第四章消毒与灭菌
消毒与灭菌(共75张PPT)
吸附—侵入—生物合成—成熟和释放
吸附
侵入
生物合成〔复制和成熟〕
释放
噬菌体生长迹象的观察：
噬菌体可使混浊的细菌液体培养物变清朗，在 固体培养基上可形成噬菌斑。
一个噬菌斑由一个噬菌体繁殖而成，不同噬菌 体产生的噬菌斑大小、形态、边缘和透明度 均不同，所以，噬菌斑可用于噬菌体的鉴定、 纯种别离和计数。
② 高温瞬时法
71～72℃保持15s
③ 超高温法
132℃保持1～2s
巴氏消毒装置
二、辐射灭菌法
〔一〕非电离辐射
包括： 紫外线
日光
可见光
红外线
微波
1、紫外线
波长200～300nm的紫外线具有杀菌作用， 其中253～265nm段杀菌力最强。
杀菌机理：
主要破坏菌体细胞DNA的构型，使DNA分子 中间形成胸腺嘧啶二聚体，干扰DNA的复
温和噬菌体的增殖
噬菌体的应用
• 由于噬菌体感染具有菌种或菌型的特异性， 故可用噬菌体进行细菌的鉴定和分型、检 测未知细菌、进行流行病学调查。
• 此外，噬菌体也是分子生物学及基因工程 研究的工具。
第四节 微生物实验室的生物平安
一、生物平安的概念和一般要求
〔一〕生物平安
是指与生物有关的各种因素对社会、经济、 人类健康可能产生的潜在的有害影响。而 兽医微生物实验室的生物平安是指在转移、 检查和处理病料、污染材料等过程中，防 止污染环境及对人员造成危害。
〔二〕细菌素〔bacteriocin〕
是某些细菌产生的一类具有杀菌作用的蛋 白质，只能作用于同种细菌不同的菌株 或与它有亲缘关系的其他细菌。
例如：
大肠菌素 作用大肠杆菌其他菌株和与它有亲 缘关系的志贺氏菌、沙门氏菌、克雷伯氏菌 等。
消毒与灭菌
第四章消毒与灭菌一、A11、口腔黏膜及创面消毒选用A、含有效碘250mg/L的碘附液B、含有效碘500mg/L的碘附液C、含有效碘1000mg/L的碘附液D、含有效碘2500～5000mg/L的碘附液E、含有效碘5000mg/L的碘附液2、不属于高度危险性物品的是A、腹腔镜B、穿刺针C、脏器移植物D、麻醉机管道E、活体组织检查钳3、高度危险性物品的处理必须选择A、灭菌方法B、高效消毒方法C、中效消毒方法D、低效消毒方法E、清洁方法4、欲配制1%过氧乙酸1000ml，需要20%的过氧乙酸原液和灭菌蒸馏水的ml数分别为A、50ml，950mlB、100ml，900mlC、150ml，850mlD、200ml，800mlE、250ml，750ml5、过氧乙酸原液浓度低于何值时禁止使用A、11%B、12%C、13%D、14%E、15%6、有关化学消毒剂戊二醛的使用注意事项错误的是A、戊二醛对碳钢制品有腐蚀性，使用前应先加入0.1%碳酸氢钠防锈B、使用过程中应加强对戊二醛浓度的检测C、接触戊二醛消毒液时应戴橡胶手套D、防止将戊二醛溅入眼内或吸入体内E、盛装戊二醛消毒液的容器应加盖，放于通风良好处7、有关化学消毒剂的使用，错误的是A、碘酊多用于皮肤的消毒B、氯己定对金属和织物无腐蚀性C、过氧乙酸可用于浸泡金属器械D、过氧乙酸可用于浸泡内镜E、碘附对皮肤、黏膜无刺激8、能杀死一切微生物的化学消毒剂是A、二溴海因B、碘附C、氯己定D、戊二醛E、苯扎溴铵9、属于低效消毒剂的是A、乙醇B、氯己定C、含氯消毒剂D、过氧乙酸E、碘附10、具有广谱、高效的杀菌作用，对金属腐蚀性小，受有机物影响小的化学消毒剂是A、乙醇B、福尔马林（4%甲醛溶液）C、戊二醛D、过氧化氢E、碘附11、用紫外线灯管消毒，下列说法错误的是A、被消毒物品应摊开或挂起B、紫外线灯管要保持清洁透亮C、灯管使用期限不能超过1000小时D、灯管强度低于60μW/cm2时应更换E、定期进行空气培养12、紫外线消毒空气时，若每10m2安装30W紫外线灯管1支，则有效距离和消毒时间分别为A、＜1m，30～60分钟B、＜2m，30～60分钟C、＜1m，60～90分钟D、＜2m，60～90分钟E、＜1m，90分钟13、消毒灭菌使用的紫外线多为A、A波B、B波C、C波D、D波E、真空紫外线14、压力蒸气灭菌时物品的装载错误的是A、尽量将同类物品放在一起灭菌B、物品的上下左右均应间隔一定距离C、难灭菌的大包放上层，易灭菌的小包放下层D、金属物品放下层，织物包放上层E、玻璃瓶等开口向上或侧放15、使用化学灭菌或消毒时，错误的是A、根据需要选择合适的消毒剂B、了解化学消毒剂的性能和作用C、配制时注意有效浓度D、按规定定期监测E、更换灭菌剂时对用于浸泡灭菌物品的容器进行消毒16、为防止“小装量效应”，脉动真空压力蒸气灭菌器的装载量不得小于A、5%B、10%C、15%D、20%E、25%17、使用季铵盐类消毒剂消毒物品时，下列叙述错误的是A、苯扎溴铵仅能杀灭部分细菌繁殖体和亲脂病毒B、复方季铵盐消毒剂原液皮肤擦拭消毒，作用时间3～5分钟C、苯扎溴铵用于黏膜消毒时，浓度为1000～2000mg/LD、可用于环境表面消毒E、与肥皂、洗衣粉等合用时，有增强消毒效果的作用18、用医用干热灭菌箱进行物品灭菌时，下列叙述错误的是A、适用于耐高温、不耐湿热或不宜穿透物品的灭菌B、温度为160℃时，灭菌时间仅需要1hC、灭菌时不要与箱底部及四壁接触D、物品包装不可超过10cm×10cm×20cmE、物品高度不能超过箱高度的2／319、用预真空压力蒸气灭菌器对金属器皿包进行压力蒸气灭菌时，下列叙述最正确的是A、重量不超过10kgB、灭菌时间需要20minC、若不同类的物品，以最易达到的温度和时间为准D、装载量不超过柜室容积的90％E、与敷料包同时灭菌时，放于柜室的上层20、手术器械包采用压力蒸汽灭菌所需时间为A、121℃下排气压力蒸汽灭菌需15minB、132℃预真空压力蒸汽灭菌需15minC、132℃脉动真空压力蒸汽灭菌需15minD、121℃下排气压力蒸汽灭菌需20minE、121℃下排气压力蒸汽灭菌需30min21、下列操作不符合无菌原则的是A、术者双手保持在无菌台面以上B、术者面对面更换位置C、术者肘部接触有菌区后带袖套D、手术区无菌巾浸湿后立即加盖无菌巾E、胃肠切开前垫好纱垫22、下列物品与所选用的消毒灭菌方法对应不妥的是A、耐热的玻璃器材：干热灭菌法B、皮肤消毒：80％乙醇溶液擦拭C、不耐热诊疗器械：2％戊二醛D、伤口清洗：5％过氧化氢E、物品表面：0.4％过氧乙酸23、口腔科的牙钻结构复杂，且经常接触破损的黏膜，常有血液污染。
消毒与灭菌
消毒与灭菌清洁、消毒、灭菌是预防和控制医院感染的一个重要环节。
它包括医院病室内外环境的清洁、消毒、诊疗用具、器械、药物的消毒、灭菌，以及接触传染病患者的消毒隔离和终末消毒等措施。
一、概念（一）消毒是指杀灭或清除传播媒介上的病原微生物，使之达到无害化的处理。
根据有无已知的传染源可分预防性消毒和疫源性消毒；根据消毒的时间可分为随时消毒和终末消毒。
（二）灭菌是指杀灭或清除传播媒介上的所有微生物（包括芽胞），使之达到无菌程度。
经过灭菌的物品称“无菌物品”。
用于需进入人体内部，包括进入血液、组织、体腔的医用器材，如手术器械、注射用具、一切置入体腔的引流管等，要求绝对无菌。
消毒与灭菌是两个不同的要领。
灭菌可包括消毒，而消毒却不能代替灭菌。
消毒多用于卫生防疫方面，灭菌则主要用于医疗护理。
二、消毒、灭菌的原则（一）明确消毒的主要对象应具体分析引起感染的途径、涉及的媒介物及病原微生物的种类，有针对性地使用消毒剂。
（二）采取适当的消毒方法根据消毒对象选择简便、有效、不损坏物品、来源丰富、价格适中的消毒方法。
医院诊疗器械按污染后可造成的危害程度和在人体接触部位不同分为三类：1．高度危险的器材穿过皮肤、粘膜而进入无菌的组织或器官内部，或与破损的皮肤粘膜密切接触的器材，如手术器械、注射器、心脏起搏器等。
必须选用高效消毒法（灭菌）。
2．中度危险的器材仅与皮肤、粘膜密切接触，而不进入无菌组织内，如内窥镜、体温计、氧气管、呼吸机及所属器械、麻醉器械等。
应选用中效消毒法，杀灭除芽胞以外的各种微生物。
3．低度危险器材和物品不进入人体组织，不接触粘膜，仅直接或间接地与健康无损的皮肤接触，如果没有足够数量的病原微生物污染，一般并无危害，如口罩、衣被、药杯等，应选用低效消毒法或只作一般卫生处理。
只要求去除一般细菌繁殖体和亲脂病毒。
（三）控制影响消毒效果的因素许多因素会影响消毒剂的作用，而且各种消毒剂对这些因素的敏感性差异很大。
1．微生物的种类不同类型的病原微生物对消毒剂抵抗力不同，因此，进行消毒时必须区别对待。
第四章消毒灭菌
第四章消毒灭菌1、何谓消毒？何谓灭菌？消毒：是指杀灭或清除传播媒介上的病原微生物，使其达到无害化的处理。
但不能杀死细菌芽孢。
灭菌：是指杀灭或清除传播媒介上的一切微生物(包括细菌芽孢)的处理。
2、消毒灭菌的原则是什么？（1）进入人体组织或无菌器官的医疗用品必须灭菌；接触完整皮肤的器械和用品必须消毒，接触完整黏膜的器械和用品必须高水平消毒。
（2）根据物品性能可使用物理或化学方法消毒灭菌，首选物理方法。
（3）使用后的医疗器械应先冲洗，然后消毒或灭菌。
（4）使用中的消毒剂必须保持其有效浓度，并定期检测消毒效果。
3、什么是斯伯尔丁分类法？答：据医疗器械污染后使用所致感染的危险性大小及在患者使用之间的消毒或灭菌要求，将医疗器械分三类：（1）高度危险物品：定义：进入人体无菌组织、器官、脉管系统，或有无菌体液从中流过的物品或接触破损皮肤、破损黏膜的物品，一旦被微生物污染，具有极高感染风险，如手术器械、穿剌针、腹腔镜、活检钳、心脏导管、植入物等。
要求：一定要灭菌！灭菌方法：压力蒸汽(首选)，环氧乙烷(E0)，等离子体灭菌(HP-Plasma)。
（2）中度危险物品：定义：与完整黏膜相接触，而不进入人体无菌组织、器官和血流，也不接触破损皮肤、破损黏膜的物品，如胃肠道内镜、气管镜、喉镜、肛表、口表、呼吸机管道、麻醉机管道、压舌板、肛门直肠压力测量导管等。
要求:高水平消毒；消毒方法：2%戊二醛、含氯消毒剂、碘伏、75%酒精。
（3）低度危险物品：定义：与完整皮肤接触而不与黏膜接触的器材，如听诊器、血压计袖带等；病床围栏、床面以及床头柜、被褥；墙面、地面等。
要求：中、低水平消毒；消毒方法：洁洗，机械除菌。
总之，应根据物品污染后的危险程度选择消毒灭菌方法。
4、什么是高水平消毒?高水平消毒是指杀灭一切细菌繁殖体包括分枝杆菌、病毒、真菌及其孢子和绝大多数细菌芽孢。
达到高水平消毒常用的方法包括采用含氯制剂、二氧化氯、邻来二甲醛、过氧乙酸、过氧化氢、臭氧、碘酊等以及能达到灭菌效果的化学消毒剂在规定的条件下，以合适的浓度和有效的作用时间进行消毒的方法。
消毒与灭菌ppt课件
红外线
红外线辐射是一种0.77～1000微米波长的电磁波,有 较好的热效应,尤以1～10微米波长的热效应最强。 红外线由红外线灯泡产生,不需要经空气传导，所以 加热速度快，但热效应只能在照射到的表面产生，因 此不能使一个物体的前后左右均匀加热。 红外线的杀菌作用与干热相似，利用红外线烤箱灭菌 的所需温度和时间亦同于干烤。 人受红外线照射较长会感觉眼睛疲劳及头疼；长期照 射会造成眼内损伤。因此，工作人至少应戴能防红外 线伤害的防护镜。
输液器等） －－不能用于人体的消毒。
3、微波：波长10-1~10-9m或更短的电磁波。 －－常用于药品和食品灭菌。 －－微波长期照射可引起眼睛的晶状混浊、睾丸损伤和神经功
能紊乱等全身性反应
三、超声波杀菌法
不被人耳感受的＞20千Hz/秒的声波，称为超 声波。 可使细菌细胞裂解而死亡，但往往有残存的 活细胞。对G-菌效果最好，葡萄球菌最差。 主要用于粉碎细胞，提取其中的化学成分。
四、 滤过除菌法
将液体或空气通过含有微细小孔的滤器， 只允许小于孔径的物体如液体和空气通过， 大于孔径的的物体不能通过。 主要用于一些不耐热的血清、毒素、抗生 素、药液、空气等除菌。一般不能除去病毒、 支原体和细菌的L型。
滤器的种类
滤膜滤器：由硝基纤维素制成薄膜，装于滤器上，其 孔径大小不一，常用于除菌的为0.22um。硝基纤维 素的优点是本身不带电荷，故当液体滤过后，其中有 效成分丧失较少。 蔡氏滤器（Seitz）：是用金属制成，中间夹石棉滤板， 有石棉K、EK、EK-S三种，常用EK号除菌。 玻璃滤器：是用玻璃细砂加热压成小碟，嵌于玻璃漏 斗中一般为G1、G2、G3、G4、G5、G6六种，G5、 G6可阻止细菌通过。 实验室等处应用的超净工作台，就是利用过滤除菌的 原理去除进入工作台空气中的细菌。
消毒与灭菌
上,可使被处理物品中的芽胞、繁殖体全部
被杀灭,即达到灭菌目的。 适用于含糖、血清等不耐高温的营养培 养基的灭菌,或用于无高压蒸汽灭菌器而物 品又必须灭菌时。
2.紫外线( ultraviolet ray,U)杀菌法
波长200-300mm的紫外线(包括日光中紫
外线)有杀菌作用,其中波长265-266m作用
下,温度可达121.3℃,维持15-20分钟,可达 到灭菌的目的。
适用于金属器械、敷料、手术衣、生理
盐水、普通培养基等耐高温、耐湿物品的
灭菌,不适用于油类及粉剂。现在还有一种
新型的预真空压力蒸汽灭菌器,灭菌速度快,
省时节能,效果更好。
2)煮沸法:在一个大气压(101.325kPa)下,
水煮沸(温度100℃)经5分钟可杀死细菌繁
消毒效果,故消毒皮肤、器械和衣服时,需先
洗净这些污染物后再消毒； 对痰液、粪便等的消毒,宜选择受有机物影 响小的消毒剂,如漂白粉、生石灰、酚类等。
(4)其他影响
其他影响消毒效果的因素还有温度、湿度、 酸碱度等,如戊二醛溶液中加入碳酸氢钠后 才有杀菌作用。
小结
消毒是指杀灭物体上病原微生物的方法,不一定能杀死非病原微 生物或细菌芽胞。用于消毒的化学制剂称为消毒剂。灭菌是指杀 灭物体上所有微生物的方法,包括杀灭细菌芽胞在内的所有病原微 生物和非病原微生物。无菌是指物体上无活的微生物存在。防腐 是指防止或抑制微生物生长繁殖的方法。防腐不导致微生物死亡, 用于防腐的化学制剂称为防腐剂。无菌操作防止活的微生物侵入 机体或污染物品的操作方法称为无菌操作。无菌操作所用器具和 材料必须先经灭菌处理。物理消毒灭菌方法是利用热力射线、超 声波滤过、干燥、低温等物理因素进行消毒灭菌的方法。焚烧是 一种简单、彻底的灭菌方法,高压蒸汽灭菌法是医疗中最常用、最 有效的灭菌方法。煮沸法是一种简便、实用的消毒方法。紫外线 杀菌法能破坏DNA而导致微生物的变异或死亡。但紫外线穿透力弱, 玻璃、纸张、灰尘、蒸汽等均能阻挡紫外线,所以只适用空气消毒 或不耐热物品表面消毒。紫外线对入体皮肤、眼睛有损伤作用,使 用时应注意防护。化学消毒灭菌法只能外用或用于环境消毒。
消毒与灭菌
• ⑵对受到真菌、亲水病毒、螺旋体、支原 体、衣原体等病原微生物污染的物品，应 选用中水平以上的消毒方法。 • ⑶对受到一般细菌和亲脂病毒等污染的物 品，采用达到中水平或低水平消毒效果的 方法。
根据物品上污染微生物的种类、数 量和感染风险选择消毒、灭菌的方 法
医院常用的消毒、灭菌方法
• ⑴灭菌方法：包括热力灭菌等物理灭菌方法，以及使用环 氧乙烷、过氧化氢、过氧乙酸等化学灭菌剂的低温灭菌方 法等。 • ⑵高水平消毒方法：包括紫外线等物理消毒法和使用含氯 制剂、过氧乙酸、过氧化氢等化学消毒剂的消毒方法。 • ⑶中水平消毒方法：包括使用碘类消毒剂（碘伏、碘酊、 氯己定碘等）、醇类、醇类和氯己定的复方，醇类和季铵 盐类化合物的复方、酚类等消毒剂。 • ⑷低水平消毒方法：包括使用季铵盐类（苯扎溴铵等）、 双胍类（氯己定）等消毒剂的消毒方法。
干热灭菌法
杀菌机制：使菌体蛋白质变性；电解质浓
缩。
穿透力与杀菌作用不及湿热，所需温度高
(>160℃)，时间长(1～3h)。
适用于耐热忌湿物品。
常用的干热消毒灭菌方法
• • • • • 热空气加热 红外线照射 强光加热 烧灼 焚烧等
干热温度通常要180℃以上方可达到灭菌 焚烧是最彻底的方法之一，可以直接将 处理对象变为无害的灰烬， 多用于处理医院或疫源地的垃圾。
消毒与灭菌
基本概念
消毒
• 指杀灭或清除传播媒 介上病原微生物,使其 达到无害化的处理
灭菌
• 指杀灭或清除传播媒 介上一切微生物的处 理。
消毒与灭菌的关系
• 消毒处理不一定都能达到灭菌的要求，而 灭菌一定可达到消毒的目的。
消毒与灭菌方法
物理消毒与灭菌法ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
口腔执业医师-综合笔试-医学微生物学-第四单元消毒与灭菌
口腔执业医师-综合笔试-医学微生物学-第四单元消毒与灭菌[单选题]1.在物理灭菌方法中，为首选的是A.紫外线消毒B.辐射消毒C.酒精消毒D.高压消毒E.热力消毒参（江南博哥）考答案：E参考解析：热力灭菌效果可靠又简单，为首选的灭菌方法。
掌握“消毒与灭菌”知识点。
[单选题]3.湿热灭菌的优越性是A.能够损伤生物的核酸及酶类的物理灭菌方法B.穿透力强、灭菌可靠、不是物品升温C.使细菌DNA链上相邻的嘧啶碱基形成嘧啶二聚体，导致细菌死亡或突变D.适用于一次性塑料制品E.穿透力强、使菌体吸收水分易变性凝固以及蒸汽具有潜在的热能正确答案：E参考解析：湿热灭菌的优越性在于穿透力强，使菌体吸收水分易变性凝固以及蒸汽具有潜在的热能。
掌握“消毒与灭菌”知识点。
[单选题]4.下列哪项方法属于湿热灭菌法A.焚烧法B.烧灼法C.巴氏消毒法D.紫外线消毒法E.酒精消毒法正确答案：C参考解析：湿热灭菌法包括巴氏消毒法、煮沸法和高压蒸汽灭菌法。
掌握“消毒与灭菌”知识点。
[单选题]5.高压蒸汽灭菌法通常在103.4kPa(1.05kg/cm2)的压力下维持时间为A.1～5分钟B.6～10分钟C.15～20分钟D.30～40分钟E.55～60分钟正确答案：C参考解析：高压蒸汽灭菌法：可杀灭包括芽胞在内的所有微生物，是灭菌效果最好、应用最广的灭菌方法。
方法是将需灭菌的物品放在高压锅内，加热时蒸汽不外溢，高压锅内温度随着蒸汽压的增加而升高。
在103.4kPa（1.05kg/cm2）蒸汽压下，温度达到121.3℃，维持15～20分钟。
适用于普通培养基、生理盐水、手术器械、玻璃容器及注射器、敷料等物品的灭菌。
掌握“消毒与灭菌”知识点。
[单选题]6.关于高压蒸气灭菌法，不正确的描述是A.灭菌效果最可靠B.适用于对耐高温和耐湿物品的灭菌C.可杀灭包括细菌芽胞在内的所有微生物D.通常灭菌压力为2.05kg/cm2E.通常灭菌温度为121.3℃正确答案：D参考解析：高压蒸汽灭菌法可杀灭包括芽胞在内的所有微生物，是灭菌效果最好、应用最广的灭菌方法。
消毒与灭菌
一、消毒、灭菌、防腐、化疗、无菌、无菌技术等基本概念的含义是什么？消毒：指杀死病原微生物，但不包括芽胞。
灭菌：是指杀灭物体上所有微生物，包括繁殖体和芽胞。
防腐：是指防止或抑制微生物生长繁殖。
消毒剂：高浓度防腐剂：低浓度化疗：化疗即化学治疗，是利用对病原菌具高度毒力而对其宿主基本无毒的化学物质来抑制宿主体内病原微生物的生长繁殖，以达到治疗该宿主所染疾病的方法。
无菌：物品中没有活的微生物存在。
无菌技术：是指在进行外科手术或分离、转种及培养时防止其他微生物污染实验材料的操作方法。
无菌操作所用的器具和材料，都必须先经灭菌处理。
二、物理消毒灭菌的常用方法有那些？热力灭菌法：高温、低温、干燥辐射杀菌法：电离、非电离物理学方法滤过除菌法超声波杀菌法等离子体渗透压（一）、热力灭菌法分类：干热灭菌法湿热灭菌法1.干热灭菌法A 焚烧：B 烧灼：C 干烤：160°～180℃，2hD 红外线灭菌：2.湿热灭菌法A 巴氏消毒法：61.1-62.8℃，30 min71.7℃，15-30secB 煮沸消毒法：100℃，5min -10minC 流通蒸气消毒法：100℃，15-30minD 间歇蒸汽灭菌法：100℃，15-30min，37℃过夜（3次）E 高压蒸气灭菌法:15磅（121.3℃），15-30min湿热比干热灭菌好的原因：1 细菌蛋白质在有水的情况下易于凝固变性2 湿热穿透力强3 湿热蒸气有潜热存在，水蒸气凝固成水释放潜热，迅速提高被灭菌物体的温度（二）、光线与射线的消毒作用1 日光与紫外线机理：损坏DNA构型->细菌死亡或变异特点：穿透力弱2 电离辐射：包括X射线和γ射线机制：干扰DNA的合成；破坏细胞膜；产生过氧化氢等特点：穿透力强，不升高温度（三）、滤过除菌法用滤菌器除去液体及空气中的细菌用于不耐热的血清、毒素、抗生素（四）、超声波的消毒作用可裂解细菌，尤其对G+更敏感主要用于粉碎细胞，提取细胞组分或制备抗原等（五）等离子体法对微生物有良好的杀灭作用。
4 消毒与灭菌
6 、 防 腐 (antisepsis) 指 阻 止 或 抑 制 微 生 物 生 长繁殖的方法。用于防腐的化学物质称防腐剂。 7、无菌(asepsis) 指没有活的微生物的状态。 采取防止或杜绝任何微生物进入动物机体或其 他物体的方法，称为无菌法。以无菌法进行的 操作称为无菌技术或无菌操作。以无菌技术剖 腹产取出分娩胎儿，并在无菌条件下饲喂的动 物，称无菌动物。 8、SPF动物：以无菌方法取出，饲养在相对封 闭的环境中，动物明显健康，无规定疫病病原。
作用时间
种类
环境
有机物
温度
酸碱度
西南民族大学
1、消毒剂的性质、浓度和作用时间
绝大多数消毒剂在高浓度时杀菌作用大， 例外的有70%乙醇或50%～70%异丙醇的消毒效 果最好。
消毒剂在一定浓度下，对细菌的作用时间 愈长，消毒效果也愈强。
西南民族大学
2、微生物的种类与数量
同一消毒剂对不同种类和处于不同生长期 的微生物的杀菌效果不同；微生物的数量越大， 所需消毒的时间就越长。
西南民族大学
一、消毒剂的种类及其应用
1、消毒剂的条件
种类很多，其杀菌作用亦不相同，一般可 根据用途与消毒剂特点选择使用。最理想的消 毒剂应是杀菌力强、价格低、无腐蚀性、能长 期保存、对动物无毒性或毒性较小、无残留或 对环境无污染的化学药物。
西南民族大学
2、消毒剂的杀菌机制
复杂而多样，根据对菌体的作用大致可分为: (1)使菌体蛋白质变性或凝固，例如酚类(高浓度)、
西南民族大学
4、灭菌(sterlization)指杀灭物体中所有病原 微生物和非病原微生物及其芽孢、霉菌孢子的 方法。 5、消毒(disinfection)指杀灭物体中的病原微 生物的方法。消毒只要求达到消除传染性的目 的，而对非病原微生物及其芽孢、孢子并不严 格要求全部杀死。用于消毒的化学物质称消毒 剂。
发酵工程第四章工业发酵灭菌与消毒
•
达到灭菌温度（120 ℃）时，开始计算维持时间 （保温时间）。生产上采用30min 采用快速冷却方式，减少营养成份的损失
•
（1）连续灭菌
培养基在发酵罐外经过一套灭菌设备连续的加热灭菌,冷却后送入已灭菌 的发酵罐内的工艺过程.
• 优点
• • • • • • 保留较多的营养质量 容易放大，较易自动控制； 糖受蒸汽的影响较少； 缩短灭菌周期； 在某些情况下，可使发酵罐的腐蚀减少； 发酵罐利用率高，蒸汽负荷均匀。
第四章工业发酵灭菌
第一节灭菌的概念和必要性
灭菌：是指用物理或化学因子杀灭有生活 能力的细菌营养体和芽孢或孢子的方法。 消毒：用物理或化学方法消除物料、容器、 器皿内外的病原微生物的措施。 在工业中一般都笼统地称为杀菌或灭菌。
工程上灭菌：是指使用物理或化学方法将培养基中的 杂菌的细胞和孢子杀灭至不影响发酵为限。 灭菌是为了保证进行纯培养（纯种）发酵。
如有杂菌，可引起以下的后果： ①生产菌和杂菌同时在培养基中生长，结果丧失了生 产能力。 ②杂菌的生长速度有时比生产菌生长得快，结果使反 应器中以杂菌为主。 ③杂菌会污染最终产品。 ④杂菌所产生的物质，使提取产物时发生困难。 ⑤杂菌降解所需要的产物。 ⑥发酵如污染了噬菌体，可使生产菌株发生溶菌现象。
发酵的一般流程
培养基配制 种子扩大培养 培养基灭菌 空气除菌 发酵设备
发酵生产
下游处理
工业上采取的措施
• • • • 培养基灭菌 设备灭菌 好氧培养中空气灭菌 培养过程中加入的物料要 灭菌 • 使用无污染的纯种 • 设备严密，罐内保持正压
第二节 灭菌的方法
1. 加热灭菌 火焰灭菌、干热灭菌、湿热灭菌 2. 射线灭菌 紫外线、阴极射线、X射线、γ射线 3. 化学药剂灭菌 0.%~0.25%KMnO4溶液、0.5%~1%漂白粉溶液、 75%酒精、0.25%新洁尔灭、10%甲醛溶液、苯 酚溶液、来苏尔 4.臭氧灭菌 5.过滤除菌
医学微生物学第四章 消毒与灭菌
的信，赞扬巴斯德对他的启发，帮助了改革了外
科学，拯救了无数生命。 “尊敬的先生：请您允许我恭恭敬敬地向您致 谢，感谢您指出病原菌是术后化脓的真正原因， 使我找到了预防方法……人类已经享受到您的成
就，这确实是很令人钦佩的…….”
一、消毒与灭菌的重要性
“消毒与灭菌”是临床医学、预防医 学、护理学初学者必须学习的一课，也是 最重要的一课。
二、消毒与灭菌的概念 2、消毒（disinfection）
杀死物体上病原微生物，但不一定能杀 死含芽胞的细菌和非病原微生物。
二、消毒与灭菌的概念 3、防腐（antisepsis） 防止或抑制体外细菌生长繁殖 4、无菌（asepsis） 物品中没有活的微生物存在
二、消毒与灭菌的概念 5、无菌操作（antiseptic technique）
通蒸气消毒器，加热15～30min→37 ℃培养
过夜。如此3次，可达到灭菌目的。
主要用于不耐高热的含糖、牛奶等培养 基的消毒。
三、物理灭菌方法 巴氏消毒法（pasteurization）：加热
72℃，15～30s，可杀死物品中的无芽胞病 原菌，并保持食品的风味和营养价值。主
要用于酒类、牛乳、果汁等消毒。
消毒与灭菌
一、消毒与灭菌的重要性 二、消毒与灭菌的概念 三、物理灭菌方法 四、化学消毒法
一、消毒与灭菌的重要性
早在一百多年前，即在巴斯德时代之 前，医院被看成是病人临终的场所，在病 人住院之前，几乎没有一个不是先向亲友 作最后告别的。
一、消毒与灭菌的重要性
外科医院：麻醉、止血和抗感染三大 技术尚未建立。为了拯救生命，医生只能 不顾病人的极大痛苦去切割肢体；用炽热 的铁器烙印切口止血；再缠 上“脏”布或让血肉模糊的伤 口直接暴露在空气中。
消毒与灭菌 ppt课件
（三） 湿热灭菌技术
3高压蒸汽灭菌法 ▪ 由于蒸汽有很强的穿透能力，湿热灭菌
对耐热芽孢杆菌来说，温度升高10 ℃时， 灭菌速度常数可增加8～10倍，对营养细 胞更高。
▪ 蒸汽来源方便，价格低廉，灭菌效果可 靠，是目前最为常用的灭菌方法。因此 实验室、工厂化生产中广泛采用湿热灭 菌。湿热灭菌有经济快速等特点
• 主要针对必须保持干燥的实验器具或材料 （培养皿、接种针、固定化细胞用的载体 材料等）。
（二）火焰灭菌法
利用火焰直接杀死微生物的灭菌法称 为火焰灭菌法。该法方法对设备要求 低，操作简单，灭菌彻底，但使用范 围有限，仅适用于接种针、玻璃棒、 三角瓶口等的灭菌。
（三） 湿热灭菌技术P11
▪ 湿热蒸汽比干热空气穿透力大，易使菌 体蛋白变性而使微生物死亡。利用饱和 蒸汽进行灭菌的方法称为湿热灭菌法。
• 臭氧：原理（常温常压下）O3=O2+O(单个氧原子）。特点： 不存在任何有毒残留物，称为无污染消毒剂。适用：环境消 毒
• 去垢剂：新洁尔灭 （苯扎溴铵、溴化苄烷 铵）
新洁尔灭是表面活性剂类洁净消毒剂。它 在水溶液中以阳离子形式与菌体表面结合， 引起菌体外膜损伤和蛋白变性。10 min能 杀死营养细胞，但对细菌芽孢几乎没有杀 灭作用。一般用于器具和生产环境的消毒， 不能与合成洗涤剂合用，不能接触铝制品。
消毒不一定能达到杀菌的要求，而灭菌能 达到消毒的要求。
思考：消毒与灭菌的概念及区别
第一节 化学灭菌方法P19
• 原理：某些化学药剂能与微生物细胞物质 发生反应而具有杀菌作用。如甲醛、氯 （或次氯酸钠）、高锰酸钾、环氧乙烷、 季铵盐（如新洁尔灭）等。
• 适用范围：化学药剂适于接种室、培养室 等环境的灭菌，接种操作前小型器具的灭 菌等。
消毒与灭菌
一、消毒与灭菌消毒与灭菌在发酵工业中均广泛应用。
1、消毒：。
是指用物理或化学的方法杀死物体上的病原微生物，一般只能杀死营养细胞而不能杀死细菌芽孢。
2、灭菌：是指用物理或化学的方法杀灭或除掉传播媒介上的所有微生物（包括芽孢），使之达到无菌程度。
在生产上习惯叫做消毒但它与消毒是的严格意义上的区别。
二、灭菌方法灭菌的方法主要有：干热灭菌法、湿热灭菌法、化学药品灭菌法、过滤除菌法、过滤除菌法。
根据灭菌的对象和要求选用不同的方法。
1 干热灭菌法干热灭菌法是指在干燥高温条件下，将微生物杀死。
干热对微生物有氧化、蛋白质变性和电解质浓缩引起中毒的作用，其中氧化作用是主要的。
干热灭菌必须高温，工业生产中采用的条件是摄氏160℃，1h。
主要使用于需要保持干燥的器械、容器的灭菌。
生产实例：在接种操作和镜检涂片时用的灼烧灭菌法就是最简单的干热灭菌法，在投罐前的空消（125℃、30min)也属于干热灭菌，所以在空消之前必须先把PH、溶氧电极拔掉，否则会大大削减其使用寿命。
湿热灭菌法湿热灭菌是借助蒸汽释放的热能和水的参与，能使微生物细胞中蛋白质、酶、核酸分子内部的化学键（特别是氢键）受破坏，特别是蛋白质发生不可逆的凝固性变性，使微生物死亡。
蒸汽在冷凝时释放出大量潜热，具有强大的穿透力，尤其适用于大量培养基及发酵设备的灭菌。
温热灭菌与干热灭菌相比具有以下特点：(1)湿热灭菌时，菌体蛋白质吸收热量容易变性凝固；(2)湿热的穿透力比干热大（如表1所示）(3)蒸汽冷凝时放出大量潜热，温度上升快；(4)蒸汽制取简便、成本低、数量大，适于工业生产。
高温灭菌也会给培养基带来一些不利影响，所以在生产中就要求我们在实消时一定要严格按工艺要求来控制实消的温度和时间。
超温超时对培养基的破坏主要有两种情况：一造成培养基成分相互作用；二造成热稳定性差的原材料严重破坏。
前者在降低培养基质量的同时还会引起培养基褐变、沉淀，褐变反应包括类黑色素褐变（主要是氨基化合物与羰基化合物在加热条件下生成棕红色的色素），焦糖化褐变（糖在没有含氨基化合物存在下，加热到其熔点逐步形成焦糖），糖类破坏后易和有机氮源结合，产生氨基糖，对微生物产生一定的毒性，严重时将抑制微生物的生长发育破坏整个发酵所以在一、二步种子罐时，一旦发现料液发黑会发现其菌量很少，产糖或产酸会大受抑制甚至造成代谢停滞，严重时不得不倒罐。
消毒与灭菌—消毒与灭菌(动物微生物技术课件)
影响消毒剂作用的因素
1.消毒剂的性质、浓度和作用时间 ； 2.微生物的种类与数量 ； 3.温度：温度升高可增强消毒剂的杀菌效果。 4.酸碱度剂作用的因素 5.有机物：环境中有机物，可降低消毒剂效果。 6.药物颉抗：两种消毒剂合用时，有的能相互 颉抗。如阴离子剂肥皂与阳离子剂新洁尔灭。 7. 其他因素：湿度、穿透力、表面张力等。
常用消毒剂
（4）改变核酸功能：如染料、烷化剂等。
2. 消毒剂的应用
主要用于体表、器械、排泄物和环境的消毒。 选择消毒剂的原则：杀菌力和穿透力强、奏效快；易溶 于水，使用方便，价格低；性质稳定，不易分解，便于保存； 对机体或环境无毒性或毒性较小，对消毒物品无腐蚀性，无 残留，对环境无污染；杀菌力不受或少受有机物存在的影响。
剂特点选择使用。 理想的消毒剂：杀菌力强、无腐蚀性、能长
期保存、对动物毒性很小、无残留污染、价格低 等。
1.消毒剂的分类
（1）使菌体蛋白质变性：如酚类、醇类、重金属 盐类、酸碱类、醛类；
（2）损伤胞浆膜：如酚类(低浓度)、表面活性剂、 醇类等脂溶剂；
（3）干扰细菌的酶系统和代谢：如氧化剂、重金 属盐类(低度)；
动物微生物应用技术
消毒与灭菌概述
消毒
应用物理或化学方法杀灭物体中的病原微生物， 而对非病原微生物及其芽孢并不要求全部杀死的方法 称为消毒；具有消毒作用的药物称为消毒剂
灭菌
应用物理或化学方法杀灭物体中所有的病原微 生物、非病原微生物和芽胞的方法，称为灭菌
消毒剂的种类及其应用 消毒剂的种类很多，一般可根据用途与消毒