最新7-细胞化学染色ppt课件
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细胞化学染色
18
6、临床意义 （1）正常分布 粒系:早期原粒阴性，晚期原粒及以下各阶段呈 不同程度阳性。 单核系:早期原单阴性，其它阶段皆呈弱阳性。 淋巴、红系、浆细胞、巨核均呈阴性。
精选课件
1919
（2）急性白血病的鉴别诊断 幼稚细胞POX阳性率≥3% ：急非淋（AML) 幼稚细胞POX阳性率＜3% ：急淋（ALL)
至9.2，4℃保存！
（3）作用(基质液): 磷酸萘酚钠
5mg
N-N二甲基酰胺 1ml
Tris-Hcl液
4ml
坚固蓝RR盐
5mg
（4）复染液：1%中性红
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2222
3.操作步骤 1、新鲜、干燥的外周血或骨髓涂片（标本片及 对照片）加固定剂作用30秒（染缸），水洗待干； 2、滴加作用液，室温染色15min，水洗待干； 3、1%中性红复染1min
过氧化物酶染色 中性粒细胞碱性磷酸酶染色 糖原染色 非特异性酯酶染色 特异性酯酶染色 骨髓铁染色
精选课件
77
（一)过氧化物酶(POX)染色
1、原理：
pox
H2O2
O
联苯胺
联苯胺蓝 +
亚硝基铁氰化钠
蓝黑色颗粒
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88
2.试剂 (1)联苯胺酒精溶液： 取0.3g联苯胺加亚硝基铁氰化钠饱合液（36%）1ml, 再加95%乙醇至100ml，存在于棕色瓶中，可存一年。 (2) 稀过氧化氢（新鲜配制）：取50ml蒸馏水加 30%H2O21滴。 （3）瑞吉氏复染液
细胞化学染色检验
申家辉
精选课件
11
一、概述 二、细胞化学染色的基本方法 三、临床应用
精选课件
22
一、概 述
1、概念： 细胞化学染色是细胞学和化学相结合而成的一门
第四章 细胞化学染色医学PPT课件
×100%
【正常血细胞染色反应】
1.单核细胞系统
原始单核细胞
分化差
分化好 阳性
阴性
阳性 被氟化钠抑制
幼稚及成熟单核细胞
2.粒细胞系统
复染
显示各种细胞，其颜色与有色沉 淀的颜色有明显的对比度
三、临床应用
1.鉴别各类血细胞
2.辅助血液系统等疾病诊断和鉴别诊断
3.观察疾病疗效和判断预后
第二节 常用细胞化学染色方法
过氧化物酶染色
中性粒细胞碱性磷酸酶染色 过碘酸-雪夫反应 α-醋酸萘酚酯酶染色 铁染色
一、过氧化物酶染色 （peroxidase，POX）
2. 急性淋巴细胞白血病 阴性反应
或阳性率< 3%(残留的原粒细胞)
二、中性粒细胞碱性磷酸酶染色
（neutrophilic alkaline phosphatase，NAP）
【原理】Kaplow偶氮偶联法
中性粒细胞 胞浆中NAP 水解 α-萘酚
磷酸萘酚钠
（基质中）
＋
磷酸钠
重氮盐
（坚牢蓝盐RR）
【 原 理 】
α-萘酚
胞浆不溶性灰黑色 或棕黑色沉淀
【结果判断】
胞浆内有灰黑色或棕黑色弥散性颗粒状沉淀 为阳性。
氟化钠抑制试验
在基质液中加入适量NaF,其余染色方法同上。 两种方法染色后用油镜计数100或200个被检细 胞，分别计算出抑制前和抑制后的阳性率或阳性 积分。
氟化钠抑制率=
抑制前阳性率或阳性积分 抑制后阳性率或阳性积分 抑制前阳性率或阳性积分
0分 1分 2分 3分 4分
阳性率
积分值
全部阳性反应细胞之和
各种阳性程度细胞的分值之和
《细胞化学染色》课件
、切片或裂解样品，确保样品处
标记染色剂
2
于最佳状态以获得清晰的染色结果。
选择适当的染色剂，与细胞内的目标
分子发生特异性反应。
3
洗涤
去除多余的染色剂，减少非特异性背
显微镜观察
4
景染色。
使用显微镜观察和记录染色后的细胞 结构和染色结果。
细胞化学染色的应用领域
1 病理学研究
方法
包括直接染色、间接染色和特殊染色等方法， 根据目的和需求选择适当的方法。
技术
需要合适的实验步骤和条件，包括样品制备、 染色剂选择和显微镜观察。
常用的细胞化学染色方法
伊纳尔反应
用于检测脱氧核糖核酸(DNA)的存在和分布。
酸性磷酸酶染色
用于检测酸性磷酸酶活性和酶的分布。
特殊染色
用于检测细胞中特定结构或分子的存在和分布，如免疫组化染色。
结论及展望
细胞化学染色是一种强大的技术，帮助我们深入了解细胞结构与功能。未来， 随着技术的不断发展和创新，细胞化学染色将在多个领域继续发挥重要作用。
细胞化学染色
细胞化学染色是一种通过特定染色剂使细胞内的化学成分显现的技术。它在 细胞研究和诊断中起着重要的作用，帮助我们更好地了解细胞的结构和功能。
细胞化学染色的定义
目的
通过染色剂将细胞内的特定化学成分显现出 来，例如核酸、蛋白质、多肽等。
原理
染色剂与细胞内化学成分之间的特异性反应， 例如酶活性、酸碱性和亲和性。
通过染色剂对病理变化 进行观察和鉴定，辅助 诊断和治疗决策。
2 细胞生物学研究
了解细胞结构和功能， 探索细胞内分子的表达 和相互作用。
3 药物研发
评估药物对细胞内目标 分子的作用和影响，辅 助药物研发过程。
标记染色剂
2
于最佳状态以获得清晰的染色结果。
选择适当的染色剂，与细胞内的目标
分子发生特异性反应。
3
洗涤
去除多余的染色剂，减少非特异性背
显微镜观察
4
景染色。
使用显微镜观察和记录染色后的细胞 结构和染色结果。
细胞化学染色的应用领域
1 病理学研究
方法
包括直接染色、间接染色和特殊染色等方法， 根据目的和需求选择适当的方法。
技术
需要合适的实验步骤和条件，包括样品制备、 染色剂选择和显微镜观察。
常用的细胞化学染色方法
伊纳尔反应
用于检测脱氧核糖核酸(DNA)的存在和分布。
酸性磷酸酶染色
用于检测酸性磷酸酶活性和酶的分布。
特殊染色
用于检测细胞中特定结构或分子的存在和分布，如免疫组化染色。
结论及展望
细胞化学染色是一种强大的技术，帮助我们深入了解细胞结构与功能。未来， 随着技术的不断发展和创新，细胞化学染色将在多个领域继续发挥重要作用。
细胞化学染色
细胞化学染色是一种通过特定染色剂使细胞内的化学成分显现的技术。它在 细胞研究和诊断中起着重要的作用，帮助我们更好地了解细胞的结构和功能。
细胞化学染色的定义
目的
通过染色剂将细胞内的特定化学成分显现出 来，例如核酸、蛋白质、多肽等。
原理
染色剂与细胞内化学成分之间的特异性反应， 例如酶活性、酸碱性和亲和性。
通过染色剂对病理变化 进行观察和鉴定，辅助 诊断和治疗决策。
2 细胞生物学研究
了解细胞结构和功能， 探索细胞内分子的表达 和相互作用。
3 药物研发
评估药物对细胞内目标 分子的作用和影响，辅 助药物研发过程。
《细胞化学染色》课件
瘤的诊断和分类。
细菌和真菌鉴别
染色技术可以用于鉴别不同类型的 细菌和真菌，对于感染性疾病的诊 断和治疗具有重要意义。
寄生虫鉴定
染色技术可以帮助鉴定寄生虫种类 ，对于寄生虫病的诊断和治疗具有 指导作用。
生物学研究中的应用案例
细胞凋亡研究
染色技术可以用于观察细胞凋亡 的过程，有助于研究细胞死亡的
机制。
准确性
染色结果是否准确反映 了细胞内物质的分布和
含量。
重复性
染色结果是否具有可重 复性，即多次实验结果
是否一致。
特异性
染色方法是否能够特异 性的标记目标细胞或组
织。
敏感性
染色方法能否检测到低 浓度的目标物质。
染色结果的解读与解释
01
02
03
04
了解染色原理
熟悉染色方法的原理，有助于 正确解读染色结果。
识别阳性信号
能够识别出染色结果中的阳性 信号，并判断其强弱和分布情
况。
排除干扰因素
排除非特异性染色、背景干扰 等因素对结果的影响。
比较不同样本
将染色结果与正常或已知样本 进行比较，以判断其差异和意
义。
染色结果的应用与推广
科学研究
染色结果可以为科学研究提供 数据支持，帮助揭示细胞生物
学行为的奥秘。
临床诊断
细胞化学染色的种类与 特点
常用细胞化学染色的种类
酸性品红染色
用于显示RNA，常 用于鉴别细胞质。
苏木精染色
用于显示细胞核， 常用于观察染色体 。
福尔根染色
用于显示DNA，常 用于鉴别细胞核。
甲基绿染色
用于显示DNA，常 用于观察染色体。
伊红染色
用于显示RNA和糖 原，常用于鉴别细 胞质和糖原。
细菌和真菌鉴别
染色技术可以用于鉴别不同类型的 细菌和真菌，对于感染性疾病的诊 断和治疗具有重要意义。
寄生虫鉴定
染色技术可以帮助鉴定寄生虫种类 ，对于寄生虫病的诊断和治疗具有 指导作用。
生物学研究中的应用案例
细胞凋亡研究
染色技术可以用于观察细胞凋亡 的过程，有助于研究细胞死亡的
机制。
准确性
染色结果是否准确反映 了细胞内物质的分布和
含量。
重复性
染色结果是否具有可重 复性，即多次实验结果
是否一致。
特异性
染色方法是否能够特异 性的标记目标细胞或组
织。
敏感性
染色方法能否检测到低 浓度的目标物质。
染色结果的解读与解释
01
02
03
04
了解染色原理
熟悉染色方法的原理，有助于 正确解读染色结果。
识别阳性信号
能够识别出染色结果中的阳性 信号，并判断其强弱和分布情
况。
排除干扰因素
排除非特异性染色、背景干扰 等因素对结果的影响。
比较不同样本
将染色结果与正常或已知样本 进行比较，以判断其差异和意
义。
染色结果的应用与推广
科学研究
染色结果可以为科学研究提供 数据支持，帮助揭示细胞生物
学行为的奥秘。
临床诊断
细胞化学染色的种类与 特点
常用细胞化学染色的种类
酸性品红染色
用于显示RNA，常 用于鉴别细胞质。
苏木精染色
用于显示细胞核， 常用于观察染色体 。
福尔根染色
用于显示DNA，常 用于鉴别细胞核。
甲基绿染色
用于显示DNA，常 用于观察染色体。
伊红染色
用于显示RNA和糖 原，常用于鉴别细 胞质和糖原。
《细胞化学染色检验》课件
样本的保存
样本应保存在适当的温度 和湿度条件下，以确保其 质量和稳定性。
结果的准确性
操作的规范性
在细胞化学染色检验中，应遵循正确的操作步骤和规范，以确保 结果的准确性。
仪器设备的校准
使用的仪器设备应在有效期内进行校准，以确保其准确性和可靠性 。
结果的解读
检验结果应由专业人员进行解读，避免误判或漏判。同时，应定期 对结果进行复核和验证，以确保结果的准确性和可靠性。
目的
细胞化学染色检验主要用于诊断疾病、研究细胞生物学特性、评估治疗效果等 。
历史与发展
历史
细胞化学染色检验技术自19世纪末开始发展，经历了多个阶段，包括手工染色、 半自动染色和全自动染色等。
发展
随着科技的不断进步，细胞化学染色检验技术也在不断改进和完善，如免疫组织 化学染色、荧光染色等新技术的应用，使得检测的灵敏度和特异性得到了显著提 高。
04
结果报告
将分析结果整理成报告，向相 关人员或机构提供准确的实验 数据和结论。
04
细胞化学染色检验应用
在疾病诊断中的应用
肿瘤诊断
通过细胞化学染色检验，可以观 察肿瘤细胞的形态、染色特征和 组织结构，有助于肿瘤的早期发
现和诊断。
感染性疾病诊断
某些细菌、病毒等感染性疾病会导 致细胞发生特异性改变，通过细胞 化学染色检验可以辅助诊断。
染色完成后，进行充分 的洗涤和复染，以提高
染色效果和对比度。
结果观察与解读
01
显微镜观察
使用显微镜观察染色后的样本 ，观察细胞形态、染色情况等 。
02
结果记录
对观察到的染色结果进行详细 记录，包括细胞形态、染色强 度、分布等。
03
实验细胞化学染色POX(共72张PPT)
▪ 苏丹黑B染色较过氧化物酶染色更敏感，但特异 性不如过氧化物酶染色（极少数急性淋巴细胞 白血病可为阳性）。
M1-SBB(+)
M2-SBB(+)
三、过碘酸一雪夫（PAS)染色
▪ 【原理】
胞浆内存在糖原或多糖类物质（如粘多糖、 粘蛋白、糖蛋白、糖脂等）中的乙二醇基（ CHOH-CHOH）经过碘酸（periodic acid） 氧化，转变为二醛基（CHO-CHO），与雪夫 (Schiff )试剂中的无色品红结合，形成紫红色 染料而沉积于胞浆中。该反应称为过碘酸一雪 夫(PAS)阳性反应。
▪ 【结果】 ▪ （1）粒细胞系：
▪ 原粒细胞多呈阴性反应，也可弱阳性。
▪ 自早幼粒细胞以后随着细胞的成熟程度，阳 性反应逐渐增强。
▪ 嗜酸粒细胞颗粒本身不着色，但颗粒间的胞质
呈弥漫性阳性反应；
▪ 嗜碱粒细胞为阳性反应，颗粒紫红色，大小不 一。
中性粒细胞糖原含量参考标准 （-） 胞质无颗粒 （+） 胞质呈淡红色，无颗粒 （++） 胞质呈红色，有少量颗粒 （+++） 胞质呈暗红色 ，颗粒较密 （++++）胞质呈紫红色，颗粒极密
淀物，具有一定的稳定性。
▪ 血细胞化学染色可显示糖原、脂类、酶 、蛋白质等。
血细胞化学染色流程
▪ （一）固定 Ⅳ型：>10个铁颗粒。
苏丹黑B染色较过氧化物酶染色更敏感，但特异性不如过氧化物酶染色（极少数急性淋巴细胞白血病可为阳性）。 L1 PAS(+) POX主要分布在粒细胞和单核细胞内，随着粒细胞成熟的程度而逐渐增强，中性分叶核粒细胞为强阳性。
M7 PAS(+)
（3）巨核细胞和Sternberg细胞鉴别
M1-SBB(+)
M2-SBB(+)
三、过碘酸一雪夫（PAS)染色
▪ 【原理】
胞浆内存在糖原或多糖类物质（如粘多糖、 粘蛋白、糖蛋白、糖脂等）中的乙二醇基（ CHOH-CHOH）经过碘酸（periodic acid） 氧化，转变为二醛基（CHO-CHO），与雪夫 (Schiff )试剂中的无色品红结合，形成紫红色 染料而沉积于胞浆中。该反应称为过碘酸一雪 夫(PAS)阳性反应。
▪ 【结果】 ▪ （1）粒细胞系：
▪ 原粒细胞多呈阴性反应，也可弱阳性。
▪ 自早幼粒细胞以后随着细胞的成熟程度，阳 性反应逐渐增强。
▪ 嗜酸粒细胞颗粒本身不着色，但颗粒间的胞质
呈弥漫性阳性反应；
▪ 嗜碱粒细胞为阳性反应，颗粒紫红色，大小不 一。
中性粒细胞糖原含量参考标准 （-） 胞质无颗粒 （+） 胞质呈淡红色，无颗粒 （++） 胞质呈红色，有少量颗粒 （+++） 胞质呈暗红色 ，颗粒较密 （++++）胞质呈紫红色，颗粒极密
淀物，具有一定的稳定性。
▪ 血细胞化学染色可显示糖原、脂类、酶 、蛋白质等。
血细胞化学染色流程
▪ （一）固定 Ⅳ型：>10个铁颗粒。
苏丹黑B染色较过氧化物酶染色更敏感，但特异性不如过氧化物酶染色（极少数急性淋巴细胞白血病可为阳性）。 L1 PAS(+) POX主要分布在粒细胞和单核细胞内，随着粒细胞成熟的程度而逐渐增强，中性分叶核粒细胞为强阳性。
M7 PAS(+)
（3）巨核细胞和Sternberg细胞鉴别
细胞化学染色法共71页
ห้องสมุดไป่ตู้ 31、只有永远躺在泥坑里的人，才不会再掉进坑里。——黑格尔 32、希望的灯一旦熄灭，生活刹那间变成了一片黑暗。——普列姆昌德 33、希望是人生的乳母。——科策布 34、形成天才的决定因素应该是勤奋。——郭沫若 35、学到很多东西的诀窍，就是一下子不要学很多。——洛克
细胞化学染色法
51、没有哪个社会可以制订一部永远 适用的 宪法， 甚至一 条永远 适用的 法律。 ——杰 斐逊 52、法律源于人的自卫本能。——英 格索尔
53、人们通常会发现，法律就是这样 一种的 网，触 犯法律 的人， 小的可 以穿网 而过， 大的可 以破网 而出， 只有中 等的才 会坠入 网中。 ——申 斯通 54、法律就是法律它是一座雄伟的大 夏，庇 护着我 们大家 ；它的 每一块 砖石都 垒在另 一块砖 石上。 ——高 尔斯华 绥 55、今天的法律未必明天仍是法律。 ——罗·伯顿
细胞化学染色检验-精品医学课件
70
71
分级标准
(-) 0，阴性反应，胞浆中无阳性颗粒。 (+) 1，胞浆中含有少量颗粒或呈弥散浅灰色。 (++) 2，胞浆呈均匀棕黑色或出现较粗的黑色颗粒。 (+++) 3，胞浆中充满棕黑色颗粒，颗粒间有缝隙， 胞 核清楚。 (++++)4，有极丰富的粗大颗粒，充满胞浆，胞核不清晰
72
NAP
(坚固盐B)
棕黑色 灰黑色沉淀
40
45
（二）正常细胞的染色反应
1.单核系统：原单为阴性/阳性，幼稚、成熟单为强阳 性，且易被NaF抑制（抑制率>50%）。
抑制前阳性率- 抑制后阳性率 氟化钠抑制率=
抑制前阳性率
× 100%
46
2.粒细胞系：各期多数为阴性，有时可呈弱阳性，M3呈 阳性，不被NaF抑制。
20
（三）临床意义：
1.辅助判断急性白血病类型 pox计数的是100个未知细胞（白血病细胞），并计算其
阳性率。 Pox阳性率＜3%：急淋
Pox阳性率＞3%：急非淋（ANL），M3、M2最强， M4、M1、M5最弱
23
急性淋巴细胞 白血病: 原始、幼稚淋 巴细胞呈阴性 POX﹤3％
急性粒细胞白血病:原始粒细胞呈阳性或 阴性，POX>3％
（1）细胞核复染常用苏木素、甲基绿、中性红、沙 黄
（2）细胞质复染常用：伊红、亮绿等
12
常用的细胞化学染色项目
Fe：骨髓铁染色（普鲁士蓝染色） NAP：中性粒细胞碱性磷酸酶染色 POX：过氧化物酶染色 SB：苏丹黑染色 PAS：过碘酸－雪夫反应（糖原染色） SE：特异性酯酶染色 NSE：非特异性酯酶染色
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分级标准
(-) 0，阴性反应，胞浆中无阳性颗粒。 (+) 1，胞浆中含有少量颗粒或呈弥散浅灰色。 (++) 2，胞浆呈均匀棕黑色或出现较粗的黑色颗粒。 (+++) 3，胞浆中充满棕黑色颗粒，颗粒间有缝隙， 胞 核清楚。 (++++)4，有极丰富的粗大颗粒，充满胞浆，胞核不清晰
72
NAP
(坚固盐B)
棕黑色 灰黑色沉淀
40
45
（二）正常细胞的染色反应
1.单核系统：原单为阴性/阳性，幼稚、成熟单为强阳 性，且易被NaF抑制（抑制率>50%）。
抑制前阳性率- 抑制后阳性率 氟化钠抑制率=
抑制前阳性率
× 100%
46
2.粒细胞系：各期多数为阴性，有时可呈弱阳性，M3呈 阳性，不被NaF抑制。
20
（三）临床意义：
1.辅助判断急性白血病类型 pox计数的是100个未知细胞（白血病细胞），并计算其
阳性率。 Pox阳性率＜3%：急淋
Pox阳性率＞3%：急非淋（ANL），M3、M2最强， M4、M1、M5最弱
23
急性淋巴细胞 白血病: 原始、幼稚淋 巴细胞呈阴性 POX﹤3％
急性粒细胞白血病:原始粒细胞呈阳性或 阴性，POX>3％
（1）细胞核复染常用苏木素、甲基绿、中性红、沙 黄
（2）细胞质复染常用：伊红、亮绿等
12
常用的细胞化学染色项目
Fe：骨髓铁染色（普鲁士蓝染色） NAP：中性粒细胞碱性磷酸酶染色 POX：过氧化物酶染色 SB：苏丹黑染色 PAS：过碘酸－雪夫反应（糖原染色） SE：特异性酯酶染色 NSE：非特异性酯酶染色
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疾病鉴别意义：
• 缺铁贫：外铁明显下降，甚至消失； 内铁下降,铁粒幼细胞减少。经铁剂治 疗后，铁增加.
• 铁粒幼细胞贫血：内、外铁增加，且 出现环铁粒幼红细胞增多,有时可见铁 粒红细胞.
• 感染、肝硬化、慢性肾炎、尿毒症、 恶性肿瘤：外铁增加,内铁减少。
• 骨髓增生异常综合症:环形铁粒幼细 胞大于有核红细胞的15%,细胞外铁 也常增加.
主要的鉴别点:酸碱性
各种原始细胞的鉴别
鉴别 点 胞体
核形
核位 置 核仁 染色 质 胞质 颜色 颗粒
原淋
圆
圆
中或 偏 小 颗粒
少 蓝 无
原粒 原单
圆
圆,不规
则
圆
圆,不规
则
中或偏 中或偏
小
大
细颗粒 网状
较少 蓝 无
较多 灰蓝 无
原红 原巨
圆,突 起 圆
中
圆,不规 则
圆,不规 则
中或偏
较大 粗颗粒 较细
——————————
AKP积分总分为325
参考范围：30~130分
参考值：
阳性率 ﹤40% 积分值 30～130分
生理变化：
AKP活性和年龄有关，新生儿、婴幼儿高于 成年人，老年人略低,应激状态下增加。
病理变化：
（1）增高 细菌感染、AA、类白血病、急淋、骨髓纤
维化,真红,慢淋,血小板增多症,恶性肿瘤等 （2）减低
二、中性粒细胞碱性磷酸酶染色（NAP）
原理:成熟中性粒细胞内的AKP在PH 9.4~9.6缓冲 液中能水解基质液中的α-磷酸柰酚，产生α-奈 酚，其与重氮盐偶联，形成不溶性灰黑色偶氮染 料沉淀，定位于酶活性处。
AKP主要存在于中性成熟粒细胞内,其他细胞基 本阴性.
阳性程度：
- —— 胞浆中无紫黑色颗粒 + —— 胞浆中有一层棕黑色不透明或局限地方 有紫黑色颗粒(约1/4) ++—— 胞浆中颗粒占胞浆1/2或遍布整个胞浆， 但较疏松 +++—— 胞浆中颗粒占3/4，颗粒染色浓 ++++——仅见核影，其余均是黑色
细胞外铁:单核吞噬系统内的铁,反映骨髓的储存铁 细胞内铁:幼红细胞和红细胞内的铁,骨髓可以利用 的铁.
几种病理情况,
1.体内铁摄入不足或消耗过多:骨髓细胞 内外铁均减少或消失(IDA) 2.铁利用障碍:幼红细胞线粒体合成血红 素功能障碍,为铁失利用,内外铁均增加 (铁粒幼细胞性贫血) 3.铁储存于单核吞噬细胞内不能被释放入 幼红细胞内,为铁失利用,外铁增加,内铁减 少(慢性炎症贫血)
研究的对象：细胞和组织中的化学物质
研究的方法：根据细胞和组织中化学物 质的有无以及强弱判断血细胞类型以及 是否发生异常.
细胞化学染色的临床应用
1、 辅助诊断急性白血病的细胞类型（不同系别， 不同阶段的细胞所含化学物质不同）；
2、 辅助血液系统疾病的诊断和鉴别诊断（IDA、 CML与类白）。
一、铁染色
原理： 正常人骨髓中的储存铁主要存在于骨髓小
粒和幼红细胞中。骨髓小粒中的含铁血黄素称 细胞外铁，其中的三价铁与分子中的蛋白质结 合不牢，经稀盐酸处理后而游离，并能在酸性 亚铁氰化钾溶液中产生普鲁士蓝反应。细胞内 铁也可用此法显示。根据反应的强弱了解骨髓 中铁的含量。
细胞内铁：中、晚幼红细胞胞浆中有蓝绿色颗 粒,为铁蛋白. 铁粒幼细胞：胞质内有蓝绿色颗粒的幼红细胞. 环铁粒幼红细胞：胞质内有蓝绿色颗粒在6个以 上，并围绕于核周排列成环形者，超过1/2区域. 细胞外铁：正常骨髓以含铁血黄素形式储存的 铁，主要存在骨髓小粒的巨噬细胞的胞质内或 外。正常情况下 +~++
4.再障与PNH的鉴别 再障—— NAP增高 PNH —— NAP减低
慢粒与中性粒细胞性类白血病反应的鉴别
三、过氧化物酶染色（POX）
原理： 细胞内的过氧化物酶能将底物的过氧
化氢分解，产生新生氧。后者将试剂中 的联苯胺氧化为联苯胺蓝，再与亚硝基 铁氰化钠结合，进而生成棕黑色化合物 沉淀于酶的所在部位。
7-细胞化学染色
瑞氏染色的原理
瑞氏染料中含有碱性亚甲蓝和酸性伊红 两种成分,它们与细胞内的各种物质具有 不同的亲和力,使其显现出不同的色调,以 利辨认.
1.细胞核是由核糖核酸与强碱性的组蛋白, 精蛋白形成核蛋白,与酸性染料伊红有亲 和力,染成红色.
2.幼稚细胞的胞质和核仁含有酸性物质, 与碱性染料亚甲蓝有亲和力,染成蓝色.
细胞外铁反应强度的判断标准：
显微镜检查
肉眼观察 ———————————————— 着色程度 形态大小 分布情况
————————————————
阳性 显色不明显 淡染
小
稀疏
（+~++）
（绿~蓝） （颗粒~小珠）（星状排列）
强阳性 显色明显 深染
大
密集
（+++~++++） （蓝~黑） （大珠~成堆） （片状分布）
急慢粒、PNH、MDS、恶组,病毒感染等
临床意义:
1.慢粒(无继发感染时)——积分明显下降 中性粒细胞类白血病——积分可大于200
2.细菌感染——NAP积分增加 病毒性感染——无明显变化（感染症状相似）
3.急性白血病类型的鉴别： 急粒—— NAP明显减低 急淋—— NAP增高 急单—— NAP正常或减低
结果统计:
1.阳性率计算: 100个中性杆状,分叶核粒 细胞中阳性细胞总数.
2.AKP积分的计算
积分：-——0分 +——1分 ++——2分
+++——3分 ++++——4分
举例：细胞数 积分 5 5*0——0 5 5*1——5 10 10*2——20 20 20*3——60 60 60*4——240
————————————————
3;++
++
+
--
环形铁粒幼细胞
环形铁粒幼细胞
参考值
1、细胞外铁：（＋）～（＋＋）
2、细胞内铁：观察100个幼红细胞,计 算出铁粒幼红细胞百分比,阳性率为12 ％～44％,无环形铁粒幼红细胞和铁粒红 细胞。
铁的生成和利用
食物中的铁经吸收后在单核吞噬系统内储存, 铁通 过幼红细胞表面的铁受体,转至幼红细胞内,与原卟 啉结合形成血红素.
较多 深蓝 无
较少 蓝 无
原浆 原 圆 偏
粗颗 粒 丰富 深蓝 无
定义：
细胞化学染色是细胞学和化学相结合的一 门科学。它是以细胞形态学为基础，根据 化学反应的原理、应用涂片染色的方法观 察细胞的化学成分及其变化的重要方法。
各种类型血细胞的化学成分（酶，脂， 糖，蛋白，核酸）,分布及其量不完全相 同,在病理情况下,血细胞的成分可发生改 变.