圆二色谱仪
圆二色谱仪数据解析 -回复
圆二色谱仪数据解析-回复圆二色谱仪数据解析是一种分析光学性质的方法,通过测量物质在不同波长下对圆偏光和线偏光的旋光性质来研究其结构和构象。
本文将通过一步一步的解析来详细介绍圆二色谱仪数据解析的过程。
第一步:数据采集在进行圆二色谱仪数据解析之前,首先需要采集实验数据。
圆二色谱仪通过发送两个不同偏振方向的光束通过被测物质,并检测其通过与吸收的光的旋光角度差异。
因此,实验过程中首先需要准备好待测的物质样品,并确定合适的测量波长范围。
然后,将样品放置在样品室中,并进行测量。
第二步:数据分析在数据采集完成后,接下来需要进行数据的分析。
圆二色谱仪所得到的数据通常以角度或圆二色度(CD)为单位。
圆二色度表示物质对圆偏光的旋转强度,是圆二色谱仪最常用的参数之一。
通过计算圆二色度的变化,可以推断出物质的结构和构象。
第三步:谱图绘制将数据转化为直观的图形是理解圆二色谱仪数据解析的重要步骤之一。
从圆二色度-波长曲线可以观察到各个波长下物质的圆二色度变化情况。
一般情况下,圆二色度的变化趋势与物质的结构有关。
例如,正螺旋肽结构在UV光区域表现出负圆二色度,而beta折叠结构则表现出正圆二色度。
第四步:寻峰定量分析通过寻找圆二色谱图中的峰值位置,可以进一步定量分析样品中的物质浓度或不同构型之间的比例。
峰值位置的偏移量可以被用来确定特定化合物之间的相对构象变化。
例如,分析蛋白质的次级结构时,可以通过圆二色度峰值的位置和形状来推断蛋白质的α螺旋、β折叠或无规卷曲结构的比例。
第五步:定性分析圆二色谱仪数据解析最重要的应用之一是定性分析。
通过比较待测物质与已知物质的圆二色谱图,可以推断待测物质的结构和构象。
这种方法在生物化学和药物研发中具有广泛应用。
例如,在研究药物与蛋白质的相互作用时,可以通过分析圆二色谱图来确定药物与蛋白质之间的结合方式。
总结:圆二色谱仪数据解析是一种重要的光学分析方法,通过测量物质在不同波长下对圆偏光和线偏光的旋光性质,来研究物质的结构和构象。
圆二色光谱仪操作流程
圆二色光谱仪操作流程圆二色光谱仪是一种广泛应用于生命科学领域的仪器,可以用来研究溶液中的有机化合物的结构和构象。
本文将介绍圆二色光谱仪的基本操作流程。
I. 准备工作在开始操作圆二色光谱仪之前,需要完成以下准备工作:1. 样品制备:根据研究目的选择相应的溶剂,将待测的有机化合物溶解于其中,注意控制浓度。
同时,确保样品中没有杂质或者其他干扰物。
2. 刷洗样品池:使用纯水和酒精对样品池进行彻底清洗,以确保无杂质残留。
避免使用有机溶剂,以免对后续实验产生干扰。
3. 仪器预热:启动圆二色光谱仪,并按照厂家的指示预热仪器至指定温度。
通常情况下,建议将仪器预热至室温。
II. 校准仪器在进行实际测量之前,需要对圆二色光谱仪进行校准,以确保测量结果的准确性。
校准的具体步骤如下:1. 空白校准:在样品池中加入相同溶剂但不含有机化合物的空白样品。
按照仪器操作手册的指示,进行空白校准,以消除系统本底的影响。
2. 参考物质校准:选择合适的参考物质,如D-葡萄糖酸钠。
将参考物质溶解于相同溶剂中,加入样品池,按照仪器操作手册的指示进行参考物质校准。
III. 测量样品完成仪器的校准后,可以进行样品的测量。
具体操作步骤如下:1. 操作参数设定:根据样品的性质和研究目的,设置合适的操作参数。
例如,选择适当的波长范围、光强等参数。
2. 样品测量:将待测样品溶液加入样品池中,确保样品池的表面平整没有气泡。
将样品池放入圆二色光谱仪的样品室中。
3. 测量记录:按下开始测量按钮,圆二色光谱仪会自动记录样品的圆二色信号。
在测量过程中,避免干扰,保持实验室环境的稳定。
4. 清洗样品池:在每次测量完毕后,使用纯水和酒精对样品池进行彻底清洗,以避免污染。
IV. 数据处理与分析完成样品的测量后,可以进行数据处理与分析,以获取有关样品结构和构象的信息。
具体步骤如下:1. 数据导出:将测量得到的原始数据导出为适当的格式,如文本文件或Excel文件。
2. 数据校正:根据仪器的响应性能,对数据进行校正,消除背景噪声等。
圆二色谱仪chirscan参数
圆二色谱仪chirscan参数
圆二色谱仪(Circular Dichroism Spectrometer)是一种用于
研究物质对圆偏振光的吸收和散射特性的仪器。
Chirascan是一种
商用圆二色谱仪,它具有许多可调参数,以便用户可以根据实验需
求进行调整。
以下是一些Chirascan圆二色谱仪可能具有的参数:
1. 波长范围,Chirascan圆二色谱仪通常可以覆盖较宽的波长
范围,例如从170nm到900nm。
这种广泛的波长范围可以用于研究
各种生物大分子和化合物的圆二色谱特性。
2. 光学路径长度,光学路径长度是样品在仪器中通过的距离,Chirascan通常允许用户调整光学路径长度以适应不同类型的样品。
较长的光学路径长度可提高检测灵敏度。
3. 温控系统,一些Chirascan圆二色谱仪配备了温控系统,可
以在进行实验时控制样品的温度,这对于研究温度对样品圆二色谱
特性的影响非常重要。
4. 数据采集速度,Chirascan圆二色谱仪通常具有可调的数据
采集速度,用户可以根据实验需求选择快速扫描或高分辨率扫描。
5. 自动化功能,一些Chirascan圆二色谱仪具有自动化功能,可以进行自动样品加载、实验执行和数据分析,提高实验效率和准确性。
总的来说,Chirascan圆二色谱仪具有多种参数和功能,可以满足不同实验需求,并且可以通过调整这些参数来实现对样品圆二色谱特性的全面研究。
圆二色光谱仪的使用
圆二色光谱仪操作步骤仪器型号(法国Bio-Logic:2400304)1.打开光源打开ALX-300光源控制器机箱后部开关,而后按机箱前面板“start"按钮,然后等待15分钟保证ALX-300前面板功率显示稳定,查看是否在150±2,如不是,可用前面板左部旋钮调节至150±2),左旋(逆时针旋转)按钮可使数值变小,右旋(顺时针旋转)按钮可使数值变大;2.在数值稳定在150±2之后,打开MOS-500主机前面板开关;3.打开电脑,双击BioKine图标启动程序;在弹出的界面中,鼠标左键单击菜单栏中的“Install device":在出现的“Device Isallation对话框”中要勾选配置的仪器和附件,这里勾选了“MOS-500”。
若有温控附件则还需勾选Peltier TCU-250(股没有不用选),最后单市“OK"确认:选择菜单栏“Device”,点击Scanming spectrometer(MOS-500)”,在新弹出的小框中,选择是,然后大院等待2分钟。
设置狭缝宽度2nm(输入数值后按enter键),点击窗口上部“Acquisition Setup"在出现的“Scanning Setup对话框”中的Acquisition mode选择“CD”。
其它参数:起始波长(Begin)最低不能低于190nm,否则损伤仪器,End(nm)根据自己的需要一般300-800nm之间。
Step(nm)为扫描速度,数值越大,测样速度越快。
快门选择“常开”其它Options栏都不用勾选,CD parameters不用更改,CD unit选择Elipticity而后单击“OK”确认。
4.Ex输入190enter,点击Shutter off使变成Shutter on,点击HV off使变成HV on,点击Auto 得到330V以下电压值1-2秒后再点击一次Auto使变成灰色。
圆二色谱仪检测原理
圆二色谱仪检测原理
圆二色谱仪是一种用来测量物质的旋光性质的分析仪器。
其检测原理基于物质对偏振光的旋光效应。
圆二色谱仪中,光源发出的可见光经过偏振器后,被分成两束偏振方向相互垂直的线偏振光。
其中一束光经过样品管,与样品发生相互作用后,光的偏振方向发生变化。
另一束没有经过样品管。
两束光再次相遇时,通过光栅分光器将其分离为两束光,分别进入两个相互垂直的光电检测器。
当被测物质的溶液处于外加磁场的作用下时,分子因旋转而在样品管中具有特定的旋光性质。
旋光方向以及旋光强度与物质的结构有关。
这种旋光性质能够影响两束光之间的干涉现象,从而使得通过光电检测器的两束光的光强发生变化。
通过检测两束光的光强差异,圆二色谱仪可以测量样品的旋光性质。
圆二色谱仪的测量结果一般以CD(Circular Dichroism)谱或OR(Optical Rotation)谱的形式呈现。
CD谱描述了样品在不同波长处的旋光强度变化,可以用来研究样品的结构、构象和对称性等;OR谱则描述了样品在某一特定波长处的旋光方向和旋光强度。
圆二色谱仪在生物化学和药物领域具有广泛的应用,可以用来研究蛋白质、核酸、糖类等生物大分子的结构和构象变化,同时也可以用来研究药物的药效和药物-靶标相互作用等。
圆二色谱仪的使用步骤和谱图解读技巧
圆二色谱仪的使用步骤和谱图解读技巧圆二色谱仪(Circular Dichroism Spectrometer,简称CD谱仪)是一种常用的光谱仪器,广泛应用于生物化学、生物物理、有机化学等领域。
它通过测量物质对环形偏振光的吸收差异,可以研究样品的结构、构象和化学反应等信息。
本文将介绍圆二色谱仪的使用步骤和谱图解读技巧。
一、圆二色谱仪的使用步骤1. 准备样品:选择适合的样品,如蛋白质、核酸、有机小分子等,按照实验要求进行样品制备。
样品的浓度应该适中,一般在0.1-1.0 mg/mL之间。
2. 调节仪器参数:打开圆二色谱仪,根据实验要求选择合适的仪器参数,如波长范围、光程、扫描速度等。
这些参数会对谱图的质量产生较大影响,需要仔细选择。
3. 参考谱图测定:选择一个与样品相类似的参考物质,并制备成相同浓度的溶液。
将参考物溶液装入样品池,并用去离子水进行基线校正。
4. 样品谱图测定:将样品溶液装入样品池,注意不要产生气泡和表面张力现象。
同样,用去离子水进行基线校正。
扫描仪器并记录谱图。
5. 数据处理和分析:将样品谱图与参考谱图进行比较,分析其差异部分。
常见的数据处理方法包括谱图叠加、拟合曲线等。
二、谱图解读技巧1. 谱图的形态:圆二色谱图一般为正或负对称的峰形,其形态可以提示样品的结构特征。
例如,α-螺旋结构的蛋白质在200-230 nm范围内会出现负吸收峰,而β-折叠结构在190-210 nm范围内会出现正吸收峰。
2. 谱峰的位置:谱峰的位置与物质的手性有关。
一般来说,左旋(L-)物质在200-230 nm范围内表现为负吸收,而右旋(D-)物质则相反。
通过对比实验样品与参考谱图的位置差异,可以了解样品的立体构型。
3. 肩峰的存在:有些样品的圆二色谱图中会出现肩峰,它们通常位于主峰的两侧。
肩峰的存在提示样品可能存在多种构象,可能与蛋白质的不规则结构或转变有关。
4. 拟合曲线:通过将实验谱图与拟合曲线进行比较,可以获得更加精确的结果。
圆二色谱仪chirscan参数
圆二色谱仪chirscan参数全文共四篇示例,供读者参考第一篇示例:圆二色谱仪(Circular Dichroism Spectrometer,简称CD)是一种用于研究物质的圆二色性质的仪器。
圆二色性是指物质在吸收圆偏振光时所表现出的不对称吸收现象,可以提供关于分子结构、构象和手性等信息。
Chirascan是一款由Applied Photophysics公司(APC)推出的CD仪器,具有高灵敏度、高分辨率和广泛的应用范围。
Chirascan是一款便携式的圆二色谱仪,它可以实现快速、准确地测量生物分子、生物大分子和其他有机小分子的圆二色谱谱图。
Chirascan具有以下主要参数:1.波长范围:Chirascan能够在175nm至900nm的波长范围内进行测量,覆盖了紫外到可见光区域,可以满足不同光学活性化合物的测量需求。
2.分辨率:Chirascan具有高分辨率的优点,使得用户可以在光学活性化合物的吸收光谱中清晰地观察到特征峰和特征谷,从而准确分析样品的立体结构和手性信息。
3.灵敏度:Chirascan在测量过程中具有高灵敏度,可以探测到微量的光学活性物质,即使在低浓度下也可以获得可靠的数据。
4.自动化功能:Chirascan具有智能化的数据采集和分析软件,可以实现自动测量、自动校准和自动计算参数等功能,为用户提供便捷、快速的操作体验。
5.温控功能:Chirascan具有温控功能,可以在不同温度下进行测量,研究物质的热力学性质和温度对其圆二色性质的影响。
6.多种测量模式:Chirascan支持多种测量模式,包括扫描模式、定点模式、动力学扫描模式等,可以满足不同用户的测量需求。
Chirascan是一款功能强大、性能稳定的圆二色谱仪,广泛应用于生物医药、生物化学、药物研发、食品安全等领域。
它不仅可以帮助科研人员深入理解生物大分子的结构和功能,还可以为药物设计和合成提供重要信息。
随着科技的不断发展,Chirascan将在更多领域展现其应用潜力,为科学研究和产业发展做出更大贡献。
圆二色谱仪操作规程培训ppt课件
根据Beer-Lambert law 有: θ = [θ]. l.c 或 [θ]=mdeg/(l.c ) (c-摩尔浓度)
计算出的值最后再乘以1000即可转换为deg.cm2.dmol-1
蛋白质: 氨基酸的圆二色性: 在可见光区没有吸收,紫外区只有芳
香族色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸。
2、 JASCO J-1500 基本组成与附件
配置:
1)检测器: UV-VIS 163-950nm NIR 400-1250nm 2) 光源:氙灯 3)气体:高纯N2 4)多通道测定 (CD/HT/Abs…),
制样工具
3) 停流附件
注射器:10ml
单管路死体积:46ul
注射器Flow rateMax :5ml/min
反应动力学检测
Mixing Ratio:整数倍
4) N2吹扫装置
只能用于标准样品支架,用于190nm以下样品测试
3、开机与基本操作规程
1)开气:打开氮气,调节分压在0.02mPa左右,依据测定波 长范围在仪器右侧的流量控制器中调节所需的气体流量。 (>190nm 2L/min; 185-190nm 5-10L/min; <185nm 25L/min) 2)开机:打开主机电源,使用变温时,需打开水循环电源。 或使用停流附件需开启停流附件控制器电源。 3) 软件:打开电脑主机,双击“spectra manager”图标,进入 操作界面,显示J-1500处于Idle状态则表示联机成功。
二级结构分析:
打开protein Secondary structure estimation软件,打开转换单位后 另存的文件数据。
圆二色光谱仪(Chirascan)仪器操作步骤
圆二色光谱仪 Chirascan简明操作步骤1.开通氮气通氮气约10分钟后,再进行开通电源等下述步骤。
2.开启电源2.1按“lamp”开关,接通氩灯(xe)的电源,等待约15秒后,按“start”开关,看到氙灯被点亮,有指示灯光透出。
2.2按“System”开关,仪器开始自检,Status指示灯渐渐变为稳定的绿色,Rx,TX指示灯闪亮。
3.开启电脑及软件3.1开启电脑,选择用户帐号( Chirascan user)3.2点击“Chirasean”软件到ProData Chirasean主界面3.3点击图标快捷键3.4设定文件名、工作文件夹及当前工作目录:在E盘中,点击New folder快捷键,命名新建的文件,并设为当前工作目录(点),接下来的测试数据就被直接保存记录下来了。
3.5设置测试条件参数Wavelength改为400,点击set,High改为400,点set4.开始一个光谱测试实验4.1首先测试系统背景值空气的吸收情况,样品池中不放任何物体直接采集空气的值,点击“Background”。
4.2测试比色皿及buffer的光吸收性质:选择合适的比色皿,用甲醇清洗比色皿,加入400ul 或200ul甲醇,将比色皿按照一定的方式和方向(比色皿上字朝右)放入仪器,盖上盖子,点击改样品名字,在Spectrum输入Meoh,后面为记样次数(改为0),点击OK,点击“Acquire”。
4.3样品测试使用上一步测试buffer的同一个比色皿,清洗比色皿,稀释样品,将比色皿按照一定的方式和方向(比色皿上字朝右)放入仪器,点击改样品名字,在Spectrum输入样品编号,后面为记样次数(改为1),点击OK,点击“Acquire”。
菜单栏点Window,New Window,Absorbance(紫外),紫外不超过3(1~2)。
5.数据处理测试完成后,关闭紫外吸收的窗口,放大CD窗口将甲醇数据从左边拖到图中,点击界面“D”快捷键处理数据点击Meoh ,设基线set baseline,甲醇点击样品,背景扣除Subtract baseline,解除背景设定unset baseline,选中扣除背景后的样品文件subtracted:0,移除其他Remove Others,选中subtracted:0,点smooth,Smooth后,点OK,选中Smooth(s):0,点Remove Others,OK。
圆二色光谱仪操作规程
圆二色光谱仪操作规程一、实验前的准备工作1.检查光谱仪是否正常工作,包括光源、单色器、检测器等。
2.清洁光谱仪内部和外部的透镜和镜片,以确保光的传输和输入的准确性。
二、仪器的设置1.打开光谱仪电源,根据厂家说明进行启动。
2.调整光谱仪的入射、出射、相角器的位置,使其垂直于样品台。
3.调整光谱仪的扫描速度和开始终止角度,根据实验要求进行设置。
三、样品的准备1.准备待测样品,并将其置于样品台上。
2.样品台应与光源、单色器、检测器等配合,确保光通过样品时不会发生漏光和反射。
四、运行光谱仪1.打开光谱仪软件,并进行相应的设置,确保样品台在与单色器、检测器光路对正的位置。
2.点击开始按钮,光谱仪将开始扫描样品。
3.在扫描过程中,观察光谱仪软件上的实时光谱图,并确保采集到清晰的信号。
4.等待扫描结束,并停止程序,保存光谱结果。
五、数据处理与分析1.使用光谱仪软件对保存的光谱数据进行处理和分析。
2.根据实验要求,可以进行波长校准、光谱曲线的平滑和修整等操作。
3.根据光谱数据分析样品的组成、结构和特性等。
六、实验后的操作1.关闭光谱仪电源,并进行相关的清洁和保养工作。
2.将光谱仪的数据存储设备连接到计算机上,导出实验结果并保存。
3.整理实验现场,确保实验室的整洁和安全。
七、注意事项1.在操作光谱仪时,要避免直接接触光源,以防止烫伤。
2.在更换样品时,要注意样品的处理和保护,避免污染和损坏样品台。
3.在操作光谱仪时,要小心使用相关设备和工具,以防止误伤和损坏仪器。
4.实验结束后,要及时关闭光谱仪电源,并进行清洁和保养工作,以延长仪器的使用寿命。
4圆二色谱
1. 仪器用途仪器主要用于手性光学活性物质的研究。
可用于有机立体化学研究、光学活性物质纯度测试、药物定量分析、天然有机化学、生物化学与宏观大分子、金属配合物化学、聚合物化学、蛋白质折叠研究、蛋白质热稳定性测量、蛋白质构象研究等。
2. 系统组成2.1 圆二色谱仪主机 1套包括: 紫外光譜测量装置,线二色测量装置,荧光圆二色测量装置,荧光各向异性测量装置2.2 电子温控装置2.3 固体压片及漫反射测量装置2.4 快速动力学停流装置2.5 比色池0.1mm, 0.5mm,1mm, 2mm, 10mm各4个2.6 耗材: 备用氙灯3个2.7 操作软件﹑计算机工作站及打印机3. 技术规格3.1 圆二色谱仪主机:3.1-1 测量谱图功能:圆二色光谱﹑紫外光譜﹑线二色光谱﹑荧光圆二色谱及荧光各向异性谱;3.1-2 光源:3.1-2-1 电源供应器功率范围: 75W至180W可调3.1-2-2 标配150W氙灯及150W汞氙灯双光源需可同时装配(具双灯座)3.1-3 光学系统:3.1-3-1 双光栅非棱镜系统3.1.3-2 具波长扫描自动对焦装置3.1-4 波长范围: 163 nm – 950 nm3.1-5 波长准确度 : ±0.1 nm ( 163 nm – 950 nm ) 3.1-6 波长重复性 : ±0.05 nm ( 163 nm – 950 nm ) 3.1-7 光谱带宽: 0 ~ 16nm3.1-8 杂散光: 2 ppm (200 nm)3.1-9 基线稳定性: <0.007 mdeg/hr3.1-10 噪音水平: 0.01 mdeg @ 200nm (16s, 1nm 带宽) 3.1-11 测量范围:不小于±8000 mdeg3.1-12 氮气吹扫:波长在185nm以上不需要氮气吹扫,185nm以下吹扫气体用量不大于 3升/分钟3.2 电子温控装置3.2-1 电子控温系统的温度范围:0℃ - 100℃3.2-2 准确度:± 0.1 ℃;3.2-3 精密度:± 0.01℃3.2-4 配套冷却循环水槽1台3.3 固体样品测量附件3.3-1 固体粉末漫反射测量积分球装置1套。
圆二色谱仪的原理及应用
圆二色谱仪的原理及应用1. 圆二色谱仪的介绍圆二色谱仪是一种用于测量光学活性物质的仪器,它能够通过测量物质对左旋光和右旋光的旋光性质,实现对物质的结构、构型和纯度等方面的分析。
圆二色谱仪可以广泛应用于医药、化学、生物学等领域,对于研究和分析手性化合物、蛋白质结构等具有重要的作用。
2. 圆二色谱仪的原理圆二色谱仪的工作原理基于光束的旋转和二色性。
当物质通过圆二色谱仪时,它会与光产生相互作用,使得入射光分成两个方向旋转的光束,即左旋光和右旋光。
这两个旋光光束的角度、强度差异可以通过圆二色谱仪测量出来,从而得到物质的旋光性质。
3. 圆二色谱仪的组成圆二色谱仪主要由光源、单色器、样品室、检测器和计算机等组成。
- 光源:圆二色谱仪使用的光源通常为氙灯或卤素灯,具有广谱且连续的特性。
- 单色器:单色器用于将光源发出的白光分解成不同波长的单色光,以满足实验需求。
- 样品室:样品室是放置待测样品的位置,通常包括旋转样品架等装置,用于调节样品的入射角度和位置。
- 检测器:检测器用于测量样品通过的旋光光束的强度,常用的检测器包括光电二极管和光电倍增管等。
- 计算机:圆二色谱仪还配备了计算机控制系统,用于控制实验参数、采集和处理数据等。
4. 圆二色谱仪的应用领域圆二色谱仪在许多领域中都有广泛的应用,以下列举了一些主要领域: - 药学研究:圆二色谱仪可以用于研究药物的手性性质,如药物对不同手性异构体的吸收、分布和代谢等。
- 生物化学:圆二色谱仪可以用于蛋白质和核酸的二级结构研究,进而揭示它们的功能和性质。
- 光学活性材料研究:圆二色谱仪可以用于研究光学活性材料(如液晶材料、染料等)的手性性质以及其与其他化合物的相互作用。
-环境分析:圆二色谱仪可以用于环境样品中手性化合物(如农药、药物残留等)的分析与检测。
5. 圆二色谱仪的优势与局限性圆二色谱仪有许多优势,如高灵敏度、高分辨率、快速测量等,使得它在实验室和工业研发中得到广泛应用。
圆二色谱仪数据解析 -回复
圆二色谱仪数据解析-回复什么是圆二色谱仪?圆二色谱仪是一种用于研究物质在不同波长下的旋光性质的仪器。
通过测量物质对不同波长光的吸收情况,可以得到光谱图,并进一步分析物质的结构、构型和纯度等信息。
圆二色谱仪的数据解析是指通过对所得的圆二色谱仪光谱图进行分析和解释,从而获取有关样品的旋光性质的详细信息。
在进行圆二色谱数据解析之前,需要先了解圆二色谱仪的工作原理和基本参数。
圆二色谱仪的工作原理是利用样品对左旋光和右旋光的吸收程度不同,通过测量两者的吸光度差来获得圆二色信号。
常用的参数包括旋光度和波长。
在进行圆二色谱仪数据解析时,首先要对所得的光谱图进行观察和分析。
光谱图通常分为两个部分:CD谱和LD谱。
CD谱反映了物质对不同波长光的吸收差异,而LD谱则表示左旋光和右旋光的吸收情况。
在观察时,可以注意到吸收峰的强度和形状,以及谱线的变化趋势。
接下来,需要进行光谱数据的处理和计算。
对于CD谱,常用的计算是利用对应的强度差值或旋光度数据来获得圆二色信号的绝对值,即将光谱数据转化为绝对旋光度。
对于LD谱,可以分别计算左旋光和右旋光的吸光度值,并进行分析。
此外,还可以计算光谱图的区域积分值,用于研究物质的构型和纯度等特性。
在对圆二色谱仪数据进行解析时,还可以借助一些工具和技术进行辅助分析。
例如,可以通过与已知物质的光谱图进行比较来确定样品的结构。
还可以使用化学模拟软件对光谱数据进行模拟和拟合,以获得更准确的结果。
此外,还可以利用数据处理和统计学方法对大量光谱数据进行整合和分析,以得到更全面和准确的结论。
最后,在进行圆二色谱仪数据解析时,需要对结果进行合理的解释和评价。
需要考虑实验条件、样品的特性以及其他可能的影响因素,以确保结果的可靠性和准确性。
同时,还可以进行结果的比较和验证,以进一步验证分析的正确性。
最终,可以得到有关样品的旋光性质、结构和纯度等信息,并对研究对象进行深入的理解和分析。
综上所述,圆二色谱仪数据解析是利用圆二色谱仪测量数据进行光谱分析的过程。
圆二色谱仪操作规程培训
4)比色皿:
石英比色皿由于加工过程产生形变可显示圆二色性,故需使用低CD信号的比 色皿。
比色皿清洗:保证测试重复性。禁止超声清洗,Pierced等专门清洗剂(清洗 剂洗后建议用2M)、碱溶液、50%硝酸等。
for protein:近紫外区使用光程长≥5mm的,远紫外区使用1mm-0.1mm。
3D数据分析:
需进行2D数据提取后方可进行有关分析。点击Interval Data Analysis软
件,打开.jwb格式3D数据文件。
5、关机与测试注意事项
1)关机程序: 关闭软件、关闭电脑和J-1500主机电源、关闭水循环、通气10min后关 闭氮气。
2)样品架确认:仪器开机前确认安装的是何种样品支架,若是变温支架必 须先开循环水才能开机。
HT<170可损坏PMT检测器。
பைடு நூலகம்
4、数据分析
1)数据类型: 2D数据:.jws格式,光谱分析软件以及二级结构分析软件都是需要这种 格式数据文件。 3D数据:.jwb格式,需根据需要提取2D数据后进行相关分析。
2)蛋白质二级结构软件分析:CD单位需为摩尔浓度,故需已知蛋白浓度( mg/ml),氨基酸残基平均分子量(未知时,一般取110)。
JASCO J-1500圆二色谱仪操作培训
----食品科技学院 中心实验室 唐老师
目录
1、圆二色谱仪基本原理与应用 2、 JASCO J-1500 基本组成与附件 3、开机与基本操作规程 4、数据分析 5、关机与试验注意事项
1、圆二色谱仪基本原理
圆二色性(CD):活性物质对左、右旋圆偏振光的吸收率差值,将传播的左右圆偏振光 变成椭圆偏振光。
圆二色谱仪数据解析
圆二色谱仪数据解析
圆二色谱仪是一种用于分析物质的结构和手性性质的仪器。
它
通过测量物质对圆偏振光的吸收或旋转来获取信息。
解析圆二色谱
仪的数据涉及到对吸光度和旋光度的理解以及数据处理。
首先,圆二色谱仪的数据通常包括两部分,一部分是吸光度数据,即物质对左旋和右旋圆偏振光的吸收程度;另一部分是旋光度
数据,即物质对圆偏振光的旋转角度。
这些数据通常以波长为横坐标,吸光度或旋光度为纵坐标进行记录。
解析这些数据时,首先需要对吸光度和旋光度的变化趋势进行
分析。
通过观察吸收峰的位置、强度和形状,可以推断物质的手性
性质和结构特征。
同时,旋光度数据可以提供物质对圆偏振光的旋
转方向和程度,从而进一步了解物质的手性性质。
此外,对圆二色谱仪数据进行解析还需要进行数据处理和比较。
常见的方法包括与已知标准物质的圆二色谱数据进行比对,以确定
待测物质的手性性质;同时,还可以利用数学模型对数据进行拟合
和分析,以获取更多信息。
总的来说,解析圆二色谱仪的数据需要结合对吸光度和旋光度的理解,通过分析数据的变化趋势和进行数据处理,以获取物质的手性性质和结构信息。
这涉及到化学、物理和数学等多个领域的知识,需要综合运用多种方法进行全面的解析。
圆二色谱测蛋白质结构原理
圆二色谱测蛋白质结构原理
一、蛋白质的圆二色性
蛋白质或多肽中的主要光活性基团是肽键、芳香族氨基酸残基和二硫键。
当平面圆偏振光的吸收不同时,会产生吸收差异,导致偏振光矢量的振幅差异,圆偏振光变成椭圆偏振光,即蛋白质的圆二色性。
这种圆二色性反映了蛋白质分子中光活性基团的手性分布和构象特征,是研究蛋白质结构的重要手段之一。
二、圆二色谱仪的工作原理
圆二色谱仪通过测量不同波长下蛋白质分子对左旋圆偏振光和右旋圆偏振光的吸收差异来实现对蛋白质结构的分析。
这种差异的大小和方向与样品中手性分子结构的数量和方向有关。
具体来说,圆二色谱仪通过以下几个步骤进行测量:
1.样品准备:将待测蛋白质样品溶解在适当的溶剂中,制成一定浓度的溶液。
2.光学系统设置:在圆二色谱仪中,左旋圆偏振光和右旋圆偏振光分别通过两个独立的通道,并且各自的光强通过光电倍增管进行检测。
3.扫描波长:在一定的波长范围内,连续扫描不同波长的光,并记录左旋圆偏振光和右旋圆偏振光的强度。
4.数据处理和分析:通过比较不同波长下左旋圆偏振光和右旋圆偏振光的强度差异,计算出样品的圆二色性。
进一步的分析可以揭示蛋白质分子中手性基团的数量、分布和构象特征。
总之,圆二色谱是一种非常有用的工具,可以用来研究蛋白质的结构和构象特征。
通过对圆二色谱数据的分析,我们可以了解蛋白质分子的手性分布、柔性、二级结构等信息,从而更好地理解蛋白质的功能和作用机制。
圆二色谱仪检定规程
圆二色谱仪检定规程MV_RR_CNJ_0052圆二色谱仪检定规程1.圆二色谱仪检定规程的说明编号JJG(教委)026-1996名称(中文) 圆二色谱仪检定规程(英文) Verification regulation for circular dichroism spectrometer归口单位国家教育委员会起草单位国家教育委员会主要起草人高松批准日期1997年1月22日实施日期1997年4月1日替代规程号无适用范围本规程适用于新安装、使用中和修理后的,波长范围为180nm~700nm(或以此为主要谱区)的圆二色谱仪(以下简称仪器)的检定。
主要技术要求 1.外观要求2.安装条件3.检定环境4.检定设备(检定用标准物质)5.检定项目和检定方法是否分级无检定周期(年) 2附录数目 4出版单位科学技术文献出版社检定用标准物质相关技术文件备注2.圆二色谱仪检定规程的摘要2 范围本规程适用于新安装、使用中和修理后的,波长范围为180nm~700nm(或以此为主要谱区)的圆二色谱仪(以下简称仪器)的检定。
2.1原理圆二色性定义为每摩尔物质对左圆和右圆偏振光吸收系数的差Δε:Δε=εL-εRεL——物质对左圆偏振光的摩尔吸收系数εR——物质对右圆偏振光的摩尔吸收系数仪器测定的一般为椭圆度,摩尔椭圆度[θ]=3300Δε,即仪器测定的信号是物质对左圆和右圆偏振光吸收系数的差。
包含纵轴Δε和横轴波长的圆二色谱仅可在吸光带中观测到。
CD产生于电子跃迁。
有两种形式的圆二色谱:天然CD和磁诱导的MCD。
CD信号仅在光活性或手性分子中出现。
它被广泛地用于测定手性物质的绝对构型和研究生物高分子的构象。
2.2构成仪器主要由光源部分、单色圆偏振光的产生部分、试样部分和测光部分构成。
光源部分:仪器常用的光源有氙灯、钨卤灯。
单色圆偏振光的产生:由单色器将光变成单色光,单色光经偏振器产生线偏振光,然后再通过光弹调制器将其变为圆偏振光。
圆二色光谱仪操作规程
MOS-450 圆二色光谱扫描操作规程1.测量波长小于210nm,需要对仪器进行氮气吹扫处理。
打开氮气,调整流量计流速为16.6L/min,通氮气几分钟。
确认ALX-250的电源线插在氙灯的位置,并且氙灯已对准光路,具体操作见光源的选择操作说明。
然后打开ALX-250光源开关,将氮气流量计流速设为6.6L/min,预热15分钟后,查看ALX-250面板显示,微调旋钮,将功率确定在150W,光源准备完毕。
2.测量波长大于210nm如果无需氮气吹扫,直接打开ALX-250电源,等待功率稳定在150W后进行下一步操作。
3.打开ALX-250的同时,打开MM-450和PMS-450电源,一起预热15分钟。
4.将装有待测样品空白溶液(如水或缓冲盐)的石英池放入样品仓,盖上盖子,(所用的石英池必须经过仔细的清洗)。
5.点击电脑桌面上的图标,进入BioKine软件操作主界面。
6.点击图1主界面的Device/Scanning Spectrometer,进入光谱扫描界面,如图2。
图1 图27. 在要测量波长的范围内取一个波长数值,输入到图2下方的Ex处,点击Enter键。
这时确认按钮变为,然后点击,自动调整HV电压,然后再点击按钮,锁定此电压值。
8. 点击主界面上方的按钮,选择光谱测量方法,如图3。
图3Acquisition mode:选择测量模式CD。
Begin(nm):扫描初始波长End(nm):扫描结束波长Scan Repeat :扫描次数Acquisition duration:每个nm的测量持续时间,范围0.05s-20s。
圆二色扫描推荐值20s,建议最小大于1 s。
ShutterAutomatic mode:选择Always open,挡板处于始终打开的状态。
PM gain*10:当在非常低的信号测量,可选择此项,进行信号的增益。
CD parameters:CD的灵敏度,根据信号的振幅设置,有四个不同的选项,1000、300、100和30 mdeg。
圆二色光谱仪构造
圆二色光谱仪构造
圆二色光谱仪主要由光源、样品池、光谱仪和计算机数据处理系统等部分组成。
1. 光源:产生具有特定波长和极性的偏振光。
2. 样品池:将光作用于待测物质。
3. 光谱仪:记录对偏振光的旋转和吸收度测量结果。
4. 计算机数据处理系统:处理数据并生成图表和分析结果。
5. 光学系统:用于聚焦和导向光束,确保光路畅通无阻。
6. 检测器:用于捕捉光谱信号,并将其转换为电信号以便进一步处理。
7. 控制系统:用于控制光谱仪的各个部分,确保实验过程的准确性和稳定性。
圆二色光谱仪在应用方面具有广泛性,除了生物化学领域外,还可应用于物理、化学、材料科学等多个领域。
例如,在物理领域中,圆二色光谱仪可用于研究分子的光学性质和结构;在化学领域中,可应用于分析有机化合物和无机物的组成和结构;在材料科学领域中,可用于研究材料的光学性能和微观结构。
需要注意的是,不同型号和品牌的圆二色光谱仪在构造和功能上可能存在差异,因此在实际应用中需要根据具体情况进行选择和使用。
同时,为了确保实验结果的准确性和可靠性,还需要注意仪器的维护和保养。
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2019/10/27
2019/10/27
圆二色 Circular Dichroism
对左旋和右旋圆偏光的吸收不同,形成椭圆偏振光
2019/10/27
2019/10/27
2019/10/27
α-螺旋 α-Helix β-折叠 β-Sheet
β-转角 β- Turn poly (Pro) II
-operation in NIR calls for very narrow slits
-large bandpasses are not possible in the low UV since slitwidth is mechanically limited to 2 or 3 mm
2.770
210-230(弱) 212
2019/10/27
α-helix:41% β-Sheet:15% Turn:23% Random:21%
Residue of Elip. Elip. / deg cm2 decimol-1
2019/10/27
80
Turn
α-Helix β-Sheet
30
-20
-70
Random
2019/10/27
Bio-Logic MOS-500 光源: 三种光源 (Xe / Hg-Xe / 钨丝灯)设计
Jasco CD单光源设计 (150W Light source)
Xe光谱扫描用(130…175 W), W 波长500nm以上用, Hg-Xe 停流或变温检测用
2019/10/27
Cathode adaptor M0 mirror
CD/ORD发展历史
• 1961 Cary Model 60 Spectropolarimeter, Jasco AP-1 • 1963 Jasco ORD/UV5 • 1960 - 1965 Jobin-Yvon CD Cary 61CD Jasco ORD/UV5-CD • 1969 Cary 1401CD • 1970 Jasco J-20 • 1972 Jasco J-40 CD/ORD • 1978 Jasco J-500 1980 J-200 • 1983 Bio-Logic 400 1986 J-600 • 1990 Jasco J-700CD, Jabin-Yvon CD6, AVIV 410 (Cary 60) • 1999 Jasco J-810 Bio-Logic MOS-450 • 2003 APP ChiraScan • 2005 Jasco J-815 • 2006 APP ChiraScan Plus • 2007 AVIV Model 420 • 2013 2019/10/27 new Bio-Logic MOS-500 newJasco J-1500
-120
5 0 -5
190 200 210 220 230 240 wavenumber / nm
蛋白质近紫外CD 表征三级结构信息
蛋白质中芳香氨基酸残基,如色氨酸(Trp)、酪氨酸 (Tyr)、苯丙氨酸(Phe)及二硫键处于不对称微环境 时,在近紫外区260~320nm,表现出CD 信号。 研究表明: 色氨酸在290 及305nm 处有精细的特征CD 峰; 酪氨酸在275nm 及282nm 有CD 峰; 苯丙氨酸在255、260 及270 nm 有弱尖锐的峰
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱS1
M2
150W
M1
M4
P1
P2 S2
M3
O-ray
M5
E -r ay S3 L F CDM SH
2019/10/27
PM
光柵-稜鏡
• 就色散而言,光栅的性能较优于棱镜
• 第一,由分辨本领知,光栅可经由增加光栅数或观察光栅 的高级谱线(较大之p值)来增大其分辨本领;而棱镜只有 增大棱镜一个方法来增大,这是光栅优于棱镜的一点。
Bio-Logic MOS-500 to keep constant 1nm bandwidth Slitwidth always 2mm, from 163nm to 1250nm
2019/10/27
Jasco CD 狭缝校准
2019/10/27
Jasco CD 波长校准
2019/10/27
Jasco CD 圆二色椭圆度校准
2019/10/27
2019/10/27
2019/10/27
2019/10/27
2019/10/27
2019/10/27
Bio-Logic MOS-500
APL Chirascan
2019/10/27
Jasco J1500
光源 150W
Bio-Logic MOS-500
LS
M0 Jasco J-1500
2019/10/27
狭缝宽度
Jasco J-800 to keep constant 1 nm bandwidth*, following slitwidths
λ (nm) 900 800 700 600 500 400 300 250 200 170
slitwidth (mm)
0.011
0.013 0.019 0.027 0.053 0.104 0.278 0.538 1.344
Light source cover Anode holder Light source
M1 mirror
2019/10/27
PMT high voltage (V)
• 第二,用棱镜分光时,因为色散是和波长的三次方成反比, 所以实际上所看到的相同波长间隔的光谱区域并不相等, 而是长波长的光谱区域较短,短波长的光谱区域较长。用 光栅分光时,因为光栅方程式示出绕射角与入射光的波长 成正比,所以,所看到的相同波长间隔的光谱区域大致相 等,这是光栅优于棱镜的第二点。
• 第三,就光谱而言,对于宽度相同的入射缝,光栅形成的 谱线较明亮,易于观察。根据上面从色散的观点所讨论知 道,光栅在这方面较优于棱镜,而这也是光栅分光仪较常 被使用的原因。
无规则卷曲 Random
α-螺旋 α-Helix
β-折叠 β-Sheet
β-转角 β- Turn
左手螺旋P2结构 poly (Pro) II 无规则卷曲 Random
- band(nm) 222,208
216 220-230(弱) 180-190(强)
190
200
+ band(nm) 192 195 205