药物色谱分析-1

义
• 分离效率高，一般可同时分离分析多 种化合物，柱效高。
色 • 分析速度快 谱 • 灵敏度高 法 • 样品用量少 特 • 应用范围广 点 • 选择性好
• 易于自动化
• 缺点是定性能力不如光谱法
色谱分析法与其他分析方法的比较
化学法
光谱法
色谱法
适用范围 灵敏度
原料药含量测定 一般杂质检查 特定官能团鉴别
留和有机溶剂残留的主要检测方法 • 毛细管电泳在蛋白质分离、手性药物的分离等
方面应用较广
各国药典色谱方法收载时间的比较
色谱方法 USP/年
TLC
1965
GC
1965
HPLC
1975
CE
2001
BP/年 1968 1973 1980 2000
JP/年 ChP/年
1971
1977
1971
1985
1981
1956年,Van Deemter等提出了色谱过程的速 率理论
1965年,Giddings提出速率理论偶合方程
近年来色谱理论研究多集中在柱过程热力学 和动力学参数、毛细管色谱柱、保留规律预 测及超临界流体色谱等方面
薄层色谱法
• 1938年，Izmailov和Schraiber在玻璃板
色
上涂氧化铝，用来分离药物
液相色谱法（liquid chromatography,LC）， 又分为液-固色谱法LSC和液-液色谱法LLC
超临界流体色谱法（supercritical fluid chromatography），是以超临界流体作流动相， 以固体吸附剂或键合到载体上的高聚物为固定 相的色谱法
二、按分离原理分类
药物色谱分析-1
齐永秀 药物分析教研室
第一章 概论
• 色谱法的定义、特点及其发展历史 • 色谱法的分类 • 色谱法在药学研究中的作用和未来 • 色谱法的相关文献介绍
• 色谱分析法（Chromatography）是一
色
种物理或物理化学的分离分析方法，
谱
法
主要用于分析多组分样品.
定 • 色谱系统由固定相和流动相组成。
谱
和电化学检测器陆续问世
方 • 1967年，第一台自动化液相色谱仪组成，
法
色谱柱的填料也有了新进展
的 • 19世纪80年代，二极管阵列检测器产生，
发
HPLC-MS技术出现
展 • 2004年，超高效液相色谱出现（Waters
ACQUITY UPLC;Agilent RRLC）
毛细管电泳法
• 1948年，瑞典科学家梯塞留斯因应用电泳法分
较低，一般为mg 级
药物、药物代 谢物或药物中 杂质定性及结 构鉴定
较高，一般为 g~mg级
药物的定性、 定量分析
较高，一般为 ng ~ g级
优点 缺点
简单、直观、快 速、价廉
无分离能力，选 择性差
准确度高
分离效率高
无分离能力， 定性能力较差 选择性差
色谱法的诞生
• 1834年，德国化学家Fra Baidu bibliotekunge进 行染料和植物萃取液的布上 分离试验
1985
未收载 2000
色谱法在药典一部中的应用
2000 年版
2005 年版
薄层色谱法
气相色谱法
液相色谱法
鉴别 检查 含量 鉴别 检查 含量 鉴别 检查 含量
测定
测定
测定
602 -- 18 11 21 11 1 2 107
848 -- 49 11 21 33 10 2 480
谱 • 1949年，Macllean等在氧化铝中加入淀粉
方
黏合剂制作薄层板
法 • 1956年，Stah提出概念，开发出薄层色谱
的
板涂布器
发 • 1964年，Hara发明了薄层扫描光度计
展 • 近年来，超薄层色谱法为此开创了一个全
新的领域。
气相色谱法
• 1952年，James和Martin等提出气相色谱
三、按操作形式分类
• 柱色谱法（column chromatography） • 平板色谱法（plane chromatography）
第三节 色谱在药学研究中的作用和未来
• 薄层色谱法是鉴别和有关物质检查的常用方法 • 液相色谱法是药物含量、中药有效成分、体内
药物分析、药理研究和临床检验常用技术 • 气相色谱法是药品中挥发性成分、中药农药残
细管电色谱开始受到重视
CE从液相色谱和凝胶电泳发展而来
移动界面电泳（30年代）
薄层层析（30年代）
气相色谱（40年代）
凝胶电泳（60年代）
液相色谱（60年代）
毛细管电泳（80年代）
微全分析系统uTAS（90年代末）
分离分析技术发展简史
第二节 色谱法的分类
一、按流动相和固定相的物态分类
气相色谱法（gas chromatography,GC），又分 为气-固色谱法GSC和气液色谱法GLC
• 1897年，德伊以装白土的柱 子分离石油
• 1903年，俄国植物学家茨维 特提出了吸附原理分离植物 色素，1906年发表关于色谱 的论文
•
色
谱•
理
论•
的 发• 展•
1940年,英国的Martin和Synge提出液-液分配 色谱法
1941年, Martin和Synge提出柱效能模型,即 模拟蒸馏理论,同时提出流动相可用气体代替
色
法，阐述其理论和方法，因此获诺贝尔化
谱
学奖。
方 • 1954年，Ray把热导池检测器用于气相色
法
谱仪
的 • 1958年，产生毛细管气相色谱法
发 • 1959年，气相色谱的新仪器产生
展 • 20世纪60年代，推出了气相色谱-质谱联
用技术。
液相色谱法
• 1959年，凝胶过滤色谱研制成功
色 • 1966年，紫外检测器的研制成功，荧光
色
析血清蛋白而被授予诺贝尔化学奖
谱
• 1967年，提出区带电泳（CZE）
方
• 20世纪80年代，提出了内径较小的毛细管中，
法
轴向扩散是影响柱效的主要因素，人们又相继
的
提出了胶束电动毛细管电泳法（MECC），非水
发
毛细管电泳法（NACE），毛细管等电聚焦电泳
展
（CIEF），毛细管凝胶电泳（CGE），90年代毛
• 吸附色谱法（adsorption chromatography） • 分配色谱法（partition chromatography） • 分子排阻色谱法（molecular exclusion
chromatography） • 离子交换色谱法（ion exchange chromatography,IEC） • 亲和色谱法（affinity chromatography ,AC ） • 毛细管电泳法（capillary electrophoresis,CE） • 手性色谱法（chiral chromatography,CC）