中药制剂检测技术第二章 理化鉴定

2.分离度
用于鉴别时，对照品溶液与供试品溶液中相
应的主斑点，应显示两个清晰分离的斑点。用 于限量检查和含量测定时，要求定量峰与相邻 峰之间有较好的分离度，除另有规定外，分离 度应大于1.0。
分离度（R）的计算公式为： R=2(d2-d1)/W1+W2 式中 d1为相邻两峰中后一峰与原点的距离； d2为相邻两峰中前一峰与原点的距离； W1 及W2为相邻两峰各自的峰宽；
二、特点 升华法具有简便、实用等特点，由于升 华性仅为少数中药化学成分所具有且升华 物纯度较高，故该法专属性亦较好。
三、操作方法
大多采用微量升华法，少数使用坩埚法 或蒸发皿法，在此，仅介绍微量升华 。
六味地黄丸中冰片升华物
六味地黄丸中冰片升华物显微镜下观
六味地黄丸中冰片升华物香草醛浓硫酸显色
四、注意事项
（四）皂苷 常用的定性鉴别反应有： ① 泡沫反应 样品水溶液振摇后，产生持久性泡 沫。 ② 醋酐—浓硫酸反应 甾体皂苷呈现污绿色，三 萜皂苷呈现红、红紫色。 ③ 浓硫酸反应 呈现红、红紫色。 ④ 三氯化锑或五氯化锑反应 氯仿液呈紫兰色。 ⑤ 氯仿—浓硫酸反应 氯仿层出现红色或兰色， 并具绿色荧光。 例：地奥心血康胶囊（黄山药和穿山龙薯蓣的 提取物）、养心定悸膏（甘草、红参、麦冬）。
（二）黄酮类化合物 最多使用的检识反应为盐酸—镁粉反应，呈紫 红色。大山楂丸（山楂）、抗骨增生丸（淫羊 藿）、参茸保胎丸（黄芩）等。此外，黄芩提取 物采用二氯氧锆-盐酸显色反应进行检识。 （三）蒽醌类化合物 主要应用碱液反应（Borntrager反应），阳性反 应呈红色，加酸红色褪去呈黄色。例如大黄流浸 膏。来自3.雄黄（主含As2S2）
（1）氯化钡沉淀法（检出硫） As2S2+KClO3+4HNO3
[o]
2K3AsO3+H2SO4+Cl2↑+4NO↑
H2SO4+BaCl2 牙痛一粒丸
BaSO4↓（白）
（2）硫化氢反应（检出砷） 2As2S2+7O2 2As2O3+4SO2↑ As2O3+3H2O 2H3AsO3 2H3AsO3+3H2S As2S3(黄)+6H2O As2S3在盐酸中析出黄色沉淀，并溶于碳酸铵中
二、特点
（一）简便、快速、易普及、具有分离和分析双重功
能，且采用共薄层对照分析法，故专属性亦较强。 （二）系统适用性试验。(05版药典新增) 1.检测灵敏度 2.分离度
3.重复性
1.检测灵敏度 主要用于限量检查.采用供试品溶液和对照品 溶液与稀释若干倍（10倍）的对照品溶液在规 定的色谱条件下，于同一块薄层板上点样、展 开、检视，后者应显示清晰的斑点。
A B
W1 d1
W2
d2
3.重复性 主要用于含量测定.即同一供试品溶液在同一块薄 层板上平行点样的待测成分的峰面积测量值的相对 标准偏差(RSD) 应不大于3.0%；需显色后测量的相 对标准偏差应不大于5.0%。
（三）对照物的设臵
对照物分为对照品（主要为有效成分和特征性成分的 单体）、对照药材和对照提取物三种。 对照物的设臵有四种方式： ①设臵一种或数种对照品 ②设臵对照提取物 ③设臵一种或数种对照药材 ④同时设臵对照品和对照药材 (“ 双对照” ) ，它要求
七、应用实例
1.千柏鼻炎片 6.安胃片
2.小儿清热止咳口服液
3.茴香橘核丸
7.天王补心丹
8.牙痛一粒丸
4.地奥心血康胶囊
5.养阴清肺膏
9.中风回春片
第三节 升华鉴别法
（Sublimation）
一、原理 本法是利用某些成分的升华性，在一定 温度下将其从制剂中升华分离出来，并以 升华物所具有的某些理化性质作为制剂鉴 别的依据。
（七）矿物药
朱砂、石膏、雄黄等为中成药中常见的矿药。 1.朱砂（主含HgS） 主要采用铜片反应。 HgS+2HCl+Cu→CuCl2+Hg（白 △↑）+H2S 天王补心丹等中成药中朱砂的鉴定。 2.石膏、牡蛎、海螵蛸等 此类药物均富含钙盐，主要采用草 酸铵反应 。 CaSO4+(NH4)2C2O4→CaC2O4（白）↓+(NH4)2SO4 CaC2O4溶于盐酸，难溶于醋酸。 CaC2O4+2HCl→CaCl2+H2C2O4 止咳桔红口服液（石膏）、安胃片（海螵蛸）、龙牡壮骨颗 粒（牡蛎、龙骨、乳酸钙、葡萄糖酸钙等）
第二章 中药制剂的鉴别技术
第一节 性状鉴别
一、性状鉴别的内容 颜色、形态、形状、气、味、其他(水试，火试) 二、各种剂型的性状描述
左金丸：
本品为黄褐色的水丸；气特异，味苦、辛。
伤湿止痛膏：本品为淡黄绿色至淡黄色的片状橡胶膏；气芳香。 甘草浸膏： 本品为棕褐色的固体，有微弱的特殊臭气和持久
的特殊甜味；遇热软化，易吸潮。
① 升华时应缓缓加热，温度过高，易使药粉焦化，在载玻片上产 生焦油状物，影响对升华物的观察或检识。温度的控制可通过调整 酒精灯火焰与石棉板的间距来实现。 ② 样品粉末用量一般约0.5g，过少不易产生足够量的升华物。 ③ 可在载玻片上滴加少量水降温，促使升华物凝集析出。
④ 无金属片，可用载玻片代替。
五、应用实例（P58） (一) 万应锭的鉴别 （二）小儿惊风散的鉴别（反应机理） （三）明目地黄丸的鉴别
3.易发生假阳性或假阴性反应
假阳性或假阴性反应克服方法如下：
①对样品进行预处理，除去干扰性成分，富集被检成分。 ②选用专属性较强的检测试剂。 ③必要时做阳性或阴性对照试验加以验证，保证其专属 性和灵敏度。
三、常用的一般化学反应 主要用于制剂中生物碱、黄酮类、蒽醌类、皂 苷、香豆素、萜类以及各种矿物类成分的鉴别 （一）生物碱 1. 碘化铋钾反应 产生红棕色沉淀 2. 碘化汞钾反应 产生类白色沉淀 3. 硅钨酸反应 产生白色沉淀 4. 苦味酸反应 产生黄色结晶性沉淀 需在酸性条件下进行。注意事先排除其它成分 的干扰。少数生物碱不与上述通用沉淀试剂反应， 而具有专属性较强的其它反应。
一、原理
一般化学反应法是利用检测试剂与制剂中的 指标性成分发生化学反应，根据所产生的颜 色、沉淀或气体等现象，来判断某些成分或 某些药味的有无。由此可见，所谓一般化学
反应法即通常所说的显色反应和沉淀反应。
二．特点
1.一般化学反应法具有操作简便，适用性较强 等特点。
2. 其否定功能往往强于肯定功能 , 专属性较差。
五、应用实例（P59）
（一）元胡止痛片 （二）五味麝香丸
（三）热炎宁颗粒
第五节 薄层色谱鉴别法
（Thin Layer Chromatography TLC）
一、原理
基于相同物质在同一的色谱条件下，表现出相同的色谱 行为这一基本规律，在同一块薄层板上点加供试品和对照 物，在相同条件下展开，显色检出色谱斑点后，将所得供 试品与对照物的色谱图进行对比分析，从而对药品进行定 性鉴别。
三、理化鉴别的方法
目前中国药典收载的理化鉴别方法有：一般 化学鉴别法、微量升华法、荧光鉴别法、分光光 度法、薄层色谱法、气相色谱法和高效液相色谱 法等。 其中色谱法尤其是薄层色谱法得到广泛的应 用，这主要是由于色谱法具有分离分析双重功能， 从而大大提高了鉴别工作的灵敏度和专属性，并 成为今后中药制剂鉴别的发展方向。
毛细管法测 定熔点
第二节 显微鉴别
适用于：由药材粉末直接制成的制剂或添加有部 分药材粉末的制剂 显微定性鉴别的特点—复杂 制片方法： 散剂、胶囊剂—直接制片 片剂—刮取或研磨后制片 水丸—研磨后制片 蜜丸—解离组织片
氢氧化钾法 硝铬酸法 氯酸钾法 不加试剂法
麦味地黄丸粉末显微特征图
第二章 中药制剂的理化鉴别 （Physicochemical Identification）
三、操作方法
取中成药的提取液点加于滤纸上或加入蒸发皿中， 臵紫外光灯（ 365nm ）下约 10cm 处观察所产生的荧 光。必要时可在供试品上加酸、碱或其它试剂，再观 察荧光及其变化。
四、注意事项
① 荧光强度较弱，故一般需在暗室中观察荧光。
② 供试液一般用毛细管吸取，少量多次点加在滤纸上，使 斑点集中且具有一定浓度。 ③ 紫外光对人的眼睛和皮肤有损伤，操作者应避免与紫外 光较长时间接触。
药品真实性的检定是药品质量控制的重要内容， 是评价药品质量的重要依据。如果药品缺乏真实性， 则可判定为不合格药品，并以假药论处。
二、理化鉴别的特点 理化鉴别是以制剂药味中的指标性成分（主要为 有效成分或特征性成分）为检测对象，故可以更加
客观深刻地评价药品的真实性。对于液体制剂或其
它不含原料药粉的制剂，理化鉴别则显得为重要。
（五）香豆素、内酯类和酚类 常用的检识反应有： ① 氯亚氨基-2，6-二氯醌-四硼酸钠反应 （Gibbs反应），呈现蓝色。 ② 异羟肟酸铁反应 呈红色。 应用品种有：养阴清肺膏（牡丹皮）、前列 舒丸（牡丹皮）等。
（六）挥发性成分
主要使用香草醛—浓硫酸反应检识此类成分， 正反应呈红、红紫色。应用品种主要有：万应锭 （冰片）、牛黄解毒片（冰片）、养心定悸膏 （桂枝、生姜）等。
三、物理常数--鉴别药物，反映药物的纯净程度
折光率：20℃，用钠光谱的D线(589.3nm)测定供试
品相对于空气的折光率。 区分不同的油类或检查药品的纯杂程度
旋光度和比旋度：20℃，用钠光谱的D线(589.3nm)
测定旋光度，除另有规定外，测定管长度为1dm。 比旋度
α为测得的旋光度
l 为测定管长度dm
d 为液体的相对密度
区分或检查药品的纯杂程度，或测定含量 例：薄荷油
[ ]tD

ld
“折光率 应为1.456-1.466（附录VII F ） 旋光度 取本品，依法测定（附录VII E），旋光度应 为-17°至-24 °”
三、物理常数测定—鉴别药物，反映药物的纯净程度 相对密度 比重瓶法和韦氏比重秤法 熔点 毛细管测定法 凝点