总蛋白检测试剂盒(双缩脲比色法)

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总蛋白测定试剂盒(双缩脲法)产品技术要求zhongshengbeikong

总蛋白测定试剂盒(双缩脲法)产品技术要求zhongshengbeikong

总蛋白测定试剂盒(双缩脲法)适用范围:本产品与ABBOTT ARCHITECT c4000/c8000/c16000全自动生化分析仪配套使用,用于体外定量测定人血清中总蛋白的浓度。

1.1包装规格液体单剂型(液体Ⅰ型)试剂(R):60mL×4;试剂(R):80mL×4。

1.2主要组成成分试剂(R)(液体)氢氧化钠0.6mol/L酒石酸钾钠32mmol/L碘化钾20mmol/L硫酸铜12mmol/L2.1 外观试剂(R)应为蓝色溶液,无杂质、无絮状物,外包装完整无破损。

2.2 净含量液体试剂净含量应不少于标示值。

2.3 试剂空白吸光度在波长546nm(540nm~560nm)(光径1cm)处,试剂空白吸光度(A)应≤0.200。

2.4准确度测定尿素、尿酸和总蛋白复合冰冻人血清国家标准品(编号:360012),相对偏差应不超过±5%。

2.5分析灵敏度对应于浓度为60g/L的TP所引起的吸光度差值(△A)的绝对值应在0.100~0.500的范围内。

2.6重复性重复测试高、中、低浓度样本,变异系数(CV)应≤5%。

2.7批间差测定同一样本,批间差(R)应≤6%。

2.8线性范围在[2,100]g/L范围内,线性相关系数(r)应≥0.990;在(30,100]g/L范围内,线性相对偏差应不超过±10%;在[2,30]g/L范围内,线性绝对偏差应不超过±3g/L。

2.9试剂稳定性2.9.1试剂效期稳定性:原包装的试剂盒在2℃~8℃避光贮存,有效期为36个月。

试剂有效期满后3个月以内,试剂性能应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.8的要求。

2.9.2开盖稳定性:开盖后,在2℃~8℃避光保存,稳定期为30天;稳定期满后1天内,试剂性能应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.8的要求。

总蛋白测定试剂盒(双缩脲法)产品技术要求shouyi

总蛋白测定试剂盒(双缩脲法)产品技术要求shouyi

总蛋白测定试剂盒(双缩脲法)
适用范围:本试剂用于体外定量测定人血清中总蛋白的含量。

1.1产品规格
4×100mL;6×60mL;8×50mL;2×100mL
1.2产品组成成分
NaOH 600mol/L,硫酸铜12 mmol/L,酒石酸钾钠32 mmol/L。

2.1 外观
试剂为淡蓝色透明溶液。

2.2 装量
液体试剂的净含量应不少于标示值。

2.3 试剂空白吸光度
A≤0.15(光径1.0cm,波长540nm)。

2.4分析灵敏度
测定57.2g/L被测物时,吸光度变化在0.1631~0.2075范围内。

2.5 准确度
相对偏差应不超过±5%。

2.6 精密度
2.6.1 重复性
变异系数CV<3%。

2.6.2 批间差
批间相对极差<3%。

2.7 线性区间
a)(0,100]g/L。

在规定的线性区间内,测定值与样本浓度值的相关系数(r)应不低于0.990。

b)(0,30]g/L区间内,线性绝对偏差应不超过±3g/L;(30,100]g/L 区间内,线性相对偏差应不超过±10%。

2.8稳定性
原装试剂2~8℃避光保存,有效期18个月,有效期满后两个月内测定结果应符合2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.7的要求。

SH0001总蛋白测定SOP

SH0001总蛋白测定SOP

总蛋白液体测定(双缩脲法)Total Protein (TP)1检验目的本试剂盒用于体外定量测定人血清或血浆总蛋白。

2方法双缩脲比色终点法。

3原理在碱性条件下,蛋白与铜离子生成紫蓝色复合物。

显色强度和蛋白浓度成正比。

4 标本血清或血浆。

稳定性:20~25℃保存可稳定6天,4~8℃保存可稳定4周,-20℃保存至少可稳定1年。

不可使用已被污染的标本。

5 试剂5.1在测定时的各组分和浓度试剂1(R1):氢氧化钠80 mmol/L酒石酸钾钠12.8 mmol/L试剂2(R2):氢氧化钠100 mmol/L酒石酸钾钠16 mmol/L碘化钾15 mmol/L硫酸铜 6 mmol/L5.2试剂稳定性与贮存试剂避光保存于2~25℃,若无污染,可稳定至失效期。

试剂不可冰冻!标准品避光保存于2~8℃,若无污染,可稳定至失效期。

6 仪器OLYMPUS AU400全自动生化分析仪7测定程序见参数表8 校准品和质控品8.1使用Roche公司提供的Roche多项目定标液对自动分析仪进行校准。

每批样品检测时,使用Roche 公司提供的Roche定标液和控制品进行内部质量控制。

8.2质控物的保存和稳定性:质控物存放于4-8℃可保存一个月,分装存放于-20℃至有效期。

8.3室内质控规则:X±2S为警告线, X±3S为失控线。

8.4 不准确度允许范围:X±10%8.5不精密度:RCV:4.0%9 性能特性9.1病人结果可报告范围本法对总蛋白的检测范围为0.5~150 g/L。

当样品测定值超过上限时,应将样品用9 g/L氯化钠溶液作1+ 1稀释,重新测定,结果乘以2。

9.2特异性/干扰当样品中抗坏血酸浓度≤ 1704 μmol/L,胆红素浓度≤ 684 μmol/L,血红蛋白浓度≤ 5.00 g/L,甘油三酯浓度≤ 11.3 mmol/L时没有观察到干扰。

9.3灵敏度/检测限本试剂的检测限为0.5 g/L。

总蛋白测定试剂盒(双缩脲法)产品技术要求ruizhengshanda

总蛋白测定试剂盒(双缩脲法)产品技术要求ruizhengshanda

总蛋白测定试剂盒(双缩脲法)适用范围:本试剂盒用于体外定量测定人血清中总蛋白的含量。

1.1产品型号/规格及其划分说明1.2主要组成成分2.1外观2.1.1 外观(液体单试剂).R应为蓝色透明溶液,无混浊,无未溶解物;.校准液应为浅黄色透明溶液,无混浊,无未溶解物;.试剂盒标签标识清晰,外包装完整无损。

2.1.2 外观(液体双试剂)a)R1应为无色溶液,无混浊,无未溶解物;b)R2应为蓝色溶液,无混浊,无未溶解物;c)校准液应为浅黄色透明溶液,无混浊,无未溶解物;d)试剂盒标签标识清晰,外包装完整无损。

2.2 净含量R和校准液的净含量不少于标示值。

R1、R2和校准液的净含量不少于标示值。

2.3 试剂空白吸光度在主波长540nm, 副波长700nm处(光径1cm),试剂空白吸光度A≤0.20。

2.4分析灵敏度测量1g/L的被测物时,吸光度变化△A≥0.0010。

2.5 线性区间在[10,110]g/L线性范围内,线性相关系数r≥0.990。

在[10,20]g/L范围内,绝对偏差不超过±2g/L;在(20,110]g/L范围内,相对偏差不超过±10%。

2.6 精密度2.6.1 重复性重复测定(45±5)g/L、(70±10)g/L和 (100±10)g/L的样品,变异系数CV%≤5%。

2.6.2 批间差相对极差≤5%。

2.7 准确度测定标准物质BW3627-2,测定值与靶值的相对偏差不超过±10%。

2.8 稳定性原包装的试剂盒在(2~8)℃避光保存,有效期为18个月。

试剂盒在规定的储存条件下保存至有效期满后,检测2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.7项,结果应符合各项目的要求。

总蛋白测定(双缩脲法)SOP

总蛋白测定(双缩脲法)SOP

q 总蛋白测定(双缩脲法)SOP1.原理:所有蛋白质分子都含有肽键。

在碱性溶液中,肽键与铜离子结合,生成蓝紫色的化合物。

蓝紫色化合物在546nm(540nm-560nm)处的吸光度与肽键的数量成正比关系,依次可以计算蛋白质的含量。

2.方法:双缩脲法3.试剂:总蛋白试剂其含量为氢氧化钠0.6mol/L酒石酸钾钠32mol/L碘化钾20mol/L硫酸铜12mol/L4.储存条件及有效期:(1)原包装试剂在2℃-8℃避光贮存,有效期36个月。

(2)试剂开盖后在2℃-8℃避光保存,稳定期30天。

5. 样本要求:(1)样本种类:新鲜无溶血血清。

(2)样本采集:取空腹静脉血 3.0ml,置于带分离胶试管中,标本采集后,3000r/min离心5min,分离血清,立即密封送检。

(3)样本干扰:对反应吸光度有干扰的样本,包括溶血和浑浊的样本都可能影响检测结果,遇上述情况建议重新采集。

(4)样本保存:密封无蒸发条件下样本2℃-8℃可稳定3天。

6. 检验步骤:(1)开生化仪见生化仪的SOP。

(2)操作步骤:参数设置;试剂装载;校准;质控;样本装载;测定;结果审查;报告。

a.参数设置b.试剂装载每天在生化仪上进行试剂检查,检测的样本数,如发现量不多或不能满足当天需要,则需要加试剂,注意同一批号,不同批号的不能混用。

c.校准换一批新试剂或质控做的不理想需要校准。

d.质控在做样本之前每天做质控,质控符合要求才可以做样本,不符合要求需要做校准,做完校准后,用校准品当样本来测,做质控。

e.样本装载样本符合要求,放在试管架上,编号,上机检测。

f.测定g.结果审查h.报告7. 参考值55-85g/L8 .临床意义:+(1) 血清总蛋白浓度增高a.血清中水分减少,而使总蛋白浓度相对增高。

凡体内水分的排出大于水分的摄入时,均可引起血浆浓缩,尤其是急性失水时(如呕吐,腹泻,高热等)变化更为显著,血清总蛋白浓度有时可达100-150 g/L。

双缩脲法测定血清总蛋白实验报告

双缩脲法测定血清总蛋白实验报告

双缩脲法测定血清总蛋白实验报告一、实验目的1、掌握双缩脲法测定血清总蛋白的基本原理和操作方法。

2、熟悉分光光度计的使用。

3、了解血清总蛋白测定的临床意义。

二、实验原理双缩脲试剂是由硫酸铜的碱性溶液与酒石酸钾钠的碱溶液混合而成。

当含有两个或两个以上肽键的化合物与双缩脲试剂反应时,会形成紫红色的络合物。

由于蛋白质分子中含有多个肽键,其在碱性溶液中能与双缩脲试剂产生紫红色的反应,颜色的深浅与蛋白质的浓度成正比。

通过比色法测定反应后溶液的吸光度,与标准曲线对照,即可计算出血清中总蛋白的含量。

三、实验器材与试剂1、器材分光光度计恒温水浴箱移液器试管刻度吸管2、试剂双缩脲试剂:称取硫酸铜(CuSO4·5H2O)15g 和酒石酸钾钠60g,分别用蒸馏水溶解后,混合并定容至 1000ml,在室温下放置可长期稳定。

蛋白标准液(60g/L):准确称取干燥的牛血清白蛋白 60g,用生理盐水溶解并定容至 100ml。

待测血清样本四、实验步骤1、标准曲线的绘制取 6 支干净的试管,编号 1-6,按下表加入试剂:|试管编号| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 ||::|::|::|::|::|::|::||蛋白标准液(ml)| 0 | 02 | 04 | 06 | 08 | 10 ||生理盐水(ml)| 10 | 08 | 06 | 04 | 02 | 0 ||双缩脲试剂(ml)| 40 | 40 | 40 | 40 | 40 | 40 |摇匀后,置于 37℃水浴中保温 30 分钟。

以 1 号管为空白对照,在 540nm 波长处,用分光光度计测定各管的吸光度值(A)。

以蛋白质含量(g/L)为横坐标,吸光度值为纵坐标,绘制标准曲线。

2、测定血清总蛋白取 3 支干净的试管,编号 7、8、9,按下表加入试剂:|试管编号| 7(空白管)| 8(标准管)| 9(测定管)||::|::|::|::||生理盐水(ml)| 10 | 0 | 0 ||蛋白标准液(ml)| 0 | 10 | 0 ||待测血清(ml)| 0 | 0 | 10 ||双缩脲试剂(ml)| 40 | 40 | 40 |摇匀后,置于 37℃水浴中保温 30 分钟。

总蛋白(TP)测定试剂盒(双缩脲法)产品技术要求mairui

总蛋白(TP)测定试剂盒(双缩脲法)产品技术要求mairui

2性能指标
2.1外观
试剂1(R1)应为清澈透明的液体,无沉淀、悬浮物和絮状物;
试剂2(R2)应为清澈透明的液体,无沉淀、悬浮物和絮状物;
试剂盒各组分应齐全、完整,液体无渗漏;包装标签文字符号应完整、清晰。

2.2净含量
液体试剂的净含量应不少于标示值。

2.3试剂空白吸光度
试剂以水为空白在37 ℃ 1 ℃,546 nm 波长条件下,吸光度应小于0.200。

2.4分析灵敏度
当样本浓度为70 g/L 时,吸光度变化应不小于0.150。

2.5线性范围
试剂盒在(2~120)g/L 范围内:
a)线性相关系数r 应不小于0.995;
b)当样本浓度不小于30 g/L 时,线性相对偏差应不超过±6.0%;当样本浓度小于30 g/L 时,线性绝对偏差应不超过±3.6g/L。

2.6测量精密度
2.6.1重复性
变异系数:CV 应不大于 2.0%。

2.6.2批间差
相对极差:R 应不大于 4.5%。

2.7准确度
2.7.1国家标准品测试
测定国家标准品,测定结果与靶值的相对偏差应不超过±5.0% 。

2.7.2质控品测试
测定质控品,测定结果应在靶值范围内。

2.8分析特异性
血红蛋白浓度在250 mg/dL 内、抗坏血酸浓度在30 mg/dL 内、内源性酯浓度在1200 mg/dL 内、结合胆红素在21 mg/dL 内、非结合胆红素浓度均在21 mg/dL 内、葡聚糖(分子量:7w 或4w)浓度在3000 mg/dL 内,对试剂检测结果的偏差影响应在±10 .0%以内。

血清总蛋白液体双缩脲法测定

血清总蛋白液体双缩脲法测定

血清总蛋白液体(TP)双缩脲法测定1.实验原理双缩脲比色终点法。

在碱性条件下,蛋白与铜离子生成紫蓝色复合物。

显色强度和蛋白浓度成正比。

OH—蛋白质+ Cu2+ -------------﹥紫红色复合物2. 标本采集2.1 病人准备:无特殊要求。

最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。

2.2 类型:血清或血浆。

3. 标本存放20~25℃保存可稳定6天;4~8℃保存可稳定4周;-20℃保存至少可稳定1年。

4. 标本运输室温条件下运输5. 标本拒收标准:细菌污染的不能做测定。

6. 实验材料:6.1 上海申能总蛋白测定试剂盒货号:14223171701 试剂1+试剂26.1.1 试剂组成试剂1(R1):6×64ml氢氧化钠80 mmol/L酒石酸钾钠12.8 mmol/L试剂2(R2):6×16ml氢氧化钠100 mmol/L酒石酸钾钠16 mmol/L碘化钾15 mmol/L硫酸铜 6 mmol/L6.1.2 试剂准备:试剂为即用式。

6.1.3 试剂稳定性与贮存:试剂避光保存于2~25℃,若无污染,可稳定至失效期。

试剂有效期为24个月。

试剂不可冰冻。

开盖后应避免污染。

6.1.4 变质指示:当试剂有浊度时,表明有细菌污染,不能继续使用。

6.1.5 注意事项:试剂中含有氢氧化钠,不可入口!如与皮肤及粘膜接触,请立即用大量水冲洗。

使用试剂时应采取必要的防护。

6.2 校准品:使用DiaSys公司提供的TruCal U校准品对自动分析仪进行校准,具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。

6.3 质控品:具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。

7. 仪器:贝克曼AU680生化分析仪8. 操作步骤8.1 项目基本参数:参见生化检验贝克曼AU680生化分析仪项目测定参数.SOP文件8.2仪器操作步骤:参见生化检验贝克曼AU680生化分析仪操作规程.SOP文件9. 检验结果的判断与分析10. 质量控制:在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析,以2S为质控警告限,3S为失控限,绘制质控图,判断是否在控。

单试剂与双试剂双缩脲法测定血浆总蛋白的对比分析

单试剂与双试剂双缩脲法测定血浆总蛋白的对比分析

单试剂与双试剂双缩脲法测定血浆总蛋白的对比分析发布时间:2022-01-25T07:22:16.075Z 来源:《中国科技人才》2021年第29期作者:蒋炳姣[导读] 国际临床化学协会(IFCC)建议,在严格控制条件下,推荐使用双缩脲法测定血浆总蛋白,这也使得该检测方法在临床中广泛应用。

广西冠峰生物制品有限公司广西南宁 530299摘要:目的:探究在对血浆总蛋白进行测定时,应用单试剂与双试剂双缩脲法测定的结果对比。

方法:随机选择我公司血浆标本100例,分为70例脂浊标本以及30例正常血浆标本,分别采用单试剂与双试剂双缩脲法测定血浆总蛋白,并将结果进行对比分析。

结果:单试剂双缩脲法测定中,对正常血浆组标本与4.00 <TG<10.00 mmoL/ L组、TG >10 .03 mmoL/ L组标本测定结果比较,存在明显差异(P<0.05),双试剂双缩脲法测定中,对正常血浆组标本与4.00 <TG<10.00 mmoL/ L组、TG >10 .03 mmoL/ L组的标本测定结果比较,存在明显差异(P<0.05)。

但是单试剂与双试剂双缩脲法测定血浆总蛋白的结果比较,三组均不存在明显差异(P>0.05)。

结论:总蛋白双缩脲法单试剂盒与双试剂盒的检测结果无明显偏差,为体现检测结果表达更完整,建议实验室使用双试剂盒检测血浆样本。

关键词:单试剂;双试剂;双缩脲法;血浆总蛋白国际临床化学协会(IFCC)建议,在严格控制条件下,推荐使用双缩脲法测定血浆总蛋白,这也使得该检测方法在临床中广泛应用。

既往研究表明,对于脂浊标本,通过双试剂双缩脲法测量其血浆总蛋白的干扰是已知的,并且脂质混浊度越显著,干扰越大[1]。

另外如果应用单试剂双缩脲法测定时,由于标本中存在黄疸、油腻浑浊、溶血的影响,不适合自动分析,同时也存在样品空白干扰的情况。

而有条件的实验室,通过双试剂双缩脲法评估血浆蛋白质的含量,可以有效地提高对报告结果的准确性[2]。

尿酸测定试剂盒(尿酸酶法)标准化操作规程TP-SOP

尿酸测定试剂盒(尿酸酶法)标准化操作规程TP-SOP

总蛋白测定试剂盒(双缩脲法)标准化操作规程1 目的规范实验室操作,保证检验工作顺利有效进行特制定此规程。

2 授权操作人经培训且考核通过的实验室检验人员。

3 适用范围本试剂适用于体外定量检测人血清或血浆中总蛋白的含量。

4 检验方法本试剂盒采用双缩脲法测定总蛋白的含量。

5 检验原理本试剂采用双缩脲反应方法,即在碱性溶液中,蛋白质分子中的肽键与两价铜离子反应生成蓝紫色络合物,其中每个铜离子与五至六个肽键络合。

在试剂中加入碘化物有助于防止碱性铜络合物的自动还原。

反应形成的蓝紫色与样本中总蛋白浓度成正比,通过测定520~560nm处吸光度值的变化,即可计算出样本中总蛋白的浓度。

双光束分析时,空白波长应设定在600~700nm。

6 标本要求6.1样本为血清或血浆。

由于血浆含有纤维蛋白原,测定结果比血清高约3g/L。

6.2样本应及时离心分离,不得使用溶血或被污染的样本。

6.3样本分离后,请于当日测定。

如当日不能完成测定,请作如下保存:样本在无微生物污染2℃~8℃可稳定5天。

冷冻保存稳定时间更长,注意样本融化后需轻轻颠倒混匀。

7 试剂及配套品7.1试剂来源长春迪瑞医疗科技股份有限公司总蛋白试剂盒(双缩脲法)7.2试剂组成7.37.3.1试剂在2℃~8℃条件下,干燥、避光、密封贮存,有效期为18个月。

7.3.2试剂开封后在2℃~8℃条件下可稳定30天。

8 实验仪器及性能指标8.1 实验仪器迪瑞CS系列全自动生化分析仪8.2试剂性能指标8.2.1 试剂空白吸光度:A在0.050~0.150范围内。

8.2.2 分析灵敏度:测试1.0g/L被测物时,吸光度变化△A>0.002。

8.2.3 线性范围:线性范围为5.0g/L~150g/L;线性相关系数r≥0.9950;[5.0,30]g/L范围内,线性绝对偏差应不超过±5.0g/L;(30,150] g/L范围内,相对偏差不超过±15%。

8.2.4 准确度:当参考物质浓度≤30 g/L,实测值与标示值的绝对偏差应在±5.0 g/L范围内;当参考物质浓度>30 g/L,实测值与标示值的相对偏差应在±15%范围内。

TP 文档,总蛋白(TP)测定试剂盒(双缩脲法)检测标准操作规程

TP 文档,总蛋白(TP)测定试剂盒(双缩脲法)检测标准操作规程

1、方法依据:深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司总蛋白(TP)测定试剂盒(双缩脲法)测定方法2、适用范围:适用于人血清或血浆总蛋白(TP)的测定。

3、试剂仪器:3.1 试剂:深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司原装试剂盒。

3.2 试剂储存:未开启的试剂盒在2℃~8℃保存有效期为一年。

试剂开瓶后应避光保存,在2℃~8℃可稳定28天。

试剂不可冰冻3.3 仪器:迈瑞BS-2000M全自动生化分析仪.4、操作程序4.1方法原理在碱性条件下,蛋白质与铜离子生成紫蓝色复合物。

显色强度和蛋白质浓度成正比4.2样本要求新鲜血清、肝素抗凝或EDTA抗凝血浆样本。

采集后及时测定,应避免溶血和污染4.3上机操作4.3.1试剂装载、校准、样品和质控血清分析操作详见“《迈瑞BS-2000M全自动生化分析仪标准操作、维护、保养规程》”。

4.3.2 校准:4.3.2.1 标准液的准备:标准液的准备:校准品使用深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司配套冻干品,按说明书要求稀释后分装,-20℃冷冻保存,用前提前15分钟从冰箱中取出,复溶到室温后上机检测。

4.3.2.2 校准程序:首次使用校准。

当有以下情况时需重新校准:1)换试剂批号或出现质控漂移时;2)当仪器做完保养后;3)仪器进行零件更换时。

每次试验前用准备好的校准品进行校准,校准通过后进行检测。

4.3.2.3 质控:在标本开始之前做质控,质控通过后方能进行标本的检测。

4.3.3 测试基本参数4.4参考范围60~80 g/L(注:各实验室应有自己的参考范围。

)4.5 方法评价线性范围:2~120 g/L。

样本中含量超出可报告范围,请用生理盐水稀释后测定,结果乘以稀释倍数。

反应曲线异常时应进行重复测定确认。

精密度:批内 CV ≤ 3%批间 CV ≤ 4.5%分析灵敏度:本试剂盒检测低限2 g/L。

5、临床意义TP 分为白蛋白和球蛋白两类,具有维持胶体渗透压,运输多种代谢物,调节被运输物质生理作用等功能,与机体免疫功能密切相关。

总蛋白测定试剂盒(双缩脲法)产品技术要求haomai

总蛋白测定试剂盒(双缩脲法)产品技术要求haomai

总蛋白测定试剂盒(双缩脲法)适用范围:本试剂盒用于体外定量测定人血清中总蛋白(TP)的含量。

1.1包装规格序号规格1 试剂1:2×50ml;校准品:1×3ml。

2 试剂1:6×60ml;校准品:1×3ml。

3 试剂1:6×100ml;校准品:1×3ml。

4 试剂1:4×100ml;校准品:1×3ml。

5 试剂1:1×1000ml;校准品:1×3ml。

6 试剂1:5×24ml;校准品:1×3ml。

7 试剂1:10L。

1.2主要组成成分本试剂由试剂1(R1)和校准品(STD)组成试剂1(R1):氢氧化钠0.6mol/L酒石酸钾钠30mmol/L硫酸铜12mmol/L碘化钾30mmol/L校准品:蛋白质溶液(基质:水溶液;浓度:80g/L)。

2.1 外观试剂盒外观应整洁,文字符号标识清晰;R1为蓝色透明液体,校准品为无色透明液体。

液体试剂不得有沉淀和絮状物。

2.2 装量试剂瓶内液体装量应不少于标示值。

2.3 空白吸光度以生理盐水为样品,在37℃、546nm波长、1cm光径条件下,吸光度≤0.15。

2.4 分析灵敏度浓度为50g/L的样本,吸光度差值△A>0.06。

2.5 准确性相对偏差应不大于10%。

2.6 重复性重复测试浓度在(70±10)g/L的控制血清,所得结果的重复性(变异系数,CV)应不大于10%。

2.7 线性2.7.1在(10,120)g/L范围内,线性相关系数r应不低于0.990;2.7.2 在(10,40]g/L范围内绝对偏差不超过±4.0g/L;(40,120)g/L范围内相对偏差不超过±10%。

2.8 批间差用三个批号的试剂盒测定同一份样本,试剂盒批间相对极差应不超过10%。

2.9 稳定性试剂盒在2~8℃避光保存,可稳定22个月。

取到效期后的样品检测试剂空白吸光度、分析灵敏度、准确度、重复性、线性范围应分别符合2.3、2.4、2.5、2.6、2.7的要求。

实验二 血清总蛋白测定(双缩脲法)

实验二 血清总蛋白测定(双缩脲法)

实验二血清总蛋白测定(双缩脲法)血清总蛋白是血清中所有蛋白质的总称,正常人含量为60-80g/L。

按不同的分离方法可将血清蛋白质分为不同的组分。

从目前临床生化实际应用上,血清总蛋白分为清蛋白和球蛋白两大类,其中球蛋白又分为α1球蛋白、α2球蛋白、β球蛋白、γ球蛋白四种。

正常成人每天所合成的血清蛋白质中,清蛋白及大部分α1、α2、β球蛋白是肝脏合成的,γ球蛋白(大部分是免疫球蛋白)则主要来源与浆细胞。

总蛋白测定,一般利用下列四种蛋白质的结构或性质进行:重复的肽键结构;酪氨酸和色氨酸残基对酚试剂反应或紫外吸收;与染料的结合能力;沉淀后借浊度或光折射测定。

目前临床应用最广泛的方法是利用蛋白质分子中的多个肽键与双缩脲试剂显色法。

【目的】1. 熟悉血清总蛋白测定的原理及基本操作。

2. 掌握血清总蛋白测定的临床意义。

【原理】蛋白质分子中的肽键(-CONH-)在碱性条件下能与Cu2+ 作用形成紫红色络合物。

此呈色反应与双缩脲(H2N-OC-NH-CO-NH2)在碱性溶液中与Cu2+ 作用产生紫红色的反应相似,故称为双缩脲反应。

反应中溶液颜色的深浅与蛋白质的含量成正比,可用分光光度法定量检测蛋白质的含量。

凡具有两个以上肽键结构的化合物均有此反应,因此双缩脲反应广泛用于肽及蛋白质定性、定量检测。

【器材】恒温水浴箱、分光光度计、刻度吸管、微量移液管、试管、试管架。

【试剂】1.6mol/L NaOH溶液称取NaOH(优级纯)240g,溶解于新鲜蒸馏水中并加至1000ml。

置聚乙烯瓶内盖紧室温保存。

2. 双缩脲试剂精确称取结晶硫酸铜(CuSO4·5H20)3.0g,酒石酸钾(NaKC4H4O6·4H2O) 9.0g,碘化钾(KI)5.0g,用500m1新鲜蒸馏水溶解。

在搅拌下,加入6mol/L氢氧化钠溶液100ml,最后加蒸馏水稀释至1000ml。

置聚乙烯瓶内盖紧室温保存。

3.70g/L蛋白标准液可用商品血清蛋白标准液,也可收集混合新鲜血清用微量凯氏定氮法测定蛋白质含量,加叠氮钠防腐,冰冻保存。

总蛋白(TP) 双缩脲终点法

总蛋白(TP) 双缩脲终点法

目录1. 检测原理2. 标本采集与处理2.1 受检者的准备2.2 静脉采血2.3 抗凝剂2.4 标本处理3. 试剂3.1 试剂3.2 校准血清3.3 试剂与校准血清的稳定性4. 仪器5. 操作6. 计算7. 操作性能7.1 精密度7.2 准确度7.3 灵敏度7.4 可报告范围7.5 特异性7.6 干扰8. 参考值9. 临床意义附录A: 参数1. 检测原理蛋白质是由许多氨基酸通过肽键相互结合而成的,肽键在碱性溶液中,能与铜离子作用产生紫红色络合物,在540nm有吸收峰,并与蛋白含量成正比。

通过与同样处理的标准蛋白比较可求出血清总蛋白含量。

碱性蛋白质+ 铜离子------------ 紫红色络合物2.标本采集与处理2.1 受检者的准备:病人空腹12h,不饮酒24h后采集血样。

体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。

注意有无应用影响测试项目的药物。

此外,对于体检者,采血的季节都应做相关记录,因为样本中各项目的含量有季节性变动,为了前后比较应在每年同一季节检验。

应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。

2.2 静脉采血:除非是卧床的病人,一般在采血时取坐位。

体位影响水分在血管内外的分布,会影响测试项目的浓度。

在采血前至少应静坐5分钟,一般从肘静脉取血,使用止血带的时间不超过1分钟,穿刺成功后立即松开止血带。

2.3 抗凝剂:血浆使用0.1mg/ml肝素或EDTANa2(1.8mg/mL)作为抗凝剂。

2.4 标本处理:血标本室温放置30min~45min后离心分离血清或血浆,在两小时内检测完毕;如两小时内不能检测完毕,将离心分离血清或血浆置洁净试管加盖2-8℃保存。

3.试剂3.1 试剂:本科使用湖南永和阳光科技有限责任公司TP试剂盒,为液体单一试剂,各组分如下:标准液:70g/L总蛋白3.2 校准血清:使用湖南永和阳光科技有限责任公司提供的40项校准血清。

校准频次:空白定标:每日需做试剂空白定标。

全点定标:试剂换批号使用时或质控结果超过规定的2SD范围,需要全点定标。

总蛋白(TP)测定试剂盒(双缩脲法)产品技术要求sainuopu

总蛋白(TP)测定试剂盒(双缩脲法)产品技术要求sainuopu

总蛋白(TP)测定试剂盒(双缩脲法)适用范围:用于体外定量测定人体血清中总蛋白的含量。

1.1 试剂盒包装规格试剂:1×20ml;2×60ml;3×40ml;4×60ml;4×400ml;2×30ml。

校准品:1×1ml;1×3ml。

1.2 试剂盒主要组成成分2.1 外观试剂:亮蓝色澄清液体。

校准品:无色至浅黄色澄清液体。

2.2 净含量液体试剂的净含量不得低于标示体积。

2.3 试剂空白吸光度在37℃、546nm波长、1cm光径条件下,试剂空白吸光度应不大于0.2。

2.4 分析灵敏度测定浓度为50g/L样本时,吸光度变化值(ΔA)应不小于0.2。

2.5 线性范围在(10,100)g/L线性范围内,线性相关系数r应不小于0.990。

在[30,100)g/L范围内的线性相对偏差应不大于±10%;在(10,30)g/L范围内的线性绝对偏差应不大于±3.0g/L。

2.6 重复性重复测试两份高低浓度的样本,所得结果的变异系数(CV%)应不大于3%。

2.7 批间差不同批号试剂测试同一份样本,测定结果的批间相对极差应不大于5%。

2.8 准确度相对偏差:相对偏差应不超过±10%。

2.9 校准品溯源性依据GB/T 21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》的要求,校准品溯源至NIST生产的有证参考物质(SRM927)。

2.10 稳定性效期稳定性:试剂盒在2℃~8℃下有效期为12个月,取失效期的试剂盒进行检测,试验结果应满足2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.8要求。

双缩脲法测定血清总蛋白实验报告

双缩脲法测定血清总蛋白实验报告

一、实验目的1. 掌握双缩脲法测定血清总蛋白的基本原理和操作步骤;2. 了解双缩脲试剂的配制方法和使用注意事项;3. 熟悉血清总蛋白的临床意义;4. 通过实验,提高实验操作技能和数据分析能力。

二、实验原理双缩脲法是一种测定蛋白质含量的方法,其原理是:在碱性溶液中,蛋白质分子中的肽键与铜离子(Cu2+)发生反应,形成紫红色络合物。

该络合物在特定波长(如540nm)下的吸光度与蛋白质含量呈线性关系。

通过测定吸光度,可以计算出样品中蛋白质的含量。

三、实验材料与试剂1. 实验材料:牛血清、生理盐水、双缩脲试剂、蛋白质标准液、试管、加样枪、刻度吸管、洗耳球、水浴锅、分光光度计。

2. 实验试剂:(1)双缩脲试剂:硫酸铜、酒石酸钾钠、碘化钾;(2)蛋白质标准液:70g/L;(3)生理盐水:0.9%。

四、实验步骤1. 准备工作:将牛血清、生理盐水、双缩脲试剂、蛋白质标准液等实验材料准备好,并检查仪器设备是否正常。

2. 标准曲线的制作:(1)取6支试管,分别编号为1-6号;(2)向1-5号试管中加入不同浓度的蛋白质标准液,6号试管为空白对照;(3)向每支试管中加入适量的双缩脲试剂;(4)将试管放入水浴锅中,室温放置30分钟;(5)用分光光度计测定540nm处的吸光度,记录数据;(6)以蛋白质浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。

3. 样品测定:(1)取3支试管,分别编号为A、B、C;(2)向A、B、C号试管中加入适量的牛血清;(3)向A、B号试管中加入适量的双缩脲试剂,C号试管为空白对照;(4)将试管放入水浴锅中,室温放置30分钟;(5)用分光光度计测定540nm处的吸光度,记录数据;(6)根据标准曲线,计算A、B号试管中蛋白质的含量。

五、实验结果与分析1. 标准曲线的制作:根据实验数据,绘制标准曲线,横坐标为蛋白质浓度(g/L),纵坐标为吸光度。

曲线线性良好,相关系数R2=0.99。

2. 样品测定:根据标准曲线,计算A、B号试管中蛋白质的含量,结果如下:A号试管:蛋白质含量为70g/L;B号试管:蛋白质含量为68g/L。

双缩脲法测定血清总蛋白实验报告

双缩脲法测定血清总蛋白实验报告

双缩脲法测定血清总蛋白实验报告双缩脲法测定血清总蛋白实验报告引言:血清总蛋白是血液中的一种重要指标,它反映了人体内蛋白质的总量和分布情况。

测定血清总蛋白可以帮助医生判断患者的营养状况、肝功能以及某些疾病的发展情况。

本实验采用了双缩脲法,通过与标准物质的比色反应,定量测定了血清总蛋白的含量。

实验方法:1. 实验仪器与试剂准备本实验所需仪器有分光光度计、移液器、比色皿等。

所需试剂有双缩脲试剂、标准物质(如牛血清白蛋白)以及待测血清样品。

2. 样品预处理将待测血清样品离心,取上清液,并用移液器将上清液吸取到比色皿中。

3. 加入双缩脲试剂用移液器向比色皿中加入适量的双缩脲试剂,并轻轻搅拌均匀,使样品与试剂充分反应。

4. 与标准物质比色将标准物质分别加入不同的比色皿中,每个比色皿中加入相同体积的双缩脲试剂,与待测血清样品同时进行比色。

5. 分光光度计测定将比色皿放入分光光度计中,设定波长为标准波长,记录吸光度值。

6. 绘制标准曲线将吸光度值与标准物质的浓度进行对照,绘制标准曲线。

7. 计算待测血清样品的总蛋白含量根据待测血清样品的吸光度值,在标准曲线上找到对应的浓度,即可计算出待测血清样品的总蛋白含量。

结果与讨论:在本次实验中,我们测得待测血清样品的吸光度值为0.6。

根据标准曲线,我们可以得知该吸光度值对应的总蛋白浓度为30 g/L。

通过与标准物质的比色反应,我们成功地测定了待测血清样品的总蛋白含量。

总蛋白是人体内重要的营养物质,对于维持正常的生理功能至关重要。

通过测定血清总蛋白的含量,我们可以了解患者的营养状况。

如果总蛋白含量过低,可能意味着患者存在蛋白质摄入不足或吸收不良的问题。

而过高的总蛋白含量可能与肝功能异常、肾脏疾病等有关。

然而,需要注意的是,双缩脲法只能测定血清总蛋白的含量,并不能提供蛋白质的具体组成信息。

在实际应用中,还需要结合其他指标和临床病史来综合判断患者的健康状况。

结论:通过双缩脲法测定血清总蛋白的含量,我们可以快速、准确地了解患者的营养状况和某些疾病的发展情况。

总蛋白测定试剂盒(双缩脲法)产品技术要求aiweide

总蛋白测定试剂盒(双缩脲法)产品技术要求aiweide

总蛋白测定试剂盒(双缩脲法)
适用范围:本试剂用于体外定量测定人体血清中总蛋白的含量。

1.1 包装规格
a) 单一试剂:4×40mL;
b) 单一试剂:5×60mL;
c) 单一试剂:2×100mL。

1.2主要组成成分
氢氧化钠600 mmol/L
硫酸铜12 mmol/L
酒石酸钾钠32 mmol/L
碘化钾30 mmol/L
2.1外观
单一试剂:亮蓝色清亮液体。

2.2试剂装量
应不低于试剂瓶标示装量。

2.3 试剂空白吸光度
在546nm处测定试剂空白吸光度,应≤0.5。

2.4分析灵敏度
测定TP含量为50g/L样本时,其△A应≥0.01。

2.5线性范围
2.5.1测试浓度在[10,150] g/L范围内,线性回归的相关系数(r)应不低于0.990;
2.5.2测试浓度在[10,30] g/L范围内,线性绝对偏差应不超过±3g/L;
测试浓度在(30,150] g/L范围内,线性相对偏差应不超过±10%。

2.6 测量精密度
2.6.1重复性:重复测试三个水平的样本,所得结果的变异系数(CV)应不大于5%。

2.6.2批间差:抽取3个不同批号的试剂,对同一份样本进行重复测定,相对极差≤10%。

2.7准确度
以国家标准物质为检测样本时,测定结果相对偏差≤±10%。

2.8 稳定性
取在2℃~8℃条件下贮存达到18个月的试剂进行检测,应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.7的要求。

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总蛋白检测试剂盒(双缩脲比色法)
简介:
总蛋白(Total Protein ,TP)由白蛋白和球蛋白组成。

对于生物体液(血清、尿液、脑脊液)中总蛋白质含量的测定,一般要基于如下两个假设:1、所有蛋白质分子由纯多肽组成,含氮量的质量百分比为16%;2、体液中含有数百个蛋白质分子,每个分子对测定反应都具有非常相似的特性。

目前常用的方法有:双缩脲法、紫外分光光度法、染料结合法、凯氏定氮法、沉淀法等。

Leagene 总蛋白检测试剂盒(双缩脲比色法)多用于人或动物血清、血浆、组织等样本中的总蛋白含量测定。

双缩脲反应的原理是在呈蓝色的碱性硫酸铜溶液存在的情况下,铜离子与肽键形成有色螯合的铜复合物,呈紫色,所产生的颜色密度与参与反应肽键数成比例。

可通过比色法分析浓度,在紫外可见光谱中的波长。

双缩脲法测定蛋白浓度兼容性亦很好,不受大部分样本中其他成分的影响,但易受铜离子螯合剂影响。

本试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。

组成:
自备材料:
1、 离心管或小试管
2、 水浴锅或恒温箱
3、 比色杯
4、 分光光度计
操作步骤(仅供参考):
1、 取蛋白标准配制液或稀释液加入到蛋白标准中,充分溶解后配制成的蛋白标准溶液,配
制后可立即使用,溶解后的蛋白标准溶液应-20℃保存。

亦可按自己试验要求继续进行稀释,如稀释至1mg/ml 。

特别提示:待测蛋白溶解于什么样的稀释液中,蛋白标准也宜溶解于什么样的稀释液中。

例如待测蛋白溶解于蔗糖中,亦取蛋白标准溶解于蔗糖中。

一般也可以用NaCl 或PBS 作为溶解总蛋白标准品的稀释液。

编号 名称
TC0547 120T Storage
试剂(A): 双缩脲试剂 250ml 4℃ 试剂(B): 蛋白标准 20mg RT 试剂(C): 蛋白标准配制液 5ml RT 试剂(D): 双缩脲空白试剂(备选) 100ml
4℃ 使用说明书
1份
2、样本处理:血清、血浆样本直接取检测。

对于组织样本,按组织质量(g):生理盐水比
例,加入生理盐水或PBS,冰浴下匀浆后,离心,取上清待检。

3、TP加样操作,按下表依次加入试剂:
加入物(ml) 空白管标准管待测管
ddH2O 0.04
蛋白标准溶液(如1mg/ml) 0.04
待检样品(血清、血浆、组织匀浆液) 0.04
双缩脲试剂 2.0 2.0 2.0
4、混匀,孵育。

5、比色杯光径,分光光度计测定波长处的吸光度,如无,之间的波长也可。

以空白管调零,
读取标准管和各待测管的吸光度。

6、当遇到浑浊或溶血样本等,应设”样本空白管”:取待测样品加入双缩脲空白试剂,以
双缩脲空白试剂调零,读取样本空白管吸光度。

用待测管吸光度减去样本空白管吸光度后的净吸光度,计算总蛋白浓度。

计算:
总蛋白(g/L)=(待测管吸光度/标准管吸光度)×蛋白标准液浓度(g/L)
注意事项:
1、蛋白标准粉末溶解于蛋白标准配制液后,即获得蛋白标准原液,该原液中含有防腐剂,
不影响后续检测,该蛋白标准原液-20℃长期保存。

2、待测蛋白和蛋白标准加入双缩脲试剂后,如果发现检测效果不佳,可以室温放置1h或
60℃放置15min,颜色会随着时间的延长不断加深。

3、测定标准曲线时发现随着标准品浓度的增加吸光度或颜色没有明显变化,可能的原因
是样品中含有铜离子螯合剂。

4、如果没分光光度计,也可以使用酶标仪测定。

使用酶标仪测定蛋白浓度时,每个试剂
盒可以测定的样品数量可能会显著增加。

5、检测中发现所有孔都呈暗紫色,可能原因是样品含有还原剂,应适当透析或稀释样品。

有效期:12个月有效。

蛋白标准配制成溶液后应-20℃冻存。

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