实验3 环境和人体微生物的检验及无菌操作技术__
无菌实验室操作规程
无菌实验室操作规程标题：无菌实验室操作规程引言概述：无菌实验室是进行微生物实验和细胞培养的重要场所，为保证实验结果的准确性和可靠性，操作规程十分关键。
本文将详细介绍无菌实验室的操作规程，包括实验室准备、操作流程、设备消毒、个人防护和废物处理等方面。
一、实验室准备1.1 清洁实验室环境：无菌实验室应保持干净整洁，定期清洁地面、台面和设备，避免灰尘和细菌污染。
1.2 检查实验室设备：在进行实验前，要检查实验室设备是否正常运转，确保无菌实验室的各项设备都处于良好状态。
1.3 准备所需材料：提前准备好所需的培养基、试剂和实验用具，确保实验进行顺利。
二、操作流程2.1 洗手消毒：进入无菌实验室前，必须先进行手部消毒，避免将细菌带入实验室。
2.2 穿戴个人防护用具：穿戴实验服、手套、口罩和护目镜等个人防护用具，避免污染实验样品。
2.3 严格按照实验操作规程进行：在进行实验时，要按照操作规程的要求进行，避免操作失误导致实验失败。
三、设备消毒3.1 消毒实验台面：在进行实验前，要将实验台面用75%乙醇或其他消毒液擦拭消毒，避免细菌污染。
3.2 消毒实验用具：使用完实验用具后，要及时用高温或消毒液进行消毒，确保下次使用时无菌。
3.3 定期消毒实验室设备：定期对实验室设备进行消毒，保持实验室的无菌状态。
四、个人防护4.1 穿戴个人防护用具：在进行实验时，必须穿戴好实验服、手套、口罩和护目镜，避免接触细菌。
4.2 避免交叉污染：在实验过程中，要避免将实验用具和试剂带到其他实验室，避免交叉污染。
4.3 定期进行健康检查：实验人员要定期进行健康检查，确保身体健康，避免将疾病传播到实验室。
五、废物处理5.1 分装废物：在进行实验后，要将废物分类分装，避免混合造成交叉感染。
5.2 定期清理实验室废物：实验室废物要定期清理，避免细菌滋生和传播。
5.3 合理处理废物：将实验室废物交由专业机构处理，避免对环境和人体造成危害。
结论：无菌实验室操作规程十分重要，只有严格遵守规程，才能确保实验结果的准确性和可靠性。
《医院感染管理办法》练习题
《医院感染管理办法》练习题一、单项选择题1.所有医疗机构均应建立预防和控制医院感染的（）A.规章制度B.责任制C.管理制度D.责任状2. 医院感染管理要达到的目的是（）A.有效预防和控制医院感染B.落实规章制度C.防止医疗纠纷的发生D.管理医院感染专职人员3. 住院床位总数在多少张以上的医院应当设立医院感染管理委员会和独立的医院感染管理部门（）A.250张B.200张C.150张D.100张4. 《医院感染管理办法》中对医院感染管理科的职能界定为（）A.管理科室B.业务科室C.综合科室D.赋予一定管理职能的业务科室5. 医院感染管理委员会应当建立会议制度，定期研究、协调和解决哪方面的问题，发挥医院感染管理委员会的决策作用（）A.医院感染管理B.传染病管理C.抗菌药物管理D.多重耐药细菌管理6. 医院感染管理委员会应当根据本医院病原体特点和耐药现状，配合药事管理委员会提出哪方面的指导意见（）A.合理用药B.合理使用抗菌药物C.合理使用抗生素D.合理使用抗微生物药物7. 医疗机构应当严格按照《抗菌药物临床应用指导原则》，加强抗菌药物的哪方面管理（）A.贮存B.验收C.临床使用和耐药菌检测D.不良反应检测8. 医疗机构应当及时发现医院感染病例和医院感染的爆发，分析下面什么情况，采取有效的处理和控制措施，积极救治患者（）A.易感因素B.感染源、感染途径C.易感人群D.工作中的薄弱环节9. 无明确潜伏期的感染，规定入院多少小时后发生的感染为医院感染（）A.12小时B.24小时C.48小时D. 72小时10. 调查证实出现5例以上医院感染爆发时，医院应在多少小时内向当地县级地方人民政府卫生行政部门和所在地疾病预防控制机构报告（）A.12小时B.24小时C.36小时D.72小时11. 医疗机构应当严格突发公共卫生事件和疫情报告制度，责任报告人在首次诊断传染病患者后，应立即填写传染病报告卡。
传染病报告卡由录卡单位保留多少年（）A.1年B.2年C.3年D.5年12. 下列属于重大医院感染爆发事件的是（）A.3例以上医院感染爆发事件B.5例以上医院感染爆发事件C.1例及以上人感染高致病性禽流感D.4例以上医院感染爆发事件13. 医院感染学是现代医学领域中的一门新型学科，它具有跨学科的特点，除基础学科外，它的边缘学科是（）A.流行病学B.医学微生物学C.传染病学D.消毒学14. 医务人员的职业卫生防护，按照什么法规及其配套规章和标准的有关规定执行（）A.《传染病防治法》B.《医院消毒技术规范》C.《职业病防治法》D.《执业医师法》15. 医院感染管理是一门新兴的学科，医院内预防与控制医院感染的决策和实施主体者是（）A.临床医师B.检验人员C.护理人员D.医院感染专业人员16. 卫生行政部门现场检查的目的主要是检查谁是是否按照工作规范和要求开展执业活动（）A.临床医师 B医疗机构 C.医务人员 D.医疗机构及其工作人员17. 县级以上地方人民政府卫生行政部门未按照规定履行监督管理和对医院感染爆发事件的报告、调查处理职责，造成严重后果的，对卫生行政主管部门主要负责人、直接责任人和相关责任人予以的行政处分是（）A.警告B.记大过C.降级或者撤职D.开除18. 医疗机构违反规定，未采取预防和控制措施或者发生医院感染未及时采取措施，造成医院感染爆发、传染病传播或者其他严重后果的，对负有责任的主管人员和直接责任人员给予的行政处分是（）A.警告、记大过B.记大过、降级C.记大过、降级、撤职D.降级、撤职、开除19. 医疗机构发生医院感染爆发事件未按《医院感染管理办法》规定报告的，由县级以上地方人民政府卫生行政部门给予（）A.通报批评B.罚款C.责令整改D.以上都是20. 用化学、物理、生物的方法杀灭或者消除环境中的病原微生物称之为（）A.消毒B.灭菌C.隔离D.去污二、多项选择1. 制定医院感染管理办法依据的法律和行政法规是（）A.《传染病防治法》B.《医疗机构管理条例》C.《医院消毒技术规范》D.《突发公共卫生事件应急条例》2. 医院感染研究的对象主要包括（）A.住院患者B.医院工作人员C.门急诊就诊患者D.探视者和患者家属3. 医院感染管理是针对诊疗活动中存在的医院感染、医源性感染及相关的危险因素进行（）A.治疗B.预防C.诊断D.控制4.医院感染管理分为行政管理和业务管理，行政管理包括（）A.建立健全医院感染管理组织并明确岗位职责B.完善相关的管理制度C.制定相关的工作规范D.制定相关的工作标准5. 医院感染管理的业务管理包括（）A.医院感染检测B.消毒灭菌与隔离C.抗菌药物合理使用D.重点部门的医院感染预防与控制E.医疗废物的安全管理6. 关于医院感染的有效预防方面，世界卫生组织于1986年向全球推荐的几类措施包括（）A.消毒B.隔离C.无菌操作D.合理使用抗菌药物E.监测并通过监测进行感染控制的效果评价7. 各级各类医疗机构应当制定并落实医院感染管理的规章制度和工作规范，医院感染的管理制度应包括以下哪几个方面（）A.医院感染管理制度B.医院感染管理工作制度C.医院感染工作流程D.医院感染管理评价方法8. 医院感染管理委员会的成员优哪些部门的主要责任人（）A.医院感染管理部门B.医务部门、护理部门C.临床科室、消毒供应室、手术室 C.临床检验部门、药事管理部门 E.设备管理部门、后勤管理部门9. 医院感染管理委员会的职责有（）A.建立会议制度，定期研究、协调和解决有关医院感染管理方面的问题B.组织开展医院感染预防与控制方面的科研工作C.对全国医院感染预防与控制工作进行业务指导D.研究并制订本医院的医院感染管理工作计划，并对计划的实施进行考核和评价10. 医院感染管理委员会应当制定医院发生医院感染爆发及出现不明原因传染性疾病或者特殊病原体感染病例等事件时的控制预案，该预案应当包括事件发生的( )A.报告体系B.调查体系C.应急措施D.控制策略11. 医院管理感染部门、分管部门及医院感染管理专（兼）职人员应对医院感染及其相关危险因素进行哪些工作，针对问题提出控制措施并指导实施（）A.监测B.分析C.反馈D.讨论12. 医院感染管理部门、分管部门及医院感染管理专（兼）职人员应对医院的哪些工作提供指导（）A.清洁、消毒、灭菌与隔离B.无菌操作技术C.医疗废物管理D.传染病的医院感染控制13. 医院感染管理部门、分管部门及医院感染管理专（兼）职人员应对医院感染爆发事件进行报告和调查分析，提出控制措施并协调、组织哪些部门进行处理（）A.医务部门B.护理部门C.检验部门D.物资供应部门14.卫生部成立医院感染预防与控制专家组，专家组各类成员包括（）A.医院感染管理B.疾病控制C.传染病学、流行病学D.消毒学、护理学E.临床医学、临床检验15.下列哪些措施是预防医院感染的主要措施（）A.标准预防B.合理使用抗菌药物C.手卫生D.严格执行消毒隔离技术操作16. 国家与医院感染管理相关的法律法规有（）A.《传染病防治法》﹑《执业医师法》和《医疗机构管理条例》B.《医疗废物管理条例》和《医疗卫生机构医疗废物管理办法》C.《消毒管理办法》、《艾滋病防治条例》D.《病原微生物实验室生物安全管理条例》、《传染性非典型肺炎防治管理办法》17. 国家有关医院感染管理的原则和技术规范有（）A.《医院感染诊断标准（试行）》、《医务人员艾滋病病毒职业暴露防护指导原则》B.《抗菌药物临床应用指导原则》、《内镜清洗消毒技术操作规范》C.《消毒技术规范》、《口腔诊疗器械消毒技术操作规范》D.《血液透析器复用操作规范》18. 医疗机构有关医院感染管理的规章制度包括（）A．医院感染管理组织及其职责、医院感染管理有关部门及医务人员的职责、医院感染的培训制度 B.环境卫生学及消毒灭菌监测与质量改进制度、医院感染爆发突发事件的监测、报告、调查与控制制度 C.医院消毒隔离制度、消毒药械的管理制度、一次性使用无菌用品的管理制度、医务人员职业卫生防护制度、手卫生制度、无菌操作技术规范 D.抗菌药物合理应用管理制度，重点部门、重点感染部门的医院感染预防与控制制度，医疗废物的管理制度，生物安全管理制度19. 医疗机构应当按照《消毒管理办法》，严格执行医疗器械、器具的消毒工作技术规范，并达到哪些要求（）A.进入人体组织、无菌器官的医疗器械、器具和物品必须达到灭菌水平B.接触皮肤、黏膜的医疗器械、器具和物品必须达到消毒水平C.各种用于注射、穿刺、采血等有创操作的医疗器具必须一用一灭菌D.对于各种污染器械应先消毒后清洗，再消毒或灭菌20．医疗器械、器具和其他物品根据其危险性分为（）A．高度危险器材B．中度危险器材C．低度危险器材D．无危险器材21．关键器材是指进入人体组织、无菌器官的医疗器械、器具和物品，使用前必须经过灭菌处理，包括（）A．外科手术器材和装置 B．心血管支架C．植入的D．体温表22．半关键器材是指与完整黏膜密切接触的物品，应当采用高水平或中水平消毒法，如（）A．吸机管道 B．胃肠镜C．体温表 D阴道镜23．医疗机构应当制定具体措施，保证医务人员的下列哪些工作符合规定要求，对医院感染的危险因素进行控制（）A．手卫生B．诊疗环境条件C．无菌操作技术D．职业卫生防护24．手卫生是预防和控制医院感染、保障患者和医务人员安全最重要、最简单、最有效、最经济的措施，要贯彻和落实好有关医务人员手卫生的规范，必须做到（）A．建立并落实医院的手卫生制度B．配备有效、便捷的手卫生设施C．严格按照洗手与手消毒指征、手卫生方法认真洗手或者手消毒D．医疗机构应当每季度对重点部门按照正确的监测方法对手消毒效果进行监测25．医院感染的易感因素有（）A．年龄与基础疾病B．放疗与化疗、免疫抑制的使用C．环境的变化、人口的不断增长和拥挤D．器官移植 E.抗菌药物的大量应用,多重耐药性细菌的产生26．占了整个医院感染的80%以上的主要感染部位包括（）A．呼吸道B．手术切口C．胃肠道D．泌尿道E.消化道27．医疗机构的医务人员应熟练掌握和正确使用防护用品包括（）A．口罩B．帽子C．护目镜D．手套E.隔离衣28．针对感染性疾病传播的“三个环节”，即感染源、传播途径和易感者（易感宿主），在预防感染性疾病的传播时起重要作用的是（）A．隔离感染源B．切断传播途径C．保护易感宿主D．改善微生态环境29．抗菌药物临床应用是否正确、合理，基于哪几个方面（）A．有无指征应用抗菌药物B．选用的品种是否正确合理C．给药方案是否正确合理D．给药时机是否合适30．三级医院必须建立符合标准的临床微生物实验室，配备相应设备及专业技术人员，开展病原微生物的哪些方面的工作（）A．培养B．分离C．鉴定D．细菌药敏试验31．作为了解医院感染发生发展情况的医疗感染监测，其主要目的有（）A．降低医疗感染率，减少获得医院感染的危险因素；建立医院的医院感染发病率基线，确定各自医院的医院感流行基线B．发现暴发流行，一旦确定散发基线，可以据此判断暴发流行C．利用调查资料说服医务人员遵守医院感染控制规范与指南，评价控制效果，调整和修改感染控制规范D．防止缺乏经过证据支持的医疗感染控制措施，评价干预措施在医院感染控制方面的效果，并进行不同医院间医院感染率和感染控制效果的比较32．医疗机构主要是医院要建立有效的医院感染监测制度，主要包括哪些内容（）A．建立医院感染报告制度，制订切实可行的医院感染监测计划并付诸实施B．开展目标性监测，确保医院感染监测的设施与人员C．采用前瞻性调查方法收集医院病例资料，尤其是实验室资料和临床资料D．监测资料要及时向有关部门报告与反馈，建立医院感染监测质量评价制度33．医院感染监测计划内容包括（）A．监测人员和监测方法B．监测工具和监测对象C．监测时间、监测资料的原始记录D．总结和运用34．医疗机构经调查证实发生以下哪些情形时，应当于12小时内向所在地的县级地主人民政府卫生行政部门报告，并同时向所在地疾病预防控制机构报告。
《病原生物学与免疫学基础》课程标准
《病原生物学与免疫学基础》课程标准（2019 护理专业高职高专）1．前言1.1课程性质病原生物与免疫学是高职护理、助产专业的一门重要专业基础课程，主要阐述与医学有关的病原生物以及免疫学的基本内容，包括医学微生物、人体寄生虫和免疫学基础三大部分。
通过本课程学习，使学生具备该专业所必需的病原生物及免疫学的基本知识和基本技能，为学生学习相关专业知识和职业技能打下一定的基础。
本门课程的先修课程有生物化学、人体形态，本门课程的后续课程有人体机能、药物应用、传染病护理、护理学基础等。
1.2设计思路按照护理、助产专业人才培养计划，病原生物与免疫学课程安排54学时，其中实验12学时。
教学内容上，贯彻高职教育工学结合、校企合作的教学理念，遵循基础理论以应用为目的、以必须够用为度的原则。
教学方法上，理论教学环节全部采用多媒体授课，适当引入案例教学、基于问题的教学（PBL）等方法，以提高学习效果。
实验环节注重对学生基本技能的培养。
2．课程目标2.1总体目标通过本课程学习，使学生理解病原生物与免疫学的基础知识和基本技能，为学好后续基础理论课程、职业能力课程打下扎实基础。
注重理论联系实际，将基础理论知识融入实际应用的案例分析中，培养学生分析问题、解决问题的能力。
通过实训培养学生正确使用相关仪器设备的能力；学会无菌操作技术和消毒灭菌方法，能将所学知识运用到消毒、隔离、预防感染及标本采集送检等护理工作中的能力；培养学生认真观察实验现象，正确处理和分析结果、撰写报告的能力；培养学生的无菌观念、环保意识，在实验中注重减少试剂用量，尽量采用无毒、无害的原料，严格控制废弃物的任意排放。
培养良好的责任意识、团队沟通和团队合作能力。
2.2具体目标2.2.1知识目标能说出本课程中的基本概念、常用名词、术语；能说出目前常见的病原生物的主要的生物学特性、致病和免疫机制、特异性诊断及防治原则；能说出机体免疫系统的组成、主要功能及基本应答机制，并初步学会免疫学诊断和免疫学防治的基本实践技能；学会追踪病原生物学和免疫学的发展趋势。
微生物培养及实验基本操作技术
微生物培养及实验基本操作技术一、培养基配制培养基是指人工配制的、适合于微生物生长繁殖或累积代谢产物所需的各种营养物的混合基质。
配制培养基是进行微生物检验工作的基础,甚至是任何与微生物有关工作的基础。
注意事項–灭菌锅的使用①加水盖过底部铁板—②放入东西—③关门—④調整溫度時間—⑤关紧泄压阀灭菌結束後，等压力降回零時才可打開門進入灭菌锅之物品，蓋子不可關太緊或太鬆拿滅菌後物品請記得帶耐熱手套培养基中的主要成分及其作用：营养物质：N源、C源、无机盐、生长因子、水常用的N源：蛋白胨、牛肉膏、肉浸汁、酵母膏常用的C源：糖、醇类物质（单糖：葡萄糖、果糖、半乳糖、甘露糖双糖：蔗糖、麦芽糖、乳糖；多糖：淀粉、纤维素、菊糖；醇类：甘露醇、卫茅醇、甘油）水：用蒸馏水，不能用自来水凝固剂：琼脂、明胶、血清等抑制剂：1、作用：鉴定细菌、抑制杂菌的生长繁殖，增加待检菌的检出率2、种类：盐类：氯化钠、氯化锂、氰化钾、亚碲酸钾（钠）、亚硒酸钠等染色剂类：煌绿、蔷薇酸、结晶紫、孔雀绿、孟加拉红、玫瑰红胆盐类：猪（牛、羊）胆盐、混合胆盐、三号胆盐、去氧胆酸盐、胆石酸盐抗菌素：青霉素、链霉素、杆菌肽、多粘菌素指示剂1、作用：用于指示鉴别细菌可否利用分解糖醇类物质和含氮化合物，产酸产碱的能力。
2、常用的指示剂：酚红、溴甲酚紫、中性红、中国蓝、甲基红、复红、伊红、美蓝、孔雀绿等。
培养基的类型：●根据培养基的物理状态来区分：1、液体培养基：主要用于增菌培养、鉴别性培养2、固体培养基：用作微生物的分离、鉴定、检验杂菌、计数、保藏、生物测定3、半固体培养基：观察微生物的动力，有时用来保藏菌种4、脱水(商品)培荞基：脱水培养基也称为商品培养基、预制干燥培养基。
●将各种营养成分按比例配制完全,制成脱水的干粉状,装瓶出售;使用时只需按比例加人定量的水溶化、灭菌便可。
●根据培养基的用途来区分：➢增殖培养基选择培养基鉴别培养基1、增殖培养基：在普通培养基中加入一些某种微生物特别喜欢的营养物质，以增加这种微生物的繁殖速度，逐渐淘汰其它微生物，这种培养基称为增殖培养基。
生物物质无菌通用要求
生物物质无菌通用要求摘要：一、生物物质无菌通用要求的背景和重要性二、生物物质无菌操作的基本要求1.实验室环境要求2.实验人员的要求3.实验操作的要求三、生物物质无菌处理的方法1.消毒法2.过滤法3.辐射法4.化学灭菌法四、生物物质无菌保存的注意事项五、生物物质无菌检测的方法1.物理检测法2.化学检测法3.生物检测法六、我国在生物物质无菌技术方面的进展正文：生物物质无菌通用要求是生物科研和生物制品生产中至关重要的一个环节。
生物物质在无菌条件下进行操作，可以有效防止实验物质的污染，保证实验结果的准确性和产品的安全性。
一、生物物质无菌通用要求的背景和重要性随着生物科学技术的飞速发展，生物物质在科研、医疗、食品等领域的应用越来越广泛。
然而，许多生物物质对环境敏感，容易被微生物污染，从而影响其性能和应用。
因此，生物物质无菌通用要求在生物制品生产、科研和临床应用中具有重要的意义。
二、生物物质无菌操作的基本要求生物物质无菌操作需要满足以下几个方面的要求：1.实验室环境要求：实验室应具备无菌操作的基本条件，如洁净度、温湿度、通风等。
2.实验人员的要求：实验人员应接受过无菌操作培训，并严格遵守无菌操作规程。
3.实验操作的要求：实验操作过程中，应严格遵循无菌操作规程，确保实验物质不受污染。
三、生物物质无菌处理的方法生物物质无菌处理的方法主要有消毒法、过滤法、辐射法和化学灭菌法等。
这些方法都有各自的优缺点和适用范围，需要根据实际需求选择合适的方法。
四、生物物质无菌保存的注意事项生物物质无菌保存时，应确保保存条件符合要求，如温度、湿度和光照等。
此外，还需定期检测无菌状态，一旦发现问题及时处理。
五、生物物质无菌检测的方法生物物质无菌检测的方法包括物理检测法、化学检测法和生物检测法等。
这些方法可以有效地检测生物物质的无菌状态，确保实验和生产的顺利进行。
六、我国在生物物质无菌技术方面的进展近年来，我国在生物物质无菌技术方面取得了显著的进展，不仅在理论研究方面有所突破，而且在实际应用中也取得了显著的成果。
微生物实验室良好规范 USP_1117
公用系统取样：如，水，无菌取样方式
微生物实验室布局与操作
环境监测取样
仪器设备的摆放与移除对无菌操作要求较低 设备仪器应同时与微生物培养基同时摆放
各类无菌检验：应在控制环境中进行
无菌制剂 原料药 发酵菌种 生物制品菌种
隔离器 <1208>
样品操作
样品操作
操作与储存条件：关键 微生物样品：水、环境监测样、生物负荷样 关键参数： 样品成分 包材成份 储存时间 储存温度 取样操作至检验开始的时间 严格控制 期间的储存条件 样品转移到较远处检测 运输条件确认：时间、温度等 USP <1231> 医药用水
检验时间大于72小时，按天表达
30-35℃, 3 – 5天 上午或下午开始培养，也应同样时间结束
人员培训
人员培训
微生物学教育背景 员工 主管 经理 职责明确 操作规程的培训 检验方法描述 文件编号便于检索化验员接受的培训内容 建立个人培训档案 确认后方能独立操作 培训记录时效性：现行版本与SOP
化验室记录的维护
化验室记录应包括的要素
日期 样品名称 化验员姓名 规程号 记录检验结果 偏差 参数记录
设备、微生物菌种、培养基批号
主管/复核人签名
化验室记录的维护
记录 关键设备，按期校验、有维保记录、使用日志 设备温度（水浴、培养箱、灭菌柜），可追溯 SOP SOP名称与版本号 方法描述应具体详细 书写修改： 单线划掉，签字、日期 原数据不得擦掉、或涂抹 检验结果 原始平板计数：便于复核 图表：装订应安全、数据可读；骑缝签字
首次结果无效
做出结论 进行复验（按复验SOP） 必要时重新取样
Thank You !
人员培训
微生物检验流程及操作标准
微生物检验流程及操作标准全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：微生物检验是一种重要的实验室技术，用于检测食品、水质、环境等样品中的微生物存在情况。
微生物检验需要严格遵守一系列操作标准和流程，以确保检验结果的准确性和可靠性。
下面我们将介绍一下微生物检验的流程及操作标准。
一、样品采集1. 样品的采集需要采用无菌工具，并保持样品在采集过程中不受到外界环境的污染。
2. 样品的采集过程应尽量避免接触到任何可能引入外源微生物的物质，比如皮肤、空气等。
3. 采集的样品应标明正确的标识信息，包括样品名称、采集地点、采集日期等。
二、样品处理1. 样品收到实验室后，需要尽快进行处理，避免样品内的微生物增殖或死亡。
2. 样品处理过程需要保持在无菌条件下进行，使用无菌工具进行操作。
3. 样品处理过程中需要按照检验要求进行适当的稀释，以确保实验得出准确的结果。
三、培养基准备1. 培养基的制备需要按照标准的配方和步骤进行，以确保培养基的质量符合要求。
2. 制备培养基时需要严格遵守无菌操作规范，避免细菌、真菌等外源微生物的污染。
3. 制备好的培养基需要在适当的条件下保存，确保培养基的稳定性和有效性。
四、接种操作1. 在进行微生物检验之前，需要准备好无菌的接种环、移液器等工具。
2. 采取适当的方法将处理好的样品接种到培养基上，避免接种时引入外源微生物。
3. 接种操作需要在无菌条件下进行，避免培养物受到任何污染。
五、培养与观察1. 接种后的培养基需要置于适当的温度和湿度条件下进行培养，促使样品中的微生物生长。
2. 定期观察培养基上的生长情况，记录生长的数量和形态，用于后续的分析和鉴定。
3. 在观察过程中需要注意反复进行无菌操作，避免细菌、真菌等外源微生物的污染。
六、鉴定与结果解读1. 当样品中的微生物生长到一定程度时，需要进行鉴定和分析，确定其种属和数量。
2. 鉴定过程需要参考相关的鉴定手册和标准，进行适当的试验和测试。
3. 根据鉴定结果进行结果解读，判断样品中微生物的种类和数量是否符合标准要求。
无菌实验室操作规程
无菌实验室操作规程引言概述：无菌实验室是进行微生物学研究和实验的重要场所，其操作规程对于实验结果的准确性和可靠性至关重要。
本文将详细介绍无菌实验室操作规程的五个部分。
一、实验室准备1.1 清洁与消毒：无菌实验室应定期进行清洁和消毒，确保实验环境的无菌状态。
清洁应使用无菌纱布和无菌溶液，消毒则应选择适当的消毒剂，如酒精或过氧化氢。
1.2 实验器材准备：在进行实验前，必须确保实验器材的无菌状态。
实验器材应经过高温高压灭菌或使用无菌过滤器过滤，确保无菌操作的可靠性。
1.3 个人防护：进入无菌实验室前，实验人员应穿戴适当的个人防护装备，包括无菌手套、口罩和实验服。
这些装备能有效减少外界微生物的污染，保证实验的无菌性。
二、无菌技术操作2.1 消毒操作：在进行无菌实验前，必须进行适当的消毒操作。
这包括用酒精或火焰对实验台面、实验器材和手术刀进行消毒处理，以杀灭表面的微生物。
2.2 灭菌操作：在进行培养基、培养皿等实验材料的制备时，必须进行灭菌操作。
常见的灭菌方法包括高温高压灭菌、紫外线辐射灭菌等，确保实验材料的无菌性。
2.3 采样操作：在进行微生物采样时，必须采取严格的无菌操作。
这包括用无菌棉签或无菌吸管进行采样，避免外界微生物的污染。
三、培养基制备与使用3.1 培养基配制：在制备培养基时，必须按照一定比例将培养基粉末与无菌蒸馏水混合，并进行高温高压灭菌，以确保培养基的无菌性。
3.2 培养基使用：使用培养基时，必须采取无菌技术进行操作。
这包括使用无菌吸管或无菌移液器取出适量的培养基，并将其均匀涂布在培养皿上。
3.3 培养基保存：未使用完的培养基应保存在冰箱或低温冷藏室中，避免细菌的生长和污染。
同时，应定期检查培养基的无菌性，确保其质量。
四、细胞培养操作4.1 细胞传代：在进行细胞培养时，必须进行细胞传代操作。
这包括将细胞从旧培养皿中取出，用无菌吸管或无菌移液器转移到新的培养皿中，以保持细胞的健康和纯度。
4.2 细胞培养液更换：细胞培养液应定期更换，以保持培养液的无菌性和营养成分的充足。
无菌操作规程
无菌操作规程
《无菌操作规程》
在医疗、实验室和制药等行业中，无菌操作是非常重要的一项规程。
它旨在防止微生物的污染，保证工作环境和产品的安全性和可靠性，对于人们的健康和生命安全有着重要的意义。
无菌操作规程包括了一系列的工作流程和操作要求，以确保操作过程中不会引入任何微生物。
这些操作规程通常包括了穿戴适当的防护装备、在洁净的环境中进行工作、使用无菌器具和材料、遵循严格的操作步骤等内容。
严格执行无菌操作规程可以有效地保证产品的质量，防止交叉感染和污染，降低患者和工作人员的风险。
在实际工作中，无菌操作需要工作人员具备一定的专业知识和技能，严格遵循规程，始终保持警惕和细心。
此外，还需要定期检查和维护工作环境和设备，确保处于最佳的无菌状态。
总之，无菌操作规程是各个行业中必不可少的重要规定，它对于维护产品质量和人们的健康至关重要。
在日常工作中，我们应该认真遵守规程，严格执行无菌操作流程，不仅是对自己的负责，更是对患者和客户的负责。
无菌操作技术在微生物四项基本实验技术中的应用和意义
无菌操作技术主要是指在微生物实验工作中，控制或防止各类微生物的污染及其干扰的一系列操作方法和有关措施，其中包括无菌环境设施、无菌实验器材及无菌操作方法等。
微生物学四项基本实验技术是指显微镜技术、无菌操作技术、纯种分离技术和纯种培养技术。
微生物学实验技术所用玻璃器皿。
不但要像化学实验那样要求清洁，而且还要无菌（玻璃器皿、接种工具、材料要灭菌），实验过程中要严格无菌操作。
实验结束后若桌面被菌液污染，可用3％来苏尔液擦拭干净，带菌工具（吸管、塑料吸嘴、玻璃刮棒、染色涂片等）洗涤前浸泡在3％来苏尔液中，消毒后再清洗。
有微生物污染的废物要集中处理，不能污染环境。
无菌操作一般是在无菌环境条件下，使用无菌器材进行检验或实验过程中，防止微生物污染和干扰的一种常规操作方法。
无菌操作的目的，一是保持待检物品不被环境中微生物所污染；二是防止被检微生物在操作中污染环境和感染操作人员，因而无菌操作在一定意义上讲又是安全操作。
无菌操作技术在微生物四项基本实验技术中的应用和意义从以下四个方面做简要的论述：一、在显微镜技术中的应用和意义微生物个体微小，必须借助显微镜才能观察到，因此在微生物学的各项实验技术中，显微镜就成为研究者不可缺少的工具。
显微镜的种类很多，根据其结构，一般分为光学显微镜和非光学显微镜两大类，在实验室观察微生物形态常用的显微镜，以光学显微镜最为常见。
在显微镜技术中必不可少的是涂片、染色等技术，无论是在制片还是染色等过程中，防止杂菌的污染即无菌操作都是非常重要的，一旦被观察的玻片遭到杂菌污染，将使观察结果受到严重偏差和影响。
因此在操作过程中为保证无菌操作应注意：①在实验室观察平板培养物时，一般不宜开盖观察；检验结果，可以开盖检查。
如取菌作涂片染色或移植培养时。
培养皿上下盖可适度开缝，但不准完全揭开；②涂片染色时应使用夹子夹持玻片，切勿用手直接拿玻片，以防感染细菌；③用过的玻片应放置消毒液中或直接煮沸消毒，冲洗液也应煮沸或消毒处理后再倒掉以免污染环境。
微生物学检验实验指导
微生物学检验实验指导2009．7一、《微生物学检验》实验目的要求1．通过实验验证理论知识，并掌握比较全面的微生物学基本操作技术。
2．在微生物学实验过程中建立无菌观念，掌握无菌操作技术。
3．通过实验进一步掌握临床常见病原微生物的生物学性状、分离培养和鉴定的方法、各种临床标本的微生物学检验程序和方法。
4．在实验过程中逐渐培养独立思考问题、分析问题和解决问题的能力。
二、微生物学实验室规则及实验室意外处理方法1．微生物学实验室规则由于微生物学实验是以病原微生物为研究对象，在实验过程中任何疏忽大意都有可能引起实验人员的自身感染或实验室和周围环境的污染。
因此，实验中应严格遵守实验规则，建立无菌观念，严格无菌操作，防止实验过程中出现意外情况，并确保实验结果的准确。
（1）试验前须预习实验内容，了解实验目的、方法和注意事项，做到心中有数，避免发生错误，提高实验效率。
（2）进入实验室必须穿工作服，必要时还须戴口罩、帽子和手套，并做好实验前的各项准备工作。
（3）非必需物品禁止带入实验室，带入实验室的物品应远离操作区，放在指定的区域。
（4）实验室内不准大声喧哗、嬉戏，应保持实验室的安静、整洁和有序。
不准在实验室内吸烟、饮水和进食，尽量避免用手触摸头、面部，防止感染，尽量减少室内活动，以免引起风动。
（5）实验中注意节约试剂，爱护仪器，避免有菌材料的污染，如有传染性材料污染桌面、地面、手、衣服或发生其他意外情况，应立即报告老师及时作适当处理。
（6）用过的污染物品应放到指定的地点，经专人消毒灭菌之后再进行清洗，切勿乱丢或冲入水池中。
禁止将本实验室的物品带出实验室外。
需送温箱培养的物品，应标记清楚后送到指定地点。
（7）实验完毕后应将桌面整理清洁，试剂、仪器放回原处，并用浸有消毒液的抹布将操作台擦拭干净，打扫卫生，关好水、电、门窗。
（8）离室前脱下工作服，反折放在指定的地方；双手在2％来苏液中浸泡5min左右，再用肥皂、清水洗净，方可离开实验室。
无菌实验室操作规程
无菌实验室操作规程标题：无菌实验室操作规程引言概述：无菌实验室是进行微生物实验和培养的重要场所，严格的操作规程能够确保实验结果的准确性和可靠性。
本文将详细介绍无菌实验室操作规程，匡助实验人员正确操作，避免污染和误操作。
一、实验室准备1.1 确保实验室环境无菌：实验室内应时常进行消毒，保持空气清洁，避免微生物污染。
1.2 准备实验材料：提前准备好所需的培养基、试剂和器具，确保其无菌。
1.3 检查设备状态：检查培养箱、平台振荡器等设备是否正常运转，确保实验顺利进行。
二、个人操作规范2.1 穿戴实验服和手套：进入实验室前需穿戴干净的实验服和手套，避免外部微生物污染。
2.2 洗手消毒：进入实验室后，及时洗手并进行消毒，避免手部细菌污染实验物品。
2.3 避免交叉污染：每次操作前应更换手套，避免不同实验之间的交叉污染。
三、培养基制备3.1 精确称量：按照配方准确称量培养基成份，确保培养基质量准确。
3.2 消毒处理：将配制好的培养基装入试管或者培养皿中，进行高温高压消毒处理，杀灭其中的微生物。
3.3 冷却保存：待培养基冷却后，放置在无菌条件下保存，避免污染。
四、微生物接种4.1 操作迅速：在无菌条件下，迅速将微生物接种到培养基上，避免空气中的细菌污染。
4.2 合理布局：将接种好的培养皿放置在培养箱中，合理布局，避免交叉污染。
4.3 注意观察：定期观察培养皿内微生物的生长情况，及时调整培养条件。
五、实验室清洁5.1 定期消毒：实验室设备和台面等应定期进行消毒，避免细菌滋生。
5.2 清洁整理：实验结束后，及时清洁实验台面和设备，保持整洁。
5.3 废弃物处理：实验后的培养皿、试管等废弃物应按规定进行处理，避免细菌外泄。
结论：无菌实验室操作规程对实验结果的准确性和可靠性起着至关重要的作用，实验人员应严格按照规程操作，确保实验过程的无菌性和准确性。
院感知识考试试题及答案
院感知识考试试题及答案院感知识考试试题及答案在各领域中，我们经常跟试题打交道，试题可以帮助学校或各主办方考察参试者某一方面的知识才能。
一份什么样的试题才能称之为好试题呢？下面是小编收集整理的院感知识考试试题及答案，欢迎阅读，希望大家能够喜欢。
一、名词解释：每题5分，共20分。
1、医院感染：指病人在医院内获得的感染，包括在住院期间发生的感染和在医院内获得出院后发生的感染，但不包括入院前已开始或者入院时已处于潜伏期的感染。
医院工作人员在医院内获得的感染也属医院感染。
2、无菌操作：指在医疗、护理操作过程中，防止一切微生物侵入人体和防止无菌物品、无菌区域被污染的技术。
3、飞沫传播：病原微生物的飞沫核（≥5um）在空气中短距离（1米内）移动使易感人群的口、鼻粘膜或眼结膜等导致的传播。
4、隔离：是防止引起感染的病原体从病人或带菌者传播给他人的一种措施。
二、填空题：每空2分，共30分。
1、开启的各种溶酶超过（ 24小时）小时不得使用，最好采用小包装。
2、无菌物品存放于阴凉干燥、通风良好的物架上，距地面≥（ 20---25 ）cm的柜内，过期物品应（重新）灭菌。
3、新紫外线灯管照射强度不得低于（90）uw/cm2，使用中灯管不得低于（70）uw/cm2。
4、进入人体织组织或无菌器官的医疗用品必须（无菌）；接触皮肤粘膜的器具和用品必须（消毒）。
5、抽出的注射药液须注明时间，超过（ 2小时）不得使用。
6、物品的浸泡消毒、污染物具的表面擦拭消毒、饮用水和污水污物的'消毒宜选用（含氯）消毒剂。
7、手卫生泛指通过（洗手）、（手部消毒）或者（外科刷手）等方法来清洁消毒手部。
8、长期留置导尿管患者，不宜频繁更换导尿管。
建议更换导尿管频率为（ 1次/2周），普通集尿袋为（ 2次/周）。
9、疑似导尿管阻塞时，不得冲洗，就立即（更换导尿管）。
三、判断题：对者打√，错者打X，每题1分，共15分。
1、医疗机构收治的隔离传染病人或者疑似传染病病人产生的生活垃圾均属于感染性废物。
微生物学实验
微生物学实验实验一实验室环境和人体表面微生物的检查实验二油镜的使用和细菌的简单染色实验三细菌的革兰氏染色和芽孢染色实验四微生物大小的测定和酵母菌死活细胞的鉴定实验五培养基的配制与消毒灭菌实验六土壤微生物的分离纯化与鉴定实验七食品微生物检验 (一)细菌总数测定实验八食品微生物检验（二）大肠菌群数测定实验九大肠杆菌生长曲线的测定实验十IMViC与硫化氢试验实验一、实验室环境和人体表微生物的检查1.一、目的：1.比较来自不同场所与不同条件下细菌的数量与类型；2.观察不同类型微生物的菌落形态特征；3.体会无菌操作的重要性。
2.二、原理：1.微生物无孔不入，无处不在。
2.微生物→营养琼脂平板→菌落或菌苔。
（37 ℃倒置培养24 h）3.描述：菌落的大小、表面光滑或粗糙、干燥或湿润、隆起或扁平、边缘整齐或锯齿状、菌落透明或不透明、颜色以及质地均匀与否、疏松或紧密等，以便检查环境中细菌的类?秃褪 俊?4.细胞、放线菌、酵母菌和霉菌四大类型都可能存在，本实验重点观察细菌。
3.三、器材：1.培养基：营养琼脂平板（牛肉膏蛋白胨培养基）2.器具：无菌水、灭菌棉签、接种环（针）、酒精灯等。
4.四、步骤：1.标记。
组号/姓名、日期、样品来源。
2.接种。
3.倒置培养，37℃ 24 h4.观察结果。
5.五、结果6.样品来源菌落数菌落类型特征描写本实验室（流动空气30 min）1 大小形态干湿扁/隆透明度颜色边缘23接种室（不流动空气30min）洗手前洗手后头发屑指甲垢实验台门把1.六、思考题：1.人多的实验室与少人走动的实验室比较，平板上的菌落数和菌落类型有区别吗？试解释。
2.通过本实验，在防止培养物的污染和防止细菌的扩散方面，你有何体会？3.4.实验二油镜的使用和细菌的简单染色一、实验目的1、学习和掌握油镜的原理和使用技术。
2、学习微生物涂片、染色的基本技术，掌握细菌的简单染色法。
二、实验原理1．油镜使用原理：光镜的几种物镜中以油镜的放大倍数最大，尤其适用于微生物学研究。
微生物实验室要求
微生物检验实验室操作技术要求第一节实验室管理制度一、实验室管理制度1．实验室应制定仪器配备管理、使用制度，药品管理、使用制度，玻璃器皿管理，使用制度，并根据安全制度和环境条件的要求，本室工作人员应严格掌握，认真执行。
2．进入实验室必须穿工作服，进入无菌室换无菌衣、帽、鞋，戴好口罩，非实验室人员不得进入实验室，严格执行安全操作规程。
3．实验室内物品摆放整齐，试剂定期检查并有明晰标签，仪器定期检查、保养、检修, 严禁在冰箱内存放和加工私人食品。
4．各种器材应建立请领消耗记录，贵重仪器有使用记录，破损遗失应填写报告；药品、器材、菌种不经批准不得擅自外借和转让，更不得私自拿出，应严格执行《菌种保管制度》。
5．禁止在实验室内吸烟、进餐、会客、喧哗，实验室内不得带入私人物品，离开实验室前认真检查水、电、暖气、门窗，对于有毒、有害、易燃、污染、腐蚀的物品和废弃物品应按有关要求执行。
6．科、室负责人督促本制度严格执行，根据情况给于奖惩，出现问题立即报告，造成病原扩散等责任事故者，应视情节直至追究法律责任。
二、仪器配备、管理使用制度1．食品微生物实验室应具备下列仪器：培养箱、高压锅、普通冰箱、低温冰箱、厌氧培养设备、显微镜、离心机、超净台、振荡器、普通天平、千分之一天平、烤箱、冷冻干燥设备、匀质器、恒温水浴箱、菌落计数器、生化培养箱，电位pH计、高速离心机。
2．实验室所使用的仪器、容器应符合标准要求，保证准确可靠，凡计量器具须经计量部门检定合格方能使用。
3．实验室仪器安放合理，贵重仪器有专人保管，建立仪器档案，并备有操作方法，保养、维修、说明书及使用登记本，做到经常维护、保养和检查，精密仪器不得随意移动，若有损坏需要修理时，不得私自拆动、应写出报告、通知管理人员，经科室负责人同意填报修理申请、送仪器维修部门。
4．各种仪器（冰箱、温箱除外），使用完毕后要立即切断电源，旋钮复原归位，待仔细检查后，方可离去。
5．一切仪器设备未经设备管理人员同意，不得外借，使用后按登记本的内容进行登记。
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目的要求
掌握从土壤中分离微生物的方法，通过检 测环境和人体中微生物的存在，体会微生 物分布的广泛性。
学习无菌操作的技术，掌握平板划线分离 微生物的方法。
实验原理
自然环境中和人及动物的体表、体内都存在大量的 微生物，它们一遇到适合的条件就会大量繁殖。当把 取自不同来源的含菌样品接种于含有生长发育需要的 各种营养成分的固体培养基时，就会形成肉眼可见的 微生物集体群落。
实 验 程 序 Ⅱ （土样的稀释分离 ）
制备土样悬浊液：称取土样1g，迅速倒入盛有99ml无菌水和玻璃 球的三角瓶中，置入磁力棒，搅拌10-15min，使土样充分打散， 即成10-2的土壤悬浊液。
稀释：用无菌移液管吸10-2的土壤悬液1mL，放入9mL无菌水中 即为10-3稀释液，如此重复，可依次制成10-3～10-6的稀释液。 (注意：操作时每一个稀释度换用一支移液管，每次吸入土 液后，要将移液管插入液面，吹吸3次，每次吸上的液面要高 于前一次，以减少稀释中的误差。)
空气--d 4、按个人标记：姓名
培养：将接种的平板分别放入细菌和霉菌培养箱中培养
。25-30℃下霉菌培养3-5天、放线菌培养5-7天，； 35-37℃下细菌培养1-2天。
每小组具体分工
结果与思考题
无菌倒平板时注意的事项有哪些？ 平板接种后为什么要倒置培养？ 通过本次试验你学到了什么？有什么体会？
➢ 10-5 、10-6的土壤稀释液：无菌移液枪或吸管分别取0.2ml，无 菌操作加到两种平板上，每个稀释度做两套平板）。
实 验 程 序 Ⅲ （标记、培养 ）
标记： 培养类别-组别- 样品类别-姓名
1、按培养基类别：细菌培养基--A，霉菌培养基--B，放线菌 培养基--C
2、按3个大组：Ⅰ、 Ⅱ、 Ⅲ 3、按样品类别：10-5、10-6、口腔--a、鼻腔--b、 头发--c、
➢ 鼻腔：取一支无菌棉棒，放入无菌生理盐水中沾湿后，插入到鼻 孔中转动一周，取出，在无菌平板上划线接种，取出棉棒，合上 皿盖。
➢ 头发：将皿盖打开，轻拍头发，使头发中的微生物降落到平板表 面，合上皿盖。
➢ 空气：选好地点后，打开皿盖，手托住平板，静止3-5分钟，使 空气中的微生物自然降落到平板表面，合上皿盖。
每种微生物群落都有其独有的特点，如大小、颜色、 表面干燥或湿润、隆起或扁平、粗糙或光滑、边缘整 齐或不整齐等。因此，可以通过平板培养来检测不同 环境下微生物的数量、种类和特点。
实验材料
培养基：牛肉膏蛋白胨培养基(PCA)、马铃薯葡萄
糖培养基（PDA ）、改良高氏1号培养基；
土 样：地面以下5-10cm的土壤；
其 他：酒精灯、无菌棉棒、无菌生理盐水、涂布
棒、记号笔、培养皿、吸管、磁力搅拌器；
实 验 程 序 Ⅰ（无菌操作技术 ）
倒平板
在酒精灯火焰旁操作，将融化并冷却至不烫手的灭菌固体 培养基倒入无菌的培养皿，倒量为容积的1/3或者覆盖皿底5毫 米左右，然后平放到桌面待其凝固即为无菌平板。
稀释涂布平板法（移液枪稀释）
土样的稀释方法示意图
No Image
图1 从土壤中分离微生物操作过程
实验程序Ⅱ
（环境及人体各部位取菌样 ）
共取六个菌样，分别为：口腔、鼻腔、头发、 空气和土壤稀释液中的10-5、10-6两个稀释浓（无菌吸管分Biblioteka 取0.2ml，无菌操作加到平板上）
➢ 口腔: 将无菌平板打开适度开口，嘴对着开口咳嗽3-5次，使口 腔中的微生物接种到平板中，将皿盖合上，放在桌面即可。