USP微生物试验说明

美國藥典微生物試驗說明Essentials of USP Microbiological Testing

研討會大綱

I.基礎微生物學

II.良好微生物實驗室規範

III.藥典協同之改變

IV.IV.滅菌滅菌滅菌與無菌保證與無菌保證

V.微生物方法之確效

微生物學

研究微小生命形式的生物學分支研究微小生命形式的生物學分支。。典型的微小生命形式是單細胞的生命形式的微小生命形式是單細胞的生命形式，，也包括非常少也包括非常少量量的多細胞生物體 新陳代謝基本需求

能量(如光、硫、一氧化碳或氨一氧化碳或氨))

碳、氮、鈣、磷、硫、鎂、鉀和鈉 水(即使真菌也需要0.6 Aw 以上的游以上的游離離水)

分類學

生物環境多樣性

嗜低溫菌嗜中溫菌嗜高溫菌

生物環境多樣性

嗜酸性菌嗜中性菌嗜鹼性菌

依DNA在細胞中的情況可將細胞分為

兩大類：

真核細胞Eukaryotic cells

原核細胞Prokaryotic cells

原核生物Prokaryotic cells

大部分細菌對人體無害

如: 乳酸菌

但, 也有微生物會致病

細菌(分2界) 古細菌 真細菌

原核生物革原核生物革蘭蘭氏分類氏分類法法

Hans C.J. Gram –丹麥細菌學家(1853-1938).

發現發現了了細胞學上的染色和染色技術細胞學上的染色和染色技術（（革蘭氏染色染色），），），用於區分細菌的分用於區分細菌的分用於區分細菌的分類類學組群學組群。。

脂多糖(相對耐熱)

如果進入人體，能導致發燒、白血球減少、腹

瀉、休克（熱原Pyrogen）(內毒素Endotoxin)

革蘭氏陽性結構革蘭氏陰性結構

什麼是芽孢?

在惡劣惡劣的環境條件下產生的有再生能的環境條件下產生的有再生能的環境條件下產生的有再生能力力的細胞或細胞群的細胞或細胞群。。

特徵特徵：：

–厚壁–耐惡劣惡劣環境環境

–非常緩慢的代謝速非常緩慢的代謝速度度

分4界

原生動物 動物

植物

真菌

真菌-特徵

皆為化學異異營菌

皆為化學

具強大的酵素 (腐生或寄生

腐生或寄生) ) ) 具強大的酵素

pH5））

酸性的生活環境（（pH5 比細菌

比細菌更更酸性的生活環境

高鹽、、高糖環境中生長

高鹽

黴菌和蕈是多細胞

酵母是單細胞

新陳代謝Metabolism 依據分解代謝是否能夠使用O2

為什麼了解微生物對新陳代謝的

需求很重要？

為的是想培養微生物生長

更為的是防止微生物生長

USP微生物相關

務必遵守章節

<51> 防腐效力/Antimicrobial Preservatives –Effectiveness

耐受力力測試

<55> 生物指示劑–耐受

Biological Indicators –Resistance Performance Tests

微生物計數數試驗

非無菌產品的微生物檢驗：：微生物計

<61> 非無菌產品的微生物檢驗

Microbiological Examination of Nonsterile Products:

Microbial Enumeration Tests

<62> 特定菌的微生物檢查/ Microbiological Procedures

for Absence of Specified Microorganisms

<71> 無菌試驗/ Sterility Tests

<85> 細菌內毒素試驗Bacterial Endotoxins Test

USP微生物相關章節

建議遵循

<1035> 滅菌生物指示劑

<1072> 消毒劑與殺菌劑

<1111> 非無菌產品的微生物評估

<1112> 水活性應用

<1116> 清淨室和其他管制環境的微生物評估

<1117> 微生物實驗室規範 <1207> 無菌產品包裝–完整性評估 <1209> 滅菌–化學和物理化學指示劑，及綜合指示劑

<1211> 滅菌與無菌保證

<1222> 最終滅菌藥品–參數放行 <1223> 微生物方法確效

<1227> 藥物的微生物回收率確效 <1231> 製藥用水

<2021> 微生物計數試驗–營養和膳食補充劑

<2022> 特定菌的微生物檢查–營養和膳食補充劑

<2023> 非無菌營養和膳食補充劑的微生物評估

EP & USP & JP 藥典方法的國際協合

International Harmonization of Pharmacopoeia

時限

–現行的EP 只維持到2008年12月31日

–USP 將維持至2009年4月

影響

行適用性試驗

並需重新進行

–各藥廠將必需提早因應,並需重新進

批產品來來測試其一致性.

( Suitability Test),以至少3 批產品

此協合後的方法不不僅在產品( non-sterile)的稀釋液

此協合後的方法

及預試驗,生長試驗上有改變,在部份培養基的組成

有所改變,甚至新增一些檢驗項目與培養基,在有些

品管菌株及接種量量都有改變

品管菌株及接種