氨基酸分析仪整理.ppt
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Biochrom30氨基酸分析仪
保留时间重复性：≤0.05% CV （精氨酸） ≤0.07% CV （丙氨酸） ≤0.1% CV （全部氨基酸平均）
峰面积重复性： ≤0.2% CV （甘氨酸） ≤0.4% CV （组氨酸） ≤0.5% CV （全部氨基酸平均）
分离度：全部氨基酸 >1.4; 平均值3.3
Page 20 © DKSH
是中国市场上唯一获得FDA市场准入许可，并符合联邦药物、食品和化妆 品条款的氨基酸分析仪。
唯一采用陶瓷泵的专用自动氨基酸分析系统，完全避免了传统不锈钢泵头 被含高盐的缓冲液侵蚀的危险，全机流路采用PEEK 惰性材料，使清洗维 护都变得简单。
Page 32 © DKSH
Biochrom 30 +氨基酸技术特点
具有氮气过压保护，防止试剂瓶过压爆瓶；茚三酮倒流保护，防止分析柱 被污染；液体流速误差自动调整功能，确保分析准确度。
意外断电可自动通过氮气压力系统冲洗管路，以防管路被降低温度后变粘 稠的茚三酮堵住。
生理体液型：游离氨基酸，Biochrom30 氨基酸分析仪目前可以分析最多 的56种氨基酸（锂盐系统分析）
避免液体跑dkshpage22biochrom30内置方法多种报告模板客户也可自己编辑全中文软件多媒体软件使用教学免除了软件引起的困惑dkshpage23dkshpage24dkshpage25dkshpage26dkshpage2743dkshpage28生理体液j加速分析标准图谱48种氨基酸570nmdkshpage29英国曼彻斯特皇家儿童医院提供dkshpage30英国曼彻斯特皇家儿童医院提供dkshpage31英国biochrom剑桥实验室提供dkshpage32biochrom氨基酸分析仪作为全球氨基酸分析仪的领导者是替欧盟制定现行饲料标准的德固赛公司唯一使用氨基酸分析仪该标准被包括中国在内的几乎所有国家作为目前饲料及食品的国家标准参照使用此国标也被一切使用水解蛋白分析的样品参照使用
峰面积重复性： ≤0.2% CV （甘氨酸） ≤0.4% CV （组氨酸） ≤0.5% CV （全部氨基酸平均）
分离度：全部氨基酸 >1.4; 平均值3.3
Page 20 © DKSH
是中国市场上唯一获得FDA市场准入许可，并符合联邦药物、食品和化妆 品条款的氨基酸分析仪。
唯一采用陶瓷泵的专用自动氨基酸分析系统，完全避免了传统不锈钢泵头 被含高盐的缓冲液侵蚀的危险，全机流路采用PEEK 惰性材料，使清洗维 护都变得简单。
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Biochrom 30 +氨基酸技术特点
具有氮气过压保护，防止试剂瓶过压爆瓶；茚三酮倒流保护，防止分析柱 被污染；液体流速误差自动调整功能，确保分析准确度。
意外断电可自动通过氮气压力系统冲洗管路，以防管路被降低温度后变粘 稠的茚三酮堵住。
生理体液型：游离氨基酸，Biochrom30 氨基酸分析仪目前可以分析最多 的56种氨基酸（锂盐系统分析）
避免液体跑dkshpage22biochrom30内置方法多种报告模板客户也可自己编辑全中文软件多媒体软件使用教学免除了软件引起的困惑dkshpage23dkshpage24dkshpage25dkshpage26dkshpage2743dkshpage28生理体液j加速分析标准图谱48种氨基酸570nmdkshpage29英国曼彻斯特皇家儿童医院提供dkshpage30英国曼彻斯特皇家儿童医院提供dkshpage31英国biochrom剑桥实验室提供dkshpage32biochrom氨基酸分析仪作为全球氨基酸分析仪的领导者是替欧盟制定现行饲料标准的德固赛公司唯一使用氨基酸分析仪该标准被包括中国在内的几乎所有国家作为目前饲料及食品的国家标准参照使用此国标也被一切使用水解蛋白分析的样品参照使用
氨基酸分析原理与方法
碱性氨基酸 > 芳香族氨基酸 > 中性氨基酸 > 酸性氨基酸及羟基氨基 酸
4.提高流动相PH值，氨基酸正电荷减少，吸附力减弱，最后从离子交换柱 上洗脱下来。洗脱顺序是酸性和带羟基氨基酸、中性氨基酸、碱性氨基 酸。
5.氨基酸标准液中各种氨基酸在氨基酸自动分析仪上被洗脱的顺序有一定; 标准液各种氨基酸的浓度一定，洗脱峰的面积一定;由此可计算出样品中
• 生理体液样品首先要除去样品中的蛋白质，获得游离 氨基酸。除去蛋白质化学方法为：
• 1.苦味酸法 • 2.三氯醋酸法 • 3.磺基水杨酸法 • 4.乙醇沉淀法 • 常用方法为磺基水杨酸法：用4%磺基水杨酸，按1:3比
例与样品混合离心去蛋白，转速2万转以上离心10分钟 或更长一些时间。取上清液用样品稀释液稀释后上机 测定。（建议进样前用C18过滤柱处理一下为好）。
• 山东大学生命科学院发表的《低智儿童与正常儿童中氨 基酸的比较研究》一文着重叙述了血清中11种氨基酸的降 低可直接影响人体组织的正常发育、生长，从而导致儿童 智力发育不全。
• 军事医科院《条件性必需氨基酸在创伤愈合中的作用》 一文中叙述了条件性必需氨基酸在创伤愈合中的关系。
• 北京军区总医院《人胃癌组织及胃正常组织氨基酸的差 异研究》一文中通过对胃癌组织及自身胃正常组织氨基酸 的测定，探讨了肿瘤组织氨基酸代谢的变化规律。
LL--88880000氨氨基基酸酸分分析析仪仪 成成都都交交流流讲讲座座
吕守民 天美科技有限公司
目录
• 一、氨基酸分析仪 • 二、氨基酸 • 三、氨基酸分析仪基本分析原理 • 四、氨基酸分析仪法与HPLC的比较 • 五、样品的制备 • 六、应用
日立L-8800氨基酸分析仪简介
一、氨基酸分析仪： （一）氨基酸分析仪的构成（见图1) （二）氨基酸分析仪的流程图（见图2)
4.提高流动相PH值，氨基酸正电荷减少，吸附力减弱，最后从离子交换柱 上洗脱下来。洗脱顺序是酸性和带羟基氨基酸、中性氨基酸、碱性氨基 酸。
5.氨基酸标准液中各种氨基酸在氨基酸自动分析仪上被洗脱的顺序有一定; 标准液各种氨基酸的浓度一定，洗脱峰的面积一定;由此可计算出样品中
• 生理体液样品首先要除去样品中的蛋白质，获得游离 氨基酸。除去蛋白质化学方法为：
• 1.苦味酸法 • 2.三氯醋酸法 • 3.磺基水杨酸法 • 4.乙醇沉淀法 • 常用方法为磺基水杨酸法：用4%磺基水杨酸，按1:3比
例与样品混合离心去蛋白，转速2万转以上离心10分钟 或更长一些时间。取上清液用样品稀释液稀释后上机 测定。（建议进样前用C18过滤柱处理一下为好）。
• 山东大学生命科学院发表的《低智儿童与正常儿童中氨 基酸的比较研究》一文着重叙述了血清中11种氨基酸的降 低可直接影响人体组织的正常发育、生长，从而导致儿童 智力发育不全。
• 军事医科院《条件性必需氨基酸在创伤愈合中的作用》 一文中叙述了条件性必需氨基酸在创伤愈合中的关系。
• 北京军区总医院《人胃癌组织及胃正常组织氨基酸的差 异研究》一文中通过对胃癌组织及自身胃正常组织氨基酸 的测定，探讨了肿瘤组织氨基酸代谢的变化规律。
LL--88880000氨氨基基酸酸分分析析仪仪 成成都都交交流流讲讲座座
吕守民 天美科技有限公司
目录
• 一、氨基酸分析仪 • 二、氨基酸 • 三、氨基酸分析仪基本分析原理 • 四、氨基酸分析仪法与HPLC的比较 • 五、样品的制备 • 六、应用
日立L-8800氨基酸分析仪简介
一、氨基酸分析仪： （一）氨基酸分析仪的构成（见图1) （二）氨基酸分析仪的流程图（见图2)
氨基酸含量的测定及分离鉴定ppt课件
5
实验结果:
丙氨酸 苯丙氨酸 天冬氨酸
L/㎝ d/㎝ Rf
原点到溶剂前沿距离为L，原点到层析点中心距离为d
6
氨基酸的定量分析 —甲醛滴定法
一、目的：
初步掌握甲醛滴定法测定氨基酸含量的原理和操作要点
7
二、实验原理
水溶液中的氨基酸为兼性离子，因而不能直接用碱滴定氨基酸的羧基 。甲醛可与氨 基酸上的 —N+H3结合，形成 —NH—CH2OH、—N(CH2— OH)2 等羟甲基衍生物，使N+H3上的H+游离出来，这样就可以用碱滴定 N+H3放出H+，测出氨基氮，从而计算氨基酸的含量。
12
五、计算
标准甘氨酸氨基氮的回收率=
VNaoH*0.0200mol/L 理论计算值
*14.008
理论计算值:取用氨基酸的体积乘以浓度,再乘以14.008 VNaoH 两次测定所用氨基酸的体积的平均值
13
每毫升氨基酸溶液中含氨基氮的毫克数为
式中：V1为滴定样品消耗氢氧化钠的体积（ml）； V2为滴空白消耗氢氧化钠的体积（ml）； MNaOH 标准NaOH溶液的摩尔浓度
14
思考题
1、甲醛法测定氨基酸含量的原理是什么？ 2、根据滴定结果，总结分析此法在实际应用中的
优缺点。 3、为什么氢氧化钠溶液滴定氨基酸的—N+H3基上
的H+，不能用一般的酸碱指示剂？
15
8
若样品中只含有单一的已知氨基酸，则可由此法滴定的结果算出氨基 酸的含量。若样品中含有多种氨基酸（如蛋白质水解液），测不能由 此法算出氨基酸的含量。 脯氨酸与甲醛作用后，生成的化合物不稳定，导致滴定后结果偏低； 酪氨酸含酚基结构，导致滴定结果偏高。
实验结果:
丙氨酸 苯丙氨酸 天冬氨酸
L/㎝ d/㎝ Rf
原点到溶剂前沿距离为L，原点到层析点中心距离为d
6
氨基酸的定量分析 —甲醛滴定法
一、目的：
初步掌握甲醛滴定法测定氨基酸含量的原理和操作要点
7
二、实验原理
水溶液中的氨基酸为兼性离子，因而不能直接用碱滴定氨基酸的羧基 。甲醛可与氨 基酸上的 —N+H3结合，形成 —NH—CH2OH、—N(CH2— OH)2 等羟甲基衍生物，使N+H3上的H+游离出来，这样就可以用碱滴定 N+H3放出H+，测出氨基氮，从而计算氨基酸的含量。
12
五、计算
标准甘氨酸氨基氮的回收率=
VNaoH*0.0200mol/L 理论计算值
*14.008
理论计算值:取用氨基酸的体积乘以浓度,再乘以14.008 VNaoH 两次测定所用氨基酸的体积的平均值
13
每毫升氨基酸溶液中含氨基氮的毫克数为
式中：V1为滴定样品消耗氢氧化钠的体积（ml）； V2为滴空白消耗氢氧化钠的体积（ml）； MNaOH 标准NaOH溶液的摩尔浓度
14
思考题
1、甲醛法测定氨基酸含量的原理是什么？ 2、根据滴定结果，总结分析此法在实际应用中的
优缺点。 3、为什么氢氧化钠溶液滴定氨基酸的—N+H3基上
的H+，不能用一般的酸碱指示剂？
15
8
若样品中只含有单一的已知氨基酸，则可由此法滴定的结果算出氨基 酸的含量。若样品中含有多种氨基酸（如蛋白质水解液），测不能由 此法算出氨基酸的含量。 脯氨酸与甲醛作用后，生成的化合物不稳定，导致滴定后结果偏低； 酪氨酸含酚基结构，导致滴定结果偏高。
氨基酸测定仪测定操作规程
氨基酸测定仪测定操作规程1. 引言本操作规程旨在指导使用氨基酸测定仪进行氨基酸测定的操作流程，并确保准确、可靠地测定样品中氨基酸的含量。
2. 仪器和试剂准备•氨基酸测定仪•相应的试剂盒和标准品•电子天平•移液器和移液枪•显微镜和玻璃片3. 样品处理1.准备样品：选择需要测定氨基酸含量的样品，并记录每个样品的相关信息，如样品编号、来源等。
2.样品预处理：根据样品的特性，选择合适的预处理方法，如样品酶解、样品脱蛋白等，以保证测定结果的准确性。
3.样品稀释：根据测定方法的要求，将样品适当稀释，以确保在仪器检测范围内。
4. 仪器设置1.开启仪器：按照仪器的使用说明，正确开启氨基酸测定仪，并进行初始化操作。
2.设置参数：根据测定方法的要求，设置仪器的相应参数，如测定波长、积分时间等。
3.校准仪器：使用标准品进行仪器的校准，确保仪器的准确性和精确度。
5. 操作步骤1.取样和试剂加入：使用移液器或移液枪，取出预处理好的样品，加入试剂，并记录试剂的加入量。
2.反应和测定：将样品和试剂混合均匀，然后放入氨基酸测定仪中进行反应和测定。
确保每次测定都按照相同的时间进行，以保证结果的可比性。
3.数据记录与分析：根据仪器的测定结果，记录每个样品的氨基酸含量，并进行数据分析，如平均值、标准差等。
6. 结果计算与报告1.结果计算：根据仪器的测定结果和标准品的浓度，计算出样品中每种氨基酸的含量。
这部分可以使用计算软件或者自行编写程序进行计算。
2.报告撰写：根据实验结果，撰写相应的实验报告，并进行结果解释和结论汇总。
7. 安全注意事项•在操作过程中，严格遵守实验室的安全操作规程，佩戴实验室必要的防护用品。
•注意试剂的储存和使用方法，避免接触皮肤和吸入。
•避免样品交叉污染和仪器污染，每次操作后清洗仪器和工作台面。
8. 管理和维护1.仪器管理：定期对仪器进行维护和保养，保持仪器的良好状态。
如清洁仪器外壳、调试仪器等。
2.试剂管理：根据试剂的要求进行存储和保管，防止试剂过期或受污染。
氨基酸分析仪操作方法
氨基酸分析仪的操作流程及注意事项
操作流程
• 打开自动进样器，放入样品。 • 设置分析参数，如色谱柱、洗脱液、检测器等。 • 启动仪器，进行样品分析。 • 查看分析结果，进行数据处理。
注意事项
• 样品处理过程中，要保证样品的均匀性和代表性。 • 分析过程中，要保证仪器各部件的正常运行。 • 数据处理过程中，要保证数据的准确性和可靠性。
CREATE TOGETHER
SMART CREATE
氨基酸分析仪操作方法详解
01
氨基酸分析仪简介及工作原理
氨基酸分析仪的发展历程与应用领域
氨基酸分析仪的发展历程
• 20世纪50年代初期，出现了第一代氨基酸分析仪，主要用于蛋白质水解液中氨基酸的定量 分析。 • 20世纪60年代，出现了第二代氨基酸分析仪，采用了柱前衍生技术，提高了分析速度和灵 敏度。 • 20世纪80年代，出现了第三代氨基酸分析仪，采用了高效液相色谱技术，实现了氨基酸的 高灵敏度、高准确度分析。
氨基酸分析仪在医药领域的应用实例及案例分析
医药领域的应用实例
• 生物制品中氨基酸的纯度分析，评价生物制品的质量。 • 血液制品中氨基酸的分析，评价血液制品的营养价值。 • 药物研究中氨基酸的分析，评价药物的效果和安全性。
案例分析
• 某品牌奶粉中氨基酸的分析，发现某种氨基酸含量偏低，可能影响奶粉的营养质量。 • 某品牌酱油中氨基酸的分析，发现某种氨基酸含量偏高，可能影响酱油的风味和品 质。
氨基酸分析仪的分类
• 高效液相色谱法（HPLC）：采用高压液相色谱技术，实现了氨基酸的高灵敏度、 高准确度分析。 • 气相色谱法（GC）：采用气相色谱技术，分析了氨基酸的挥发性成分。 • 离子交换法（IE）：采用离子交换技术，分析了氨基酸的阴离子成分。
氨基酸的测定PPT课件
第18页/共24页
双语例句
气相色谱法
（辨别燕窝的真伪）
反应原理：
1. 氨基酸标准溶液的配制
一定量的气体或液体分析物
被注入到柱一端的进样口中。
2.1样品水解：称取约50mg
当分析物在载气带动下通过
研碎的样品(如为燕窝饮品，则
茚三酮、谷氨酸、磷酸氢二钠、磷
用去离子水将谷氨酸和果葡糖浆
酸二氢钾、硼酸等。7200可见分光
配制成谷氨酸含量分别为
光度计等
50,25,12.5 , 6.25 μg/mL的果葡
糖浆样品。以未加谷氨酸的果葡
糖浆为空白，采用茚三酮法测定
准确称取100mg谷氨酸(纯度不低
其中的氨基酸含量。计算回收率
于99% )，溶于100 mL水中，即母
样品的检测与分析 分别取市售不同的胶原蛋白
粉、明胶、奶粉等样品，按上 述样品处理方法进行处理后进 样，测定不同样品中17种水解 氨基酸和经脯氨酸的含量。 若样品中检出有经脯氨酸，则 说明有胶原蛋白的存在，可作 为乳粉中是否添加动物胶原水 解蛋白的依据。
该方法样品处理简便易操 作，可以对羟脯氨酸直接进行 分析，避免了衍生产物的多样 性，也不涉及样品中氨基酸衍 生不彻底等问题，能快速、准 确地判断乳制品中是否添加了 动物胶原水解蛋白。
评价某种蛋白质的营养价值包括两个方面：一是 各种必需氨基酸含量是否丰富，二是必需氨基酸的构 成是否符合一定比例。
第3页/共24页
随着食品科学的发展和营养知识的普及，食物蛋白质中必 需氨基酸含量的高低及氨基酸的构成，愈来愈得到人们的重 视。为提高蛋白质的生理效价而进行食品氨基酸互补和强化 的理论，对食品加工工艺的改革，对保健食品的开发及合理 配膳等工作都具有积极的指导作用。因此，食品及其原料中 氨基酸的分离、鉴定和定量也就具有极其重要的意义。
双语例句
气相色谱法
（辨别燕窝的真伪）
反应原理：
1. 氨基酸标准溶液的配制
一定量的气体或液体分析物
被注入到柱一端的进样口中。
2.1样品水解：称取约50mg
当分析物在载气带动下通过
研碎的样品(如为燕窝饮品，则
茚三酮、谷氨酸、磷酸氢二钠、磷
用去离子水将谷氨酸和果葡糖浆
酸二氢钾、硼酸等。7200可见分光
配制成谷氨酸含量分别为
光度计等
50,25,12.5 , 6.25 μg/mL的果葡
糖浆样品。以未加谷氨酸的果葡
糖浆为空白，采用茚三酮法测定
准确称取100mg谷氨酸(纯度不低
其中的氨基酸含量。计算回收率
于99% )，溶于100 mL水中，即母
样品的检测与分析 分别取市售不同的胶原蛋白
粉、明胶、奶粉等样品，按上 述样品处理方法进行处理后进 样，测定不同样品中17种水解 氨基酸和经脯氨酸的含量。 若样品中检出有经脯氨酸，则 说明有胶原蛋白的存在，可作 为乳粉中是否添加动物胶原水 解蛋白的依据。
该方法样品处理简便易操 作，可以对羟脯氨酸直接进行 分析，避免了衍生产物的多样 性，也不涉及样品中氨基酸衍 生不彻底等问题，能快速、准 确地判断乳制品中是否添加了 动物胶原水解蛋白。
评价某种蛋白质的营养价值包括两个方面：一是 各种必需氨基酸含量是否丰富，二是必需氨基酸的构 成是否符合一定比例。
第3页/共24页
随着食品科学的发展和营养知识的普及，食物蛋白质中必 需氨基酸含量的高低及氨基酸的构成，愈来愈得到人们的重 视。为提高蛋白质的生理效价而进行食品氨基酸互补和强化 的理论，对食品加工工艺的改革，对保健食品的开发及合理 配膳等工作都具有积极的指导作用。因此，食品及其原料中 氨基酸的分离、鉴定和定量也就具有极其重要的意义。
07 氨基酸分析检测
进样系统
• 通常使用耐高压的六通 阀进样装置 • 常压下进样
检测系统
• • • • （1）紫外－可见检测器 （2）光电二极管阵列检测器 （3）荧光检测器 （4）示差折光检测器
高效液相色谱法分离过程
进样口 混合器 色谱图 色谱柱 检测器 溶剂
在线检测
高压泵
高效固定相
高灵敏检测器
高压输送流动相 色谱柱多次使用
氨基酸测定方法详述
氨基酸专用系统配置
P200Ⅱ型或P230高压恒流泵 UV200Ⅱ或UV230紫外可见波长监测器 氨基酸专用色谱工作站 ZW型色谱柱恒温箱 氨基酸专用色谱柱（C18，5μ，250×4.6mm，Part No.20200031 ） 恒温水浴 酸度计 2台 1台 1套 1台 1支 选配 选配
高效液相色谱仪的组成
• • • • • • • • • 1、输液系统 储液瓶、脱气方法、高压输液系统（高压泵） 低压梯度洗脱和高压梯度洗脱 2、进样系统 3、色谱柱系统 4、柱温箱 5、检测系统 6、馏分收集器 7、控制系统
梯度洗脱装置
高压梯度: 利用两台高压输液 泵，将两种不同极性的 溶剂按一定的比例送入 梯度混合室，混合后进 入色谱柱。 低压梯度: 一台高压泵, 通过 比例调节阀,将两种或 多种不同极性的溶剂 按一定的比例抽入高 压泵中混合。
• • • • • • • • • • • • • • 定性和定量方法 (1)根据保留时间和紫外吸收谱进行定性分析。 (2)外标峰面积法进行定量测定。 (3)计算 a.标准曲线的绘制 以不同浓度的L-亮氨酸标准液测得的峰面积为纵坐标，L-亮氨酸 含量为横坐标绘制标准曲线，得到回归方程： Y=kX 式中Y：峰面积 X：L-亮氨酸标准品浓度 b.发酵液中L-亮氨酸含量计算方法 X= A/k 式中X:发酵液中L-亮氨酸含量，g/L A：样品的峰面积 k :回归方程所得值
氨基酸分析仪培训讲义
下面将日立氨基酸分析仪的构成、流程图 及特点给大家介绍如下： （一）氨基酸分析仪的构成
1、输液单元（泵与管路） 作用：输送缓冲液、反应液在流路系统 中流动。
2、进样单元（自动进样器） 作用：将样品在流动相的带动下送入仪 器体系中。
3、分离单元（离子交换柱、柱温箱）
作用：主要是样品的分离、将混合的样 品分离成单一组分。
从目前的情况来看，别的仪器产品厂家有的已 退出中国市场、且仪器的使用年限已有20几年， 具我们了解的情况来看，基本大多数都已报废 停用（如贝克曼121M、6300型）。近期进入国 内市场的一两家仪器生产商，在国内的占有率 也非常小、而且售后服务也不到位。日本日立 公司的一切从最早的分析时间12小时、4小时、 70分钟、直至降到现在的30分钟一个分析程序 （快速20分钟），而且操作软件非常得心应手 简便快捷，最小检测限为3pmol。无论从市场 占有率上、还是售后服务上都是最好的。
（4）泵（高速反馈、实时控制技术）：
日立氨基酸分析仪 采用双柱塞串联往 复泵，此种泵采用了高速反馈实时控制 技术，最大的优点是脉动小、流速稳定、 噪音低，所采用的这种泵它可保证所供 液体流量恒定、流速稳定。流量是否恒 定关系到峰的重复性、分辨率和定量的 准确。流速如果不稳定会产生脉动，它 可导致检测器噪音增大、最小检测量增 加灵敏度下降。实时控制技术系统采用 了一个高速传感器，对内部压力进行实 时监控，在柱塞换向的时间区段内、系 统压力有所下降趋势时
精氨酸 甘氨酸 胱氨酸 酪氨酸
非必需氨基酸 谷氨酸
天门冬氨酸 丙氨酸 丝氨酸 脯氨酸
羟脯氨酸
动物的必需氨基酸除上述8种外，还有精氨 酸、组氨酸共10种。 中性氨基酸：在分子式中具有一个氨基和 一个羧基，这样的氨基酸叫中性氨基酸。 酸性氨基酸：在分子式中羧基多于氨基具 有酸性，这样的氨基酸叫酸性氨基酸。 碱性氨基酸：在分子式中氨基多于羧基具 有碱性，这样的氨基酸叫碱性氨基酸。 什么叫必需氨基酸：人体每日总有一定量 的组织蛋白分解成氨基酸，然后再进一步 分解成水
氨基酸分析仪法测定氨基酸含量
测定农作物中的氨基酸含量
• 评价作物的营养品质，指导作物育种和栽培
• 检测农作物中的氨基酸代谢产物，研究作物生长和抗逆性
检测农业生产中的肥料和饲料
• 测定肥料和饲料中的氨基酸含量，评估肥料和饲料的营养价值
• 检测肥料和饲料中的氨基酸代谢产物，评估肥料和饲料的使用效果
谢谢观看
THANK YOU FOR WATCHING
• 通过输液泵和色谱柱实现氨基酸的分离
• 使用检测器检测氨基酸的荧光或紫外吸收信号
⌛️
数据处理
• 使用计算机和软件处理实验数据
• 计算氨基酸的含量和相对含量
• 生成实验报告，总结实验结果
03
氨基酸分析仪法的实验操作
样品前处理及氨基酸提取
样品前处理
氨基酸提取
• 研磨样品，使其均匀分散
• 使用醋酸钠或醋酸铵溶液沉淀氨基酸
氨基酸分析仪法在食品检测中的应用
测定食品中的氨基酸含量
检测食品中的食品添加剂
• 评价食品的营养价值，指导食品配方和加工
• 测定食品添加剂中的氨基酸含量，评估食品添加剂的安
• 检测食品中的氨基酸代谢产物，评估食品的新鲜度和品
全性
质
• 检测食品添加剂中的氨基酸代谢产物，评估食品添加剂
的使用效果
氨基酸分析仪法在生物医药领域的应用
谢产物，评估食品的新鲜
度和品质
农业领域
• 测定农作物中的氨基酸
生物医药领域
含量，评价作物的营养品
质
• 检测农作物中的氨基酸
代谢产物，研究作物生长
和抗逆性
• 测定生物体液中的氨基
酸含量，评价生理功能和
疾病状态
• 检测生物组织中的氨基
• 评价作物的营养品质，指导作物育种和栽培
• 检测农作物中的氨基酸代谢产物，研究作物生长和抗逆性
检测农业生产中的肥料和饲料
• 测定肥料和饲料中的氨基酸含量，评估肥料和饲料的营养价值
• 检测肥料和饲料中的氨基酸代谢产物，评估肥料和饲料的使用效果
谢谢观看
THANK YOU FOR WATCHING
• 通过输液泵和色谱柱实现氨基酸的分离
• 使用检测器检测氨基酸的荧光或紫外吸收信号
⌛️
数据处理
• 使用计算机和软件处理实验数据
• 计算氨基酸的含量和相对含量
• 生成实验报告，总结实验结果
03
氨基酸分析仪法的实验操作
样品前处理及氨基酸提取
样品前处理
氨基酸提取
• 研磨样品，使其均匀分散
• 使用醋酸钠或醋酸铵溶液沉淀氨基酸
氨基酸分析仪法在食品检测中的应用
测定食品中的氨基酸含量
检测食品中的食品添加剂
• 评价食品的营养价值，指导食品配方和加工
• 测定食品添加剂中的氨基酸含量，评估食品添加剂的安
• 检测食品中的氨基酸代谢产物，评估食品的新鲜度和品
全性
质
• 检测食品添加剂中的氨基酸代谢产物，评估食品添加剂
的使用效果
氨基酸分析仪法在生物医药领域的应用
谢产物，评估食品的新鲜
度和品质
农业领域
• 测定农作物中的氨基酸
生物医药领域
含量，评价作物的营养品
质
• 检测农作物中的氨基酸
代谢产物，研究作物生长
和抗逆性
• 测定生物体液中的氨基
酸含量，评价生理功能和
疾病状态
• 检测生物组织中的氨基
氨基酸分析原理与方法
非必需氨基酸 谷氨酸
天门冬氨酸 丙氨酸 丝氨酸 脯氨酸 羟脯氨酸
• 动物的必需氨基酸除上述8种外，还有精 氨酸、组氨酸共10种。
（三）氨基酸的化学性质
• 氨基酸分子中都具有氨基和羧基，因此 它们都能产生氨基与羧基的一般反应， 如脂化、甲基化、乙酰化以及酸碱的中 和作用等。有些氨基酸由于存在其它基 团而产生特殊反应，如半胱氨酸的巯基 （－SH)
碱性氨基酸 > 芳香族氨基酸 > 中性氨基酸 > 酸性氨基酸及羟基氨基 酸
4.提高流动相PH值，氨基酸正电荷减少，吸附力减弱，最后从离子交换柱 上洗脱下来。洗脱顺序是酸性和带羟基氨基酸、中性氨基酸、碱性氨基 酸。
5.氨基酸标准液中各种氨基酸在氨基酸自动分析仪上被洗脱的顺序有一定; 标准液各种氨基酸的浓度一定，洗脱峰的面积一定;由此可计算出样品中
• DYDA在570nm处有最大吸收。 • 脯氨酸、羟脯氨酸与茚三酮反应生成黄色物
质，在440nm处吸收峰最大。 • 生除成氨有基色酸物以质外（，这如N种H反2肽应类机也理可现与应茚用三于酮我反们应使
用的氨基酸分析仪之中）。
三、氨基酸分析仪基本分析原理
• 氨基酸的分离分析方法很多，近几年来 一般认为离子交换色谱法是比较准确的 定量方法。氨基酸分析仪就是以此为基 础研制出来的。近几年越来越多的日立 L-8800型氨基酸分析仪被引进到各行各 业之中，为我们科学研究及检测提供了 现代化的手段。
OPA是快速反应剂，有些氨基酸反应极其不稳定，特别 是甘氨酸、赖氨酸衍生物的信号衰减很快，一天变化很 大。从以往我们做的实验来看此方法的变异系数CV%一 般为5％左右，个别的氨基酸如组氨酸可达9%左右，尤 其对带有盐分的饲料氨基酸类样品特别不适合，因样品 中带有的盐分直接影响衍生（紫外法基线不好）。
氨 基 酸 自 动 分 析 仪 简 介
氨基酸自动分析仪氨基酸是蛋白质的组成成分，是蛋白质化学研究的主要内容之一。
蛋白质是一切生命物质的基础，因此，探讨和揭示生命现象的发生、生长、新陈代谢、遗传变异过程，都与氨基酸的研究有关。
随着近代物理学、化学和电子学的飞速发展，氨基酸的分析技术亦在不断更新。
氨基酸分析仪是本世纪50年代研制的，仅40多年，已发展到现在的进样、分离、检测和数据处理全部自动化的程度。
检出量由微克分子到毫微克分子，分析时间由原来的24小时到现在的半个小时，分析技术的提高促进了其他科学领域的发展。
一、氨基酸自动分析仪的进展用于氨基酸分析的方法很多，有纸色谱法、柱色谱法、薄层色谱法、电泳法及气相色谱法等。
一般认为离子交换柱色谱法是较为精确的检测方法，氨基酸分析仪就是在此基础上研制成功的。
1951年Moor和Stein采用离子交换树脂色谱，用茚三酮试剂显色和分光光度计检测而设计，后来在Spaekman的协助下，使分析操作自动化。
迄今氨基酸分析仪的条件和自动程度有了很大的改观，其特点主要表现以下几个方面。
⒈树脂粒径减小近年来制成的小颗粒球状树脂，使氨基酸分析仪得到很大改进。
由于树脂粒径减小就对应地增加等量树脂的总面积，使现在少量树脂达到过去大量树脂的分离效果，从而减小了树脂柱的内径和体积，节省了试剂用量，缩短了分析时间。
树脂的粒径从200→20→10→5µm。
⒉色谱柱内径缩小树脂粒径减小使填充树脂床的色谱柱内径减小，由过去的粗长柱变为微柱。
色谱柱内径的变化为18→6→2.8→1.75mm。
⒊输压泵压力增高一般氨基酸分析仪采用低压泵，其施加于输液的压力只有几9.80665×104Pa，以后增加至几十9.80665×104Pa，现在发展到2068×104Pa。
⒋分析时间缩短由于树脂粒径的改善，色谱柱内径缩小和泵压增高，使分析时间大大缩短。
蛋白质水解液的分析时间从过去的24小时缩短到现在的半个小时左右。
氨基酸分析仪原理
氨基酸分析仪原理
氨基酸分析仪的原理可以分为两个基本部分：色谱分离和检测。
首先是色谱分离。
氨基酸分析仪使用液相色谱法进行氨基酸的分离。
将待测样品中的氨基酸与特定的试剂反应生成衍生化合物，提高氨基酸的稳定性和检测性能。
然后，样品溶液经过进样装置进入液相色谱柱。
液相色谱柱是由高效分离固定相填充的管状设备。
不同氨基酸根据其化学性质和物理性质在固定相上的分配系数不同，因此会以不同的速率通过色谱柱，实现氨基酸的分离。
其次是检测。
液相色谱柱通过检测器与数据处理系统连接。
最常用的检测方法是紫外光检测法。
在紫外线的激发下，氨基酸会发生吸收，产生特定的吸收峰。
检测器可以测量样品中吸收光强的变化，并转化为电信号，通过数据处理系统进行处理和分析，最终得到各个氨基酸的浓度。
在氨基酸分析仪中，还可以使用其他检测方法，如荧光检测法或融合球束电泳等，以满足不同实验需求。
但无论采用何种检测方法，氨基酸分析仪的核心原理仍然是通过色谱分离和检测来实现氨基酸的定量分析。
氨基酸分析基本原理和应用PPT讲稿
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日立L-8900氨基酸分析仪
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（一）氨基酸分析仪的构成
• 1、输液单元（泵与管路）
• 2、进样单元（自动进样器）
• 3、分离单元（离子交换柱、柱温箱）
• 4、反应单元（反应柱、反应温度加热设备） • 5、检测单元（分光光度计）
• 缓冲液、样品、流路系统混入氨进可使
基线在碱性氨基酸出峰处将基线抬高， 影响碱性氨基酸分离效果和准确定量。
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（五）氧的影响
• 反应液中的茚三酮最忌氧，茚三酮氧化后
即变质失效，所以茚三酮购入后一定要妥 善保管，特别是不能在空气中长时间暴露。 缓冲液中的溶解氧也会对茚三酮显色效果 造成影响。
定量精确度 操作
氨基酸分析仪 30min 110min 95-98% 3pmol
CV≤1.0% 简单
HPLC 50min 135min
85% 100pmol
CV≤3% 复杂
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三、样品的制备
• （一）蛋白质的水解
• （二）游离氨基酸样品的制备
• （三）生理体液样品的前处理
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（六）光源的影响
• 光源不佳时，灵敏度会降低，到达规定
时间后该换就得换灯（使用期限以灯能 量为准）
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五、应用
• 氨基酸是组成蛋白质的基本单元，具有极
其重要的生理功能。氨基酸的检测分析广 泛应用于医学、农业、食品、医药、饲料、 化妆品等与人类生活和健康密切相关的几 大行业。
• 2、离子交换树脂
日立L-8900氨基酸分析仪
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（一）氨基酸分析仪的构成
• 1、输液单元（泵与管路）
• 2、进样单元（自动进样器）
• 3、分离单元（离子交换柱、柱温箱）
• 4、反应单元（反应柱、反应温度加热设备） • 5、检测单元（分光光度计）
• 缓冲液、样品、流路系统混入氨进可使
基线在碱性氨基酸出峰处将基线抬高， 影响碱性氨基酸分离效果和准确定量。
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（五）氧的影响
• 反应液中的茚三酮最忌氧，茚三酮氧化后
即变质失效，所以茚三酮购入后一定要妥 善保管，特别是不能在空气中长时间暴露。 缓冲液中的溶解氧也会对茚三酮显色效果 造成影响。
定量精确度 操作
氨基酸分析仪 30min 110min 95-98% 3pmol
CV≤1.0% 简单
HPLC 50min 135min
85% 100pmol
CV≤3% 复杂
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三、样品的制备
• （一）蛋白质的水解
• （二）游离氨基酸样品的制备
• （三）生理体液样品的前处理
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（六）光源的影响
• 光源不佳时，灵敏度会降低，到达规定
时间后该换就得换灯（使用期限以灯能 量为准）
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五、应用
• 氨基酸是组成蛋白质的基本单元，具有极
其重要的生理功能。氨基酸的检测分析广 泛应用于医学、农业、食品、医药、饲料、 化妆品等与人类生活和健康密切相关的几 大行业。
• 2、离子交换树脂
日立l-8900氨基酸自动分析仪.ppt
对柱子危害比较厉害。组氨酸分离不好、组氨酸的二级衍生物与丝 氨酸重叠，另一个峰柱效降低时完全融入到前面苯丙峰中，直接影 响定量，时间变化比较大。
氨基酸分析仪与HPLC常规比较
四 样品的制备
1. 蛋白质的水解 2. 游离氨基酸样品的制备
蛋白质的水解
用于全氨基酸测定的样品，凡是以蛋白质形式存在的都有进行水解处 理，水解方法有三种：
L-8900氨基酸分析仪内部结构
日立L-8900氨基酸分析仪的组成
日立L-8900氨基酸分析仪分析原理
1. 样品中的氨基酸在低pH的条件下，都带有正电荷，在阳离子 交换树脂上均被吸附，但吸附的程度不同，碱性氨基酸结合力 最强，其次为中性氨基酸、酸性氨基酸结合力最弱。
2.按照氨基酸分析仪设定的洗脱程序，用不同离子强度、pH值 的缓冲液依次将氨基酸按吸附力的不同洗脱下来。
氨基酸分析仪生产厂家及常见型号
日立氨基酸分析仪发展历史
三 氨基酸分析仪原理及相应部件
氨基酸分析仪基本分析原理：
各种蛋白质是由20种氨基酸首尾相连，并以一定的顺序组成肽链。用 水解的方法将肽链打开，形成单一的氨基酸进行分析。所有的氨基酸 在低pH值的条件下都带有正电荷，在阳离子交换树脂上均被吸附，但 吸附的程度不同，碱性氨基酸结合力最强、其次为芳香族氨基酸、中 性氨基酸、酸性氨基酸结合力最弱。按照氨基酸分析仪设定的洗脱程 序，用不同离子强度、pH值的缓冲液依次将氨基酸按吸附力的不同洗 脱下来（先酸性氨基酸再中性氨基酸最后碱性氨基酸），被洗脱下来 的氨基酸与茚三酮反应液在加热的条件下反应（135度），生成可在分 光光度计中570nm和440nm检测到的蓝紫色物质（仲氨生成浅黄色物 质440nm检测），外标法定量。
氨基酸的化学性质
氨基酸分析仪与HPLC常规比较
四 样品的制备
1. 蛋白质的水解 2. 游离氨基酸样品的制备
蛋白质的水解
用于全氨基酸测定的样品，凡是以蛋白质形式存在的都有进行水解处 理，水解方法有三种：
L-8900氨基酸分析仪内部结构
日立L-8900氨基酸分析仪的组成
日立L-8900氨基酸分析仪分析原理
1. 样品中的氨基酸在低pH的条件下，都带有正电荷，在阳离子 交换树脂上均被吸附，但吸附的程度不同，碱性氨基酸结合力 最强，其次为中性氨基酸、酸性氨基酸结合力最弱。
2.按照氨基酸分析仪设定的洗脱程序，用不同离子强度、pH值 的缓冲液依次将氨基酸按吸附力的不同洗脱下来。
氨基酸分析仪生产厂家及常见型号
日立氨基酸分析仪发展历史
三 氨基酸分析仪原理及相应部件
氨基酸分析仪基本分析原理：
各种蛋白质是由20种氨基酸首尾相连，并以一定的顺序组成肽链。用 水解的方法将肽链打开，形成单一的氨基酸进行分析。所有的氨基酸 在低pH值的条件下都带有正电荷，在阳离子交换树脂上均被吸附，但 吸附的程度不同，碱性氨基酸结合力最强、其次为芳香族氨基酸、中 性氨基酸、酸性氨基酸结合力最弱。按照氨基酸分析仪设定的洗脱程 序，用不同离子强度、pH值的缓冲液依次将氨基酸按吸附力的不同洗 脱下来（先酸性氨基酸再中性氨基酸最后碱性氨基酸），被洗脱下来 的氨基酸与茚三酮反应液在加热的条件下反应（135度），生成可在分 光光度计中570nm和440nm检测到的蓝紫色物质（仲氨生成浅黄色物 质440nm检测），外标法定量。
氨基酸的化学性质
氨基酸分析仪概况
上海仪先
五、实验室条件（水解分析） 实验室条件（水解分析）
设备名称
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 试管浓缩仪(或其它浓缩设备) 真空泵 干燥箱 液氮罐 喷灯 喷灯用气（火机气） 涡流振荡器 抽滤瓶 冷冻安培瓶 浓缩管 500ml 20ml 50ml
用途简述
样品浓缩 浓缩或抽滤时使用 水解处理 样品烘干 溶液保护 水解处理，试管封口 水解处理，试管封口 溶液混匀 溶液过滤纯化 水解处理 充氮保护 样品浓缩
上海仪先
茚三酮与氨基酸的衍生反应
+
伯胺型氨基酸 仲胺型氨基酸
兰紫色化合物 黄绿色化合物
茚三酮 还原茚三酮 +
水合茚三酮
伯 胺
还原茚三酮
型
兰紫色化合物
胺 型
黄绿色化合物
上海仪先
三、为什么要采用茚三酮柱后衍生法
• 符合国标及国际仲裁标准 • 仪器自动化水平高 • 衍生时间、衍生温度等无样品间差异，稳定性、分辨率、 分离度具佳 • 色谱柱寿命长 • 单样成本低
全自动氨基酸分析仪概况
上海仪先仪器有限公司 韩 春
上海仪先
一、氨基酸的定义
什么是氨基酸，为什么分析氨基酸？ 什么是氨基酸，为什么分析氨基酸？
•
地球上近150万种动物、30万种植物和20万种微生物虽然生物种 类如此繁多，其外部形态、内部结构、生活习性、繁衍方式千差 万别，但本质只有一个，即如恩格斯所说的: “生命是蛋白体的存 在方式，这种存在方式的实质就是这些蛋白体化学成分的不断自 我更新”。
•
“蛋白体的化学成分”就是组成蛋白的基本单元－氨基酸，而 “不断自我更新”就是氨基酸的不断的重新排列、组合。
பைடு நூலகம்
《氨基酸分析》PPT课件
整理ppt
28
毛细管电泳法
毛细管电泳具有微量、灵敏和柱效高的 特点， 适合于氨基酸手性分离和复杂样 品中的氨基酸 分析。
用于氨基酸分析的毛细管电泳主要采用 两种分 离模式：毛细管区带电泳和胶束电动毛细管电 泳。
检测方式主要有紫外法和荧光法。
整理ppt
29
毛细管电泳法
毛细管电泳法可以进行柱前、柱内和柱后衍生化。
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20
离子交换色谱法
阳离子交换树脂：强酸型磺酸化的
聚苯乙烯-二乙烯基苯共聚物。
阴离子交换树脂：只有在特殊情况下 用于强酸性氨基酸的分析。
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21
1、直接检测法
离子交换色谱法用于氨基酸分析时，可在 200nm处对各种氨基酸进行直接检测，检出 限在1～10 pmol之间。
整理ppt
22
整理ppt
31
显色分析法
有几种显色试剂只有当干扰物预先除去后 才有定量分析的价值。
在有些情况下可以通过改变试剂的组成或 反应条件以便进行某一种氨基酸的选择性 测定。
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32
荧光法
色氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸等在紫外光照 射下会产生荧光，其它氨基酸与某些有机 试剂反应之后其产物才会产生荧光。
相对于显色法，荧光分析法的选择性和灵 敏度要好。
H
R C COOH NH2
天然的氨基酸均为L-氨基酸
整理ppt
9
氨基酸的理化性质
❖1. 溶解度
❖2. 熔点:高
❖3. 旋光性有旋光性
❖4. 味感：D-氨基酸大
多带甜味，L-氨基酸有 苦、甜、鲜、酸等四种 不同味感。
❖ 1. 两性性质：氨基酸分子 中含有氨基及羧基，使其既 能象酸又能象碱一样解离；
氨基酸的定量测定 PPT课件
氨基酸含量= (VHClO4 cHClO4 VNaAC cNaAC ) M 100 % m
（含有两个氨基的氨基酸，如赖氨酸、胱氨酸和精氨酸在此计算式中还应该除以2） 式中：VHClO4——所消耗的高氯酸标准溶液的体积
cHClO4——所消耗的高氯酸标准溶液的浓度 VNaAC——所消耗的醋酸钠溶液的体积 cNaAC——所消耗的醋酸钠溶液的浓度 M——被测氨基酸的摩尔质量 m——被测氨基酸的质量
3、茚三酮比色法
注意事项： ①通常采用的样品处理方法为：准确称取粉碎样品5～10g或吸取样液 样品5～10mL置于烧杯中，加入50mL蒸馏水和5g左右活性炭，加热煮沸， 过滤，用30～40mL热水洗涤活性炭，收集滤液于100mL容量瓶中，加水 至标线，摇匀备测。 ②茚三酮受阳光、空气、温度、湿度等影响而被氧化呈淡红色或深红 色，使用前须进行纯化，方法如下：
分别吸取：每组两份。 ①测定管：稀释10倍的血清上清液100μL，加水至300μL ②标准管：1mmol谷氨酸标准溶液25μL，加0.06mol/L三氯醋酸 100μL。加水至300μL ③空白管：0.06mol/L三氯醋酸100μL，加水至300μL。
分别加3mLOPT溶液于上述样品中，迅速摇匀，立即进行荧光测 定。使用荧光分光光度计，激发光波长340nm，发射光波长455nm。
2、电位滴定法
操作方法： 吸取含氨基酸约20mg的样品溶液于100mL容量瓶中，加水至标线，
混匀后吸取20.0mL置于200mL烧杯中，加水60mL，开动磁力搅拌器， 用0.05mol/L氢氧化钠标准溶液滴定至酸度计指示pH8.2，记录消耗 氢氧化钠标准溶液的体积（mL），供计算总酸含量。
加入10.0mL甲醛溶液，混匀，再加上述氢氧化钠标准溶液继续 滴定至pH9.2，记录消耗氢氧化钠标准溶液的体积（mL）。
（含有两个氨基的氨基酸，如赖氨酸、胱氨酸和精氨酸在此计算式中还应该除以2） 式中：VHClO4——所消耗的高氯酸标准溶液的体积
cHClO4——所消耗的高氯酸标准溶液的浓度 VNaAC——所消耗的醋酸钠溶液的体积 cNaAC——所消耗的醋酸钠溶液的浓度 M——被测氨基酸的摩尔质量 m——被测氨基酸的质量
3、茚三酮比色法
注意事项： ①通常采用的样品处理方法为：准确称取粉碎样品5～10g或吸取样液 样品5～10mL置于烧杯中，加入50mL蒸馏水和5g左右活性炭，加热煮沸， 过滤，用30～40mL热水洗涤活性炭，收集滤液于100mL容量瓶中，加水 至标线，摇匀备测。 ②茚三酮受阳光、空气、温度、湿度等影响而被氧化呈淡红色或深红 色，使用前须进行纯化，方法如下：
分别吸取：每组两份。 ①测定管：稀释10倍的血清上清液100μL，加水至300μL ②标准管：1mmol谷氨酸标准溶液25μL，加0.06mol/L三氯醋酸 100μL。加水至300μL ③空白管：0.06mol/L三氯醋酸100μL，加水至300μL。
分别加3mLOPT溶液于上述样品中，迅速摇匀，立即进行荧光测 定。使用荧光分光光度计，激发光波长340nm，发射光波长455nm。
2、电位滴定法
操作方法： 吸取含氨基酸约20mg的样品溶液于100mL容量瓶中，加水至标线，
混匀后吸取20.0mL置于200mL烧杯中，加水60mL，开动磁力搅拌器， 用0.05mol/L氢氧化钠标准溶液滴定至酸度计指示pH8.2，记录消耗 氢氧化钠标准溶液的体积（mL），供计算总酸含量。
加入10.0mL甲醛溶液，混匀，再加上述氢氧化钠标准溶液继续 滴定至pH9.2，记录消耗氢氧化钠标准溶液的体积（mL）。
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茚三酮衍生原理
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氨基酸分析仪的分类
➢水解蛋白型：分析常见18种氨基酸，可加入标准品扩 展至20多种（钠盐系统分析）
➢生理体液型：游离氨基酸，常见43种，Biochrom30+ 氨基酸分析仪目前可以分析最多的56种氨基酸（锂盐 系统分析）
➢氧化水解型：主要用于含硫氨基酸的准确分析（饲料） （钠盐系统分析）
茚三酮： • 特殊配方生试剂无需混合，无需低温保存即可在常温氮气保护下
保存一年 柱温箱二次加热功能 • 柱温箱有预热模块，可将缓冲液在进入分离柱之前预热，使之达
到柱温，缓冲液不会受到外界温度变化影响。
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仪器参数
检测限：2.5pmol (S/N=2,天冬氨酸) 9pmol (全部氨基酸平均)
请参看/coa/） ▪ 中国计量器具认证
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COA认证
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COA17029
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目录
1. 水解蛋白标准谱图 2. 原理及特点 3. 仪器特点介绍 4. 技术参数 5. 仪器配置 6. 仪器配套设备 7. 图谱实例 8. 总结
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Biochrom 30+ 氨基酸分析 仪标准图谱
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什么是氨基酸分析仪？
氨基酸分析仪是基于阳离子交换柱分离、 茚三酮柱后衍生、光度法测定的离子交换色谱 法为基础的全自动氨基酸分析仪器。此类分析 方法由Moore和Stein于1958年发明，并于1972 年获得诺贝尔奖，是当今国际和国家标准以及 仲裁和涉外标准方法。
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蛋白水解法的两个国家标准
▪ GBT 5009.124-2003 食品中氨基酸分析 酸水解法：测定天冬氨酸、苏氨酸、丝氨酸、谷氨 酸、甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸 、亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、赖氨酸、 精氨酸、脯氨酸
▪ GBT 18246-2000 饲料中氨基酸的测定 酸水解法：同上 氧化水解法：测定半胱氨酸和蛋氨酸 碱水解法：色氨酸
Biochrom 30+ 全自动氨基酸分析仪
瑞士华嘉有限公司 产品支持：张晓明
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Biochrom 30+ 氨基酸分析仪
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Biochrom 全自动氨基酸分析仪，全球氨基酸分析仪的领 导者 ，40年应用历史，全球2000用户的选择；全球最早的氨 基酸标准《欧盟饲料标准》由该机全程试验、验证，此标准 此后被包括中国在内的几乎所有国家参照做为水解蛋白分析 的标准；中国市场上唯一获得FDA市场准入许可，并符合联 邦药物、食品和化妆品条款的氨基酸分析仪。唯一在市场上 出具毫无争议的涉外仲裁结果的全自动氨基酸分析仪
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▪ 中国市场上唯一获美国FDA市场准入许可 ▪ 并符合联邦药物、食品和化妆品条款510（k） ▪ 符合ISO 9001:2000 ▪ 符合ISO 13485:2003 ▪ 符合ERNDIM 2005认证 ▪ 符合EU Directive 98/79/EC认证 ▪ 符合COA认证（所有使用的化学试剂及其成分认证，
Biochrom 30+特点介绍
意外断电保护：以外断电可自 动通过氮气压力与系统压力形 成的压差带动冲洗液冲洗管路 ，以防管路被降低温度后变粘 稠的茚三酮堵住。
茚三酮倒流保护：防止由于误操 作导致分析柱被污染。
液体流速误差自动调整 功能：确保分析准确度 。
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Biochrom 30+特点介绍
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氨基酸基础知识
▪ 从各种生物体中发现的氨基酸已有180多种，但是参与蛋白质组 成的常见氨基酸只有20种。 天冬氨酸（Asp）、苏氨酸（Thr）、丝氨酸（Ser）、谷氨酸（ Glu）、甘氨酸（Gly）、丙氨酸（Ala）、半胱氨酸（Cys）缬 氨酸（Val）、蛋氨酸（Met）、异亮氨酸（Ile）、亮氨酸（ Leu）、酪氨酸（Tyr）、苯丙氨酸（Phe）、组氨酸（His）、 赖氨酸（Lys）、精氨酸（Arg）、脯氨酸（Pro）、色氨酸（ Trp）、天冬酰胺(Asn）、谷氨酰胺（Gln）
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Biochrom 30+特点介绍
氮气保护系统： • 防止缓冲液、衍生试剂被氧化，延长试剂寿
命 • 防止氧气进入缓冲液，导致样品中易氧化组
分被破坏，影响分析结果 • 用而不耗，节约成本 • 氮气过压保护，防止由于氮气阀没有调节好
而引起缓冲液、衍生试剂瓶发生爆炸的危险
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保留时间重复性：≤0.05% CV （精氨酸） ≤0.07% CV （丙氨酸） ≤0.1% CV （全部氨基酸平均）
峰面积重复性： ≤0.2% CV （甘氨酸） ≤0.4% CV （组氨酸） ≤0.5% CV （全部氨基酸平均）
分离度：全部氨基酸 >1.4; 平均值3.3
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Biochrom 30+特点介绍
• 采用世界最大的色谱填 料生产 商原安玛西亚色谱填料填装色 谱柱
• 色谱柱4.6200mm(高效) 所有氨基酸分析仪中最长的色 谱柱，可达到高分辨的效果
•色谱柱采用惰性PEEK材料，使得每次分析完成后的再生清洗可采用高 浓度氢氧化钠溶液，同样的分析时间（净分析时间+再生时间）下，净分 析时间最长，从而达到最好的分析效果。并可加温至99℃的高温，对于 氢氧化钠无法清洗的污染物，如：高脂、高糖污染物达到很好的分解清 洗作用，延长色谱柱使用寿命。
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Biochrom 30氨基酸分析仪原理图
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Biochrom 30+特点介绍
配置两个高压小体积 电子陶瓷泵，并配有 泵头自动冲洗装置， 可避免传统不锈钢泵 头被高盐缓冲液长期 腐蚀导致的磨损、漏 液的情况；除此之外 所有与液体接触的管 路、接头色谱柱的部 件都采用惰性PEEK材 料，使得仪器在耐用 性上达到了无与伦比 的程度。
茚三酮衍生原理
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氨基酸分析仪的分类
➢水解蛋白型：分析常见18种氨基酸，可加入标准品扩 展至20多种（钠盐系统分析）
➢生理体液型：游离氨基酸，常见43种，Biochrom30+ 氨基酸分析仪目前可以分析最多的56种氨基酸（锂盐 系统分析）
➢氧化水解型：主要用于含硫氨基酸的准确分析（饲料） （钠盐系统分析）
茚三酮： • 特殊配方生试剂无需混合，无需低温保存即可在常温氮气保护下
保存一年 柱温箱二次加热功能 • 柱温箱有预热模块，可将缓冲液在进入分离柱之前预热，使之达
到柱温，缓冲液不会受到外界温度变化影响。
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仪器参数
检测限：2.5pmol (S/N=2,天冬氨酸) 9pmol (全部氨基酸平均)
请参看/coa/） ▪ 中国计量器具认证
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COA认证
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COA17029
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目录
1. 水解蛋白标准谱图 2. 原理及特点 3. 仪器特点介绍 4. 技术参数 5. 仪器配置 6. 仪器配套设备 7. 图谱实例 8. 总结
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Biochrom 30+ 氨基酸分析 仪标准图谱
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什么是氨基酸分析仪？
氨基酸分析仪是基于阳离子交换柱分离、 茚三酮柱后衍生、光度法测定的离子交换色谱 法为基础的全自动氨基酸分析仪器。此类分析 方法由Moore和Stein于1958年发明，并于1972 年获得诺贝尔奖，是当今国际和国家标准以及 仲裁和涉外标准方法。
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蛋白水解法的两个国家标准
▪ GBT 5009.124-2003 食品中氨基酸分析 酸水解法：测定天冬氨酸、苏氨酸、丝氨酸、谷氨 酸、甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸 、亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、赖氨酸、 精氨酸、脯氨酸
▪ GBT 18246-2000 饲料中氨基酸的测定 酸水解法：同上 氧化水解法：测定半胱氨酸和蛋氨酸 碱水解法：色氨酸
Biochrom 30+ 全自动氨基酸分析仪
瑞士华嘉有限公司 产品支持：张晓明
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Biochrom 30+ 氨基酸分析仪
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Biochrom 全自动氨基酸分析仪，全球氨基酸分析仪的领 导者 ，40年应用历史，全球2000用户的选择；全球最早的氨 基酸标准《欧盟饲料标准》由该机全程试验、验证，此标准 此后被包括中国在内的几乎所有国家参照做为水解蛋白分析 的标准；中国市场上唯一获得FDA市场准入许可，并符合联 邦药物、食品和化妆品条款的氨基酸分析仪。唯一在市场上 出具毫无争议的涉外仲裁结果的全自动氨基酸分析仪
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▪ 中国市场上唯一获美国FDA市场准入许可 ▪ 并符合联邦药物、食品和化妆品条款510（k） ▪ 符合ISO 9001:2000 ▪ 符合ISO 13485:2003 ▪ 符合ERNDIM 2005认证 ▪ 符合EU Directive 98/79/EC认证 ▪ 符合COA认证（所有使用的化学试剂及其成分认证，
Biochrom 30+特点介绍
意外断电保护：以外断电可自 动通过氮气压力与系统压力形 成的压差带动冲洗液冲洗管路 ，以防管路被降低温度后变粘 稠的茚三酮堵住。
茚三酮倒流保护：防止由于误操 作导致分析柱被污染。
液体流速误差自动调整 功能：确保分析准确度 。
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Biochrom 30+特点介绍
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氨基酸基础知识
▪ 从各种生物体中发现的氨基酸已有180多种，但是参与蛋白质组 成的常见氨基酸只有20种。 天冬氨酸（Asp）、苏氨酸（Thr）、丝氨酸（Ser）、谷氨酸（ Glu）、甘氨酸（Gly）、丙氨酸（Ala）、半胱氨酸（Cys）缬 氨酸（Val）、蛋氨酸（Met）、异亮氨酸（Ile）、亮氨酸（ Leu）、酪氨酸（Tyr）、苯丙氨酸（Phe）、组氨酸（His）、 赖氨酸（Lys）、精氨酸（Arg）、脯氨酸（Pro）、色氨酸（ Trp）、天冬酰胺(Asn）、谷氨酰胺（Gln）
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Biochrom 30+特点介绍
氮气保护系统： • 防止缓冲液、衍生试剂被氧化，延长试剂寿
命 • 防止氧气进入缓冲液，导致样品中易氧化组
分被破坏，影响分析结果 • 用而不耗，节约成本 • 氮气过压保护，防止由于氮气阀没有调节好
而引起缓冲液、衍生试剂瓶发生爆炸的危险
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保留时间重复性：≤0.05% CV （精氨酸） ≤0.07% CV （丙氨酸） ≤0.1% CV （全部氨基酸平均）
峰面积重复性： ≤0.2% CV （甘氨酸） ≤0.4% CV （组氨酸） ≤0.5% CV （全部氨基酸平均）
分离度：全部氨基酸 >1.4; 平均值3.3
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Biochrom 30+特点介绍
• 采用世界最大的色谱填 料生产 商原安玛西亚色谱填料填装色 谱柱
• 色谱柱4.6200mm(高效) 所有氨基酸分析仪中最长的色 谱柱，可达到高分辨的效果
•色谱柱采用惰性PEEK材料，使得每次分析完成后的再生清洗可采用高 浓度氢氧化钠溶液，同样的分析时间（净分析时间+再生时间）下，净分 析时间最长，从而达到最好的分析效果。并可加温至99℃的高温，对于 氢氧化钠无法清洗的污染物，如：高脂、高糖污染物达到很好的分解清 洗作用，延长色谱柱使用寿命。
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Biochrom 30氨基酸分析仪原理图
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Biochrom 30+特点介绍
配置两个高压小体积 电子陶瓷泵，并配有 泵头自动冲洗装置， 可避免传统不锈钢泵 头被高盐缓冲液长期 腐蚀导致的磨损、漏 液的情况；除此之外 所有与液体接触的管 路、接头色谱柱的部 件都采用惰性PEEK材 料，使得仪器在耐用 性上达到了无与伦比 的程度。