高效液相色谱与酶法检测血清游离脂肪酸的对比分析_熊辉
血清游离脂肪酸酶法测定的方法学评价分析与生物学变异探究
血清游离脂肪酸酶法测定的方法学评价分析与生物学变异探究作者:郭欣桐来源:《现代养生·下半月版》 2015年第7期郭欣桐河北大学临床医学院河北省保定市071000【摘要】目的:分析研究血清游离脂肪酸酶法测定的正确度以及精密度,并探究血清FFA个体之间与个体内的生物学变异。
方法:血清游离脂肪酸酶法的正确度以及精密度将采用EP5-A2文件以及EP15-A文件进行评价,随机选取12名健康者在6周内每间隔2周测定一次血清FFA浓度,并分析个体间生物学变异以及个体内生物学变异。
结果:批内不精密度为 2.14%、批间不精密度为3.42%、日间不精密度为3.65%、室内不精密度为5.43%。
测定结果的百分比偏差分别为24.21%、-0.92%、-1.51%。
血清FFA个体间生物学变异为8.44%、个体内为19.32%。
结论:血清游离脂肪酸酶法测定的正确度以及精密度均满足相关要求,而血清FFA个体间以及个体内的生物学变异可作为实验室质量规范的参考依据。
【关键词】血清游离脂肪酸酶法;精密度;正确度;方法学评价;生物学变异游离脂肪酸(FFA)也可称为非酯化脂肪酸。
其在血液中的浓度可作为评价人体脂肪代谢水平的指标。
过去临床多采用气相色谱法或高效液相色谱法进行血清FFA检测但上述检测方法具有较为严格的操作要求,而且检测成本也相对较高[1]。
近年来酶学比色法(酶法)在血清FFA检测工作中的应用范围愈趋广泛,本次研究将采用方法学评价血清游离脂肪酸酶法测定的临床应用价值,探究血清FFA个体之间与个体内的生物学变异,现报道如下。
1资料和方法1.1研究对象本次研究将随机选择12名健康者作为研究对象,其中男性3例,女性9例;年龄:22-24岁,平均年龄为(22.3±1.1)岁;BMI为18.48-26.71kg/m2,平均BMI为(21.31±1.3)kg/m2。
排除具有心血管病史、手术史、吸烟以及饮酒者。
荧光光度法、高效液相色谱法和酶联免疫法检测食用油黄曲霉毒素B1的比较(正式)
荧光光度法、高效液相色谱法和酶联免疫法检测食用油黄曲霉毒素B1的比较黄思伟张银菊宋红张翠云浮市质量计量监督检测所食品化工室,广东云浮527300 摘要对荧光光度法、高效液相色谱法和酶联免疫法在检测食用油黄曲霉毒素B1的过程和结果进行比较。
结合数据发现,三种方法在检测过程中各有优劣,检测结果均能满足一般检测要求。
因此,检测员因根据实验室的环境设备和样品数量择优选择适合的方法。
关键词黄曲霉毒素B1荧光光度法高效液相色谱法酶联免疫法Comparison of fluorescence spectrophotometry and HPLC and ELISA for determiningaflatoxin B1 in edible oilHuang Siwei Zhang Yinju Song Hong Zhang CuiYunfu Quality measurement supervision and Inspection Institute,Guangdong Yunfu527300Abstract:A comparison of fluorescence spectrophotometry and HPLC and ELISA for determining aflatoxin B1 in edible oil had been made.From the data we find that there are both pros and cons in the detection process of the three methods,and the detection results can meet the requirements of general detection.Therefore testers should chose the best method according to the environmental equipment and the sample size.Key words:aflatoxion B1;fluorescence spectrophotometry;HPLC;ELISA1 前言黄曲霉毒素(Afilatoxin,AFT)是黄曲霉和寄生曲霉的代谢产物。
酶法测定血清游离脂肪酸的方法学评价及临床应用
酶法测定血清游离脂肪酸的方法学评价及临床应用李义龙;王萌;唐志毅;韩靖云;黄桂玉【摘要】@@ 游离脂肪酸(FFA)是由油酸、软脂酸、亚油酸等组成,是甘油三酯的水解产物,大部分游离脂肪酸与血清白蛋白结合存在于血液中.血清中游离脂肪酸浓度受脂类代谢、糖代谢、内分泌功能等的影响.近年来研究发现FFA 水平升高即可增加胰岛素抵抗又可引起高胰岛素血症[1].大多数肥胖人群的2 型糖尿病患者都存在胰岛素抵抗,而血浆游离脂肪酸(FFA) 是联系肥胖和胰岛素抵抗或高胰岛素血症的重要环节.【期刊名称】《中国实验诊断学》【年(卷),期】2011(015)006【总页数】3页(P1099-1101)【作者】李义龙;王萌;唐志毅;韩靖云;黄桂玉【作者单位】卫生部北京医院,检验科,北京,100730;卫生部北京医院,检验科,北京,100730;卫生部北京医院,检验科,北京,100730;卫生部北京医院,检验科,北京,100730;卫生部北京医院,检验科,北京,100730【正文语种】中文游离脂肪酸(FFA)是由油酸、软脂酸、亚油酸等组成,是甘油三酯的水解产物,大部分游离脂肪酸与血清白蛋白结合存在于血液中。
血清中游离脂肪酸浓度受脂类代谢、糖代谢、内分泌功能等的影响。
近年来研究发现FFA水平升高即可增加胰岛素抵抗又可引起高胰岛素血症[1]。
大多数肥胖人群的2型糖尿病患者都存在胰岛素抵抗,而血浆游离脂肪酸(FFA)是联系肥胖和胰岛素抵抗或高胰岛素血症的重要环节[2]。
目前测定血清FFA有滴定法,比色法,原子分光光度法,高压液相层析法,气相色谱法和酶法等。
由于传统方法操作繁琐且精密度差,而日本积水医疗株式会社最新研制的酶法检测血清FFA试剂盒具有特异性高精密度好,操作简单并可直接用于自动生化仪检测。
本文将FFA酶法试剂盒进行方法学评价,并对部分2型糖尿病患者进行FFA检测,结果如下。
1 材料与方法1.1 标本来源收集北京医院临床血清标本,按照FFA低、高2个水平制成混合血清,分装后于-80℃储存,用于不精密度测定;选择FFA高值样本用于线性分析。
高效液相色谱法测定青稞红曲中内酯式和酸式洛伐他汀的含量
高效液相色谱法测定青稞红曲中内酯式和酸式洛伐他汀的含量陈发贵;张丹;刘敏;熊燕;张森林;赵辉【期刊名称】《中国酿造》【年(卷),期】2016(035)010【摘要】采用高效液相色谱法测定青稞红曲中内酯和酸式洛伐他汀的含量,以体积分数75%的乙醇作为提取剂,在室温条件下超声提取青稞红曲中的洛伐他汀1h.使用Eclipse PlusC18柱(5μm,250 mm×4.6 mm),调整柱温30℃,流动相为甲醇∶0.1%磷酸=73∶27;流速1.0 mL/min;进样最20μL;紫外检测器波长238 nm.内酯式洛伐他汀标准品溶液在20~100 μg/mL时呈良好的线性(r2=0.999 7),内酯式洛伐他汀的平均回收率为99.30%,相对标准偏差为1.67%;酸式洛伐他汀标准品溶液在20~100 μg/mL时呈良好的线性(r2=0.999 9),酸式洛伐他汀的平均回收率为98.50%,相对标准偏差为1.65%.因此高效液相色谱法能够简便、快捷、准确测定青稞红曲中内酯式和酸式洛伐他汀的含量.【总页数】4页(P162-165)【作者】陈发贵;张丹;刘敏;熊燕;张森林;赵辉【作者单位】青藏高原微生物国家地方联合工程中心,西藏拉萨850000;西藏月王生物技术有限公司,西藏拉萨850000;西藏月王生物技术有限公司,西藏拉萨850000;青藏高原微生物国家地方联合工程中心,西藏拉萨850000;西藏月王生物技术有限公司,西藏拉萨850000;青藏高原微生物国家地方联合工程中心,西藏拉萨850000;西藏月王生物技术有限公司,西藏拉萨850000;西藏月王生物技术有限公司,西藏拉萨850000;西藏月王生物技术有限公司,西藏拉萨850000【正文语种】中文【中图分类】O657.7【相关文献】1.高效液相色谱法测定红曲米中洛伐他汀的含量 [J], 张艳红;侯团章;张胜2.高效液相法测定琦红丸中酸式及内酯洛伐他汀含量 [J], 于文斌;孟青青;张松玲;孙丽丽3.高效液相色谱法测定红曲中洛伐他汀的含量 [J], 杜珊4.高效液相色谱法测定红曲药材中洛伐他汀的含量 [J], 范雯5.同时检测降脂红曲中酸式和内酯式洛伐他汀的TLC方法的建立 [J], 郑文伟; 林军; 吴丽云; 林风因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
酶法检测血清游离脂肪酸的方法学评价
( L a b o r a t o r y Me d i c i n e Di a g n o s t i c C e n t r e ,T h e F i r s t A f f i l i a t e d Ho s p i t a l , Xi n j i a n g Me d i c a l U n i v e r s i t y,
推荐的评价方法 , 对 酶 法 测 定 血 清 游 离 脂 肪 酸 的精 密 度 、 比对试验 、 回收 试 验 、 干扰试验 、 线 性 范 围进 行 评 价 。 结
果 精 密度 : 酶 法 测 定 血 清游 离脂 肪 酸 的精 密 度 批 内 、 批 间、 日间 、 总变 异 系 数 ( C V) 均<5 , 精密度好 ; 比对 试 验 :
Me t ho d s T he a c c u r a c y,c o m pa r a t i v e t e s t ,i nt e r f e r e nc e t e s t ,r e c o ve r y t e s t a n d l i ne a r r a ng e o f s e r u m FFA
wi t h e n z ymi c me t ho d we r e e v a l ua t e d i n a c c o r d a n c e wi t h t he c l i ni c a l a n d 1 a bo r a t o r y s t a n da r ds i n s t i t u t e a nd
2 种 厂 家 的试 剂 盒 测 定 血 清 游 离 脂 肪 酸 ( F F A) 结 果 相 关 性 良好 ( r : O . 9 8 2 1 , n :4 0 ) , 测 定结 果基本 一致 ( f—
酶法与高效液相色谱法测定糖化血红蛋白的结果比对分析
酶法与高效液相色谱法测定糖化血红蛋白的结果比对分析目的评估高效液相色谱法(HPLC)与酶化学法测定糖化血红蛋白的结果相关性和偏倚。
方法使用全自动糖化血红蛋白仪D-10采用高效液相色谱法和东芝TBA-120全自动生化分析仪以酶化学法分别测定40例EDTA-K2抗凝血液样本糖化血红蛋白,对结果进行分析比较;计算线性相关系数,直线回归方程和预期偏倚。
结果全自动糖化血红蛋白仪D-10高效液相色谱法的测定均值为7.78%,TBA-120全自动生化分析仪酶化学法测定均值为7.74%,线性回归方程为y=1.0349x-0.3111,r2=0.9923,无显著性差异(P>0.05),糖化血红蛋白可接受偏倚大于预期偏倚可信区间上限。
结论酶化学法与高效液相色谱法结果相关性良好,可满足临床要求。
标签:高效液相色谱法;酶化学法;糖化血红蛋白糖化血红蛋白Alc(HbAlc)是反映血液中葡萄糖水平的一个中长期指标,国际上通常将其做为糖尿病血糖控制的”金指标”[1]。
目前我室采用高效液相色谱法和酶化学法,为给临床提供可靠地检测结果,比较两种检测方法测定HbAlc 的差异,探讨其可比性,现参照美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)标准的EP9-A2文件[2],对其进行比较分析。
1资料与方法1.1一般资料收集我院住院患者糖化血红蛋白标本40例,均为EDTA-K2抗凝全血。
1.2仪器和试剂高效液相色谱法:全自动糖化血红蛋白仪D-10及配套试剂标准品;酶化学法:日本东芝TBA-120全自动生化分析仪,试剂和标准品为九强公司提供的HbAlc测定试剂;质控品为美国Bio-Rad公司生产,批号为33860.1.3方法1.3.1精密度实验根据NCCLS EP5-A文件的要求进行精密度实验。
采用美国Bio-Rad公司的中值质控和高值质控。
批内不精密度实验:同一天将2份质控品连续定20次;批间不精密度实验:将2份质控品测定1次/d,连续测定20d。
高效液相色谱法和酶联免疫吸附法检测DON含量的差异性研究
选取 2 0个样 品同时 分别 进 行 E IA法 和 H L 1 LS P C法 的测定 , 双试 验取 均值 后 , 除超 出检 测 置信 区 间 的样 品 剔 结 果后 , 行分 析讨论 。 进
4
对重 新 编 号 的 2 0个 样 品进 行 高 效 液 相 色 谱 法 检 1
测 . 果见 图 2 结 。
考 虑到 D N在 粮 食 中 的限量 标 准 , 所 有 的 1 8个 O 将 8 样 品 结 果分 成 以下 5个 部 分 , 别 进行 方 差 分 析 和 显 著 分 性 检验 , 结果 见表 1 。
圈牌 定性 滤纸 : 州 沃华滤纸 有 限公 司 ; 璃仪 器 。 杭 玻
13 试验 方法 .
从 图 1中可 以看 出 , 少数 结果 外 , 除 绝大 多数 的结果
均在 20 600 , 。 由于使用 的快速 检 测试 剂盒 检 测 0~ 0 g g k
范 围是 02 60mg g 即所 测得 的结 果基 本是有 效 的 。 .~ . / , k 21 .. 高效液相 色谱 法检 测 D 2 ON的结果
司 : Y一 H 2型调 速多 用振荡 器 、J2 o型高 速分散 均 质机 : F~ 0 江苏 金坛 金城 国胜 实验仪 器厂 ;~ 0 5 5 L微量 移液 器 、0 5~
样 品 编 号
图 1 E IA 法检测脱 氧 雪腐镰 刀菌 烯醇 的结 果 LS
30 0 L多头 移液 器 : 默飞 世尔 ( 海 ) 器有 限公 司 ; 赛 上 仪 双
检测 。
昂 贵仪 器设备 等优 点 。本 文着 重考 察 2种 方法 检 测结 果 的一 致 性 。通 过对 2种 方法 在 不 同样 品检 测结 果 的显 著 性 分 析 , 合 国家标 准 , 未来 脱氧 雪腐 镰 刀菌 烯 醇 的快 结 为
高效液相色谱法与酶联免疫法检测小麦中呕吐毒素含量的比较研究
高效液相色谱法与酶联免疫法检测小麦中呕吐毒素含量的比较研究随着食品安全问题的关注度不断提高,对于检测食品中有害物质的准确性和效率也提出了更高的要求。
在小麦中,呕吐毒素(Vomitoxin,VT)是一种常见的真菌毒素,其存在会对人体健康产生严重威胁。
为了确保食品安全,科学家们开展了各种有效的检测方法,其中包括高效液相色谱法(HPLC)和酶联免疫法(ELISA)。
本文将对这两种方法进行比较研究,旨在找到更适合检测小麦中呕吐毒素含量的方法。
1. 高效液相色谱法(HPLC)高效液相色谱法是一种常用的色谱分析技术,已广泛应用于食品中有害成分的检测。
该方法通过样品预处理、色谱柱分离、检测等步骤来分析目标物质的含量。
具体操作流程如下:(1)样品预处理:将小麦样品经过粉碎、提取等步骤,得到待分析的样品溶液。
(2)色谱柱分离:将样品溶液注入高效液相色谱仪中,经过柱分离,将不同成分分离开来。
(3)检测:通过检测器检测目标物质的信号,并根据标准曲线计算出其含量。
2. 酶联免疫法(ELISA)酶联免疫法是一种高灵敏度、高特异性的免疫学检测方法。
它利用抗原与抗体之间的特异性反应来检测目标物质的含量。
具体操作流程如下:(1)样品处理:将小麦样品经过一系列预处理步骤,如提取、稀释等,得到待分析的样品。
(2)抗原结合:将样品中的目标物质与特异性抗体结合,形成抗原-抗体复合物。
(3)酶标记物检测:将酶与抗体结合,并通过染色反应来检测目标物质的含量。
3. 方法比较与分析(1)准确性:高效液相色谱法在分析物质含量时具有较高的准确性,可以更精确地分析目标物质的含量。
酶联免疫法也可以达到较高的准确性,并且具有较低的误差。
(2)灵敏度:酶联免疫法相对于高效液相色谱法来说,具有更高的灵敏度。
小麦中呕吐毒素的含量较低时,酶联免疫法可以检测到更少的目标物质。
(3)简便性:酶联免疫法相对于高效液相色谱法来说,操作相对简单,对于非专业人员来说更易掌握。
高效液相色谱法与酶法检测糖化血红蛋白结果一致性的比较
1 材 料 与 方 法
1 . 1 仪 器和试 剂
美 国伯乐( B i o — R a d ) D 一 1 0 H b A l c 分析仪( H P L C 法 )及配套试剂和专用校准品 ( 美 国N G S P 参考系 统) ;美 国雅 培C I 一 1 6 2 0 0 全 自动生 化分 析 仪/ 日本 积
以伯 乐 D 一 1 0 H b Al c分 析 仪 为 比对 方 法 ( x ) , 酶法 为实验方法 ( Y ) ;检测前对仪器进 行校准 , 每 天 测 定 2个 浓 度 的 质 控 品 结 果 在 控 . 按 照
E P 9 一 A 2文件 的要求 ,在 5 个工作 日内每天选取 8 份患 者 样本 ,分 别 用二 种 方 法按 1 —8 ,8 — 1的顺 序重复测定 H b A l c ,共检测 4 O 份标本 ,记 录测定
1 . 3 方 法
P >0 . 0 5 ,2 者无 明显统计学差异 ,酶法与 H P L C法 结果具有显著相关性 . H b A l c 在 医学决定 水平 ( 6 . 5 %) 的预期偏倚 见表 2 .根据上述 回归方程对 2 种检 测方法测得 H b A 1 c的结果进行预期偏倚 的估计 ,允许偏倚采
近年来 ,随着人们生活水平的提高糖尿病的发 病率越来越高 ,预计到 2 0 2 5 年全世界糖尿病患者 将达 3 亿人【 l 1 .糖化血红蛋 白 ( H b A l c )是血红蛋 白与糖类 经非酶促反应结合而成的 ,其合成过程 缓慢 且 相对 不 可逆 .因此 可 反 映机 体 1~ 2月前 的 平 均 血糖 水 平 ,在 糖 尿 病 的监 测 、治 疗 方 面 具 有 重要意义 .2 0 0 2 年美 国糖尿病协会 ( A D A )将其 作为监测糖尿病血糖控制的金标准 ,2 0 1 0 年A D A 发布的糖 尿病诊疗指南 中以 H b A l c ≥6 . 5 %作 为耱 尿 病 的诊 断标 准嘲 . 目前 H b A l c主要 的测 定 方 法 有 离子交换高效液相色谱法 ( H D L C ) 、免疫法及近 年 新 发 展 的 一 酶 法 . 为 了解 酶 法 与 H D L C 法 H b A l c 测定结果的一致 性 ,笔者依据 美 国临床实 验室标准化协会 ( C L S I ) 《 用患者样本进行方法学 对 比及偏差估计 E P 9 一 A 2 指南文件》 ( E P 9 一 A 2 ) , 对H P L C和酶法两种 H b A l c 检测结果进行 了对 比分 析和偏倚评估 ,现报道如下.
【doc】两种血清苯丙氨酸高效液相色谱测定法的比较
两种血清苯丙氨酸高效液相色谱测定法的比较2o05年8月第9巷翌文章编号:11307—4287(2005)04—0607一o3——607?--——两种血清苯丙氨酸高效液相色谱测定法的比较唐爱国,洪敏,莫喜明,陈若虹(中南大学湘雅二医院检验科,湖南长沙410011)摘要:目的对两种血清苯丙氨酸高效液相色谱测定法进行比较.方法对高效液相色谱.紫外检测法(HPLC-uv)和高效液相色谱.荧光检测法(唧c.FLD),从线性范围,检测限,精密度等参数上进行比较,用两种方法分别测定了正常儿童和一组PKU患儿血清phe值,对结果进行统计分析.结果HPI.C-UV法和I-IPI_E.FLD法的线性范围分别为6~1512IⅡnL和12~1220/~nolJL,最低检测限分别为0.75pmd/L和3p.molJL,平均回收率分别为98.6%和102.5%,批内Cv均<5%,批间Cv分别为4.01%和7.17%,正常儿童血清phe值分别为63.2±11.6tmaol/L和92.8±21.3L(x±s);两种方法同时测定PKU血清phe结果之间的差异有显着性的意义(P=0.019),唧c.FLD法值较高但与唧c.Uv法值呈正相关(r=O.783).结论两种HPD2方法均能灵敏,特异地测定血清phe,满足对pku筛查的需要,I-IPLC.uv法在精密度及缩短分析检测时间上略优于HPI~FLD法.关键词:苯丙氨酸;高效液相色谱法;比较;苯丙酮尿症中图分类号:R722.11文献标识码:ATilec0I唧arisonbetweentwolLCforsenlmphenylalanineTANGAi-guo,HONGMn,MOxi-rni~,a1.(加删ofClinicallaboratory,theSecondHospital,CentralSouthUniversity,c^硼410011,Ch/na) Abstract:ObjectiveComparisonthetwoIligIlperformanceliquidchromatography(HPLC) forSelMnlphenylalanine(phe).Me~odsHPLC-ultravioletabsorbingdetection(一uV)andHPI_E-fluorescencedetection(HPLC-FLD)were㈣p删inlinearFange,recoveryratedetectionlimitandprecision.Id~fiealsamplesweFedetectedwithtwoI-~LCmethods,Theresultswere锄一lyzed.ResultsThelinearr'dnge,meanr~eoveryrate,in—runCV andbetween—runCVwere6~1512tanol/L,0.75pmol/L,3.68%and4.01%forI-IPD3一Uv,respectively,and12~1220ta-nol/L,3tnnol/L,102.5%,4.0r7%and7.17%forHPIL-FLD,respectively.ConclusionBothHPI/2aresensitive,accurate,simple,rapidandadaptedforcli nicaluse.TheI-IPI_E-UVis啪represisionandrapidthantheHPLC—FLD.Keywords:phenylalanine;performancelidchromatography;comparison;phenylketonuri a(Ch/nJLaboa~gn,2005,9:607)苯丙酮尿症(PKU)是一种常染色体隐性遗传性疾病,我国的发病率为1/1I188…,患者因苯丙氨酸羟化酶(PAn)缺陷引起苯丙氨酸(phe)代谢障碍不能被转化为酪氨酸,从而导致过量的苯丙氨酸毒性代谢产物在脑,血液及尿液中过量蓄积,使患者中枢神经系统受到不可逆的损害而造成智力低下等严重不良后果.但是该病若在早期发现并给予积极治疗,病儿智力发育可以完全正常.血中phe水平检测对于PKU的诊断,治疗等具有十分重要价值.Phe的检测方法有多种,主要有细菌抑制法(BLA),荧光法(FELA),比色法,高效液相色谱法(HPLC),高效毛细管电泳法(HPCE)等,国内有作者对BIA与FEIA及不同的FEIA检测试剂盒进行了比较J.本文对两种直接测定血phe浓度的高效液相色谱法H进行了比较.1材料与方法1.1血清标本正常儿童血清标本来自长沙市区幼儿园,小学,社区和儿科门诊作健康普查的各项体查指标正常者(年龄1月l4岁),PKU血清标本来自本院诊断为I;'KU患JL(n=13,年龄16天一5岁). 均在上午810时期间内空腹静脉采血,待血清析出后离心取血清分析.1.2主要试剂phe标准品购自美国Sigma公司;乙腈(色谱纯)购自美国Tedia公司;高氯酸为国产优级纯;实验用水为经美国Millipore公司Milli.Q纯水器处理的超纯水.1.3方法1.3.1高效液相色谱.票外检测法(HPLC.Uv)按国外文献H稍加改进.实验原理根据phe具有自然紫外吸收的特点,血清标本去蛋白后,上清液中的phe经色谱柱分离后在一定紫外波长下进行检测,将其与已知浓度phe标准品的峰面积(或峰高)比较,即可定量检测出血清标本中phe的浓度.--——608—._——仪器及色谱条件美国Waters公司高效液相色谱仪,包括M510泵,M486紫外检测器,M7125Rheodyne手动进样(带20l定量杯),PC800色谱工作站.色谱柱为NOV A—PAKC18不锈钢柱(3.9 mmid×150mm,粒径4脚,Waters公司).流动相为乙腈一水(体积比40:960),流速为1ml/min,紫外检测波长190nnl.进样量20l.操作步骤吸取血清5O于塑料小离心管内,加入等量的0.59mol/L高氯酸溶液,盖紧后于旋涡混合器上混合10s,放10min后,10,000r/min离心5 min,取上清液进样检测.用外标法定量,每检测l0份血清标本后进样检测1份已知浓度的phe标准液.血清phe(/maol/L)=血清标本中phe峰面积A÷标准液phe峰面积A×phe标准液浓度.用PC800 色谱工作站自动计算结果.1.3.2高效液相色谱一荧光检测法(HPIE—vtD)按国外文献稍加改进.实验原理基于phe具有自然荧光的特性,血清去蛋白后,取上清液经色谱柱分离phe后,在一定激发波长和发射波长条件下进行荧光检测,与已知浓度phe标准液的峰面积(或峰高)比较定量检测出血清phe浓度.仪器及色谱条件美国安捷伦(Agilent)高效液相色谱仪,包括G1311A四元泵,G1321A荧光检测器及HP1100色谱工作站.色谱柱为HypersilC8不锈钢柱(6.0mmid×300rnm,粒径10,大连依利特科学仪器有限公司).流动相乙腈一水(体积比100:9oo),流速为1ml/min;激发波长210nnl,发射波长303rim;进样量20.操作步骤除色谱后分离采用荧光检测器检测,用HP1100色谱工作站计算结果外,其余步骤与HPLC—Uv法相同.2结果2.1线性范围和检测限HPIE—Uv法检测Dhe的线性范围为6~1512/~nol/L,最低检测限为0.75pmol/L.HPLC—FlY)法的线性范围为12~1220tmaolJL,最低检测限为3tanol/L.2.2回收率和精密度HPIE—Uv平均回收率98.6%,批内CV为3.68%,批间CV为4.0l%.HPLC-FLD法的平均回收率102.5%,批内CV为4.07%,批间CV为7.17%.2.3正常儿童血清phe水平HPLC—Uv法测定35名1月~5岁体格检查完全正常的幼儿,血清Dhe值为63.2±11.6tmaol/L(x4-s).HPIE—FlY)法测得5l ChinjLabDia~n,Aul~st,2OO5,V ol9,No.4名1月~5岁正常幼儿血清phe值为92.8±21.3tanol/L,81名1月~14岁儿童(<5岁和>5岁儿童各为l/2)血清phe值为92.6±18.7tanol/L.2.4PKU患儿血清phe值采用两种HPLC方法同时测定l3例PKU患儿血清phe,测定结果见表1.表1两种方法对13例PKU血清phe的测定结果(~mol/L) *配对t检验.P=0.019;两法r=0.7833讨论由Guthrie建立的BIA,对滤纸干血样的phe进行半定量测定,方法灵敏,简便,不需要特殊仪器设备,成本较低,适于大批样本的检测,但此法仅为半定量,而且一次实验花的时间长,其结果的可靠性可受血浓度,标本内抗生素含量以及从采血到实验等各个环节的影响,因此不排除PKU漏诊的可能性.FELA法是一种定量测定方法,具有较高的敏感性,特异性,自从Meeaman和Robin二氏开始采用此法测定血清phe以来,经过改进,已有专用的检测试剂盒,检测仪器及配套软件供临床应用],使得操作变为较简便,标本微量化,适于大批量标本检测.但是该操作时间仍需3~4小时.],不同厂商的试剂盒和仪器检测同一样本有的结果相差2倍之多b].高效液相色谱法测定phe因具有灵敏度高,特异性好,高重复性,定量测定,为国内外学者重视,国内已在2000年全国儿科内分泌遗传性疾病学大会被肯定为早期诊断,防治高苯丙氯酸血症的新的有效方法u.国内外尤其是国外有不少有关phe测定的高效液相色谱法报道,但以Atherton等建立的HPLC—UV 法L4和以Allen等建立的HPIE—FLD法[5最为操作国9卷第4简便快速.此两种检测方法血清标本只需去除蛋白质,无需再作柱前或柱后化学衍生化处理而直接进样检测phe,流动相配制简单(仅由极少量的乙腈加蒸馏水组成),采用单泵固定流量(等度)洗脱,首份检测标本从去蛋白到检测完毕可在30min内完成.本文结果显示,上述两种方法的线性范围宽,检测限低,回收率高,精密度高,均是PKU筛查,诊断和治疗监测的良好检测方法,但HPLC—uV法线性范围宽度,检测限,批间CV及标本检测所费时间(检测首份标本只需15rain)上更优于HPLC—FLD法.本文用HPLC—FLD法测定正常儿童血清phe值明显高于HPLC.UV测定值,两法同时检测PKU患者血清phe 值差异显着(P=0.019),HPLC—FLD测定值与HPI_E—Uv测得值有较好的正相关关系(r=0.783).参考文献:[1]喻唯民.积极开展新生儿筛查工作[J].中华检验医学杂志,2001,24(6):325.f2]蔡宗友,胡定波,曹小英,等.苯丙酮尿症的新生儿筛查及方法比文章编号:11307—4287(2005)04—0609—03___——609'___——较[J].中国优生与遗传杂志,20O2,10(4):95.[3]包日新,粱东春.两种苯丙氨酸荧光检测试剂盒的比较[J].天津医科大学,2003,9(3):346.[4]AthertonND,GreenA.HPIEmeasurementofphenyManineinplasma [J].ClinChem,1988,34(11):2241.[5]AllenKR,DeggTJ,RushworthPA,eta1.Measurementofphenylalanine andtyrosineinplasrmbyhi曲-perfomumceliquidchromatographyusing theinhemntfluorescenceofarm~ficaminoacids[J].AJ1nClin13i~11em, 1999,36(pt2):207.[6]李明训,陈西贵,李文杰,等.新生儿筛查滤纸干血样测定的影响因素的探讨[J],中华检验医学杂志,2001,24(6):339.[7]McCamanMW,RobinsE,Huormr~tricmethodforthedeterminationof phenylalanineinsemm[Jj,JClinMed,1962,59:885,【8]GerasimovsNS,甄el【lovaTV,TuumlnenT.nuorometrlcmethodforphe—nylalaninemicroplateassayadaptedforphenylketonuriascreening[J]. ClinChem,1989,35:2112,[9]岳胜,田庆春,廉聪,等.干血片荧片分析法在新生儿苯丙酮尿症筛查中的应用[J].天津医药,2003,31(3):178.[10]沈永年.全国儿科内分泌遗传疾病2OOO年学术会议(第七届)纪要[J].中华儿科杂志,2001,52(3):183.(收稿日期:2004—04—20)流式细胞术分析RAU患者外周血淋巴细胞表型方玲,李美华,董立武,毛庆华',迟宏宇,高朋杰,宁佳(1.大庆油田总医院口腔科,黑龙江大庆163001;2.吉林大学第--II~床学院口腔科) 摘要:目的为了更好的理解RAU患者免疫紊乱的实质及寻找有效的治疗方法,我们采用流式细胞技术,对RAU患者发病期和康复期外周血淋巴细胞的表型进行测定,分析,探索流式细胞技术在RAU的诊断及指导临床治疗方面的作用.方法选择24例RAU患者抽取外周血送流式细胞技术实验室检测,以20名健康成人为对照组,根据检测结果,选免疫指标异常的患者采用免疫调节剂进行治疗,一至二疗程后再对其外周血行淋巴细胞表型分析.结果RAU患者发病期淋巴细胞表型分析与对照组比较:显示c细胞,c/cI)8比值明显低于对照组(P<0.05),cI)8细胞,NK细胞明显高于对照组(P<0.05),cD3细胞与对照组比较无明显差异(P>0.05).RAU患者康复期各项指标检测与对照组无明显差异(P>0.05).结论免疫活性细胞亚群不平衡和免疫活性细胞缺陷在RAU的发病中起重要作用.通过流式细胞术的指导,合理使用免疫调节剂,使治疗更有目的性.关键词:复发性口疮;淋巴细胞表型中图分类号:11781.5文献标识码:A.~malysisofperipherallymphcelldifferentiationtorecurrentaphthousulcerpatientFANG 厶,LIMeglma,DONGLi-wu,eta1.(咖ofstomatology,GeneralHospitalofDaqingOil凡,,如gProdnce163001,Ch/na) Abstract:ObjectiveInordertoknowtheessentialmeaningofimmunedisorderinRecurrentA phthousUlcerpatientsandtosearchtheagreeabletreatmentmeanwhile,theclusterofdifferentiationofperipherallymphc ellsweredetectedandanalyzedbyfloweytometry,andafterwardsthosepatientsweretreatedbyinununomodulator.MethodsInthiss tudy,24documentedcasesofRAU patientsexperiencedperipheralblooddetectionbyflowc)rtorneryinLaboratoryasco mparedto20controlhealthypersons.Accordingtothelabomto~results,thosepatientwithabnormalimmuneresponseswerechoseastheobje ctivestreatedbyimmunon~dulator.Onetreatmentperiondafterwards,theperipheralbloodoftheseobjectiveswereanalyzedaga in.ResultsThepercentagesofCcdls。
血清游离脂肪酸酶法测定的方法学评价及生物学变异研究
f o r t h e d e t e r m i n a t i o n o f s e r u m f r e e f a t t y a c i d ( F F A) ,a n d t o s t u d y t h e b e t w e e n — s u b j e c t a n d w i t h i n — s u b j e c t b i o l o g i c l a
鹿 刚 , 高社 军 , 巨英博
( 河 北 医科 大学第 四医院 检验科 , 河 北 石家 庄 0 5 0 0 1 1 )
摘要 : 目的 评价血清游离脂肪酸 ( F F A) 酶学 比色法 ( 简称酶法 ) 的精密度 和正确度 , 并且研究 血清 F F A个
体 间和个体 内生物学变异。方法
d e t e r mi n a t i o n o f s e r u m f r e e f a t t y a c i d L U
,G A O S h e j u n ,| , Y i n g b o . ( D e p a r t m e n t o f C l i n i c a l L a b o r a t o r y ,
中图 分 类 号 : R 4 4 6 . 1
文献标志码 : A
D OI : 1 0 . 3 9 6 9 / j . i s s n . 1 6 7 3 — 8 6 4 0 . 2 0 1 4 . 0 2 . 0 1 3
血 清 游 离脂 肪 酸 酶 法 测 定 的方 法 学评 价 及 生 物 学 变 异 研 究
t h e F o u r t h A f il f i a t e d H o s p i t a l fH o e b e i Me d i c a l U n i v e r s i t y , H e b e i S h i j i a z h u a n g 0 5 0 0 1 1 , C h i n a )
高效液相色谱法的特点及应用
1.2 高效液相色谱法的特点 根据高效液相色谱法的应用情况而言,高效液相
色谱法的主要检测特点为:①高效液相色谱法在实际 进行物质检测时,主要是将液态进行流动相的设置, 然后在液体流动到色谱柱后,因其液体会受到一定的 阻力,为保证液体能进行正常的流动,多采用承载液 加压的方式进行处理。②因高效液相色谱法采用高压 泵进行输液处理,使其载液的速度非常快,使其检测 分析的速度也相应增加。这种情况下,高效液相色谱 法的样品分析时间,可以缩短到 1h 内,甚至可以在几 分钟内,完成样品检测的工作。③使用高效液相色谱 法进行样品分离时,能根据样品属性,进行固定相与 流动相的自行选择,且由于流动相多使用新型填出料, 有利于在一定程度上提升色谱柱的柱效,使检测的结 果能够得到进一步优化。④高效液相色谱法与传统液 相色谱法不同,其结合了紫外线检测仪的使用,这使 得其样品检测能够在紫外线检测仪的作用下,有效提 升检测的灵敏度。⑤高效液相色谱仪在实际进行使用
关键词:液相色谱法;色谱法;食品测定
Abstract:This paper describes the characteristics of high performance liquid chromatography, the working principle of common high performance liquid chromatography and its application in the determination of food antioxidants, providing a reference for the application of high performance liquid chromatography in food analysis.
高效液相色谱法与酶比色法测糖化血红蛋白的方法学比较
高效液相色谱法与酶比色法测糖化血红蛋白的方法学比较摘要】目的:为了提高检验科糖化血红蛋白(HbAlc)结果的准确度;为了增强与临床之间的互认;为了流行病学调查的研究,本文对高效液相色谱法(HPLC)和酶比色法测HbAlC两种方法的检测结果进行比对。
贝克曼AU5800全自动生化分析仪采用酶比色法测定HbAlC,普门H9糖化血红蛋白分析仪采用高效液相色谱法测定HbAlC,对两种仪器两种方法所检测出的结果进行比对分析。
结论:酶法与HPLC法具有良好的相关性,HPLC更适合本科室的检测环境,精密度较高,线性范围较宽,使用专门的仪器检测,减少项目间的交叉污染,更适用于流行病学的研究,方便快捷,具有很大的市场前景。
【关键词】糖化血红蛋白;酶比色法;高效液相色谱法【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2017)26-0146-02Comparison of the methods for the determination of glycosylated hemoglobin by high performance liquid chromatography and enzyme colorimetryWang Conghui, Chen Jie, Yang Xiaobo, Liu Pingping,Department of clinical laboratory; the 253rd Hospital of PLA,010051,China【Abstract】Objective To improve the inspection of glycosylated hemoglobin (HbAlc) in order to enhance the accuracy of the results; and between clinical recognition; in order to study the epidemiological investigation, based on high performance liquid chromatography (HPLC) and enzyme colorimetry HbAlC two methods detection results were compared. Backman AU5800 automatic biochemical analyzer using enzymatic colorimetric method for determination of HbAlC, H9 of the glycosylated hemoglobin analyzer was determined by high performance liquid chromatography HbAlC, detected by the two instruments, the results of the two methods were compared and analyzed. Conclusion The enzyme method and HPLC method have a good correlation, HPLC is more suitable for the detection of environmental department, high precision, wide linear range, detection of specialized equipment, reduce the cross contamination between projects, research, more suitable for epidemiological convenient and has good market prospect.【Key words】Glycosylated hemoglobin enzyme colorimetric method high performance liquid chromatography近年来,随着人们生活水平的提高,糖尿病的发病率也越来越高,且死亡率也在逐年递增,目前糖尿病在全世界的主要发病病因中占第3位,已成为仅次于心血管疾病和癌症的第三大死亡原因[1]。
高效液相色谱和离子色谱测定水中短链脂肪酸的方法比较
孟令璐 ,李 徐 ,郭 伟 ,薛晓凡 ,张 帆 ,唐天培 ,刘睿 杰
(江南大学 食品 学院,江 苏 无锡 214122)
摘要 ;从分离谱 图、分析 时间、线性范围、检 出限、精 密度和加标 回收率角度 ,对 离子 色谱和高效液相 色谱 (HPLC)测定水中的短链脂肪酸的方法进行比较 。HPLc使用 SunFireT M C18色谱柱,流动相为 磷 酸二 氢钾 溶 液和 甲醇 ,梯度 洗 脱 ,流速 1,0 mL/min。 离子 色谱 法使 用 DionexTM ATC一3色谱 柱 , 流动 相 为不 同浓度 氢氧化钠 溶 液梯 度洗 脱 ,流 速 1.5 mL/min。结 果表 明 :HPLC的 分析 时 闻、线性 范围 、检 出限、保 留 时 间 精 密度 、峰 面 积 精 密 度 和 加 标 回 收 率 分 别 为 l4.5 min、0~1 200 ms/L、 15.57~23.23 mg/L、0.079% 一0.597% 、1.12% 一3.50% 和 96.1% ~112.0% ,离子 色谱 法 的相 应 指标 分 别 为 13.0 min、0~20 mg/L、0.03一O.10 mg/L、0,000% 一0.053% 、1.18% 一2.69% 和 98.2% ~122.0%。HPLC线性检测 范围宽 ,但检 出限相对 高。 离子 色谱法检 出限低 ,但线性检 测 范围 窄 ,过 高的进 样质 量 浓度使 得 分 离效果 不佳 。应 根 据样 品 实 际质 量 浓度 ,选择 合适检 测方 法 。 关键 词 :离子 色谱 法 ;高效 液相 色谱 法 ;短 链 脂肪 酸 ;方 法比较 中图分类号:0657.7;Q547 文献标识码 :A 文章编号 :1003—7969(2018)10—0147—03
两种酶法测定血清游离脂肪酸试剂盒的分析性能比较
两种酶法测定血清游离脂肪酸试剂盒的分析性能比较王昌敏;孟晓辉;宋金萍;张慧【期刊名称】《标记免疫分析与临床》【年(卷),期】2013(020)006【摘要】目的比较两种酶法测定血清游离脂肪酸试剂盒的分析性能.方法分别应用国产与进口两种血清游离脂肪酸检测试剂盒,通过雅培c8000全自动生化分析仪测定50份体检样本血清游离脂肪酸浓度,进行精密度、准确度、抗干扰和线性试验等分析性能的评价与比较.结果①精密度分析结果:国产试剂的批内CV%为7.6%、5.8%,批间CV%为9.6%;进口试剂的批内CV%为0.7%、2.8%,批间CV%为2.2%.②平均回收率结果:国产试剂平均回收率为100.3%,进口试剂为97.76%,两者差异无统计学意义(P>0.05).③线性范围分析结果:在3.11 mmol/L内,国产试剂测定血清游离脂肪酸线性相关性良好;在3.23mmol/L内,进口试剂线性相关性良好,且两者差异无统计学意义(P>0.05).④干扰试验分析结果:在血红蛋白<0.12mmol/L,胆红素<0.34mmol/L,甘油三酯<11.3mmol/L,维生素C<1.2mmol/L条件下,两种试剂盒测定血清血清游离脂肪酸的结果之间无显著差异(P >0.05).⑤对临床血清游离脂肪酸测定结果分析表明,两种试剂相关性好(Y九强=0.9667X德赛+0.0175,R2=0.9801,P<0.05,n=50),偏差无统计学差异(P>0.05).结论国产与进口试剂盒检测血清游离脂肪酸结果一致性较好,且CV%均小于10%.国产试剂精密度相对较低,线性可达3.11 mmol/L,抗干扰能力较强.该结果表明两种试剂盒的分析性能无明显差异,具有较好可比性.【总页数】3页(P443-445)【作者】王昌敏;孟晓辉;宋金萍;张慧【作者单位】新疆维吾尔自治区人民医院临床检验中心,新疆乌鲁木齐830001;新疆维吾尔自治区人民医院临床检验中心,新疆乌鲁木齐830001;新疆维吾尔自治区人民医院临床检验中心,新疆乌鲁木齐830001;新疆维吾尔自治区人民医院临床检验中心,新疆乌鲁木齐830001【正文语种】中文【中图分类】R392-33【相关文献】1.血清游离脂肪酸酶法测定的方法学评价及生物学变异研究 [J], 鹿刚;高社军;巨英博2.酶法测定血清胆红素试剂盒在BECKMANSYNCHRON CX5生化分析仪上的应用 [J], 朱穗兰3.胆红素氧化酶法测定血清总胆红素试剂盒在Monarch自动生化分析仪上… [J], 白峰;赵海舰4.血清胆固醇酶法测定系列试剂盒的研制及临床应用的分析 [J], 景寿年5.酶法测定游离脂肪酸液体试剂盒的稳定性评价 [J], 张玲; 刘华伟; 杨清; 马玉华; 林艳因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
探讨高效液相色谱法与L—蛋氨酸γ—裂解酶法在血清同型半胱氨酸含量检测中的应用
探讨高效液相色谱法与L—蛋氨酸γ—裂解酶法在血清同型半胱氨酸含量检测中的应用摘要:目的:对比分析高效液相色谱法与L-蛋氨酸γ-裂解酶法对血清同型半胱氨酸含量测定效果。
方法:此次研究的对象是选取2013年12月-2015年9月于本院健康体检的体检者120例,将其临床资料进行回顾性分析,并分为高效液相色谱法组和L-蛋氨酸γ-裂解酶法组,每组60例。
比较两组变异系数、回收率及准确度。
结果:两组不同浓度批内和日间变异系数比较,差异均无统计学意义(P>0.05);两组不同浓度回收率比较,差异均无统计学意义(P>0.05);两组检测同型半胱氨酸含量比较,差异无统计学意义(P>0.05),L-蛋氨酸γ-裂解酶法组检测准确率为99.24%,高于高效液相色谱法组的89.63%,比较差异有统计学意义(P<0.05)。
结论:在同型半胱氨酸含量的测定中,两组检测稳定性无明显差异,相对高效液相色谱法而言,L-蛋氨酸γ-裂解酶法检测准确率较高。
在临床检验中,可以根据检测工作需求选择合适的检测方法。
关键词:高效液相色谱法;L-蛋氨酸γ-裂解酶法;同型半胱氨酸Abstract:Objective:To compare the effect of high performance liquid chromatography(HPLC)and L- methionine lyase on serum homocysteine content. Methods:the object of this study is to select 120 cases of December 2013 -2015 yearin September in healthy physical examination in our hospital physical examination,retrospective analysis,and divided into the treatment group and the L- group of methionine gamma lyase by HPLC,60 cases in each group. The coefficient of variation,recovery and accuracy were compared between the two groups. Results:the two groups of different concentration of intra and inter day coefficient of variation,there were no significant differences between the two groups(P>0.05);different concentration recovery rate comparison,there were no significant differences between the two groups(P>0.05);detection of homocysteine levels,the difference was not statistically significant(P>0.05),the accuracy rate of L- methionine gamma cracking enzymatic detection group was 99.24%,higher than the HPLC group 89.63%,the difference was statistically significant(P<0.05). Conclusion:in the determination of homocysteine content,the stability of the two groups is not significantly different. Compared with the HPLC method,the detection accuracy of L- methionine lyase is higher. In the clinical examination,we can select the appropriate detection method according to the testing requirements.[Key words] high performance liquid chromatography;L- methionine lyase method;Homocysteine同型半胱氨酸是一种含硫氨基酸,其在血液中的含量过高会产生同型半胱氨酸症,同时同型半胱氨酸的浓度增加,与心脑血管疾病的发病有着密切的关系,可以说同型半胱氨酸浓度已经成为脑卒中、冠心病等心脑血管疾病发病的危险因素[1]。
两种高效液相色谱法测定血清色氨酸的结果比较
两种高效液相色谱法测定血清色氨酸的结果比较柳兴其;王清平;唐爱国【期刊名称】《实用预防医学》【年(卷),期】2004()4【摘要】目的比较高效液相色谱 -紫外检测法 (HPLC -UV)与高效液相色谱 -荧光检测法 (HPLC -FLD)测定血清色氨酸的结果 ,了解这两种检测法测定结果之间的相关性。
方法用HPLC -UV和HPLC -FLD同时随机检测 40例临床血清标本的色氨酸含量 ,比较相关性。
用两法对同一混合血清标本各测定血清色氨酸含量 2 0次 ,比较两法精密度。
结果HPLC -UV测定同一份混合血清标本色氨酸含量为( 3 9.85± 1.69) μmol/l(X±S) ,HPLC -FLD测定值为( 4 0 .2 5± 1.0 6) μmol/l。
其浓度差值无显著性意义 (P >0 .0 5 )。
结论两法对 40例临床血清标本色氨酸测定结果一致性好。
【总页数】2页(P693-694)【关键词】氨基酸;高效液相色谱法;紫外检测;荧光检测【作者】柳兴其;王清平;唐爱国【作者单位】中南大学湘雅二医院检验科【正文语种】中文【中图分类】R-33【相关文献】1.高效液相色谱法快速测定血清中的色氨酸 [J], 张秀玲;于玲;常丽2.高效液相色谱法同时测定血清色氨酸和犬尿氨酸浓度的方法建立及应用 [J], 张晓清;王猛;丁敏3.高效液相色谱法测定孕妇血清中色氨酸及其代谢产物Kynurenine [J], 徐雪梅;夏晓萍4.高效液相色谱法同时测定血清中的犬尿氨酸和色氨酸 [J], 王瑞;唐爱国5.高效液相色谱法测定血清色氨酸 [J], 唐爱国;孟巧因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
高效液相色谱法与L-蛋氨酸γ-裂解酶法在血清同型半胱氨酸含量检测中的应用
高效液相色谱法与L-蛋氨酸γ-裂解酶法在血清同型半胱氨酸含量检测中的应用杨元好;肖静;蒋艺勤;吴永国;唐娟【期刊名称】《中国医学创新》【年(卷),期】2016(13)24【摘要】目的:比较高效液相色谱法与L-蛋氨酸γ-裂解酶法对血清同型半胱氨酸含量测定效果.方法:选取2013年12月-2015年9月于本院健康体检的体检者120例作为研究对象,将其分为高效液相色谱法组和L-蛋氨酸γ-裂解酶法组,每组60例.比较两组变异系数、回收率及准确度.结果:两组不同浓度批内和日间变异系数比较,差异均无统计学意义(P>0.05);两组不同浓度回收率比较,差异均无统计学意义(P>0.05);两组检测同型半胱氨酸含量比较,差异无统计学意义(P>0.05),L-蛋氨酸γ-裂解酶法组检测准确率为99.24%,高于高效液相色谱法组的89.63%,比较差异有统计学意义(P<0.05).结论:在同型半胱氨酸含量的测定中,两组检测稳定性无明显差异,相对高效液相色谱法而言,L-蛋氨酸γ-裂解酶法检测准确率较高.在临床检验中,可以根据检测工作需求选择合适的检测方法.【总页数】4页(P50-53)【作者】杨元好;肖静;蒋艺勤;吴永国;唐娟【作者单位】广东省深圳市宝安区松岗人民医院广东深圳518105;广东省深圳市宝安区松岗人民医院广东深圳518105;广东省深圳市宝安区松岗人民医院广东深圳518105;广东省深圳市宝安区松岗人民医院广东深圳518105;广东省深圳市宝安区松岗人民医院广东深圳518105【正文语种】中文【相关文献】1.高效液相色谱法与容量分析法测定发酵液中L-赤藓酮糖含量的比较 [J], 葛驰宇;张君丽2.高效液相色谱法同时测定水果蔬菜中L-抗坏血酸、D-异抗坏血酸、脱氢抗坏血酸及总维生素C的含量 [J], 杨媛;冯晓元;石磊;杨军军;张莹莹;张开春3.高效液相色谱法同时测定发酵液中木糖醇和L-木酮糖的含量 [J], 葛驰宇;蒋洁;翁旭;张君丽4.反相高效液相色谱法安培检测器快速测定人血清中维生素C含量 [J], 卓海通;高允生5.血清同型半胱氨酸、α-L-岩藻糖苷酶、血清铁蛋白检测在原发性肝癌诊断中的应用 [J], 卓雪芽; 吕微风因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
高效液相色谱法测定康脂通降脂胶囊中熊果酸的含量
高效液相色谱法测定康脂通降脂胶囊中熊果酸的含量
沙玫;徐伟;陈莉
【期刊名称】《中华中医药杂志》
【年(卷),期】2007(22)8
【摘要】目的:建立高效液相色谱(HPLC法)测定康脂通降脂胶囊中熊果酸的含量。
方法:采用HPLC法,色谱柱为Kromasil C18(4.6mm×250 mm,5μm),检测波长为215nm,流动相为甲醇-水-醋酸铵-乙腈(9∶25∶0.8∶65),流速为1.0 ml/min。
结果:熊果酸在浓度64-320μg/ml范围内线性关系良好(r=0.9996),平均回收率为100.10%,RSD为1.32%。
结论:本方法操作简便,快速,重复性好,精密度高,结果准确可靠,可用于康脂通降脂胶囊中熊果酸的含量测定。
【总页数】3页(P554-556)
【关键词】康脂通降脂胶囊;熊果酸;含量测定;高效液相色谱法
【作者】沙玫;徐伟;陈莉
【作者单位】福建中医学院
【正文语种】中文
【中图分类】R286.0
【相关文献】
1.高效液相色谱法测定山楂精降脂片中齐墩果酸和熊果酸含量 [J], 林轶男;金慧子;苏娟
2.高效液相色谱法测定强肝消脂胶囊中熊果酸的含量 [J], 洪海;李英哲;金光日
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高效液相色谱法测定大鼠血浆中游离脂肪酸浓度
高效液相色谱法测定大鼠血浆中游离脂肪酸浓度黄作君;徐刚;黎月玲;劳干诚【期刊名称】《广东药学院学报》【年(卷),期】2004(20)6【摘要】目的建立大鼠血浆中游离脂肪酸(FFAs)浓度的测定方法.方法以十七烷酸为内标,用ψ(异丙醇∶正庚烷∶2 mol/L磷酸)=(40∶10∶1)提取,溴苯乙酮衍生化,流动相为ψ(乙腈∶水)=(81∶19),流速1.0 mL/min,柱温55 ℃,分析柱Nova-pak C18(250 mm×4.6 mm,4 μ m),紫外检测波长242 nm.结果各FFAs最低检测限为0.6 μmol/L,平均回收率为(100.1±2.0)%,批内、批外RSD<6.5%.结论本法稳定、灵敏、可靠,适用于大鼠血浆中FFAs浓度测定.【总页数】3页(P656-658)【作者】黄作君;徐刚;黎月玲;劳干诚【作者单位】广州市红十字会医院,广东,广州,510220;暨南大学2001级研究生,广东,广州,510632;广州市红十字会医院,广东,广州,510220;广州市红十字会医院,广东,广州,510220【正文语种】中文【中图分类】R927.2【相关文献】1.高效液相色谱法测定大鼠血浆中灯盏花乙素的药物浓度 [J], 高敏;卢李倩;王晓月;周庆颂2.高效液相色谱法测定大鼠血浆中替格瑞洛的浓度 [J], 马文娟3.超高效液相色谱法测定大鼠血浆中左氧氟沙星质量浓度 [J], QIU Yanchuan;LIU Yang;ZHONG Ling;YANG Zongfa4.高效液相色谱法测定大鼠血浆中厄洛替尼的浓度及其口服药动学研究 [J], 李欣;李晓琴;李新霞5.高效液相色谱法测定大鼠血浆中倍半萜内酯类化合物苍耳亭的浓度 [J], 曹秀;韩静文;吴妍;李会婷;马旖旎;陈卫东;史天陆因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
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) 课题来源 : 国家自然科学基金资助项目 ( 编号 : 8 1 2 7 1 9 1 9 医学硕士生 , 作者简介 : 熊辉 , 男, 主要从事动脉粥样硬化性疾病的研究 0 1 9 8 -, 副教授 , 主要从事脂代谢与相关疾病的研究 医学硕士 , 通信作者 : 胡汉宁 , 男, 2 9 6 1 -,
摘要 目的 : 探讨高效液相色谱法 ( 与酶 法 检 测 血 清 游 离 脂 肪 酸 ( 收取 HP L C) F F A)的 结 果 有 无 差 异 。 方 法 : , 武汉大学 中 南 医 院 9 分离新鲜血清, 采用全自动生化分析仪酶法测定血清 F 2名健康体检者空腹外周血3m l F A 水平 , 为 内 标, 改良 D 酶法检测血清 同时以正十七酸 ( 1 7∶0) o l e s法 萃 取 血 清 F F A, HP L C 法 定 量 检 测 。结 果 : C ( ) / ( ) / 两种 方 法 检 测 结 F F A 结果为 4 6 6. 5 3 4 7. 3, 5 8 5. 3 m o l L,HP L C法 F F A 结果为 4 4 8. 5 3 3 9. 5, 5 7 1. 9 m o l L, μ μ ) , ) 。 结论 : 果无明显差异 ( 且具有良好的相关性 ( 酶法与 HP 0 0 3 9 4, 5 9 8 0, 5 L C 法检测 F F A t =1. P>0. r=0. P<0. 结果一致性良好 。 酶法操作简单 , 更适合临床实验室常规检测 。 关键词 高效液相色谱 ; 游离脂肪酸 ; 酶法 中图分类号 R 6. 1 文献标识码 A 4 4
C e n F o r G e n D i a n Z h o H o s i o Wu h U n i Wu h 4 3 0 C h i t e r e o s i s, n n a n t a l a n v e r s i t a n 0 7 1, n a g p f g y,
A b s t r a c t : ( e r O b e c t i v e T o e x l o r e w h e t h e r s e r u m f r e e f a t t a c i d s F F A) l e v e l d e t e r m i n e d b h i h - p p y y g j f o r m a n c e l i u i d c h r o m a t o r a h HP L C)d i f f e r e d f r o m t h e r e s u l t s o f e n z m a t i c m e t h o d s . q g p y ( y :A , M e t h o d s t o t a l o f 9 2s u b e c t s w e r e r e c r u i t e d f r o m Z h o n n a n H o s i t a l o f Wu h a n U n i v e r s i t 3 j g p y , m l f a s t i n b l o o d s a m l e s w e r e t a k e n f r o m t h e a r t i c i a n t s a n d s e r u m F F A l e v e l s w e r e m e a s u r e d g p p p ( ) b o t h b a u t o m a t i c b i o c h e m i c a l a n a l z e r e n z m a t i c m e t h o d a n d HP L C m e t h o d .T h e m o d i f i e d y y y , D o l e s E x t r a c t i o n m e t h o d w a s u s e d t o e x t r a c t f r e e f a t t a c i d s a n d h e t a d e c a n o i c a c i d( C 1 7∶0) y p : ) 0 t =1. P>0. s e r v e d a s a n i n t e r n a l s t a n d a r d . R e s u l t s T h e r e w a s n o s i n i f i c a n t d i f f e r e n c e( 3 9 4, 5 g / b e t w e e n t h e r e s u l t s o f e n z m a t i c m e t h o d( 4 6 6. 5[ 3 4 7. 3, 5 8 5. 3]μ m o l L) a n d HP L C m e t h o d y ( [ , ] / ) , ( , 4 4 8. 53 3 9. 55 7 1. 9 μ m o lL a n d t h e r e s u l t s s h o w e d s t r o n l c o r r e l a t i o n r=0. 9 8 0 P< g y ) : 0. 0 5 . C o n c l u s i o n T h e r e s u l t s o f e n z m a t i c m e t h o d a r e c o n s i s t a n t w i t h HP L C. E n z m a t i c a s s a y y y i s s i m l e a n d s u i t a b l e f o r c l i n i c a l l a b o r a t o r r o u t i n e t e s t i n . p y g ; ; K e W o r d s i h P e r f o r m a n c e L i u i d C h r o m a t o r a h F r e e F a t t A c i d s E n z m a t i c A s s a H g q g p y y y y y 硬脂酸和软 血清中含 量 最 多 的 脂 肪 酸 是 油 酸 、 脂酸 , 它们占血清 总 含 量 的 9 0% 以 上 。 血 清 中 游 离 , 主要来源于脂肪组 脂肪酸 ( e f a t t a c i d s F F A) f r e y
同, 近年来研究发现 F F A 水平升高既可增加胰岛素 抵抗又 可 引 起 高 胰 岛 素 血 症
[ 3]
。人体内高水平的
最终出现与2 型糖 F F A 可以直接损害胰 岛 β 细 胞 , [ 4] 尿 病 相 似 的 β 细 胞 功 能 异 常 。 不 仅 如 此, 血清 糖 F F A 的升高与心血管 疾 病 的 危 险 因 素 如 高 血 压 、 、 尿病等密切 相 关 。 目前测定血清 F 采用滴定法 F A 比色法 、 原子分光光度法等 , 但是这些方法操作繁琐 , 精密度差 。 后来出现 的 气 相 色 谱 法 是 常 用 方 法 。 与 气相色谱法相比 , 高效液相色谱 ( f o r m a n c e l i h i h e r - q g p , ) 法具有更高的精密度和灵 u i d c h r o m a t o r a h H P L C g p y
, , , , , , X I O N G H u i C H E N W e i L I U S o n m e i L U O W a n MA P e i L Z h i h u a g , , L I S i w e i T U J i a n c h e n Z H O U X i n, H U H a n n i n g g
第2期
熊 辉, 等. 高效液相色谱与酶法检测血清游离脂肪酸的对比分析
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2] 。 不同脂肪酸对 人 体 的 作 用 不 结合存在于血液中 [
, 各F 积与内标峰面积之比为横坐标 ( F A 浓度为纵 X) , 进行回归分析 , 坐标 ( 得到线性回归方程 。 Y) 1. 5 精密 度 测 定 选 取 正 常 健 康 人 群 血 清 标 本 1 / , 同时再选取脂肪酸浓度处于医 份( 3μ m o l L) 4 2 5. / , 将每份标 学决定水平的 标 本 1 份 ( 5μ m o l L) 8 7 9. 本分 为 2 前 者 编 为 第 一 批 次, 后者编为第二批 0 份, , 每 天 测 两 个 批 次, 每个批次 次 。 连续上样测定 5d 测4 次, 计算批内相对标准差( 和批间相对标 R S D) 。 准差 ( R S D) 1. 6 回收 率 测 定 选 取 正 常 健 康 人 群 血 清 标 本 1 份, 分别加入高 、 中、 低 3 种浓度的混合 F F A 标准品 溶液 , 按前述步骤进行色谱分析 。 S 1 9. 0软件进行统计 1. 7 统 计 学 分 析 使 用 S P S 学分析 。 两种 方 法 所 测 脂 肪 酸 结 果 经 正 态 性 检 验 , 故 采 用 四 分 位 数 表 示。检 测 结 果 F F A 呈偏态分布 , 的比较采用配 对 样 本t 检 验 , P <0. 0 5表示两种方 法检测差异有统计学意义 。
/ : 0. 1 4 1 8 8 . 1 6 7 1 2. 2 0 1 5. 0 2. 0 2 5 D O I 1 8 8 5 - j
高效液相色谱与酶法检测血清游离脂肪酸的对比分析
熊 辉 陈 薇 刘松梅 罗 婠 马 培 吕志华 黎四维 涂建成 周 新 胡汉宁 武汉大学中南医院基因诊断中心 湖北 武汉 4 0 7 1 3 0
r i s o n o f S e r u m F r e e F a t t A c i d s D e t e r m i n e d b H i h P e r f o r m a n c e C o m a y y g p L i u i d C h r o m a t o r a h a n d E n z m a t i c M e t h o d q g p y y 第3来自6卷 第2期 5年3月 2 0 1