α-淀粉酶活性的测定呢

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1.α-淀粉酶抑制剂对PPA 活性的抑制作用

分别取浓度为0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mg/mL 的柚皮素溶液0.05mL

(溶于水)与0.2 mL PPA 溶液(0.33 U/mL,溶于pH 6.8 磷酸盐缓

冲液)混匀在37 ℃水浴反应20 min。对照组溶液则以0.05 mL水与0.2

mL PPA 溶液进行反应。在反应液中加入1mL 1 %可溶性淀粉溶液,继

续37 ℃水浴10 min 后,加入1.5 mL DNS 显色剂,混匀,置于沸水

浴中5 min。然后,冷却至室温,定容至25 mL,540 nm 下测定吸光。

空白是1.25ml水加上1.5mlDNS,定容至25ml,在A540nm下测吸光值根

据下式计算柚皮素对PPA 活性的抑制率:抑制率(%)=[(ΔA 对照-

ΔA 样品)/ΔA 对照]×100%注:ΔA 对照=A 对照-A 对照空白,

ΔA 样品=A 样品-A 样品空白

反应液中加入 1.5mL

1 %可溶性淀粉溶液

继续37 ℃水浴10

min 后,加入 1.5

mlDNS 显色剂,混匀,置于沸水浴中5 min。然后,冷却至室温,定

容至25 mL,540 nm 下测定吸光。空白是1.25ml水加上1.5mlDNS,

定容至25ml,在A540nm下测吸光值

一、实验步骤:取试管5个,并分别编号,按下表加入药品

再从标准曲线中查出还原糖的含量,以1/V为纵轴,1/S为横轴做直

角坐标。

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