α-淀粉酶活性的测定呢
合集下载
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
1.α-淀粉酶抑制剂对PPA 活性的抑制作用
分别取浓度为0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mg/mL 的柚皮素溶液0.05mL
(溶于水)与0.2 mL PPA 溶液(0.33 U/mL,溶于pH 6.8 磷酸盐缓
冲液)混匀在37 ℃水浴反应20 min。对照组溶液则以0.05 mL水与0.2
mL PPA 溶液进行反应。在反应液中加入1mL 1 %可溶性淀粉溶液,继
续37 ℃水浴10 min 后,加入1.5 mL DNS 显色剂,混匀,置于沸水
浴中5 min。然后,冷却至室温,定容至25 mL,540 nm 下测定吸光。
空白是1.25ml水加上1.5mlDNS,定容至25ml,在A540nm下测吸光值根
据下式计算柚皮素对PPA 活性的抑制率:抑制率(%)=[(ΔA 对照-
ΔA 样品)/ΔA 对照]×100%注:ΔA 对照=A 对照-A 对照空白,
ΔA 样品=A 样品-A 样品空白
反应液中加入 1.5mL
1 %可溶性淀粉溶液
继续37 ℃水浴10
min 后,加入 1.5
mlDNS 显色剂,混匀,置于沸水浴中5 min。然后,冷却至室温,定
容至25 mL,540 nm 下测定吸光。空白是1.25ml水加上1.5mlDNS,
定容至25ml,在A540nm下测吸光值
一、实验步骤:取试管5个,并分别编号,按下表加入药品
再从标准曲线中查出还原糖的含量,以1/V为纵轴,1/S为横轴做直
角坐标。