新生儿溶血病筛查实验
新生儿溶血病检测标准操作规程
新生儿溶血病检测标准操作规程1.检验原理：本试验为将排阻层析和抗人球蛋白试验（COonIbS试验）相结合，即在微柱凝胶介质中，红细胞抗原与相应的不完全抗体在抗人球蛋白的作用下发生凝集反应，形成红细胞免疫复合物，在一定离心力下，该复合物不能通过凝胶间隙而浮于胶表面或悬于胶中；如无相应的不完全抗体结合，则不能形成红细胞免疫复合物，在一定离心力下，分散的红细胞可以通过凝胶间隙沉于微柱腔底部。
2.主要组成部分：本品系在聚丙烯塑料透明卡片上的六支微柱型管中填充葡聚糖凝胶和抗人球蛋白（多抗），制成抗人球蛋白检测卡，凝胶微管分为反应腔和凝胶分离柱两部分。
3.样本要求：3.1红细胞样本：采集被检对象静脉血，用EDTA抗凝，配制成红细胞悬液（直接抗人球蛋白试验配制成红细胞生理盐水悬液，间接抗人球蛋白试验配制成红细胞低离子溶液悬液（只适用于交叉配血和不规则抗体筛检）），红细胞最终浓度0.5%-0.8%o3.2血清样本：采集被检对象静脉血，放入含有兔脑粉或者其他促凝剂的试管中，10分钟后离心，取上清；或者静脉血采入无抗凝剂试管中，4℃放置12小时，或者37℃放置2小时后离心，20OrPmlO分钟，取上清该上清不得有絮状物或沉淀。
血清标本必须充分去蛋白，否则标本中析出的或红细胞悬液中残余的纤维蛋白可阻碍红细胞沉降，使非凝集细胞离心后在胶表面形成一条红线，呈假阳性反应。
4.检验方法4.1.准备工作1）微柱凝胶检测卡的准备：观察外观，如有干胶、杂质、气泡不可使用，之后将卡平衡至室温（18—25℃）,再用专用离心机离心5分钟。
2）标本采集：用EDTA抗凝管采集被检对象脐带血或静脉血，制备成红细胞标本和血浆标本。
3）红细胞悬液的制备：将被检者红细胞标本至少洗涤4次，取被检者压积红细胞10微升，加入1毫升红细胞稀释液或生理盐水，外观应为均匀淡红色,无絮状物和血块。
4）血浆标本的处理:将被检者血浆标本进行离心,采用3000r∕min离心3min或3500r∕min离心2min（不得有絮状物或沉淀）。
新生儿溶血病(HDN)的免疫血液学实验
(2)放散： OC（+）； BC（+）：！ AC（+）: AC（+）,BC（+
注意：游离（+）：表明血浆中有Ab 放散（+）：表明Ab粘上RBC， 4.儿如为B型， 同样方式分析结果.
三项试验结果综合分析 直抗 + + + + 游离 + + + + 放散 + + + + -
有Ab，致敏儿RBC
直抗假阳性? 有Ab（可能Ag弱）未粘RBC 直抗假阴性，有Ab，粘RBC，血清中残余 直抗假阴性，Ab全粘RBC 有Ab,全粘RBC 有Ab,未粘RBC,
(六)产前检查结果分析 1.试管法有IgG ABO Ab 43.1% 2. 试管法IgG ABO Ab 效价≤64占 66.8%，≥512占5.6% ,
≤32 HDN% 2.6 64 10.4 129/256 21.3 512-1024 38.9 ＞1024 42.9
3.Rh，抗-D＞32，便可能生成严重HDN
3.HDN 产前检查不属急诊 4. IgG ABO 抗体太高者,慎报!:
(五)产前检查报告格式 姓名——，胎次——，妊娠月——，采血时间——， 送检单位—— 一、血型 ABO Rh 妻 夫 二、妻血清（含/ 无）免疫性ABO抗体， （抗 -A /B）效价—— 三、妻血清抗体筛选（+/- ）; 抗（ ）效价——
四. 发病过程 1.胎母出血 2.免疫产生的抗体是IgG,分子量小, 可以通过胎盘 3. O型人(妻) 容易发病 4. RhD致敏血量：
5. 注意 RhD(-)女性“婚前”因人流, 可能产生抗体 “未婚”女性人流前查RhD，
五.临床特点 1. ABO HDN 占85.3% ; 夫A（49.6%）＞夫B（35.7%） 与胎次无关: ①胎儿血型O？ ②儿RBC Ag成熟？ ③分泌型 血型物质中和 ？ ④IgG亚类？
新生儿溶血病(HDN)免疫血液学试验标准检测流程
HDN换血治疗中血液及血型选择标准
❖ 二、ABO、Rh（D）血型鉴定
❖⒈ 选用经国家批准且批批检测合格的 单克隆抗-A、抗-B、抗-D(IgM)和A、B 型标准试剂红细胞。
❖⒉ ABO血型鉴定：母亲血样做正反定型； 患儿血样只做正定型。推荐使用试管法 和微柱凝胶血型卡，不推荐使用纸片或 玻片法。
HDN换血治疗中血液及血型选择标准
HDN产前免疫血液学试验检测标准
❖ （1）第一次检测，一般可在妊娠第1216周进行，以此作为抗体基础水平。如 果检测到ABO以外抗体，或高效价的IgG 抗A（B）抗体，建议每月复查一次。
❖ （2）第二次检测在妊娠28-30周做，以 后每隔2-4周重复测定一次，了解抗体 增加速度。抗体效价上升快，提示HDN 的可能性大。
❖ 二、证实患儿血清中是否有来自于 母亲的抗体；
❖ 三、患儿红细胞是否被来自母亲的 免疫性抗体所致敏。
HDN产后免疫血液学试验检测标准
❖ 一、标本要求 ❖ ⒈ 采样时间建议： ❖ （1）可疑ABO不合HDN患儿血清学
检查最好在出生后1-7天之内； ❖ （2）可疑Rh等其他血型系统血型
不合应在出生后尽早为好。
❖ 二、试剂与设备（查看Word文件） ❖ 三、检测方法 ❖ ⒈ 产妇血样检测： ❖ 同《HDN产前免疫血液学试验》孕妇血
样检测条目。 ❖ ⒉ 患儿血样检测： ❖ （1）红细胞：ABO正定型、RhD血型
HDN产后免疫血液学试验检测标准
❖ 说明：新生儿ABO定型，多数专家 认为反定型没有意义。
❖ （2）红细胞直接抗人球蛋白试验 （DAT）：
国内外进展 ❖⒉ 研讨：
（1）研讨内容： ① 样本采集 ② 实验项目及操作 ③ 结果判定或解释
输血科新生儿溶血病血型血清学检查标准操作规程
输血科新生儿溶血病血型血清学检查标准操作规程1、目的：规范血液免疫学产前检查操作，确保试验过程及结果的准确性与可靠性。
2、范围：本规程适用于实验室血液免疫学产前检查试验操作。
3、职责：经授权的血型实验室试验人员负责血液免疫学产前检查试验过程及报告的发出。
4、原理孕妇和丈夫ABO血型不合（O/A、O/B、O/AB、A/B、A/AB、B/A、B/AB）时，孕妇体内的IgG抗A（B）可能会引起新生儿溶血病的发生。
本试验通过检测孕妇血清中有无IgG性质的抗A（B）抗体及其效价（应用巯基试剂破坏IgM抗体，检测IgG抗体效价）即可预测ABO系HDN发生的可能性。
应用筛选红细胞可检测孕妇血清中是否存在不规则抗体，如果存在，应用谱细胞进行抗体鉴定，确定抗体的特异性，进一步检测非ABO系新生儿溶血病。
5、所需设备、材料或试剂：37℃恒温水浴箱、细胞洗涤离心机、抗-A抗-B血型定型试剂（单克隆抗体）、抗-D RH血型定型试剂（单克隆抗体）、凝聚胺介质试剂、抗人球蛋白试剂（抗-IgG、C3d）、（A、B、O）型标准红细胞悬液（2—5%）、商品化筛选细胞、谱细胞、2—ME试剂、12×75mm试管、塑料滴管。
6、检测环境条件：温度：18—25℃；湿度：30—70%7、标本要求7.1标本接收在接收标本时，应尽可能的了解、核对、记录患者的相关资料，包括受血者姓名、年龄、性别、临床诊断、输血史、用药史、妊娠史、标本编码等；7.2检验人员收到被检者产前检查申请按照申请单内容在试管上做标记(用记号笔在试管上标明被检者姓名、性别)，保留申请记录。
7.3按照要求进行血液采集。
将采好的血液沿试管壁注入已标识的抗凝试管中，反复颠倒混匀，放入2-8℃冰箱待用。
并填写《外来标本交接记录》及相关记录。
7.4标本的种类与数量：产前检查需送夫妇血样，血样均需抗凝（EDTA抗凝），女（母）5ml，男3ml。
7.5标本的保存与处理：完成所有试验内容后，要仔细核对实验结果，发出实验报告后，将实验所用的标本原始送检管存于2-8℃冰箱内至少7天以便进行查找和核对，之后交由单位相关部门统一处理。
新生儿溶血病检测卡标准操作程序(SOP)
新生儿溶血病检测卡标准操作程序（SOP）一、准备工作（一）微柱凝胶试剂卡的准备：观察外观，如有干胶、杂质、气泡不可使用，之后将卡放置室温（18－25℃）平衡，再用专用离心机离心5分钟。
(二)试剂的制备：6%牛血清白蛋白（盐水稀释）（三）标本采集：采集被检对象静脉血，将该同一人血液分别制备成红细胞标本和血清标本。
（四）红细胞标本的制备：用红细胞稀释液配制红细胞悬液，红细胞最终浓度为0.8%－1％。
（五）血清标本的制备：将被检者静脉血采入含兔脑粉或其它促凝剂的试管中，10分钟后离心，取上清；或者将被检者静脉血采入无抗凝剂试管中，4℃放置12小时，或37℃放置2小时后离心，2000rpm，10分钟，取上清。
该上清不得有絮状物或沉淀。
（六）放散试验：1、充分洗涤红细胞至少三次，取同体积洗涤后的压积血和6%牛血清白蛋白混匀，置于56℃孵育10分钟，期间不断摇动，离心1000rpm，2－3分钟，取上清。
即放散液。
2、充分洗涤红细胞至少三次，用博讯公司生产的酸性放散试剂盒做室温放散。
参见酸性放散试剂盒使用说明书。
二、实验步骤1、取新生儿的红细胞0.8%－1％悬液50ul分别加入卡1中的1－6孔中。
2、使用专用离心机离心5分钟，900rpm 2分钟，1500 rpm 3分钟。
3、取出，判读结果。
4、第二卡1－3孔分别加入50ul新生儿血清，4－6孔分别加入50ul新生儿红细胞放散液。
5、将A型红细胞悬液50ul分别加入1号、4号；将B型红细胞悬液50ul分别加入2号、5号；将O型红细胞悬液50ul分别加入3号6号孔中。
6、37℃孵育15分钟。
7、取出，使用专用离心机离心5分钟（900rpm2分钟，1500 rpm3分钟），取出，判读结果。
结果判定阳性结果：红细胞凝集块位于凝胶表面或凝胶中。
表明被检者血清中含有对应其抗原的抗体或血细胞被致敏。
阴性结果：红细胞完全沉降到凝胶底部，在凝胶管底部形成红细胞扣。
表明血清中无相应抗原免疫的抗体或血细胞没有被致敏。
浅析新生儿溶血三项检测
等核 黄疸 症状 。
．
３ 诊 断鉴别
母 亲有过 流产 、死胎 、输血 史 ，或兄姐 患过新 生儿溶 血
病者 ，母 婴血型 不合 ，尤其母 为 Ｏ型者 。
新生 儿先 天性水 肿 ，面色苍 白，生 后数小 时至 ３ ６小 时
内出现黄疸 ，呈 进行性 加重 ，呼吸急促 ，心跳增 快 ，肝脾肿 大 。
黄疸 严重 者可 出现嗜 睡 、尖 叫 、反应 差 、角 弓反张 、惊
厥等 核黄疸 症状 。
血像 ：轻 到重度 贫血 ，血红 蛋 白 ＜１ ４ ５ ｇ／Ｌ，重 型
者有 核红 细胞 ） １ ０％ ，网织 红细胞 增加 。
胆红 索 ）２ ０ ５．２ Ｕ ｍ Ｏ ｌ／Ｌ （）１ ２ ｍ ｇ／ ｄ １），
０ 引言
新 生 儿 溶血 三 项是 筛 查 母 婴 ＡＢ０血型 不 合造 成 的新 生
儿 溶血病 （ＡＢＯ—ＨＤＮ）的产 后检测 系统 。游离抗 体试验 有助
于观 察 疾病 的发 展 趋势 和 治 疗 ，若有 游 离 抗 体 ，提示 病 情
严 重 ，游离抗 体试 验 ｌ项 阳性 只 能作为参 考 而不 能作为诊 断
有 明显 的水肿 、贫血 。
１ 相 关 病 因
新 儿溶 血 病是 指母 婴 血 型不合 引起 的同族 免疫 性溶 血 。
其 中 以Ａ Ｂ Ｏ血 型不合最 常见（母 Ｏ型 ，胎 儿 Ａ或 Ｂ型最多 ），
母 Ａ或 Ｂ型 ，胎儿 Ｂ、Ａ Ｂ型或 Ａ、Ａ Ｂ型较少见 。 Ｒ ｈ血
型 不合 （母 Ｒ ｈ阴性 ，胎儿 Ｒ ｈ阳性 ）溶 血在 我 国少见 。Ａ
白 （ＩｇＧ）单 特 异检 测试 剂卡 内分 别加 入患 儿红 细胞 、释放 液 及 血浆 ，通过 离 心 ，玻 璃珠 会 阻 挡住 已经 发生 凝 集反 应 的 红 细胞 ，而没 有 凝集 的红 细胞 则 可 通过 玻 璃珠 的缝 隙 到达 微柱 的底 部 ，用 以检查 患儿 体 内红 细胞 是 否 已被 ＩｇＧ型 抗 体所致 敏 ，及 患儿 血浆 中有无 游离 ＩｇＧ型抗体 …。
新生儿溶血病检测作规程
新生儿溶血病检测操作规程一、项目名称、检验方法名称1.项目名称：新生儿溶血病检测（包括直接抗人球蛋白试验、游离试验和放散试验三项）2.检验方法名称：柱凝集二、方法学原理该试剂卡是基于柱凝集的原理而设计。
正常具有抗原的人红细胞将与相应的抗体发生凝集反应，BioVue血型诊断试剂卡的微柱中含有玻璃珠介质和试剂。
加入红细胞并将试剂卡离心后，发生凝集的红细胞会被阻挡在玻璃珠的上面，而未凝集的游离红细胞则会在离心力的作用下通过玻璃珠之间的间隙到达微柱的底部。
三、试剂卡品牌、代号、包装规格、内含物1.试剂卡品牌：美国强生奥索2.代号：BioVue-po1yCassettes3.包装规格：400卡/箱试剂卡（707300）；100卡/箱试剂卡（707350）4.试剂成分:抗人球蛋白（1gG,C3b∕C3d）检测卡有6根微柱组成，每一柱中含有缓冲液,其成分为牛血清蛋白，大分子增强剂以及0.1%叠氮钠,0.0IM的EDTA.成分描述第1〜6柱：抗人球蛋白、抗抗一IgG（兔）-IgG.-C3d；多特异性抗一C3b（鼠单克隆）（克隆F7G3）抗一C3d（鼠单克隆）（克隆C4C7）FD&C1#蓝色染料FD&C5#黄色染料5.试剂的储存与效期：储存条件：2〜25。
C环境保存。
请勿将试剂存放在自动除霜的冰箱中，也不要冷冻保存。
并且不要放在离热源（如孵育箱、辐射器、大型设备、冰箱、冰柜等）很近或阳光直射的地方。
效期：试剂盒上有记载四、仪器品牌、型号BioVUe专用离心机；BiOVUe专用孵育器五、样本的采集与准备：在采集标本前对病人/献血者无特殊要求。
含有或不含有抗凝剂的标本均可使用。
标本采集后应尽快进行检测。
如果实验不能立即进行，应将标本置于2—8。
C保存。
六、试剂准备：抗人球蛋白（IgG,C3b∕C3d）检测卡为即用型产品。
试剂卡应在铝箔开启后一小时内使用。
试剂卡经过运输颠簸后，需倒置一下，然后重新离心以备用。
新生儿溶血病产前检测新版
新生儿溶血病产前预测1.夫妻血型鉴定（ABO/RhD血型定型检测试剂卡）(1)将丈夫、妻子样本以3000转1分钟离心；(2)取ABO/RhD血型定型检测试剂卡做好标记；(3)用生理盐水将待检者红细胞配置成0.5-0.8%浓度红细胞悬液(8微升压积红细胞加入1毫升生理盐水，尽量吸取中上层压积红细胞)；(4)将反定试剂Ac、Bc红细胞按1:4比例稀释至0.5-0.8%浓度（可根据用量同比例增加稀释）；(5)将配置好的待检者红细胞悬液分别加入第1、2、3、6孔中，每孔50ul；(6)将稀释好的反定试剂Ac、Bc红细胞悬液分别加入第4、5孔中，每孔50ul；(7)将待检者的血浆分别加入第4、5孔中，每孔25ul（加血浆时把卡转过90度角，避免交叉污染，尽量吸取中上层的血浆）；(8)置于离心机5分钟；(9)取出观察，判定结果。
2.孕妇血浆抗体筛查（抗人球蛋白（抗IgG+C3d）检测卡）I II III妻子姓名(1)将孕妇样本以3000转1分钟离心；(2)取抗人球蛋白（抗IgG+C3d）检测卡，分别标记Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ；(3)用生理盐水将抗筛细胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ，按1:3比例分别稀释至0.5-0.8%浓度（可根据用量同比例增加稀释）；(4)向Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ每孔按照标记加入抗筛细胞悬液各50ul；(5)向Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ每孔中分别加入孕妇的血浆25ul（加血浆时把卡转过90度角，避免交叉污染，尽量吸取中上层血浆）；(6)将抗人球蛋白（抗IgG+C3d）检测卡置于孵育器中37℃孵育15分钟；(7)孵育完成后置于离心机中离心5分钟；(8)离心结束后，取出观察，判定结果。
3.妻子（孕妇）IgG抗体效价测定（1）取一支洁净试管，加入200µl母体血浆和200µl DTT（IgM灭活液）溶液，混匀，然后置于37℃水浴30~60分钟，以充分破坏血浆中IgM类抗体；（2）取2支洁净试管，标记好Ac、Bc，向2支试管中分别加入反定细胞Ac、Bc各50ul，然后再向2支试管中加入已经灭活的血浆各100ul；摇匀观察是否凝集，来判定孕妇血浆中IgM类抗体灭活是否完全；（3）孕妇血浆灭活完全后，取6支洁净试管，分别按1~6数字做好标记，将灭活充分的血浆按下列方式做倍比稀释；1号试管加入350µl生理盐水，2~6号试管分别加入200µl生理盐水；（4）将准备好的抗人球蛋白（抗IgG+C3d）检测卡做好标记（16、32、64、128、256、512），在所有孔中分别加入50µl父亲（或与父同型）的0.5-0.8%红细胞悬液；（5）在所有孔中分别对应加入不同梯度的稀释液25ul；（如果孕妇抗筛结果为阳性，则还需增加不规则抗体细胞的效价测定，实验方法相同，只需将父亲红细胞替换成抗筛阳性的抗筛细胞）；（6）将抗人球蛋白（抗IgG+C3d）检测卡置于孵育器中37℃孵育15分钟；（7）孵育完成后置于离心机中离心5分钟；（8）离心结束后，取出观察，判定结果。
探讨不规则抗体导致的新生儿溶血病实验室检查及临床输血策略
探讨不规则抗体导致的新生儿溶血病实验室检查及临床输血策略不规则抗体导致的新生儿溶血病是一种严重的疾病，对新生儿的健康产生极大的威胁。
实验室检查及临床输血策略在治疗这种疾病中起着至关重要的作用。
本文将探讨不规则抗体导致的新生儿溶血病实验室检查及临床输血策略。
新生儿溶血病是指母体产生的抗体在胎儿或新生儿体内引起溶血反应的一种疾病。
引起新生儿溶血病的原因有多种，其中不规则抗体导致的疾病占多数。
母体产生的不规则抗体可以穿过胎盘，对胎儿的红细胞产生溶血作用，导致新生儿贫血、黄疸甚至死亡。
对不规则抗体引起的新生儿溶血病进行实验室检查及临床输血策略至关重要。
一、实验室检查1. 胎儿或新生儿血液学检查对于疑似患有不规则抗体导致的新生儿溶血病的胎儿或新生儿，首先需要进行血液学检查。
这包括血常规、血红蛋白电泳、红细胞比容、红细胞计数等指标的检测。
这些检查可以帮助医生了解胎儿或新生儿的贫血程度以及溶血的情况，为后续的治疗提供依据。
2. 母体血液学检查对于患有不规则抗体的孕妇，需要进行母体血液学检查，包括血型、Rh因子和不规则抗体的筛查。
只有在母亲体内发现不规则抗体后，才能判断是否会对胎儿产生影响，进而进行相应的治疗。
3. 脐带血检测在新生儿出生后，还需要进行脐带血的检测，包括血型、Rh因子和不规则抗体的筛查。
这些检测可以帮助医生了解新生儿的血型情况以及是否受到母体不规则抗体的影响。
二、临床输血策略1. 选择合适的输血产品对于因不规则抗体引起的新生儿溶血病患儿，需要选择合适的输血产品进行治疗。
通常情况下，需要给予红细胞悬液进行输血，以补充患儿身体内失血造成的贫血。
2. 血液制品的选择在选择输血产品时，还需要考虑患儿体内的抗体情况。
如果母亲体内的不规则抗体对特定的血型抗原产生作用，需要选择相应的血型相容的输血产品进行输血，以减少溶血反应的发生。
3. 精准输血对于新生儿溶血病患儿，需要进行精准的输血管理。
在输血前，需要进行严格的血型鉴定和交叉配血，确保输血产品的血型和Rh因子与患儿相容，避免再次引起溶血反应。
新生儿溶血六项解读
新生儿溶血六项解读新生儿溶血是指母子血型不合，母亲体内产生针对胎儿红细胞的免疫抗体，从而引起胎儿溶血性贫血。
为了确诊新生儿溶血，需要进行一系列的实验室检测，其中六项检测是最为常见的。
本文将对这六项检测进行详细解读。
一、直接抗人球蛋白试验直接抗人球蛋白试验是用来检测新生儿红细胞上是否存在IgG 抗体。
如果试验结果为阳性，则说明新生儿红细胞已被母亲的免疫抗体攻击，是诊断新生儿溶血的重要依据。
二、游离抗体检测游离抗体检测是用来检测新生儿血清中是否存在IgG抗体。
如果血清中存在游离的IgG抗体，则说明胎儿可能已经产生了免疫反应，这也为诊断新生儿溶血提供了依据。
三、抗体释放试验抗体释放试验是用来检测母体血清中是否存在能够攻击胎儿红细胞的抗体。
如果试验结果为阳性，则说明母体已经产生了针对胎儿红细胞的免疫抗体，可能导致胎儿溶血性贫血。
四、红细胞血型抗原抗体检测红细胞血型抗原抗体检测是用来检测母体血清中是否存在针对胎儿红细胞抗原的抗体。
如果试验结果为阳性，则说明母体已经产生了针对胎儿红细胞抗原的免疫抗体，可能导致胎儿溶血性贫血。
五、血清学诊断方法血清学诊断方法是用来确诊新生儿溶血的方法之一。
通过检测母体血清中抗体的类型和效价，可以判断胎儿是否会发生溶血性贫血，以及病情的严重程度。
六、其他相关检测除了以上五项检测外，还有一些其他相关检测可以帮助诊断新生儿溶血，如血红蛋白电泳、高铁血红蛋白还原试验等。
这些检测可以帮助医生判断胎儿是否患有溶血性贫血，以及贫血的程度和类型。
总之，新生儿溶血的六项检测是确诊该疾病的重要手段。
通过这些检测，医生可以了解胎儿是否发生溶血性贫血、病情的严重程度以及病因，从而制定出合适的治疗方案。
新生儿溶血病相关实验室检测的结果分析
新生儿溶血病相关实验室检测的结果分析【摘要】目的对疑为新生儿溶血病患者，采集血样，进行直接抗人球蛋白试验、红细胞抗体释放试验、血清中游离抗体试验。
探讨ABO血型不合引起新生儿溶血病的血型分布规律，为临床提供ABO HDN的诊断依据。
方法应用微柱凝胶法2010年8月至2012年10月可疑为新生儿溶血病患者血样进行溶血三项试验，同时鉴定患儿及其母亲血型，参考患儿父亲血型，对检验结果进行分析。
结果放散试验结果总阳性率23.52 %，其中ABO血型系统中A型72 例，阳性率41.66%。
B型98例，阳性率1020%。
AB型8 例，阳性率0 %。
Rh血型系统母亲为Rh阴性，患儿为Rh阳性者未检出阳性患儿。
结论直接抗人球蛋白试验阳性率低于其他文献报道，A型和B型红细胞抗体释放试验阳性率有不大的差异。
结合其他实验室检查，为临床提供早期诊断依据。
【关键词】新生儿溶血病；血型；诊断1 资料与方法1.1 一般资料2010年8月至2012年10月可疑为新生儿溶血病，出现高胆红素血症的患儿，采集血样后进行直接抗人球蛋白，游离试验，释放试验溶血三项试验，同时检测血清中的不规则抗体。
其中男98人次，女112 人次，出生后20 min～10 d内的患儿。
1.2 试剂与仪器微柱凝胶卡长春博讯生物技术有限公司，ABO血型试剂够自上海生物医药有限公司，标准ABO红细胞悬液购自长春博德生物技术有限公司，BASO专用离心机及孵育器。
1.3 方法试管法ABO血型正定型，微柱凝胶法进行直接抗人球蛋白试验、红细胞抗体释放试验、血清中游离抗体试验。
1.4 结果判断①母婴ABO血型不合。
②溶血试验三项同时阳性判为阳性。
③释放试验阳性判为阳性。
④直接抗人球蛋白阳性，游离抗体试验一或两项阳性，应结合患者实际情况分析。
2 结果3 讨论放散试验结果总阳性率23.52 %，其中ABO血型系统中A型72 例，阳性率41.66%。
B型98例，阳性率1020%。
检测溶血的实验方法
检测溶血的实验方法
溶血是指红细胞受到外界因素（如某些化学物质、高温、低温等）的作用而发生破裂。
以下是一种常用的溶血实验方法：
1. 准备两个试管，标记为A和B。
2. 向试管A中加入一定量的溶血试剂（如甲醇、乙醇、高渗
盐水等），并标注所加入试剂的浓度。
3. 向试管B中加入相同体积的生理盐水，作为对照组。
4. 从被检测样本中获得一定量的红细胞悬液，并将其分别加入试管A和B中，使红细胞浓度保持一致。
5. 轻轻摇匀试管A和B中的溶液，并放置在适当的温度条件
下（如37°C，室温等）孵育一段时间。
6. 孵育结束后，观察试管A和B中溶液的颜色变化和透明度。
7. 如果试管A中的溶液发生明显的变色和混浊，而试管B中
的溶液保持不变，则说明红细胞发生了溶血。
需要注意的是，由于溶血可能受到多个因素的影响，为了得到准确的结果，可以同时进行多个试验，采用不同的溶血试剂和温度条件，并对照对照组进行比较。
此外，也可以通过测定溶血程度的方法（如测定溶血率、半溶血浓度等）来定量评价溶血情况。
溶血实验实验报告（范文2篇）
溶血实验实验报告（范文2篇）以下是网友分享的关于溶血实验实验报告的资料2篇，希望对您有所帮助，就爱阅读感谢您的支持。
溶血实验实验报告（1）溶血实验报告溶血试验实验报告补体溶血反应实验分析篇一:细胞渗透性实验姓名系年级组别同组者科目细胞生物学实验题目细胞渗透性实验学号一、实验目的1.了解溶血现象及其发生机制2. 了解细胞膜的渗透性及各类物质进入细胞的速度。
3.掌握估测、比较各类物质进入细胞速度的方法。
二、实验原理细胞膜是细胞与环境进行物质交换的选择通透性屏障，是一种半透膜，可选择性地控制物质进出细胞。
将红细胞放在低渗溶液中，水分子大量渗透到细胞内，可使细胞胀破，血红蛋白释放到介质中，溶液由不透明的红细胞悬液变为红色透明的血红蛋白溶液，这种现象称为溶血。
由于溶质渗透入细胞的速度不同，溶血的时间也不同，因此，发生溶血现象所用的时间长短可作为测量物质进入红细胞速度的一种指标。
影响物质穿膜能力大小的因素主要有三个:一是物质脂 1溶性的大小，因为膜骨架是有脂双层分子构成的，所以脂溶性物质易于穿过细胞膜;二是分子体积大小，较小的分子易穿过细胞膜;三是物质带电状况，因为细胞表面一般带电，不带电的物质易进入细胞。
判定细胞溶血不溶血的方法:溶血的溶液红的程度更高，且溶液发亮，透明度也更高。
二是可以在显微镜下观察细胞的形态。
细胞破裂后细胞形态并没有发生很大的变化，而是膜结构上有一个小口，膜还是有结构的，只不过体积变小了。
需要说明的等渗溶液中细胞也会是破裂的，因为生活状态下膜两侧不断交换物质，代谢产物的积累使细胞渗透压的平衡破坏，同时有些代谢物质对细胞是有毒性的，所以长时间放置会使细胞破裂，所以做等渗实验时间不宜超过1h。
本实验选用红细胞作为细胞膜渗透性的实验材料，将其放入不同的介质溶液中，观察红细胞的变化。
三、实验材料试剂:鸡血，0.85%氯化钠溶液，0.0085%氯化钠溶液，0.8mol/L甲醇，0.8mol/L丙三醇，6%葡萄糖溶液，2%Triton X-1001姓名系年级组别同组者科目细胞生物学实验题目细胞渗透性实验学号用具:显微镜、粗天平、载破片、盖玻片、滴管2支、离 2心管2支、离心机、9试管、磁力搅拌器。
新生儿溶血病血清学检查标准操作规程
新生儿溶血病血清学检查标准操作规程(一)检验目的检测孕妇产前与其丈夫ABO及Rh血型相容性、孕妇IgG 抗体效价、产后新生儿体内不相容抗体存在情况、新生儿与产妇之间血型相容性，为新生儿溶血病的预防、诊断及治疗提供可靠的实验室依据。
(二)检验原理新生儿溶血病是由母婴血型不合，母亲体内与新生儿红细胞抗原不配合的IgG性质的血型抗体进入新生儿体内，破坏新生儿或胎儿红细胞而引起，可发生在胎儿期和新生儿早期，溶血严重者可出现死胎而流产，存活者则有不同程度的新生儿黄疸。
新生儿溶血病产前诊断方法主要包括检测胎儿父母的ABO及Rh血型、孕妇不规则抗体筛查、外周血抗A ／抗B或Rh抗体效价来判断新生儿溶血病发生的可能性及严重程度；新生儿溶血病产后诊断主要包括母子ABO及RhD 血型鉴定试验、新生儿标本三项试验，为临床诊断及进一步采取治疗手段提供可靠的依据。
(三)适用范围适用于新生儿溶血病产前、产后血型血清学试验。
(四)设备性能参数参见血清学专用离心机、达亚美ID离心机、达亚美ID 孵育器、强生Ortho BioVue离心机及各全自动血型／配血系统使用说明书。
(五)器材与试剂1.器材血清学专用离心机、达亚美ID离心机、达亚美ID 孵育器、强生Or-tho BioVue离心机、塑料软试管、塑料硬质试管(75mmXl2mm)、试管架、一次性塑料滴管、记号笔、移液枪、一次性移液枪头。
2.试剂DiaMed ABO／RhD血型卡、OrthoBioVueABO ／RhD血型卡、抗A、抗B血清、Rh分，型血清、生理盐水、抗球蛋白试剂(市售单克隆)、抗体筛查试剂红细胞、抗体鉴定试剂红细胞、致敏的阳性对照细胞(自制)。
(六)标本要求1.夫妇标本EDTA-K2或EDTA-K3抗凝全血≥3ml(手工操作时也可以使用不抗凝标本)，经B600-A型离心机在 1 760g条件下，离心5分钟，离心后无溶血及明显乳糜。
2.患儿标本EDTA-K2或EDTA-K3抗凝全血≥3ml(手工操作时也可以使用不抗凝标本)，经B600-A型离心机在 1 760g条件下，离心5分钟，离心后无明显乳糜。
128 例新生儿溶血病实验室检测结果分
健康域检验128例新生儿溶血病实验室检测结果分析庞立坤（北京市房山区良乡医院北京102488）【摘要】目的：对新生儿溶血病实验室检查的结果展开分析，导致新生儿溶血病血型分布和实验室溶血病相关检测的重要性，为新生儿溶血病诊断提供参考依据。
方法：对新生儿A B O血型、Rh血型进行检测，并开展直接抗人球蛋白试验，游离与放散试验及不规则抗体筛查试验均通过微柱凝胶法完成。
结果：1.不规则抗体筛查试验结果均为阴性，说明此次实验的受检对象排除了发生A B O血型系统以外其他血型系统溶血病的可能，说明新生儿溶血病以A B O血型系统溶血病为主。
2.A B O血型不合引起的新生儿溶血病，母亲血型O型，患儿血型以A型和B型为主，而患儿又以A型发病率最高。
3.日龄在7天以下的新生儿出现溶血的检出率高于7天以上新生儿，相互间比较无显著统计学差异，>0.05。
4.128例受检新生儿里游离抗体试验+抗体放散试验组合的阳性检出率最高。
结论：A B O血型不合导致的新生儿溶血在各血型系统导致的新生儿溶血病中占比最高，同时日龄越低，新生儿溶血病的检出率越高；对于临床初步诊断疑似新生儿溶血的病例加强实验室相关检测，能够为新生儿溶血病的诊断以及治疗提供可靠依据，更好地保障母婴健康。
【关键词】新生儿溶血病；实验室检测；结果新生儿溶血病即因母子血型不合，母亲体内产生与胎儿血型不相容血型抗体，而此抗体由胎盘至胎儿体内并出现同族免疫性溶血[1]。
AB0血型不合所致的新生儿溶血病在人类多种血型系统里最为常见，R h血型不合所致的新生儿溶血病发生率非常低。
有资料显示，所发生的新生儿溶血病里，AB O溶血病占比是85.3%，R h溶血病占比是14.6%，MN溶血病占比仅0.1%。
并且所有妊娠里，大概约15%概率会出现AB O血型不合的现象，而出现新生儿溶血病的概率为4%，这在临床相关科室引起了高度重视[2]。
新生儿溶血的典型症状表现为贫血、黄疸、肝脾肿大等，病情严重的情况下会发生水肿、核黄疸后遗症，最终可能因病情控制不佳而死亡[3]。
新生儿溶血病检测操作SOP
新生儿溶血病检测操作SOP一、产前诊断1、夫妇血型检测(微柱凝胶检测法:ABO、Rh(D)血型定型检测卡)1、1将红细胞稀释至1% 红细胞生理盐水悬液;1、2撕开微胶卡的封膜,于正定管蓝A、黄B、灰D、Control微柱管反应腔中加入1% 待检 RBC 生理盐水悬液各50μl;于反定管白色A、B、O、自身管分别对应加入1、0% A1、B、O型试剂红细胞与待检红细胞生理盐水悬液50μl,再分别加入待检血浆(血清)50μl;1、3将检测卡室温反应≥10 min,取出,置离心机1000r/min 2min,1800r/min 3 min离心;1、4取出,判定结果(凝集强度判断详见结果判定示图)。
2、孕妇抗体效价的测定(微柱凝胶检测法:抗人球蛋白检测卡)2、1孕妇IgG(抗A/抗B)效价2、1、1取待检血清与2-Me(二巯基乙醇)应用液各0、2ml,充分混匀,37℃水浴2小时(以充分破坏血清中的IgM类抗体)。
2、1、2取4支干净试管排于试管架上;将第一管加入50微升中与血清与1、6毫升低离子介质(原液为1:1稀释,此时稀释倍数为原液的64倍)。
2、1、3 第2－4管中分别加入400微升低离子介质;从第一管中吸出400微升的液体加入第二管,混匀,在从第二管吸出400微升加入第三管混匀,依次倍比稀释。
2、1、4取抗人球蛋白检测卡,撕去铝箔,在4管中个依次加入倍比稀释好的灭活血清50微升与1％的标准红细胞(或父亲红细胞)低离子介质(LIM)悬液50微升。
2、1、5将加好样的检测卡入生科孵育器中孵育15分钟。
2、1、6将孵育好的检测卡放入生科离心机中离心5分钟(1000r/min 2 min,1800r/min 3 min),(离心必须在加样后30分钟内进行)2、1、7取出,判定结果(凝集强度判断详见结果判定示图)临床参考值:孕妇IgG(抗A/抗B)效价≤64。
2、2孕妇IgG(抗D)效价测定2、2、1 确定孕妇为RhD阴性,丈夫为RhD阳性。
溶血全套实验操作规程
溶血全套实验操作规程一, 抗碱血红蛋白（HbF）测定1.取抗凝血1-2ml, 用等渗盐水离心沉淀, 洗涤红细胞3-4次, 将洗涤后的红细胞按沉淀体积加1.5倍蒸馏水和半量四氯碳, 用力震荡混合5-6分钟, 使红细胞完全溶解后离心20分钟, 上层即为100g/lHb液.2.对照管: 100g/lHb液0.02ml, 再加5ml蒸馏水, 混匀.3.测定管: 100g/lHb液0.1ml, 加入预温至25℃的0.083M的KOH1.6ml，同时开动秒表，混匀数秒钟，至1min整，立即加入酸性半饱和硫酸铵溶液3.4ml，倒转混匀，过滤取上清夜。
4.分光光度计540nm，蒸馏水调零，分别测两管光密度。
HbF%=测定管光密度/（对照管光密度X5）X1005.正常人1.0-3.1%，新生儿55-85%，一岁后接近正常人。
二，异丙醇试验1ml7%异丙醇溶液，置有塞试管中，37℃水溶液预热数分钟后，加入0.1mlHb(10%)溶液，加塞混匀，计时观察，同时做正常对照。
若放在37℃水溶液中，5min出现浑浊，40min 之内出现沉淀，则为阳性。
三，血浆游离血红蛋白测定试剂（ml）标准管测定管空白管1. 10g/L联苯胺0.5 0.5 0.52. 被检血浆（血清）——0.02 ——3. 标准血红蛋白0.02 ————4．1%HO 0.5 0.5 0.55．10%醋酸液 5 5 5（注：1-4试剂混合后，于室温下静置20min, 再加5试剂）10min后，用比色剂（0.5cm）测定各管的光密度，波长530nm空白管为比色对照。
结果按下列计算：血浆游离Hb(mg/L)=测定管光密度/标准管光密度（0.025）X100）正常值：〈40mg/L四，高铁血红蛋白还原实验1，静脉采血1.5-2mL，加入含有38g/L枸橼酸钠抗凝剂的小瓶内，再加葡萄糖20mg.血液与抗凝剂按9：1混合，亦可用ACD抗凝。
2，将此血标本离心沉淀5分钟（1000R/M），或置于4℃冰箱24小时，待红细胞下沉后，吸取部分血浆，使血液与血浆之比约为1：1（相当于红细胞压积30-40%）3，摇匀后，取此血液1.0毫升，加12.5%g/l亚硝酸钠-葡萄糖溶液和0.0004mol/L美兰液各0.05ml,颠倒混合15次，使与空气中的氧气充分接触，加塞，37℃水浴（孵箱）保温3小时（血不足用半量）。
新生儿溶血病检测操作
新生儿溶血病检测操作SOP一、产前诊断1.夫妇血型检测（微柱凝胶检测法：ABO、Rh(D)血型定型检测卡）将红细胞稀释至1% 红细胞生理盐水悬液；撕开微胶卡的封膜，于正定管蓝A、黄B、灰D、Control微柱管反应腔中加入1% 待检 RBC 生理盐水悬液各50μl；于反定管白色A、B、O、自身管分别对应加入% A1、B、O型试剂红细胞和待检红细胞生理盐水悬液50μl，再分别加入待检血浆（血清）50μl；将检测卡室温反应≥10 min,取出，置离心机1000r/min 2min，1800r/min 3 min离心；取出，判定结果（凝集强度判断详见结果判定示图）。
2.孕妇抗体效价的测定（微柱凝胶检测法：抗人球蛋白检测卡）孕妇IgG(抗A/抗B)效价取待检血清和2-Me(二巯基乙醇)应用液各，充分混匀，37℃水浴2小时（以充分破坏血清中的IgM类抗体）。
取4支干净试管排于试管架上；将第一管加入50微升中和血清和毫升低离子介质（原液为1:1稀释，此时稀释倍数为原液的64倍）。
第2－4管中分别加入400微升低离子介质；从第一管中吸出400微升的液体加入第二管，混匀，在从第二管吸出400微升加入第三管混匀，依次倍比稀释。
取抗人球蛋白检测卡，撕去铝箔，在4管中个依次加入倍比稀释好的灭活血清50微升和1％的标准红细胞（或父亲红细胞）低离子介质(LIM)悬液50微升。
将加好样的检测卡入生科孵育器中孵育15分钟。
将孵育好的检测卡放入生科离心机中离心5分钟（1000r/min 2 min，1800r/min 3 min），（离心必须在加样后30分钟内进行）取出，判定结果（凝集强度判断详见结果判定示图）临床参考值：孕妇IgG(抗A/抗B)效价≤64。
孕妇IgG(抗D)效价测定确定孕妇为RhD阴性，丈夫为RhD阳性。
取待检血清和2-Me(二巯基乙醇)应用液各，充分混匀，37℃水浴2小时（孕妇血清与O型RhD阳性红细胞反应盐水法为阳性需要灭活，阴性不需要灭活）。
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新生儿溶血病筛查实验
在临床上，常见新生儿出生后，黄疸逐渐加重，在 1 ～ 5 天内达到最高值，大大超出生理性黄疸的水平，有些还伴有贫血、肝脾肿大胎儿期水肿等症状，然后黄疸在一周后逐渐消失。
这类患儿经治疗后大多数会康复，少数患儿会产生核黄疸，导致严重后果。
这种疾病就是新生儿溶血病。
临床上造成胎儿、新生儿溶血性贫血疾病的原因有很多种，如 G6PD 缺乏， a- 地中贫血，遗传性球形红细胞增多症，病毒感染等，但这些病因只占新生儿溶血的少数，大多是由于母婴之间的血型不合造成的，所以“新生儿溶血病”这一病名就特指由母婴之间的血型不合造成的胎儿、新生儿溶
血 (Haemolitic disease of the new born –简写为 HDN) 。
新生儿溶血病又称母子血型不合溶血病，是母亲对胎儿红细胞发生同种免疫反应引起的溶血性疾病，Rh血型和ABO血型不符都能引起这种疾病，但前者引起的比较严重，是新生儿病理性黄疸最常见的原因，也是引起新生儿胆红素的最重疾病，目前已发现26个血型系统，160种血型抗原，在我国以ABO血型不合溶血病发生率最高，Rh 血型不合溶血病发生较少，MN溶血最为罕见。
ABO 新生儿溶血病的发病率约
为 5 ％，其中 O 型母亲生出 A 型、 B 型新生儿，总
胆 >18mg/dl(300 μ mol/L) 的新生儿 ABO 溶血病发病率达 20 ％，病情通常较轻，一般无需换血。
Rh 阴性孕妇新生儿溶血病的发病率约为 60 ％（第二胎），病情严重，大多数需要换血。
发病机理
一、新生儿溶血病是因胎儿红细胞具有从父亲遗传而来，而又为母亲红细胞所缺乏的抗原，此种红细胞血型抗原在胎儿时期进入母体，刺激母体产生相应的血型抗体，此种血型抗体中的IgG抗体透过胎盘进入胎儿体内与胎儿红细胞抗原产生抗原抗体反应，破坏胎儿红细胞而引起新生儿溶血病。
二、 Rh新生儿溶血病因孕妇和胎儿的Rh血型不符而引起的疾病。
若孕妇为Rh-，胎儿为Rh+（有D抗原），当孕妇第一胎分娩胎盘剥离时，胎儿的红细
胞进入母体会刺激母体产生抗D抗体（IgG）。
抗D抗体在母体怀第二胎时可通过胎盘进入胎儿，与胎儿的红细胞结合，引起胎儿发生溶血病。
三、 ABO新生儿溶血病因孕妇与胎儿ABO血型不符而引起的疾病。
多见于O型孕妇，尤其多见于O型孕妇和A型胎儿。
由于天然的抗A 或抗B抗体(IgM)的分子大，不能通过胎盘进入胎儿血循环，而母亲为O型者比A型或B型人更容易产生抗A或抗B的IgG抗体，IgG抗体则能通过胎盘进入胎儿血循环，引起胎儿发生溶血病。
四、 A或B抗原也与部分抗A或抗B抗体发生作用，而且抗A的量高于抗B。
但这类病例不多，病情也比较轻，加以胎儿血管内皮和组织细胞上有血型抗原，可部分吸收对应抗体，以减少抗体对红细胞的破坏。
ABO血型的“天然”抗体主要是IgM类，但也有IgG类，后者有引起新生儿溶血病的可能。
妊娠期间，由于母婴血型不合，胎儿红细胞会少量进入母体循环，刺激母体产生了相应血型抗体。
抗体通过胎盘回到胎儿体内，使胎儿红细胞产生不同程度的溶血，这是造成大月龄胎儿死亡的常见原因。
如果胎儿存活，来自母体的抗体继续造成新生儿红细胞溶血，严重的造成新生儿死亡或形成核黄疸，核黄疸会严重影响智力和运动机能。
对既往不明原因的死胎、流产及曾分娩重度黄疸儿的孕妇均应进行产前检查。
1、血型及血型抗体测定：先查孕妇，再查丈夫血型，如夫妻Rh血型不合成或有可能引起ABO溶血可能的ABO血型不合时，则应检测孕妇血型抗体，必要时再做特殊性抗体。
如连续检查发现效价明显上升，提示胎儿常受累，如妊娠后期效价明显下降，提示胎儿已有严重溶血。
2、羊水检查、B型超声检查及其他相关检查。
产前检查可以排除血型系统可能造成的新生儿溶血病，因此，为了优生优育产妇有必要做血液免疫学产前检查。
预防
一项统计显示，在所有分娩中大概有20%-30%的几率会出现母婴血型不合，即这些母亲分娩出的孩子都有可能患上新生儿溶血病。
与此形成对比的是，只有不到一成的父母会到医院做产前血型血清学检查，来使孩子远离溶血病。
一、母亲O型、父亲AB型婴儿最易发病据了解，新生儿溶血病的原因主要分为两种：ABO血型系统不合，Rh血型系统不合。
在我国，最常见的是ABO 血型系统不合，尤其是母亲血型为O型、父亲是AB型的时候，因为这样血型的父母生出的孩子，血型不是A型就是B型，很容易发生溶血病。
虽然胎儿在母亲体内依靠母亲供应营养，但是母亲和胎儿之间有一道“胎盘屏障”，这道屏障可以保护母婴血液不会“相互来往”。
但是仍有少量的婴儿红细胞会渗入母体循环，由此导致了抗体产生，母亲的血液也会有少部分血液进入胎儿体内。
母亲一般不会受到溶血的影响，而这两种不同的血液在孩子身体里则可能“打架”，从而引起溶血病。
当然，也不是所有母婴血型不合的孩子体内都会出现“打架”现象，因为等到孩子出生之后，婴儿体内的来自母亲的带有抗体的血液就会在一定时间内代谢耗尽，孩子很快会恢复正常。
所以，O型血的准妈妈照样能够怀孕生孩子。
不过，一些较为严重的溶血病可能会导致流产或者死胎，如果有些年轻夫妇遇到莫名其妙的反复流产或死胎时，就需要考虑是否有溶血的原因在里头。
另外一种溶血病发生在母婴Rh血型不合，汉族人群中发生该病的几率比较小。
二、把好产前和产后两道关
如果准爸爸是A型血、B型血或AB型血，准妈妈是O型血，且有过流产史或者输血史的话，就要当心新生宝宝有无贫血以及黄疸出现的时间、程度，不要和其他原因所致的黄疸、贫血混淆，以免耽误治疗。
如果有ABO血型不合的可能，准妈妈在怀孕前就要做一个“产前血型血清学检查”，来查一查血液里抗体的情况。
要是抗体的“活性”不高，准爸妈可以安心生孩子，要是抗体的“活性”很高，则可以通过一些药物治疗来降低。
如果已经怀上宝宝，准妈妈们要记得从16周左右开始，定期检测血液中抗体的情况，一般在四周左右一次，密切注意宝宝有否发生溶血可能。
如有异常可以在孕期治疗，效果也不错。
Rh血型不同的准爸妈，第一次怀孕时基本上没事，但如果有过流产或生过孩子等现象，一定
要查准妈妈体内Rh抗体。
若抗体阳性的“活性”很强，就不应该怀孕，否则发生死胎、新生儿严重溶血的危险性就比较大了。