TGEV
猪传染性胃肠炎诊断与治疗
猪传染性胃肠炎诊断与治疗猪传染性胃肠炎(Transmissible Gastroenteritis, TGE)是由猪传染性胃肠炎冠状病毒(Transmissible Gastroenteritis Coronavirus, TGEV)引起的一种急性、高度传染的胃肠道传染病,主要在幼年猪中发病。
该病主要通过飞沫、粪-口传播,人工装运等传播途径。
病毒对猪的肠道上皮细胞有强烈的亲和力,感染后引起肠道上皮细胞的坏死和脱落,导致猪出现腹泻、呕吐、食欲不振、消瘦等症状,对猪的免疫系统造成严重损害。
一、猪传染性胃肠炎的诊断猪传染性胃肠炎是一种非常严重的传染病,对猪场的生产经营造成了很大的危害。
及时准确地诊断猪传染性胃肠炎,对于控制该病的传播和治疗防治具有非常重要的意义。
1. 临床表现猪传染性胃肠炎主要发生在出生后10天到3个月的幼猪中,症状主要包括剧烈的腹泻、呕吐、食欲不振、发热、消瘦等。
腹泻是本病的主要临床表现,猪的大便呈稀水状,颜色较浅,有时会带有泡沫,味道恶臭。
患病猪只能呈躺姿,丧失食欲,精神不振,消瘦,有时伴有急剧的抽搐,病情严重者可导致死亡。
2. 实验室检查病理学检查:病理学检查是诊断猪传染性胃肠炎最重要的手段之一。
对遗体猪进行尸检,可以发现胃黏膜充血、水肿,粘膜呈浅红色,有时可见到糜烂灶和溃疡形成,肠粘膜破坏明显。
病毒学检测:采用RT-PCR、ELISA等方法检测猪传染性胃肠炎病毒核酸或抗体,可作为病因学诊断的重要依据。
二、猪传染性胃肠炎的治疗目前,对于猪传染性胃肠炎的治疗主要是对症治疗和预防措施。
1. 对症治疗(1)保温:新生仔猪生后应及时处理分娩物、给予温暖的环境,保证温暖的饮水和饲料。
(2)对抗菌素治疗:针对猪传染性胃肠炎引起的肠道感染,可选用氨苄西林、环丙沙星等广谱抗生素进行治疗。
(3)抗腹泻药物:如蒙脱石、滑石、止泻药等,可以有效改善猪的腹泻症状,保持水电解质平衡。
2. 预防措施(1)消毒:对猪场环境、设施、用具进行定期彻底的消毒,防止病毒的传播。
猪传染性胃肠炎的诊疗报告
猪传染性胃肠炎的诊疗报告一、临床症状二、病原学检测猪传染性胃肠炎主要由猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)引起。
诊断该疾病可通过病毒的分离和鉴定。
采集病猪的粪便、消化道内容物或者肠黏膜组织,经过样品处理后,通过病毒分离培养技术筛选出阳性样本。
然后利用病毒特异性抗血清或分子生物学方法进行进一步的鉴定。
三、病理学检查四、诊断方法诊断猪传染性胃肠炎主要根据临床症状、病原学检测和病理学检查结果进行综合判断。
在确认大规模猪群患病前,需先从猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、沙门菌病等猪胃肠炎常见病进行排除。
五、治疗方法目前,对猪传染性胃肠炎的治疗主要采取支持治疗和预防措施。
在临床症状出现时,应立即隔离患病猪,保持良好的环境卫生,加强饲养管理。
对于发病较重的猪,可适当补液、支持治疗,避免其他疾病的二次感染。
提高猪的抵抗力,可通过合理饲养和合理营养,增强猪的免疫力。
六、预防措施1.疫苗预防:可选用同种类疫苗接种和异种类疫苗接种两种方法进行预防。
同种类疫苗接种主要是利用同种病毒进行接种,促使猪产生特异性抗体。
异种类疫苗接种则是利用与病毒有交叉免疫原性的病毒进行接种,也可起到一定的预防效果。
2.日常管理措施:加强饲养管理和环境卫生,确保猪群的生活环境干净整洁。
避免混养与传播,定期检测病毒感染情况,及早发现病例并进行隔离处理。
七、总结猪传染性胃肠炎是一种由病毒引起的猪的胃肠炎症,常见于全球范围内。
诊断猪传染性胃肠炎需通过临床症状、病原学检测和病理学检查进行综合判断。
目前尚无特效药物治疗,主要采取支持治疗和预防措施,包括隔离患病猪、保持环境卫生、疫苗预防和日常管理措施等。
通过综合预防措施的实施,可有效减少猪传染性胃肠炎的发生和传播,保障猪的健康和生产业的稳定发展。
猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)对猪小肠黏膜上皮细胞活性的影响
I l e c f t e Tr ns is b e Ga t 0 nt r ts Vi u n nfu n e o h a m s i l s r e e ii r so Ac i ii s o wi nt s i a tv te fS ne I e tn lEpihe i lCel t la ls
增 殖 和凋 亡 的影 响 。将 猪 传 染 性 胃肠 炎 病 毒 接 种 于 体 外 培 养 猪 小 肠 黏 膜 上 皮 细 胞 2 、8和 7 44 2h后 , 测 细 检 胞 的 AT P酶 ( a 一 _ TP酶 、 a 一 一 P酶 ) N K_ A C Mg AT 活性 , T 法 检 测 细 胞 增 殖 能 力 , MT 流式 细胞 仪 测 定 细 胞
仝 钢 Байду номын сангаас 彦 明 , 青 海 , 津 津 张 唐 王
( 西北 农 林 科 技 大 学 动 物 医学 院 , 西 杨 凌 陕 720) 1 1 0
摘
要 : 察 猪 传 染 性 胃肠 炎 病 毒 对 猪 小 肠 黏 膜 上 皮 细 胞 Na 。 。 P 酶 、 a 一 A ' 活 性 , 胞 观 - K_ AT C Mg TP酶 细
浅析常见猪病毒性腹泻疾病的诊治
浅析常见猪病毒性腹泻疾病的诊治
猪病毒性腹泻是一种常见的猪病,也是猪场养殖中的主要疾病之一。
病原体主要是猪传染性腹泻病毒(PEDV)和猪流行性腹泻病毒(TGEV),临床表现为猪只呕吐、腹泻、腹痛等症状,严重时可导致猪只死亡。
诊断常见症状
病猪的主要症状是腹泻,粪便呈灰白色、水样状,有较明显的恶臭味。
同时,病猪还会出现呕吐、食欲下降等。
在体温方面,病猪的体温一般不会很高,通常不超过40摄氏度。
了解病原体
PEDV和TGEV均属于冠状病毒,都是通过口腔-消化道途径传播。
这两种病毒的病情也比较相似,都会导致猪只腹泻、呕吐等症状。
但是,PEDV主要感染猪只肠道上段,而TGEV 则主要感染肠道下段。
治疗方案
猪病毒性腹泻的治疗主要包括对症治疗和预防措施两个方面。
1. 对症治疗
这种治疗方式主要是针对病猪的症状进行治疗。
例如,采用药物控制病猪腹泻和呕吐等症状。
同时,也可以采用营养调理、保护消化系统等方法进行治疗。
对于猪只的营养方面,应该给予高能高营养、易消化、易吸收的食物,例如鸡蛋、牛奶、米粥等。
2. 预防措施
由于PEDV和TGEV都是通过口腔-消化道途径传播的,因此在日常养殖中应该注重卫生管理。
例如,加强消毒、减少猪只之间的接触、用药前进行病毒检测等。
此外,也可以使用疫苗预防猪病毒性腹泻的发生。
综上所述,针对猪病毒性腹泻的治疗应该综合考虑病猪的症状和病原体特点。
通过对症治疗和预防措施的综合应用,可以有效地预防和控制猪病毒性腹泻的发生。
猪传染性胃肠炎病毒疫苗研究进展
猪传染性胃肠炎疫苗研究进展摘要: 猪传染性胃肠炎是由猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)引起猪的一种高度接触性肠道疾病,可导致仔猪发生严重的呕吐、腹泻与脱水,死亡率可达100%。
人们一直在研究TGEV的免疫控制技术,这期间大致经历了人工感染强毒、灭活苗、弱毒活疫苗和基因工程疫苗4个阶段。
随着对TGEV基因组结构及其功能上的认识不断深入,人们采用基因工程疫苗来预防TGE的研究越来越多。
现针对TGEV疫苗近年来研究的概况进行综述,分析其优点与不足,并对其未来的发展进行展望。
关键词: 猪传染性胃肠炎病毒;强毒苗;灭活疫苗;弱毒活疫苗;基因工程疫苗Abstract:Porcine transmissible gastroenteritis is a highly contagious, enteric disease of swine caused by transmissible gastroenteritis virus(TGEV). The disease is especially severe in baby pigs less than two weeks old, characterized by vomiting, severe diarrhea and nearly 100% mortality.People have been studying the immune control technology of TGEV, which has gone through the artificial infection of virulent, Inactivated vaccine, live attenuated vaccine and Genetic Engineering Vaccine . With the deeper understanding of TGEV Genetic structure and function, people research the effect of Genetic Engineering Vaccine to prevent TGE more and more. The research progress of TGEV vaccine were reviewed in this article, its advantage, disadvantage and further development were also prospected.Key words: Transmissible gastroenteritis virus;Virulent vaccine;Inactivated vaccine;Attenuated live vaccine;Genetic engineering vaccine1前言猪传染性胃肠炎TGEV属于冠状病毒科(Coronaviridae)冠状病毒属(Coronavius)。
猪传染性胃肠炎( - 副本
与猪副伤寒 与猪瘟
预防措施
①晚秋、冬季和早春一定要做好猪舍的防寒保温工作,加厚保温垫料并勤 更换,必要时可给猪舍加温。 ②从外地进猪时,一定要隔离观察10~15天,无疫情方可进栏饲养。 ③严禁猫、狗等进入猪舍。 ④经常及时的打扫、清理猪舍粪水等,无疫情时每周用3%~4%氢氧化钠 溶液冲洗、消毒1~2次,后用清水冲洗1~2次,或喷50%百毒杀3000倍液等 消毒。 ⑤发生疫情时,每天喷洒1次0.2%过氧乙酸溶液、1%~3%漂白粉溶液和 3000倍液博灭特等其中的任意一种。 ⑥必要时进行猪体消毒,可喷洒1%百毒杀600倍液、强力消毒王1000倍 液和过氧乙酸2000倍液等其中的任意一种。 ⑦怀孕母猪在产前25~30天,每头后耳穴注射猪传染性胃肠炎灭活苗3毫 升,仔猪可通过吃母乳获得被动免疫效果。 ⑧初生仔猪每头后耳穴注射0.5~1毫升本病毒灭活苗,10~15千克猪每头 注射2毫升,50千克以上猪每头注射3毫升,都能获主动免疫。 ⑨每头新生仔猪每头口服10毫升康复猪的抗凝血或高免血液,连用3天,有 很好防效。
与猪痢疾
均有精神沉郁,腹泻,脱水等 临床症状
与猪坏死性肠炎
均有精神沉郁,腹泻,脱水等 病原为坏死杆菌,急性病例多 临床症状 发生于4~12月龄间的猪,排 焦黑色粪便或血痢并突然死亡, 慢性病例常见于6~20周龄的 肥育猪,病死率较低,剖检可 见肠壁增厚,肠管变粗 均有精神沉郁,腹泻,脱水等 病原为沙门氏菌,多发生于 临床症状 2~4月龄仔猪,体温升高,粪 便中混有血液和假膜,剖检可 见,大肠壁增厚,黏膜有坏死。 可见耳根、胸前、腹下皮肤有 紫红色出血斑
一.病原
二.流行病学
三.症状
四.病理变化
)属于冠状病毒科 冠状病毒属。TGEV病毒粒子多呈圆形或椭 圆形,直径为80~120nm,有囊膜,其表面 有一层棒状纤突,长12~25nm。
TGEV和PEDV重组猪痘病毒活载体疫苗的效力及载体生物安全评价
TGEV和PEDV重组猪痘病毒活载体疫苗的效力及载体生物安全评价猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible egastroenteritis virus,TGEV)和猪流行性腹泻病毒(Porcine epidem diarrhea virus,PEDV)是引起猪病毒性腹泻的两种主要病原,猪病毒性腹泻病从2010年起我国各地猪场呈现爆发流行,对养猪业造成巨大的经济损失。
10日龄以内仔猪只要被感染,发病率为100%,死亡率极高。
然而,现有的商品化疫苗不能有效的预防上述两种疫病。
猪痘病毒(Swinepox virus,SPV)是痘病毒家族成员之一,目前市场上并没有商品化的猪痘活载体疫苗,是一种具有开发应用前景的活疫苗载体。
本研究旨在研发TGEV和PEDV新型重组猪痘病毒活载体疫苗,并对载体减毒致弱和生物安全性评价。
1.表达猪传染性胃肠炎截短的S蛋白的重组猪痘病毒的构建及免疫评价猪传染性胃肠炎病毒是一种冠状病毒,可以感染各年龄段猪,但是对哺乳期的新生仔猪最为敏感,死亡率高达100%。
本研究成功构建了表达猪传染性胃肠炎病毒保护性抗原S基因A位点的猪痘病毒活载体疫苗,希望能够用于防控猪传染性胃肠炎。
免疫接种小鼠和猪动物模型后,进行体液免疫和细胞免疫水平检测。
结果表明TGEV特异性抗体水平显著升高,细胞免疫中Th1型和Th2型细胞因子水平均有升高,中和抗体水平显著升高。
新生仔猪被动免疫保护实验结果显示,重组活载体疫苗rSPV-SA对新生仔猪保护率可达100%,未出现腹泻等临床病症。
这些结果表明,重组猪痘病毒活载体疫苗rSPV-SA对TGEV强毒株的攻击具有较好的免疫保护效果。
2.表达猪流行性腹泻的S1蛋白的重组猪痘病毒的构建及免疫评价猪流行性腹泻病毒(PEDV)是一种严重造成养殖猪场经济损失的病原。
尽管市场有商业化疫苗进行销售,但是市场应用推广并不好,猪场临床反映,现有的商品化PEDV疫苗效果不佳。
本研究构建了重组猪痘病毒rSPV-Sa株,该重组病毒成功的表达了 PEDV(SQ2014株)截短的S蛋白.通过免疫原性评测显示,该rSPV-Sa能够有效激活机体IgA产生,IgG和细胞因子水平的提高。
猪传染性胃肠炎病毒
猪传染性胃肠炎病毒猪传染性胃肠炎病毒(Transmissiblegastroenteritisvirusofswine)猪传染性胃肠炎(TGE)是猪的1种具有高度接触传染性的病毒性疾病。
临床特征为严重腹泻、呕吐和脱水,不同年龄和品种的猪都易感,但2周以内仔猪的病死率很高,5周以上的猪很少死亡。
其它动物包括实验动物均无感染性。
猪传染性胃肠炎病毒(Transmissiblegastroenteritisvirusofswine)猪传染性胃肠炎(TGE)是猪的1种具有高度接触传染性的病毒性疾病。
临床特征为严重腹泻、呕吐和脱水,不同年龄和品种的猪都易感,但2周以内仔猪的病死率很高,5周以上的猪很少死亡。
其它动物包括实验动物均无感染性。
1933年起,美国的依利诺斯州就有本病记载,此后在美国广泛流行。
1946年,Doyle等确定本病的病原体为病毒,并作了比较详细的报道。
1956年在日本,1957年在英国相继发生本病。
以后法国、荷兰、德国、匈牙利、意大利、波兰、前苏联、罗马尼亚、比利时、南斯拉夫、我国台湾省、马来西亚和加拿大相继报道了本病。
现在除阿拉斯加、北欧各国之外,在北半球,特别是北纬三十度以北的温带至寒带地区,均有本病分布。
从六十年代末期起,我国就有关于本病的报道。
引起猪传染性胃肠炎的病毒为冠状病毒。
其它病毒如轮状病毒、腺病毒、呼肠孤病毒以及肠道病毒等亦可引起猪的传染性腹泻。
本节只介绍猪传染性胃肠炎冠状病毒(TGEV)。
1.形态特征经滤过试验、超速离心和电镜观察,证明病毒粒子的直径为90~200nm,呈圆形,有的呈椭圆形或多边形。
有双层膜,囊膜上覆有花瓣状纤突,纤突长18~24nm,以极小的柄连接在囊膜的表面,其末端呈球状,直径约10nm,制片时容易使纤突脱落,所以经常只看到囊膜的边界,或者只在囊膜的某些部位有这种花瓣状纤突。
某些病毒粒子在以磷钨酸负染后,可见到1个电子透明中心或没有特征的核心,其形态与粘病毒的管状或螺旋状的核蛋白结构不同。
TGEVC1系列高压直流接触器
4.5 端子拧紧条件:各个部位的螺钉锁紧扭矩,请控制在下述的规定范围内。在超过范围的情况下,
可能会造成破损。
扭矩请遵循以下范围:
M4 螺丝 1.8 ~ 2.7N.m
M5 螺丝
3 ~ 4N.m
M6 螺丝
6 ~ 8N.m
M8 螺丝 10 ~ 12N.m
4.6 配线、母线等,请参考:
请参见“接线能力表”
试验电流范围 (A)
300 次
300 次
控 制
反向切断
—
(b)150A
—
400VDC 100 次 150A 200VDC 200A 200VDC 250A 200VDC
120A 200VDC 1000 次
1000 次
1000 次
1000 次
电
耐电 线圈触点间 3000VAC
3000VAC
3000VAC
3000VAC
3000VAC
功能性 强度 功能性 强度
20G
20G
20G
20G
20G
20G
50G
50G
50G
50G
50G
50G
4G 以上
4G 以上
4G 以上
4G 以上
4G 以上
4G 以上
(10~500Hz) (10~500Hz) (10~500Hz) (10~500Hz) (10~500Hz) (10~500Hz)
4G(10~500Hz) 4G(10~500Hz) 4G(10~500Hz) 4G(10~500Hz) 4G(10~500Hz) 4G(10~500Hz)
时间(S)
100000 10000
1000 100 10 1 10
TGE
TGE是由TGEV引起猪的一种高度接触传染性的肠 道疾病。临床特征是病猪呕吐、严重腹泻和失水; 不同品种、年龄的猪只都可感染发病,尤以2周 龄内仔猪、断乳仔猪易感性最强,致死率高达 100%;架子猪、成年猪感染发病死亡率低,一 般呈良性经过。 近年来发现某些TGEV基因缺失毒株还可导致猪 出现程度不等的呼吸道感染。
病理变化
胃内容物呈鲜黄色并混有大量乳白色凝乳 块。 整个小肠气性膨胀,肠管扩张,内容物稀 簿,呈黄色泡沫状,肠壁菲薄呈透明状, 弛缓而缺乏弹性。 部分病例肠道充血、胃底粘膜潮红充血、 小点状或斑状出血并有粘液覆盖。
特征性变化
主要见于小肠,剖检时取一段小肠用生理盐水轻 轻洗去肠内容物,臵平皿中加入少量盐水,在解 剖镜下观察可见健康猪空肠绒毛呈棒状,均匀, 密集,可随水的振动而摆动;而患病猪小肠绒毛 变短,粗细不均,甚至大面积绒毛仅留有痕迹或 消失。 猪呼吸道冠状病毒感染时,病猪肺脏可出现程度 不同的间质性肺炎变化。
免疫接种
目前控制TGE常用的疫苗包括德国的IB300疫苗株、匈牙利的CKP弱毒苗、美国 的TGE-Vac株以及日本的羽田株、H-5株 和TO163弱毒株等。我国培育成功了华 毒株弱毒苗,免疫效果达到或超过了国 外同类疫苗。 TGE疫苗免疫目的是保护仔猪,一般妊 娠母猪在产前45天及15天通过肌肉、鼻 内各接种疫苗1ml,可使其新生仔猪通过 初乳获得的被动保护率达95%以上。
病原学பைடு நூலகம்
TGEV属于冠状病毒科冠状病毒属。 该病毒能凝集动物的红细胞。 该病毒只有一个血清型; TGEV较敏感的细胞有猪甲状腺细胞、唾液 腺细胞、猪睾丸细胞和胎猪或仔猪肾细胞, 并可在这些细胞培养物中形成细胞病变。
流行病学
传染性胃肠炎OK
2、实验室诊断:
2.1 病毒抗原检测:小肠上皮细胞中检测TGEV 抗原,是最简单和常用的方法。常用IF(免 疫荧光):空肠、回肠粘膜刮取物或空肠、 回肠制备冷冻切片、直接或间接IF染色。
2.2 病毒核酸检测:RT-PCR 2.3 病毒的电镜检测:免疫电镜(IEM)效果好。 2.4 病毒的分离与鉴定:
小肠肠回处呈球状膨胀,内有黄色粪污痕迹,肠道中空无一物
小肠充血,肠腔充气,肠壁变薄,弛缓,呈半透明状
肠壁极薄,由于细菌 感染致粘膜严重出血
左为病猪肠绒毛变平,肠 陷窝不明显,右为正常
五、诊 断
1、现场初步诊断:寒冷季节,呕吐、水泻。
黄痢:1w内,分离大肠杆菌,抗菌素。
白痢:10-30日龄,一般不死。
•
地方流行性TGE:
四、病变
• 小肠绒毛变短和萎缩,绒毛长度与肠腺深度 几乎到1:1(正常是7:1); • 胃内充满凝乳块,胃底粘膜充血; • 肠内充满白色至黄色液体,肠壁菲薄缺乏弹 性;
• 肠系膜充血、淋巴结肿大;
• 肾浑浊肿胀和脂肪变性,并含有白色尿酸盐。
胃浆膜出血
胃粘膜弥漫性充血,肿胀,呈卡他性炎症
一、病
原
TGEV,感染性核酸,S蛋白具 多种生物学功能。
TGEV在空肠、十二指肠及肠系膜淋巴结中
含量最高。
病毒对阳光、乙醚、氯仿、许多消毒剂敏感,
对胰蛋白酶不敏感,在猪胆汁中相当稳定, 常用消毒药为0.03%福尔马林,1%来苏尔。
二、流 行 病 学
1、猪是唯一的易感动物; 2、犬可参与本病的传播;50%康复猪排 毒达2-8周,最长的达104天; 3、新疫区呈流行性,老疫区呈地方流行 性或周期性流行;多发于冬季。
传染性胃肠炎
猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)种毒特性研究
S t u d y o n p o r c i n e t r a n s mi s s i b l e g a s t r o e n t er i t i s v i r u s v a c c i n e s t r a i n / R E N
X i a o f e n g , T ON G L i n g , S U N X u e j i a o , Z H A O G a o w e i , WA N G J i n g j i n g , G A O Mi n g ( S c h o o l o f V e t e r i n a r y Me d i c i n e s , N o r t h e a s t A g r i c u l t u r a l U n i v e r s i t y , H a r b i n 1 5 0 0 3 0 , C h i n a )
a g a i n s t T GE V b e o me c s i mp o r t a n t . Av a i l a b i l i y t o f p u r i i f e d s e e d v i r u s i s a p r e r e q u i s t or f d e v e l o p me n t o f
Ab s t r a c t : P o r c i n e t r a n s mi s s i b l e g a s t r o e n t e d t i s v i r u s ( T G E V ) i s a n i n t e s t i n a I i n f e c t i o u s d i s e a s e s , c a u s e
任 晓峰 ,佟 玲 ,孙 雪娇 ,赵高伟 ,王婧婧 ,高 明
猪流行性腹泻病毒
猪流行性腹泻病毒(PEDV)和传染性胃肠炎病毒(TGEV)猪流行性腹泻病毒(PEDV)和传染性胃肠炎病毒(TGEV)都是冠状病毒。
轮状病毒(RV)呈车轮状外观,是一种人畜共患病。
这三种病毒均可被醛威TM和巨碘灭活,福尔马林、氢氧化钠亦可有效将其杀灭。
诊断要点1. PED和TGE有严格的季节性。
冬春季节(11月至下年4月)尤其是春节前后是发病高峰期。
2. 呕吐,水样的喷射状腹泻,有一股很特别的臭味。
3. 大小猪均发,日龄越小死亡率越高。
4. 轮状病毒7日龄以下不发病,多发生于13~39日龄。
5. 粪便呈酸性(细菌性腹泻的粪便一般为碱性),在普通显微镜下观察,肠绒毛缩短。
治疗原则:1. 猪流行性腹泻、猪传染性胃肠炎和猪轮状病毒是我国猪群中危害最严重的三种病毒性腹泻。
2. 这三种病毒性腹泻用抗生素和化学抗病毒药治疗无效。
重在管理,重在疫苗注射,重在增强体质和免疫力。
冬春季节的“病毒性腹泻”危险期,在注射疫苗的基础上定期饮水或拌料添加健力源或瘟毒力克,是未病先防的明智之举。
3. 在该病的治疗上,补液的同时应用免疫增强剂和消毒剂(可饮水消毒的巨碘)是关键,可以考虑使用抗生素防止继发感染(杆菌消、立速健是目前治疗肠道感染较好的敏感药物)。
4. 母猪发病时,新生仔猪由于严重脱水,加上母猪发病时无奶,死亡率可达100%,可采取人工奶或寄奶。
人工奶配方:500ml鲜奶+500ml10%葡萄糖水+1粒VC+2粒复合VB+2粒乳酶生。
治疗该病的发生目前尚无特效疗法,对症治疗可以缓解症状,防止继发感染;加强护理可以减少死亡。
具体做法如下:1、治疗病情较轻病猪。
用新城疫I系苗,每支0.5克加生理盐水10毫升,每头猪不论大小注射2毫升;注射三氮唑核苷每公斤体重0.2毫升,每日注射一次。
2、治疗病情较重病猪。
用恩诺沙星注射液,防止继发感染,按猪体重每千克用药0.1毫升(含恩诺沙星25毫克),肌肉注射,每日2次,连用3天。
或用肠炎灵注射液,按猪体重每千克用药0.3~0.5毫升,肌肉注射,每日2次,连注2~3日为一个疗程。
猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)福建分离株核衣壳蛋白基因(加的克隆与表达分析
摘
要
猪 传 染性 胃肠 炎( s wi n e t r a n s mi s s i b l e g a s t r o e n t e r i t i s , T G E ) 是一种 高度 接触 性 肠道 传 染病 , 是 我 国
法 定检 疫 的疫病 。为研 究福建 省 猪传 染性 胃肠 炎病 毒 ( T r a n s m i s s i b l e g a s t r o e n t e r i t i s v i r u s , T G E V) 核衣 壳 蛋 白基 因( 加 的分 子特 征 及其 原 核表 达 产物 的抗 原性 , 参 照 Ge n B a n k中的 T G E V全 基 因序列 , 设计 合 成 一 对扩增 T G E V福 建 ( F J ) 分离 株 Ⅳ基 因 的特 异 性 引物 , 进 行 克 隆和 序 列 分析 , 结 果表 明, T G E V. F J 株 Ⅳ 基
( D E 3 ) 中进行 表 达 。S DS — P A GE分 析表 明 , 重 组 蛋 白约 为 6 8 k D, 与 预 期分 子量 一 致 ; We s t e r n b l o t 分 析表
的间接 E L I S A抗 体检 测方 法 具有 良好 的特 异性 , 送检 2 0份猪 ( S u s s c r o f a ) T G E V 阳 性血 清样 本 中检 出 l 6
蠡 箬
On l i n e s y s t e m: h t t p : / / w ww. j a b i o t e c h . o r g
墩奠囊■穗礤警鬟
农
业生Βιβλιοθήκη 物技术学
报
J o u r n a l o f Ag r i c u l t u r a l Bi 0 t e c h n o l o g y
TGEV单克隆抗体的制备及检测方法的建立
TGEV单克隆抗体的制备及检测方法的建立猪传染性胃肠炎(Transmissible gastroenteritis of pigs,TGE)是由猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible Gastroenteritis virus of swine,TGEV)引起的一种高度接触性的消化道传染性疾病,多发于冬春季,主要临床症状为腹泻和呕吐,仔猪感染后死亡率达到70%以上,造成了严重的经济损失。
因此,在感染初期对TGE快速准确的诊断,是至关重要的。
通过对TGE抗原和抗体检测方法的研究,可以更好的防控疫情。
本实验通过超速离心和蔗糖密度梯度离心对TGEV进行纯化,免疫BALB/c小鼠,三次免疫后细胞融合,通过间接ELISA法筛选阳性的杂交瘤细胞,并用有限稀释法对阳性细胞进行克隆,4次亚克隆后获得稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株,分别为3G11、1D6、2E5和5D1。
通过Western blot发现4株单抗均是特异性针对TGEV-N蛋白;4株细胞中,3G11、2E5和5D1的亚类均为IgG<sub>1</sub>,1D6的亚类为IgM;间接免疫荧光实验鉴定4株单抗均能与感染TGEV的细胞结合;特异性反应实验中,4株单抗与猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪轮状病毒(PRV)和II型猪圆环病毒(PCV2)均不反应。
用BALB/c小鼠制备3G11单抗细胞的腹水,通过纯化柱对腹水进行纯化,测定效价为10<sup>5</sup>。
用实验室保存的TGEV-N蛋白单抗E10F10D5和本研究制备的3G11单抗建立了双抗体夹心ELISA检测方法。
与传统的双抗体夹心ELISA相比,本实验将检测抗体3G11与HRP进行偶联,省去了酶标二抗的孵育,减少了操作步骤和时间。
通过对反应条件的摸索和优化,确定了当E10F10D5单抗包被浓度为4μg/mL,HRP-3G11单抗工作浓度为1∶800稀释时,检测效果最佳。
猪传染性胃肠炎
• 仔猪突然发病,首先呕吐,继而发生频繁水样腹泻,粪便黄 色、绿色或白色,常夹杂有未消化的凝乳块。病猪极度口渴, 明显脱水,体重迅速减轻,日龄越小、病程越短、病死率越 高。10日龄内的仔猪多在2-7d内死亡,如母猪发病或泌乳 量减少,小猪得不到足够的乳汁,病情加剧,营养严重失调, 增加小猪的病死率,随着日龄的增长病死率逐渐降低。病愈 仔猪生长发育不良。
• 本病毒对牛、猪、豚鼠及人的红细胞没有凝集或吸附作用, 对乙醚、氯仿及去氧胆酸钠敏感,对0.5%胰酶能抵抗7h。 病毒对胰蛋白酶不敏感和在猪胆汁中相当稳定,常用消毒药 为0.03%福尔马林,1%来苏尔,容易将其杀死。 • 病毒对阳光敏感,粪便样品中的病毒在阳光下6小时即能灭 活,置阴暗处7天仍有感染力。病毒不耐热,56ºC45min, 65℃10min死亡。在阳光下曝晒6h即被灭活,紫外线能使 病毒迅速失活。病毒在pH4―8稳定,pH2.5则被灭活。
流行病学
• 猪是唯一的易感动物;
•104天;
• 新疫区呈流行性,老疫区呈地方流行性或周期性流行;
多发于冬季。
• 病猪和带毒猪是本病的主要传染来源。各种年龄的猪均可 感染发病,但症状轻微,并可自然康复,以10日龄以下的
哺乳仔猪发病率和死亡率最高,随年龄的增大死亡率稳步 下降;其它动物对本病无易感性。本病的发生有季节性, 我国多流行于冬春寒冷季节,夏季发病少,在产仔旺季发 生较多。在新发病鸡群,几乎全部猪均可感染发病,在老 疫区则呈地方流行,由于经常产仔和不断补充的易感猪发 病,使本病在猪群中常在。
•
幼猪、肥猪和母猪的症状轻重不一,通常只有1d至数
天出现食欲不振或废绝。个别猪有呕吐,出现灰色褐色水
样腹泻呈喷射状,5-8d腹泻停止而健康,极少死亡。某些 哺乳母猪与仔猪密切接触,反复感染,症状较重,体温升
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
病理变化
• 胃肠胀满,胃底黏膜充血和不同程度的出 血 • 小肠肠壁变薄而无弹性 • 黏膜上皮细胞变性、脱落。
诊断
• • • • • 病毒分离和鉴定 荧光抗体检查病毒抗原 血清学诊断 RT-PCR快速诊断法 鉴别诊断(PEDV、RV还有仔猪黄白痢)
防治
• 强化猪场的卫生管理,定期消毒 • 疫苗(TGEV和PEDV二联苗)
• 如何利用S基因和S蛋白就成了非常关键的 因素。
• An antibody derivative expressed from viral vectors passively immunizes pigs against transmissible gastroenteritis virus infection when supplied orally in crude plant
疫苗
• • • • 灭活疫苗(不能产生黏膜免疫) 弱毒疫苗(二联疫苗) PRCV疫苗 基因工程疫苗
• PRCV疫苗 TGEV只有一个血清型,PRCV与TGEV的核苷酸 和氨基酸序列有96%的同源性,并已证明PRCV 是由TGEV突变而来。 PRCV相对于TGEV有两点:1、S蛋白氨基酸末 端区域的缺失;2、ORF 3a或3b的缺失。PRCV 嗜性的改变,毒力温和,只产生轻微的腹泻和呼 吸道疾病,所以PRCV是一种天然的抗体。
TGEV的抵抗力比较低,对光照和高温敏感, 对乙醚和氯仿敏感等化学药品敏感,但病 毒在胆汁中很稳定,对胰酶蛋白有抵抗力, 在pH4~9的环境中比较稳定。
• TGEV基因组为不分节段的单股正链RNA, 大小约28.5kb。基因组编码8个ORF, TGEV有4种结果蛋白(S、M、N和sM)和 3种非结构蛋白。其中S基因编码纤突糖蛋 白,形成病毒的囊膜突起。
流行病学
• 本病只侵害猪,10日龄以内的仔猪最为敏 感,发病率和死亡率都很高。5周龄以上的 猪死亡率就很低了。 • 主要传染源病猪和带毒猪,带毒的犬、猫 和鸟也可能传播此病。
发病机理
• TGEV经口鼻到达胃,能抵抗低pH和蛋白 水解酶的作用的到达小肠,与高度敏感的 小肠上皮细胞接触,依靠病毒N蛋白的作用 定居在细胞核内,大量繁殖。 • 小肠内酶活性明显降低,扰乱了消化及细 胞营养物质和电解质的运输,从而产生一 系列的症状,包括腹泻和脱水。 • 死于脱水、代谢性酸中毒和高血钾导致的 心、肾功能衰竭。
• PRCV制成的活疫苗免疫怀孕母猪可以引起较高 水平的IgG抗体,但IgA和IgM抗体水平不高。 有人认为,PRCV主要在呼吸道组织增殖,而呼 吸道的淋巴小结远远少于肠道内的淋巴小结,因 此抗原刺激呼吸道产生的林母细胞少,从而使局 部产生的IgA少,粘膜免疫力下降.
• 基因工程苗 ORF2表达的S蛋白,其具有多种生物活性: 携带主要的B淋巴细胞表位,诱导产生中和 抗体;含有宿主细胞氨肽酶受体识别位点, 决定宿主细胞的嗜性;决定病毒的致病性; 具有细胞膜融合作用,使病毒核蛋白进入 细胞浆,决定病毒的血凝活性。
• 携带TGEV DNA 疫苗减毒沙门氏菌的构建 及安全性与免疫性分析 • DNA 免疫制备猪传染性胃肠炎病毒S 蛋白 单克隆抗体
猪传染性胃肠炎(TGEV)源自概论• 猪传染性胃肠炎是一种急性胃肠道传染病,临床 上发热、呕吐、严重腹泻、腹水和2周龄以内仔猪 高死亡率为特征,为OIE规定的B类疫病。 • 该病1946年首次在美国报道,我国最早于1956年 1946 1956 在广州的揭阳、惠州和汕头等地的猪场发现本病。
病原
• TGEV属于冠状病毒科冠状病毒属。病毒粒 子多呈圆形或椭圆形,直径为80-120nm, 有囊膜,表面有一层棒状纤突,长12-25nm。