糖类、蛋白质、脂肪的鉴定
检测生物组织中糖类脂肪和蛋白质的方法
检测生物组织中糖类脂肪和蛋白质的方法糖类的检测方法：1.放射免疫法：利用放射性同位素标记的抗体或反应物与目标糖类结合，通过测量放射同位素的放射性强度来定量糖类。
2.高效液相色谱法：利用高效液相色谱仪将样品中的糖类分离，并通过检测器测定糖类的浓度。
3.还原糖法：通过还原糖的特性，将还原糖与试剂反应生成有色化合物，通过测量其吸光度来定量糖类的浓度。
4.酶法：利用具有特异性的酶针对特定的糖类进行酶解反应，生成可测定的产物，通过检测产物的浓度来定量糖类。
脂肪的检测方法：1.水解法：将样品中的脂肪水解为脂肪酸和甘油，再通过酶法或化学法测定脂肪酸或甘油的浓度。
2.胆固醇氧化酶法：利用脂肪样品中的胆固醇通过酶催化反应生成可测定的产物，通过测量产物的浓度来定量脂肪。
3.紫外吸收法：利用脂肪样品中的化学结构特性，通过紫外光谱测量脂肪的吸光度来定量脂肪的含量。
4.气相色谱法：通过气相色谱仪将样品中的脂肪分离，并通过检测器测定脂肪的浓度。
蛋白质的检测方法：1.低里氏法：利用低里氏试剂与蛋白质发生反应，形成可测定的复合物，通过测量复合物的吸光度来定量蛋白质的浓度。
2.高效液相色谱法：利用高效液相色谱仪将样品中的蛋白质分离，并通过检测器测定蛋白质的浓度。
3.毛细管电泳法：将样品中的蛋白质在电场作用下在毛细管中分离，根据蛋白质的电荷、大小和形状的差异来测定蛋白质的浓度。
4.射流显色法：利用射流试剂将蛋白质样品中的蛋白胺基酸与试剂反应生成有色产物，通过测量产物的吸光度来定量蛋白质的浓度。
需要注意的是，以上方法中的每一种都有其适用范围和局限性，具体选择方法时需根据实验要求、样本特性和实验设备等因素进行合理选择。
此外，还可结合多种方法进行确认和校准以提高检测结果的准确性和可靠性。
检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
考点三 （实验）检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质（5年6考）检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质1.检测原理(1)糖类的检测(2)脂肪的检测：脂肪＋⎩⎨⎧苏丹Ⅲ染液―→橘黄色苏丹Ⅳ染液―→红色 (3)蛋白质的检测：蛋白质＋双缩脲试剂―→紫色2.实验步骤3.实验成功关键点(1)三个实验中都不宜选取有颜色的材料，否则会干扰实验结果的颜色变化。
(2)由于苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液易溶于酒精，故可用体积分数为50%的酒精洗去浮色。
(3)蛋白质鉴定中，若用大豆作材料，必须提前浸泡；若用蛋清作材料，必须稀释，防止其黏在试管上不易刷洗。
(4)物质鉴定实验一般可预留部分样液作对照实验，若需进一步设立对照实验，对照组应加入成分已知的物质，如验证唾液淀粉酶是蛋白质，对照组可加入稀释的鸡蛋清溶液。
1.下图是检测还原糖的实验(1)如下图示的处理，2 min后试管内将呈现何种颜色？试加以分析说明。
(2)向某试管内无色液体中加入斐林试剂，经加热若出现砖红色沉淀，则表明试管内含有葡萄糖，对吗？提示(1)应为蓝色(斐林试剂的颜色，因未经水浴加热，只有将试管置于50～65 ℃温水中，经水浴加热后，方可呈现“砖红色沉淀”)。
(2)不对。
只能证明含有“还原糖”，不能具体证明是哪种还原糖。
2.下图为某种物质鉴定方案，请推测：(1)图示的实验方案用于鉴定何类物质，其中“某试剂”是什么？A液、B液分别指什么？(2)若溶液中有被检测物质则右侧试管“摇匀后”变成何种颜色？提示(1)蛋白质及多肽化合物；双缩脲试剂；A为0.1 g/mL NaOH溶液；B为0.01 g/mL CuSO4溶液。
(2)紫色。
糖类、脂肪与蛋白质的检测1.(2016·海南卷，15)下列实验中，加入试剂后不能产生特定颜色的是()A.取成熟香蕉匀浆，用斐林试剂检测还原糖B.黑暗中生长24 h的天竺葵叶片，用碘液检测淀粉C.玉米根尖经甲基绿染色后，在显微镜下观察细胞核D.花生子叶经苏丹Ⅲ染色后，在显微镜下观察脂肪颗粒解析成熟香蕉中含有较多葡萄糖，用斐林试剂检测会出现砖红色沉淀；黑暗中生长24 h的天竺葵叶片，淀粉被消耗，加入碘液不会产生蓝色；玉米根尖经甲基绿染色后，在显微镜下观察细胞核呈绿色；花生子叶经苏丹Ⅲ染色后，在显微镜下观察脂肪颗粒呈橘黄色。
检测生物组织中的糖类、脂肪、蛋白质(教学案]
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检测生物组织中的糖类、脂肪、蛋白质(教学案]
1. 糖类检测：可以采用苏丹红反应法和不定量蓝色磷钼酸法。
苏丹红反应法基于苏丹红与糖类产生的红色复合物，颜色深浅程度可以反映糖类的含量；不定量蓝色磷钼酸法则是利用蓝色磷钼酸与糖类生成蓝色复合物，再根据颜色深浅程度进行糖含量的定量。
2. 脂肪检测：可以采用苏丹三染色法和乙醇提取法。
苏丹三染色法是将组织切片染色，然后进行显微镜观察，染色深的部位表示脂肪含量高；乙醇提取法是用乙醇将脂肪溶解，然后通过温度恒定、有机溶剂飘移法进行脂肪量的测定。
3. 蛋白质检测：可以采用比色法和光度法。
比色法根据蛋白质与某种化学试剂生成的色素深度，来反映蛋白质的含量；光度法则是利用蛋白质与特定光源产生的光学反应，通过光密度来测定蛋白质含量。
需要注意的是，具体选择哪种检测方法要根据样本的类型和检测的目的确定。
同时，检测前要进行适当的样本处理和前处理，以保证检测的准确性和重复性。
检测生物组织中的糖类脂肪和蛋白质实验报告
检测生物组织中的糖类脂肪和蛋白质实验报告实验报告：检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质一、实验目的本实验旨在通过生化实验的方法，检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质，以了解这些物质在生物组织中的分布和含量，为生物组织代谢研究提供基础数据。
二、实验原理1.糖类检测：糖类物质在生物组织中广泛存在，包括单糖、低聚糖和多糖。
其中，还原性糖如葡萄糖、果糖等可与斐林试剂发生氧化还原反应，产生砖红色沉淀。
非还原性糖如淀粉、纤维素等则不能与斐林试剂反应。
2.脂肪检测：脂肪是生物组织中重要的储能物质。
在酸性条件下，脂肪可被脂酶分解为脂肪酸和甘油，脂肪酸可与热硫酸反应生成硫酸酯，产生绿色荧光。
3.蛋白质检测：蛋白质是生物组织中功能多样性的基础。
在碱性条件下，蛋白质可与双缩脲试剂发生紫色反应。
三、实验步骤1.准备试剂和样品：分别准备斐林试剂、脂酶、硫酸、双缩脲试剂；选取具有代表性的生物组织样品，如动物肝脏、植物叶片等。
2.制备样品溶液：将生物组织样品研碎，加入适量溶剂制成样品溶液。
3.检测糖类：取样品溶液适量，加入斐林试剂，加热至沸腾，观察颜色变化。
4.检测脂肪：取样品溶液适量，加入脂酶，在酸性条件下加热一定时间，加入热硫酸，观察颜色变化。
5.检测蛋白质：取样品溶液适量，加入双缩脲试剂，搅拌均匀，观察颜色变化。
四、实验结果与分析1.实验结果：通过上述实验步骤，我们得到了生物组织中糖类、脂肪和蛋白质的检测结果。
具体数据如下：2.结果分析：从实验结果可以看出，该生物组织中糖类含量较高，这可能与该生物组织的能量需求有关；脂肪含量相对较低，这可能与该组织的生理功能有关；蛋白质含量适中，表明该组织具备一定程度的生物活性。
此外，通过对不同物质含量的比较分析，我们可以初步推断该生物组织的代谢类型和生理功能。
五、结论本实验通过生化实验方法成功地检测了生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质含量，得到了较为可靠的实验数据。
这些数据为进一步研究生物组织的代谢过程提供了基础资料。
细胞中糖类、蛋白质、脂肪的鉴定实验
蔗糖
2 紫色 3、实验结论：淀粉遇碘变蓝色。
淀粉
2 蓝色
鉴定还原性糖
1、材料用具 2mL 稀释的唾液
2
蓝色
2
蓝色
2
砖红色沉淀
3、实验结论：糖类中的可溶性还原性糖与斐林试剂发生
作用，在水浴加热时生成砖红色沉淀。
实验：脂肪的鉴定
实验原理：脂肪易被苏丹Ⅲ染成橘黄色。 1、材料用具（见教材P19）
细胞中糖类蛋白质脂肪的鉴定实验蛋白质会转化成脂肪吗高蛋白质低脂肪食物花生中蛋白质和脂肪蛋白质脂肪碳水化合物蛋白质能转化成脂肪吗蛋白质转化成脂肪先消耗脂肪还是蛋白质蛋白质脂肪蛋白质转化脂肪
第 二 节
细胞中糖类、脂肪及蛋白质的 鉴定实验
主讲： 刘乔顺老师
实验：鉴定生物组织中的糖类
实验原理：淀粉遇碘变蓝色，糖类中的可溶性 还原性糖（如葡萄糖、果糖、麦芽糖、乳糖 等），与斐林试剂发生作用，在水浴加热时生 成砖红色沉淀。 实验目的：学会鉴定生物组织中的成分。 一、鉴定淀粉(参考教材) 1、材料用具 2、方法步骤
2、方法步骤
制作装片
徒手切片 材料染色 显微镜观察
漂洗浮色
（使用体积分数为50%的酒精）
3、实验结论：脂肪可被苏丹Ⅲ染成 橘黄色。
边学边做
鉴定蛋白质
• 原理：蛋白质与双缩脲试剂反应呈紫色 操作： １．取材: 取一支洁净试管,加入2 ml组织 样液（黄豆研磨液，蛋清稀释液） ２．加双缩脲Ａ液（０.１g／ml的NaOH溶 液）：２ml 震荡后观察颜色 ３．加双缩脲Ｂ液（０.０１g/ml 的CuSO４ 溶液 ）：３－４滴．震荡 • ４.观察颜色变化 ５.结论： 大豆和蛋清中都含有蛋白质
糖类、蛋白质、脂肪的鉴定
1.实验原理
生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定
实验原理
鉴定物质 还原性糖
脂肪
蛋白质 淀粉
试剂 斐林试剂
苏丹Ⅲ 苏丹Ⅳ 双缩脲试剂
碘
实验现象
砖红色沉淀 橘黄色 红色 紫色 蓝色
方法步骤： 1．实验材料、仪器和试剂的选择 2．设计记录表格，记录预测结果 3．检测的方法步骤 (1)还原糖的检测和观察; (2)脂肪的检测和观察; (3)蛋白质的检测和观察;
D、使用斐林试剂和双缩脲试剂最好是现配现用
第二章组成细胞的分子 网络构建
蛋白质的结构和功能
细胞的分子组成
核酸的结构和功能
水和无机盐的作用
糖类的种类和作用
脂质的种类和作用
C、H、O、N 种类
20种
氨基酸 脱水缩合 多肽 化学键名称 肽键
氨基酸种类、数目、排列顺序、空间结构
蛋白质结构的多样性
蛋白质7~10%
显微观察：先在低倍镜下找到已着色的薄片，后用高倍镜观察
现象：有被染成橘黄色(或红色)的脂肪微粒
脂肪的检测结果
3.蛋白质的鉴定
选材与制备 黄豆组织样液（或鸡蛋蛋清稀释液） 组织样液：［黄豆浸泡 →去皮→切片→研磨→过滤→滤液］
显 色 反 应 现象：
(创设碱性条件)
(提供Cu2+)
无色
紫色或紫红色
而后立即使用。
砖 红 色 沉
0.05g/mL
淀
在碱性
NaOH 浓度为
蛋白质 的鉴定
双缩脲试 剂NaOH和
CuSO4
环境下 的Cu2+
0.1g/mL
CuS04 浓度为
先加入Na0H 1mL，然后 再加CuS04 4滴，摇匀。 (不能过量)
检测糖类,脂肪,蛋白质的实验步骤
检测糖类,脂肪,蛋白质的实验步骤嘿，朋友们！今天咱来聊聊怎么检测糖类、脂肪和蛋白质这三样东西。
这可有意思啦，就像一场小小的科学探秘之旅呢！先来说说糖类吧。
想象一下，糖类就像是我们身体的小能量包。
那怎么检测它呢？我们可以用斐林试剂呀！就像个神奇的小侦探，能把糖类给找出来。
先取点样本溶液，然后滴入斐林试剂，接着把它放在热水里稍微煮一下。
嘿，要是溶液变成砖红色沉淀了，那就说明有糖类在里面啦！这就好比是找到了隐藏的宝藏一样让人兴奋呢！再讲讲脂肪。
脂肪啊，就像是我们身体的小仓库，储存着能量呢。
检测脂肪可以用苏丹染液哦！把样本处理一下，滴上苏丹染液，要是看到出现了橘黄色或者红色，哈哈，那就是脂肪啦！这感觉就像在茫茫人海中一下子认出了那个特别的人一样。
最后说说蛋白质。
蛋白质可是我们身体的重要组成部分呢，就像建筑的基石。
检测蛋白质要用双缩脲试剂哦！取样本，加试剂，要是溶液变成紫色啦，那就是蛋白质在向我们打招呼呢！这就像是看到了夜空中最亮的星一样显眼。
检测这些东西可真是个有趣的过程啊！就好像我们在和这些小小的物质玩捉迷藏，然后通过一些巧妙的方法把它们一个个找出来。
这多有意思呀！想想看，如果我们不知道这些方法，那岂不是像在黑暗中摸索一样？但有了这些检测方法，就像是点亮了一盏明灯，让我们能清楚地看到这些物质的存在。
在生活中，我们经常会接触到各种食物，了解这些检测方法，就能更好地知道我们吃进去的东西里面都有什么。
这不仅能满足我们的好奇心，还能让我们更加科学地饮食呢！比如说，我们可以检测一下自己喜欢吃的食物里有没有很多糖类或者脂肪，然后根据自己的需要来调整饮食。
这不是很棒吗？所以啊，朋友们，学会这些检测糖类、脂肪和蛋白质的实验步骤，就像是掌握了一把打开科学之门的钥匙。
让我们一起在这个奇妙的科学世界里尽情探索吧！不用去管那些复杂的名词和术语，就用我们最平常的心态去感受，去发现。
这就是科学的魅力呀，它就在我们身边，等着我们去挖掘呢！。
糖类脂肪蛋白质的鉴定
VS
脂肪
是长期能量储存的形式，通过β-氧化产生 ATP。
生物功能比较
• 蛋白质：在能量需求增加时可以作为能量来源，通过脱氨基产生ATP。
生物功能比较
01
糖类
是细胞膜和细胞壁的重要组成成 分。
02
03
脂肪
蛋白质
是生物膜的组成成分，并参与信 号转导。
是细胞的主要结构成分和功能执 行者，参与细胞运动、物质运输、 催化反应等。
脂肪
由碳、氢、氧组成，是脂类。
化学性质比较
• 蛋白质：由碳、氢、氧、氮、硫组成，是 氨基酸的聚合体。
化学性质比较
糖类
单糖之间通过糖苷键连接，如α-1,4-糖苷键和α-1,6-糖苷键。
脂肪
脂肪酸之间通过酯键连接。
蛋白质
氨基酸之间通过肽键连接。
物理性质比较
要点一
糖类
易溶于水，尤其是单糖和低聚糖。
要点二
酸水解法
03
将样品中的糖类物质在酸的作用下水解成单糖，再通过化学反
应进行鉴定。
物理鉴定
色谱法
利用色谱柱将糖类物质与其他物质分 离，通过检测器检测糖类物质的峰， 判断糖的存在。
红外光谱法
利用红外光谱技术检测样品中糖类物 质的特征吸收峰，判断糖的存在。
生物鉴定
酶法
利用酶与糖类物质反应，生成可被检测的产物，通过检测产物判断糖的存在。
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酯化反应
脂肪分子中的羧基可以与醇发生酯化反应，生成 酯类化合物，通过测定酯的生成量，可以判断脂 肪的存在。
物理鉴定
折射率法
脂肪分子中含有大量的碳、氢等元素， 对光线的折射率较高，可以通过测定 折射率的大小来判断脂肪的存在。
糖类脂肪蛋白质的鉴定
③刀口向内，与花生断面平行，以均匀的动作，
自左前方向右后方快速拉刀，滑行切片（注意 要整个臂部用力，而不要腕部用力。）如此连
续动作，切下一些薄片。
（2）染色
用毛笔将最 薄的几片材料移至洁净的载玻片的 中央→滴苏丹Ⅲ溶液2-3滴于花生子叶薄片上→21min后，吸去染液→滴50%的酒精洗去浮色→吸去 多余酒精→再滴1-2滴蒸馏水→盖上盖玻片，制成 临时装片。
R—CHO+2Cu(OH)2→R—COOH+Cu2O↓+2H2O
2.实验材料
做可溶性还原糖的鉴定实验，还原糖 的含量、生物组织有无色素是影响实验结 果及其观察的最重要因素。
因此要选用可溶性还原糖含量高、 白色或近于白色的植物组织，其中以 苹果、梨最好，也可用白萝卜替代。
3.试剂配制 甲液（0.1g/mL的氢氧化钠溶液）
2.实验材料 做蛋白质的鉴定实验，一般选用蛋白质
含量较高的大豆(可用豆浆替代）或鸡蛋清。 3.试剂配制
A液（0.1g/mL的氢氧化钠溶液） 双缩脲试剂
B液（0.01g/mL的硫酸铜溶液）
4.实验步骤：
（1）制备生物组织样液（教师制备） （2）鉴定
先加 2mL组 织样液
再加 2mL双 缩脲试 剂A液
（3）镜检鉴定
在低倍镜下观察，找到花生子叶切片的 最薄处（最好只有1-2层细胞），移至视野 的中心→换用高倍镜观察，调焦至最清晰。 可发现细胞内橘黄色的圆形小颗粒，这就是 脂肪滴（油滴）。若发现观察物外围也有许 多橘黄色小颗粒，则是脂肪跑了出来。
脂肪检测实验的实验结果
若用物理方法如何鉴定脂肪的存在?
斐林试剂 乙液（0.05g/mL的硫酸铜溶液）
甲液乙液等量混合，现用现配， 切不可分开滴加，或者久置后 才用。
糖类脂肪蛋白质的检测
橘黄色
脂肪+苏丹IV染液
红色
B:实验步驟 选材:花生种子最好,浸泡.
制备样品:花生去皮------切薄片.
鉴定:
d 显微镜观察
c 制片
花生切片
b 50%酒精漂洗 a 苏丹III染色
实验现象:脂肪+苏丹III染液
橘黄色
脂肪+苏丹IV染液
红色
显微镜
三 、 蛋白质的鉴定
A: 实验原理： 蛋白质+双缩脲试剂
四、淀粉的检测与观察
淀粉遇碘变蓝
紫色反应
B: 实验步驟:
选择:大豆豆浆或鸡蛋蛋白(稀释) ,鲜肝提取液.
制备样液: 大豆----研磨------过滤
鉴定步驟:
0.01 g/ml的CuSO4溶液
b 再加双缩脲试剂B液
a 先加双缩脲试剂A液
0.1 g/ml的NaOH溶液, 先为实验制造碱性环境.
豆浆
蛋白质与双缩脲试剂发生作用，产生紫色反应
斐林试剂的本质是Cu(OH)2 的悬浊液，还原糖 把 Cu(OH)2 还原成Cu 2 O 沉淀。
NaOH + CuSO4
Cu(OH)2 蓝色沉淀 + … …
Cu(OH) 2 + 还原糖
Cu 2 O 砖红色沉淀 + … …
3.为什么要用新配制的试剂？ 因为斐林试剂稳定性较差，要现用现配，混合使用。
二、脂肪的鉴定 A:实验原理: 脂肪+苏丹III染液
① B液要求量适中，否则多余的B液将会与A液发生反应生 成Cu(OH)2显色而遮盖原有的颜色。
②鉴定前，留出一部分组织样液，以便对比
③用于蛋白质鉴定的蛋清必须稀释，以免实验后粘住试管 壁，不易洗刷
实验：检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
思考：
1.为什么加入斐林试剂甲液和斐林试剂乙液 时必须混合后再加入？ 因为若先加入NaOH溶液，还原性糖中的还 原性半缩醛羟基易被氧化而失去还原性， 再加入CuSO4溶液后不能产生Cu2O砖红色 沉淀，只有将其先配成Cu(OH)2悬浊液， 才可产生砖红色沉淀。
6
2.斐林试剂甲液和乙液既然混合后使 用，为什么不能在实验前配制好，一 定要使用时临时配制？
2
二.目的要求：
尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、 脂肪和蛋白质
三.实验过程:
1、还原糖的检测和观察： 选材 应该选择含 糖 量高.颜色为 白色或近于白色 的植物组织， 以苹果.梨为最好。
制备组织样液：制浆 过滤
用一层纱布
取液
3
注入2mL 苹果组 呈色反应 织样液
振荡、混 合摇匀呈 现蓝色
注入1mL刚配制好的 斐林试剂 甲乙液等量混匀现配现用
B液要求量适中，否则多余的B液将会与A液发生反应生成大 量蓝色Cu(OH)2沉淀而遮盖试验中所产生的紫色。同样为了防 止生成较Cu(OH)2沉淀遮蔽实验结果，在配制溶液时，双缩脲试剂B比
斐林试剂乙液浓度小得多，这也是斐林试剂和双缩脲试剂不能互换使用的道 理。 ② 鉴定前，留出一部分组织样液，以便对比。 13 ③用于蛋白质鉴定的蛋清必须稀释，以免实验后粘住试管壁，不易洗刷
水浴加热约2min 变成砖红色 50----650C的温水
结论：可溶性还原糖与斐林试剂在加热的过
程中生成砖红色沉淀，说明植物组织 样液中含有还原糖。
4
注意事项： ①还原糖有 葡萄糖，果糖，麦芽糖 。 ②试剂： 斐林试剂 . （甲液：0.1g/ml 的 NaOH , 乙液：0.05g/ml的 CuSO4 .） 甲乙液必须 等量混合均匀 后再加入样 液中， 现配现用 。 ③必须 用水浴加热 。 ④颜色变化： 浅蓝色 棕色 砖红色
检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
约2min50~65℃水浴加热三、检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质1.实验原理：某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。
①还原糖+斐林试剂———————>砖红色沉淀②淀粉+碘液→蓝色③脂肪+苏丹Ⅲ（或苏丹Ⅳ）→橘黄色（或红色） ④蛋白质+双缩脲试剂→紫色2.实验步骤及实验现象：①还原性糖鉴定：取材→制备组织样液→加斐林试剂1ml →水浴加热煮沸→显色（浅蓝色→棕色→砖红色沉淀） ②淀粉鉴定：取材→制备组织样液（马铃薯匀浆）→滴加碘液→摇匀后变成蓝色③脂肪鉴定：方法一：取材与制备组织样液（花生种子匀浆）→滴加苏丹Ⅲ（苏丹Ⅳ）→摇匀后变成橘黄色（红色） 方法二：取材、切片、制片：花生种子浸泡，将子叶切成薄片→滴加苏丹Ⅲ（或苏丹Ⅳ）→用50%酒精洗去浮色→镜检（看到橘黄色或红色的脂肪颗粒）④蛋白质鉴定：取材→制备组织样液（豆浆或蛋清稀释液）→加双缩脲试剂A 液1ml →摇匀→加双缩脲试剂B 液4滴→观察颜色（紫色）3.实验注意事项：（1）从植物器官中提取糖类、脂肪、蛋白质的方法：设法使细胞破碎（如研磨、挤压或切割等），再将这些物质提取出来。
（2）禾谷类的果实、种子中含淀粉较多；甘蔗的茎和甜菜的根含蔗糖较多；花生、芝麻的种子中含脂质较多；大豆种子中含蛋白质较多。
（3）显色反应材料选择时要注意：①材料本身应浅色，以免对实验结果的观察产生干扰； ②材料应含有丰富的相关物质，使现象更显著。
（4）还原性糖鉴定①常见的还原糖有葡萄糖、果糖、半乳糖、麦芽糖、果糖、乳糖等。
②实验材料要选含还原性糖量高，白色或近于白色的组织，如苹果和梨的匀浆。
③不能选用甜菜、甘蔗，因为它们所含的蔗糖属于非还原性糖。
④马铃薯含淀粉较多，也不能作为该实验材料。
⑤西瓜、血液、绿色叶片等材料本身的颜色会对实验结果造成干扰，也不能作为该实验材料。
⑥斐林试剂实际上是Cu(OH)2的悬液，不稳定，如果长时间放置，Cu(OH)2悬液会变成Cu(OH)2沉淀，不易和还原糖发生反应。
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生物组织中糖类脂 肪和蛋白质鉴定
精选课件
1
思考题：
1、糖类、脂肪、蛋白质鉴定的实验原理
2、常见的还原糖有哪些？取材的要求
3、斐林试剂的组成，使用时的注意事项
4、双缩脲试剂的组成，使用时注意事项
5、斐林试剂和双缩脲试剂的比较
6、脂肪鉴定中酒精的用法和作用
7、脂肪鉴定中能否直接观察颜色？借助 什么来观察？
注：①样液浓度不宜过高，以免实验后黏住试 管壁，洗不干净。
②B液不能过量，多余的B液会与A液反应成
蓝色，而掩盖生成的精紫选课件色。
10
5.比较斐林试剂和双缩脲试剂
0.1g/mL 0.05g/m 同甲液 0.01g/m
NaOH LCuSO4
LCuSO4
还原性糖 蛋白质
等量混合后 先加A液1mL，摇匀
先加双缩脲试剂A液1mL， 摇匀，再加双缩脲试剂B 液4滴
不需加热，摇匀即可
砖红色沉精淀选课件
紫色络合物 21
蛋白质的鉴定原理：
蛋白质与双缩脲试剂发生作用，产生紫 色反应。
蛋白质分子中含有很多肽键，
在碱性溶液（即A液可造成碱性 环境）中能与双缩脲试剂中Байду номын сангаас Cu2+作用，产生紫色络合物。
精选课件
22
注意事项：（1）材料的选取：还原糖含
量高，白色或近于白色，如苹果 》 梨 》
白萝卜。
思考：西瓜、甘蔗、甜菜可以吗？为什
么？
（2）试剂：斐林试剂(等量混合、现配现
用)
甲液：0.1g/mL的NaOH溶液
乙液：0.05g/ml的CuSO4溶液
精选课件
7
4、双缩脲试剂组成，使 用时注意事项
精选课件
8
（1）蛋白质 + 双缩脲试剂 → 紫色
成砖红色的Cu2O沉淀。
（放在盛有50-65℃温水的大烧杯）
颜色变化：浅蓝色 棕色 精选课件
砖红色 5
1步骤：
样液制备:（取材5g，加入石英砂和 5ml水 ）
(1)取样液2ml于试管中 ( 2 ) 加入新配制的斐林试剂1ml（甲液
和乙液等量混合均匀后再加入）盛有 50-65℃温水的大烧杯）
(3)水浴加热2min左右(（4）观察颜色 变化（浅蓝色→棕精选课色件 →砖红色） 6
此课件下载可自行编辑修改，此课件供参考！ 部分内容来源于网络，如有侵权请与我联系删除！感谢你的观看！
①取材： 取一粒浸泡过的花生种子，去掉种皮
②切片
③制片：（切片越薄越好）将最薄的花生切片放在 载玻片中央
④染色：滴2～3滴苏丹Ⅲ染液，染色3min，用吸 水纸吸去染液，再滴体积分数50%的酒精洗去浮 色，再用吸水纸吸去多余的酒精（苏丹Ⅲ易溶于 酒精中，避免影响实验结果），滴1～2滴清水于 材料切片上→盖上盖玻片
• Cu(OH)2氧化， Cu(OH)2被还原 成砖红色的Cu2O沉淀
精选课件
20
5.比较斐林试剂和双缩脲试剂
0.1g/mL的 NaOH溶液
0.05g/mL 0.1g/mL 的CuSO4 的NaOH
溶液
溶液
0.01g/m LCuSO4 溶液
还原性糖
蛋白质
甲液和乙液等量混 合均匀后再加入
50-65℃水浴加热
CC．将斐林试剂的甲液和乙液混合均匀后再加
D．以上A、B、C三种操作方法都正确
7.鉴定蛋白质样品时加双缩脲试剂正确做
法是
AA．先加A液，混合后再加B液摇匀观察
B．先加B液，混合后再加A液摇匀观察
C．A、B液混合后加入，摇匀后观察
D．A、B液同时加入样液，摇匀后观察
精选课件
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还原糖的鉴定原理：
• 即：还原糖中的醛基（–CHO ）被
再加入
，
50-65℃水浴加热 再不加需B液加4热滴 ，摇匀
砖红色沉精淀选课件
紫色络合物 11
6、脂肪鉴定中酒精的用 法和作用
7、脂肪鉴定中能否直接 观察颜色？借助什么来 观察？
精选课件
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3.脂肪+苏丹Ⅲ→橘黄色 脂肪+苏丹Ⅳ→红色
精选课件
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（2）步骤
材料的选取：含脂肪量高的组织，如花生的子叶。
⑤镜检观察：光学显微镜对光→低倍镜寻找着色圆 形小颗粒→高倍镜观察精选染课件成橘黄色的脂肪颗粒14
8、如何鉴定淀 粉，颜色反应 如何
精选课件
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4、淀粉 + 碘→蓝色
用试管取2mL待测组织样液，向试管 内滴加1～2滴碘液，观察颜色变化 。
加1~2滴碘液
精选课件
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1.鉴定生物组织中可溶性还原糖的试剂
半乳糖) 注意：蔗糖不是还原糖
3、斐林试剂的组成，使用时注意事项
斐林试剂：甲液：0.1g/mL的NaOH溶液
乙液：0.05g/mL的CuSO4溶液
• 使用注意事项：等量混合，现配现用
（ NaOH+CuSO精4选）课件
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1.点拨：
还原糖 + 斐林试剂
水浴 加热
砖红色沉淀
可溶性还原糖与斐林试剂发生作用，可生
AA．斐林试剂
C．苏丹Ⅲ染液
B．双缩脲试剂 D．苏丹Ⅳ染液
2.能与斐林试剂反应产生砖红色沉淀的是
A．淀粉 BB．果糖 C．蔗糖 D．纤维素
3.下列哪个实验用到显微镜（ C）
A可溶性还原糖的鉴定 B．蛋白质的鉴定
C．脂肪的鉴定 D．淀粉的鉴定
精选课件
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4.用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时，溶
液颜色的变化过程为（ D） A．无色一砖红色（沉淀）
双缩脲试剂组成： A液：0.1g/mL的NaOH溶液 B液：0.01g/mL的CuSO4溶液
使用注意事项： 先加A液1mL于样液中， 再加B液4滴于样液中
精选课件
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2步骤：
（1）试管中加样液2mL （ 2 ） 加双缩脲试剂A液1mL（造成碱性环 境
），摇匀
（3）加双缩脲试剂B液4滴，摇匀 （4）观察颜色变化（紫色）
8、如何鉴定淀粉，精颜选课色件 反应如何
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1.实验原理：
化学试剂+有机化合物→特定的颜色
(1) 还原糖 + 斐林试剂 水浴加热砖红色 沉淀 (2) 脂肪+苏丹Ⅲ→橘黄色
脂肪+苏丹Ⅳ→红色 (3) 蛋白质 + 双缩脲试剂 → 紫色
精选课件
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2、常见的还原糖有哪些？取材的要求
还原糖：可被氧化充当还原剂的糖。 (常见的有：葡萄糖、果糖、麦芽糖、乳糖、
B．浅蓝色一砖红色（沉淀）
C．浅蓝色一蓝色一砖红色（沉淀）
D．浅蓝色一棕色一砖红色（沉淀）
5.下列物质中，能被苏丹IV染液染成
红色的是（ ） B
A马铃薯块茎 B．浸软的蓖麻种子
C．蛋清液 D．苹果
精选课件
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6.还原糖的实验中，加入斐林试剂时必须要 A．先加入斐林试剂甲液，后加入乙液 B．先加入斐林试剂乙液，后加入甲液