苏木素-伊红染色液(H-E)
苏木素染色原理
苏木素-伊红染色液(H-E)说明书【产品名称】苏木素-伊红染色液(H-E)【型号】苏木素染色液分别为:Mayer型、改良Harris型、型改良Lillie-Mayer型;伊红染色液分别为:水溶型、醇溶型。
【包装规格】货号:DH0006单瓶包装规格分别为:100ml、250ml、500ml、5000ml;每套/盒包装规格分别为:2×100ml/盒、2×250ml/盒、2×500ml/盒、2×5000ml/盒。
【预期用途】主要用于对细胞组织进行染色。
【检验原理】苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合主要用于对细胞组织进行染色,简称HE染色,是病理学常规制片中最基本的染色方法,应用极其广泛,苏木素-伊红染色是生物学、组织学、病理学及细胞学等学科必不可少的最基本的染色方法,在病理诊断、教学与科研中广泛应用,具有重要价值,细胞中的细胞核是由酸性物质组成,它与碱性染料(苏木素)的亲和力较强;细胞浆则相反,它所含的碱性物质与酸性染料(伊红)的亲和力较大。
因此细胞或组织切片经苏木素-伊红染色液染色后,细胞核被苏木素染成鲜明的蓝紫色,细胞浆、肌纤维、胶元纤维等呈不同程度的红色,红细胞则呈橙红色。
【主要组成成分】试剂组成主要成分苏木素染色液(改良Lillie-Mayer)或苏木素染色液(改良Harris)或木素染色液(Mayer) 苏木色精伊红染色液(水溶)或伊红染色液(醇溶) 伊红【储存条件及有效期】5℃~35℃保存,原包装未开封染色液的有效期为18个月,在有效期内的已开封染色建议在开封后6个月内使用完,每次用后及时拧紧瓶盖,以免挥发或变质。
【样本要求】涂片和切片必须充分固定,石蜡切片要充分脱蜡。
【检验方法】l、石蜡切片于二甲苯I、II中脱蜡;2、经无水乙醇和95%乙醇,经8O%乙醇,自来水冲洗;3、苏木素染色液(改良Lillie-Mayer或改良Harris)染色,自来水洗;或苏木素染色液(Mayer)染色;4、苏木素染色后用l%盐酸乙醇溶液分化数秒(l%盐酸乙醇溶液配制:99m1 75%乙醇加1ml浓盐酸);若用苏木素染色液(Mayer)染色后则不需分化;5、自来水冲洗返蓝;亦可用碳酸锂水溶液返蓝,自来水洗;6、入伊红染色液(水溶)染色,稍洗;若用伊红染液(醇溶),切片应先经80%乙醇脱水后,再入伊红染液(醇溶)染色(忌水洗);7、95%乙醇I、II中调色;8、无水乙醇I、II中脱水,二甲苯I、II中透明;9、封片胶封片,镜检。
H.E染色概念、定义及操作步骤
He染色介绍苏木精—伊红染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,简称HE染色法,石蜡切片技术里常用的染色法之一。
苏木精染液为碱性,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色;伊红为酸性染料,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。
染色分类易于被碱性或酸性染料着色的性质称为嗜碱性( basophilia )和嗜酸性( acidophilia ) 。
组织内的蛋白质构成蛋白质的氨基酸的种类很多,它们有不同的等电点。
在普通染色法中,染色液的酸碱度为pH6左右,细胞内的酸性物质如细胞核的染色质、腺细胞和神经细胞内的粗面内质网及透明软骨基质等均被碱性染料染色,这些物质称为嗜碱性。
而细胞质中的其它蛋白质如红细胞中的血红蛋白、嗜酸粒细胞的颗粒及胶原纤维和肌纤维等被酸性染料染色,这些物质称为嗜酸型。
如果改变染色液的酸碱度,pH值升高时,则原来被酸性染料染色的物质可变为嗜碱性;pH值降低时,原来被碱性染料染色的物质则可变为嗜酸性。
所以说染色液的pH值可以影响染色的反应。
去氧核糖核酸(DNA)两条链上的磷酸基向外,带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏木精碱性染料以离子键结合而被染色。
苏木精在碱性溶液中称蓝色,所以细胞核被染成蓝色。
伊红Y是一种化学合成的酸性染料,在水中离解成带负电荷的阴离子,与蛋白质的氨基正电荷的阳离子结合使胞浆染色,细胞浆、红细胞、肌肉、结缔组织、嗜伊红颗粒等被染成不同程度的红色或粉红色,与蓝色的细胞核形成鲜明对比。
伊红是细胞浆的良好染料。
由于组织或细胞的不同成分对苏木精的亲和力不同及染色性质不一样。
经苏木精染色后,细胞核及钙盐粘液等呈蓝色,可用盐酸酒精分化和弱碱性溶液显蓝,如处理适宜,可使细胞核着清楚的深蓝色,胞浆等其它成分脱色。
再利用胞浆染料伊红染胞浆,使胞浆的各种不同成分又呈现出深浅不同的粉红色。
故各种组织或细胞成分与病变的一般形态结构特点均可显示出来。
染色结果细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色,软骨基质、钙盐颗粒呈深蓝色,粘液呈灰蓝色。
HE Staining
苏木素-伊红染色(HE)【染色原理】苏木素染液中带正电荷的蓝色色精与细胞核中带负电荷的脱氧核糖核苷通过正、负电荷的极性吸附而守成染色;伊红是带负电荷的酸性染料,通过渗透或弥散作用而使组织着色。
【组织固定与切片】4%甲醛固定,石蜡切片厚度4~6μm。
【染色用具】常规染色用具一套:染色皿或染色缸、刻字笔、标签、树脂胶、盖玻片、鸭嘴镊、绸布或纱布。
滴管数支。
【试剂配制】1. Harris苏木素液苏木素2.5g,无水乙醇25ml,钾明矾50g,蒸馏水500ml,氧化汞1.25g,乙酸20ml。
将苏木素溶于乙醇(加热)后加入预先已加热溶解明矾的蒸馏水中,煮沸1~2min,改用小火加热,慢慢加入氧化汞(注意防止产生大量气泡和溶液溅出)再煮沸2min后立即浸于冷水中,冷却后加入乙酸,过滤后使用。
2. 伊红液(1) 水溶性伊红染液:伊红0.5g,蒸馏水100ml。
(2)醇溶性伊红染液:伊红0.5~1g,80%~95%乙醇100ml。
3. 分化液: 盐酸0.5~1ml,80%乙醇100ml。
4. 返蓝液: 氨水1ml,蒸馏水100ml。
5. 各级乙醇、二甲苯【注意事项】1. 石蜡切片在脱蜡前要烘烤使组织与切片粘贴。
烘烤温度50℃,时间30min 或30℃,24h。
2. 脱蜡要彻底,应定期更换脱蜡液。
3. 分化的时间要恰当掌握,可镜下观察着色情况。
4. 透明要充分。
【染色步骤】1. 石蜡切片二甲苯Ⅰ脱蜡10~15min。
2. 二甲苯Ⅱ脱蜡10~15min。
3. 无水乙醇5min。
4. 95%乙醇5min。
5. 80%乙醇5min。
6. 自来水冲洗1min。
7. 蒸馏水洗1min。
8. 苏木素染液5~15min。
9. 自来水冲洗1~5min。
10. 化液分化数秒至数分钟。
11. 自来水冲洗1~3min。
12. 返蓝液返蓝30s~1min。
13. 自来水冲洗。
14. 伊红液5~10min。
15. 自来水冲洗。
16. 80%乙醇脱水30s。
河南赛诺特生物 苏木素-伊红(H-E)染色液产品说明书
苏木素-伊红(H-E)染色液产品说明书【产品名称】通用名称:苏木素-伊红(H-E)染色液英文名称:Hemaxytolin-Eosin(HE)Staining kit【包装规格】500mL/瓶,5瓶/盒【预期用途】用于对石蜡切片和冰冻切片的细胞组织进行染色。
【检验原理】苏木素经过氧化变成酸性染料苏木红,苏木红与三价铝离子结合形成带正电荷的蓝色色精,便可与细胞中带负电荷的脱氧核糖核酸结合。
苏木素染液主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色;伊红Y为酸性胞质性染料,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。
【主要组成成份】每套苏木素-伊红(HE)染色液试剂盒是由高清恒定液(A液)、苏木素染液(B液)、分化液(C液)、返蓝液(D液)、伊红染液(E液)组成。
每套苏木素-伊红(HE)染色液试剂盒的主要成分为:1)高清恒定液(A液),由专用稳定剂等成分组成;2)苏木素染液(B液),主要由苏木素、乙二醇、硫酸铝钾等成分组成;3)分化液(C液),主要由酒石酸等成分组成;4)返蓝液(D液),主要由Tris、氯化钠和防腐剂等成分组成;5)伊红染液(E液),主要由伊红二钠Y和乙醇等成分组成。
【储存条件及有效期】试剂盒应存放于室温(15-30℃),有效期为12个月,在有效期内的已开封试剂使用期限为3个月。
每次用后应及时盖上盖子,以免挥发或变质。
【适用仪器】手动常规染色和全自动染色机染色。
【样本要求】病理组织经取材,福尔马林固定,脱水处理,用石蜡包埋后制成蜡块,用切片机切成2-5μm厚度的组织切片采集到载玻片上(有些特殊类型的组织可能要求不同的切片厚度)。
之后将载玻片放置于烤片机上65℃(±5℃)下烤片10-30分钟,即可染色。
【检验方法】1、二甲苯I、II、III脱蜡各2-4min;2、无水乙醇I、II、III各2min;3、95%乙醇15s;4、75%乙醇15s;5、水洗1min;6、高清恒定液30s-60s;7、苏木素染液3-5min;8、水洗1min;9、分化液3-15s;10、水洗1min;11、返蓝液1-2min;12、水洗1min;13、95%乙醇30-60s;14、伊红染液20-60s;15、无水乙醇I、II、III各2min;16、二甲苯I、II、III各2min。
石蜡切片(苏木精-伊红对染法)
石蜡切片制作(苏木精-伊红对染法)实验原理:石蜡切片是最基本的切片技术,冰冻切片和超薄切片等都是在石蜡切片基础上发展起来的。
苏木素与伊红对比染色法(简称H.E.对染法)是组织切片最常用的染色方法。
这种方法适用范围广泛,对组织细胞的各种成分都可着色,便于全面观察组织构造,而且适用于各种固定液固定的材料,染色后不易褪色可长期保存。
经过HE染色,细胞核被苏木素染成蓝紫色,细胞质被伊红染色呈粉红色。
一、器材及试剂:1. 器材:切片刀,切片机,恒温箱,蜡杯,酒精灯,解剖刀,解剖剪,解剖盘,培养皿,镊子,单面刀片,毛笔,包埋盒,染色缸,盖玻片,载玻片,玻片盘,树胶,树胶瓶,显微镜,温度计,脸盆,水浴锅。
切片机,切片刀,温台,恒温箱,解剖刀,镊子,剪刀,解剖针,单面刀片,小台木,洒精灯,包埋纸盒,染色缸,烧杯,水盆,熔蜡炉,蜡杯。
2.试剂:中性福尔马林固定液、各种浓度的酒精、二甲苯、石蜡、蜂蜡、苏木精染液, 1%伊红酒精溶液,1%盐酸酒精溶液,甘油蛋白粘片剂,中性树胶。
卡诺(Carnoy)固定液,埃利希苏木精染液,1%伊红酒精溶液,1%盐酸乙醇液,各级酒精(30%、50%、70%、80%、90%、95%、100%),二甲苯,甘油蛋白粘片剂,中性树胶。
3. 材料:鼠肝、肾、心肌、骨骼肌或其他组织、大豆或小麦、绿豆、洋葱、大蒜、蚕豆的根、茎、叶等。
二、实验原理:石蜡切片是最基本的切片技术,冰冻切片和超薄切片等都是在石蜡切片基础上发展起来的。
苏木素与伊红对比染色法(简称H.E.对染法)是组织切片最常用的染色方法。
这种方法适用范围广泛,对组织细胞的各种成分都可着色,便于全面观察组织构造,而且适用于各种固定液固定的材料,染色后不易褪色可长期保存。
经过HE染色,细胞核被苏木素染成蓝紫色,细胞质被伊红染色呈粉红色。
三、试剂配法:1.中性甲醛固定液:甲醛(37%-40%,市售,本所购买即为此浓度) 100mL磷酸氢二钠 6.5磷酸二氢钾(钠) 4g双蒸水 900mL 2.苏木精、伊红染色液为碧云天产品3.1%盐酸乙醇液盐酸 1份70%酒精 100份4.甘油蛋白贴片剂:蛋白 50 ml甘油 50 ml水杨酸钠(防腐剂) 1g配制时将鸡蛋一个打破入碗或杯中,去蛋黄留下蛋白,用玻棒调打成雪花状泡沫,然后用粗纸或双层纱布过滤到量筒中,经数小时或一夜,即可滤出透明蛋白液。
(仅供参考)苏木素伊红染色液说明书
苏木素-伊红染色液(H-E)说明书【产品名称】苏木素-伊红染色液(H-E)H&E Staining System【产品编号】HE-500ml,HE-1000ml,HE-2500ml【包装规格】苏木素染色液500ml、1000ml2500ml;伊红染色液500ml、1000ml 2500ml;返蓝染色液500ml、1000ml2500ml。
【预期用途】主要用于对细胞组织进行染色。
【检验原理】苏木素-伊红染色液(H-E)由3部分组成:苏木素染色液、伊红染色液和返蓝染色液。
苏木素氧化后与金属媒染剂作用,可形成不可替代的细胞核颜料。
带有正电荷的苏木素-金属媒染剂复合体,易与细胞核内DNA上带负电荷的磷酸基团结合,因而使细胞核染色形成特定的蓝色。
伊红染色液是一种广泛用于组织学染色中与苏木素染色形成对比的染料(HE染色法)。
此染色法可观察到清晰的细胞结构。
样本中细胞核可经苏木素染色呈蓝色,细胞质经伊红染色呈粉红色。
伊红是一种阴离子染料,可将红细胞染成亮红色,同样也可对其他基本的细胞组分(细胞质,胶原及肌纤维)进行染色。
返蓝染色液为组织学染色试剂,可替代水洗,快速使核染色质和核膜显现蓝色。
由于其坚硬度和碱性,水冲洗后改变苏木素染核后的颜色。
使用BioGnost 返蓝染色液,粘附在玻片上的样本不会发生像使用其他返蓝染色液时发生降解。
【主要组成成分】苏木素:乙二醇、苏木素、碘酸钠、硫酸铝;伊红:伊红、乙醇;返蓝染色液:碳酸锂。
【储存条件及有效期】保证产品包装完整的情况下,储存温度在+15°C和+25°C 之间。
保持储存环境干燥,不要放置于寒冷的环境中,不要冷冻产品,避免直接阳光直射。
产品使用效期为2年,具体效期见标签。
【适用仪器】不适用【样本要求】使用合适的设备仪器收集组织样本,并标记清楚,根据操作说明进行实验。
为避免发生错误,染色及诊断过程最好由具相关专业知识的技术人员操作。
根据标准医疗诊断实验室标准镜检诊断。
he染色苏木素
苏木素-伊红染色液(H-E)说明书【产品名称】苏木素-伊红染色液(H-E)【型号】苏木素染色液分别为:Mayer型、改良Harris型、型改良Lillie-Mayer型;伊红染色液分别为:水溶型、醇溶型。
【包装规格】货号:DH0006单瓶包装规格分别为:100ml、250ml、500ml、5000ml;每套/盒包装规格分别为:2×100ml/盒、2×250ml/盒、2×500ml/盒、2×5000ml/盒。
【预期用途】主要用于对细胞组织进行染色。
【检验原理】苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合主要用于对细胞组织进行染色,简称HE染色,是病理学常规制片中最基本的染色方法,应用极其广泛,苏木素-伊红染色是生物学、组织学、病理学及细胞学等学科必不可少的最基本的染色方法,在病理诊断、教学与科研中广泛应用,具有重要价值,细胞中的细胞核是由酸性物质组成,它与碱性染料(苏木素)的亲和力较强;细胞浆则相反,它所含的碱性物质与酸性染料(伊红)的亲和力较大。
因此细胞或组织切片经苏木素-伊红染色液染色后,细胞核被苏木素染成鲜明的蓝紫色,细胞浆、肌纤维、胶元纤维等呈不同程度的红色,红细胞则呈橙红色。
【主要组成成分】试剂组成主要成分苏木素染色液(改良Lillie-Mayer)或苏木素染色液(改良Harris)或木素染色液(Mayer) 苏木色精伊红染色液(水溶)或伊红染色液(醇溶) 伊红【储存条件及有效期】5℃~35℃保存,原包装未开封染色液的有效期为18个月,在有效期内的已开封染色建议在开封后6个月内使用完,每次用后及时拧紧瓶盖,以免挥发或变质。
【样本要求】涂片和切片必须充分固定,石蜡切片要充分脱蜡。
【检验方法】l、石蜡切片于二甲苯I、II中脱蜡;2、经无水乙醇和95%乙醇,经8O%乙醇,自来水冲洗;3、苏木素染色液(改良Lillie-Mayer或改良Harris)染色,自来水洗;或苏木素染色液(Mayer)染色;4、苏木素染色后用l%盐酸乙醇溶液分化数秒(l%盐酸乙醇溶液配制:99m1 75%乙醇加1ml浓盐酸);若用苏木素染色液(Mayer)染色后则不需分化;5、自来水冲洗返蓝;亦可用碳酸锂水溶液返蓝,自来水洗;6、入伊红染色液(水溶)染色,稍洗;若用伊红染液(醇溶),切片应先经80%乙醇脱水后,再入伊红染液(醇溶)染色(忌水洗);7、95%乙醇I、II中调色;8、无水乙醇I、II中脱水,二甲苯I、II中透明;9、封片胶封片,镜检。
苏木素-伊红染色切片褪色的解决办法
( 稿 日期 :0 0 0 — 2 收 2 1- 6 0 )
有机溶剂, 与水互不相溶, 因此需要借助乙醇使组织切片从无
水状态进入到 乙醇 中进行染色反应I ④放人 10 。 】 。 0 %乙醇 Ⅱ 5
mn ⑤放人 9%乙醇 5mn再放入 8% 7%7醇各 5mn i。 5 i, 0 、0 - - , i,
水水洗是洗去未与组织 结合 的染液 ,将切片表面的浮色洗干
1~ 4 , 22 盖玻片 自 h 动脱落。②将带有组织的盖玻片用镊子整
齐地夹放在染 色架 , 泡入二 甲苯 Ⅱ溶液 以浸过盖玻 片为宜 , 时
间 3 ~ 5m n 洗净黏附在组织上的 中性树胶 吸水 纸吸干 O 4 i, 用 液体 。③放入 10 0 %乙醇 I n 由于二 甲苯属于非水性 的 5mi,
不易脱落 , 将其浸泡在二甲苯 I 溶液时 , 放人 3 ~ O℃烤箱内 74
陈旧褪色的石蜡切 片重染方法 ,通常都采 用酸性高锰 酸
钾氧化 、 酸氧化 漂白还原 法日 1 %冰醋酸1 高锰酸钾 、 草 和 0 3 ] , 草 酸氧化漂 白还原法会使组织略带 酸性 , 破坏组 织正 常结构 , 形 成空洞和脱落。1 %冰醋酸脱色法通常需要 2 3b作用 时间 0 - , 长, 不易掌握 。 笔者 经过 反复试 验证 明 H E染色 ,%盐 酸 乙醇分 色 和 1 1 %氨水 溶液返蓝 , 重染着色效 果理想 , 苏木 素染 色后的 自来
3 章克萍 , 龙飞. 组织苏木素 一 伊红染 色的石蜡切片褪色后 还原 对 比染色 . 实用临床医学 , 0 8 1 9 : 6 2 0 , ( ) 1.
来水流水 冲洗 1~ 0 i。 02 n ⑩蒸馏水过洗 12 。 m ⑩放入 8%、 s 0 7%乙醇各 5 i ⑩ 0 % 0 n m 。 . 伊红乙醇溶液 35 i 5  ̄ n m 伊红乙醇
形态学技能-苏木素-伊红染色
2.二甲苯:①染色前:溶解切片中的石蜡,以使染液可以进入细胞和组织,因此,石蜡的存在妨碍水和染料进入细胞;②染色后:透明切片的作用,以利于光线透过,否则组织切片透明度达不到光学显微镜观察时透光度的要求,在显微镜下看不清细胞和组织结构。
苏木素-伊红(HE)染色操作
【试剂和材料】
已烤片的石蜡切片、二甲苯、无水乙醇、90%乙醇、70%乙醇、Ehrlich苏木素颜色液、0.5%盐酸70%酒精分色液、稀氨水返兰液、1%伊红染色液、中性树胶、自来水、蒸馏水
【耗材和设备】
染缸、盖玻片、玻璃棒、显微镜
【具体步骤】
1.实验准备:按步骤顺序摆放好染缸,准备计时器用主要依靠盐酸在水中容易电离出氢离子,用来改变组织的电荷性质,使过染和吸附在组织表面的染料从组织中及表面脱落下来,从而达到分化的目的。根据盐酸的性质,盐酸在水中电离出的氢离子要比在乙醇中电离出的氢离子多,我们认为传统的盐酸乙醇用于分化乙醇在这里并不起作用,相反,由于乙醇的存在致使切片更易脱落,因为乙醇具有脱水及使组织收缩的作用,分化后水洗时组织又发生吸水、膨胀,而造成脱片。为此,改用盐酸水溶液进行分化,可避免脱片现象的发生。
分化和返兰的作用
1.分化作用:苏木素染色后,用水洗去为结合在切片中染液,但是对细胞核中结合过多的染料和细胞浆中吸附的染料必须用酸性分化液脱去,保证细胞核和细胞浆染色分明。
2.返兰作用:分化之后苏木精在酸性条件下处红色离子状态,呈红色,若在碱性条件下处于蓝色离子状态,呈蓝色,所以在酸性溶液中分化之后用水洗去酸而中止分化,后用弱碱水(稀氨水)使细胞核中苏木素呈蓝色,呈返兰作用。
HE染色试验技术及注意事项
染色:
(1)苏木素染色
苏木素染色太浅,细胞核 与细胞质颜色对比度差。
原因:染色时间短;苏木 素过度氧化,失去染色能 力;分化时间过长。
对策:切片重新染色。
原因:与图2相反,染色液
时间过长、切片太厚、分化 步骤时间太短。
细胞核过染, 核膜、核仁等不清晰, 细胞质( 尤其是皮肤上皮细胞) 含有大量的 细胞核染色液苏木精, 导致细胞核与细胞 质比例失调。
有完全脱水, 导致二甲苯透明中 性树胶封固后残留大量水分。也可 能是封片的时候出现的气泡。
对策:移去盖玻片, 用二甲苯溶
解封固剂如中性树胶。将切片置入 新鲜的无水乙醇换几道。待切片重 新脱水完全后,用新二甲苯透明, 中性树胶封固。所有用于脱水和透 明的液体,在使用一定时间以后, 应即时更换。将切片浸如二甲苯中, 重新封片。
几种常见的染色问题
脱蜡:
切片中白色的区域脱蜡不彻底,染色液由 于石蜡斑点的残留而不能渗透着色。
原因:①烤( 烘) 片温度
太低,脱蜡前没有充分烤 ( 烘) 干。 ②二甲苯脱蜡时 间不足, 或二甲苯使用过 久,造成脱蜡不尽。
对策:①用无水乙醇去
掉玻璃片上的水分,重新 二甲苯脱去石蜡。 ②切 片需退回到脱蜡步骤,延 长脱蜡时间,或跟换二甲 苯,驼色、漂白、重新染 色。
(仅供参考)苏木素伊红染色液说明书
苏木素-伊红染色液(H-E)说明书【产品名称】苏木素-伊红染色液(H-E)H&E Staining System【产品编号】HE-500ml,HE-1000ml,HE-2500ml【包装规格】苏木素染色液500ml、1000ml2500ml;伊红染色液500ml、1000ml 2500ml;返蓝染色液500ml、1000ml2500ml。
【预期用途】主要用于对细胞组织进行染色。
【检验原理】苏木素-伊红染色液(H-E)由3部分组成:苏木素染色液、伊红染色液和返蓝染色液。
苏木素氧化后与金属媒染剂作用,可形成不可替代的细胞核颜料。
带有正电荷的苏木素-金属媒染剂复合体,易与细胞核内DNA上带负电荷的磷酸基团结合,因而使细胞核染色形成特定的蓝色。
伊红染色液是一种广泛用于组织学染色中与苏木素染色形成对比的染料(HE染色法)。
此染色法可观察到清晰的细胞结构。
样本中细胞核可经苏木素染色呈蓝色,细胞质经伊红染色呈粉红色。
伊红是一种阴离子染料,可将红细胞染成亮红色,同样也可对其他基本的细胞组分(细胞质,胶原及肌纤维)进行染色。
返蓝染色液为组织学染色试剂,可替代水洗,快速使核染色质和核膜显现蓝色。
由于其坚硬度和碱性,水冲洗后改变苏木素染核后的颜色。
使用BioGnost 返蓝染色液,粘附在玻片上的样本不会发生像使用其他返蓝染色液时发生降解。
【主要组成成分】苏木素:乙二醇、苏木素、碘酸钠、硫酸铝;伊红:伊红、乙醇;返蓝染色液:碳酸锂。
【储存条件及有效期】保证产品包装完整的情况下,储存温度在+15°C和+25°C 之间。
保持储存环境干燥,不要放置于寒冷的环境中,不要冷冻产品,避免直接阳光直射。
产品使用效期为2年,具体效期见标签。
【适用仪器】不适用【样本要求】使用合适的设备仪器收集组织样本,并标记清楚,根据操作说明进行实验。
为避免发生错误,染色及诊断过程最好由具相关专业知识的技术人员操作。
根据标准医疗诊断实验室标准镜检诊断。
苏木素-伊红染色试剂盒使用说明书
注意:当跳过此步骤时,不使用二甲苯透明,酒精将会保存于组织切片上,导致伊红从切片 上流出。
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杭州昊鑫生物科技股份有限公司
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13 封片:中性树胶封片,自然风干或烤干,显微镜观察。
注意事项 HE 染色是一个对经验要求非常高的染色,上述实验流程中所提供的染色时间都是参考时间, 要根据实验原理,结合具体情况而定。
染色较弱是由于:1)组织切片过薄;2)染色时间不足;3)随后 95%酒精分化过度。 染色过度是由于:1)染液浓度较高(可能是由于过度蒸发);2)组织切片过厚;3)染色时 间过长;4)随后 95%酒精分化不足。
伊红染色未分化(一种颜色)是由于: 1)固定不彻底; 2)过度染色,a)染色时间过长;b)染液浓度过高。
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4. 水洗:苏木素染色后,用水洗组织是非常重要的。这一步以及随后的水洗,可将多余的 染料,媒染剂等去除。适当的漂洗可以去除表面金属光泽,金属光泽可阻止苏木素的染色。 注意:跳过此步,将产生不好的结果,例如沉淀的形成,染液的稀释,表面金属光泽的存在。 5. 酸酒精:酸酒精分色剂 3~5sec。在苏木素染色方 注意:如果没有此步骤,组织切片将变为暗紫色。嗜酸结构,例如,胶原,将不会呈现明亮 的粉红色。组织结构之间将很难区分。很难对切片做出正确的判断。 分色过度可能是由于:1)酸浓度过高;2)脱色时间过长等。分色不足是由于:1)酸浓度过低; 2)脱色时间不足;3)在切片上有多余的蛋白或者明胶等。
结果 细胞核染为蓝色;细胞质染为红色。
温馨提示 1. 为了您的自身安全,使用试剂前,请做好防护,如穿实验服,戴手套等。 2. 试剂应保存于阴凉、干燥、通风良好的环境中。
储存温度 避光储存于室温。
包装清单 货号
HCY112A HCY112B
伊红染液(Eosin staining solution)使用说明书
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1 伊红染液
伊红染液(Eosin staining solution )
为了正确区分胞内结构,伊红常常用于苏木素染色后的复染。
伊红是酸性染料,可染细胞质,尤其是线粒体、分泌颗粒和胶原。
它可以区分细胞内不同的细胞器以及不同的结缔组织。
实验流程
1.样品处理
1)对于石蜡切片
二甲苯中脱蜡2×3~5min。
无水乙醇5 min 、90%乙醇2 min 、70%乙醇2 min 、PBS 漂洗2 min 。
2)对于冰冻切片
PBS 漂洗2 min 。
3)对于培养细胞
用4%多聚甲醛固定10 min 以上;PBS 洗涤2×2 min 。
2. 伊红染色
伊红复染30~60sec ,可根据染色结果和要求调整染色时间。
注意:使用伊红复染组织切片的失败,将导致组织切片的低分化。
染色较弱是由于:1)组织切片过薄;2)染色时间不足;3)随后95%酒精分化过度。
染色过度是由于:1)染液浓度较高(可能是由于过度蒸发);2)组织切片过厚;3)染色时间过长;4)随后95%酒精分化不足。
结果
细胞质:红色。
温馨提示
1. 为了您的自身安全,使用试剂前,请做好防护,如穿实验服,戴手套等。
2. 试剂应保存于阴凉、干燥、通风良好的环境中。
储存温度
避光储存于室温。
包装清单 货号
品名 包装 HCY106
Eosin staining solution 100mL 说明书 1份。
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苏木素-伊红染色液(H-E)说明书
【产品名称】
苏木素-伊红染色液(H-E)
【型号】
苏木素染色液分别为:Mayer型、改良Harris型、型改良Lillie-Mayer型;
伊红染色液分别为:水溶型、醇溶型。
【包装规格】
货号:DH0006
单瓶包装规格分别为:100ml、250ml、500ml、5000ml;
每套/盒包装规格分别为:2×100ml/盒、2×250ml/盒、2×500ml/盒、2×5000ml/盒。
【预期用途】
主要用于对细胞组织进行染色。
【检验原理】
苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合主要用于对细胞组织进行染色,简称HE染色,是病理学常规制片中最基本的染色方法,应用极其广泛,苏木素-伊红染色是生物学、组织学、病理学及细胞学等学科必不可少的最基本的染色方法,在病理诊断、教学与科研中广泛应用,具有重要价值,细胞中的细胞核是由酸性物质组成,它与碱性染料(苏木素)的亲和力较强;细胞浆则相反,它所含的碱性物质与酸性染料(伊红)的亲和力较大。
因此细胞或组织切片经苏木素-伊红染色液染色后,细胞核被苏木素染成鲜明的蓝紫色,细胞浆、肌纤维、胶元纤维等呈不同程度的红色,红细胞则呈橙红色。
【主要组成成分】
试剂组成主要成分苏木素染色液(改良Lillie-Mayer)或苏木素染色液(改良Harris)或木素染色液(Mayer) 苏木色精伊红染色液(水溶)或伊红染色液(醇溶) 伊红
【储存条件及有效期】
5℃~35℃保存,原包装未开封染色液的有效期为18个月,在有效期内的已开封染色建议在开封后6个月内使用完,每次用后及时拧紧瓶盖,以免挥发或变质。
【样本要求】
涂片和切片必须充分固定,石蜡切片要充分脱蜡。
【检验方法】
l、石蜡切片于二甲苯I、II中脱蜡;
2、经无水乙醇和95%乙醇,经8O%乙醇,自来水冲洗;
3、苏木素染色液(改良Lillie-Mayer或改良Harris)染色,自来水洗;或苏木素染色液(Mayer)染色;
4、苏木素染色后用l%盐酸乙醇溶液分化数秒(l%盐酸乙醇溶液配制:99m1 75%乙醇加1ml浓盐酸);若用苏木素染色液(Mayer)染色后则不需分化;
5、自来水冲洗返蓝;亦可用碳酸锂水溶液返蓝,自来水洗;
6、入伊红染色液(水溶)染色,稍洗;若用伊红染液(醇溶),切片应先经80%乙醇脱水后,再入伊红染液(醇溶)染色(忌水洗);
7、95%乙醇I、II中调色;
8、无水乙醇I、II中脱水,二甲苯I、II中透明;
9、封片胶封片,镜检。
【检验方法的局限性】
仅供细胞和组织形态学观察染色使用。
【注意事项】
1、温度较低时苏木素染色液不易着色,可适当延长染色时间。
2、苏木素染色液(改良Lillie-Mayer)染色时,亦可考虑不用分化,但应相应缩短苏木素染色时间。
3、苏木素染色液(改良Lillie-Mayer)、苏木素(改良Harris)不含汞等有毒物质,其着色强度可能会因使用日期不同而稍有差异,故开封后可先试染,根据试染结果稍调整苏木素染色时间以保证较佳染色效果。
4、盐酸乙醇分化时间应根据染色结果的具体情况而定。
5、碳酸锂水溶液的配方:取本产品附送的碳酸锂粉末一包,完全溶解于1000ml蒸馏水中,即为碳酸锂水溶液。
6、本产品仅用于体外诊断,应由专业人士使用及进行结果的判读。
7、使用前应详细阅读说明书,并做好个人卫生防护,在有效期内使用,生产日期、生产批号和失效日期见包装。
8、用后应按医院或环保部门要求处置废弃物。
【基本信息】
备案人/生产企业名称:安徽雷根生物技术有限公司
住所:淮北凤凰山经济开发区凤冠路三期标准化厂房三号厂房。