8.6 人工制备抗体
人工制备抗体
小分子抗体的类型：
（1）Fcb片段， （2）单域抗体， （3）Fv片段， （4）单链抗体（ScFc）， （5）最小识别单位（MRU）， （6）双价小分子抗体 （diabody）， （7）双特异性小分子抗体， （8）微抗体（minibody）。
（二）噬菌体抗体
三、基因工程抗体
概念：又称重组抗体，利
用基因工程技术制备抗体 分子，这是分子水平的抗 体。
基因工程抗体的优势：
去除或减少无关结构，保留 或增加天然抗体特异性和生
物学活性。
基因工程抗体包括：
（一）改造鼠源性抗体
（二）噬菌体抗体 （三）胞内抗体
（一）改造鼠源性抗体
1.人-鼠嵌合抗体
2.改型抗体或人源化抗体 3.小分子抗体
2.改型抗体或人源化抗体
概念：指利用基因工程技术，将
鼠单抗V区中互补性决定区（CDR）
序列取代人源抗体CDR序列，重
构成既具有鼠源性单抗的特异性
又保持人抗体亲和力的CDR移植
抗体。
改型抗体或人源化抗体的特点：
保留亲本鼠单克隆抗体的亲 和力和特异性，又降低了其
异源性，有利应用于人体。
3.小分子抗体
二、单克隆抗体
概念：1975年，Kohler和 Milstein在自然杂交基础上 创建杂交瘤技术，其产生的 抗体只针对单一程示意图
单克隆抗体的特点：
•高特异性
•高均质性
单克隆抗体的应用：
1、在血清学技术方面, 2、在免疫学基础研究方面, 3、在抗原纯化方面, 4、在肿瘤治疗方面，如生物导 弹, 5、用于制备抗独特型抗体疫苗。
（3）细菌增殖快，培养成本低，适
合大规模生产，为临床上大量应用
抗体的制备
抗体的制备为了研究抗体的理化性质、分子结构与功能，以及应用抗体于临床疾病的诊断、治疗及预防都需要人工制备抗体。
目前，根据制备的原理和方法可分为多克隆抗体、单克隆抗体及基因工程抗体三类。
一、多克隆抗体大多数抗原是由大分子蛋白质组成，但只是抗原上有限部位的特殊分子结构能与其相应抗体结合，称此部位为抗原决定簇（antigenic determinant）或表位(epitope)。
一种天然抗原性物质（如细菌或其分泌的外毒素以及各种组织成分等）往往具有多种不同的抗原决定簇，而每一决定簇都可刺激机体一种抗体形成细胞产生一种特异性抗体。
在机体淋巴组织内可存在千百种抗体形成细胞（即B细胞），每种抗体形成细胞只识别其相应的抗原决定簇，当受抗原刺激后可增殖分化为一种细胞群，这种由单一细胞增殖形成的细胞群体可称之为细胞克隆（clone）。
同一克隆的细胞可合成和分泌在理化性质、分子结构、遗传标记以及生物学特性等方面都是完全相同的均一性抗体，亦可称之为单克隆抗体。
在早期传统的抗体制备方法是将一种天然抗原经各种途径免疫动物，由于抗原性物质具有多种抗原决定簇，故可刺激产生多种抗体形成细胞克隆，合成和分泌抗各种决定簇抗体分泌到血清或体液中，故在其血清中实际上是含多种抗体的混合物，称这种用体内免疫法所获得的免疫血清为多克隆抗体，也是第一代抗体。
由于这种抗体是不均一的，无论是对抗体分子结构与功能的研究或是临床应用都受到很大限制，因此如何能获得均一性抗体成为关注的问题。
二、单克隆抗体体内免疫法很难获得单克隆抗体（monoclonal antibody,McAb）。
如能将所需要的抗体形成细胞选出并能在体外进行培养即可获得已知特异的单克隆抗体。
1975年德国学者Kohler 和英国学者Milstein将小鼠骨髓瘤细胞和经绵羊红细胞（sheep rue blood cell），SRBC）免疫的小鼠脾细胞在体外进行两种细胞融合，结果发现部分形成的杂交细胞既能继续在体外培养条件下生长繁殖又能分泌抗SRBC抗体，称这种杂交细胞系为杂交瘤（hybridoma）。
抗体的制备方法及原理
抗体的制备方法与原理一、抗血清的制备有了质量好的抗原，还必须选择适当的免疫途径，才能产生质量好（特异性强和效价高）的抗体。
（一）用于免疫的动物作免疫用的动物有哺乳类和禽类，主要为羊、马、家兔、猴、猪、豚鼠、鸡等，实验室常用者为家兔、山羊和豚鼠等。
动物种类的选择主要根据抗原的生物学特性和所要获得抗血清数量，如一般制备抗r-免疫球蛋白抗血清，多用家兔和山羊，因动物反应良好，而且能够提供足够数量的血清，用于免疫的动物应适龄，健壮，无感染性疾患，最好为///雄性，此外还需十分注意动物的饲养，以消除动物的个体差异以及在免疫过程中死亡的影响。
若用兔，最好用纯种新西兰兔，一组三只，兔的体重以2～3kg为宜。
（二）免疫途径免疫途径有多种多样，如静脉、腹腔、肌肉、皮、皮下、淋巴结注射等，一般常用皮下或背部多点皮注射，每点注射0.1ml左右。
途径的选择决定于抗原的生物学特性和理化特性，如激素、酶、毒素等生物学活性抗原，一般不宜采用静脉注射。
（三）佐剂由于不同个体对同一抗原的反应性不同，而且不同抗原产生免疫反应的能力也有强有弱，因此常常在注射抗原的同时，加入能增强抗原的抗原性物质，以刺激机体产生较强的免疫反应，这种物质称为免疫佐剂。
佐剂除了延长抗原在体的存留时间，增加抗原刺激作用外，更主要的是，它能刺激网状皮系统，使参与免疫反应的免疫活性细胞增多，促进T细胞与B细胞的相互作用，从而增强机体对抗原的细胞免疫和抗体的产生。
常用的佐剂是福氏佐剂（Freund adjuvant）,其成分通常是羊毛脂1份、石腊油5份，羊毛脂与石腊油的比例，视需要可调整为1：2～9（V/V），这是不完全福氏佐剂，在每毫升不完全佐剂加入1～20mg卡介苗就成为完全佐剂。
配制方法：按比例将羊毛脂与石蜡油置容器，用超声波使之混匀，高压灭菌，置4℃下保存备用。
免疫前取等容积完全或不完全佐剂与免疫原溶液混合，用振荡器混匀成乳状，也可以在免疫前取需要量佐剂置乳钵中研磨，均匀后再边磨边滴加入等容积抗原液（其中加卡介苗3～4mg/ml或不加），加完后再继续研磨成乳剂，滴于冰水上5～10min完全不扩散为止。
抗体制备流程
抗体制备流程抗体制备是生物学研究中常见的实验技术之一，也是一项复杂而精细的工作。
下面将介绍抗体制备的一般流程，以供参考。
1. 抗原制备。
首先，需要准备抗原。
抗原可以是蛋白质、多肽、细胞膜蛋白等。
通常情况下，我们会通过基因工程技术来表达和纯化抗原蛋白。
在这一步骤中，需要注意保持抗原的天然构象和活性。
2. 免疫动物的选择。
选择合适的免疫动物也是非常重要的。
常见的免疫动物包括小鼠、大鼠、兔子等。
在选择免疫动物时，需要考虑到免疫动物的体积、生理特征、抗原的种类等因素。
3. 免疫程序。
将制备好的抗原充分混合并与免疫动物进行免疫。
免疫的途径可以是皮下注射、腹腔注射等。
在免疫过程中，需要根据实验要求进行多次免疫，以提高抗体的效价。
4. 血清收集。
在完成免疫程序后，需要定期采集免疫动物的血清样本。
血清中含有免疫动物产生的抗体，可以用于后续的实验。
5. 抗体纯化。
从采集到的血清样本中，可以通过蛋白A/G亲和层析柱或其他纯化手段来纯化抗体。
纯化后的抗体可以用于酶联免疫吸附试验（ELISA）、免疫印迹（Western blot）等实验。
6. 抗体鉴定。
鉴定纯化后的抗体的效价和特异性也是必不可少的步骤。
常用的鉴定方法包括ELISA、Western blot、免疫组化等。
7. 抗体保存。
最后，需要将鉴定合格的抗体进行分装并保存。
在保存过程中，需要注意避免抗体的冻融循环，以保证抗体的稳定性和活性。
总结。
抗体制备是一项复杂的实验技术，需要研究人员具备扎实的实验技能和丰富的经验。
在实验过程中，需要严格控制各个步骤的条件和参数，以保证抗体的质量和稳定性。
希望本文介绍的抗体制备流程能对您有所帮助。
第三章 人工抗体的制备
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五、单克隆抗体的应用
（一）在血清学技术方面。
（二）在免疫学基础研究方面。
（三）在肿瘤治疗方面。如生物导弹。
（四）在抗原纯化方面。
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第三节 基因工程抗体
一、概念： 利用基因工程技术制备的抗体分子，称为基因工程抗体。这是分子水平的抗体。
优势：去除或减少 无关结构，保留或 增加天然抗体特异 性和生物学活性。
五、全套抗体基因库
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第四节 催化抗体
一、概念： 是具有催化活性的免疫球蛋白，也叫抗体酶。具有抗体的高度选择性和酶的高效催化性。
优点： 具有抗体的高
度选择性和酶的高
效催化性。
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二、催化抗体的制备：
如：细胞融合法、基因工程抗体技术、引入辅助因子法等。
三、催化抗体的应用：
如：在抗肿瘤方面的应用。在戒毒上也有重要应用价值。
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基本制备过程：
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一、嵌合抗体：
是指在同一抗体分 子中含有不同种属来 源抗体分子片段的抗 体。
嵌合抗体多为“鼠-
人”类型。
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二、重构抗体：
将鼠抗体超变区基因嵌入人抗体Fab骨架区编码基因中，再将 此DNA片段与人Ig恒定区基因相连，转染杂交瘤细胞，并表达嵌合的V 区抗体。
三、单链抗体：
单
需适当选择 产生高纯度抗体
无 悬浮培养：0.01~0.05
中空纤维： 小鼠
体外培养液：无7
三、建立B细胞杂交瘤与单克隆抗体生产基本过程
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四、单克隆抗体的优势
高度均一性： 纯度很高的均一性抗体
高度专一性： 只对抗原分子上某一抗原决定簇起反应。
[课件]第3章抗体的人工制备PPT
![[课件]第3章抗体的人工制备PPT](https://img.taocdn.com/s3/m/251c4063be1e650e52ea9944.png)
一、嵌合抗体
嵌合抗体 （chimeric antibody)是指同一 抗体分子中含有不同种属来源抗体片段 的看体，又称杂种抗体．主要有“鼠－ 人类型。”Fab或Ｆ（ab）2来源于鼠类， Fc来源于人类。这种杂交瘤细胞分泌的 抗体特异性和亲和力与原杂交瘤细胞相 同，但减少了鼠源性成分。
二、重构抗体
为进一步减少鼠源蛋白在嵌合抗体中 的含量，将鼠抗体超变区基因嵌入人 抗体Fab骨架区的编码基因中，在将 此基因片段与人Ig恒定区基因相连， 然后转染杂交瘤细胞，使之表达V区 抗体，即为重构抗体（reshaping antibody）
三、单链抗体
单链抗体（single—chain antibody）又 称Fv分子。由VL区氨基酸序列VH区氨 基酸序列经肽连接物（linker）连接而成。 肽连接物还可以将药物、毒素或同位素 与单链抗体相连。这种抗体分子小，免 疫原性低；在血清中清除快；无FC片段， 避免非特异性杀伤；能进入实体瘤周围 的微循环等。
四、Ig相关分子
将抗体的部分片段连接到一些有治 疗作用的毒素或药物上，取代Fc片 段，可直接发挥毒素或药物的治疗 作用，起“生物导弹”作用。 例如：CD4免疫黏附素治疗AIDS。
五、噬菌体抗体
噬菌体抗体（phage antibody）是 将一直特异性抗体分子的所有V区 基因在噬菌体中构成基因库，用噬 菌体感染细菌，模拟免疫选择过程， 具有相应特异性重链和轻链可变区 即可在噬菌体表面呈现出来。这种 技术成为噬菌体表面展示技术 （phage display technology）
脾
B 细 胞
骨髓瘤小鼠 取腹水
抗原
骨髓瘤细胞 + PEG, 融合 杂交瘤细胞
Ab1 Ab2 Ab3 Ab4
详细介绍抗体的生产制备
详细介绍抗体的生产制备抗体是一种由人类或动物免疫系统产生的蛋白质分子，用于识别和抵御入侵体内的外来抗原，如细菌、病毒或其它异物。
它们起到了非常重要的免疫调节和防御作用。
抗体的生产制备可以通过以下步骤进行：免疫原选择、免疫动物筛选、抗原接种和免疫、细胞融合和克隆、抗体纯化和检测。
首先，选择合适的免疫原。
免疫原一般是指从目标病原体中提取出的具有抗原性的物质。
免疫原可以是细菌、病毒、真菌、寄生虫等。
选择合适的免疫原非常重要，因为它决定了抗体的特异性和亲和性。
其次，选择合适的免疫动物。
大多数情况下，小鼠是最常用的免疫动物。
它们具有一种高度多样化的基因组和良好的免疫系统。
其他常用的免疫动物还包括兔子、猴子、鸟类等。
第三，进行抗原接种和免疫。
将免疫原注射到免疫动物的体内，触发其免疫系统产生特异性抗体。
免疫过程可以通过多次接种来增强免疫效果。
根据需要，可以选择不同的免疫方法，如小鼠腹腔注射、小鼠尾静脉注射、兔子皮下注射等。
接下来的步骤是细胞融合和克隆。
细胞融合是将免疫细胞与肿瘤细胞进行融合，形成杂交瘤细胞。
这些杂交瘤细胞拥有免疫细胞的能力和肿瘤细胞的无限增殖能力。
杂交瘤细胞可以在体外持续产生特异性抗体，这使得抗体的大规模生产成为可能。
接下来，通过限稀克隆的方法，从杂交瘤细胞中筛选出特异性抗体的产生细胞株。
最后，抗体纯化和检测。
通过对培养物中的细胞和抗体的分离，可以获得纯化的抗体。
这可以通过多种方法实现，如亲和层析、凝胶渗透层析和蛋白质A/G结合等。
检测抗体的纯度和活性也是十分重要的。
常用的方法包括酶联免疫吸附试验（ELISA）、免疫印迹（Western blotting）和流式细胞术等。
总结起来，抗体的生产制备是一个复杂的过程，需要经过免疫原选择、免疫动物筛选、抗原接种和免疫、细胞融合和克隆、抗体纯化和检测等多个步骤。
这些步骤都需要仔细和精确地操作，以确保最终获得高质量和高效能的抗体产品。
抗体的生产制备能够为医学研究和临床诊断提供重要的工具和方法。
抗体制备过程
抗体制备过程抗体是一种重要的生物分子，具有广泛的应用价值，尤其在医学和生物学研究领域。
抗体制备过程是制作抗体的关键步骤之一，本文将详细介绍抗体制备的过程。
抗体制备的过程可以分为以下几个步骤：抗原的选择、免疫动物的选择、免疫程序的设计、抗血清的制备和纯化。
第一步是选择抗原。
抗原是诱导机体产生抗体的物质，可以是蛋白质、多肽、多糖或化合物。
抗原的选择应根据研究目的和需要进行，通常选择与研究对象具有相关性的抗原。
第二步是选择免疫动物。
常用的免疫动物有小鼠、兔子、大鼠等。
选择合适的免疫动物要考虑到其灵敏度、免疫反应强度和体积等因素。
通常情况下，小鼠是最常用的免疫动物，因为其体积小、繁殖周期短且易于操作。
第三步是设计免疫程序。
免疫程序的设计要考虑到抗原的适宜剂量、免疫次数和免疫间隔时间。
在设计免疫程序时，需要注意免疫次数过多可能导致免疫动物免疫抑制，而免疫间隔时间过短则可能导致免疫反应不充分。
第四步是抗血清的制备。
免疫程序完成后，免疫动物的血液中会产生特异性抗体。
在抗血清制备过程中，需要采集免疫动物的血液，并对血液进行离心分离得到血清。
血清中包含了特异性抗体，可以用于后续实验和分析。
第五步是抗血清的纯化。
抗血清中除了包含特异性抗体外，还有其他非特异性成分，如血浆蛋白和其他血清成分。
因此，在使用抗血清之前，需要对其进行纯化。
常用的纯化方法有盐析法、胶体蛋白聚集法、亲和层析法等。
抗体制备过程的关键是合理设计和严格执行免疫程序。
只有充分考虑抗原选择、免疫动物选择、免疫程序设计以及抗血清的制备和纯化，才能获得高质量的抗体。
总结起来，抗体制备的过程包括抗原的选择、免疫动物的选择、免疫程序的设计、抗血清的制备和纯化。
这个过程需要合理选择抗原和免疫动物，并设计适当的免疫程序。
制备好的抗血清还需要进行纯化处理，以去除其他非特异性成分。
抗体制备过程的成功与否将对后续的实验和研究结果产生重要影响。
3.抗体的人工制备
第三章抗体的人工制备由一个祖先细胞增殖而形成的一群细胞称为克隆(clone，无性繁殖系)一个B细胞克隆只能产生针对一种抗原表位的抗体;一个浆细胞只能分泌一种类型的抗体第1节多克隆抗体一、多克隆抗体的概念①将抗原物质经不同途径注入动物体内，经数次免疫后采取动物血液，分离出血清，由此获得的抗血清即为多克隆抗体(polyclonal antibody, PcAb)，简称多抗。
②从天然感染康复动物采取的血清。
无论是细菌抗原，还是病毒抗原，都含有多种抗原成分。
即使是纯蛋白质抗原分子也含有多种抗原表位，进入机体后可激活多种淋巴细胞克隆，机体可产生针对各种抗原或抗原决定簇(表位)的抗体, 由此获得的抗血清是一种多克隆的混合抗体，具有高度的异质性。
进一步讲，针对同一抗原决定簇的抗体仍是由不同B细胞克隆产生的不同质的抗体。
二、多克隆抗体制备的基本过程1.抗原制备2.动物免疫3.试血测定抗体效价4.血清分离与保存5.多抗纯化与标记三、多克隆抗体的用途1.用于血清学实验——作为阳性血清或标记抗体(血清凝集实验/沉淀实验/补体结合实验/中和实验/免疫标记技术/免疫转印技术) 2.治疗制剂——可用于一些传染病的紧张预防和治疗第 1 页/共 6 页第2节单克隆抗体一、单克隆抗体的概念单克隆抗体是指由一个B细胞分化增殖的子代细胞(浆细胞)产生的针对单一抗原决定簇的抗体。
将产生特异性抗体的B细胞与骨髓瘤细胞融合，形成B细胞杂交瘤，这种杂交瘤细胞既具有骨髓瘤细胞无限繁殖的特性，又具有B细胞分泌特异性抗体的能力，由克隆化的B细胞杂交瘤产生的抗体即为单克隆抗体(monoclonal antibody，McAb)，简称单抗。
二、单抗与多抗的比较与多克隆抗体比较，单克隆抗体具有无可比拟的优越性：高特异性、高纯度、均质性好、亲和力不变、重复性强、效价高、成本低并可大量生产等。
三、建立B细胞杂交瘤与单克隆抗体的制备1.B细胞的制备小鼠脾细胞悬液2.骨髓瘤细胞的制备免疫相同来源的小鼠骨髓瘤细胞3.饲养细胞的决定融合之前, 将饲养细胞制成所需的浓度参加培养板孔中。
人工抗体的制备教案
人工抗体的制备教案教案标题：人工抗体的制备教案教学目标：1. 理解人工抗体的定义、作用和制备方法；2. 掌握制备人工抗体的实验步骤；3. 培养学生的实验设计和实验操作能力；4. 培养学生的科学研究精神和团队合作能力。
适用对象：高中生物或化学课程教学准备：1. PowerPoint演示文稿2. 实验材料和设备：- 磷酸缓冲盐溶液- 抗原溶液- 兔子血清- 蛋白A琼脂糖- 烧杯、移液器、显微镜等实验用具3. 实验安全措施：- 要求学生佩戴实验室护目镜和手套- 实验前讲解实验操作注意事项和安全规范教学过程：引入：1. 使用PowerPoint演示文稿介绍抗体的定义和作用，引导学生思考抗体的制备过程；2. 引发学生的兴趣，提问一些问题，如“为什么我们需要制备人工抗体？”、“人工抗体和天然抗体有什么区别？”等。
主体：1. 解释人工抗体的制备方法，包括:- 免疫动物制备- 人工合成- 基因工程技术着重讲解免疫动物制备抗体的过程和原理。
2. 进行实验演示：- 准备一份抗原溶液，并添加适量的磷酸缓冲盐溶液；- 给兔子注射抗原，准备兔子血清；- 将兔子血清与蛋白A琼脂糖混合并搅拌；- 离心，分离固相和液相；- 收集液相，其中即含有人工抗体。
3. 学生探究实验：- 学生分组进行实验设计，制备人工抗体；- 每个学生组准备一份实验报告，包括实验目的、实验步骤、实验结果和结论；- 每个学生组轮流演示实验过程。
讨论与总结：1. 学生展示实验结果和结论，并进行讨论和交流；2. 提问学生，总结制备人工抗体的关键步骤和注意事项；3. 引导学生分析人工抗体在医学和科研领域的应用。
作业：要求学生撰写实验报告，包括实验目的、实验步骤、实验结果和结论。
拓展：1. 介绍目前人工抗体在抗癌研究和治疗中的应用，鼓励学生了解最新研究成果。
2. 引导学生思考未来人工抗体研究的方向和潜在应用。
教学评估：1. 通过学生的实验报告和课堂讨论评估学生是否掌握了人工抗体的制备方法和关键步骤。
抗体的制备与使用指南
抗体的制备与使用指南
《抗体的制备与使用指南》
嘿呀，今天咱就来聊聊抗体这玩意儿。
你知道吗，就像我之前有一次感冒了，那可真是难受得要命啊！整天咳咳咳，感觉肺都要咳出来了。
这时候我就在想，要是有个什么东西能帮我快点好起来就好了。
后来我才知道，这抗体就像是我们身体里的小战士。
咱先来说说抗体的制备吧。
这就好比是在训练一支精锐部队，得有各种条件和步骤呢。
首先得找到合适的“原料”，就像做菜得有好食材一样。
然后经过一系列复杂的过程，慢慢培养出这些厉害的抗体小战士。
那抗体怎么使用呢？就像我感冒的时候，如果身体里有足够多的针对感冒病毒的抗体，它们就能迅速出击，把那些坏家伙给干掉。
这些抗体就像是一个个聪明的小精灵，知道该去对付谁，然后精准打击。
而且哦，抗体还挺有个性的。
不同的抗体针对不同的敌人，可不能乱来。
就像我们不能让步兵去打飞机一样，得让合适的抗体去对付合适的病原体。
哎呀，说了这么多，总之抗体就是我们身体的好帮手啦。
有了它们，我们才能在这个充满各种病菌的世界里好好地活着。
下次要是再感冒，我可得好好指望我身体里的这些抗体小战士啦！希望它们能像超级英雄一样，迅速把病魔赶跑，让我又能活蹦乱跳的啦！哈哈！
怎么样，这下你对抗体的制备和使用有点了解了吧！。
第五节 人工制备抗体
第五节人工制备抗体抗体在疾病的诊断、免疫防及其基础研究中被广泛应用，人们对抗体的需求也随之增大。
人工制备抗体是大量获得抗体的有效途径。
以特异性抗原免疫动物，制备相应的抗血清，是早年人工制备多克隆抗体的主要方法。
1975年，KÖhler 和Milstein建立的单克隆抗体（单抗）技术，使得规模化制备高特异性、均一性抗体成为可能。
但鼠源性单抗在人体反复使用后出现的人抗鼠抗体（HAMA）反应，很大程度上限制了单抗的临床应用。
近年，随着分子生物学的发展，人们已可通过抗体工程技术制备基因工程抗体，包括人-鼠嵌合抗体、人源化抗体或人抗体等。
一、多克隆抗体天然抗原常含多种抗原表位。
以该抗原刺激机体免疫系统，可使多种具有相应抗原受体的B细胞活化增殖发生免疫应答，分泌多种针对不同抗原表位的抗体。
由不同B细胞产生的、针对多种抗原表位的混合抗体称为多克隆抗体（polyclonal antibody,pAb)。
获得多克隆抗体的途径主要有动物免血清、恢复期中层得血清或免疫接种人群。
其优点是：作用全面，具有中和抗原、免疫调理、介导补体依赖的细胞毒作用（CDC）、ADCC等重要作用，来源广泛、制备容易；缺点是：特异性不高、易发生交叉反应，不易大量制备，从而应用受限。
二、单克隆抗体KÖhler和Milstein将可产生特异性抗体但短寿的B细胞与无抗原特异性但长寿的骨髓瘤细胞融合，建立了可产生单克隆抗体的B淋巴杂交瘤细胞和单克隆抗体技术。
通过该技术融合形成的杂交细胞系即杂交瘤，既有骨髓瘤细胞大量扩增和永生的特性，又具有免疫B细胞合成和分泌特异性抗体的能力。
每个杂交瘤细胞由一个B细胞与一个骨髓瘤细胞融合而成，而每个B细胞克隆仅识别一种抗表位，故经筛选和克隆化的杂交瘤细胞仅能合成及分泌抗单一抗原表位的特异抗体。
这种由单一杂交瘤细胞产生，针对单一抗原表位的特异性抗议体，称为单克隆抗体(monoclonal antibody，mAb)，具有结构均一、纯度高、特异性强、效价高、易体外大量制备和强化等特点，已广泛应用于医学及生物学各领域，如细胞因子、肿瘤细胞表面抗原受体、激素等的检测。
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人工制备抗体
多克隆抗体（polyclonal antibody, pAb）
用一种包含多种抗原决定簇的抗原免疫动物，可刺激机体多个B细胞克隆产生针对多种抗原表位的不同抗体的总和。
所获得的免疫血清实际上是含有多种抗体的混合物，称为多克隆抗体。
单克隆抗体（monoclonal antibody, mAb）
由识别一种抗原决定簇的细胞克隆所产生的均一性抗体。
•mAb is the specific Ab produced by one B cell clone and recognize one antigenic epitope only. •With same structure, high purity and specificity.
发明单克隆抗体技术Nobel Prize in 1984
小结
1．掌握抗体、免疫球蛋白的概念，免疫球蛋白的基本结构，免疫球蛋白的功能；
2．熟悉免疫球蛋白的水解片段，J链和分泌片；
3．了解各类免疫球蛋白的特性。
THANKS!。