鸡胚接种
实验八 病毒鸡胚接种与细培养
兽医微生物实验教学课件
（动物医学本科专业）
动物医学系
实验八 病毒鸡胚接种与培养
目的要求：
1、了解不同日龄鸡胚接种的途径和应用。 2、掌握鸡新城疫病毒鸡胚尿囊腔接毒、收毒方法。 3、掌握鸡胚成纤维细胞培养和新城疫病毒接种、病变观察及收毒。
病毒分离培养
分离培养：动物接种——原动物/实验动物 鸡胚接种——尿囊腔、卵黄囊、尿囊膜、羊膜腔等
细胞培养——原代细胞
二倍体细胞 传代细胞
cpe观察空斑ຫໍສະໝຸດ 基因克隆/扩增组织块培养——肠管、气管环等
鸡 胚 成 纤 维 细 胞 培 养 程 序 ：
在无菌条件下采取9－10日龄鸡胚 ↓ 除去头(或仅除去喙和眼)、爪和内脏，并剪成块 ↓ 用Hanks液等充分冲洗 ↓ 剪将其剪成lmm大小的碎块 ↓ 加入Hanks液或其他洗液，充分冲洗 ↓ 约4倍量的0.25％胰酶，并调整pH至7.6－7.8 ↓ 37℃水浴中感作30分钟，每10分钟轻轻摇动一次 ↓ 吸弃上层胰酶溶液 ↓ 用洗液轻洗2次后 ↓ 吸管充分吹打，直至形成均匀的细胞悬液 ↓ 准备细胞计数 ↓ 单层细胞培养
实验内容：
1、鸡胚的选择和接种途径：鸡胚发育正常时，可见清晰的血管和活 的鸡胚，血管及其主要分支均明显，呈鲜红色，鸡胚可以活动。 卵黄囊接种：6-8日龄的鸡胚； 绒毛尿囊腔接种：9-13日龄的鸡胚； 鸡胚血管注射：12-13日龄鸡胚； 羊膜腔和脑内注射：10日龄鸡胚。 2、鸡新城疫病毒接种液或接种病料的处理；照蛋、打孔；接种。接 种后的检查和收毒。 3、鸡胚成纤维细胞培养和新城疫病毒接种、病变观察及收毒。
鸡胚接种实验步骤
鸡胚接种实验步骤
鸡胚接种实验是一种常用于研究病毒感染和疫苗研发的方法。
以下是一般的鸡胚接种实验步骤：
1. 准备工作：
- 确保实验室卫生条件良好，并进行必要的消毒处理。
- 准备所需材料，包括鸡蛋（受精后的鸡蛋）、病毒样品或疫苗、适当的培养基等。
2. 取出鸡蛋：
- 使用无菌器具将鸡蛋从孵化器中取出。
- 用消毒剂擦拭鸡蛋表面，确保表面无菌。
3. 制备操作区域：
- 在实验室台面上准备一个无菌操作区域。
- 使用无菌器具将所需工具（如注射器、刀片）摆放在操作区域上。
4. 接种操作：
- 在无菌操作区域上，使用无菌器具在鸡蛋的空气室区域确定一个合适的接种点。
- 使用无菌注射器将病毒样品或疫苗注入鸡蛋内。
- 注意避免对鸡蛋内的胚胎造成机械损伤。
5. 封蛋：
- 使用无菌聚乙烯封膜或其它适当的封蛋材料将接种点封住，以防止污染和脱水。
6. 孵化：
- 将接种后的鸡蛋放回孵化器中，并根据所研究的病毒或疫苗的特性设定合适的温度和湿度。
- 根据实验需求，确定孵化时间，通常为数天至数周。
7. 结果观察：
- 在孵化结束后，取出鸡蛋，观察胚胎的发育情况。
- 根据研究的目的，可以进行进一步的分析、检测和测量。
需要注意的是，鸡胚接种实验需要在合适的实验室条件下进行，严格遵守实验室安全操作规范，并获得相关机构的许可和伦理审批。
此外，具体的实验步骤可能会因研究目的和病原体的不同而有所变化，所以在进行实验前最好参考相关的专业文献或咨询专业人士。
《鸡胚接种技术》课件
卫生管理
保持接种器具和操作区域的清 洁，防止细菌或病毒的污染。
鸡胚接种后的常见问题与处理方法
问题 鸡胚死亡 细菌感染 发育异常
处理方法
检查温度、湿度和操作技术是否合适，并调整相 应参数。
进行必要的消毒处理，更换培养基，增加卫生管 理措施。
观察并记录发育情况பைடு நூலகம்与预期结果进行对比，调 整相关因素。
总结与展望
鸡胚接种技术是一项重要的科研工具，通过研究鸡胚的发育过程，可以获得 对生命科学和医学领域的重要启示。未来，我们将继续探索和优化鸡胚接种 技术，为科学研究做出更大的贡献。
《鸡胚接种技术》PPT课件
鸡胚接种技术简介 影响鸡胚成活的因素 鸡胚接种前的准备工作 鸡胚接种过程详解 鸡胚接种后的管理要点 鸡胚接种后的常见问题与处理方法 总结与展望
鸡胚接种技术简介
鸡胚接种技术是一种重要的研究工具，用于研究鸡胚在发育过程中的变化。 研究人员可以通过接种不同物质来观察鸡胚的反应和发育情况，从而获得重 要的科学发现。
鸡胚接种前的准备工作
1 设备准备
确保接种所需的设备和材料已准备齐全，包括培养皿、接种针和培养基等。
2 培养基准备
根据实验需求制备适当的培养基，确保其成分和浓度符合实验要求。
3 消毒处理
对接种器具和操作区域进行彻底的消毒处理，以避免细菌或病毒的污染。
鸡胚接种过程详解
1
接种准备
2
将鸡胚放置在适当的接种器具中，准备
好需要使用的培养基和接种针。
3
鸡胚获取
选择具有良好质量的鸡胚，并在适当的 环境中进行保持，以避免其受到外界环 境的影响。
接种过程
使用接种针将所需物质接种到鸡胚中， 确保操作的准确性和稳定性。
病毒的鸡胚接种技术
病毒的鸡胚接种技术目的要求掌握鸡胚培养病毒的接毒和收毒方法，明确鸡胚培养病毒的应用。
仪器及材料受精卵、恒温箱、照蛋器、接种箱、蛋架、一次性注射器（1～5ml）、中号镊子、眼科剪和镊子、毛细吸管、橡皮乳头、灭菌平皿、试管、吸管、酒精灯、试管架、胶布、蜡、锥子、锉、煮沸消毒器、消毒剂（5%碘酊棉、75%酒精棉、5%石炭酸或3%来苏儿）、新城疫Ⅰ系或Ⅳ系疫苗。
方法与步骤（尿囊接种为例）1．选择9～12日龄的健康鸡胚，最好是SPF鸡胚。
为便于照蛋观察，以来航鸡蛋或其他白壳蛋为好。
选好后用孵化箱孵化，要注意温度、湿度和翻蛋。
孵化最低温度为36℃，一般为37.5℃，相对湿度为60%。
每日最少翻蛋3次。
健康鸡胚：照蛋时可见清晰的气室、血管及鸡胚的活动。
2．病毒材料的处理怀疑污染细菌的液体材料：加抗生素（青霉素1000IU和链霉素1000μg/ml）置室温1h或4℃冰箱12～24h→高速离心，取上清液→细菌滤器滤过除菌若用新城疫Ⅰ系或Ⅳ系疫苗，则无菌操作用生理盐水将其稀释100倍。
3．照蛋以铅笔划出气室、胚胎位置及接种的位置，标明胚龄及日期气室朝上立于蛋架上。
4．消毒先碘酊后酒精，由内向外呈同心圆状消毒5．打孔用灭菌小锥子在在气室中心或远离胚胎侧气室边缘，避开大血管进行打孔，孔径以1ml注射器针头容量刺入为宜。
6．注入病毒材料用一次性1ml注射器吸取新城疫病毒液垂直或稍斜插入气室，刺入尿囊，向尿囊腔内注入0.1～0.3ml。
7．封孔并继续孵化注射后，用熔化的石蜡封孔，置温箱中直立孵化3～7d。
孵化期间，每6h照蛋一次，观察胚胎存活情况。
弃去接种后24h内死亡的鸡胚，24h以后死亡的鸡胚应置0～4℃冰箱中冷藏4h或过夜（气室朝上直立），一定时间内不能致死的鸡胚也放冰箱冻死。
8．收毒收毒原则：（1）先冷藏再收毒。
（2）接种什么部位，收集什么部位。
（3）固液分开收集。
（4）无菌收集。
（5）冷冻保存。
收毒方法：无菌操作轻轻敲打并揭去气室顶部蛋壳及壳膜，用灭菌镊子夹起并撕开或剪开气室中央的绒毛尿囊膜，然后用灭菌吸管从破口处吸取尿囊液，注入灭菌青霉素瓶或试管内。
鸡胚接种实验报告
一、实验目的1. 掌握鸡胚接种病毒的方法和步骤。
2. 了解病毒在鸡胚中的生长和繁殖情况。
3. 学习病毒分离和培养的基本原理。
二、实验原理鸡胚接种是一种常用的病毒分离和培养方法。
病毒接种于鸡胚后，能够在鸡胚中繁殖，从而便于观察和分析病毒的生物学特性。
本实验主要采用尿囊腔接种法，将病毒接种于鸡胚尿囊腔内，观察病毒在鸡胚中的生长和繁殖情况。
三、实验材料1. 实验动物：9-11日龄的鸡胚。
2. 实验试剂：新城疫病毒悬液、生理盐水、碘酒、酒精、消毒棉球等。
3. 实验仪器：照蛋器、无菌手术刀、镊子、注射器、剪刀、平皿等。
四、实验方法1. 鸡胚准备：取9-11日龄的鸡胚，用碘酒和酒精消毒鸡胚蛋壳，用手术刀在鸡胚气室处划一小孔，用注射器吸取适量新城疫病毒悬液。
2. 尿囊腔接种：将鸡胚置于卵盘上，气室端向上，用注射器将病毒悬液注入鸡胚尿囊腔内，注入量约为0.1-0.2ml。
3. 孵育：将接种后的鸡胚放入37℃孵卵箱中孵育48-72小时。
4. 观察：定期观察鸡胚的生长发育情况，记录死亡、畸形等现象。
5. 病毒分离：取出死亡鸡胚，无菌操作下取出尿囊液，进行病毒分离和培养。
五、实验结果1. 接种后，部分鸡胚出现死亡现象，死亡时间集中在接种后24-48小时。
2. 死亡鸡胚的尿囊液中检测到新城疫病毒。
3. 成活鸡胚生长发育正常，未出现明显异常。
六、实验讨论1. 鸡胚接种是一种简单、有效的病毒分离和培养方法，适用于多种病毒的研究。
2. 尿囊腔接种法是一种常用的鸡胚接种方法，适用于新城疫病毒、流感病毒等多种病毒。
3. 本实验结果表明，新城疫病毒能够在鸡胚中繁殖，为新城疫病毒的研究提供了有力支持。
七、实验结论1. 鸡胚接种是一种简单、有效的病毒分离和培养方法。
2. 尿囊腔接种法适用于新城疫病毒等多种病毒的分离和培养。
3. 本实验成功分离和培养了新城疫病毒，为新城疫病毒的研究提供了有力支持。
八、实验心得1. 实验过程中，无菌操作至关重要，需严格按照无菌操作规程进行。
实验鸡胚接种
实验鸡胚接种
xx年xx月xx日
CATALOGUE
目录
实验准备实验步骤实验数据分析实验结论实验讨论与展望
01
实验准备
1
实验人员要求
2
3
了解微生物的种类、特点、致病性及检验方法等。
具备微生物学基础知识
熟悉接种、分离、培养、鉴定等实验操作规范，并能够熟练操作。
掌握实验操作技能
遵守实验室的各项安全规章制度，注意个人防护和实验室废弃物的处理。
培养时间
根据实验需要，确定鸡胚培养的时间，以便观察和记录实验结果。
鸡胚培养
03
实验数据分析
数据记录
记录实验进行的日期。
实验日期
记录所使用鸡胚的编号，方便追踪。
鸡胚编号
记录接种的病毒或细菌剂量。
接种剂量
记录鸡胚在实验过程中表现出的症状和时间。
症状表现
数据转换
将非数值型数据进行转换，以便进行数学分析。
多样性
根据实验需求，选择不同品种、来源的鸡胚，以满足实验的多样性和代表性。
鸡胚选取
选用精细、锋利的接种针，灭菌烘干后备用。
鸡胚接种
准备接种工具
将鸡胚固定在操作台上，用接种针在鸡胚的尿囊膜上选择适宜的位置，进行无菌接种。
接种操作
接种后对鸡胚进行密封处理，以防止外界微生物的侵入。
接种后处理
培养环境
为鸡胚提供适宜的温度、湿度和气体环境，以保证鸡胚的正常发育和繁殖。
数据清洗
去除异常值、缺失值和重复数据，确保数据准确性。
数据聚合
将多个数据源的数据聚合在一起，以便更全面地评估实验结果。
数据处理
03
结论提取
基于分析和解释，提取有关实验的结论，为后续研究提供参考。
鸡胚接种技术
这些病毒被接种到尿囊腔后，可在内皮细胞中复制，
复制的病毒被释放到尿囊液中，因此，在尿囊液中喊 与大量的病毒。
鸡胚接种技术
——鸡胚的接种途径和方法
✪
卵黄囊接种：
这些大的病原体能在卵黄囊的内皮细胞中快速生长。
用于虫媒病毒、衣原体及立克次体等的分离和繁殖，
鸡胚接种技术
——鸡胚的结构与生理 ✪ 鸡胚的发育过程：Day 3
鼻、腿、翅开始形成，器官出现。 尿囊开始长出，胚胎的位置与蛋的长轴垂直。 胚胎与延伸的卵黄囊血管形似蚊子。
鸡胚接种技术
——鸡胚的结构与生理 ✪ 鸡胚的发育过程：Day 4
尿囊和羊膜腔形成。 卵黄体积继续增大，卵黄囊血管包围卵黄近1/3。 胚胎与卵黄囊血管形似蜘蛛。
主要用于分离和繁殖在绒毛尿囊膜上产生斑点状和痘 可在绒毛尿囊膜上滴定这些病毒，通过产生斑和痘的 数目来计算感染性病毒颗粒的数目。 还可用于抗体滴定，因为斑和痘数目减少的程度与抗 体浓度有关。
鸡胚接种技术
——鸡胚的接种途径和方法
✪
尿囊腔接种：
应和传代培养。
用于流感病毒、流行性腮腺炎病毒和新城疫病毒的适
✪ 卵黄囊
主要营养的存储场所，在胚胎发育早期供给鸡胚营养
✪ 卵白
在胚胎发育晚期供给鸡胚营养
鸡胚接种技术
——鸡胚的孵育和检查
✪ 受精鸡卵的选择
接种病毒的受精鸡卵应未感染已知病毒或其它微生
物，最好来自无特定病原体(Specified Pathogen
Free, SPF)鸡群。 受精卵的壳最好是白色的，利于检卵灯观察鸡胚的 发育情况。 受精卵必须新鲜，保存在5~20℃不超过10天。
鸡胚接种技术
——鸡胚的孵育和检查
鸡胚接种实验报告
鸡胚接种实验报告引言鸡胚接种实验是一种常见的生物学实验，通过将病毒或细菌接种于鸡胚中，我们可以观察到它们对胚胎发育的影响。
这种实验能够帮助我们了解病原体的传播途径、感染机制以及鸡胚对外界刺激的响应能力。
本文将就鸡胚接种实验的过程和观察结果展开论述，以期更好地了解和探索生命的奥秘。
实验材料和方法材料：新鲜鸡胚、病毒/细菌培养液方法：1. 准备培养基：将培养基配制好，并加热灭菌。
2. 取出鸡胚：在无菌条件下，取出新鲜的鸡胚，约为8-10天，保证胚胎仍处于发育阶段。
3. 接种病原体：在鸡胚卵黄囊的顶部，用无菌针缓慢注入病原体培养液。
4. 封胚：用胶带或蜡封好孔洞，保持接种处的无菌状态。
5. 孵化：将接种后的鸡胚放入孵化器中，保持适当的温度和湿度。
6. 观察：根据实验设计，每隔一段时间观察鸡胚的发育情况。
实验结果通过观察病原体接种后的鸡胚，我们可以得出一些有趣的结果。
1. 反应变化：不同病原体对鸡胚的反应变化具有差异。
一些病原体可能导致胚胎发育减缓或停滞，而另一些病原体可能导致胚胎畸形或死亡。
这些结果提供了关于病原体对于胚胎发育的影响的线索。
2. 免疫响应：鸡胚对病原体的接种可能会触发免疫响应。
我们可以观察到鸡胚的免疫系统是否能够有效地对抗病原体的入侵。
免疫细胞的增多、炎症反应的出现都可能是这一免疫响应的体现。
3. 病变形态：观察鸡胚的病变形态对于了解病原体的感染机制和病变过程非常重要。
我们可以观察到病原体在鸡胚中的定位、侵入细胞的方式以及细胞破坏的情况。
这些观察结果有助于研究病原体的致病机制，并为预防和治疗提供依据。
4. 实验变量：在鸡胚接种实验中，还可以引入一些实验变量，比如改变接种浓度、不同时间点的接种等，以观察这些变量对实验结果的影响。
通过对变量的控制和对比，可以更加准确地判断病原体对鸡胚的影响。
结论鸡胚接种实验是一种有效的方法，可以研究病原体与胚胎发育之间的关系。
通过观察鸡胚的发育情况和病变形态，我们可以了解病原体的感染机制以及胚胎对外界刺激的响应能力。
鸡胚的接种技术 - 养鸡技术
鸡胚的接种技术-养鸡技术张师杨（哈尔滨市阿城区畜牧兽医局150000）鸡胚接种技术用途广泛，除了可以分离培养病毒、支原体及衣原体等病原以确诊传染病外，还可用于病毒的鉴定，效价测定，致病力测定及制造疫苗、抗原等。
因此掌握鸡胚接种技术对进行传染病的研究和防制工作非常重要。
1选胚根据需要选用合适日龄的鸡胚，大多数病毒适于9～12日龄的鸡胚。
鸡胚应以白色蛋壳者为好，便于照蛋观察。
鸡胚应发育正常，健康活泼，不要过大、过小或畸形蛋孵化的胚。
鸡胚应来自健康无病的鸡群，而且不能含有可抑制所接种病毒的母源抗体，最好选用SPF鸡胚或非免疫鸡胚。
2. 照蛋定位接种前应在照蛋器下检查鸡胚，挑出死胚和弱胚。
对所有健康胚应先用红铅笔画出气室位置，再于胚胎侧画出接种位点（进针点），接种点应避开大血管，靠近气室边缘处，离胚头约1cm左右[养殖:/]。
3 接种照蛋定位完毕后，即可开始接种。
先用碘酊将接种位点和气室消毒，再用70%酒精脱碘，然后根据需要用三棱针或20号针头在蛋壳上打孔。
尿囊腔接种：最常用的接种方法，鸡新城疫、减蛋综合症病毒、传染性支气管炎病毒、法氏囊病毒等均可采用这种方法。
蛋壳消毒后，先在气室上打一小孔，再于胚胎一侧近气室处所画位点打一小孔，用带5～7号针头的注射器插入孔内约1. 5cm，接种接种材料0. 1～0.2mL。
进针时针头与蛋壳应保持30℃角，不应垂直进针，注射完毕，立即用溶化的热石蜡将注射口和气室上小孔密封，然后放回37℃孵化箱孵化72～120h。
绒毛尿囊膜接种：主要用于痘病毒、喉气管炎病毒和马立克氏病毒等的分离培养。
将卵壳消毒后，先在气室上打一小孔，再于胚胎侧靠近气室处避开大血管用电烙铁或钢锯条将蛋壳打开1个4mm见方的小口，用刀尖小心撬开蛋壳，不能损伤卵壳膜，形成卵窗。
用针尖轻轻挑破卵窗中心的卵壳膜，但不能损伤卵壳膜下的绒毛尿囊膜。
在针尖挑破处滴1滴灭菌生理盐水或甘油，然后用吸头在气室小孔上吸气，使胚内造成负压，这时卵窗处绒毛尿囊膜下陷而形成人工气室，此时可见生理盐水或甘油迅速渗入。
实验一 鸡胚接种 ppt课件
病毒培养的宿主系统： ✓ 本动物 ✓ 实验动物：家兔、小
白鼠、大白鼠、豚鼠、 鸡胚 ✓ 体外培养的器官、组 织细胞
实验一 鸡胚接种
实验一 鸡胚接种
实验一 鸡胚 接种
1. 鸡胚 10日龄 2. 病毒 鸡新城疫病毒（NDV） 3. 照蛋灯 4. 打孔器 5. 石蜡 6. 注射器 7. 蛋座 8. 酒精棉球、碘酊棉球
实验一 鸡胚接种 3. 将卵横放在卵座上，胚胎位置向下。在卵长
径的1/2处用碘酊和酒精消毒。 4. 用钢锥打一小孔，将针头刺入约1.5cm，注
入病毒液0.1-0.5ml。
5. 用熔化的石蜡封孔， 置孵卵箱内继续孵育， 24h内死亡者废弃。
实验一 鸡胚接种
1. 取10-12日龄鸡胚，画出气室部，消毒。 2. 在气室端的卵壳上开一1.5×1.5cm的口
32. 必相须对保湿证度具：有50充%-60% 分的新鲜空气流 通，特别是在孵 化5-6天以后。
4. 从孵育后第3天 开始，每天翻卵 一次。
六、 检卵
实验一 鸡胚接种 ➢ 未受精卵：只见模糊的卵黄阴影，不见
血管和鸡胚痕迹。 活胚：具有清晰的血管和鸡胚暗影，较 大鸡胚还可见到胚动，但孵育14、15天 以后胎动不明显，甚至无胎动。 死胚：血管昏暗模糊，没有胚动。
7. 卵黄 在胚胎发育早期供给鸡胚营养。 8. 卵白 在胚胎发育晚期供给鸡胚营养。
实验一 鸡胚接种
四、பைடு நூலகம்精卵的选择
1. 最好是来自SPF鸡群，以降低母源抗体 的影响
2. 受精卵的壳最好是白色的 3. 受精卵必须新鲜，保存在5-20℃不要
超过10天，保存一个月的受精卵，孵 化率将近于零。
接种
1. 孵卵箱内的温度应保持在37.538.5℃
鸡胚接种实验报告
鸡胚接种实验报告
本次实验旨在观察鸡胚在不同条件下的发育情况，以及探讨不同因素对鸡胚发育的影响。
通过本实验的开展，我们希望能够更深入地了解鸡胚的发育过程，为相关领域的研究提供参考和支持。
首先，我们在实验室中准备了一批健康的鸡蛋，并将它们放置在适宜的温度和湿度条件下进行孵化。
在鸡蛋孵化的过程中，我们进行了一系列的观察和记录，包括鸡胚的发育情况、胚胎膜的形成、器官的发育等。
同时，我们还设置了不同的实验组，分别在不同的环境条件下进行观察和比较。
在实验过程中，我们发现了一些有趣的现象。
首先，我们发现在恒温恒湿的条件下，鸡胚的发育速度更快，胚胎膜的形成也更加完整。
而在温度或湿度波动较大的条件下，鸡胚的发育情况则明显受到影响。
其次，我们还观察到在不同营养条件下，鸡胚的发育情况也存在差异。
营养充足的情况下，鸡胚的发育速度更快，器官的发育也更加完善。
通过本次实验，我们得出了一些初步的结论。
首先，恒温恒湿的条件对鸡胚的发育至关重要，温度和湿度的波动会严重影响鸡胚的发育情况。
其次，营养充足也是保证鸡胚正常发育的重要条件，缺乏营养会导致鸡胚的发育受到影响。
总的来说，本次实验为我们提供了一些有益的启示，对于鸡胚的发育规律有了更深入的了解。
在今后的研究中，我们将进一步探讨鸡胚发育的机制，以及寻找更好的方法来促进鸡胚的健康发育。
希望通过我们的努力，能够为相关领域的发展做出一些贡献。
通过本次实验，我们对鸡胚的发育过程有了更深入的了解，也为相关领域的研究提供了一些有益的参考。
希望我们的努力能够为鸡胚发育的研究和应用提供一些有益的支持。
实验一鸡胚接种课件
06 参考文献
参考文献
书籍名称：《实验动物学》 作者：XXX
出版年份：XXXX年
感谢您的观看
THANKS
实验一鸡胚接种课件
目录
CONTENTS
• 实验目的 • 实验材料 • 实验步骤 • 实验结果与分析 • 注意事项与安全防护 • 参考文献
01 实验目的
掌握鸡胚接种技术
掌握鸡胚接种的基本操作流程： 包括对鸡胚的选择、处理、接种
和观察等步骤。
Байду номын сангаас
熟悉接种工具的使用：如接种环、 注射器等，并了解其消毒和保养
病原体繁殖情况统计
繁殖数量
繁殖条件
通过显微镜观察和计数，统计了病原 体在鸡胚内的繁殖数量。发现病原体 在适宜条件下繁殖迅速。
分析了病原体繁殖所需的温度、湿度 等条件，有助于了解病原体的生态学 特性。
繁殖周期
记录了病原体从开始繁殖到达到一定 数量所需的时间，即繁殖周期。这对 于了解病原体生长特性和制定防治措 施具有重要意义。
方法。
了解不同接种方法的适用范围和 注意事项：如滴注法、注射法等。
了解鸡胚对不同病原体的反应
1 2
观察鸡胚对不同病原体的反应
如细菌、病毒等，记录其症状和病变。
分析鸡胚对不同病原体的抵抗力
了解哪些病原体能够引起鸡胚死亡或异常发育。
3
比较不同病原体对鸡胚的致病力
为研究病原体致病机制和疫苗研发提供参考。
数据分析与结论
数据处理
对实验数据进行整理、统计和分 析，以表格、图表等形式呈现实
验结果。
对比分析
将实验组与对照组的数据进行对 比分析，以评估实验效果和病原
体对鸡胚的影响。
《鸡胚接种技术》课件
该技术广泛应用于生物医学、农 业、食品工业等领域，具有较高 的实用价值。
鸡胚接种技术的历史与发展
鸡胚接种技术最早可追溯到19 世纪末期，当时主要用于疫苗 生产。
随着科技的不断进步，鸡胚接 种技术在20世纪得到了迅速发 展，应用范围不断扩大。
目前，鸡胚接种技术已经成为 一种成熟的实验和生产手段， 为科学研究和技术创新提供了 有力支持。
鸡胚接种技术的应用领域
01
02
03
04
生物医学
用于疫苗生产、药物筛选、疾 病模型构建等。
农业
用于育种、品种改良、动物疫 病防治等。
食品工业
用于生产某些酶制剂、生物活 性物质等。
其他领域
如环保、生物安全等也涉及到 鸡胚接种技术的应用。
02
鸡胚接种技术的基本原理
鸡胚的结构与发育
鸡胚的结构
鸡胚由卵黄囊、羊膜、绒毛膜和 尿囊等组成，具有完整的胚胎发 育过程。
VS
病原鉴定
通过鸡胚接种技术，可以对分离出的病毒 进行生物学鉴定，确定病毒的种类、毒力 等。
抗体的制备与检测
抗体制备
利用鸡胚接种技术，可以制备针对各种病毒 的特异性抗体，用于治疗或诊断疾病。
抗体检测
通过鸡胚接种技术，可以检测血清中的抗体 水平，了解免疫状态或评估疫苗免疫效果。
THANKS
感谢观看
鸡胚接种技术的应用实例
疫苗的研发与生产
疫苗研发
利用鸡胚接种技术，可以研发针对各种病毒性疾病的疫苗，如流感疫苗、狂犬病疫苗等。
疫苗生产
鸡胚是生产疫苗的重要原材料，通过鸡胚接种技术，可以大量繁殖病毒，为疫苗生产提供足够的原材 料。
病原的分离与鉴定
病原分离
鸡胚接种的方法与步骤
鸡胚接种的方法与步骤
鸡胚接种是一种常用的病毒分离和培养方法，其基本步骤如下：1. 选择合适的鸡胚：通常选择9-12 日龄的鸡胚，此时鸡胚的免疫系统尚未完全发育，适合病毒的生长和繁殖。
2. 准备接种材料：将待接种的病毒样品稀释到适当的浓度，并准备好接种工具，如吸管、针头、注射器等。
3. 接种鸡胚：将稀释后的病毒样品接种到鸡胚的尿囊腔、卵黄囊或绒毛尿囊膜等部位。
接种时要注意操作规范，避免污染和损伤鸡胚。
4. 孵化鸡胚：将接种后的鸡胚放入孵化箱中，在适当的温度和湿度条件下孵化，让病毒在鸡胚中生长和繁殖。
5. 观察和检测：在孵化过程中，定期观察鸡胚的生长情况和病变特征，如鸡胚是否死亡、是否出现出血点、是否出现痘斑等。
同时，可以进行病毒的分离和鉴定，以确定病毒的种类和特性。
6. 收获病毒：当病毒在鸡胚中生长和繁殖到一定程度时，可以收获病毒。
收获病毒的方法包括离心、过滤、沉淀等，具体方法取决于病毒的种类和特性。
7. 保存病毒：收获的病毒可以保存在适当的温度和湿度条件下，以备后续的实验和研究使用。
需要注意的是，鸡胚接种是一项技术性较强的操作，需要严格遵守实验操作规范和安全注意事项，以确保实验的准确性和安全性。
同
时，在进行鸡胚接种实验时，应该遵循相关的法律法规和伦理规范，确保实验的合法性和道德性。
实验一 鸡胚接种
五、孵育
1. 孵卵箱内的温度应保持在37.5-38.5℃ 孵卵箱内的温度应保持在37.5 37.52. 相对湿度：50%-60% 相对湿度：50%3. 必须保证具有充 分的新鲜空气流 通，特别是在孵 天以后。 化5-6天以后。 4. 从孵育后第3天 从孵育后第3 开始， 开始，每天翻卵 一次。 一次。
（二）绒毛尿囊膜接种 主要用于痘V和疱疹V的分离和增殖。 主要用于痘V和疱疹V的分离和增殖。 方法一： 方法一： 1. 取10-12日龄鸡胚，画出气室部，消毒。 10-12日龄鸡胚，画出气室部，消毒。 日龄鸡胚 2. 在气室端的卵壳上开一1.5×1.5cm的口 在气室端的卵壳上开一1.5 1.5cm的口 1.5× 3. 用灭菌眼科镊子撕去一 小片内壳膜 4. 滴入接种物 5. 用胶布或透明胶纸封闭 切口
4. 用注射器吸取病毒悬液，沿气室 用注射器吸取病毒悬液， 端所穿小孔垂直刺入3cm 3cm， 端所穿小孔垂直刺入3cm，注入 0.1-0.5ml病毒液 病毒液。 0.1-0.5ml病毒液。 5. 用熔化的石蜡封孔，置孵卵箱内 用熔化的石蜡封孔， 继续孵育，每天翻卵1 继续孵育，每天翻卵1-2次，24h 内死亡者废弃。 内死亡者废弃。
十一、 十一、试验报告作业
1. 常用的鸡胚接种方法有哪些? 常用的鸡胚接种方法有哪些? 2. 简要说明鸡胚的结构及各部分结构的功能。 简要说明鸡胚的结构及各部分结构的功能。 3. 用鸡胚来进行病毒的培养要注意哪些问题? 用鸡胚来进行病毒的培养要注意哪些问题? 4. 如何区分无精卵、死胚、活胚？ 如何区分无精卵、死胚、活胚？ 5. 用于病毒培养的系统主要有哪些？ 用于病毒培养的系统主要有哪些？
用橡皮乳头紧贴于气室中央小孔上吸气用橡皮乳头紧贴于气室中央小孔上吸气造成气室内负压使卵窗部位的绒毛尿造成气室内负压使卵窗部位的绒毛尿囊膜下陷而形成人工气室此时可见滴囊膜下陷而形成人工气室此时可见滴于壳膜上的生理盐水迅速渗入
鸡胚接种注意事项
鸡胚接种注意事项鸡胚接种是家禽育种中重要的一环，它对于确保育种工作的顺利进行和家禽的健康发展至关重要。
以下是鸡胚接种的一些注意事项：1. 鸡胚的来源和存储：确保鸡胚的来源可靠，选择健康的种鸡作为母鸡，对母鸡进行充分的预防接种，排除传染病的风险。
鸡胚应当存储在适当的温度和湿度下，避免过高或过低的温度对鸡胚质量的影响。
2. 接种器具的消毒：鸡胚接种器具包括针头、注射器等，使用前应当进行严格的消毒处理，以避免交叉感染。
消毒可采用高温蒸汽、化学消毒剂等方法进行，确保器具表面干燥后方可使用。
3. 接种环境的准备：接种前要对接种环境进行充分的准备，确保无尘、无菌的环境，以减少接种后的感染风险。
接种室内要保持干燥，地面要清洁干净，空气流通良好，配备必要的消毒设备和安全用品。
4. 鸡胚的处理和接种操作：接种前，对鸡胚进行外观检查，选择外形完整、无明显异常的鸡胚作为接种对象。
接种时要先将鸡胚表面进行消毒处理，然后通过注射器将疫苗接种到鸡胚的腹腔内。
接种时要确保操作准确、迅速，并且不要使鸡胚受到过多的创伤。
5. 接种后的照顾：鸡胚接种后要给予适当的照顾，要保持鸡胚温暖、干燥，充分休息。
鸡胚接种后要进行观察，确保没有异常症状的出现。
同时，要给予它们充分的营养和护理，以促进它们的正常生长发育。
总之，鸡胚接种是育种工作中至关重要的一步，正确的接种操作和注意事项会直接影响到家禽育种的成果。
因此，在进行鸡胚接种时，我们要选择好的鸡胚来源，进行必要的消毒和准备工作，规范的操作流程和良好的鸡胚照顾是确保接种成功的关键。
只有做好这些，才能保证家禽育种的顺利进行，提高家禽的免疫力和生产性能，为养殖业的发展做出积极的贡献。
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– 实验检测法
❖血凝试验和血凝抑制试验：流感病毒的存在 ❖中和实验、IFA ❖PCR
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第五节 鸡胚接种技术的应用
病毒的培养、分离与鉴定
– 流感病毒的分离和鉴定 – 禽流感病毒的分离和鉴定
疫苗的研制
– 活疫苗和死疫苗
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二、鸡胚的孵育和检查
受精鸡卵的供给
– 没有受到病毒和细菌的污染如新城鸡瘟病毒、布氏杆菌 – 培养立克次体和衣原体，不能来自食用抗生素的鸡
鸡胚的孵育
– 温度为38～39 ℃ – 湿度为40％－70％ – 翻蛋：防止蛋白粘连，促进羊膜运动和空气流通 – 通风：排出CO2和吸入O2
检卵
– 目的标记气室和胚胎位置，了解胚胎活动情况 – 血管是否明显；有无胎动；
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三、鸡胚接种途径及方法
尿囊腔接种
– 流感病毒、流行性腮腺炎病毒、新城鸡瘟病毒的传代 – 取9－11日龄的鸡胚 – 检卵灯下划出气室和胚胎位置 – 收集尿囊液前4 ℃冰箱过夜
羊膜腔接种
– 分离流感病毒；收集羊水和尿囊液 – 收集前4 ℃冰箱过夜，目的是冻死鸡胚，使血液凝固，避
鸡胚接种技术
前言
1911年应用鸡胚研究鸡肉瘤病毒，后可用于痘病毒、 正/副粘病毒和疱疹病毒、立克次体等
鸡胚接种技术的优点:
– 为一活的机体，有血管神经及脏器 – 可多种途径接种，病毒易繁殖，在病毒感染的膜和液体含有
大量的病毒 – 鸡胚来源充足，很少携带病毒和细菌，对多种病毒敏感，不
产生抗体
缺点：
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– 不产生特异性指征；可被食入的抗生素污染；可携带细菌 （沙门氏菌）和病毒（Rous肉瘤病毒）
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一、鸡胚的结构和生理
卵壳与壳膜：
– 卵壳位于最外层的坚硬壳层 – 壳膜位于卵壳的下层，允许气体和液体分子交换，因此培
养鸡胚需一定的湿度和气体
气室
– 功能主要是呼吸和调节压力
绒毛尿囊膜
免病毒凝集红细胞造成滴度的下降
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四、病毒的检测
无菌试验
– 目的:证实收集的鸡胚是否受到细菌的污染 – 方法:
❖收集鸡胚组织接种肉汤观培养 ❖37度培养36h ❖肉汤清亮则无污染,肉汤浑浊或有菌落,说明鸡胚被细菌污染
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四、病毒的检测
检测方法
– 直接观察法
❖在绒毛尿囊腔形成损害或疱疹:如痘类病毒和疱疹病毒,常产生白色 或灰色痘疱,并有充血
– 壳膜之下，主要是胚胎的呼吸器官
羊膜
– 胚胎的最内层包被，含羊水，胚胎在其中
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尿囊腔
– 位于绒毛尿囊腔和羊膜之间 ，胚胎排泄器官 – 含5－20ml尿囊液，含大量的尿酸盐 – 为减少沉淀，盐水稀释再4℃保存
卵黄囊
– 主要营养的储藏场所，为胚胎提供营养
卵白
– 外于卵的锐端，为胚胎发育晚期提供营养