土壤硝态氮及铵态氮的取样测定

土壤无机N---铵态氮硝态氮测量方法

土壤无机N---铵态氮硝态氮测量方法铵态氮和硝态氮测定方法铵态氮测量方法（2mol ?L -1KCl 浸提—靛酚蓝比色法）1）方法原理2mol ?L -1KCl 溶液浸提土壤，把吸附在土壤胶体上的NH4+及水溶性NH4+浸提出来。

土壤浸提液中的铵态氮在强碱性介质中与次氯酸盐和苯酚作用，生成水溶性染料靛酚蓝，溶液的颜色很稳定。

在含氮0.05～0.5mol ?L -1的范围内，吸光度与铵态氮含量成正比，可用比色法测定。

2）试剂（1）2mol ?L -1KCl 溶液称取149.1g KCl ，化学纯）溶于水中，稀释至1L 。

（2）苯酚溶液称取苯酚（C6H5OH ，化学纯）10g 和硝基铁氰化钠[Na2Fe(CN)5NO 2H 2O]100mg稀释至1L 。

此试剂不稳定，须贮于棕色瓶中，在4℃冰箱中保存。

（3）次氯酸钠碱性溶液称取氢氧化钠（化学纯）10g 、磷酸氢二钠（Na 2HPO 4?7H 2O ，化学纯）7.06g 、磷酸钠（Na 3PO 4?12H 2O ，化学纯）31.8g 和52.5g ?L -1次氯酸钠(NaOCl，化学纯，即含10%有效氯的漂白粉溶液)5mL 溶于水中，稀释至1L ，贮于棕色瓶中，在4℃冰箱中保存。

（4）掩蔽剂将400g ?L -1的酒石酸钾钠（KNaC 4H 4O 6?4H 2O ，化学纯）与100g ?L -1的EDTA 二钠盐溶液等体积混合。

每100mL 混合液中加入10 mol?L -1氢氧化钠0.5mL 。

（5）2.5μg ?mL –1铵态氮（NH4+—N; 100ppm）标准溶液称取干燥的硫酸铵[(NH4)2SO 4，分析纯0.4717g 溶于水中，洗入容量瓶后定容至1L ，制备成含铵态氮（N ）100μg ?mL –1的贮存溶液；使用前将其加水稀释20倍，即配制成含铵态氮（N ）2.5μg ?mL –1的标准溶液备用。

3）仪器与设备：往复式振荡机、分光光度计。

土壤可溶性有机氮,硝态氮,铵态氮和微生物量氮测定

土壤可溶性有机氮、硝态氮、铵态氮、微生物量氮最方便最简单的测定方法1.母液制样：称取新鲜土壤（30.0g）于放置烧杯中，加约等于田间持水量60%水在25℃下培养7~15d。

取15.0g土于烧杯，置于真空干燥器中，同时内放一装有用100ml精制氯仿的小烧杯，密封真空干燥器，密封好的真空干燥器连到真空泵上，抽真空至氯仿沸腾5分钟，静置5分钟，再抽滤5分钟，同样操作三次。

干燥器放入25℃培养箱中24小时后，抽真空15-30分钟以除尽土壤吸附的氯仿。

按照土：0.5M K2SO4=1:4(烘干土算，一般就是湿土：0.5M K2SO4=1：2)，加入0.5M K2SO4溶液（未熏蒸为空白直接称取15.0g土，加同样比例0.5M K2SO4溶液）震荡30分钟，过滤。

其中熏蒸后的土壤过滤液为A母液，未熏蒸的土壤过滤液为B母液。

母液要是不及时测定，需立即在-15℃以下保存2.测定可溶性有机氮=可溶性全氮-（铵态氮+硝态氮）要是有流动分析仪器还有TOC的话可以利用A母液测得碳氮减去B母液的碳氮含量根据公式计算得出微生物碳氮，可以用B母液测的铵态氮、硝态氮和可溶性全氮，是很方便的。

以下的是用传统的方法测定以上指标，经过852个土壤样品试验结果还是很好的。

土壤可溶性全氮测定氧化剂:将6g NaOH 和30g K2S2O8溶于蒸馏水中并定容至1L(K2S2O8 比较难溶，在低于60℃得瑟水浴中溶解，高于60℃配置的溶液至其氧化性失效，NaOH制成溶液，致其温度达到常温后与K2S2O8溶液混合定容至1L)测定：移取A母液10ml至消化试管，加入10ml氧化剂，水浴中加热，温度升高到120℃后保持90min，使用紫外分光光度计测定A220和A275，空白需加入1ml氧化剂并同时作水浴处理。

（Tips：农化上母液与氧化剂各取25ml，此处取其比例为1:1。

）标准曲线：0.7218g硝酸钾溶于水中，转入1000ml容量瓶中定容摇匀，制得浓度为100mg/L的氮标准贮存液。

土壤硝态氮和铵态氮的测定方法

一、原理：过滤后的样品经过一个开放的镀铜镉还原器通道后，硝酸根被还原成亚硝酸根，亚硝酸根通过磺胺处理后，与N-(1-萘基)-乙二胺二盐酸盐偶联，形成深红色的偶氮染料，然后在550nm或者520nm比色分析。

二、样品处理土壤鲜样采取四分法处理，根据实验用量进行过筛（比目大小视样品含水量而定）。

过筛后的土样，取出5g土样放入离心管，加入25ml 氯化钾提取液（2moL/L），震荡2小时后进行离心（8000 g ，15min），静置后过滤，取上清液测定。

若不能及时测定，放入4℃冰箱保存。

三、试剂配制：试剂用水：蒸馏水或去离子水。

（1）显色试剂：（棕色玻璃瓶，避光保存）150ml水，加入25ml浓磷酸▲，冷却至室温后，加入10g磺胺，再加入0.5g N-(1-萘基)-乙二胺二盐酸盐溶解。

用水定容至250ml。

加入浓缩探针清洗液（表面活性剂）。

（2）氯化铵-EDTA缓冲液（ammonium chloride-EDTA）：把85g氯化铵和0.1g 乙二胺四乙酸二钠盐（EDTA-Na2）溶解于水，定容至1L。

用浓氨水▲调节PH至。

（3）硝化组件缓冲液：{用来清洗OTCR(镀铜镉还原器通道)}取100ml的氯化铵-EDTA缓冲液，稀释至1L。

调节PH至。

（4）2%硫酸铜：10g 五水硫酸铜（）溶于水，定容至500ml。

（5）5mol/L盐酸：小心慢慢加入浓盐酸▲于水中，冷却后定容至100ml。

（6）硝酸盐存储溶液(1g/L)：（溶液6个月内有效）7.218g硝酸钾溶于水，定容至1L，加入1ml氯仿▲（防腐剂）。

（7）比色管清洗液：（定容时缓慢，防止出现泡沫，室温保存,两个月内有效）取50ml比色管清洗液，加水定容至1L。

（8）进样针清洗液：（定容时缓慢，防止出现泡沫，室温保存，两个月内有效。

）取进样针清洗液，加水定容至1L。

四、测定方法：土壤硝态氮测定采用SmartChem全自动间断化学分析仪。

一、样品处理土壤鲜样采取四分法处理，根据实验用量进行过筛（比目大小视样品含水量而定）。

降低样品采集制备过程中土壤硝态氮和铵态氮测定误差的方法

收稿日期（Ｒｅｃｅｉｖｅｄ）：２０１９－１１－１８基金项目：国家重点研发计划（２０１８ＹＦＤ０８００８０２，２０１８ＹＦＤ０８００８０４）作者简介：朱靖蓉（１９７２－），女，浙江龙游人，高级实验师，硕士，研究方向为农产品营养与质量安全，（Ｅ－ｍａｉｌ）ｚｈｕｊｒ２０３０＠１６３ｃｏｍ通信作者：马兴旺（１９７０－），男，研究员，博士，博士生导师，研究方向为养分资源高效利用、面源污染防治，（Ｅ－ｍａｉｌ）ｍａｘｗ＠ｘａａｓ．ａｃ．ｃｎ
０引言
【研究意义】土壤矿质氮主要包括硝态氮（ＮＯ３－－Ｎ）和铵态氮（ＮＨ４＋－Ｎ），是植物能直接吸收利用的速效性无机氮素营养，是土壤的养分指标，用于评价土壤肥力、推荐施肥等；也是重要的环境评价指标，用于评价面源污染风险［１］，因此准确测定新鲜土壤硝态氮、铵态氮含量不但是进行作物推荐施肥，也是评价硝态氮和铵态氮淋溶风险、防治面源污染的基础。对土壤矿质氮测定的土壤样品处理方法进行研究，明确关键环节对测定值精确度的影响，改进测试方法，减低数据误差、提高数据可比性，对于推动土壤学界交流具有重要意义；同时为建立土壤矿质氮测试标准方
实验室测定土壤硝态氮、铵态氮的方法，无论是化学测定方法还是仪器分析方法，在实验室进行的试剂配制、土壤样品称量、振荡浸提、化学测定或仪器分析等过程和环节都有严格的规定，尽管不同方法中的浸提剂和浸提液中硝态氮、铵态
法可以奠定坚实基础，对于各地开展土壤测试服务提供了统一方法，极大推动测土配方施肥技术发展、降低硝态氮对环境的污染。【前人研究进展】迄今国内外制定了土壤硝态氮、铵态氮测定的多个方法，对从土壤中浸提硝态氮和铵态氮过程，对浸提液中硝态氮和铵态氮测定方法和步骤给出了细致的规定［１－６］。只是氮在土壤中以多种形态存在，形态之间以化学和微生物转化的含氮有机质矿化过程、硝化－反硝化过程、腐殖质形成过程、植物和微生物对有效态氮吸收固定作用及粘土矿物对ＮＨ４＋吸收固定等多个过程时刻进行着，而影响土壤氮素形态之间转化的因素众多，有土壤中原有有机态氮含量、施入土壤的肥料、土壤温度、含水量、理化性质、土壤微生物、耕作制度、

土壤硝态氮铵态氮的测定

（二）土壤硝态氮的测定1、酚二磺酸比色法1）方法原理土壤用饱和CaSO4 2H2O溶液浸提，在微碱性条件下蒸发至干，土壤浸提液中的NO3－—N在无水的条件下能与酚二磺酸试剂作用，生成硝基酚二磺酸。

C6H3OH(HSO3)2+HNO3→C6H2OH(HSO3)2 NO2+H2O2，4-酚二磺酸6-硝基酚-2，4-二磺酸此反应必须在无水条件下才能迅速完成，反应产物在酸性介质中无色，碱化后则为稳定的黄色溶液，黄色的深浅与NO3－—N含量在一定范围内成正相关，可在400～425nm处（或用蓝色滤光片）比色测定。

酚二磺酸法的灵敏度很高，可测出溶液中0.1mg•L-1 NO3－—N，测定范围为0.1～2mg•L-1。

2）主要仪器分光光度计、水浴锅、瓷蒸发皿。

3）试剂（1）酚二磺酸试剂：称取白色苯酚（C6H5OH，分析纯）25.0g置于500mL三角瓶中，以150mL纯浓H2SO4溶解，再加入发烟H2SO475mL并置于沸水中加热2h，可得酚二磺酸溶液，储于棕色瓶中保存。

使用时须注意其强烈的腐蚀性。

如无发烟H2SO4，可用酚25.0g，加浓H2SO4225mL，沸水加热6h配成。

试剂冷后可能析出结晶，用时须重新加热溶解，但不可加水，试剂必须贮于密闭的玻塞棕色瓶中，严防吸湿。

（2）10µg•mL-1 NO3－—N标准溶液：准确称取KNO3（二级）0.7221g溶于水，定容1L，此为100µg•mL-1 NO3－—N 溶液，将此液准确稀释10倍，即为10µg•mL-1 NO3－—N标准溶液。

（3）CaSO4•2H2O（分析纯、粉状）、（4）CaCO3（分析纯、粉状）、（5）1:1 NH4OH、（6）活性碳（不含NO3－），用以除去有机质的颜色。

（7）Ag2SO4（分析纯、粉状）、Ca(OH)2（分析纯、粉状）和MgCO3（分析纯、粉状），用以消除Cl-1的干扰。

4）操作步骤（1）浸提：称取新鲜土样（注1）50g（风干土样25g）放在500mL三角瓶中，加入CaSO4•2H2O 0.5g（注2）[凝聚剂的作用，使滤液不混浊而澄清]和250.00mL蒸馏水，盖塞后，用振荡机振荡10min。

硝态氮测定

土壤铵、硝态氮的测定（1）待测滤液的制备（水：土=10：1）称取10g待测样品准确到0.01g，置于大白瓶中，加入100ml 0.01mol/l的CaCl2溶液，以200 r/min 25℃振荡30min，取出静置5-10min后将悬液的上部清液用干滤纸（定性滤纸）过滤，得待测滤液。

（2）硝态氮—紫外分光光度法取上述滤液5.00 ml于50 ml容量瓶，用重蒸水定容，得待测液（一般不需要稀释，浸提液过滤后直接测定即可，但是刚施完肥的土壤硝态氮含量较高，建议取2-3样品做直接上机测定一下，标线5mg/L对应读数为1.05-1.1左右，然后决定稀释倍数）。

用标线0调零，测定此待测液在220nm和275nm处吸光度A220和A275。

按照下式计算校正吸光度A：A= A220-2A275。

绘制硝态氮标准曲线：分别取100mg/L硝酸盐(NO3--N)标准溶液0.00、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00mL 于100mL容量瓶,若直接测定则用浸提剂（0.01mol/l的CaCl2）定容摇匀（用蒸馏水定容即可，蒸馏水与CaCl2吸光值无差异），即分别配成0、1、2、3、4、5 mg/L 的标准系列溶液。

用标线0调零，分别用石英比色皿在220nm和275nm处测定标曲吸光度。

用公式：A= A220 -2A275求得校正吸光度，以氮浓度为纵坐标，A （A= A220-2A275）为横坐标绘制得标准曲线。

注:标准曲线要先进行配置，并且在配置前先把紫外分光光度计打开预热30min，以节约时间。

标曲根据土壤中硝态氮含量配制，标线最大值做到5，R2可达0.999以上，一般做到6/7/8即可，R2仅0.99，线性相关不好，标线要重新配置，标线275nm读数一般为0。

（3）铵态氮—靛酚蓝比色法取步骤（1）中的滤液10.00 ml（一般吸取土壤浸出液5或10ml，具体吸取量要考虑施肥时期）于50mL容量瓶中，再加入苯酚溶液5.00 ml和次氯酸钠碱性溶液5.00mL，摇匀。

土壤硝态氮铵态氮的测定

（二）土壤硝态氮的测定1、酚二磺酸比色法1）方法原理土壤用饱和CaSO4 2H2O溶液浸提，在微碱性条件下蒸发至干，土壤浸提液中的NO3－—N在无水的条件下能与酚二磺酸试剂作用，生成硝基酚二磺酸。

C6H3OH(HSO3)2+HNO3→C6H2OH(HSO3)2 NO2+H2O2，4-酚二磺酸6-硝基酚-2，4-二磺酸此反应必须在无水条件下才能迅速完成，反应产物在酸性介质中无色，碱化后则为稳定的黄色溶液，黄色的深浅与NO3－—N含量在一定范围内成正相关，可在400～425nm处（或用蓝色滤光片）比色测定。

酚二磺酸法的灵敏度很高，可测出溶液中0.1mg•L-1 NO3－—N，测定范围为0.1～2mg•L-1。

2）主要仪器分光光度计、水浴锅、瓷蒸发皿。

3）试剂（1）酚二磺酸试剂：称取白色苯酚（C6H5OH，分析纯）25.0g置于500mL三角瓶中，以150mL 纯浓H2SO4溶解，再加入发烟H2SO475mL并置于沸水中加热2h，可得酚二磺酸溶液，储于棕色瓶中保存。

使用时须注意其强烈的腐蚀性。

如无发烟H2SO4，可用酚25.0g，加浓H2SO4225mL，沸水加热6h配成。

试剂冷后可能析出结晶，用时须重新加热溶解，但不可加水，试剂必须贮于密闭的玻塞棕色瓶中，严防吸湿。

（2）10µg•mL-1 NO3－—N标准溶液：准确称取KNO3（二级）0.7221g溶于水，定容1L，此为100µg•mL-1 NO3－—N溶液，将此液准确稀释10倍，即为10µg•mL-1 NO3－—N标准溶液。

（3）CaSO4•2H2O（分析纯、粉状）、（4）CaCO3（分析纯、粉状）、（5）1:1 NH4OH、（6）活性碳（不含NO3－），用以除去有机质的颜色。

（7）Ag2SO4（分析纯、粉状）、Ca(OH)2（分析纯、粉状）和MgCO3（分析纯、粉状），用以消除Cl-1的干扰。

4）操作步骤（1）浸提：称取新鲜土样（注1）50g（风干土样25g）放在500mL三角瓶中，加入CaSO4•2H2O 0.5g（注2）[凝聚剂的作用，使滤液不混浊而澄清]和250.00mL蒸馏水，盖塞后，用振荡机振荡10min。

土壤铵氮、硝氮、TOC的测定

药品的准备1M kcl溶液：称取74.6g kcl，稀释至1L。

苯酚溶液：称取苯酚（分析纯）10g和硝基铁氰化钠（硝普钠，有剧毒）100mg，稀释至1L。

此试剂不稳定，须贮于棕色瓶中，在4℃冰箱中保存。

次氯酸钠碱性溶液：称取氢氧化钠（分析纯）10g、磷酸氢二钠（Na2HPO4﹒7H2O）7.06g、磷酸钠（Na3PO4﹒12H2O）31.8g和52.5 g﹒L-1次氯酸钠（即含5%有效率的漂白粉溶液10mL 溶于水中，稀释至1L，贮于棕色瓶中，在4℃冰箱中保存。

1M HCL:43ML HCL溶于水，稀释至1L0.8%氨基磺酸：称取氨基磺酸8g溶于水，稀释至1L铵态氮储存溶液：准确称取干燥的硫酸铵[（NH4）2SO4,分析纯]0.4717g溶于水中，定容至1L。

即配制成含铵态氮（N）100μg.mL-1的贮存溶液；硝态氮储存溶液：准确称取硝酸钾0.7221溶于水，定容至1L，即100μg.mL-1 的储存溶液。

TOC的测定1.取样品土壤10g装入5Oml离心管，加入20ml蒸馏水提取，摇床摇1h。

2.取出离心（配平！）,8000r,5min。

3.离心后用0.45um微孔膜抽滤上清液，滤液用pvc小管装好，储存。

4.1到2个月内样品上toc测定。

铵态氮和硝态氮的测定1.样品土壤取5g，用25ml 1mol/l kcl 提取，摇床摇1h2.用折好的滤纸过滤大概10ml滤液3.标曲的配置：铵态氮：用移液管取储存液2.5ml,定容至100ml，配成2.5ug/ml的标准液。

分别用移液管取0,1,2,3,4,5,6,7,8ml装入25ml比色管硝态氮：用移液管取储存液4ml,定容至100ml，配成4ug/ml的标准液。

分别用移液管取0,0.5,1,1.5,2,2.5,3,4,5ml装入10ml 比色管4.取样品，加入显色剂：（提前半小时打开分光光度计！！！）铵态氮：取2.5ml滤液，加入2.5ml苯酚溶液，2.5ml碱性次氯酸钠，摇匀定容。

土壤铵态氮的测定方法土壤铵态氮等测定

土壤铵态氮的测定方法土壤铵态氮等测定方法原理:用2mol/L KCl溶液浸提土壤，把吸附在土壤胶体上的NH+4及水溶性NH+4浸提出来。

土壤浸出液中的铵态氮在强碱性介质中与次氯酸盐和苯酚作用，生成水溶性染料靛酚蓝，溶液的颜色很稳定。

在含氮0.05~0.5mg/L的范围内，吸光度与铵态氮含量成正比，可用比色法测定。

实验步骤：（1）称取10.00g新鲜土样（精确到0.01g），置于200ml 三角瓶中，加入KCl溶液100ml，在摇床里振荡30min，取出静置后，取上清液过滤；（2）吸取浸提液5ml放入50ml容量瓶中，后加入KCl 溶液10ml、苯酚溶液5ml、次氯酸钠碱性溶液5ml,摇匀；（3）在25℃左右室温下放置1小时后，加入掩蔽剂1ml,然后用水定容至刻度，在625nm波长处进行比色。

工作曲线绘制：分别取0.00 ，0.50 ，1.00 ，2.00 ，3.00 ，4.00 ，5.00ml 铵态氮标准溶液于50ml容量瓶中，各加入10ml KCl溶液,然后同(2) (3)步骤进行。

试剂配制：【2mol/L KCl溶液】: 称取149.1g KCl(分析纯)溶入水中，稀释至1L。

【苯酚溶液】：称取苯酚（分析纯）10g、NaOH （分析纯）5g和消极铁氰化钠(分析纯)0.1g稀释至1L。

（此试剂不稳定，须贮于棕色瓶中，在冰箱中4℃保存，使用时用酸调节PH酸性）【次氯酸钠碱性溶液】：称取NaOH（分析纯）10g、磷酸氢二钠（分析纯）7.06g、磷酸钠（分析纯）31.8g和52.5g/L 次氯酸钠（分析纯，即含5%有效氯的漂白粉溶液）10mL 溶于水中，稀释至1L.(贮于棕色瓶中，在冰箱中4℃保存，使用时放置至室温)【掩蔽剂】: 将400g/L的酒石酸钾钠（分析纯）与100g/L 的EDTA二钠盐溶液等体积混合。

每100ml混合液中加入10mol/L NaOH溶液0.5ml。

【铵态氮标准溶液】：称取0.4717g于105℃烘2小时的(NH4)2SO4(分析纯)溶于水，定容至1L。

土壤中氨氮硝氮测定

硝态氮提取：2MKCl震荡提取土样30分钟后，提取液中硝氮测定同水中硝氮测定。

水中硝态氮的测定（紫外分光光度法）♦主要试剂：(1)0.100mg/ml硝酸盐氮标准储备液(购置或自配)：称取0．7218g硝酸钾(经105—110℃烘4小时)溶于水中，移至1000毫升容量瓶中用水稀释至标线。

(2)盐酸溶液：C (HCI) =lmol／L(盐酸系优级纯)♦标准曲线的绘制向6支100ml容量瓶中依次加0．100mg／ml硝酸钾标准溶液0、0.50、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00ml，用新鲜去离子水稀释到100ml(其相应浓度为0、0.50、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00mg／L)。

按水样测定相同步骤测量吸光度。

根据220nm与二倍275nm波长吸光度值之差对浓度作图，绘制标准曲线。

♦水样的测定在盛有水样的比色管中加1.0mol/L的盐酸溶液，用1cm石英比色皿在紫外分光光度计上，用新鲜去离子水50ml加l.0mol／L盐酸溶液作参比，测定水样在220nm及275nm波长处的吸光度。

♦结果计算校正吸光度计算：Ar=A220nm -2A275nm式中：Ar——校正吸光度；A220nm——220nm波长处测得的吸光度；A275nm——275nm波长处测得的吸光度由标准曲线算出相应水样硝态氮含量。

氨态氮2 mol·L-1KCl浸提—蒸馏法方法原理用2mol·L-1KCl浸提土壤，把吸附在土壤胶体上的NH4+及水溶性NH4+浸提出来。

取一份浸出液在半微量定氮蒸馏器中加MgO（MgO是弱碱，有防止浸出液中酰铵有机氮水解的可能）蒸馏。

蒸出的氨以H3BO3吸收，用标准酸溶液滴定，计算土壤中的NH4+—N含量。

主要仪器振荡器、半微量定氮蒸馏器、半微量滴定管（5mL）。

试剂（1）20g·L -1硼酸—指示剂。

20gH3BO3（化学纯）溶于1L水中，每升H3BO3溶液中加入甲基红—溴甲酚绿混合指示剂5mL并用稀酸或稀碱调节至微紫红色，此时该溶液的pH为4.8。

铵态氮的测试方法

氮的测试方法1.铵态氮采用靛酚蓝比色法测定硝态氮采用联氨铜还原比色法测定，亚硝态氮采用重氮化偶合分光光度法测定。

氨态氮测定:采用氯化钾浸提一氧化镁蒸馏法;亚硝态氮测定:N一(l一蔡基)乙二胺光度法;硝态氮测定:氯化钾浸提一还原蒸馏法;有机态氮测定:凯氏定氮法。

1.有机氮测定采用硫酸消化一蒸馏法(即凯氏定氮法):无菌移液管移取5mL细菌培养液，加入浓硫酸和催化剂(硫酸铜、硫酸钾)，400℃消化1小时后，凯氏定氮仪中加入40%氢氧化钠蒸馏，4%硼酸液吸收后，0.!m。

l/L盐酸滴定。

有机氮的计算公式为:X=(V，一VZ)xCx14.007x1000/5X—为样品中有机氮含量(m创L);v，—样品消耗盐酸标准液的体积(mL);vZ—空白试验消耗盐酸标准液的体积(mL);C一盐酸标准溶液通过标定后的摩尔浓度(Inol/L)。

2.按态氮测定采用蒸馏法:用无菌移液管移取5mL细菌培养液培养液，加IOmL40%氢氧化钠溶液凯氏定氮仪蒸馏，4%硼酸吸收后，用0.lmol/L盐酸滴定，计算含量。

钱态氮的计算公式为:A二(V，一VZ)xCx14.007x1000/5A—为样品中钱态氮含量(m叭);Vl—样品消耗盐酸标准液的体积(mL);vZ—空白试验消耗盐酸标准液的体积(mL);C一盐酸标准溶液通过标定后的摩尔浓度(mol/L)。

3.亚硝酸盐氮测定采用a一蔡胺分光光度法:弱酸条件下:对氨基苯磺酸与a一蔡胺偶合生成紫红色染料，其颜色深度与亚硝酸盐氮含量成正比。

可测定亚硝酸盐氮含量范围在0.05m叭之间，若超过该范围可稀释后测定。

取适量培养液稀释后，依次加入氯化按缓冲液、60%冰乙酸、对氨基苯磺酸和a一禁胺等体积混合液和蒸馏水，于550nm波长下进行比色测定，同时绘制标准曲线，计算含量。

4.硝酸盐氮测定采用磺基水杨酸消化法:在浓硫酸存在下，NO3“能与磺基水杨酸反应，生成硝基水杨酸。

所生成的硝基水杨酸在碱性条件(PH>12.0)条件下，于410nm处有最大吸收;并且，在一定范围内与N03’含量成线性关系。

土壤氮元素实验报告

土壤氮元素实验报告一、实验目的本实验旨在通过对土壤中氮元素含量的测定，了解土壤的氮素供应状况，并研究土壤氮素含量与作物生长之间的关系。

二、实验原理土壤中的氮素主要有有机氮和无机氮两种形态。

有机氮主要存在于土壤中的有机质中，如腐殖质和微生物体。

无机氮包括铵态氮（NH4+）和硝态氮（NO3-），它们是植物直接吸收和利用的氮素形态。

实验中，采用盐酸钠铁法测定土壤中的铵态氮含量，采用硫酸亚铁还原-蒸馏法测定土壤中的硝态氮含量。

三、实验步骤1. 取一定量的土壤样品，将其空气干燥后研磨成细粉末。

2. 取0.5g土壤样品，加入100ml盐酸钠铁溶液中，摇匀，蒸发至干燥。

3. 将干燥后的土壤样品与蒸馏水混合，过滤后用盐酸钠铁溶液进行洗涤，将洗涤液集中收集。

4. 取一定量的洗涤液，加入硫酸亚铁溶液，并加入硫酸溶液进行酸化，使其产生反应生成亚铁离子。

5. 将生成的亚铁离子与硝态氮反应生成氨气，通过导热管送入酸性缓冲溶液中。

6. 用盐酸进行滴定，直到溶液颜色变为橙黄色，记录滴定消耗的盐酸体积。

7. 根据滴定消耗的盐酸体积推算出硝态氮的含量。

四、实验结果和分析根据实验数据，计算出土壤样品中的铵态氮和硝态氮的含量，并计算土壤总氮的含量。

通过与对照组进行比较，可以评估土壤中的氮素供应状态。

五、实验结论根据实验结果分析，得出结论并总结实验中的发现。

并可以进一步展望与讨论。

六、实验改进和优化对于实验过程中存在的问题和不足之处提出改进建议，并分析可能的改进方法，以提高实验结果的准确性和可重复性。

七、实验应用和展望根据实验结果，探讨土壤氮素含量与作物生长之间的关系，以及对农业生产的应用价值。

并展望未来对土壤氮素研究的发展方向。

八、参考文献列出实验中所参考的文献和资料。

以上为土壤氮元素实验报告的基本结构和要点。

根据具体实验内容和结果，进行相应的补充和扩展。

实验报告要包含实验目的、原理、步骤、结果、结论等内容，并进行全面的分析与讨论。

土壤含氮量的测定实验报告

土壤含氮量的测定实验报告本实验的目的是通过各种方法测定土壤中的氮含量，从而掌握土壤中氮素含量的测定原理及方法。

实验原理：氮素是植物生长必须的主要微量元素之一，同时也是土壤中重要的养分元素。

土壤中的氮素形态有无机氮和有机氮两种，其中无机氮包括铵态氮、硝态氮和亚硝态氮，有机氮则主要是蛋白质、核酸、酰胺和氨基酸等化合物。

常用的土壤氮含量测定方法包括盐酸-铁法、剩余氮法、凯氏氮法、Kjeldahl法以及氨态定量法等。

实验步骤：1.取出一定重量的土壤样品，将其过筛，并晾干；2.用盐酸-铁法测定土壤中的铁，从而计算出土壤中的总氮含量；3.用剩余氮法测定土壤的无机氮和有机氮含量；4.用凯氏氮法测定土壤中的无机氮和有机氮的含量；5.用Kjeldahl法测定土壤中的无机氮和有机氮的含量；6.用氨态定量法测定土壤中的一氧化氮含量。

实验结果：通过上述五种方法，得到土壤中氮素含量的测定结果如下：铁法测定得到的土壤中总氮含量为0.08%；剩余氮法测定得到土壤中无机氮的含量为0.05%，有机氮的含量为0.03%；凯氏氮法测定得到土壤中无机氮的含量为0.06%，有机氮的含量为0.04%；Kjeldahl法测定得到土壤中无机氮的含量为0.04%，有机氮的含量为0.06%；氨态定量法测定得到土壤中一氧化氮含量为0.002mg/L。

实验结论：通过以上五种方法，我们得到了土壤中氮素含量的测定结果。

通过对比不同方法的测定结果，我们可以看到，不同方法所得到的含量有所不同，但总体上差别不是很大。

由于不同测定方法的原理和操作流程不同，因此在实际应用中应根据需要选用合适的方法进行测定。

同时，要注意各种方法的适用范围和误差，并结合实际情况进行合理的数据分析和解释。

土壤中氨态氮的测定方法

土壤中氨态氮的测定方法作者：李成延来源：《职业·下旬》2013年第03期摘要：本文用分光光度法测定不同浓度氨态氮的吸光度，利用计算机改进数据处理方法，作出标准工作曲线；将土壤用氯化钾处理后，测出吸光度即可计算出土壤中的氮含量。

关键词：氨态氮分光光度法吸光度标准工作曲线一、综述土壤中的氮素可分为有机态氮和无机态氮两大类。

1.无机态氮无机态氮在土壤中含量很少，只占全氮含量1%～10%，主要包括铵态氮、硝态氮、亚硝态氮等，其中铵态氮又包括：土壤溶液中的铵、交换性铵、固定态铵。

2.有机态氮有机态氮是土壤中氮素的主要存在形态，一般占全氮含量的90%以上，目前已经鉴定出的含N化合物单体有：氨基酸、氨基糖、嘌呤、嘧啶，以及微量存在的叶绿素及其衍生物、磷脂、各种胺、维生素等。

3.土壤中氮素的来源土壤中的氮素主要来自施肥、生物固氮、雨水和灌溉水，后二者对土壤氮贡献很小，施肥是耕作土壤氮素的主要来源，而自然土壤的氮素主要来自生物固氮。

4.土壤中氨态氮的测定方法土壤中氨态氮的测定方法采用KCl溶液提取Mgo蒸馏法、半微量开氏法、吸光光度法等。

二、氨态氮的测定方法1.土壤样品的采集与制备采样单元。

采样前要详细了解采样地区的土壤类型、肥力等级和地形等因素，将测土配方施肥区域划分为若干个采样单元，每个采样单元的土壤要尽可能均匀一致。

平均每个采样单元为100亩。

为便于田间示范追踪和施肥分区需要，采样集中在位于每个采样单元相对中心位置的典型地块，面积为1～10亩。

采样周期。

同一采样单元，无机氮每季或每年采集1次，进行植株氮营养快速诊断；土壤有效磷、速效钾2～3年采集一次，中、微量元素3～5年采集1次。

采样深度。

采样深度一般为0～20cm，果园为0～40cm。

土壤硝态氮或无机氮含量测定，采样深度应根据不同作物、不同生育期的主要根系分布深度来确定。

采样点数量。

要保证足够的采样点，使之能代表采样单元的土壤特性。

每个样品采样点的多少，取决于采样单元的大小、土壤肥力的一致性等，一般7～20个点为宜。

土壤硝态氮测定

硝态氮测定（紫外分光光度校正因数法）双波长紫外比色法1.浸提：称取20.00g 1mm风干土，加入氯化钾溶液100ml，在振荡机上振荡1h，过滤。

2mol/l氯化钾溶液：称取149.1g氯化钾，溶于水中，稀释至1L。

10μg/ml NO3-—N标准溶液：准确称取硝酸钾0.7221g溶于水，定容1L，此为100μg/ml NO3-—N标准溶液，将此液准确稀释10倍，即为10 NO3-—N标准溶液。

2.约测：吸取水样（土壤浸提液）注入1cm光径石英比色杯中，以浸提剂为参比，在210nm波长处约测吸收值。

根据约测结果，测定浸出液应予稀释的倍数，使吸收溶液吸收值在0.1~0.8之间。

3.测定：水样（浸出液）稀释一定倍数后，吸取25ml放入50ml三角瓶中，加入1.00ml 1：9硫酸溶液（防止铵态氮转化为硝态氮），摇匀。

装入1cm光径石英比色杯在紫外分光光度计上分别于210nm和275nm处测定吸光度A210和A275，以同样稀释酸化后的饱和硫酸钙溶液为参比溶液，调节仪器的零点。

4.工作曲线绘制：吸取10mg/LNO3—N标准溶液0.00、1.00、2.00、4.00、6.00、8.00ml于50ml容量瓶中，（加一定体积浸提剂）定容。

即得0.00、0.20、0.40、0.80、1.20、1.60mg/LNO3—N标准溶液。

各取25.00mL于50ml三角瓶中，加1.00ml1：9硫酸溶液，摇匀。

装入1cm光径石英比色杯在紫外分光光度计上分别于210nm和275nm处测定吸光度A210和A275。

5.结果计算：ΔA=A210-A275f其中f为校正因数，在土壤有机质含量小于50g/kg时，f可取2.2，若大于土壤有机质含量大于50g/kg，需重新测定。

硝态氮含量（mg/kg）=c*V*D/m其中c为溶液中硝态氮浓度（mg/L），V为浸提液体积（mL），m为烘干土样质量（g），D为浸出液稀释倍数，不稀释时为1。

土壤铵态氮的测定

土壤铵态氮的测定(靛酚蓝比色法)(一)方法提要土壤浸出液中的NH4+在强碱性介质中与次氯酸盐和苯酚作用，生成水溶性染料靛酚蓝，溶液的蓝色很稳定，在NH4+-N浓度为0.05~0.5u g·mL-1范围内，其深浅与NH4+含量成正比。

反应体系的pH应为10.5～11.7。

硝普钠[硝基铁氰化钠，或称亚硝酰基五氰基合铁(Ⅲ)酸钠，。

Na2Fe(CN)5N0]是此反应的催化剂，能加速显色，增强蓝色及其稳定性。

在20℃左右室温时一般须放置l h后比色，完全显色约需2~3h。

生成的蓝色很稳定，24 h内吸收值无显著变化。

比色时在625nm处测量吸收值。

待测液中如有干扰的金属离子，可用EDTA等螯合剂掩蔽。

（二）适用范围本方法适用于各类土壤铵态氮含量的测定。

（三）主要仪器设备1、分光光度计。

2 、往复式或旋转式振荡机，满足180r·min-1±20r·min-1的振荡频率或达到相同效果。

3、塑料瓶，200mL。

（四）试剂1、酚溶液：10 g苯酚(C6H50H)和100mg硝普钠[Na2Fe(CN)5NO·2H20]溶于1 L水中。

此试剂不稳定，须贮于棕色瓶，存放在4℃冰箱中，用时须温热至室温。

注意硝普钠有剧毒2、次氯酸钠碱性溶液：10g氢氧化钠(NaOH)，7.06g磷酸氢二钠(Na2HP04．7H20)，31.8g 磷酸钠(Na3P04·12H20)和10mL次氯酸钠(w (NaOCl)=5.25％，即含有效氯5%的漂白剂溶液]溶于1L水中。

此试剂应与酚溶液同样保存。

3、掩蔽剂：酒石酸钾钠溶液[p(KNaC4 H406·4H20)=400g·L-1与EDTA二钠溶液[p(C10H1408N2Na2)=100g·L-1]等体积混合，每100mL混合液中加0．5mLNaOH溶液[c(NaOH)=10mol·L-1]，即得清亮的掩蔽剂溶液。