支原体染色试剂盒
支原体 PCR 检测试剂盒使用说明书
支原体 PCR 检测试剂盒使用说明书Product Name: Mycoplasma PCR Detection KitIntended Use:The Mycoplasma PCR Detection Kit is intended for the qualitative detection of Mycoplasma spp. in cell cultures and other biological samples by PCR amplification.Kit Components:- PCR amplification reaction mix and enzyme mix- Positive control DNA template- Negative control DNA template- PCR tubes and caps- User manualStorage:The kit should be stored at -20°C. Thaw the kit components at room temperature before use.Sample Preparation:1. Collect the cell culture sample or other biological sample.2. Extract the DNA from the sample using a DNA extraction kit of your choice.3. Dilute the DNA extract as necessary in molecular grade water or buffer to achieve the optimal concentration for PCR amplification (typically between 10-100 ng/µL).PCR Amplification:1. Prepare the PCR reaction mix (in a sterile tube or plate) by adding the PCR amplification reaction mix, enzyme mix, andtemplate DNA to the appropriate volumes as specified in the table below.Component Volume per Reaction (20 µL)PCR amplification reaction mix 10 µLEnzyme mix 1 µLTemplate DNA 1-5 µLMolecular grade water/buffer To 20 µL2. Close the PCR tubes with the caps provided and mix the contents well by vortexing or pipetting.3. Place the tubes in a thermal cycler and perform PCR amplification according to the following conditions:Initial denaturation: 95°C for 5 minutesDenaturation: 95°C for 30 secondsAnnealing: 55°C for 30 secondsExtension: 72°C for 1 minuteFinal extension: 72°C for 5 minutesHold at 4°C4. Analyze the PCR products by gel electrophoresis or other methods as appropriate.Interpretation of Results:- Positive Result: A distinct band is observed in the gel at the expected size for Mycoplasma spp. This indicates the presence of Mycoplasma DNA in the sample.- Negative Result: No band or only faint bands are observed in thegel. This indicates the absence of Mycoplasma DNA in the sample. - Invalid Result: No bands or smear are observed in the gel or the band size is incorrect. Repeat the experiment with fresh controls and follow the instructions carefully.Limitations:1. This assay is designed for research use only and is not intended for diagnostic purposes.2. False negative results may occur due to low level or degraded Mycoplasma DNA in the sample, PCR inhibitors, or other factors.3. The presence of PCR inhibitors in the DNA extraction and amplification process may affect the sensitivity and reproducibility of the assay.4. The kit components must not be used beyond the expiry date.5. The Mycoplasma PCR Detection Kit may only be used by trained personnel.。
支原体 试剂盒 原理
支原体试剂盒原理
支原体试剂盒是一种用于检测支原体感染的诊断工具。
其基本原理是利用特定的抗原与支原体感染产生的抗体结合,从而实现对支原体的检测。
具体而言,支原体试剂盒中通常包含有特异性的抗体或抗原。
当患者样本中存在支原体时,该抗原与试剂盒中的抗体结合,形成免疫复合物。
这些免疫复合物可以通过染色、荧光或放射性示踪剂等方式来标记。
在进行试剂盒检测时,可将患者样本与试剂盒中的试剂混合,使其中的抗原与抗体结合。
随后,通过特定的读取设备(如酶标仪、荧光分析仪等)对免疫反应后的样本进行测定,测定结果将会显示出是否存在支原体感染。
根据浓度的不同,结果可能会显示出阳性、阴性或弱阳性等。
此外,支原体试剂盒中也可能包含有质控物质,用于确保试剂盒的准确性和可靠性。
一般情况下,试剂盒的说明书中会详细描述样本的采集、操作步骤、结果解读等信息,以帮助医护人员进行正确的使用。
总之,支原体试剂盒利用特异性抗原与抗体之间的结合反应,通过检测免疫复合物的形成或生物学指标的变化来判断是否存在支原体感染。
这种诊断工具具有操作简便、结果快速的特点,因此在临床诊断中得到了广泛应用。
支原体试检测剂盒使用说明书(中文版)
支原体检测试剂盒使用说明书1.试剂:支原体检测试剂盒由武汉源深生物科技有限公司提供。
2.实验方法:巢式PCR的方法检测支原体污染:A.待检细胞汇合率在90%以上时取100 µL细胞上清液到离心管内B.95o C孵育5分钟C.短暂高速离心15秒钟左右D.试剂盒里的组份:引物混合物(Primer Mix) 20 µL阳性对照DNA (Positive Control DNA) 15 µL阴性对照(Internal Control DNA) 20 µL巢式PCR一共需要做2轮PCR,本检测方法不受其他来源(如所培养细胞)DNA的影响,不但提高了检测的灵敏度,同时也提高了特异性。
(1)第一轮PCR:PCR 混合物:向0.2 mL PCR薄壁管中依次加入以下组分,盖紧管盖,轻弹管壁混匀,稍加离心。
E.热循环程序:将准备好的PCR管放入PCR仪,运行如下程序。
PCR 混合物:向0.2 mL PCR薄壁管中依次加入以下组分,盖紧管盖,轻弹管壁混匀,稍加离心。
F. 热循环程序:将准备好的PCR 管放入PCR 仪,运行如下程序。
试验结果:2% 琼脂糖凝胶电泳,TBE 缓冲液,PCR 产物及Marker 均点样10µL ,于50V 下电泳1hr ,EB 染色15min ,紫外灯下观察。
电泳结果见下图:图中泳道M 为DNA Marker ,1和2为待检测细胞系的第一轮PCR 产物 (1st ),3和4为待检测细胞系的第二轮PCR 产物 (2nd ), 其中1、3为阳性对照管PCR 产物,2、4为阴性对照PCR 产物。
阳性对照管在200bp 左右,和300-400 bp 处各有一条带,证明本次实验准确可靠 (不同的支原体Mycoplasma, such as M. fermentans, M. hyorhinis, M. arginini, M. orale, M. hominis, M. arthritidis, M. hyopneumoniae and Acholeplasma laidlawii 的保守区的片段长度不一,大概在200-400 bp 之间)。
肺炎支原体测试试剂盒使用
肺炎支原体测试试剂盒使用肺炎支原体是一种引起肺炎的病原体,可以导致呼吸道感染和肺部疾病。
肺炎支原体测试试剂盒是一种用于检测肺炎支原体感染的工具,它通过检测病原体的核酸来确认感染。
本文将介绍肺炎支原体测试试剂盒的使用方法和注意事项。
使用方法1.准备工作:将试剂盒从冰箱中取出后,将其适应室温放置30分钟,确保试剂盒内的试剂恢复到室温。
2.样本采集:使用专业的采样套装,采集患者的呼吸道样本。
一般可以选择咽拭子或者痰液样本作为采集物。
注意采集样本时要注意卫生,避免污染。
3.样本处理:将采集到的样本转移到试剂盒提供的管子中。
根据使用说明书的要求,将样本与提供的稀释液混合,充分混匀。
4.核酸提取:根据试剂盒提供的方法,进行核酸提取。
将样本与试剂混合,经过一系列处理步骤,将病原体的核酸提取出来。
5.PCR扩增:将提取的核酸加入PCR反应管中,根据试剂盒提供的PCR扩增方案进行扩增。
PCR扩增是将少量的核酸扩增成大量可检测的数量,以便进行后续的分析。
6.结果分析:将PCR扩增产物放入试剂盒提供的分析设备中,根据设备的提示进行操作。
设备会根据PCR扩增的结果判断样本中是否存在肺炎支原体,通常会给出阳性或阴性结论。
注意事项1.操作规范:使用试剂盒前,务必阅读说明书并按照要求操作。
严格遵循操作规范,确保结果的准确性。
2.样本采集:采集样本时,注意避免污染和交叉感染。
使用采样套装中的工具,并按照说明进行操作。
3.试剂保存:试剂盒中的试剂应妥善保存,避免暴露于阳光直射或高温环境。
注意试剂的保质期,过期的试剂可能会影响测试结果。
4.设备操作:在使用设备进行分析时,注意正确操作,遵循设备操作说明。
保持设备的清洁和维护,以确保结果的准确性。
5.结果解读:根据设备给出的结果,判断样本是否携带肺炎支原体。
阳性结果表示样本中存在肺炎支原体感染,阴性结果表示未检测到感染。
结论肺炎支原体测试试剂盒是一种有效的工具,用于检测肺炎支原体感染。
探针法支原体检测试剂盒说明书
《探针法支原体检测试剂盒》(含内参)说明书(版本20230112)【本说明书会不定期更新,每次收到新的产品时,请到本公司网站重新下载最新版本!】货号QM016包装规格50次/盒储存条件该产品在常温或随冰袋运输,收到产品后,请立即放-20 ℃冰箱低温避光保存。
该条件下,至少5年内有效。
产品用途《探针法支原体检测试剂盒》(qPCR Mycoplasma Detection Kit with Probe)采用支原体特异性引物和支原体特异性荧光探针(报告基因为FAM),用于对样品的支原体基因组DNA进行荧光定量PCR扩增检测。
试剂盒内同时含有内参对照质粒mycoIC2和相应的引物和荧光探针(报告基因为VIC),用于监控支原体DNA 提取和qPCR扩增的效率。
本试剂盒可用于检测一切可能含支原体的样品,比如:(1)体外细胞培养的上清;(2)血清;(3)各种体液,如唾液、尿液、鼻腔分泌物等;(4)别的液体样品。
本产品仅供研究使用。
产品简介哺乳动物细胞的培养,支原体(Mycoplasma)污染是个世界性的问题。
支原体污染几乎可以改变细胞的所有参数,导致实验结果的不准确、甚至完全错误(支原体污染对细胞的详细危害,请参考本公司的网站:)。
从2013年开始,《Nature》期刊已正式要求投稿的文章,如涉及细胞培养都要进行支原体检测。
相信会有越来越多的高水平期刊将做出同样的支原体检测要求。
培养法是相对可靠的支原体检测技术,但是该方法非常耗时的,需要数周,不适合作为细胞培养液中支原体污染的快速检测。
此外,通过固体培养法无法检测污染细胞的一种最常见的支原体,即猪鼻支原体(M.Hyorhinis)。
这是因为猪鼻支原体无法在支原体固体培养基上形成可见的菌落。
而猪鼻支原体约占所有支原体污染的20-50%。
有的实验室使用荧光染色法检测支原体,但是该方法灵敏度太低,当检测成阳性时,细胞经常已经严重污染。
培养法和荧光染色法虽然是我国药典收录的支原体检测方法,但是因为其各自都有明显的缺点,不适合作为支原体快速检测的方法。
LONZA支原体检测试剂盒是一种用于检测支原体感染的试剂盒
LONZA支原体检测试剂盒是一种用于检测支原体感染的试剂盒LONZA支原体检测试剂盒是一种用于检测支原体感染的试剂盒。
支原体是一类细菌,可引起多种疾病,如肺炎、支气管炎等呼吸道感染。
由于支原体的症状与其他病原体引起的疾病相似,因此准确快速地检测支原体感染对诊断和治疗至关重要。
LONZA支原体检测试剂盒采用一种特殊的分子生物学方法,可以通过检测支原体特异性的基因序列来确定是否存在支原体感染。
该试剂盒包含了一系列的试剂和探针,可以与支原体的DNA序列特异性结合,形成特定的标记信号。
使用LONZA支原体检测试剂盒非常简单。
首先,从患者的呼吸道样本中提取DNA。
样本可以是咽喉刷子、鼻咽拭子或痰液等。
接下来,将提取的DNA加入到试剂盒中,与试剂盒内的特定试剂和探针发生反应。
此时,如果样本中存在支原体的DNA序列,试剂盒内的试剂和探针就会与其结合并发出特定的信号。
最后,使用特殊的仪器对发出的信号进行分析。
根据信号的强度和特征,可以确定是否存在支原体感染。
该试剂盒的敏感度和特异性非常高,能够准确地检测出支原体感染,避免了其他常见的呼吸道疾病的误诊。
该产品的使用具有多个优点。
首先,它可以在短时间内提供准确的结果,从而帮助医生快速确定诊断并制定相应的治疗方案。
其次,试剂盒的操作简单易行,不需要复杂的仪器和特殊的技术。
再次,该试剂盒的成本相对较低,适用于各种医疗机构和实验室的使用。
总之,LONZA支原体检测试剂盒是一种快速、准确、简便的检测方法,可用于支原体感染的诊断和监测。
它为医生提供了重要的辅助工具,有助于及时处理支原体感染并避免疾病的蔓延。
支原体染色试剂盒
支原体染色检测试剂盒简介:支原体染色检测试剂盒(Mycoplasma Stain Assay Kit)是一种经典的利用DNA 荧光染色法检测支原体污染的试剂盒,其原理是当细胞发生凋亡时,染色质会固缩,Hoechst 染色后在荧光显微镜下观察,正常细胞的细胞核呈正常的蓝色,而凋亡细胞的细胞核会呈致密浓染,或呈碎块状致密浓染,颜色有些发白。
Hoechst Staining Kit 经常用于培养的贴壁或悬浮细胞以及组织切片的细胞凋亡检测。
该试剂盒检测细胞含量范围一般为0.1~1×106之间。
组成:操作步骤(仅供参考):(一)贴壁细胞1、取洁净盖玻片在70%乙醇中浸泡5分钟或更长时间,无菌超净台内吹干或用无菌的PBS 或生理盐水洗涤3次,再用细胞培养液洗涤1次。
将盖玻片置于6孔板或其他培养皿内,接种细胞培养过夜,使融合率约为50%~80%。
2、加入干预条件使细胞发生凋亡后,吸尽培养液,加入Hoechst 固定液固定。
3、去除固定液,用PBS 或生理盐水洗2次,吸尽液体。
4、加入Hoechst 染色液孵育。
也宜用摇床,或手动晃动数次。
5、弃染色液,PBS 或生理盐水洗2次。
6、滴一滴抗荧封片剂于载玻片上,盖上贴有细胞的盖玻片,让细胞接触封片剂,避免气泡。
(二)悬浮细胞1、离心收集细胞样品于1.5ml 离心管内并弃液,加入Hoechst 固定液,缓缓悬起细胞,固定10min 或更长时间(亦可4℃过夜)。
2、低速离心去除固定液,用PBS 或生理盐水洗2次,每次3min 。
洗涤时手动晃动数次。
3、低速离心离心后吸去大部分液体保留约50μl 液体,再缓缓悬起细胞,滴加至载玻片上,尽量使细胞分布均匀。
编号 名称 DA0140 100T Storage 试剂(A): Hoechst 固定液 50ml RT 试剂(B): Hoechst 染色液 50ml -20℃ 避光 试剂(C): 荧光封片剂 5ml 4℃ 避光 使用说明书 1份4、稍晾干,使细胞贴在载玻片上不易随液体流动。
支原体检测说明书
SaveIt系列产品——支原体检测试剂盒说明书一、产品简介支原体(mycoplasma):又称霉形体,为目前发现的最小的最简单的原核生物。
支原体的侵染会引起细胞功能和基因表达的严重改变,并造成持续危害。
由于支原体污染会严重影响实验结果的可靠性、重复性和一致性,对支原体的常规检测非常重要。
针对细胞、培养基以及动物血清的支原体检测,我们推出了Myco-PCR-TEST快速支原体检测试剂盒。
本试剂盒基于PCR检测原理,根据支原体高度保守的16和23SrRNA区域设计的特异性引物,经过简单快速的PCR,从而迅速准确判断支原体污染是否被清除。
汉恒生物()推出的SaveIt TM抗支原体试剂能够在不影响细胞状态的前提下能够有效的清除支原体污染,从而使一些珍贵的细胞受到支原体污染之后能够得到挽救。
二、产品包装产品规格见标签三、使用说明使用Trizol 法抽提待检测细胞的RNA,反转录为CDNA 后,加入支原体检测引物,进行PCR 检测细胞支原体污染情况。
四、操作步骤4.1样品处理1、A:培养贴壁细胞:不须胰酶消化,可直接用Trizol进行消化、裂解,Trizol体积按10cm2/ml 比例加入。
B:悬浮细胞可直接收集、裂解,每1ml Trizol可裂解5×106动物、植物或酵母细胞,或107细菌细胞。
2、细胞加Trizol后,室温放置5min,使其充分裂解。
注:此时可放入-70℃长期保持。
3、12,000rpm 离心5min,弃沉淀。
4、按200ul氯仿/ml Trizol加入氯仿,振荡混匀后室温放置15min。
注:禁用漩涡振荡器,以免基因组DNA断裂。
5、4℃ 12,000g离心15min。
6、吸取上层水相,至另一离心管中。
注:千万不要吸取中间界面;若同时提取DNA和蛋白质,则保留下层酚相存于4℃冰箱,若只提RNA,则弃下层酚相。
7、按0.5ml 异丙醇/ml Trizol 加入异丙醇混匀,室温放置5-10min 。
支原体(Uu Mh)分离培养药敏试剂盒(微生物检验法)产品技术要求珠海迪尔生物工程
2.性能指标2.1外观与性状2.1.1干粉支原体培养基应为黄色粉块状;2.1.2稀释液应为清亮液体、无混浊、无凝块和沉淀;2.1.3液体支原体培养基应为黄色清亮液体、无混浊、无凝块和沉淀;2.1.4检测卡应透明,无明显裂纹、气泡、锋棱及毛刺;文字和标记应清晰、准确、牢固。
2.1.5干粉支原体培养基的重量为0.0375g±0.0037g;2.1.6 稀释液的装量:4.8±0.4ml;2.1.7 液体支原体培养基的装量:3.8±0.4ml。
2.2性能指标2.2.1试剂盒符合率2.2.1.1试剂盒对解脲脲原体标准株ATCC27813 和人型支原体标准株ATCC14027 的分离培养符合率应为100%;2.2.1.2试剂盒对解脲脲原体标准株ATCC27813 和人型支原体标准株ATCC14027 的药敏符合率应≥90%。
2.2.2试剂盒的重复性2.2.2.1试剂盒对解脲脲原体标准株ATCC27813 和人型支原体标准株ATCC14027 分离培养重复性应为100%;2.2.2.2试剂盒对解脲脲原体标准株ATCC27813 和人型支原体标准株ATCC14027 的药敏重复性应≥90%。
2.2.3批内不精密度应无差异。
2.2.4批间不精密度应无差异。
2.2.5分析灵敏度试剂盒对解脲脲原体标准株ATCC27813 和人型支原体标准株ATCC14027 检测的CCU=10-6。
2.2.6分析特异性革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、真菌对试剂盒检测解脲脲原体和人型支原体无测定干扰。
2.3pH 值2.3.1干粉支原体培养基加入稀释液pH 为6.0±0.5(25℃);2.3.2 液体培养基pH 为6.0±0.5(25℃)。
2.4菌检检测卡及支原体培养基应无菌。
细胞支原体污染常用支原体检测方法和试剂盒介绍
细胞支原体污染常用支原体检测方法和试剂盒介绍(2016年10月16日)哺乳动物细胞的培养,支原体(Mycoplasma)污染是个世界性的问题。
支原体污染几乎可以改变细胞的所有参数,导致实验结果的不准确、甚至完全错误。
从2013年开始,《Nature》期刊已正式要求投稿的文章,如涉及细胞培养都要进行支原体检测。
相信会有越来越多的高水平期刊将做出同样的支原体检测要求。
目前,细胞支原体污染常用的支原体检测方法主要有:一、培养法●原理:将待检测样品先接种到支原体液体培养基中大量繁殖,然后再转接种到支原体固体培养基中,培养一段时间后(大约一个月),如果固体培养中,出现典型的支原体菌落,则说明待测样品有支原体污染。
●优点:支原体培养法是相对可靠的支原体检测技术,也是我国药典认可的方法之一。
●缺点:(1)培养法非常耗时的,需要数周,不适合作为细胞培养液中支原体污染的快速检测;(2)通过固体培养法无法检测污染细胞的一种最常见的支原体,即猪鼻支原体(M.Hyorhinis)。
这是因为猪鼻支原体无法在支原体固体培养基上形成可见的菌落。
而猪鼻支原体约占所有细胞支原体污染的20-50%。
●《培养法支原体检测试剂盒》》主要厂家:读者可以根据《中国药典》中收录的培养法支原体检测方法进行操作。
二、荧光染色法●原理:将待检测样品接种到专门的指示细胞(如:Vero细胞)中,培养一段时间后,用DNA荧光染料(如:Hoechst 33258,DAPI)进行染色,如果除了细胞核被染色外,细胞质也有大量的絮状核酸物质被荧光染料染色,那么这些处于细胞质的核酸物质就是支原体DNA。
●优点:荧光染色法也是我国药典认可的方法之一。
●缺点:(1)该方法灵敏度太低,当检测成阳性时,细胞经常已经严重污染;(2)需要用到专门的指示细胞(如:Vero细胞),如果不用指示细胞而直接对目标细胞进行荧光染色,由于每种细胞繁殖和吸附支原体的能力差异极大,检测的准确性将比用Vero等指示细胞进行检测要低得多;(3)该方法严重依赖实验人员的经验,可重复性较差。
MycoSHENTEK 支原体 DNA 提取纯化试剂盒(2G)(磁珠法)说明书
MycoSHENTEK®支原体DNA提取纯化试剂盒(2G)(磁珠法)说明书货号:1509840在实验前请完整阅读本说明书,务必重视注意点和常见问题!版本:A/2仅供研究用湖州申科生物技术股份有限公司⏹试剂盒简介MycoSHENTEK®支原体DNA提取纯化试剂盒(2G)(磁珠法)用于提取纯化生物样品中的微量支原体DNA,包括主细胞库、工作细胞库、病毒种子批等,同时对高浓度细胞(不大于107个)、高浓度质粒、5%人血白蛋白等复杂基质生物制品均适用,与MycoSHENTEK®支原体检测试剂盒(2G)(PCR-荧光探针法)配套使用,参照EP2.6.7和JP XVIII支原体检测相关要求进行验证,检测限可达10CFU/mL。
对于样品体积小于400μL的样品,可以直接使用本试剂盒进行提取;对于超过此体积的,可通过离心将样品浓缩至终体积为约400μL,再使用本试剂盒进行支原体DNA 提取纯化。
本试剂盒可以手动操作,也可以通过rHCDpurify®实现样品的自动化处理。
⏹试剂盒组分表1.试剂盒组分序号组分产品号装量储存条件I 洗涤液A NND01515mL×1瓶室温结合液NND01710mL×1瓶室温洗脱液NND0195mL×1瓶室温稀释液NND0225mL×1瓶室温裂解液NND0285mL×1瓶室温II 样品处理液NND002 1.25mL×4管2~8℃磁珠NND033750μL×2管2~8℃5M NaCl NND040500μL×1管2~8℃III助沉剂ⅠNND00325μL×1管-18℃及以下助沉剂ⅡNND004500μL×1管-18℃及以下蛋白酶K NND023500μL×2管-18℃及以下⏹规格50Extractions。
⏹有效期规定储存条件下24个月,具体详见试剂盒标签。
肺炎支原体检测试剂盒胶体金法
肺炎支原体检测试剂盒胶体金法背景与引言肺炎支原体是一种常见的致病菌,它是导致上呼吸道感染和肺炎的一种主要病原体。
近年来,肺炎支原体感染的发病率逐渐增加,因此早期快速的检测非常重要。
为了满足临床上对肺炎支原体的检测需求,研发出了肺炎支原体检测试剂盒胶体金法。
本文将详细介绍肺炎支原体检测试剂盒胶体金法的原理、操作步骤和优势。
原理肺炎支原体检测试剂盒胶体金法采用了胶体金免疫层析技术。
该技术利用了胶体金颗粒在溶液中的颜色变化特性,通过金标记的抗原与肺炎支原体的特异性抗体结合形成颗粒免疫复合物,从而实现对肺炎支原体的检测。
操作步骤1.样品处理:取适量标本(一般为呼吸道分泌物或咽拭子),按照说明书的要求进行预处理,如离心、加入提取液等。
2.载板处理:将处理后的样品滴加到测试载板上,一般每个孔滴加样品的量为5-10μL。
3.滴加试剂:将胶体金标记的抗原滴加到载板上,与样品中的肺炎支原体结合形成颗粒免疫复合物。
4.反应时间:根据产品说明书的要求,将载板放置在恒温箱或特定的反应时间,一般为10-20分钟。
5.结果读取:观察载板上颗粒免疫复合物的颜色变化,一般采用裸眼观察或光度计测量吸光度来判断结果。
优势1.快速检测:肺炎支原体检测试剂盒胶体金法可以在短时间内完成检测,通常只需要20分钟左右,大大缩短了检测周期。
2.简单易用:操作步骤简单,只需要少量的样品和试剂,无需复杂的实验仪器和设备,使得检测更加便捷。
3.灵敏度高:胶体金免疫层析技术具有较高的灵敏度,可以检测到低浓度的肺炎支原体,提高了检测的准确性和可靠性。
4.成本低廉:与其他检测方法相比,采用胶体金法进行肺炎支原体检测的成本较低,可以降低医疗机构的检测费用。
5.广泛应用:肺炎支原体检测试剂盒胶体金法适用于不同场景的肺炎支原体检测,可以在临床、疫情监测等多个领域得到广泛应用。
结论肺炎支原体检测试剂盒胶体金法作为一种快速、简单、灵敏度高且成本低廉的检测方法,对于肺炎支原体感染的早期诊断和疫情监测具有重要意义。
肺炎支原体快速鉴定培药敏试剂盒介绍-临床改后
适用于各类患者
该试剂盒适用于所有年龄段和 类型的肺炎支原体感染患者, 包括成人、儿童、老年人以及 免疫系统较弱的患者。
适用于多种样本类型
该试剂盒可接受多种样本类型 ,如痰液、咽拭子、支气管灌 洗液等,方便医生根据患者具 体情况选择合适的样本类型进 行检测。
应用效果
80%
快速鉴定
该试剂盒能够在较短的时间内完 成肺炎支原体的鉴定,大大缩短 了检测时间,提高了诊断效率。
案例二
某社区医疗机构使用该试剂盒对社区内的疑似肺炎支原体感染患 者进行筛查,成功发现了多名早期患者,及时采取了隔离和治疗 措施,有效控制了疫情的传播。
05
结论
总结
肺炎支原体快速鉴定培药敏试剂盒是一种高效、准 确的检测工具,用于快速鉴定肺炎支原体并对药物 敏感性的测定。
该试剂盒采用先进的分子生物学技术,通过对肺炎 支原体基因的检测,能够快速、准确地鉴定出肺炎 支原体,并对其对不同药物的敏感性进行测定。
免疫学原理
试剂盒基于免疫学原理,利用抗原与抗体特异性结 合的特性,实现对肺炎支原体的检测。
聚合酶链式反应(PCR)技术
通过PCR技术对肺炎支原体DNA进行扩增,实现对 肺炎支原体的快速鉴定。
药物敏感试验
通过观察肺炎支原体在含有不同浓度药物的培养基 中的生长情况,判断其对药物的敏感性。
试剂盒使用方法
100%
准确度高
该试剂盒采用先进的检测技术, 具有高准确度,能够为临床医生 提供可靠的诊断依据。
80%
指导用药
通过该试剂盒进行药敏试验,能 够为临床医生提供针对肺炎支原 体的敏感药物信息,有助于指导 临床合理用药。
应用案例
案例一
某大型医院使用该试剂盒对疑似肺炎支原体感染患者进行检测, 通过快速鉴定和药敏试验,确诊了患者的病情,并成功指导了临 床用药,使患者得到及时有效的治疗。
肺炎支原体检测试剂盒
肺炎支原体检测试剂盒简介肺炎支原体是一种常见的革兰阴性细菌,是引起人类呼吸道感染的重要病因。
肺炎支原体感染可导致轻度到中度的上呼吸道感染、肺炎、气管支气管炎等疾病。
为了准确检测和诊断肺炎支原体感染,科学家们开发了肺炎支原体检测试剂盒,以便在临床诊断中使用。
检测试剂盒原理肺炎支原体检测试剂盒是一种基于分子生物学原理的检测工具。
它利用核酸扩增技术,特别是聚合酶链反应(PCR),可以从临床标本中扩增并检测肺炎支原体的核酸。
该检测试剂盒通常包含肺炎支原体特异性的引物和探针,并且还可能包含一些辅助试剂和储存缓冲液等。
在使用肺炎支原体检测试剂盒时,首先需要采集患者的呼吸道标本,如咽喉拭子、痰液等。
然后,将标本中的核酸提取出来,并与检测试剂盒中的引物和探针混合。
通过PCR反应,将肺炎支原体的核酸扩增成千倍。
如果在标本中存在肺炎支原体的核酸,那么PCR反应将在一定的温度条件下产生阳性信号,表明该患者可能感染了肺炎支原体。
检测结果解读肺炎支原体检测试剂盒可以提供两种结果:阳性和阴性。
阳性结果表示在患者的标本中检测到肺炎支原体的核酸,说明患者可能感染了肺炎支原体。
阴性结果则表示未检测到肺炎支原体的核酸,表明患者可能没有感染肺炎支原体。
请注意,肺炎支原体检测试剂盒并不能完全排除肺炎支原体感染的可能性。
在某些情况下,可能由于标本采集、核酸提取等环节的技术原因,导致结果的假阴性或假阳性。
因此,在进行结果解读时,仍需结合临床症状和其他检查结果进行综合分析。
应用领域肺炎支原体检测试剂盒主要应用于临床肺炎的诊断和流行病学调查。
通过及时检测和诊断肺炎支原体感染,可以采取有效的治疗措施,避免疾病的进一步发展和传播。
此外,肺炎支原体检测试剂盒还可用于研究肺炎支原体的流行病学特征,为疫情监测和预防控制提供重要依据。
注意事项使用肺炎支原体检测试剂盒时需要遵循以下注意事项:1.仅供专业人员使用:肺炎支原体检测试剂盒是一种专业的医疗设备,仅应由经过培训和具备相关专业知识的人员操作和解读结果。
支原体检测试剂盒注册指导原则
支原体检测试剂盒注册指导原则
支原体检测试剂盒注册指导原则如下:
1.通过临床验证:支原体检测试剂盒注册前必须进行充分的临床验证,以确保其具有准确可靠的检测结果。
临床验证应包括不同临床组别的样本,以及与其他可靠检测方法的比较。
2.符合相关标准:支原体检测试剂盒应符合国家和国际相关的技术标准和法规要求,如ISO 13485、ISO 15189等。
3.安全有效性:支原体检测试剂盒在使用过程中应具有良好的安全性和有效性。
注册前需要对产品进行安全性评估和临床试验,确保产品在临床使用中的安全可靠性。
4.成分明确:支原体检测试剂盒的成分应明确清晰,产品说明书中应包含详细的试剂成分和使用方法说明。
5.标签和包装符合规范:支原体检测试剂盒的标签和包装应符合国家和国际的相关规范要求,能够确保产品的标识和保质期等信息的准确性和可靠性。
6.质量控制:支原体检测试剂盒注册前需要进行充分的质量控制,确保产品的稳定性和可靠性。
质量控制措施包括试剂的制备、质量标准的建立和质量控制程序的制定。
7.技术支持和售后服务:支原体检测试剂盒注册后,生产厂商应提供技术支持和售后服务,及时解答用户的问题,并确保产
品的正常使用和维护。
8.临床实用性:支原体检测试剂盒注册前需进行产品实际应用
的临床实用性评估,以确定其在临床实践中的有效性和可靠性。
以上是支原体检测试剂盒注册的一般指导原则,具体的注册要求可能还会根据国家和地区的法规和标准有所不同。
因此,在具体注册过程中,还需要参考相应的法规、标准和指南进行操作。
江门市凯林贸易 支原体试剂组合 ( ID2+ST ) 说明书
支原体试剂组合支原体试剂组合((ID2+ST ID2+ST)) 使用说明书使用说明书【产品名称】支原体试剂组合(培养法)【组成、型号规格】组成:本产品由支原体ID2试剂盒(以下简称ID2试剂盒)和支原体药敏试剂盒(以下简称ST 试剂盒)组成。
型号规格:S2401。
【预期用途】本产品供临床诊断泌尿生殖道支原体用,并可进行药敏试验。
【检验原理】ID2为鉴定、计数用培养基。
其肉汤提供了支原体生长的最理想环境(酸碱度、底物和一些生长因子)。
肉汤中的特殊底物(用于解脲脲原体U. urealyticum 的尿素,用于人型支原体M. hominis 的精氨酸)和指示剂(苯酚红)显示由於pH 值提高而产生颜色变化的阳性反应。
三种抗生素和一种抗真菌药物的组合提供了选择性,确保标本中出现的污染菌群不会影响试验。
ST 为药敏试验用试剂。
试剂条里的反应孔将抗生素按高、低浓度设置,分别接种一定量的支原体培养物,经培养后,根据支原体在高低浓度生长与否,将支原体分为敏感、中度敏感和耐药。
试验时,将标本接种到复溶的肉汤后,再分配到试剂条中培养。
【主要组成成份】1.支原体ID2试剂盒 1) 试剂(R1)每一个瓶内含有3.1ml 肉汤,混有用于泌尿生殖道支原体诊断的样品制剂所需的稳定的营养成分。
它可抑制大多数革兰氏阴性和革兰氏阳性细菌的生长,并且可用于R2试剂的复溶。
2) 试剂(R2)每一个瓶内含有1ml 冻干的尿素-精氨酸肉汤。
3) 鉴定、计数试剂条每个支原体鉴定计数试剂条含有3人份的测试,每个测试有5个反应孔,见表1: 表12. 支原体药敏试剂盒1) 药敏试验试剂条含有20个反应孔,分上下两行各10个反应孔,上行(H)为高浓度药敏试验,下行(L)为低浓度药敏试验。
反应孔决定10种抗生素药敏试验结果。
见表2。
表2注:1、药敏试验试剂条会不断更新改进,试验板上的标识如行号、孔号等或会发生改变,以当时试验板上的标识、并结合产品说明书的指引为准; 2、没有被注明的孔为空白孔。
支原体检测试剂盒的操作步骤及注意事项
支原体检测试剂盒的操作步骤及注意事项 货号:CA1080 保存:4℃保存,有效期为 2 年,Hoechst 工作液需要避光保存。 产品内容:
Hoechst 33258 工作液
50ml
固定液
50ml
抗荧光衰减封片液
10ml
说明书
1份
产品简介: 本试剂盒是利用荧光染料(bisbenzimide,Hoechst 33258)检测支原体污染。这种染料会结 合到 DNA 的 A-T 富集区域,因为支原体的 DNA 中 A-T 含量高(55%~80%),所以可将 其染色而被检测到。被支原体污染的细胞经染色后在细胞周围可看到许多大小均一的荧光小 点,即为支原体的 DNA 染色斑,说明有支原体污染。 Hoechst 33258 的最大激发波长为 346nm,最大发射波长为 460nm;Hoechst 33258 和双链 DNA 结合后,最大激发波长为 352nm,最大发射波长为 461nm。 操作步骤: 贴壁细胞: 1、被检细胞接种于无菌的 6 孔细胞培养板中,接种密度为 1-2×10 4 。同时,接种正常 无支原体感染的同种细胞,作为阴性对照。 2、5 天后,先吸去培养液,再加入 1ml 的固定液,静置 20min, 3、吸去固定液,晾干。
4、于每孔中,加入 1ml 的 Hoechst33258 工作液(Hoechst 33258 工作液须覆盖全部被检 细胞),37℃避光放置 15-20min 或室温静置 20~30min。 5、吸去 Hoechst 33258 工作液,加入 2ml 灭菌超纯水洗涤三次,直接风干。风干后加入 一滴封片液,并以盖玻片覆盖。 6、荧光显微镜观察。用紫外激发光激发,观察细胞周围是否有蓝色荧光小点或串珠状荧光 小点。 悬浮细胞: 1、收集需检测的细胞,1500rpm,5min。 2、将收集的细胞涂片于载玻片上,再加 1ml 的固定液,静置 20min。 3、吸去固定液,晾干。 4、于每孔中,加入 1ml 的 Hoechst33258 工作液(Hoechst 33258 工作液须覆盖全部被检 细胞),37℃避光放置 15~20min 或室温静置 20~30min。 5、吸去 Hoechst 33258 工作液,用无菌水洗涤玻片 3 次,直接风干。风干后加入一滴封 固液,并以盖玻片覆盖。 6、荧光显微镜观察。用紫外激发光激发,观察细胞周围是否有蓝色荧光小点或串珠状荧光 小点。 结果判断(参考): 阴性:仅见细胞的细胞核呈现黄绿色荧光。 阳性:除细胞外,细胞周围可见大量的大小均一的荧光着色颗粒。 注意事项: 1.Hoechst 工作液对人体有害,请注意防护。 2.固定液有刺激性气味,建议在通风橱进行固定。 3.支原体检测时,最好用不含抗生素的培养液培养 2~3 代,这样容易避免假阴性结果。 4.本试剂盒用于 6 孔板检测时,可以进行 50 次检测反应。
C0296 支原体检测试剂盒说明书
包装清单:
产品编号 C0296-1 C0296-2 C0296-3
—ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
产品名称 固定液 Hoechst染色液 抗荧光淬灭封片液 说明书
包装 100ml 10ml 10ml
1份
保存条件:
4℃保存,一年有效,其中Hoechst染色液需避光保存。
注意事项:
使用说明:
1. 细胞样品的准备: a. 对于贴壁细胞,在六孔板或其它多孔板内或盖玻片上培养细胞至50%-80%满。 细胞培养过满会导致很难判断是否存在支原体污染。 b. 对于悬浮细胞,离心沉淀细胞,取少量细胞做细胞涂片,空气中充分晾干。
2. 用PBS按照1:10稀释Hoechst染色液(1体积Hoechst染色液加入9体积PBS)。
¾ 本试剂盒的检测效果图参考上图。左图为无支原体污染情况,中图为支原体轻度污染情况,箭头所指为微粒状的一些支 原体,右图为支原体重度污染情况,可见大量微粒状的支原体。
¾ 如果发现有支原体污染,建议更换无污染的细胞进行培养。如果有必要去除支原体,可以使用Mycoplasma Removal Agent、cyprofloxacin或BM-Cyclin去除支原体污染。
稀释后的Hoechst染色液宜在24小时内使用。 3. 加适量固定液固定10-20分钟。
对于六孔板的一个孔,加入1ml固定液。确保固定液充分覆盖样品,固定前切勿对细胞进行洗涤。另外对于贴壁细胞,固 定前需去除培养液。 4. 去除固定液,空气中晾干。 5. 加适量10倍稀释的Hoechst染色液室温染色10-30分钟。 对于六孔板的一个孔,加入1ml染色液。确保染色液充分覆盖样品,染色时注意避光。可以用铝箔纸避光。 6. 去除染色液,空气中晾干。 7. 滴加试剂盒中提供的抗荧光淬灭封片液,封片后荧光显微镜下观察蓝色荧光。 荧光显微镜观察时需400倍或1000倍放大观察(需使用油镜)。参考上图判断支原体污染情况。没有支原体污染或其它原核 生物污染的细胞样品,仅观察到细胞核的蓝色荧光,线粒体DNA不会被染色。有支原体污染的细胞样品可以观察到细胞 核周围微粒状或丝状蓝色荧光。支原体污染严重的细胞可以观察到大量微粒状或丝状蓝色荧光。有细菌、酵母或霉菌污 染的情况虽然Hoechst染色也会呈阳性,但细菌、酵母或霉菌污染在光学显微镜下可以观察到,而支原体观察不到,由此 可以初步区分是支原体还是其它微生物。如有必要进一步鉴定,可以通过把支原体接种培养和RT-PCR等方法进行进一步 检测。
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支原体染色检测试剂盒
简介:
支原体染色检测试剂盒(Mycoplasma Stain Assay Kit)是一种经典的利用DNA 荧光染色法检测支原体污染的试剂盒,其原理是当细胞发生凋亡时,染色质会固缩,Hoechst 染色后在荧光显微镜下观察,正常细胞的细胞核呈正常的蓝色,而凋亡细胞的细胞核会呈致密浓染,或呈碎块状致密浓染,颜色有些发白。
Leagene Hoechst Staining Kit 经常用于培养的贴壁或悬浮细胞以及组织切片的细胞凋亡检测。
该试剂盒检测细胞含量范围一般为0.1~1×106之间。
组成:
自备材料:
1、 可观察蓝光的荧光显微镜或激光共聚焦显微镜
2、 PBS 或生理盐水
3、 载玻片、盖玻片
4、 预冷固定液:预冷的70%乙醇或4%多聚甲醛
操作步骤(仅供参考):
(一)贴壁细胞
1、取洁净盖玻片在乙醇中浸泡,无菌超净台内吹干或用无菌的PBS 或生理盐水洗涤3次,再用细胞培养液洗涤。
将盖玻片置于6孔板或其他培养皿内,接种细胞培养过夜,使融合率约为50%~80%。
2、加入干预条件使细胞发生凋亡后,吸尽培养液,加入Hoechst 固定液,固定10分钟或更长时间(可4℃过夜)。
3、去除固定液,用PBS 或生理盐水洗,每次3min ,吸尽液体。
洗涤时宜用摇床,或手动晃动。
4、加入Hoechst 染色液,孵育。
也宜用摇床,或手动晃动数次。
5、弃染色液,PBS 或生理盐水洗2次,每次3min ,吸尽液体。
洗涤时宜用摇床,或手 编号 名称 DA0140 100T Storage 试剂(A): Hoechst 固定液 50ml RT 试剂(B): Hoechst 染色液 50ml -20℃ 避光 试剂(C): 荧光封片剂 5ml 4℃ 避光 使用说明书 1份
动晃动。
6、滴一滴抗荧封片剂于载玻片上,盖上贴有细胞的盖玻片,让细胞接触封片剂,避免气泡。
7、荧光显微镜可检测到呈蓝色的细胞核。
(二)悬浮细胞
1、离心收集细胞样品于离心管内并弃液,加入Hoechst固定液,缓缓悬起细胞,固定(亦可4℃过夜)。
2、低速离心去除固定液,用PBS或生理盐水,每次3min。
洗涤时手动晃动数次。
3、低速离心离心后吸去大部分液体保留液体,再缓缓悬起细胞,滴加至载玻片上,尽量使细胞分布均匀。
4、稍晾干,使细胞贴在载玻片上不易随液体流动。
5、均匀滴上Hoechst 染色液,孵育。
用吸水纸从边缘吸去液体,微晾干。
6、弃染色液,用PBS或生理盐水洗2次,每次3min,吸尽液体。
洗涤时宜用摇床手动。
7、滴一滴抗荧光封片剂于载玻片上,盖上一洁净的盖玻片,尽量避免气泡。
8、荧光显微镜可检测到呈蓝色的细胞核。
(三)组织切片
1、常规包埋切片。
用PBS或生理盐水洗2次,每次3min。
洗涤时手动晃动数次。
2、均匀滴上Hoechst染色液,孵育。
3、弃染色液,PBS或生理盐水洗2次,每次3min,吸尽液体。
洗涤时宜用摇床或手动。
4、将切片置于载玻片上,滴一滴抗荧光封片剂,盖上一洁净的盖玻片,尽量避免气泡。
5、荧光显微镜可检测到呈蓝色的细胞核。
注意事项:
1、荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽快检测。
使用抗荧封片剂时也应避光操作。
2、在为了获得细胞沉淀的离心的过程中,对于特殊细胞,如果细胞沉淀不充分,可以适当
提高离心力或延长离心时间。
3、Hoechst染色液对人体有一定刺激性,请注意适当防护。
4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期:12个月有效。
亦可4℃保存, 1个月有效。