上海市结核病实验诊断操作规程 共74页

非结核分枝杆菌与临床疾病的关系 结核病实验诊断操作规程
非结核分枝杆菌菌种 临床相关疾病
标本来源
脓肿分枝杆菌或鸟分枝 患有囊性纤维变性或
呼吸道
杆菌复合群（MAC） 支气管扩张的老年人
偶发分枝杆菌
食道贲门失弛缓症， 慢性
呼吸道
返流病，或矿物油摄入史
海分枝杆菌
有鱼缸或海水接触史的严重伤口 活检/抽吸物
堪萨斯分枝杆菌或MAC 毛细胞白血病，HIV感染史
结核病实验诊断操作规程
第一节 编写目的和应用范围
结核病实验诊断操作规程
根据我国的结核病防控体系，结核病的诊治工 作主要在定点医院内进行。
初次感染病人的症状往往不典型，存在轻症甚 至无症状的结核病，老年人的结核病症状容易 被其他疾病掩盖。这些病人的首诊医院往往不 是定点医院。
非定点医院的实验室人员一般未经过结核分枝 杆菌检验的正规培训和能力认可，操作规程、 方法和检测的能力各不相同，容易导致不正确 的检验结果，使结核病的漏诊、误诊率增加。
结核分枝杆菌细胞壁富含脂质，约占细胞壁的 60%，主要的成分是分枝菌酸和酸化海藻糖。前 者是抗酸染色反应的物质基础；后者包括海藻糖 双分枝菌酸和硫甘酸，分别具有介导肉芽肿形成 和保护细菌在吞噬细胞内存活的作用，被认为是 结核分枝杆菌的毒力因素。
三、检测分枝杆菌的临床意义 结核病实验诊断操作规程
决于吸入结核分枝杆菌的数量、毒力和个体的抵 抗力等多种因素。
二、结核分枝杆菌生物特性 结核病实验诊断操作规程
结核分枝杆菌复合群包括结核分枝杆菌、牛分枝 杆菌、非洲分枝杆菌和田鼠分枝杆菌，引起人类 结核病的主要病原菌是结核分枝杆菌。
结核分枝杆菌大小为0.3-0.6m×1-4m，菌体 细长而略弯，两端略钝。抗酸染色阳性是其重要 特性。结核分枝杆菌生长缓慢，至少需要2-4周 才出现可见菌落。
缺点：进行LPAs试验仍需再做常规培养及DST。目 前注册使用的LPAs方法只适用于对涂片阴性培养阳 性或涂片阳性标本进行检测。
限制因素：LPAs适合在中心实验室/国家参比室开展 。如果地区实验室的基础设施能达到要求，也可考虑 开展实验。
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第三节 相关术语
相关术语
结核病实验诊断操作规程
结核病实验诊断操作规程
上海市结核病实验诊断操作规范
（适用于非定点综合性医院）
上海检验分会微生物学组
赵虎
主要内容
结核病实验诊断操作规程
结核病及其实验诊断的概述 结核病实验诊断的管理要求 结核病实验诊断的技术规范 附录
结核病实验诊断操作规程
第一章 结核病及其实 验诊断的概述
结核病实验诊断操作规程
（二）分枝杆菌培养
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优点：分枝杆菌的分离培养和菌种鉴定能为结核病患者 提供最终的诊断依据，与涂片相比可显著提高阳性检出 率（通常提高30%-50%）。分离培养同时也为药物敏 感性试验提供实验菌株。
缺点：操作更复杂，价格更昂贵，且菌体生长周期缓慢 ，并要求由专门的实验技术人员进行操作，用特殊的实 验仪器进行培养，且所有实验必须保证在恰当的生物安 全条件下才能开展。
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第二节 结核病基础知识
一、结核病定义和传播途径 结核病实验诊断操作规程
结核病是由结核分枝杆菌复合群（ Mycobacterium tuberculosis complex,简称 结核分枝杆菌）引起的慢性感染性疾病，可累及 全身多个器官系统，最常见的患病部位是肺脏。
传播途径主要是通过呼吸道传播。 个体吸入含有结核分枝杆菌的飞沫后是否患病取
临床检测分枝杆菌的最终目的是为 了辅助分枝杆菌感染患者的诊断及 治疗。
根据病人标本类型不同，所分离到 分枝杆菌的临床意义也各不相同， 实验室应尽快对病原菌做出鉴定， 以确定其临床意义。
（一）非结核分枝杆菌
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找到非结核分枝杆菌的临床意义取决于很 多因素，包括： 临床环境和宿主状态 病原菌种类及其致病性 分离培养标本的来源及其被污染的可能性 被检出病原菌的数量（包括抗酸染色涂片） 阳性培养的次数
肺结核：意指肺内结核。粟粒性结核有肺部病灶 者也归类为肺结核。
肺外结核：包括结核性脑膜炎、心包膜结核、腹 膜结核、脊椎结核、脊椎以外的骨与关节结核、 肠结核、生殖泌尿系統结核，淋巴结核、皮肤结 核；胸腔內的肺门或纵膈腔淋巴结核或单纯结核 肋膜积液属肺外结核。
结核病是一种严重危害人民健康的慢性 传染病，目前全球有约20亿人被感染， 每年新出现结核病患者约800-1000万， 每年因结核病死亡人数约为200-300万。 我国结核病患病人数居世界第二位，仅次 于印度。我国结核病年发病人数约为130 万，因结核病死亡人数每年达13万，超 过其他传染病死亡人数的总和。结核病是 我国重点防控的重大传染性疾病之一。
限制因素：样本在培养之前必须去污染，以抑制其他杂 菌的生长。所有去污染的操作对分枝杆菌都有一定程度 的伤害，因此，培养灵敏度不能达到100%。
（三）基因检测及鉴定
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优点：在检测速度、操作标准化、潜在高流通量以及 较低的生物安全要求等明显方面。
2019年，WHO认证了用分子线形探针试验（LPAs） 可以快速检测利福平耐药性（单独耐药或与异烟肼联 合耐药）。
血液，骨髓
龟分枝杆菌，脓肿分枝 慢性免疫抑制药（如类固醇激素）
杆菌或嗜血分枝杆菌 导致的浸润性皮肤损伤
活检/抽吸物
龟分枝杆菌，类龟分枝 中央静脉导管，假肢，
杆菌，偶发分枝杆菌或 创口，脓肿分枝杆菌
注查
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结核分支杆菌检查是确诊结核病 最特异的方法。
（一）痰涂片
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优点：操作简便，价格低廉，能快速检测出感染 性肺结核。
缺点：直接涂片法灵敏度相对不高，要求每毫升 痰标本中至少要包含5,000个杆状细菌才能检出 阳性。肺外结核、HIV合并感染结核以及非结核 分枝杆菌（NTM）感染的涂片灵敏度更低。
限制因素：抗酸杆菌（AFB）涂片镜检不能区分 结核分枝杆菌与非结核分枝杆菌（NTM），也不 能区分死菌与活菌、耐药与敏感菌株。