5种中药制剂杀灭幽门螺杆菌的实验研究

5种中药制剂杀灭幽门螺杆菌的实验研究

作者：杨春宾

来源：《医学信息》2016年第06期

摘要：目的研究5种中药制剂杀灭幽门螺杆菌的效果。方法选择2014年5月～2015年5月我院保存的新鲜活检胃黏膜标本作为实验材料，培养幽门螺杆菌群，制作细菌悬液，制备40、50、55mg/ml的黄连、黄芪健中汤、逍遥汤、枳实、紫草中药制剂，记录菌群存活情况和中药的灭菌率。结果一定浓度的黄连、黄芪健中汤和枳实可有效灭杀幽门螺杆菌，可将幽门螺杆菌的菌落数从107CFU/ml降至106CFU/ml，黄连该浓度在在40～50mg/ml之间，黄芪健中汤和枳实的该浓度在50～55mg/ml之间，逍遥汤和紫草的灭菌效果随着中药制剂的浓度增大而增强；黄连的杀菌作用最理想，50～55mg/ml黄连灭杀幽门螺杆菌的杀菌率达99.00%，而枳实、黄芪健中汤的杀菌功效次之。结论黄连的杀菌作用最强，其次为枳实、黄芪健中汤、紫草、逍遥汤。

关键词：中药；幽门螺杆菌；实验

幽门螺杆菌感染的引发多种胃肠道疾病的重要原因[1]。目前，临床上通常应用多种抗生素的方法治疗幽门螺杆菌感染，但是这种联合方式增强了药物的副作用，且耐药菌株的发生率逐渐增大[2]。本次选择2014年5月～2015年5月我院保存的新鲜活检胃黏膜标本作为实验材料，取得了一定的成果，其详情如下。

1 试验材料

1.1中药材料选择本院中药制剂黄连、黄芪健中汤、逍遥汤、枳实、紫草进行试验，妥善保存中药。

1.2布氏肉汤血琼脂培养基 15g琼脂、0.1g重亚硫酸钠、5g氯化钠、2g酵母粉、10g葡萄糖、10g胰蛋白胨、1000ml蒸馏水、8%～10%羊血液、1%抗生素混合液混合，控制培养基pH 值为7.2。

1.3西红柿汁培养基取新鲜西红柿，剥皮捣碎，用纱布挤压西红柿得滤汁。取1g葡萄糖、10g蛋白胨、5g氯化钠、3g牛肉膏、400ml西红柿汁、1000ml蒸馏水混合，搅拌均匀，加入琼脂18.0/L，搅匀，在121℃的条件下灭菌，持续20min。冷却至50℃后，加入15μg头孢菌素、250单位多粘菌素B、10μg万古霉素、5μgTMP、1～2滴乳酸混合。

1.4菌株在西红柿培养基双碟上涂抹胃黏膜组织，放于微需氧环境下，控制环境保持37℃温度、5%～8%O2、5%～8%CO2、33.6%H2，培养2d后，对菌群、菌体的形态、生化反应进

行观察，采用快速尿素酶试验方法对菌体进行试验，确认其为幽门螺杆菌。取该幽门螺杆菌置入布氏肉汤中，保持微需氧环境，培养2d后取出。

1.5方法布氏肉汤血琼脂培养基去除琼脂即为液体培养基，将5种中药制剂放入到液体培养基中，将中药浓度调至40、50、55mg/ml。取细菌置于液体培养基中培养12～18h，制成细菌悬液，保证悬液浓度为1×108CFU/ml。将1ml细菌悬液分别加入不同浓度不同中药制剂液中，并设置无中药的对照管，均培养1d，培养环境为36℃微需氧环境。之后，在布氏肉汤血琼脂培养基平板上涂抹试管中的待检物，继续培养3d，对存活菌落数进行计量。对照管菌落数位起始菌落数，杀菌率=100%×（起始均数-存活菌数）/起始菌数。

2 结果

一定浓度的黄连、黄芪健中汤和枳实可有效灭杀幽门螺杆菌，可将幽门螺杆菌的菌落数从107CFU/ml降至106CFU/ml，黄连该浓度在在40～50mg/ml之间，黄芪健中汤和枳实的该浓度在50～55mg/ml之间，逍遥汤和紫草的灭菌效果随着中药制剂的浓度增大而增强，见表1。黄连的杀菌作用最理想，50～55mg/ml黄连灭杀幽门螺杆菌的杀菌率达99.00%，而枳实、黄芪健中汤的杀菌功效次之，见表2。

3 讨论

胃癌、消化道溃疡、慢性胃炎等均与幽门螺杆菌有密切关系[3]。目前，专家已经从分子、基因水平来开展幽门螺杆菌的致病机制[4]。临床上经历了单一抗菌药、2种抗菌药、三重治疗的幽门螺杆菌的治疗过程，其中，三重治疗的效果最显著，其根除率可达90.00%[5]。但是，化学合成药物的毒副作用限制了药物的治疗效果，且治疗费用较高，推广应用难度较大。因此，关于中药制剂灭杀幽门螺杆菌的研究也逐渐受到关注。

本次研究中，一定浓度的黄连、黄芪健中汤和枳实可有效灭杀幽门螺杆菌，可将幽门螺杆菌的菌落数从107CFU/ml降至106CFU/ml，逍遥汤和紫草的灭菌效果随着中药制剂的浓度增大而增强。可见，这5种中药制剂均具有一定的灭杀幽门螺杆菌的功效。本次研究中，黄连的杀菌作用最理想，50～55mg/ml黄连灭杀幽门螺杆菌的杀菌率达99.00%，而枳实、黄芪健中汤的杀菌功效次之。小檗碱是黄连发挥抑菌功效的主要成分，纯小檗碱与黄连粗提取物的抑菌效果基本相同，但是其具体抑菌机制仍有待进一步研究。通常认为小檗碱可以对细菌的增殖和呼吸产生抑制作用，使细菌体内的糖代谢过程受到干扰，影响其脱氧反应的正常进行，从而达到灭菌的目的。总上所述，黄连的杀菌作用最强，其次为枳实、黄芪健中汤。

参考文献：

[1]曹鹏飞.英连金化浊解毒方治疗慢性萎缩性胃炎的临床与实验研究[D].河北医科大学，2011.

[2]王彦.Hp相关性慢性胃炎证素研究及中医药治疗的疗效评价研究[D].北京中医药大学，2013.

[3]张丽颖.中药联合标准三联疗法提高幽门螺杆菌根除率的临床疗效评价研究[D].中国中医科学院，2013.

[4]黄衍强，黄干荣，李晓华，等.中药提取物对耐药幽门螺杆菌生物膜形成的影响[J].医药导报，2013，12（11）：1407-1409.

[5]荣茜，胡德兵，李英伦.中药抑制幽门螺杆菌及其作用机制的研究进展[J].中成药，2015，20（08）：1795-1799. 编辑/哈涛