-羟基维生素D可应用于：（1）监测骨相关疾病例如佝偻病（儿童）、骨软化症、绝经后骨质疏松症和肾性骨病或非骨相关疾病补充维生素D的效果。（2）诊断维生素D毒性，例如有可逆毒性的患者（高钙血症）。（3）诊断维生素D不充足或者缺乏，有助于确认那些可能通过补充维生素D达到最佳水平从而收益的个体。

目前，临床或实验室对于25-羟基维生素D检测的方法有荧光免疫层析法、胶体金免疫层析法、化学发光法和酶联免疫法等。胶体金免疫层析法检测技术具有技术操作简便、检测快速、便携性强、样品用量少等优点，但其精密度受到一定限制，仅能做定性或半定量的检测。荧光免疫层析法是免疫荧光技术和传统免疫层析技术相结合发展创新的一种定量新型检测技术。该技术在保留胶体金免疫层析技术操作简便、检测快速、便携性强等优点外，还通过荧光示踪增强技术实现了检测结果的定量。

为验证*********有限公司生产的25-羟基维生素D测定试剂盒（免疫荧光法）是否具有临床应用价值，根据《免于进行临床试验的体外诊断试剂临床评价资料基本要求》开展临床评价，以验证产品的临床效果。

1.1.2产品的检验原理、方法

*********有限公司生产的25-羟基维生素D测定试剂盒（免疫荧光法）采用竞争法免疫层析原理研制，检测人全血/血清或血浆中25-羟基维生素D含量。样本中的25-羟基维生素D抗原与荧光乳胶标记的25-羟基维生素D单克隆抗体结合形成抗原-抗体复合物。未与样本中抗原结合的荧光乳胶标记抗体层析至检测区（T），与预包被的的25-羟基维生素D抗原结合，呈现荧光条带。抗原-抗体复合物，及未与检测区（T）包被的抗原反应完全荧光乳胶标记抗体，层析至质控区（C）与预包被的羊抗兔IgG多克隆抗体结合，呈现荧光条带。检测时，丽拓生物科技有限公司干式荧光免疫分析仪检测模块通过发光二极管发射特殊紫外光，当紫外光照射到检测卡T线和C线时，T线和C线位置的荧光乳胶抗原-抗体复合物在紫外光的照射下呈现荧光条带，干式荧光免疫分析仪检测模块的光电二极管将检测到的荧光转化成电信号，测得T/C比值，通过干式荧光免疫分析仪的软件程序和二维码内参数将T/C比值换算为抗原浓度。