饲料学课件实验八、饲料中磷含量的测定
饲料中磷的测定
饲料中磷的测定一、测定目的本测定方法主要用于测定饲料中的磷含量，帮助我们了解饲料中磷的含量，以便为畜禽提供合理的营养配比，同时避免饲料中磷的过量使用导致的环境污染。
二、测定原理本实验采用分光光度法测定饲料中的磷含量。
在酸性条件下，正磷酸盐可被钼酸铵反应生成一种带有颜色的络合物，其颜色深浅与正磷酸盐浓度成正比。
因此，通过测定该络合物的吸光度，可以计算出饲料中磷的含量。
三、样品制备1.选取具有代表性的饲料样品，粉碎后过40目筛。
2.取适量样品于干燥的称量瓶中，准确称重。
3.将称好的样品放入消化管中，加入适量浓硝酸和硫酸，进行消化。
4.消化完全后，将消化液转移至容量瓶中，定容至刻度。
5.取适量消化液进行实验。
四、实验步骤1.对照品制备：取0.5ml磷酸盐标准液加入试管中，再加入1ml 钼酸铵试剂，充分混匀，静置10分钟。
2.样品制备：取5ml消化液加入试管中，再加入1ml钼酸铵试剂，充分混匀，静置10分钟。
3.分光光度计测定：在分光光度计上分别测定对照品和样品的吸光度。
4.空白试验：取5ml去离子水代替样品，按照样品制备步骤进行处理，测定空白吸光度。
五、结果计算1.计算磷含量（mg/kg）：(样品吸光度-空白吸光度)/对照品吸光度×标准品浓度×样品称样量/1000。
2.计算相对标准偏差（RSD）以评估测定的精密度。
六、磷在饲料中的作用磷是动物体内必需的营养元素之一，是骨骼和牙齿的重要组成成分，并参与能量代谢和蛋白质合成等过程。
适量的磷摄入对动物的生长、发育和健康至关重要。
然而，过量的磷摄入可能导致畜禽排泄物中磷的流失，对环境造成污染。
因此，准确测定饲料中的磷含量对于保证动物营养需求的同时防止环境污染具有重要意义。
七、磷在畜禽营养中的重要性在畜禽营养中，磷具有以下重要作用：1.维持骨骼健康：磷是骨骼和牙齿的主要成分，参与骨骼和牙齿的生长发育和维护。
缺乏磷会导致骨骼发育不良和骨质疏松等问题。
饲料中的磷测定
精心整理
饲料中总磷的测定方法
——GB/T6437-2002饲料中总磷的测定分光光度法
1试样的分解
1.1干法（不适用于含磷酸氢钙[Ca(H 2PO 4)2]的饲料）
称取2g ～5g 试料(精确至0.0002g)于坩埚中，在电炉上小心炭化，再放入高温炉，在550℃下灼烧3h(10min ，1.2 稍冷，，1.3 后转入2 显色剂在3 准确移取试料分解液1.0mL ～10.0mL(含磷量50μg ～750μg)于50mL 容量瓶中，加入钒钼酸铵显色剂10mL ，用水稀释到刻度，摇匀，常温下放置10min 以上，用1cm 比色皿在400nm 波长下测定试样分解液的吸光度，在工作曲线上查得试样分解液的磷含量。
4结果计算
测定结果按式(1)计算：
X=m1V/104V1m (1)
式中：X ——以质量分数表示的磷含量，%;
精心整理
m1——由工作曲线查得试样分解液磷含量，μg; V——试样分解液的总体积，mL;
m——试样的质量，g;
V1——试样测定的移取试样分解液体积，mL;
精密度
含磷量0.5%以上，允许相对偏差10%;
磷量在0.5%以是，允许相对偏差3%。
饲料中的磷测定
饲料中的磷测定文稿归稿存档编号：[KKUY-KKIO69-OTM243-OLUI129-G00I-FDQS58-饲料中总磷的测定方法——GB/T 6437-2002 饲料中总磷的测定分光光度法1 试样的分解1.1 干法（不适用于含磷酸氢钙[Ca(H2PO4)2]的饲料）称取2g～5g 试料(精确至0.0002g)于坩埚中，在电炉上小心炭化，再放入高温炉，在550℃下灼烧3h(或测定粗灰分后连续进行)，取出冷却，加入10mL 盐酸和硝酸数滴，小心煮沸约10min，冷却后转入，100mL 容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，为试样分解液。
1.2 湿法称取0.5g～5g 试料(精确于0.0002g)于凯氏烧瓶中，加入硝酸30mL，小心加热煮沸至烟逸尽，稍冷，加入高氯酸10mL，继续加热至高氯酸冒白烟(不得蒸干)，溶液基本无色，冷却，加水30mL，加热煮沸，冷却后，用水转移水100mL 容量瓶中并稀释至刻度，摇匀，为试料分解液。
1.3 盐酸溶解法(适于微量元素顶混料)称取0.2g～1g 试料(精确至0..0002g)于100mL 烧杯缓缓中入盐酸10mL，使其全部溶解，冷却后转入100mL 容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，为试料分解液。
2 工作曲线准确移取磷标准液0.0、1.0、2.0、4.0、8.0、16.0mL 于50mL 容量瓶中，各加10mL 钒钼酸铵显色剂，用水稀释到刻度，摇匀，常温下放置10min 以上，以0.0mL 溶液为参比，用1cm 比色皿，在400nm波长下用分光光度计测各溶液的吸光度，以磷含量为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制工作曲线。
3 试料的测定准确移取试料分解液1.0mL～10.0mL(含磷量50μg～750μg)于50mL 容量瓶中，加入钒钼酸铵显色剂10mL，用水稀释到刻度，摇匀，常温下放置10min 以上，用1cm 比色皿在400nm 波长下测定试样分解液的吸光度，在工作曲线上查得试样分解液的磷含量。
饲料中总磷的测定
饲料中总磷含量是评价饲料品质的重要指标之一，总磷含量过低会影响动物的生长和健康， 过高则会造成环境污染。
测定结果可以反映饲料中总磷的来源和种类，从而评估饲料中磷的生物利用率和安全性。
总磷含量的测定结果可以作为饲料配方调整的依据，有助于提高饲料品质和降低生产成本。
通过测定饲料中总磷的含量，可以评估饲料中其他营养成分的含量是否合理，从而全面评价 饲料品质。
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CONTENTS
PART ONE
促进动物骨骼发育
维持动物正常生理功能
提高动物抵抗力
促进动物生长和生产性能 提升
磷是动物必需的矿物 质元素之一，对动物 的骨骼、牙齿等健康 状况有重要影响。
总磷含量不足或过高 都会影响饲料的营养 价值，进而影响动物 的生长和生产性能。
通过总磷的测定，可监测饲料 加工过程中营养素的损失情况，
优化加工工艺。
在饲料品质评定时，总磷的测 定是评价饲料质量的重要指标
之一。
饲料中总磷的测定是科研中重要的实验手段，用于研究饲料中磷的含量和分布。
总磷的测定结果可以用于评估饲料中磷的利用率和营养价值，为动物生长和繁殖提供科学依据。
在科研中，总磷的测定还可以用于研究饲料加工过程中磷的损失和变化，以优化饲料加工工艺。
样品采集：按照规定方法采集具有代表性的样品，保证样品的真实性和可靠性。
样品处理：将样品进行粉碎、混合等处理，以便于后续的测定。 测定方法：采用分光光度法或滴定法等规定的测定方法进行总磷的测定。 结果处理：对测定结果进行数据处理和分析，确保结果的准确性和可靠性。
测定方法的准确性：采用标准方法 进行测定，确保结果的可靠性。
饲料中磷的测定.
饲料中植酸磷的测定
五、测定步骤 1.磷标准曲线的绘制
准确吸取100μg/mL磷的标准溶液0，0.5，1.0，2.0，3.0 ，4.0，5.0，6.0，7.0 mL，分别盛入50 mL容量瓶中，用水 稀释至20mL左右，各加硝酸溶液(1+1，V+V) 4mL，显色剂10 mL，再用水稀释至刻度，混匀。此时系列浓度为每50 mL中分 别含磷量为：0，50，100，200，300，400，500，600，700 µg，静置20 min，在分光光度计上在波长400 nm处，用10mm 比色池，测定其吸光度。最后，以50mL中磷含量（µg）为横 坐标，用相应的吸光度为纵坐标，绘制出磷的标准曲线。
饲料中总磷的测定 ---分光光度法
饲料中总磷的测定
一、适用范围 饲料原料（磷酸盐以外）及饲料产品中总磷的测定。 二、方法原理 破坏试样中的有机物，使磷游离出来，在酸性溶液中用 钒钼酸铵显色，生成黄色的(NH4)3PO4VO3·16MoO3，在波长 420nm下进行比色测定。 三、试剂 钒钼酸铵显色的配制：称取偏钒酸铵1.25g，加水200ml加 热溶解，冷却后再加入250ml硝酸。另取钼酸铵25g，加水 400ml加热溶解，冷却后将两种溶液混合，用水定容至1000 ml，避光保存。生成沉淀不能再用。
饲料中总磷的测定 3.计算公式与允差m X(%)=1 Nhomakorabea×V
m ×V1 ×104
磷含量0.5%以下，允许相对偏差10%； 磷含量0.5%以上，允许相对偏差3%
饲料中植酸磷的测定
---三氯乙酸法，TCA法
饲料中植酸磷的测定
一、适用范围 本方法适用于配合饲料、浓缩饲料和单一饲料 中植酸磷的测定。 二、方法原理 用30 g/L三氯乙酸作浸提液提取植酸盐，然后 加入铁盐使植酸盐生成植酸铁沉淀，与氢氧化钠反 应转化为可溶性植酸钠和棕色氢氧化铁沉淀，用钼 黄法直接测出植酸磷含量。
饲料中磷的测定结果分析
饲料中磷的测定结果分析
饲料中磷的测定是动物营养学中一个非常重要的指标。
下面是对饲料中磷的测定结果分析：
1. 饲料中磷含量低，可能导致动物磷缺乏，对生长发育和免疫力产生不良影响。
2. 饲料中磷含量过高，会增加饲料成本，也可能对环境造成污染。
此外，高磷饲料也会导致动物代谢异常增加，从而影响食品的质量和安全性。
3. 饲料中磷含量的测定可以通过测量饲料样品中磷元素的含量来实现。
一般情况下，磷元素的含量可以通过原子吸收光谱法、原子荧光光谱法和分光光度法等技术来检测。
4. 饲料中磷含量的测定结果应当与国家的相关标准和规定进行比较，以判断饲料中磷的含量是否符合国家规定的安全标准。
饲料中矿物元素分析-磷的测定
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一、饲料中总磷量的测定（钼黄比色法）
三、测定步骤
（2）试样的测定 准确移取试样分解液1～10 ml于50 ml容量瓶，加入 钒钼酸铵显色试剂10 ml，用水稀释至刻度，摇匀，放 置10 min。以0 ml溶液为参比，用10 mm比色池，在 400 nm波长下，用分光光度计测得试样分解液得吸光 度。用标准曲线查得试样分解液的含磷量。
1 盐酸 1＋1（V1＋V2） 2 浓硝酸 3 高氯酸 4 钒钼酸铵显色剂（避光保存，如生成沉淀则不能继续使用） 5 磷标准溶液（50μg/ml，用磷酸二氢钾配制，溶液中加入了3ml浓 硝酸）
2021/3/1
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一、饲料中总磷量的测定（钼黄比色法）
三、测定步骤
（1）试样的分解
A、干法（不适用于含磷酸氢钙的饲料） B、湿法 C、盐酸溶解法（适用于微量元素预混料）
饲料中矿物元素分析
— 饲料中磷的分析测定
黎观红 江西农业大学动物科技学院
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饲料中磷的测定
饲料中总磷的测定（钼黄比色法） 饲料中植酸磷的测定（三氯乙酸）
2021/3/1
2Leabharlann 一、饲料中总磷量的测定（钼黄比色法）
一、原理
先将试样中有机物破坏，使磷游离出来，在酸性溶 液中，用钒钼酸铵处理，生成黄色络合物—（NH4） 3PO4•NH4VO3•16MoO3（磷－钒－钼酸复合体），在波 长400nm下进行比色测定。
与测定钙的方法一致，只是盐酸溶液浓度不一样。
有研究认为，用测定钙后的分解液可直接用于测定饲料总磷。
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一、饲料中总磷量的测定（钼黄比色法）
三、测定步骤
（1）试样的分解
饲料中磷含量的测定
饲料中磷含量的测定
饲料中磷含量的测定是农牧业生产中非常重要的一项工作。
磷作为动物生长发育、生殖和骨骼形成的重要元素之一，对动物的健康和生产性能有着关键性的影响。
为了确保饲料中磷含量达到合适的水平，必须对其进行精确的测定。
下面将介绍两种常见的磷含量测定方法。
一种常用的方法是重量法。
首先，需要将一定量的饲料样品经过干燥和研磨处理，以使其充分均匀地混合。
然后，取一定质量的样品并加入一定体积的稀酸溶液，使其中的磷溶解。
将混合溶液过滤，得到含有磷的滤液。
滤液中的磷会和添加的显色剂发生反应，生成显色物质。
利用比色法，可以通过测量显色物质的吸光度，间接测定出饲料中磷的含量。
这种方法简单易行，但操作过程中应避免产生误差。
另一种常用的方法是光度法或者火焰光度法。
这种方法利用磷化物在高温下与酒精燃烧生成发光物质，再通过光电测量的方法进行分析。
具体操作过程是将经过干燥的样品与富含燃烧助剂的燃烧母液混合，然后将该混合溶液喷入火焰中。
磷化物在高温下燃烧产生的发光强度与磷的含量成正比，通过光电测量设备记录下发光强度，就可以间接计算出饲料中的磷含量。
这种方法具有快速、准确的特点，但需要一定的仪器设备和专业知识。
无论采用何种方法进行饲料中磷含量的测定，都需要注意样品的选取和处理、实验条件的控制和数据的准确记录与分析。
此外，还要注意实验过程中的安全操作，避免对人员和环境造成危害。
磷是饲料中的重要营养元素之一，对于动物的生长和生产性能有着重要的影响。
通过准确测定饲料中的磷含量，可以为农牧业生产提供科学的依据，保障动物的健康和生产效益。
饲料中磷的测定
总磷测定的原理
适用范围:饲料原料，饲料产品 ● 磷酸氢钙、磷酸二氢钙中总磷的测定不能用比色法测定，用总磷数据判定饲料中磷酸氢钙的添加
量会产生很大偏差(氢钙10kg/t) ● 总磷测定原理：
饲料中磷的测定
根据GB/T6437-2018
饲料中总磷测定的意义
● 在饲料的矿物质元素中，磷的含量是饲料的基本营养学指标。磷摄入量不足,会弓|起幼龄 动物患佝偻症，成年动物患软骨症，同时还会出现食欲不良，产奶量降低,全身虚弱，母 畜发情异常等症状;但如果磷摄入过量,常常又会破坏畜禽生长的正常代谢过程及必要的生 产过程。
将试样中的有机物破坏,使磷元素游离出来,在酸性溶液中,用钒钼酸铵处理,生成黄色的络合物 (NH4)3PO4·NH4VO3·16M0O3 , 在波长400nm下进行比色测定。
● 分光光度计原理: 是利用物质的对不同波长的光呈现选择性吸收现象来进行物质的定性和定量分析。
饲料中总磷测定的注意事项
● 配置的磷标准溶液（50ug/ul）和移取10ml钒钼酸铵要准确。 ● 钒钼酸铵显色剂应避光保存，生成沉淀将无法使用。 ● 曲线经过测定后.要检查其相关系数的大小。一般R2>0.999,才能被利用,而且R2→1,线性越好。 ● 所测样品的吸光度值要大于曲线系列上第二个点的光度值，而小于最后一个点的吸光度值,越靠近
中间越好，测定的值越准。 即：当制作标准曲线时，吸取磷标准液0、1、2、5、10、15ml时， 吸光度值在0.2—0.8时测定样品更加准确。5ml对应的吸光度更加灵敏，15ml对应的吸光度＞1，
应当弃去。饲料中总磷测定的源自意事项在样品测定过程中，可以调整待测样品的稀释倍数，以达到准确测定的效果。（浓缩料，原料） 结果准确性：总磷含量低于0.5%，允许相对偏差不超过10%
饲料中总磷含量的测定
饲料中总磷含量 的测定
原理
将试样中的有机物破坏，使磷溶 解出来，在酸性溶液中，磷与钒钼酸铵 生成黄色络合物，在400nm波长下比色 测定。此法测得为总磷，包括植酸磷。
操作步骤
1. 试样分解 2.标准曲线绘制 ３.试样
测定
操作步骤
1. 试样分解
有干法，湿法。 与测钙基本相同（其中盐酸浓度1+1）
▪须有足够的显色时间，天气冷须 延长
▪ 避免使用浑浊的样品分解液
为何用于比色的溶液的容量（50ml）不在 计算公式中出现？
因为测标准曲线时与测定试样时均 定容50ml，含磷量X为这50ml供比色的 溶液中磷的总量，而非浓度，所以这 50ml前后抵消，不在计算公式中出现。
实验中应注意的问题：
1.显色时间不充分 2.对含磷量的误解：
亦可根据最小二乘法，计算出斜率 b值，以方便算出含磷量
曲线方程中，Y = a + b X
吸光度 截距 斜率 含磷量
当曲线为经原点的斜线，则a=0,所以吸光度
Y=bX
根据测标准曲线时各点的吸光度Y和含磷 量X，可统计得
斜率b = n*∑XY―∑X*∑Y n*∑X2―(∑X)2
测样品时，测得吸光度，可算出溶液含磷量 X=Y/b
操作步骤
３.试样测定：
吸取试样分解液适量，以同样 方法显色和比色，根据所测得的吸 光度，查标准曲线的溶液含磷量， 再计算样品含磷量。
计算：P(ຫໍສະໝຸດ )=X ×10—6 ×100%
M *(V’ / V)
重复性要求：
含磷>0.5% 允许相对偏差３% <0.5%
10%
注意：
饲料中总磷量的测定
测定结果的计算 ：
样品中总磷的含量（P%）按下式计算： X V1 P= ——————× —— ×100％ m ×106 V2
式中：m——试样的质量（g） X——由标准曲线查得试样分解液总磷含量 （µ g） V1 ——试样分解液定容的体积（ml） V2 ——测定时移取的试样分解液体积（ml）
P标准液比色液
P标准曲线
（三）试样的测定 ：
测 定 步 骤
准确称取试样分解液1~10ml（含 磷量50~750µ g）于50ml容量瓶中， 加入钒钼酸铵显色剂10ml，按6.2 的方法显色和比色测定，测得试 样分解液的吸光度，用标准曲线 查得试样分解液的含磷量（X值）。
试样分解液比色液的制备
1 .坩埚烘干
２ .试样称取
样品称重 1号=35.3520-32.3087=2.9650
样品称重
2号=33.2702-30.4254=2.8448
３ .样品的炭化、灰化
４.试样分解液制备
容量瓶和漏斗洗涤干净、编号。玻棒洗涤干净。 在盛灰分的坩埚中加入10毫升盐酸溶液 （ 10 毫升刻度吸管移取）。 加数滴浓硝酸，在电炉上小火煮沸。 将此溶液借助漏斗无损转移到250毫升容量瓶 中，用蒸馏水冲洗坩埚几次，洗液转入容量瓶 中，冷却到室温，用蒸馏水定容，摇匀即为样 品分解液。
35.3520
3.0433 250 2
33.2702
2.8448
吸光度（A）
X值（P含量， µ ） g 磷含量（%）
0.538
450 1.84
0.467
395 1.74
平均（%）
1.79
分析天平
分光光度计
高温炉
饲料中磷的测定(精)
饲料中总磷含量与植酸磷含量的测定一、饲料中总磷含量的测定(钼黄比色法)1.适用范围本方法适用于配合饲料、浓缩饲料、预混合饲料和单一饲料中总磷的测定。
2.测定原理将试样中有机物破坏，使磷元素游离出来，在酸性溶液中，用钒钼酸铵处理，生成黄色的络合物[(NH4)3PO4·NH4VO3·16MoO3(磷-钒-钼酸复合体)]，在波长400nm下进行比色测定。
此法测得结果为总磷量，其中包括动物难以吸收利用的植酸磷。
3.仪器和设备(1)实验室用样品粉碎机或研钵。
(2)分析筛：孔径0.42 mm(40目)。
(3)分析天平：感量0.0001g。
(4)分光光度计：有10mm比色池，可在400 nm下进行比色测定。
(5)高温炉：可控炉温在(550±20)℃。
(6)坩埚：瓷质。
(7)容量瓶：50，100，1000mL。
(8)刻度移液管：1.0，2.0，3.0，5.0，10mL。
(9)凯氏烧瓶：250或500 mL。
(10)可调温电炉：1000 W。
4.试剂及配制(1)盐酸(GB 622，化学纯)溶液，1+1水溶液（V+V）。
(2)浓硝酸(GB 626)化学纯。
(3)高氯酸(GB 623，分析纯)， 70％～72％。
(4)钒钼酸铵显色试剂：称取偏钒酸铵(HG 3-94l，分析纯)1.25g，加浓硝酸250 mL；另取钼酸铵(GB 657，分析纯)25g，加蒸馏水400 mL，加热溶解，冷却后，将此溶液倒入上溶液，且加蒸馏水定容至1000 mL，避光保存。
如生成沉淀则不能使用。
(5)磷标准溶液：将磷酸二氢钾在105℃干燥1 h，在干燥器中冷却后称0.2195 g，溶解于蒸馏水中，转入1000 mL容量瓶中，加浓硝酸3mL，用蒸馏水稀释到刻度，摇匀，即成50 µg/mL的磷标准溶液。
5.试样的选取和制备取有代表性试样用四分法缩减至200 g，粉碎至40目，装入密封容器中，防止试样成分的变化或变质。
饲料中总磷的测定
饲料中总磷的测定引言饲料是农畜产品生产中非常重要的组成部分，其中磷是一种不可或缺的营养元素。
磷在饲料中存在不同的形态，例如有机磷和无机磷等。
了解饲料中总磷的含量对于合理调整饲料配方、提高动物生产性能具有重要意义。
本文将介绍饲料中总磷的测定方法。
方法仪器和试剂•UV/VIS分光光度计•硫酸铵铵水合物[(NH₄)₂SO₄⋅xH₂O]•硫酸氨铵[(NH₄)₃PO₄]•无水硫酸钠(Na₂SO₄)•硝酸钴铵[(Co(NH₃)₆(NO₃)₃)]•氯仿(CHCl₃)•铵酚磷钼酸盐试剂样品预处理将饲料样品粉碎研磨，使其颗粒细小均匀。
总磷的提取和测定1.取适量饲料样品（约1g），放入锥形瓶中，加入10mL硫酸铵铵水合物和20mL氯仿。
2.用超声波清洗机进行超声处理，使样品充分混合和提取。
3.将提取液过滤，取适量滤液。
4.将滤液分2份，分别加入硝酸钴铵试剂和铵酚磷钼酸盐试剂，并进行密封。
5.分别用UV/VIS分光光度计分别在700nm和880nm波长下测定样品的吸光度值。
6.根据吸光度值进行计算，得出饲料中总磷的含量。
通过采用上述方法，可以准确测定饲料中总磷的含量。
这对于饲料生产企业和养殖户来说具有重要意义，可以通过合理控制总磷含量来调整饲料配方，达到提高动物生产性能、减少环境污染的目的。
此外，这个方法操作简便，结果可靠，具有一定的实际应用价值。
该方法是一种常用的测定饲料中总磷含量的方法，但仍然有一些改进空间。
例如，可以使用更先进的仪器设备提高测定的准确性和精确度，同时可以进一步考虑样品预处理的优化，以提高提取率。
饲料中总磷的测定方法仍然是一个值得研究和探索的领域，不断优化和更新方法是很有必要的。
参考文献1.李华. 饲料中总磷的测定方法研究[J]. 现代化工, 2010, 30(10): 92-94.2.张明, 王小云. UV/VIS分光光度法测定饲料中总磷的研究[J]. 湖北农业科学, 2009, 48(24): 5973-5974.3.张萍, 王春雨, 谢多锡. 饲料中总磷的测定方法比较[J]. 畜牧与饲料科学,2014, 35(8): 107-110.。
饲料中总磷的测定 ppt课件
（2）标准曲线的绘制
✓ 准确移取磷标准溶液（50ug/ml）0，1.0，2.0，5.0，10.0 ，15.0ml于50ml容量瓶中，各加入钒钼酸铵显色试剂10ml ，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，放置10分钟，以0ml溶液 为参比，用10mm比色池，在400nm波长下，用分光光度 计测定各溶液的吸光度。以50ml溶液中磷含量（μg）为横 坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线
健康危害： 吸入、摄入或经皮肤吸收后对身体有害，对眼睛、皮肤、粘 膜和上呼吸道有刺激作用
环境危害： 不燃，有毒，具刺激性
饲料中总磷的测定（钼黄比色法）
5.试样的选取和制备
✓ 取有代表性试样用四分法缩减至200g，粉碎至40目 ✓ 装入密封容器中，防止试样成分的变化或变质
饲料中总磷的测定（钼黄比色法）Leabharlann 饲料中总磷的测定（钼黄比色法）
PS： 吸光度测试方法：
1.按动“功能键”，切换至透射比测试模式 2.调整测试波长 3.置入遮光体，合上样品室，并使其进入光路，按动“调0%T”键调
T零，此时仪器显示“00.0”或“-00.0。完成调T零后，取出遮光体 4.按动“功能键”，切换至吸光度测试模式 5.置入参比样品，按动“调100%T”键，此时仪器显示“BL”延时数秒
饲料中总磷的测定（钼黄比色法）
6.测定步骤
（1）试样的分解
盐酸溶解法（适用于微量元素预混料）：称取试样0.2～1ｇ（ 精确至0.000 2g）于100ml烧杯中，缓缓加入盐酸溶液（1+1， V+V）10ml使其全部溶解，冷却后转入100ml容量瓶中，用水 稀释至刻度，摇匀，为试样分解液
饲料中总磷的测定（钼黄比色法）
富龙。是一种树脂）盖子，不密封 ● 两面透光 ● 内部抛光，精细打磨 ● 适用于所有标准池支架
饲料中总磷的测定
饲料中总磷的测定（钼黄比色法）
6.测定步骤
（1）试样的分解
湿法：称取试样0.5～5g于凯氏烧瓶中（准确至0.000 2g）。加 入硝酸（化学纯）30ml，小心加热煮沸，至二氧化氮黄烟逸 尽，冷却后加入高氯酸（分析纯）10ml，继续加热煮沸至溶 液无色，不得蒸干（危险!）。冷却后加蒸馏水50ml，并煮沸 驱逐二氧化氮，冷却后转入100ml容量瓶中，用蒸馏水定容至 刻度，摇匀，为试样分解液
饲料中总磷的测定（钼黄比色法）
3.仪器和设备
① 实验室用样品粉碎机或研钵 ② 分样筛：孔径0.42mm(40目) ③ 分析天平：感量0.0001g ④ 分光光度计，有10mm比色池，可在400nm下进行比色测定 ⑤ 高温炉：可控温度在（550±20）℃ ⑥ 坩埚：瓷质 ⑦ 容量瓶：50，100，1000mL ⑧ 刻度移液管：1.0，2.0，3.0，5.0，10mL ⑨凯氏烧瓶：250 mL或500mL ⑩ 可调温电炉：1000W
健康危害： 吸入、摄入或经皮肤吸收后对身体有害，对眼睛、皮肤、粘 膜和上呼吸道有刺激作用
环境危害： 不燃，有毒，具刺激性
饲料中总磷的测定（钼黄比色法）
5.试样的选取和制备
✓ 取有代表性试样用四分法缩减至200g，粉碎至40目 ✓ 装入密封容器中，防止试样成分的变化或变质
饲料中总磷的测定（钼黄比色法）
6.测定步骤
（2）标准曲线的绘制
✓ 准确移取磷标准溶液（50ug/ml）0，1.0，2.0，5.0，10.0 ，15.0ml于50ml容量瓶中，各加入钒钼酸铵显色试剂10ml ，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，放置10分钟，以0ml溶液 为参比，用10mm比色池，在400nm波长下，用分光光度 计测定各溶液的吸光度。以50ml溶液中磷含量（μg）为横 坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线
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一、原 理：
将饲料样品中有机物质破坏，使磷游离出来， 在酸性溶液中，用钒钼酸铵显色剂处理，生成黄色 的磷钒钼复合物 (NH4)3PO4·NH4VO3·16MoO3, 在 波长420nm下进行比色测定。所测结果为饲料中的 总磷含量，即包括动物难以消化吸收的植酸磷。
二、测定步骤
（3）以磷含量为横坐标，光密度值为纵坐标绘制磷 标准曲线。
1. 试样的分解(干法，与钙测定相同) （1）准确称取试样2~5g于坩埚中，在电炉上小火
炭化，再放入高温炉中550~600℃下灼烧3hr (可 用测粗灰分后的样品)。 （2）在坩埚中加入1:1HCl 10ml、浓硝酸数滴， 小心煮沸。将溶液无损失地转入100或250ml容 量瓶(接漏斗操作)，冷却后、用蒸馏水稀释至刻 度、充分摇匀，即为试样分解液(贴好标签)。
二、测定步骤
2. 标准曲线制作
（1）准确吸取磷标准溶液(50ug/ml)：0、1.0、2.0、 4.0、6.0、8.0、10.0、12.0 ml分别置ห้องสมุดไป่ตู้50ml容量 瓶中，加入钒钼酸铵显色剂10ml，用蒸馏水稀释 至刻度、混匀，放置10min以上。
（2）以空白溶液 (磷标准0ml)作为参比，用10mm比 色杯，在420nm波长处用分光光度计测定各溶液 的光密度A值 (即吸光度)。