性病实验室检测
2023年性病实验室检查理论考试试题
2023年性病实验室检查理论考试试题一、单选题（每题5分，共15道题75分）1、梅毒螺旋体镜检可采用的染色方法：A 革兰染色B 美兰染色C 镀银染色(正确答案)D 伊红染色2、非梅毒螺旋体抗体检测可采用的方法：A TPPAB ELISAC RPR(正确答案)D FTA-ABS3、TPPA 只能检测到：A IgAB IgGC IgG+IgM+IgA 等混合抗体(正确答案)D IgM4、梅毒螺旋体镜检一般不采用下列标本：A 皮肤溃疡组织液B 羊水C 血液(正确答案)D 脑脊液5、RPR 检测不能采用下列标本：A 血清B 血浆C 全血(正确答案)D 脑脊液6、解脲脲原体和人型支原体的实验室最佳检测方法是:A液体培养法B固体培养法C 固体培养和液体培养同步进行(正确答案)D基因扩增法7、梅毒螺旋体病原学检测方法不包括：A 暗视野显微镜检查B 镀银染色C 培养基培养(正确答案)D 核酸检测8、女性病人作霉菌、滴虫检验时，应该在哪个部位取样？A阴道后穹隆(正确答案)B尿道内C宫颈管口D宫颈口内1～1.5cm处9、RPR/TRUST 检测用水平旋转仪的旋转直径是：A 25±2mmB 18±2mm(正确答案)C 20±2mmD 30±2mm10、女性性病患者沙眼衣原体检查的取材部位A阴道后穹隆B尿道内C宫颈管口D宫颈口内1～1.5cm处(正确答案)11、TRUST 试验时每个反应孔滴加的抗原量是：A 50μlB 30μlC 25μlD 17μl(正确答案)12、前带现象主要出现在下列哪一种方法中：A ELISA(正确答案)B RPRC TPPAD FTA-ABS12、前带现象主要出现在下列哪一种方法中：A ELISAB RPR(正确答案)C TPPAD FTA-ABS13、RPR 试验时每个反应孔滴加的血清量是：A 50μlB 30μlC 25μlD 17μl(正确答案)14、淋球菌的生化反应只分解A 葡萄糖，产酸不产气(正确答案)B 分麦芽糖，产酸不产气C 蔗糖，产酸不产气D 乳糖，产酸不产气15、TPPA 试验结果判读孔的血清稀释倍数是：A 1:20B 1:40C 1:80(正确答案)D 1:160二、是非题（每题5分，共5道题25分）16、新生儿衣原体肺炎病例沙眼衣原体IgM抗体滴度升高，有诊断意义。
常见的性病检测方法
常见的性病检测方法1. 引言性传播感染（Sexually Transmitted Infections，简称STIs），也被称为性病，是通过性接触传播的感染性疾病。
性病的早期诊断和及时治疗对于个人和公共卫生非常重要。
本文将介绍常见的性病检测方法，包括症状检查、实验室检测和影像学检查等。
2. 症状检查症状检查是性病检测的第一步，但有些性病可能没有明显的症状。
以下是常见的性病症状：•排尿时疼痛或灼热感•性器官或会阴部的疼痛、瘙痒或灼热感•异常的阴道分泌物或尿道分泌物（颜色、质地或气味异常）•外阴或肛门区域的溃疡、疣或疮疹•泌尿道出血•性欲减退或勃起功能障碍如果出现以上症状之一或多个，特别是与性接触有关的时候，建议立即就医，并进行进一步的实验室检测。
3. 实验室检测实验室检测是性病诊断的关键步骤，它通过检测体液中的特定标志物或直接观察病原体来确定是否存在性病感染。
下面介绍常见的实验室检测方法：3.1 血液检测•HIV抗体检测：通过检测体液中的HIV抗体或抗原来确定是否感染了人类免疫缺陷病毒（HIV）。
•梅毒血清学试验：通过检测体液中的梅毒抗体来确定是否感染了梅毒螺旋体。
•肝炎病毒检测：通过检测体液中的乙型肝炎病毒（HBV）标志物（如HBsAg、HBcAb等）来确定是否感染了乙型肝炎病毒。
3.2 尿液检测•淋病检测：通过检测尿液中的淋球菌核酸来确定是否感染了淋病。
•梅毒尿液检测：通过检测尿液中的梅毒抗体来确定是否感染了梅毒螺旋体。
3.3 分泌物检测•阴道分泌物检测：通过检测阴道分泌物中的寄生虫、细菌或病毒来确定是否感染了阴道念珠菌、滴虫病、人乳头瘤病毒（HPV）等性病。
•阴茎分泌物检测：通过检测阴茎分泌物中的病原体来确定是否感染了淋病、生殖器疱疹等性病。
3.4 分泌物或组织检测•阴道或宫颈拭子检测：通过采集阴道或宫颈拭子，进行细胞学检查或病原体检测，以确定是否感染了阴道炎、宫颈炎等性病。
4. 影像学检查影像学检查在性病诊断中不是常见方法，但在某些情况下可能起到重要作用。
性病实验室检方法教学教材
03
实验室检测方法
细菌学检测
直接涂片法
取患者分泌物或组织直接涂片 ，在显微镜下观察细菌形态和 数量，适用于淋病、梅毒等性 病的初步诊断。
培养法
将患者样本接种到选择性培养 基上，通过培养、观察菌落形 态、生化反应等鉴定细菌种类 ，如淋球菌、杜克雷嗜血杆菌 等。
免疫学方法
利用特异性抗体与细菌抗原结 合的原理，通过凝集试验、酶 联免疫吸附试验等方法检测样 本中的细菌抗原或抗体，用于 梅毒、艾滋病等性病的诊断。
细胞学检查
用阴道或宫颈疣组织涂片，巴氏染色，可见到两种细胞，即空泡化细胞及角化不良细胞同 时存在，对尖锐湿疣有诊断价值。
组织病理检查
如在棘层上方及颗粒层出现空泡化细胞，是诊断HPV感染的重要证据。
生殖器疱疹实验室诊断方法
细胞学检查
从疱底或溃疡面刮取少量组织作涂片，Wright-Giemsa染色或Papanicolaou染色，可检出HSV感染具特征性的 多核巨细胞内的嗜酸性包涵体。但不能区别HSV的型别。
80%
样本运输
采用符合生物安全要求的包装和 运输方式，确保样本在运输过程 中的安全性和完整性。
试剂选择和质量控制要求
试剂选择
选择经过验证的、质量稳定的试剂， 确保检测结果的准确性和可靠性。
质量控制
建立严格的质量控制体系，包括试剂 的验收、存储、使用等环节，确保试 剂的质量和稳定性。
操作流程规范化管理要求
如梅毒螺旋体颗粒凝集试验（TPPA），为梅毒的确证试验，但是滴度
测定不能用来判断疗效、随访等。
淋病实验室诊断方法
涂片检查
取患者尿道分泌物或宫颈分泌物，作革兰氏染色，在多 形核白细胞内找到革兰氏阴性双球菌。女性宫颈分泌物 中杂菌多，敏感性和特异性较差，阳性率仅为50%～ 60%，且有假阳性，因此世界卫生组织推荐用培养法检 查女性患者。慢性淋病由于分泌物中淋球菌较少，阳性 率低，因此要取前列腺液，由阴道深部向子宫颈口注油 剂润滑的窥阴器，再用无菌棉拭子插入宫颈内停留30秒， 棉拭子及宫颈分泌物，涂成双份，进行涂片检查。
性病实验室检测流程
性病实验室检测流程性病，即性传播疾病，是一组通过性接触、类似性行为及间接接触传播的传染性疾病。
准确的实验室检测对于性病的诊断、治疗以及预防控制都具有重要意义。
下面为您详细介绍性病实验室检测的流程。
一、检测前准备1、患者准备医生会详细询问患者的病史，包括性接触史、症状出现的时间和特征、既往治疗情况等。
患者需要提前告知医生正在使用的药物，因为某些药物可能会影响检测结果。
患者在检测前应避免性生活、阴道冲洗或使用阴道栓剂等，以免干扰检测结果。
2、样本采集用品准备根据检测项目的不同，准备相应的采集器具，如无菌拭子、采血针、采血管、无菌容器等。
确保采集器具的无菌性和有效期。
3、实验室准备实验室环境应保持清洁、整齐，并定期进行消毒。
检测仪器设备应经过校准和维护，确保其性能良好、运行正常。
准备好所需的检测试剂，并检查试剂的有效期和质量。
二、样本采集1、梅毒检测样本采集血清学检测：通过静脉采血获取患者的血液样本，一般采集 3 5ml 血液，注入干燥的采血管中，待血液凝固后离心分离血清。
暗视野显微镜检查：对于一期梅毒的硬下疳或二期梅毒的皮损，用无菌生理盐水清洁后，用无菌拭子轻擦皮损表面，获取渗出液或组织液，制成涂片进行暗视野显微镜检查。
2、淋病检测样本采集男性患者：用无菌拭子插入尿道口 2 4cm，轻轻旋转拭子采集分泌物。
女性患者：先用无菌棉签清除宫颈口的分泌物，然后用无菌拭子插入宫颈管 1 2cm，轻轻旋转拭子采集分泌物。
3、生殖道沙眼衣原体感染检测样本采集男性患者：用无菌拭子插入尿道口 2 3cm，轻轻旋转拭子采集分泌物。
女性患者：可采集宫颈分泌物或尿液样本。
采集宫颈分泌物时，方法同淋病；采集尿液样本时，要求患者留取首次晨尿的中段尿 10 20ml。
4、尖锐湿疣检测样本采集对于可见的疣体，可直接用手术剪刀或活检钳取部分疣体组织。
对于亚临床感染或潜伏感染的病灶，可通过醋酸白试验确定病变部位，然后采集样本。
5、生殖器疱疹检测样本采集用无菌拭子采集水疱液或溃疡表面的分泌物。
实验室艾滋、梅毒和乙肝相应项目的标准化操作程序
实验室艾滋、梅毒和乙肝相应项目的标准化操作程序实验室是进行各类病原微生物检测的重要场所，包括艾滋病、梅毒和乙肝等项目的标准化操作程序也是实验室工作的核心。
标准化操作程序的制定，旨在确保实验室工作的准确性、可靠性和连续性，最大程度地减少误差和风险。
下面将详细介绍实验室艾滋病、梅毒和乙肝项目的标准化操作程序。
一、艾滋病检测项目的标准化操作程序：1.标本采集：按照规定的采样方法采集血液标本，包括静脉血和采血盒采集的血液。
2.样本处理：收到标本后，首先检查样本标签和申请单上的信息是否一致，然后进行样本分装和保存，确保样本的完整性和稳定性。
3.样本检测：使用艾滋病抗体检测试剂盒进行检测。
按照检测试剂的说明书，将样本和试剂按照比例混合并孵育一定时间，然后进行洗涤和显色。
4.结果判断：根据试剂盒的说明书，根据显色反应的强度和比色卡提供的判断标准，判断样本阴阳性。
5.结果记录和报告：将检测结果记录在检验记录中，并生成相应的实验报告，确保结果能够及时准确地传达给临床医生。
二、梅毒检测项目的标准化操作程序：1.标本采集：按照规定的采样方法采集血液标本，包括静脉血和采血盒采集的血液。
2.样本处理：收到标本后，首先检查样本标签和申请单上的信息是否一致，然后进行样本分装和保存，确保样本的完整性和稳定性。
3.样本检测：使用梅毒抗体检测试剂盒进行检测。
按照检测试剂的说明书，将样本和试剂按照比例混合并孵育一定时间，然后进行洗涤和显色。
4.结果判断：根据试剂盒的说明书，根据显色反应的强度和比色卡提供的判断标准，判断样本阴阳性。
5.结果记录和报告：将检测结果记录在检验记录中，并生成相应的实验报告，确保结果能够及时准确地传达给临床医生。
三、乙肝检测项目的标准化操作程序：1.标本采集：按照规定的采样方法采集血液标本，包括静脉血和采血盒采集的血液。
2.样本处理：收到标本后，首先检查样本标签和申请单上的信息是否一致，然后进行样本分装和保存，确保样本的完整性和稳定性。
性病实验室检测及其意义
梅毒实验室检测的特点
临床表现
一期梅毒
取材部位 检查方法
溃疡 淋巴结 病原学检查
血液
血清学检查
二期梅毒
潜伏梅毒 三期梅毒 神经梅毒
血液 血液
皮损 淋巴结
病原学检查
血清学检查
血液 血清学检查
血液
血清学检查
血清学检查
脑脊液
细胞、蛋白量检查VDRL等
梅毒血清学检测原理
当人体感染梅毒螺旋体后4周-10周左右，血 清中可产生一定数量的抗类脂质抗原的非特 异性抗体（反应素）和抗梅毒螺旋体抗原的 特异性抗体。这些抗体均可用免疫学方法进 行检测，是辅助诊断梅毒的重要手断.
• 在圈内加入0.05 mL等渗盐水（一般作6～8个稀释度），勿 将盐水涂开
b. 吸取0.05 mL血清或血浆作系列稀释（1:2～1:64），当稀释 到最后的第6孔时，弃去0.05 mL稀释液。从第6孔起将血清 稀释液涂布整个圈内，再涂布第5孔，依此向前到第1孔
c. 滴加抗原，旋转时间、速度和观察结果同定性试验。
缺点
• 费时（需3～5天），费力，技术要求高 • 不宜作为临床常规检查 • 不宜用于大规模的筛查和流行病学调查
衣原体抗原快速检测的临床意义
优点：
简易，方便，快速，尤其 适用于基层单位
缺点： 标本中需要足够数量的沙眼衣 原体抗原，否则有假阴性结果
敏感性 特异性
宫颈标本
50% 98%
阴道标本
33% 99%
衣原体核酸检测
现有的核酸检测方法 • PCR • LCR • SDA • TMA
• Real time PCR
衣原体核酸检测的临床意义
优 点:
敏感性：-98％ 特异性: -99％
性病实验室检测方法课件 (2)
建立严格的试剂储存管理制度，确保试剂在有效 期内使用。
设备维护
定期对检测设备进行维护和校准，确保设备性能 稳定可靠。
人员培训与资质认证
培训计划
制定并实施人员培训计划，提高检测人员的专业知识和技能。
资质认证
对检测人员进行资质认证，确保其具备从事性病实验室检测的资格。
人员健康管理
建立人员健康档案，定期进行健康检查，防止因人员健康问题影响 检测结果。
样本处理与运
样本处理
采集的样本需要进行适当的处理， 如离心、过滤、沉淀等，以去除 杂质和不必要的细胞成分，提高 检测的敏感性和特异性。
样本运输
处理后的样本需要按照规定的温度 和时间进行运输，以确保样本的新 鲜度和完整性，同时应避免交叉感 染和污染。
注意事项
样本处理和运输过程中应遵循相关 规定和操作规程，确保样本质量和 安全性。
核酸检测
1 2
聚合酶链式反应（PCR） 通过扩增特定的DNA片段，用于检测淋病奈瑟氏 菌、生殖器疱疹病毒等病原体。
实时荧光定量PCR
在PCR基础上加入荧光标记，实现实时监测，提 高检测的灵敏度和特异性。
3
基因测序
对病原体基因进行测序分析，用于高度变异病原 体的检测和分型，如HIV病毒。
03
性病实验室检测流 程
采集样本
采集方法
采集样本时应根据不同性病病原体选 择合适的采集方法，如生殖器疱疹可 采集水疱液或溃疡表面渗出物，淋病 可采集尿道分泌物等。
采集部位
注意事项
采集样本时应遵循无菌操作原则，避 免交叉感染和污染，同时应确保采集 的样本量足够用于检测。
采集样本时应选择病原体含量较高的 部位，如生殖器疱疹可采集病变部位 渗出液，淋病可采集尿道口分泌物等。
性病实验室诊断标准及应用
显微镜检查临床意义
淋菌培养临床意义
是临床诊断的金标准，是WHO推荐的淋病筛查的唯一方法 是判愈的指标 可以对疑似（或非生殖器部位标本）NG的菌株作进一步的鉴定 可进行NG耐药监测，PPNG、TRNG、QRNG 科研
性传播疾病实验室诊断标准及应用
常见性传播疾病的实验室诊断“金标准”
淋病 淋球菌培养 梅毒 暗视野检查+TPPA(FTA-ABS,WB) 沙眼衣原体 衣原体培养+核酸扩增技术 支原体感染 支原体培养 生殖器疱疹 病毒培养+核酸扩增技术 尖锐湿疣 核酸杂交和核酸扩增技术 HIV/艾滋病 蛋白印迹试验+HIV抗原检测 滴虫性阴道炎 湿片法+毛滴虫培养 细菌性阴道病 G染色查线索细胞 软下疳 细菌培养+核酸扩增技术 性病性淋巴肉芽肿 衣原体培养+核酸扩增技术
两类血清学方法临床意义的比较
RPR类： RPR等试验可用于大标本量的筛查？ RPR定量可排除生物学假阳性？ RPR是疗效判定的指标 RPR是疗后随访的指标 RPR用于判定是否血清复发
TPPA类： 是金标准 TPPA等试验是确诊指标 在HIV感染者中，血清学试验可发生难于解释的现象，若怀疑梅毒感染应作HIV检查
面对当前梅毒血清学检测存在的问题，即将有策略五…
梅毒孕产妇所生儿童随访与先天梅毒感染状态监测流程
梅毒产妇所生新生儿
不能开展暗视野、IgM
采静脉血、RPR定量
能开展暗视野、IgM
阴性
诊断先天梅毒感染
阳性
治疗、随访
18月TPPA
HIV实验室检测方法和步骤
HIV实验室检测方法和步骤HIV，也称为人类免疫缺陷病毒，是一种能导致艾滋病的病毒。
HIV实验室检测方法和步骤被广泛应用于检测感染HIV的个体。
以下是一般情况下使用的实验室检测方法和步骤的详细说明。
1.预处理和登记在进行HIV实验室检测之前，需要对样本进行预处理和登记。
预处理包括标识样本的相关信息，如样本编号和患者信息。
这些信息对于结果记录和跟踪是至关重要的。
此外，还需检查样本的适应性和完整性。
2.血液样本采集3.血清分离采集到的血液样本需要进行血清分离。
这可以通过离心来分离血液的不同成分，例如血红蛋白和血清。
离心速度和时间需要根据实验室设备和协议进行调整。
4.酶联免疫吸附测定法（ELISA）最常用的HIV实验室检测方法是酶联免疫吸附测定法（ELISA）。
这种方法使用特定的抗体来检测血液中特定的抗原。
根据ELISA方法的不同，可检测HIV抗原或抗体。
实验室技术人员将患者血清样本加入到已包含HIV相关抗原或抗体的试剂盘中，然后根据试剂盘的建议操作，包括孵育时间、温度和洗涤步骤。
任何与接触抗原或抗体反应的特异性颜色改变，都可作为阳性结果。
否则，结果被视为阴性。
5.确认试验在进行HIV检测的初步结果后，通常会进行一个或多个确认试验。
确认试验的目的是统一确定检测结果的可靠性。
常用的确认试验包括HIV免疫荧光试验（IFA）和西方印迹法（Western blot）。
这些试验通过检测血清中的HIV特异性抗体，以确保先前的结果的准确性。
6.分子检测有时，为了获得更加可靠和敏感的结果，实验室会使用分子检测方法，例如聚合酶链式反应（PCR）。
PCR可以检测和放大病毒的基因或核酸，以确定HIV感染的存在和病毒的数量。
7.结果解读和记录HIV实验室检测结束后，实验室技术人员需要解读并记录结果。
阳性结果意味着存在HIV感染，而阴性结果则表示未检测到HIV感染。
针对不同的检测方法和样本类型，结果的解释可能有所不同。
因此，在结果解读和记录时，实验室人员需要严密遵循实验室的标准操作规程（SOP）。
性病实验室检方法教学教材
检测血清中特异性抗体或抗原，操作简便、快速。
02
免疫荧光技术
利用荧光标记的抗体与病原体抗原结合，可视化检测病原体。
03
化学发光免疫分析技术
具有高灵敏度、高特异性、线性范围宽等优点，已广泛应用于性病检测
领域。
其他新型技术介绍及发展趋势
流式细胞术
生物传感器技术
可对单个细胞进行多参数、快速的定量分 析，为性病检测提供新的手段。
了解各种性病实验室检测的基本原理 和操作流程。
结合临床实际进行分析
将实验室结果与患者的病史、症状等 相结合进行综合判断。
注意报告的时效性和局限性
了解报告的有效期限以及在遇到疑问或矛盾时，及时与实验室 联系并寻求专业意见。
06 新型技术在性病检测中应 用前景
梅毒血清学试验
包括非特异性梅毒螺旋体抗原试验和特异性梅毒螺旋体抗原试验。前者常用于 临床筛选及判定治疗的效果，后者主要是用于判定试验，一旦患有梅毒，该试 验将终身阳性。
淋病实验室检测
涂片检查
取患者尿道分泌物或宫颈分泌物，作 革兰氏染色，在多形核白细胞内找到 革兰氏阴性双球菌，有诊断价值。
培养检查
淋球菌培养是诊断的重要佐证，培养 法对症状很轻或无症状的男性、女性 病人都是较敏感的方法，只要培养阳 性就可确诊。
分类
根据病原体不同，性病可分为细 菌性性病（如淋病、软下疳等） 和病毒性性病（如艾滋病、生殖 器疱疹等）。
流行病学特点与传播途径
• 流行病学特点：性病在全球范围内广泛流行，发病率高， 且呈年轻化趋势。
02 常见性病实验室检测方法
梅毒实验室检测
暗视野显微镜检查
适用于有硬下疳损害的患者，可取皮损分泌物在暗视野显微镜下观察，见到可 运动的梅毒螺旋体即可确诊。
性病的实验室检验与质量控制
*20分钟可获得实验结果。 *试剂与方法均已标化，各实验室间结果可比较。 *试验可被内部质控和外部质控监控进行。 缺点：
*敏感性和特异性低于螺旋体抗原试验，BFP反应和前带 现象
精选ppt
未经治疗的各期梅毒的敏感性
试验 VDRL
敏感性非梅毒
一抗期原血清试二验期的敏感潜性伏和特异晚性期
78%
精选ppt
RPR定量试验
中等至大的凝块为阳性（圈4和7）有明 确但很小的凝块为弱阳性（圈2和3）颗 粒均匀分布（圈1,5,8-10）或稍粗糙（圈 6）为阴性
精选ppt
非梅毒螺旋体抗原血清试验的优缺点：
优点： *敏感性特异性好 *不需要昂贵设备，简单易行 *适用于大量人群的血清筛查 *有效治疗后血清滴度可下降并阴转，故可作疗效观察、
精选ppt
性病实验室的质量控制
内部质量控制 外部质量控制
精选ppt
性病实验室的质量管理
1. 有实验室负责人，实验人员分工明确 2. 实验室人员应该定期参加培训、进修
或专业研讨会 3. 有实验室各项管理制度 4. 制定常规实验室标准操作程序（SOP）
精选ppt
性病实验室的质量管理
1．仪器、设备 实验室所有使用仪器应有使用、保养及维修记 录有温控的仪器需每天记录温度
精选ppt
淋病
精选ppt
常用淋病检测方法 直接显微镜检查 分离培养淋球菌
精选ppt
直接显微镜检查
原理：男性淋菌性尿道炎的分 泌物中，多形核白细胞内可找 到革兰染色阴性的双球菌。
精选ppt
直接显微镜检查的临床意义
男性淋菌性尿道炎的尿道标本 敏感性及特异性可高达95%～99%，具诊断价值。
精选ppt
经典：常见性病实验室检测技术
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梅毒概述（二）
一期梅毒 硬下疳和(或)腹股沟淋巴结肿大
二期梅毒 可有一期梅毒史，病期在2年以内有多形性皮疹、扁平湿疣等
三期（晚期）梅毒 可有一期或二期梅毒史，病期在2年以上 皮肤黏膜损害等，包括神经梅毒、心血管梅毒
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建设任务和标准
1）95%的省级以上医疗卫生机构能够开展梅毒血清学初筛和确证试验、 淋球菌镜检和培养、衣原体抗原检测或核酸检测。60%的省级以上医 疗卫生机构能够开展淋球菌药物敏感性检测。
2）90%的地市级医疗卫生机构能够开展梅毒血清学初筛和确证试验、淋 球菌镜检和培养、衣原体抗原检测或核酸检测。
隐性（潜伏）梅毒 早期：病期在2年以内；晚期：病期在2年以上。无任何梅毒性的症状和体征
胎传（先天）梅毒 早期：在2岁前发生；晚期：在2岁以后发病。胎传隐性梅毒：无临床表现
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梅毒概述（三）
疑似病例、确证病例诊断依据： ➢ 病史 ➢ 症状 ➢ 实验室检查 梅毒的实验室检查结果对诊断有决定性意义
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病原学检查的临床意义
病原学方法直接镜检到梅毒螺旋体， 在临床可确诊梅毒，且具有快速、 方便、易操作的特点。
螺旋体检查是诊断早期现症梅毒的 最佳方法，对于患者的早期诊断、 及时治疗、预后和尽早切断传染源 都有十分重要的意义。
如未见到梅毒螺旋体，并不能排除 患梅毒的可能性，
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梅毒血清学检测方法
加强各级性病实验室的能力建设
（1）国家性病参比实验室应具备。。。 （2）省级中心实验室应具备开展常见重要性病病原体的检测、药物敏感
161-性病实验室检测方法-医学文档资料
非梅毒螺旋体抗体试验原理
RPR试验 在USR试剂成分的基 础上 加入黑色碳颗粒 作为沉淀的指示物 用白色的硬纸片替代 玻片 血清不需要灭活 不需要显微镜观测结 果
TRUST 其原理和成分 与RPR试验相 同 用红色的甲苯 胺红替代了碳 颗粒 其余的特点均 与RPR相同
非梅毒螺旋体抗体试验操作要点
TP—ELIS试验原理
TP—ELIS试验是用重组梅毒螺旋体抗 原包被固相板条，加上梅毒血清和单克 隆抗体酶标记物，形成抗原抗体复合物 与酶标记物结合，用酶联检测仪判定试 验阳性反应。本法可用于大规模血清检 测。
梅毒免疫层析快速检测方法
梅毒螺旋体抗体试验临床意义
作为非梅毒螺旋体抗原血清试验(如RPR 等)初筛阳性标本的确证试验。 梅毒患者经过抗梅治疗后，TPPA等梅毒 螺旋体抗体试验试验仍可阳性，故TPPA 等试验阳性不能作为疗效观察的指标。 TPPA等阳性不能区分既往感染和现症感 染，应结合非梅毒螺旋体抗原血清试验 结果进行诊断。
病原学检查的临床意义
病原学方法直接镜检到 梅毒螺旋体，在临床可 确诊梅毒，且具有快速 、方便、易操作的特点 。 螺旋体检查是诊断早期 现症梅毒的最佳方法， 对于患者的早期诊断、 及时治疗、预后和尽早 切断传染源都有十分重
梅毒血清学检测分类
(1) 非梅毒螺旋体抗体检测试验（非特异性 梅毒抗体） (2) 梅毒螺旋体抗体检测试验（特异性梅毒 抗体）两类方法。 问题1：为什么梅毒实验室诊断需要两类血 清学检测方法？
主要内容
梅毒 淋病 生殖道沙眼衣原体感染 生殖器疱疹
2024年性病实验室测试试题
2024年性病实验室测试试题一、选择题:请将正确答案的序号填在括号中1、非梅毒螺旋体抗体检测可采用的方法: [单选题]A TPPAB ELISAC RPR(正确答案)D FTA-ABS2、梅毒螺旋体镜检可采用的染色方法:[单选题]A 革兰染色B 美兰染色C 镀银染色(正确答案)D 伊红染色3、RPR检测不能采用下列标本: [单选题]A 血清B血浆C全血(正确答案)D 脑液4、梅毒螺旋体病原学检测方法不包括: [单选题]A 暗视野显微镜检查B镀银染色C 养基培养(正确答案)D 核酸检测5、下列哪项方法不是检测非梅毒螺旋体抗体: [单选题]A RPRB ELISA(正确答案)C VDRLD TRUST6、TPPA 试验结果判读孔的血清稀释倍数是: [单选题]A 1:20B 1:40C 1:80(正确答案)D 1:1607、ELISA 法采用的抗原是: [单选题]A重组抗原(正确答案)B完整的梅毒螺旋体C超声裂解梅毒螺旋体D类脂质8、TPPA 法采用的抗原是: [单选题]A 重组抗原B完整的梅毒螺旋体C超声裂解梅毒螺旋体(正确答案)D类脂质9、梅毒血清学检测实验室的生物安全级别是: [单选题] A一级B二级(正确答案)C三级D四级10、室内质控的主要目的是评价: [单选题]A 检测方法有效性B检测结果精确性(正确答案)C检测结果准确性D检测方法可行性11、不推荐用于梅毒血液筛查的试验是: [单选题]A TRUSTB ELISAC PCR(正确答案)D TPPA12、脑脊液 VDRL试验阳性可作为诊断依据的是: [单选题]A一期梅毒B二期梅毒C潜伏(隐性)梅毒D神经梅毒(正确答案)13、某地疾病预防控制中心工作人员到A医院进行数据质量核查，发现本年度有5例梅毒病例诊断分期错误，应如何处理? [单选题]A 删除病例，重新报告B 在传染病信息系统中订正，并填写订正报告卡(正确答案)C 不处理D 不知道14、下列是梅毒的治疗目的，但除外: [单选题]A 各期梅毒均要求杀灭体内梅毒螺旋体，消除或降低传染性(正确答案)B 早期梅毒的损害消失，达到临床治愈C 各期梅毒均要求血清阴转D 妊娠梅毒要使胎儿免受感染二、是非题：正确的请打“√”，错误的请打“×”。
性病实验室检测的技术标准和操作规程
生殖医学中心性病实验室检测操作规程参照标准：1、乌鲁木齐市性病医疗机构规范化管理资料汇编，2002.11.07，382、试剂相关说明书目录一、淋病检查的实验室技术 (2)(一)分泌物涂片检查 (2)（二）淋球菌的分离培养 (4)（三）淋球菌的保存 (5)（四）氧化酶试验 (5)二、支原体的检测 (5)三、衣原体检查 (6)四、梅毒的实验室检测 (8)(一)直接镜检 (8)（二）非特异性梅毒螺旋体试验 (8)五、TPHA梅毒螺旋体血凝试验 (9)一、淋病检查的实验室技术(一)分泌物涂片检查急性淋菌性尿道炎患者常有大量脓性分泌物。
在有些脓细胞内可见革兰氏染色呈阴性的双球菌，椭圆或球形，常成双排列。
因形态特殊，可取患者尿道分泌物制成涂片后染色，检查有无典型细胞内革兰阴性双球菌，可作为初步诊断的依据。
标本采集尿道分泌物、宫颈粘液、尿的离心沉淀物。
涂片镜检涂片后，待自然干燥后，加热固定，行革兰染色，油镜观察。
结果在急性患者的尿道脓性分泌物革兰染色涂片中，常可见到大量红色多形核白细胞，有些细胞中吞噬有淋球菌。
多数多形核白细胞中并不含淋菌，但不少细胞中常含有1对或数对，甚至20~30对。
淋球菌常存在于细胞浆内。
在病期较长或经过治疗的淋病患者的涂片中淋球菌比较少，有时呈单个、四联和八叠状，且常位于细胞外。
对有些细菌难以下结论时，需进行培养和鉴定。
注意事项1．涂片时不要用力涂擦，而应将棉拭在玻片上轻轻滚动。
涂擦过重，细胞容易破裂变形，致细菌从胞内溢出。
2．涂片厚薄适宜。
过厚，加之染色过程中脱色时间不足，革兰染色易呈紫色。
因此，脱色时间要视涂片厚薄而定。
3．固定涂片时，迅速通过火焰2~3次，避免加热过度使细胞变形。
热度以不烫手为宜。
4．不推荐用涂片检查来诊断淋菌的直肠和咽部的感染，也不推荐用来作判愈。
方法评价涂片检查方法简便、有效、价格低廉且有一定的敏感性和特异性。
但其特异性随取材部位的不同而有所不同。
男性尿道取材特异性较高，而从女性子宫颈取材特异性较低。
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对选择性培养基上分离的直径在0.5～1mm，
无色、灰白色的半透明菌落应作进一步鉴定。
淋球菌培养-观察结果
淋球菌培养-淋球菌的初步鉴定
初步鉴定淋球菌的主要依据
菌落特征 氧化酶试验 革兰染色
梅毒患者经过抗梅治疗后，TPPA试验仍可阳性，故 TPPA试验阳性不能作为疗效观察的指标。
TPPA阳性不能区分既往感染和现症感染，应结合非梅毒 螺旋体抗原血清试验结果进行诊断。
非梅毒螺旋体抗原血清学试验结果解释示意图
治疗前
一期 二期 早期潜伏
治疗后
早 期
晚 晚期潜伏 期 三期
阳性
阴性
梅毒螺旋体抗原血清学试验结果解释示意图
淋球菌培养
培养条件 ： 35 ℃ ～ 36℃，含 5% ～ 10% CO2，湿润（70%湿度）的环境。
CO2环境可由CO2培养箱、CO2产气袋及烛缸提供。 使用烛缸时，应使用白色、无芳香味的无毒性蜡烛。 在烛缸底部放些浸水棉球以保持一定的湿度。
培养时间：24~48小时
淋球菌培养-培养条件
淋球菌培养-观察结果
检测方法-梅毒螺旋体血清试验
TPPA
TPPA试验原理与TPHA试验基本相同。TPPA试验用 梅毒螺旋体致敏明胶颗粒替代TPHA试验中致敏羊红细胞， 此致敏颗粒与人血清中的抗梅毒螺旋体抗体结合，产生 可见的凝集反应，具有较高的敏感性。明胶粒子为洋红
色，在操作部步上也较为方便，出结果较快。
TPPA/TPHA
实验室诊断的必要性
HSV实验室诊断的必要性
生殖器疱疹感染的临床表现变化多样，临床诊断的准 确性不足50%～70%，常常需要通过实验室检测手段来 证实 亚临床感染: 孕妇、性伴的检测等
进行HSV分型的必要性
HSV-2是该病的主要病原体，但近年来HSV-1所致生殖 器感染正在增多，约占该病的10%～40% 两型HSV感染的预后(复发性与复发频率)不同
+
+
+ --
-+
二、淋
病
概况-病原学
淋病是指由淋病奈瑟菌(Neisseria gonorrhoeae,简称淋球菌)引起的各种 化脓性感染，是一种经典的常见的性传 播疾病. 淋球菌为革兰阴性双球菌，大小约 0.6~0.8µm。通常成对生长，两菌接 触面平坦。
淋病的实验室诊断方法
直接显微镜检查；
革兰染色：多形核白细胞增多
美兰染色
直接显微镜检查的临床意义
男性淋菌性尿道炎的尿道标本 敏感性及特异性可高达95%～99%，具诊断价值。 宫颈标本、无症状男性尿拭子及取自直肠的涂片时 敏感性仅40～70%。
不推荐直接显微镜检查诊断直肠和咽部淋球菌感染。 亦不能用于疗后判愈。如果在多形核细胞外见到形态 典型的革兰阴性双球菌，需做培养进行确证。
非梅毒螺旋体血清试验原理示意图
检测方法-非梅毒螺旋体血清试验
性病研究实验室试验（VDRL） 不加热血清反应素试验（USR） 血浆反应素环状卡片试验（RPR） 甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）
检测方法-非梅毒螺旋体血清试验
RPR试验特点： 在USR试剂成分的基础上 加入黑色碳颗粒 作为沉 淀的指示物 用白色的硬纸片替代玻片 血清不需要灭活 不需要显微镜观测结果 可作定量试验 有现成的试剂盒 携带方便 操作简单 价格便宜 试验的结果可长期保存
核酸扩增检测
核算扩增检测具有很高的敏感性和特异性，世界卫生组织 已推荐为扩大的生殖道沙眼衣原体感染实验室诊断的“金 标准”。
核算扩增检测不仅可用于宫颈、尿道标本中沙眼衣原体的
检测，也可用于男女性尿液标本的检测。 开展核酸检测的实验室应通过有关部门考核取得开展临床
核酸检测技术资格证。
生殖器疱疹
+
Sheep red cell T.pallid um Sensitise d cell
+
Sensitise d cell Specific Antibody
Hemaggluti nation
检测方法-梅毒螺旋体血清试验
FTA-ABS
剂（用Reiter螺旋体制备而成）吸收过的梅毒患者血清形
其原理是将有完整形态的梅毒螺旋体作为抗原，加上经吸收
行动缓慢而有规律 - 围绕其长轴旋转中前后移动 - 伸缩其圈间之距离而移动 - 全身弯曲如蛇行
检测方法-病原体检查
梅毒螺旋体检查是诊断早期梅毒的最佳方法。
诊断一期梅毒、二期梅毒时，可取患者的渗 出液或淋巴结穿刺术得到的组织液，在暗视 野显微镜下观察螺旋体的特征性形态和运动 方式. 病原学检查的主要方法有暗视显微镜检查、 镀银染色法和直接荧光法
成抗原抗体复合物，再加入荧光素（FTIC）标记的抗人
免疫球蛋白，与抗梅毒螺旋体抗体结合，形成荧光的抗原 抗体复合物。在荧光显微镜下，螺旋体显出苹果绿色的荧 光，即为阳性反应。 FTA-ABS试验是检测梅毒的“金标准”试验。
检测方法-梅毒螺旋体血清试验的临床意义
作为非梅毒螺旋体抗原血清试验(如RPR等)初筛阳性标本 的确证试验。
检测方法-非梅毒螺旋体血清试验
甲苯胺红试验(TRUST)特点： 其原理和成分与RPR试验相同 用红色的甲苯胺红替代了碳颗粒 其余的特点均与RPR相同
检测方法非梅毒螺旋体血清试验临床意义
非梅毒螺旋体抗原血清试验方法简单、快速、敏
感性和特异性较好。适用于大量人群的筛查。 早期梅毒硬下疳出现1周-2周后，血清可呈阳性。 经治疗后血清滴度可下降并阴性，故可作为疗效 观察、判愈、复发或再感染的指征。
治疗前
一期
治疗后
早 期
二期
早期潜伏
晚 晚期潜伏 期 三期 阳性 阴性
梅毒血清学试验结果的临床意义总汇
USR RPR VDRL _ TPHA TPPA FTA-ABS _
意义
排除梅毒 一期梅毒的早期 艾滋病患者合并梅毒 现症梅毒(梅毒孕妇所生 的婴儿除外) 生物学假阳性 早期梅毒经治疗后 前带现象
淋球菌的鉴定特征
菌落形态
革兰染色
淋球菌样
革兰阴性双球菌
氧化酶试验
过氧化物酶试验
阳性
阳性
快速糖发酵试验
G+ L-
M- S-
淋球菌氧化酶阳性
生殖道沙眼衣原体感染生的微生物
衣原体有特殊的发育周期,可见2种不同的结 构 －原体：感染型，较小，呈球形 －始体：增殖型，大，呈圆形或卵圆形
分离培养淋球菌；
非培养技术检测淋球菌细胞成份如抗原 或DNA（EIA, PCR/LCR）
直接显微镜检查
染色方法: 革兰染液 美兰染液
姬姆萨染液
荧光抗体
革兰染色为一传统方法，因简便、快捷及价廉、仍然 为最广泛采用的方法。革兰染色将菌分为二大类，即染成 紫色的革兰阳性菌及染成红色的革兰阴性菌。
革兰染色：细胞内革兰阴性双球菌
2.
3.
暗视野显微镜检查
检测方法-血清学检测
根据检测所用抗原不同，临床血 清试验分为两大类：
1.非梅毒螺旋体抗原血清试验
2.梅毒螺旋体抗原血清试验
检测方法-非梅毒螺旋体血清试验
所有的非梅毒螺旋体血清试验的抗原基本 成分都一样,其基本成分是心磷脂 、卵磷脂 和胆固醇 抗原抗体结合形成复合物 凝集成网状沉淀 颗粒 被肉眼所见 敏感性和特异性都基本相似
沙眼衣原体感染-实验室检测
细胞培养
抗原检测试验
快速抗原试验
核酸扩增检测(NAAT)法
细胞培养
1.
2.
原理： 沙眼衣原体专性细胞内寄生，将其接种 于易于其感染的敏感细胞，在适宜培养条件 下，可在细胞中形成胞浆内包涵体，染色后 镜检可见。 方法： McCoy细胞或Hela229细胞单层包被96孔 微量板中小圆盖玻片；标本接种；培养。
检测方法-病原体检查的临床意义
1.
暗视野显微镜检查、镀银染色和荧光抗梅毒螺旋体单克 隆抗体等检查方法，直接镜检到梅毒螺旋体，在临床可 确诊梅毒，且具有快速、方便、易操作的特点。暗视野 显微镜检查已被世界卫生组织指定为性病实验室必备项 目之一。 螺旋体检查是诊断早期现症梅毒的最佳方法，对于患者 的早期诊断、及时治疗、预后和尽早切断传染源都有十 分重要的意义。 如未见到梅毒螺旋体，并不能排除患梅毒的可能性.
酶联免疫吸附试验
评 价
敏感性和特异性与直接免疫荧光法相似
敏感性：79－97％ 高 特异性: 97－99％ 高
试验结果阴性时，不能完全排除沙眼衣原体感
染，有可能是沙眼衣原体数量不足或标本采集
不当的缘故
抗原快速检测
试剂盒如Clearview Chlamydia（C-C），即立明 试验，为乳胶免疫扩散法。
淋球菌培养
培养法为诊断淋病的金标准. 对女性淋病的确诊应做淋球菌培养 从选择性培养基上分离出淋球菌即可诊断淋病。 培养的敏感性81~100%。 培养的优点有： — 特异性极高（100%）； — 可发现无症状淋球菌感染患者； — 可确诊儿童性虐待； — 可用于进一步作药敏试验； — 可用于治疗后的判愈试验。
检测方法-非梅毒螺旋体血清试验特点
前带现象
指非梅毒螺旋体抗原血清试验中，有时血清中 存在高浓度的抗体时出现的弱阳性、不典型或阴 性反应的结果，而临床上又象二期梅毒，此时将 血清稀释后再进行试验，出现了阳性的结果，该 现象称为前带现象。