食品分析——食品中铁的测定及维生素C的测定

哈尔滨商业大学食品工程学院

实验报告

课程名称：食品分析

实验名称：奶粉中铁的测定及

水溶C100中Vc的测定专业、班级：食品科学与工程

姓名：王孜

学号：200840610824

同组人：齐霁、畅乐、司淼菲

实验操作日期：2010-12-15

前言：食品中的铁元素和维生素均为食品中的微量成分。本实验首先需要认真掌握分析检验的基础理论、仪器分析的原理，以及相关的物理、化学、生物化学等基础知识，根据食品分析的特殊性，通过实验正确掌握微量组分的检验操作技能和方法。

1 实验目的

1.1 掌握样品的预处理方法即有机物破坏法，了解样品灰化的原理、操作及注意事项。

1.2掌握邻菲罗啉比色法测铁的原理、操作及注意事项。

1.3 掌握2，6——二氯酚靛酚法测定还原型抗坏血酸的原理、操作及注意事项。

1.4掌握固蓝盐B法测定还原型抗坏血酸的原理、操作及注意事项。

2 实验原理

2.1灰化：样品在高温下灼烧，使有机物氧化分解。

2.2样品经灰化（或消化），用抗坏血酸将3价铁还原为2价铁，2价铁与林菲罗啉反应生成红色物质，在520nm下测其光吸收强度A，根据A值在标准曲线上查对应2价铁浓度得C样，再计算样品中铁的含量。

2.3样品经前处理提取维生素C还原型抗坏血酸，可以定量2，6——二氯酚靛酚（定量反应过程稳定），终点为微红色，根据2，6——二氯酚靛酚消耗量计算Vc的量。

2.4在乙酸溶液中，抗坏血酸与固蓝盐B反应生成黄色的草酰肼—2—羟基丁酰内酯衍生物。在最大吸收波长420nm处测定吸光度

3 实验材料与仪器

3.1试剂：显色剂，铁标准溶液

仪器：灰化炉，水浴，可见光分光光度计，25ml比色管。

试样：奶粉

3.2试剂：Vc标准溶液，草酸溶液，2，6——二氯酚靛酚标准溶液，

；仪器：三角瓶，天平，烧杯，玻璃棒，漏斗，滤纸，容量瓶，容量吸管，移液管；试样：水溶C100。

3.3试剂：Vc标准溶液，草酸溶液，乙二胺四乙酸二钠，乙酸溶液，固蓝盐B溶液；仪器：三角瓶，天平，烧杯，玻璃棒，漏斗，滤纸，容量瓶，容量吸管，移液管；试样：水溶C100。

4 实验内容

4.1 灰化

操作：

坩埚恒重处理：取大小适宜的瓷坩埚置于高温炉中，600℃下灼烧0.5h，冷却至200℃以下后，取出，放入干燥器中冷却至室温，精密称量，并重复灼烧至恒重。

样品预灰化

准确称取坩埚质量m1=91.8425g，称取样品于坩埚中，称量样品与坩埚总重m总=96.8716g，在电炉上先以小火加热使样品充分炭化至无烟。

样品正式灰化

将炭化后的样品置于灰化炉中，在600℃灼烧至无碳粒，由于灰化时间较长，在炭化后的样品中加入一定量的浓硝酸，灼烧至无碳粒白灰色即灰化完全。冷却至200℃以下，取出放入干燥器中冷却至室温，称量。重复灼烧至前后两次称量之差不超过0.5mg为恒重，称其重量m灰化。

4.2样品测定：

称取样品5g，经灰化，并定容至100ml，制成灰化液，吸取三个10.00ml 灰化液于比色管中，加入1ml抗坏血酸和2ml显色剂并定容至25ml,混匀，60℃水浴下加热15分钟后冷却。将各比色管中的有色溶液依次注入比色皿中，以“0”管溶液为参比溶液，在520nm下，测其吸光度值。

4.3二氯酚靛酚操作

4.3.1二氯酚靛酚浓度的标定

吸取5.00mlVc标准溶液→三角瓶+5ml10g/L草酸溶液→以2，6——二氯酚靛酚→终点微红色，记V（n=3）

4.3.2样品中Vc的测定：吸取5ml样液于三角瓶+5ml10g/L草酸溶液→以2，6——二氯酚靛酚→终点微红记V

4.4固蓝盐B操作

4.4.1标准曲线绘制：吸取0、0.4、0.8、1.2、1.6、2.0抗坏血酸标准溶液（100µg/mol）分别置于25ml比色管中，各加2ml乙二胺四乙酸二钠溶液（35g/l）0.5ml乙酸溶液（2%）0.2ml固蓝盐B溶液（2g/l），加水稀释至刻度，混匀，室温（20--25℃）放置20分钟后，移入1cm比色皿内，以“0”管为参比于波长420nm处测定吸光度，以标定各点吸光度，绘制标准曲线。

4.4.2 试样测定：吸取试样

5.0ml置于25ml比色管中，按标准曲线绘制中自“2ml乙二胺四乙酸二钠溶液”起依次操作，试样吸光度从标准曲线上查出抗坏

血酸含量.

5 数据处理与计算

5.1原始数据：

铁的测定：n=3，0.386 0.356 0.360

铁的标准曲线

00.20.40.60.8

10

1

234

5

铁的浓度/ug(mL)-1吸光度

标准曲线方程为：

Vc 的测定：

2，6——二氯酚靛酚法

2,6—二氯酚靛酚浓度的标定体积消耗量

V 2,6—靛酚精1 V 2,6—靛酚精2 V 2,6—靛酚精3 体积(mL)

4.96 4.32 4.80

测定样液是时消耗2,6—二氯酚靛酚体积

V 2,6—靛酚样精1 V 2,6—靛酚样精2 V 2,6—靛酚样精3 体积(mL) 12.64

12.68

12.58

y=0.2132x+0.0118

R 2=0.9993

固蓝盐B 法 体积（ml ） 0 0.4 0.8 1.2 1.6 2.0 吸光值 0.676

0.708

0.855

0.873

1.018

1.063

固蓝盐B标准曲线

y = 0.2059x - 0.0164

R 2

= 0.9642

-0.0500.05

0.10.150.20.250.30.350.40.45

0.5

1 1.52

2.5毫升（ml）

吸光值（A ）

标准曲线方程 5.2计算 5.2.1铁的测定

3

10100

X m g /100g;

——ug /m l;——g 4.9717g ——m l;100——m l 10m l

C X m V V m l -⨯=

⨯⨯===C m V V 样样测

定

样样定测——样品中铁的含量，测定用液中铁的浓度（由标准曲线查出），样品的质量，；样品定容的体积，测定用液的体积，

y=0.2132x+0.0118