实验八 天然水中亚硝酸盐氮的测定
水中氨氮、亚硝酸盐氮和硝酸盐氮的测定
05
实验步骤与注意事项
实验步骤
实验准备
准备好实验所需的试剂和设备，如试管、滴定管、容量 瓶等，确保实验室环境干净整洁。
采集水样
使用清洁的玻璃瓶或塑料瓶，采集具有代表性的水样， 并标记好采样地点和时间。
氨氮的测定
将水样酸化后，加入适量的氯化铵，使铵离子转化为氨 气，再通过蒸馏法收集氨气，最后用酸碱滴定法测定氨 氮含量。
详细描述
酚盐法适用于高浓度氨氮的测定，尤其在氨氮浓度大于10mg/L时，该方法的准 确度较高。该方法操作简便，但需要使用滴定管和标准溶液进行滴定。
水杨酸-次氯酸盐法
总结词
水杨酸-次氯酸盐法是一种测定氨氮的 方法，通过加入水杨酸和次氯酸盐， 使氨氮转化为氮气，再通过测量释放 出的氮气计算氨氮的含量。
随着工业发展和人口增长，水体中的氨氮、亚硝酸盐氮和硝 酸盐氮含量逐渐增加，对水生生物和人类健康造成潜在威胁 。因此，准确测定这些物质的含量对于保护水资源至关重要 。
氨氮、亚硝酸盐氮和硝酸盐氮的简介
氨氮是指水中以游离态存在的氨（NH3）和铵离子（NH4+）形式存在的氮。氨氮 是水体中的主要营养物质之一，过量存在会导致水体富营养化。
亚硝酸盐氮是指水中以亚硝酸根离子（NO2-）形式存在的氮。亚硝酸盐氮是氨氮在 微生物作用下氧化生成的中间产物，过量存在可能对人体健康造成危害。
硝酸盐氮是指水中以硝酸根离子（NO3-）形式存在的氮。硝酸盐氮主要来源于土壤 中氮素的硝化作用，过量存在也可能对人体健康造成危害。
02
氨氮的测定
纳氏试剂法
荧光法
总结词
荧光法基于亚硝酸盐氮在特定波长光激发下能够发出荧光的特点，通过测量荧光强度来 测定亚硝酸盐氮的浓度。
亚硝酸盐氮检测方法
亚硝酸盐氮的测定
一、概述
亚硝酸盐氮是氮循环的中间产物，不稳定。
根据水环境条件，可被氧化成硝酸盐，也被还原成氮。
亚硝酸盐氮可使人体正常的血红蛋白氧化成高铁血红蛋白，发生高铁血红蛋白症，失去血红蛋白在体内输送氧的能力，出现缺氧的症状。
亚硝酸盐氮与仲胺类反应生成具有致癌性的亚硝酸胺类物质，在pH较低的酸性条件下有利于亚硝胺类的形成。
二、亚硝酸盐氮水样保存
亚硝酸盐氮在水中可瘦微生物等作用而很不稳定，在采集后应尽快进行分析，必要时冷藏以抑制微生物的影响。
三、亚硝酸盐氮测定方法
①原理
在酸介质中，pH值为1.8±0.3时，亚硝酸盐与对-氨基苯磺酰胺反应，生成重氮盐，再与N-(1-萘基)-乙二胺偶联生成红色络合物，可使用610nm的光进行检测。
测定范围为0.01~0.6mg/L。
采用3cm比色皿，最高测到0.2mg/L,采用1cm 比色皿，最高到0.6mg/L.可测定一般地表水、生活污水和各种工业污水。
②水样预处理
调节pH值：水样pH值大于11时，边搅拌边逐滴加入（1+9）磷酸溶液将pH值调整到8~10。
去除颜色与悬浮物干扰：在水样中加入LH-NO2-1试剂，搅拌，静置过滤，弃去最初的10mL滤液。
如水样经预处理后仍有颜色，则取两份水样，一份加显色剂，另一份加磷酸（1+9）1mL，前者吸光度减去后者吸光度再乘以曲线值即可。
③水样测定步骤
取水样10ml，加入LH-NO2-2试剂，显色20分钟后，比色出值。
此方法应用管比色方法，方法简单快速。
图1亚硝酸盐氮测定仪。
水中氨氮、亚硝酸盐氮和硝酸盐氮的测定
释至100mL。
氨氮标准溶液：CN＝1mg/mL。称取3.819g无水氯化
铵（于100～105℃下干燥2h）溶于无氨水中，转入 1000mL容量瓶内，用无氨水稀释至刻度，摇匀，准
确吸取该溶液10.00mL于1000mL容量瓶内，用无氨
水稀释至刻度，其浓度为10ug/mL。
硫酸锌溶液：10％（m/V）。 氢氧化钠溶液：25％（m/V）。
五、硝酸盐氮的测定——二磺酸酚比色法
1. 原理 浓硫酸与苯酚作用生成二磺酸酚，在无水条件下
二磺酸酚与硝酸盐作用生成二磺酸硝基酚，二磺酸硝
基酚在碱性溶液中发生分子重排生成黄色化合物，最 大吸收波长在410nm处，利用其色度和硝酸盐含量成
正比，可进行比色测定。检出限为0.02ug/mL，检测上
限为2.0ug/mL。
（2）标准曲线的绘制
分别吸取硝酸盐氮标准溶液0.00、1.00、1.50、2.00、 2.50、3.00、4.00mL于50mL比色管中，加入1.0mL二
磺酸酚，3.0mL浓氨水，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。
用1mL比色皿，以蒸馏水作为参比，于波长410nm处测 定吸光度，绘制标准曲线。
（3）水样测定
（3）亚硝酸盐使用液：临用时将标准储备液稀释为 1.0ug/mL的亚硝酸盐氮的标准使用液。 （4）草酸钠标准溶液（1/2Na2C2O4，0.050mol/L）：称 取3.350g经105℃干燥2h的优级纯无水草酸钠溶于水中， 转入1000mL容量瓶内加水稀释至刻度。 （5）高锰酸钾溶液（1/5KMnO4，0.050mol/L）：溶解 1.6g高锰酸钾于1.2L水中，煮沸0.5～1h，使体积减少 至1000mL左右，放置过夜，用G3号熔结玻璃漏斗过滤 后，滤液贮存于棕色试剂瓶中，用上述草酸钠标准溶液 标定其准确浓度。
水中氨氮、亚硝酸盐氮和硝酸盐氮的测定
一、目的和要求
• 了解水中3种形态氮测定的意义。 • 掌握水中3种形态氮的测定方法与原理。
水体中3种形态氮检出的环境化学意义
NH3－N + + -
+
+
NO2--N + + + -
-
+
NO3--N + +
+
+
三氮检出的环境化学意义 清洁水
水体受到新近污染
水体受到污染不久，且正在分解中
2. 试剂
1 二磺酸酚试剂：称取15g精制苯酚，置于250mL三角烧瓶中，加 入100mL浓硫酸，瓶上放一个漏斗，置于沸水浴内加热6h，试 剂应为浅棕色稠液，保存于棕色瓶内。
2 硝酸盐标准储备液：称取0.7218g分析纯硝酸钾（经 105~110℃烘4h）溶于水中， 稀释至1000mL，其浓度为
100mg/L。 3 硝酸盐标准溶液：准确移取50mL硝酸盐标准储备液，置于蒸
可酌情减少）至蒸发皿内，如有必要可用0.100mol/L 碳酸钠溶液调节水样pH至中性（pH7～8），置于水 浴中蒸干。取下蒸发皿，加入1.0mL二磺酸酚，用玻 棒研磨，使试剂与蒸发皿内残渣充分接触，静止 10min，加入少量蒸馏水，搅匀，滤入50mL比色管中， 加入3mL浓氨水（使溶液明显呈碱性）。如有沉淀可 滴加EDTA溶液，使水样变清，用蒸馏水稀释至刻度， 摇匀，测定吸光度。根据标准曲线，计算出水样中硝 酸盐氮的含量（ug/mL）。
2. 试剂 1 制备不含亚硝酸盐的水。在蒸馏水中加入少许高锰
酸钾晶体，再加氢氧化钙或氢氧化钡，使之呈碱性 。重蒸馏后，弃去50mL初滤液，收集中间70%的无 亚硝酸馏分。
水中氨氮、亚硝酸盐氮和硝酸盐氮的测定
水中氨氮、亚硝酸盐氮和硝酸盐氮的测定一、目的和要求了解水中3种形态氮测定的意义。
掌握水中3种形态氮的测定方法与原理。
水体中3种形态氮检出的环境化学意义NH3N NO2--N NO3--N 三氮检出的环境化学意义---清洁水--水体受到新近污染-水体受到污染不久且正在分解中--污染物已正在分解但未完全自净-污染物已基本分解完全但未自净--污染物已无机化水体已基本自净-有新的污染在此前的污染已基本自净以前受到污染正在自净过程且又有新污染二、仪器1紫外可见分光光度计。
25001000mL全玻璃磨口蒸馏装置。
3pH计。
4恒温水浴槽。
5电炉220V/1kW。
6比色管50mL。
7陶瓷蒸发皿100mL或200mL。
8移液管1mL、2mL、5mL。
9容量瓶250mL。
三、氨氮的测定——纳氏试剂比色法1、原理氨氮与纳氏试剂反应生成黄棕色的络合物其色度与氨氮的含量成正比可在420nm波长下使用光程长为10mm的比色皿比色测定最低检出浓度为0.05mg/L。
2K2HgI43KOHNH3Hg2O·NH2I2H2O7KI2、试剂无氨水水样稀释及试剂配制均需用无氨水。
配制方法包括蒸馏法每升蒸馏水中加入0.1mL浓硫酸进行重蒸馏馏出水接收于玻璃容器中和离子交换法让蒸馏水通过强酸型阳离子交换树脂柱来制备。
磷酸盐缓冲液pH为7.4称取14.3g磷酸二氢钾和68.8g磷酸氢二钾溶于水中并稀释至1000mL配制后用pH计测定其pH值并用磷酸二氢钾或磷酸氢二钾调节pH为7.4。
吸收液2硼酸或0.01mol/L硫酸。
纳氏试剂碘化汞碘化钾氢氧化钠。
称取16g氢氧化钠溶于50mL水中冷却至室温。
称取7g碘化钾和10g碘化汞溶于水中然后将此溶液在搅拌下缓慢加入到氢氧化钠溶液中并稀释至100mL。
贮存于棕色瓶内用橡皮塞塞紧于暗处存放有效期可达一年。
50酒石酸钾钠溶液称取50g酒石酸钾钠溶于100mL水中加热煮?幸郧 背浞掷淙春笙∈椭?00mL。
水中氨氮亚硝酸盐氮和硝酸盐氮的测定
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（4）浓氨水。
水体中3种形态氮检出的环境化学意义以前受到污染正在自净过程且又有新污染有新的污染在此前的污染已基本自净污染物已无机化水体已基本自净污染物已基本分解完全但未自净污染物已正在分解但未完全自净水体受到污染不久且正在分解中水体受到新近污染清洁水三氮检出的环境化学意义no3nno2nnh3n二仪器1
水中氨氮、亚硝酸盐氮和硝酸盐氮的测定
清液作试份。如果凝聚沉淀后样品仍浑浊和带色，则 应采用蒸馏法，收集馏出液并稀释到50mL。若氨氮含 量很高，也取适量水样稀释到50mL。
b. 制备标准系列。取浓度为10mg/mL氨氮标准溶液0.00、 0.50、1.00、2.00、3.00、5.00、7.00、10.00mL，分 别加入50mL比色管中，以无氨水稀释到刻度。
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3
三、氨氮的测定——纳氏试剂比色法
1、原理 氨氮与纳氏试剂反应生成黄棕色的络合物，其色度与
氨氮的含量成正比，可在420nm波长下使用光程长为 10mm的比色皿比色测定，最低检出浓度为0.05mg/L。
2K2[HgI4]+3KOH+NH3 ＝[Hg2O·NH2]I+2H2O+7KI
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2、试剂
（8）碳酸钠溶液（1/2Na2CO3，0.100mol/L）：称取5.3g无水碳酸 钠，溶于1000mL水中。
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3. 步骤
水中氨氮、亚硝酸盐和硝酸盐氮的测定
水中氨氮、亚硝酸盐和硝酸盐氮的测定一、目的和要求1、了解水中 3 种形态氮测定的意义。
2、掌握水中 3 种形态氮的测定方法与原理。
二、原理氮是蛋白质、核酸、酶、纤维素等有机物中的重要组分。
纯净天然水体中的含氮物质是很少的，水体中含氮物质的主要来源是生活污水和某些工业废水。
当含氮有机物进入水体后，由于微生物和氧的作用，可以逐步分解为无机氨（ NH 3 ）、铵（ NH 4+ ）、亚硝酸盐（ NO 2- ）和最终产物（ NO 3- ）微生物含氮有机物蛋白质、氨基酸、氨等亚硝酸菌硝酸菌菌NH 3 （ NH 4+ ） NO 2 NO 3-氨和铵的氮称氨氮。
亚硝酸盐中的氮称为呀硝酸盐氮。
硝酸盐中的氮称为硝酸盐氮。
这 3 种形态氮的含量都可以作为水质指标，分别代表有机氮转化为屋脊氮的各个不同阶段。
随着含氮物质的逐步氧化分解，水体中的微生物和其他有机污染物也被分解破坏，因而达到净化水体的作用。
水中有机氮、氨氮和硝酸盐氮等几项指标的相对含量，在一定程度上反映了含氮有机物水体的时间长短，从而对探讨水体污染历史、它们的分解趋势和水体自净状况有一定参考价值（见表 1-8-1 。
）表 1-8-1 水体中 3 种形态氮检出的环境化学意义三氮的测定方法如下：1、氨氮的测定 -------- 钠氏比色法氨氮与纳氏试剂反应生成棕色沉淀，当含量很低时呈浅黄色或棕色，因而可以比色测定。
2K 2 [HgI 4 ]+3KOH+NH 3 ＝＝＝＝ [Hg 2 O · NH 2 ]I+2H2O+7KI2、亚硝酸盐氮的测定 --------- 盐酸a —萘胺比色法在 pH 为 2.0~2.5 时，水中亚硝酸盐与对氨基苯硝酸生成重氮盐，当与盐酸 a—萘胺发生偶联后是生成红色燃料，其色度与亚硝酸盐含量成正比。
3、硝酸盐氮的测定 ------------ 紫外分光度法硝酸根离子在紫外区有强烈吸收，在 220nm 波长处的吸光度可定量测定硝酸盐氮，而其他氮化物在此波长不干扰测定。
水中亚硝酸盐氮的测定
水中亚硝酸盐氮的测定一、原理在酸性介质中亚硝酸盐与磺胺进行重氮化反应，其产物再与盐酸萘乙二胺偶合生成红色偶氮染料，于543nm波长处测定吸光度。
由于大量的硫化氢干扰测定，可在加入磺胺后用氮气驱除硫化氢。
二、仪器与试剂（1）分光光度计。
除非另作说明，所用试剂均为分析纯，水为无亚硝酸盐的二次蒸馏水或等效纯水。
（2）10g/L磺胺溶液：称取5g磺胺（NH2SO2C6H4NH2），溶于350mL盐酸溶液（1:6），用水稀释至500mL，储于棕色试剂瓶中，有效期为2个月。
（3）1g/L盐酸萘乙二胺溶液：称取0.5g盐酸萘乙二胺（C10H7NHCH2CH2NH2·2HCl），溶于500mL水中，储于棕色试剂瓶中于冰箱内保存，有效期为1个月。
（4）亚硝酸盐氮标准溶液①亚硝酸盐氮标准储备液，100μg/mLN：称取0.4926g亚硝酸钠（NaNO2，光谱纯，预先在110℃烘1h，置于干燥器中冷却至室温）溶于少量水中，移入1000mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。
加1mL三氯甲烷（CHCl3），摇匀。
储于棕色试剂瓶中，于冰箱中保存。
有效期为2个月，此溶液1.00mL含100.0μgN。
②亚硝酸盐氮标准使用溶液，5.0μg/mLN：移取5.0mL亚硝酸盐氮标准储备溶液（100μg/mL）于100mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。
现用现配。
此溶液1.00mL含5.0μgN。
三、准备（1）海水样品可用有机玻璃或塑料采水器采集，经0.45μm滤膜过滤后储于聚乙烯瓶中，应从速分析，不能延迟3h以上，否则须快速冷冻至-20℃保存。
样品熔化后立即分析。
注：滤膜应预先在0.5mol/L盐酸溶液中浸泡12h，用纯水冲洗至中性，密封待用。
（2）试样量。
测定水样用量50mL。
（3）工作曲线的绘制①取6个50mL具塞比色管，分别加入0、0.10、0.20、0.30、0.40、0.50mL 亚硝酸盐标准使用液（5.0μg/mL），用水稀释至刻度，摇匀。
水中氨氮亚硝酸盐氮和硝酸盐氮的测定
C1 /
5 KMnO
＝
4
0.050 ?
V3
V4
第十三页，编辑于星期二：七点 四十分。
按下式计算亚硝酸盐标准储备液的浓度（ mg/L ）:
C 亚硝酸盐氮
＝ V1 ? C 1 / 5 KMnO4－0.050 ? V2 50 .00
? 7 ? 1000
式中：
C亚硝酸盐氮 -------亚硝酸钠储备溶液浓度（以 N计）， mg/L ；
后，滤液贮存于棕色试剂瓶中，用上述草酸钠标准溶液 标定其准确浓度。
第十五页，编辑于星期二：七点 四十分。
（6）氢氧化铝悬浮液。溶解 125g硫酸铝钾
[AlK(SO 4)2·12H2O,CP级]于1L水中，加热到 60℃。在不断
搅拌下慢慢加入 55mL 氨水，放置约 1h后，用水反复洗涤 沉淀到洗出液中不含氨、氯化物、硝酸盐和亚硝酸盐为
止。待澄清后，倾出上层清液，只留浓的絮凝物，最后
加入 100mL水。使用前应振荡均匀。
（7）盐酸萘乙二胺显色剂： 50mL冰醋酸与 900mL 的水混合， 加入5.0g对氨基苯磺酸，加热使其全部溶解，再加入 0.05g盐酸萘乙二胺，搅拌溶解后用水稀释至 1000mL。
溶液无色，贮存于棕色瓶中，在冰箱中保存可稳定一个 月。
1000mL 容量瓶内，用无氨水稀释至刻度，摇匀，准
确吸取该溶液 10.00mL 于1000mL 容量瓶内，用无氨 水稀释至刻度，其浓度为 10ug/mL 。 ? 硫酸锌溶液： 10％（m/V ）。 ? 氢氧化钠溶液： 25％（ m/V）。
第七页，编辑于星期二：七点 四十分。
3、步骤
（1）水样蒸馏
第十八页，编辑于星期二：七点 四十分。
2. 试剂
水中亚硝酸盐氮的测定
• （2）水样的测定：
• 当水样pH≥11时，可加入1滴酚酞指示液，边搅拌边逐滴 加入（1+9）磷酸溶液，至红刚消失。 • 水样如有颜色和悬浮物，向每100 ml 水中加入2 ml氢氧 化铝悬浮液，搅拌、静置、过滤，弃去25 ml初滤液。 • 分取经预处理的水样入50 ml比色管中（如含量高，则分 取适量，用水稀释至标线），加1.0 ml显色剂，然后按校 准曲线绘制的相同的步骤操作，测量吸光度。经空白校 正后，从校准曲线上查得亚硝酸盐氮含量。
• （3）空白试验： 用实验用水代替水样，按相同步骤进行全 程序测定。
•
三、 计算
亚硝酸盐氮（N，mg/L）= m/V
m——由水样测得的校正吸光度，从校准曲线上 查得相应的亚硝酸盐氮含量（μg）；
V——水样体积（ml）。
• 四、 注意事项
如水样经预处理后，还有颜色时，则分取两份体 积相同的经预处理的水样，一份加1.0ml显色剂，另 一份改加1ml（1+9）磷酸溶液。由加显色剂的水样测 得的吸光度，减去空白试验测得的吸光度，再减去改 加磷酸溶液的的水样所测得的吸光度后，获得校正吸 光度，以进行色度校正。
The END
环境化学实验
实验三
水中亚硝酸盐氮的测定
环境工程教研室
• 实验目的
掌握N-（1-萘基）-乙二胺分光光度法测 定水中的亚硝酸盐氮 通过测定水中的亚硝酸盐氮的含量了解 水体污染和苯 磺 酰 胺
N （ 1 萘 基 ） 乙 二 胺 水 样 重 氮 盐 偶 联 磷 酸 介 质 ， p H 1 . 8 ± 0 . 3 红 色 染 料5 4 0 n m 测 吸 光 度
• 二、实验步骤
（1）校准曲线的绘制
依次吸取亚硝酸盐标准使用液（1.00μg/ml） 0ml、 1.00ml、3.00ml、5.00ml、7.00ml及10.00ml，至50ml比色管 中，用水稀释至标线，然后加入1.0 ml显色剂，密塞，混匀。 静置20 min， 1cm比色皿，于波长540 nm处，以水为参比， 测量吸光度。 从测得的吸光度，减去零浓度空白管的吸光度后，获得校 正吸光度，绘制以氮含量（μg）对校正吸光度的校正曲线。
亚硝酸盐氮的测定实验报告
亚硝酸盐氮的测定实验报告
《亚硝酸盐氮的测定实验报告》
实验目的：
本实验旨在通过化学分析方法测定水样中的亚硝酸盐氮含量，以评估水体的污
染程度。
实验原理：
亚硝酸盐氮是水体中的一种重要污染物，其含量高低直接影响着水体的质量。
本实验采用硫酸铵铁作为还原剂，将亚硝酸盐还原为氨，并用氨敏感试剂对氨
进行反应生成深黄色络合物，最终通过比色法测定络合物的光密度，从而计算
出水样中亚硝酸盐氮的含量。
实验步骤：
1. 取一定量的水样，加入硫酸铵铁和氨敏感试剂，混合均匀；
2. 将混合物在恒温水浴中进行反应，使亚硝酸盐转化为氨；
3. 将反应产物进行离心分离，取上清液进行比色测定；
4. 根据比色法测定出的光密度，计算出水样中亚硝酸盐氮的含量。
实验结果：
通过实验测定得出水样中亚硝酸盐氮的含量为X mg/L。
实验结论：
根据实验结果，可以评估水样中亚硝酸盐氮的含量，从而对水体的污染程度进
行初步判断。
同时，本实验方法简便、准确，可用于水质监测和环境保护领域。
总结：
亚硝酸盐氮的测定是环境监测中的重要内容，通过本实验的学习和实践，不仅
能够掌握一种常用的水质分析方法，也能够增进对水体污染的认识，为环境保护工作提供参考依据。
亚硝酸盐氮的测定
亚硝酸盐氮的测定亚硝酸盐氮是氮循环的中心产物，不稳定。
在水环境不同的条件下，可氧化成硝酸盐氮，也可被还原成氨。
亚硝酸盐氮在水中可受微生物作用很不稳定，采集后应立刻分析或冷藏抑制生物影响。
N—（1—萘基）—乙二胺光度法：1、原理在磷酸介质中，PH值为1.8±0.3时，亚硝酸盐与对氨基苯磺酰胺（简称磺胺）反应，生成重氮盐，再与N—（1—萘基）—乙二胺偶联生成红色染料，在波长540nm处有*大汲取。
2、干扰及除去水样呈碱性（pH≧11）时，可加酚酞指示剂，滴加磷酸溶液至红色消失；水样有颜色或悬浮物，加氢氧化铝悬浮液并过滤。
3、适用范围本法适用于饮用水、地面水、生活污水、工业废水中亚硝酸盐的测定，*低检出浓度为0.003mg/L；测定上限为0.20mg/L。
4、仪器：分光光度计、G—3玻璃砂心漏斗试剂：（1）显色剂：于500ml烧杯中加入250ml水和50ml磷酸，加入20.0g对氨基苯磺酰胺；再将1.00gN—（1—萘基）—乙二胺二盐酸盐溶于上述溶液中，转移至500ml容量瓶中，用水稀至标线（2）磷酸（ρ=1.70g/ml）（3）高锰酸钾标准溶液（1/5K2MnO4,0.050mol/L）：溶解1.6g高锰酸钾于1200ml水中，煮沸0.5—1h，使体积削减到1000ml左右放置过夜，用G—3玻璃砂心漏斗过滤后，贮于棕色试剂瓶中避光保存，待标定。
（4）草酸钠标准溶液（1/2Na2C2O4,0.0500mol/L）：溶解经105℃烘干2小时的优级纯或基准试无水草酸钠3.350g于750ml水中，移入1000ml容量瓶中，稀至标线。
（5）亚硝酸盐氮标准储备液：称取1.232g亚硝酸钠溶于150ml水中，移至1000ml容量瓶中，稀释到标线。
每毫升约含0.25mg亚硝酸盐氮。
本溶液加入1ml三氯甲烷，保存一个月。
标定：在300ml具塞锥形瓶中，移入50.00ml 0.050mol/L高锰酸钾溶液，5ml浓硫酸，插入高锰酸钾液面下加入50.00ml亚硝酸钠标准储备液，轻轻摇匀，在水浴上加热至70—80℃，按每次10.00ml的量加入充足的草酸钠标准溶液，使红色褪去并过量，记录草酸钠标液的用量（V2）。
水质亚硝酸盐氮的测定分光光度法
水质亚硝酸盐氮的测定分光光度法水质亚硝酸盐氮的测定分光光度法本标准等效采用ISO 6777-1984《水质亚硝酸盐氮测定分子吸收分光光度法》。
本标准根据我国标准的格式对ISO 6777-1984标准技术上稍作修改和补充。
1适用范围本标准规定了用分光光度法测定饮用水、地下水、地面水及废水中亚硝酸盐氮的方法。
1．1测定上限当试份取最大体积(50ml)时，用本方法可以测定亚硝酸盐氮浓度高达0．20mg／L。
1．2最低检出浓度采用光程长为10mm的比色皿，试份体积为50ml，以吸光度0．01单位所对应的浓度值为最低检出限浓度，此值为0．003mg／L。
采用光程长为30mm的比色皿，试份体积为50ml，最低检出浓度为0．001mg／L。
1．3灵敏度采用光程长为10mm的比色皿，试份体积为50ml时，亚硝酸盐氮浓度cN=0．20mg／L，给出的吸光度约为0．67单位。
1．4干扰当试样pH≥11时，可能遇到某些干扰，遇此情况，可向试份中加入酚酞溶液(3．12)1滴，边搅拌边逐滴加入磷酸溶液(3．4)，至红色刚消失。
经此处理，则在加入显色剂后，体系pH 值为1．8±0．3，而不影响测定。
试样如有颜色和悬浮物，可向每100ml试样中加入2ml氢氧化铝悬浮液(3．9)，搅拌，静置，过滤，弃去25ml初滤液后，再取试份测定。
水样中常见的可能产生干扰物质的含量范围见附录A。
其中氯胺、氯、硫代硫酸盐、聚磷酸钠和三价铁离子有明显干扰。
2原理在磷酸介质中，pH值为1．8时，试份中的亚硝酸根离子与4-氨基苯磺酰胺(4-aminobenzenesulfonamide)反应生成重氮盐，它再与N-(1-萘基)-乙二胺二盐酸盐[N-(1-naphthyl-1，2-diaminoethanedihydrochlo-ride］偶联生成红色染料，在540nm 波长处测定吸光度。
如果使用光程长为10mm的比色皿，亚硝酸盐氮的浓度在0．2mg／L以内其呈色符合比尔定律。
实验八 天然水中亚硝酸盐氮的测定
盐酸-α-萘胺分光光度法
一. 原理
酸性介质中亚硝酸盐与对氨基苯磺酸 （磺胺）进行重氮化反应，其产物再与盐 酸萘胺偶合生成红色偶氮染料，于520nm 波长处测定吸光度。
二. 实验步骤
1 配制标准系列
取7个100mL容量瓶，分别加入0、1.00、1.60、2.00、 4.00、8.00、12.00mL亚硝酸盐标准溶液（1.00×103mg/mL），各加入4.0mL对氨基苯磺酸，混匀。放置 5min。 加入醋酸钠溶液加入4.0mL 、盐酸萘胺溶液4.0mL ，混 匀，蒸馏水稀释至刻度摇匀。放置10min。 此标准系列各点的浓度分别为0、0.010、0.016、 0.020、0.040、0.0波长）： 520nm 3 工作曲线的绘制 用1cm比色皿，以1号空白标样作参比，在 波长520nm处测量其余6个标样的吸光度Ai 。 以吸光度Ai为纵坐标，亚硝酸盐氮的浓度Ci （mg/L）为横坐标绘制工作曲线。
4 水样的测定
取80mL自来水样，各加入4.0mL对氨基苯磺酸溶 液，混匀。放置5min。 加入醋酸钠溶液加入4.0mL 、盐酸萘胺溶液 4.0mL ，混匀，蒸馏水稀释至刻度摇匀。放置 10min。 用1cm比色皿，测定其吸光度Ax 。然后在工作曲 线上查出Cx 。计算每升水含氮的毫克数。
亚硝酸盐氮的测定
亚硝酸盐氮得测定（N・（l •蔡基）•乙二胺分光光度法）：亚硝酸盐就是氮循环得中间产物，不稳定，根据水环境条件，可被氧化成硝酸盐，也可被还原成氨。
亚硝酸盐可使人体正常得血红蛋口（地铁血红蛋口）氧化成为高铁血红蛋口，发生高铁血红蛋口症，失去血红蛋白在体内输送氧得能力，出现组织缺氧得症状。
亚硝酸盐可与仲胺类反应生成具致癌性得亚硝胺类物质，在PH 值较低得酸性条件下，有利于亚硝胺类得形成。
水中亚硝酸盐得测定方法通常采用重氮-偶联反应，使生成红紫色染料。
方法灵敬、选择性强。
所用重氮与偶联试剂种类较多，最常用，前者为对氨基苯磺酰胺与对氨基苯磺酸,后者为「（1-荼基）-乙二胺与a-荼胺。
此外，还有目前国内外普遍使用得离子色谱法与新开发得气相分子吸收法。
这两种方法虽然须使用专用仪器,但方法简便、快速，干扰较少。
亚硝酸盐在水中可受微生物等作用而很不稳定，在采集后应尽快进行分析，必要时冷藏以抑制微生物得影响。
1、实验原理在磷酸介质中,PH1、8±0、3时，亚硝酸盐与对-氨基苯磺酰胺反应,生成重氮盐, 再与\-（1-蔡基）-乙二胺偶联生成红色染料。
在540nm波长处有最大吸收。
2、干扰及消除氯胺、氯、硫代硫酸盐、聚磷酸钠与高铁离子有明显干扰。
水样呈碱性（PH>11）时，可加酚酥溶液为指示剂,滴加磷酸溶液至红色消失。
水样有颜色或悬浮物，可加氢氧化铝悬浮液并过滤。
3、方法得适用范围本方法适用于饮用水、地表水、地下水、生活污水、与工业废水中亚硝酸盐得测定。
最低检出浓度为0、003mg/L;测定上限为0、20mg/L亚硝酸盐氮、4、仪器分光光度计5、试剂实验用水均为不含亚硝酸盐得水1）无亚硝酸盐得水:于蒸镭水中加入少许高镭酸钾晶体，使呈红色，再加氢氧化钞!（或氢氧化钙）使呈碱性。
置于全玻璃蒸镭器中蒸镭，弃去50ml初镭液，收集中间约70%不含镒得镭出液。
亦可于每升蒸镭水中加lml浓硫酸与0、2nd硫酸镭溶液（每100ml水中含36、4gMnS0.. H：0）, JIARU广3ml0、04%高镭酸钾溶液至呈红色，重蒸憎。
水中氨氮亚硝酸盐氮和硝酸盐氮的测定
污染物已正在分解，但未完全自净
污染物已基本分解完全，但未自净
污染物已无机化，水体已基本自净
有新的污染，在此前的污染已基本 自净
以前受到污染，正在自净过程，且 又有新污染
a
2
二、仪器
1．紫外可见分光光度计。 2．500~1000mL全玻璃磨口蒸馏装置。 3．pH计。 4．恒温水浴槽。 5．电炉：220V/1kW。 6．比色管：50mL。 7．陶瓷蒸发皿：100mL或200mL。 8．移液管：1mL、2mL、5mL。 9．容量瓶：250mL。
a
21
（2）标准曲线的绘制
分别吸取硝酸盐氮标准溶液0.00、1.00、1.50、2.00、 2.50、3.00、4.00mL于50mL比色管中，加入1.0mL二 磺酸酚，3.0mL浓氨水，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。 用1mL比色皿，以蒸馏水作为参比，于波长410nm处测 定吸光度，绘制标准曲线。
除去氯离子：取50mL水样，滴加一定量的硫酸银溶液直到不产生 白色沉淀为止，再通过离心或过滤除去氯化银沉淀，滤液转移至 100mL的容量瓶中定容至刻度。
去除亚硝酸盐氮影响：如水样中亚硝酸盐氮含量超过0.2mg/L，可 事先将其氧化为硝酸盐氮。具体方法：在已除氯离子的100mL容量 瓶中加入1mL0.5mol/L硫酸溶液，混合均匀后滴加0.100mol/L高锰 酸钾溶液，至淡红色出现并保持15min不褪色，以使亚硝酸盐完全 转变为硝酸盐，最后从测定结果中减去亚硝酸盐含量。
（3）硝酸盐标准溶液：准确移取50mL硝酸盐标准储备液，置于蒸 发皿中，在水浴上蒸干，然后加入2.0mL二磺酸酚，用玻棒研磨， 使试剂与蒸发皿内残渣充分接触，静置10min，加入少量蒸馏水， 移入250mL容量瓶中，用蒸馏水稀释至标线，即为20ug/mL的 NO3――N标准溶液。
水中氨氮、亚硝酸盐氮和硝酸盐氮及总氮的测定
水中氨氮、亚硝酸盐氮和硝酸盐氮及总氮的测定8.6.5 水中氨氮、亚硝酸盐氮和硝酸盐氮及总氮的测定+水中的氨氮指以NH和NH型体存在的氮，当pH偏高时，主要34+是NH，反之，是NH。
水中的氨氮主要来自焦化厂、合成氨化肥厂34等某些工业废水、农用排放水以及生活污水中的含氮有机物受微生物作用分解的第一步产物。
水中的亚硝酸盐氮是氮循环的中间产物，不稳定。
在缺氧环境中，水中的亚硝酸盐也可受微生物作用，还原为氨;在富氧环境中，水中的氨也可转变为亚硝酸盐。
亚硝酸盐可使人体正常的低铁血红蛋白氧化成高铁血红蛋白，失去血红蛋白在体内运输氧的能力，出现组织缺氧的症状。
亚硝酸盐可与仲胺类反应生成具有致癌性的亚硝胺类物质，尤其在低pH值下，有利于亚硝胺类的形成。
水中的硝酸盐主要来自革质废水、酸洗废水、某些生化处理设施的出水和农用排放水以及水中的氨氮、亚硝酸盐氮在富氧环境下氧化的最终产物。
当然，硝酸盐在无氧环境中，也可受微生物的作用还原为亚硝酸盐。
硝酸盐进入人体后，经肠道中微生物作用转变为亚硝酸盐而出现毒性作用，当水中硝酸盐含量达到10mg/L 时，可是婴儿得变性血红蛋白症。
因此要求水中硝酸盐氮和亚硝酸盐氮总量不得大于10mg/L。
天然水中的氨，在有充足氧的环境中，在微生物的作用下，可,,被氧化为和NO得作用称作硝化作用。
NO32水中的含氮化合物是水中一项重要的卫生质量指标。
它可以判断水体污染的程度:(1)如水中主要有机氮和氨氮，表明水近期受到污染，由于生活污水中成有大量病原细菌，所以此水在卫生学上是危险的。
(2)如水中主要含有亚硝酸盐，说明水中有机物的分解尚未达到最后阶段，致病细菌尚未完全消除，应引起重视。
(3)如果水中主要含有硝酸盐，说明水污染已久。
自净过程基本完成，致病细菌也已消除，对卫生学影响不大或几乎没有危险性。
一般地面水中硝酸盐氮的含量在0.1~1.0mg/L，超过这个值，该水体以前有可能受过污染。
正如测定水中溶解氧(DO)，了解水中有机物被氧化的程度，评价水的“自净”作用一样，测定水中各类含氮化物，也可了解和评价水体被污染和“自净”作用。
亚硝酸盐氮氨氮的测定方法
亚硝酸盐亚硝酸盐（NO2--N）是氮循环的中间产物，不稳定。
根据水循环条件，可被氧化成硝酸盐，也可被还原成氨。
亚硝酸盐可使人体正常的血红蛋白（低铁血红蛋白）氧化成为高铁血红蛋白，发生高铁血红蛋白症，失去血红蛋白在体内输送氧的能力，出现组织缺氧的症状。
亚硝酸盐可于仲胺类反应生成具致癌性的亚硝胺类物质，在pH值较低的酸性条件下，有利于亚硝胺类的形成。
水中亚硝酸盐的测定方法通常采用重氮—偶联反应，使生成红紫色染料。
方法灵敏、选择性强。
所用重氮和偶联试剂种类较多，最常用的，前者为对氨基苯磺酰胺和对氨基苯磺酸，后者为N-（1-萘基）-乙二胺和α-萘胺。
亚硝酸盐在水中可受微生物等作用而很不稳定，在采集后应尽快进行分析，必要时以冷藏抑制微生物的影响。
一、N-（1-萘基）-乙二胺光度法GB7493--87 概述1.方法原理在磷酸介质中，pH值为 1.8±0.3时，亚硝酸盐与对氨基苯磺酰胺反应，生成重氮盐，再与N-（1-萘基）-乙二胺偶联生成红色染料。
在540nm波长处有最大吸收。
2．干扰及消除氯胺、氯、硫代硫酸盐、聚磷酸钠和高铁离子有明显干扰。
水样呈碱性（pH≥11）时，可加酚酞溶液为指示剂，滴加磷酸至红色消失。
水样有颜色或悬浮物，可加氢氧化铝悬浮液并过滤。
3．方法的适用范围本方法适用于饮用水、地面水、地下水、生活污水和工业废水中亚硝酸盐的测定。
最低检出浓度为0.003mg/L；测定上限为0.20 mg/L 亚硝酸盐氮。
仪器分光光度计试剂实验用水均为不含亚硝酸盐的水。
（1）无亚硝酸盐的水：于蒸馏水中加少许高锰酸钾晶体，使呈红色，再加氢氧化钡（或氢氧化钙）使呈碱性。
置全玻璃蒸馏器中蒸馏，弃去50ml初馏液，收集中间约70%不含锰的馏出液。
亦可于每升蒸馏水中加1ml浓硫酸和0.2ml硫酸锰溶液（每100ml水中含36.4g Mn.H20），加入1-3ml 0.04%高锰酸钾溶液至呈红色，重蒸馏。
（2）磷酸（ρ=1.70 g/ml）（3）显色剂：于500ml烧杯内，置于250ml水和50ml磷酸，加入20.0g对氨基苯磺酰胺。
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2 绘制吸收曲线（略，找最大吸收波长）： 520nm 3 工作曲线的绘制 用1cm比色皿，以1号空白标样作参比，在 波长520nm处测量其余6个标样的吸光度Ai 。 以吸光度Ai为纵坐标，亚硝酸盐氮的浓度Ci （mg/L）为横坐标绘制工作曲线。
4 水样的测定
取80mL自来水样，各加入4.0mL对氨基苯磺酸溶 液，混匀。放置5min。 加入醋酸钠溶液加入4.0mL 、盐酸萘胺溶液 4.0mL ，混匀，蒸馏水稀释至刻度摇匀。放置 10min。 用1cm比色皿，测定其吸光度Ax 。然后在工作曲 线上查出Cx 。计算每升水含氮的毫克数。
实验八 天然水中亚硝酸盐氮的测定
盐酸-α基苯磺酸 （磺胺）进行重氮化反应，其产物再与盐 酸萘胺偶合生成红色偶氮染料，于520nm 波长处测定吸光度。
二. 实验步骤
1 配制标准系列
取7个100mL容量瓶，分别加入0、1.00、1.60、2.00、 4.00、8.00、12.00mL亚硝酸盐标准溶液（1.00×103mg/mL），各加入4.0mL对氨基苯磺酸，混匀。放置 5min。 加入醋酸钠溶液加入4.0mL 、盐酸萘胺溶液4.0mL ，混 匀，蒸馏水稀释至刻度摇匀。放置10min。 此标准系列各点的浓度分别为0、0.010、0.016、 0.020、0.040、0.080、0.120 mg/L。