蛋白质多肽类药物
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有5个同类产品，其中2个（组）为"重磅炸弹"，一是Pegasys（Roche， PEG化的重组人α干扰素-2a）,另一组是Schering Plough的PEGIntron A/Intron A
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人血浆蛋Leabharlann Baidu因子
▪ 重组人凝血因子Ø ▪ 重组人凝血因子× ▪ 重组人凝血因子Ù ▪ 组织血浆酶原激活物tPA ▪ C反应蛋白 ▪ 重组人抗凝血酶
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蛋白多肽类药物的关键问题
蛋白多肽类药物关键问题
▪ 1）结构特征：蛋白质分子的化学结构决定其活性；药物的空间
结构即二维、三维结构也同样影响生物活性；另外，多肽及蛋白质的 分子量常为数千至几十万，颗粒大小在l～100nm之间，不能透过半透 膜。
▪ 2）体内外不稳定性：蛋白质药物在体内外环境可能经受多种
维持外周血红细胞的水平, 临床上主要用于治疗肾衰后引起的贫血。
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rHuEPO的不良反应 常见不良反应：
▪ 高血压：大多发生于慢性肾衰病人，可能是Het快速增加、血液粘
稠度增高、周围血管阻力增加等所致。
▪ 癫痫发作：原因不明，偶见于慢性肾衰病人；
▪ 其它： 头痛、心动过速、恶心、呕吐、呼吸加快、透析管栓塞等。
运动员长期滥用rHuEPO 将可能导致上述症状的出现，严重者甚至导 致死亡。
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rHuEPO的应用 rHuEPO 的作用
▪ 促使红系祖细胞的增殖和分化，骨髓内红细胞池 扩大
▪ 促使红细胞的成熟和Hb 的合成
▪ 刺激网织红细胞的早期向血液中释放 EPO 的功效在
一定剂量范围内呈剂量依赖性，但剂量超过太大后并不增加药效。
Lilly，胰岛素突变体)、Lantus (Anvents，胰岛素突变体)
▪ 人生长激素（1985年第一个重组人生长激素Protropin(Genetech)
上市）
▪ 卵泡刺激激素 ▪ 其他激素
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人造血因子
包括： ▪ 重组人促红细胞生成素: 1985年成功表达了重组人促红细胞生成素(rhEPO，1989
重组人抗凝血酶（ATryn）是2006年批准的、第一个由 转基因动物（羊）生产的重组药物。
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人骨形成蛋白 是最年轻的一组 第一个产品2001年批准上市
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融合蛋白
1）是为数很少的以抑制为作用机理的重组药物,仅有3个 2）1998年批准的Enbrel(Amgen)：是TNF受体和IgG的
人细胞因子
▪ 20世纪80年代 研究者克隆了人干扰素基因，实现了基因工程
rhuIFN的大规模生产。
▪ 到了20世纪90年代 以提高rhuIFN的生物利用度和药代动力学
为主要开发方向，进行了干扰素聚乙二醇（PEG）修饰，研制了长效 干扰素，减少了给药次数，提高了疗效。
▪ 1986年 第一个重组人α干扰素Roferon(Huffman-La Roche)上市,现
Fc片段的融合蛋白，含934个氨基酸，适应症为风湿性关节炎
3）1999年上市的免疫毒素Ontak（Ligand）：适应症
是皮肤T细胞淋巴瘤（CTCL），是缺失细胞结合域的白喉毒素与IL-2 的N端133个氨基酸的融合蛋白。
4）2003年上市的Amevive（Biogen Idec）：是
LEF-3的CD2与IgG的Fc
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基因工程蛋白质或多肽类药物
简介
分类
rHuEPO
蛋白多肽类药物
蛋白重组药物：8类
原理、方法、应用
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重组蛋白药物分类
目前目前上市的蛋白重组药物大致可以分为以下几 类:
●多肽类激素药 ●人造血因子 ●人细胞因子 ● 人血浆蛋白因子 ● 人骨形成蛋白 ● 重组酶 ● 融合蛋白 ● 外源重组蛋白
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多肽类激素药
包括: ▪ 人胰岛素（1982年第一个重组人胰岛素Humulin (Eli Lilly)上市 ▪ 12种制剂（Novo Nordisk的8个速效、中效和长效重组胰岛素突变
体在此仅计为1个）
▪ 3个"重磅炸弹": Humulin（野生型胰岛素）、Humalog (Eli
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rHuEPO的应用
rHuEPO 适用于： ▪ 慢性肾衰贫血的治疗：此类贫血的一个主要原因是EPO 生成
缺乏。EPO 可谓替代治疗方法，其疗效达95％以上
▪ 艾滋病(AIDS)病人伴贫血 ▪ 肿瘤病人化疗所致贫血 ▪ 慢性病贫血 ▪ 造血干细胞疾病的贫血 ▪ 自体供血输注。
复杂的化学降解和物理变化而失活。
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蛋白多肽类药物的关键问题
提高稳定性的方法： （1）温和的生产条件如对温度、机械搅拌强度和有 机溶剂的选择，对无菌条件的控制，容器的吸附效 应，水分控制，低温冷藏等。 （2）设计正确的处方如PH、缓冲对、电解质；加 入适宜稳定剂、冻干保护剂、阻聚剂如非离子表面 活性剂、糖、甘露醇、山梨醇、PEG、人血清白蛋 白等以及制备包合物等。
简介
1)蛋白质药物可分为: 多肽和基因工程药物 单克隆抗体和基因工程抗体 重组疫苗
2)与以往的小分子药物相比，蛋白质药物具有高活性、特异性强、低毒性、 生物功能明确、有利于临床应用的特点。由于其成本低、成功率高、安全可 靠，已成为医药产品中的重要组成部分。1982年美国Likky公司首先将重组 胰岛素投放市场，标志着第一个重组蛋白质药物的诞生。
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蛋白多肽类药物的关键问题
▪ 3）吸收特征：蛋白质药物半衰期短、清除率高、分子
量大透股能力差、易受体内酶和细菌以及体液的破坏、非 注射给药生物利用度低，一般都仅为百分之几，提高蛋白 质药物吸收的方法一般有化学修饰或制备成前体药物，使 用酶抑制剂，吸收促进剂，选择适宜剂型保护等。
年上市第一个重组人促红细胞生成素。
▪ 新红细胞生成刺激蛋白(NESP)：美国 Amgen 公司研制的长效 EPO 制剂 ,于
2001 年 6 月底获得欧洲药物评审委员会批准 ,用于慢性肾衰引起的贫血。NESP 是一种 高糖基化 rhEPO 类似物,也是第一个被批准用于临床的新型促红细胞生成素 ,具rhEPO 相似的作用机制即刺激红系造血。法国学者Dalle等 ,于2001 年利用基因重组技术合成 了一种二聚体 EPO ,由两个 EPO 及一个 9 肽连接而成的融合蛋白。
• rHuEPO与EPO： 1）氨基酸序列完全相同，仅糖基部分有微小差别； 2）在结构上的不同是N-端唾液酸含量的差异； 3）作用极为相似，可以明显提高人体的红细胞数量及血红蛋白含量，从
而提高人体运输氧的能力，提高人体最大摄氧量； 4）rHuEPO主要生理作用是调节红系前体细胞分化为成熟的红细胞,进而
▪ 粒细胞/单核细胞集落刺激因子GM-CSF（1985年Wong和Lee等人分别从MO
细胞cDNA文库和ConA刺激的T淋巴细胞cDNA文库中克隆出人GM-CSF的cDNA，并实 现了表达，1993年张智清等人在国内首次克隆了人GM-CSFcDNA，并在大肠杆菌里获 得表达）
▪ 其他造血相关因子
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1998年 重组水蛭素药物在德国正式上市 1999年 英国批准上市.复旦大学成功研制国家一类新药RGD-
Hirudin
2005年 获准正式进入一期临床试验。 2006年 两种水蛭素和一种水蛭素类似物已被美国FDA批准生产，
分别是lepirudin,desirudin,angianmax.)
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LOGO
基因工程---蛋白质多肽类药物
基因工程蛋白质或多肽类药物
简介
分类
rHuEPO
蛋白多肽类药物
蛋白重组药物-8类
原理、方法、应用
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简介
基因工程被认为是21世纪最具主导地位的高新技术之 一，基因工程药物基本都是蛋白多肽类药物，对肿瘤遗传 性和非遗传性疾病有着特殊的疗效，随着科学与技术的不 断发展以及人民对生活质量的要求在不断提高蛋白类药物 的制备将发展为21世纪我国最具吸引力的新技术产业之一。 蛋白质和多肽类作为药物，具有生理活性强、免疫原性低、 疗效高等诸多优点，随着基因工程的不断发展，在人类治 疗疾病中的地位也日趋重要，目前成为国际药学界的研究 重点之一 。
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简介
•概念
多肽和蛋白质类药物:指用于预防、治疗和诊断的多肽和蛋白质类物质
生物药物。
•特点
▪ 基本原料简单易得：主要以20种天然氨基酸为基本结构单元 ▪ 药效高，副作用低, 不蓄积中毒 ▪ 用途广泛，品种繁多，新型药物层出不穷 ▪ 研发过程目标明确,针对性强
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重组酶 1993年 第一个重组酶Pulmozyme(Genetech)上市
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外源重组蛋白
重组水蛭素(hirudin) 1986年 水蛭素的cDNA被克隆出来，获得了建立在多种载体上的重
组水蛭素，包括在大肠杆菌，枯草杆菌，酵母菌及真核细胞等的成功 表达。
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rHuEPO原理
•rHuEPO是一种酸性糖蛋白 •分子量:29.8士0．3kDa •1985年问世并成为注册药物。 •启动子构建成表达载体→不同的细胞株[有中国仓鼠卵细胞(CH0)、幼仓鼠肾细胞(BHK)及C127
小鼠纤维细3]作为受体进行表达→获取rHuEPO。
基因工程蛋白质或多肽类药物
简介
分类
rHuEPO
蛋白多肽类药物
蛋白重组药物：8类
原理、方法、应用
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重组EPO（rHuEPO）
▲
背景
原理
应用 。
不良反应
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rHuEPO背景
在运动竞赛中兴奋剂的使用日益受到人们的重视。尽管 现在对兴奋剂的检测力度不断加大，但兴奋剂的使用并未销 声匿迹，不断有新的兴奋剂在悄悄使用。随着生物技术的进 步，运用基因重组技术开发出了许多重组激素类药物。如重 组人促红细胞生成素（ rHuEPO ），近些年来被滥用于一些 耐力性运动项目中，例如长距离跑、游泳、自行车等项目。 早期的一项来自德国的报告表明，有18名自行车运动员的死 亡与rHuEPO 的滥用有关。
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人血浆蛋Leabharlann Baidu因子
▪ 重组人凝血因子Ø ▪ 重组人凝血因子× ▪ 重组人凝血因子Ù ▪ 组织血浆酶原激活物tPA ▪ C反应蛋白 ▪ 重组人抗凝血酶
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蛋白多肽类药物关键问题
▪ 1）结构特征：蛋白质分子的化学结构决定其活性；药物的空间
结构即二维、三维结构也同样影响生物活性；另外，多肽及蛋白质的 分子量常为数千至几十万，颗粒大小在l～100nm之间，不能透过半透 膜。
▪ 2）体内外不稳定性：蛋白质药物在体内外环境可能经受多种
维持外周血红细胞的水平, 临床上主要用于治疗肾衰后引起的贫血。
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rHuEPO的不良反应 常见不良反应：
▪ 高血压：大多发生于慢性肾衰病人，可能是Het快速增加、血液粘
稠度增高、周围血管阻力增加等所致。
▪ 癫痫发作：原因不明，偶见于慢性肾衰病人；
▪ 其它： 头痛、心动过速、恶心、呕吐、呼吸加快、透析管栓塞等。
运动员长期滥用rHuEPO 将可能导致上述症状的出现，严重者甚至导 致死亡。
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rHuEPO的应用 rHuEPO 的作用
▪ 促使红系祖细胞的增殖和分化，骨髓内红细胞池 扩大
▪ 促使红细胞的成熟和Hb 的合成
▪ 刺激网织红细胞的早期向血液中释放 EPO 的功效在
一定剂量范围内呈剂量依赖性，但剂量超过太大后并不增加药效。
Lilly，胰岛素突变体)、Lantus (Anvents，胰岛素突变体)
▪ 人生长激素（1985年第一个重组人生长激素Protropin(Genetech)
上市）
▪ 卵泡刺激激素 ▪ 其他激素
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人造血因子
包括： ▪ 重组人促红细胞生成素: 1985年成功表达了重组人促红细胞生成素(rhEPO，1989
重组人抗凝血酶（ATryn）是2006年批准的、第一个由 转基因动物（羊）生产的重组药物。
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人骨形成蛋白 是最年轻的一组 第一个产品2001年批准上市
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融合蛋白
1）是为数很少的以抑制为作用机理的重组药物,仅有3个 2）1998年批准的Enbrel(Amgen)：是TNF受体和IgG的
人细胞因子
▪ 20世纪80年代 研究者克隆了人干扰素基因，实现了基因工程
rhuIFN的大规模生产。
▪ 到了20世纪90年代 以提高rhuIFN的生物利用度和药代动力学
为主要开发方向，进行了干扰素聚乙二醇（PEG）修饰，研制了长效 干扰素，减少了给药次数，提高了疗效。
▪ 1986年 第一个重组人α干扰素Roferon(Huffman-La Roche)上市,现
Fc片段的融合蛋白，含934个氨基酸，适应症为风湿性关节炎
3）1999年上市的免疫毒素Ontak（Ligand）：适应症
是皮肤T细胞淋巴瘤（CTCL），是缺失细胞结合域的白喉毒素与IL-2 的N端133个氨基酸的融合蛋白。
4）2003年上市的Amevive（Biogen Idec）：是
LEF-3的CD2与IgG的Fc
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基因工程蛋白质或多肽类药物
简介
分类
rHuEPO
蛋白多肽类药物
蛋白重组药物：8类
原理、方法、应用
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重组蛋白药物分类
目前目前上市的蛋白重组药物大致可以分为以下几 类:
●多肽类激素药 ●人造血因子 ●人细胞因子 ● 人血浆蛋白因子 ● 人骨形成蛋白 ● 重组酶 ● 融合蛋白 ● 外源重组蛋白
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多肽类激素药
包括: ▪ 人胰岛素（1982年第一个重组人胰岛素Humulin (Eli Lilly)上市 ▪ 12种制剂（Novo Nordisk的8个速效、中效和长效重组胰岛素突变
体在此仅计为1个）
▪ 3个"重磅炸弹": Humulin（野生型胰岛素）、Humalog (Eli
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rHuEPO的应用
rHuEPO 适用于： ▪ 慢性肾衰贫血的治疗：此类贫血的一个主要原因是EPO 生成
缺乏。EPO 可谓替代治疗方法，其疗效达95％以上
▪ 艾滋病(AIDS)病人伴贫血 ▪ 肿瘤病人化疗所致贫血 ▪ 慢性病贫血 ▪ 造血干细胞疾病的贫血 ▪ 自体供血输注。
复杂的化学降解和物理变化而失活。
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提高稳定性的方法： （1）温和的生产条件如对温度、机械搅拌强度和有 机溶剂的选择，对无菌条件的控制，容器的吸附效 应，水分控制，低温冷藏等。 （2）设计正确的处方如PH、缓冲对、电解质；加 入适宜稳定剂、冻干保护剂、阻聚剂如非离子表面 活性剂、糖、甘露醇、山梨醇、PEG、人血清白蛋 白等以及制备包合物等。
简介
1)蛋白质药物可分为: 多肽和基因工程药物 单克隆抗体和基因工程抗体 重组疫苗
2)与以往的小分子药物相比，蛋白质药物具有高活性、特异性强、低毒性、 生物功能明确、有利于临床应用的特点。由于其成本低、成功率高、安全可 靠，已成为医药产品中的重要组成部分。1982年美国Likky公司首先将重组 胰岛素投放市场，标志着第一个重组蛋白质药物的诞生。
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蛋白多肽类药物的关键问题
▪ 3）吸收特征：蛋白质药物半衰期短、清除率高、分子
量大透股能力差、易受体内酶和细菌以及体液的破坏、非 注射给药生物利用度低，一般都仅为百分之几，提高蛋白 质药物吸收的方法一般有化学修饰或制备成前体药物，使 用酶抑制剂，吸收促进剂，选择适宜剂型保护等。
年上市第一个重组人促红细胞生成素。
▪ 新红细胞生成刺激蛋白(NESP)：美国 Amgen 公司研制的长效 EPO 制剂 ,于
2001 年 6 月底获得欧洲药物评审委员会批准 ,用于慢性肾衰引起的贫血。NESP 是一种 高糖基化 rhEPO 类似物,也是第一个被批准用于临床的新型促红细胞生成素 ,具rhEPO 相似的作用机制即刺激红系造血。法国学者Dalle等 ,于2001 年利用基因重组技术合成 了一种二聚体 EPO ,由两个 EPO 及一个 9 肽连接而成的融合蛋白。
• rHuEPO与EPO： 1）氨基酸序列完全相同，仅糖基部分有微小差别； 2）在结构上的不同是N-端唾液酸含量的差异； 3）作用极为相似，可以明显提高人体的红细胞数量及血红蛋白含量，从
而提高人体运输氧的能力，提高人体最大摄氧量； 4）rHuEPO主要生理作用是调节红系前体细胞分化为成熟的红细胞,进而
▪ 粒细胞/单核细胞集落刺激因子GM-CSF（1985年Wong和Lee等人分别从MO
细胞cDNA文库和ConA刺激的T淋巴细胞cDNA文库中克隆出人GM-CSF的cDNA，并实 现了表达，1993年张智清等人在国内首次克隆了人GM-CSFcDNA，并在大肠杆菌里获 得表达）
▪ 其他造血相关因子
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Hirudin
2005年 获准正式进入一期临床试验。 2006年 两种水蛭素和一种水蛭素类似物已被美国FDA批准生产，
分别是lepirudin,desirudin,angianmax.)
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基因工程---蛋白质多肽类药物
基因工程蛋白质或多肽类药物
简介
分类
rHuEPO
蛋白多肽类药物
蛋白重组药物-8类
原理、方法、应用
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简介
基因工程被认为是21世纪最具主导地位的高新技术之 一，基因工程药物基本都是蛋白多肽类药物，对肿瘤遗传 性和非遗传性疾病有着特殊的疗效，随着科学与技术的不 断发展以及人民对生活质量的要求在不断提高蛋白类药物 的制备将发展为21世纪我国最具吸引力的新技术产业之一。 蛋白质和多肽类作为药物，具有生理活性强、免疫原性低、 疗效高等诸多优点，随着基因工程的不断发展，在人类治 疗疾病中的地位也日趋重要，目前成为国际药学界的研究 重点之一 。
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•概念
多肽和蛋白质类药物:指用于预防、治疗和诊断的多肽和蛋白质类物质
生物药物。
•特点
▪ 基本原料简单易得：主要以20种天然氨基酸为基本结构单元 ▪ 药效高，副作用低, 不蓄积中毒 ▪ 用途广泛，品种繁多，新型药物层出不穷 ▪ 研发过程目标明确,针对性强
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重组酶 1993年 第一个重组酶Pulmozyme(Genetech)上市
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外源重组蛋白
重组水蛭素(hirudin) 1986年 水蛭素的cDNA被克隆出来，获得了建立在多种载体上的重
组水蛭素，包括在大肠杆菌，枯草杆菌，酵母菌及真核细胞等的成功 表达。
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rHuEPO原理
•rHuEPO是一种酸性糖蛋白 •分子量:29.8士0．3kDa •1985年问世并成为注册药物。 •启动子构建成表达载体→不同的细胞株[有中国仓鼠卵细胞(CH0)、幼仓鼠肾细胞(BHK)及C127
小鼠纤维细3]作为受体进行表达→获取rHuEPO。
基因工程蛋白质或多肽类药物
简介
分类
rHuEPO
蛋白多肽类药物
蛋白重组药物：8类
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背景
原理
应用 。
不良反应
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rHuEPO背景
在运动竞赛中兴奋剂的使用日益受到人们的重视。尽管 现在对兴奋剂的检测力度不断加大，但兴奋剂的使用并未销 声匿迹，不断有新的兴奋剂在悄悄使用。随着生物技术的进 步，运用基因重组技术开发出了许多重组激素类药物。如重 组人促红细胞生成素（ rHuEPO ），近些年来被滥用于一些 耐力性运动项目中，例如长距离跑、游泳、自行车等项目。 早期的一项来自德国的报告表明，有18名自行车运动员的死 亡与rHuEPO 的滥用有关。
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